Introduction
العديد من الحيوانات تستخدم الالفاظ للاتصالات ضمن النوع. في العضلة الماوس المصحف، نوع واحد من المهم الإشارة البلاغ الالفاظ بالموجات فوق الصوتية (USVs)، والتي لها ترددات أعلى من 20 كيلو هرتز. تعتبر USVs المنبعثة من الفئران مكون من الاعتراف الاجتماعي في بين الذكور والإناث 1-4، الإناث والإناث 1 و 5 و الذكور الذكور 1، 6 التفاعلات. وتنبعث USVs أيضا الجراء عندما يتم عزل أنها من والدتهم، مما يزيد من سلوكها-استرجاع الجرو، وبالتالي الجرو البقاء على قيد الحياة (7). على الرغم من أن العديد من التقارير وتحليلها وتصنيفها USVs الماوس 8، 9، والاستجابات السلوكية والآليات العصبية للحيوان تلقي تم توثيقها أقل 10، 11. وهذا الأخير هو ضروري لتوضيح الأهمية البيولوجية للخصائص مختلفة من USVs. للكشف عن هذه الآليات، وتجربة التشغيل هو وسيلة فعالة. وقد كشفت دراسات حديثة أن النساء التشغيلتنجذب الفئران لUSVs 12، وأنهم يفضلون USVs من الذكور تختلف عن آبائهم 13 و 14.
يشرح هذا المقال اختبار التشغيل المستخدمة لتقييم تفضيل USV في الفئران. وقد وضعت مربع اختبار الاختيار اثنين في اثنين من USVs مختلفة يمكن تشغيلها في وقت واحد في اثنين من مقصورات من الضميمة الاختبار، كما هو مبين في الشكل 1. وهذا النوع من مربع اختبار يمنع تلوث الصوت من خلال تقسيم منطقة الاختبار في ثلاث دوائر فرعية ، وذلك باستخدام الجدران الرصاص. توجد بواعث الموجات فوق الصوتية خارج كل غرفة. في الجدار الفاصل بين الغرف وبواعث الموجات فوق الصوتية ثقوب مغطاة سلكية. الفئران يمكن ان تتحرك بحرية في ثلاث غرف، وتظهر "البحث في شبكة" السلوك، كما لو أن الرد على USVs تشغيله عن طريق لبواعث الموجات فوق الصوتية. في هذا الاختبار، والفئران البقاء لفترات مدة مختلفة قريبة من واحد باعث الصوت أو أخرى. ويمكن تسجيل هذه المعلمات للحصول على measu حساسة إعادة تفضيل الصوت.
للعب USVs الوراء، nanocrystalline السيليكون الحرارية الصوتية بواعث (أي، "NC-سي باعث") كانت تستخدم في الدراسات السابقة 15-17. وتتكون هذه الأجهزة من سخان الكهربائي الأغشية الرقيقة، وطبقة السيليكون النانوية التي يسهل اختراقها، ورقاقة السيليكون واحدة البلورية. يتم تحويل ملف الصوت الرقمية إلى إشارة تناظرية ثم مرت القطب سخان. جهاز يحول الإشارات الحرارية التي تعتمد على الجهد مما أدى إلى ضغط الصوت كبير مع تشويه منخفضة. هذا الجهاز هي فريدة من نوعها في ذلك، على عكس المولدات الصوت المشتركة التي تعتمد على الاهتزازات الميكانيكية، فإنه يمكن إعادة إنتاج الصوت دون الحاجة إلى وجود الحجاب الحاجز. باعث يسلك مستوى ضغط الصوت مستقرا عند ترددات 20-160 كيلو هرتز (الشكل 2)، ويمكن أن تتكاثر USVs الفئران المسجلة رقميا بشكل دقيق جدا من حيث المدة، والتردد، ومستوى الصوت ضغط 15 و 18 و 19.
ve_content "> في تجربة تمثيلية هو مبين في الشكل (3)، وسمح C57BL / 6 (B6) إناث أن تختار بين BALB / ج (BALB) USVs الذكور والضوضاء الخلفية. وبالإضافة إلى ذلك، ويبين الشكل 4 اختيار الإناث B6 وBALB بين قراءات USV في وقت واحد من BALB وB6 الذكور، كما ورد في دراسة سابقة 14. خصائص USVs الذكور تختلف بين B6 وBALB سلالات 20. وكما يتضح من هذه النتائج، وجاذبية USVs يمكن تقييم لهذا البروتوكول، حيث يتم تسجيل الأصوات من شخص حي، تحليل سمعيا، ولعب إلى أشخاص آخرين.Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
وقد وافق جميع الإجراءات من قبل لجنة الأخلاقيات من جامعة أزابو. أجريت جميع التجارب في غرفة عازلة للصوت.
1. إعداد الحيوانية
- الذكور للتسجيل
- الحصول على الفئران الذكور الناضجة جنسيا من ذوي الخبرة في التزاوج.
- الموضوعات الإناث
- الحصول على إناث الفئران البكر التي تم إيواء مع 2-5 تتزاحم في قفص (عادة 8-12 أسابيع من العمر).
- الحصول على مسحات مهبلية يوميا لتحديد مرحلة من دورة وداقية قبل الاختبار، وفقا لماكلين 21. ينبغي توخي الحذر للحد من التحفيز عن طريق المهبل لتجنب حمل كاذب.
- وصمة عار تلطخ مع بالغيمزا، وتحديد المرحلة من دورة وداقية على أساس وجود أو عدم وجود الكريات البيض، الخلايا الظهارية متقرن، والخلايا الظهارية الأنوية، وفقا لنيلسون 22.
2. الأجهزة (الشكل 1)
_content ">
الشكل 1. تخطيطي لاختبار مربع وجهازين الاختيار. يمكن أن الفئران الوصول إلى غرف ألف وباء من خلال بوابات صغيرة تقع بينها وبين المنطقة المحايدة. يتم وضع مربع اختيار اثنين واثنين من بواعث الموجات فوق الصوتية على أرضية غرفة عازلة للصوت. علق الميكروفون داخل غرفة عازلة للصوت. اختصار: PC، كمبيوتر شخصي الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
- للتسجيل
- توصيل مكثف ميكروفون بالموجات فوق الصوتية إلى جهاز الكمبيوتر باستخدام محول USB A / D.
- تعيين مستوى الربح من المحول A / D إلى "7".
- البيانات الصوتية قياسية في شكل ملفات 16 بت مع معدل أخذ العينات من 400 كيلو هرتز باستخدام برامج التقاط الصوت.
- للتشغيل
- توصيل D / A المحول إلى جهاز الكمبيوتر باستخدامواجهة USB.
- ربط اثنين من مكبرات الصوت إلى D / A تحويل من خلال المخفف. (يقدم الجهاز الأخير لمنع الحمل الزائد).
- توصيل باعث الموجات فوق الصوتية لكل مكبر للصوت.
3. USV تسجيل
- ضع الماوس الذكور في الصغيرة (17 × 10 × 11 سم) أو متوسطة الحجم (21 × 14 × 13 سم) قفص مع وجود ثقب 6 سم القطر في جدار وحفرة مغطاة 0.5 سم سلكية. عند استخدام قفص المتوسطة الحجم، وبناء قسم في المركز من القفص للحد من المنطقة.
- لا تستخدم الفراش في القفص لتجنب الضوضاء سرقة يمكن أن يلوث التسجيلات.
- وضع الميكروفون بجانب شبكة.
- بدء الرصد النطق بالموجات فوق الصوتية مع الإعداد تسجيل هو موضح في الخطوة 2.1.
- ضع الماوس أنثى ناضجة جنسيا في أي تلية الوداق أو هجوع الودق في قفص مع الماوس الذكور.
- USVs سجل ل3-5 دقيقة.
4. Tطبقا لتقديرات صندوق
- بناء مربع اختبار باستخدام لوحة الاكريليك (الشكل 1).
ملاحظة: مربع اختبار (35 × 20، و× 20 سم ارتفاع) وينقسم في ثلاث مقصورات: منطقة محايدة (15 × 20 سم)، وغرف ألف وباء (20 × 10 سم، ولكل منهما). غرف A و B لكل واحد حفرة قطرها 4 سم التي يتم تغطيتها مع شبكة سلكية 0.5CM. توجد ثقوب وشبكات في نهاية كل الغرف A و B. جعل بوابات (5 × 5 سم لكل منهما) بين المنطقة المحايدة وغرف A و B. - لمنع تسرب الصوت عزل كل باعث الموجات فوق الصوتية، باستثناء الجانب التي تواجه شبكة، وذلك باستخدام لوحات المطاط، وختم لهم إلى مربع حول محيط كل شبكة.
- الأختام مكان الصدارة على جانبي الجدار الفاصل بين الغرف A و B لعزل الصوت.
5. إعداد لتشغيل الصوت
- إنشاء تشغيل تأثيرات صوتية
- القبض على شريحة 20 ثانية من USV من الملف المسجل الرقمي باستخدام برامج تحرير الصوت.
- اختيار والتقاط الخلفية لاايسي (0.35 ثانية) من ملف شريحة ثانية USV 20. إنشاء خلفية ملف الضوضاء و 20 ثانية بتكرار الجزء الضوضاء.
- لتشغيل اثنين من ملفات الصوت في وقت واحد، تصديرها كملف صوت ستيريو واحد، مع ملف واحد ل"الأذن اليسار" وملف آخر ل"الأذن اليمنى."
- تصفية ملفات الصوت باستخدام بمثابة مرشح تمريرة عالية مع قطع من 40 كيلو هرتز.
- الحد من الضوضاء باستخدام أداة للحد من الضوضاء في مجال البرمجيات مرحلة ما بعد المعالجة. اختيار والتقاط جزء من الملف الذي لا يحتوي على USVs كما التشكيل الجانبي الحد من الضوضاء، وتشغيل والحد من الضوضاء مع مستوى 40.
- معايرة تشغيل تأثيرات صوتية
- تأكد من أن المسافة بين بواعث الموجات فوق الصوتية والميكروفون هو 10 سم.
- لمعايرة مستويات ضغط الصوت من بواعث الموجات فوق الصوتية، نفذ مراقبة بالموجات فوق الصوتية باستخدام التكوين هو موضح في الخطوة 2.1. قياس مستوى ضغط الصوت من الميكروفون في ديسيبل (ديسيبل).
- باليودنانوغرام المخفف ومكبرات الصوت، وضبط حجم USVs الناتجة عن بواعث الموجات فوق الصوتية لنفس مستوى ضغط الصوت كما USVs الذكور المسجلة في الخطوة 3.
- عند استخدام اثنين من بواعث الموجات فوق الصوتية وملف صوتي يتألف من USVs والضوضاء الخلفية، تأكد من أن بواعث الموجات فوق الصوتية اثنين يحمل نفس مستوى ضغط الصوت باستخدام الصوت المعايرة (على سبيل المثال، لهجة نقية 75 كيلو هرتز) قبل إجراء الاختبار السلوكي.
- عندما استنساخ ملف الصوت يتكون من اثنين من تيارات USVs، وضبط اثنين من إنشاء مستويات ضغط الصوت إلى المستوى نفسه، قبل إجراء الاختبار.
6. اختبار اثنين الاختيار
- وضع بواعث الموجات فوق الصوتية وراء تنسجم من مربع اختبار.
- إغلاق أبواب الغرف A و B مع لوحة اكريليك، وروض موضوع الإناث إلى المنطقة المحايدة لمدة 30 دقيقة. تغطية مربع مع مجلس الاكريليك لتجنب أن الفأر يمكن الهروب.
- بدء تسجيل الفيديو باستخدام CCD كاميرا محمولة فوق مربع. الكاميرا (لا يظهر في الشكل رقم 1) تغطي مساحة جميع المقصورات الثلاث.
- إزالة البوابة وغطاء مقوى والسماح للإناث لاستكشاف بحرية مربع اختبار، بما في ذلك مناطق الصوت.
- مرة واحدة وقد حققت الأنثى على حد سواء تنسجم، وعادت إلى المنطقة المحايدة، بدء اللعب ملف صوت 20 ثانية مرارا وتكرارا لمدة 5 أو 10 دقيقة.
- إجراء الرصد السلوكي لمدة 5 أو 10 دقيقة.
- للحد من العظة الشمية غير مرغوب فيها المودعة من موضوع السابق، وتنظيف الأقفاص اختبار بين التجارب مع 70٪ من الإيثانول.
- تبديل مكان بواعث الموجات فوق الصوتية A و B عشوائيا لتجنب الأصيل جانب تأثير التحيز نحو غرف A أو B.
7. التحليلات الإحصائية
- باستخدام السلوكي برنامج الحدث التهديف، تحليل المعلمات التالية: إجمالي عدد الإدخالات في كل غرفة. إجمالي مدة البقاء في كل منطقة وسطى. إجمالي مدة البقاء في كل منطقة سليمة؛ والمدة الإجمالية للبحث في كل شبكة أمام باعث الموجات فوق الصوتية. الشكل 1 يوضح ما هو المقصود ب "المنطقة الوسطى" و "منطقة سليمة."
ملاحظة: في الحالات التي يبقى الماوس على الخط الفاصل بين المنطقتين (الشكل 1، خط متقطع) تقرر الموقع من قبل اتجاه الرأس. عندما يواجه رئيس الجانب شبكة، وسجل على أنها إقامة في منطقة الصوت. - لكل معلمة السلوكية، مقارنة استجابات لغرف A و B باستخدام اختبار Wilcoxon وقعت رتبة أو تي -tests يقترن مستوى دلالة (0.05).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
وUSVs سجلت من أحد BALB الذكور (161 المقاطع في 20 ثانية)، وكذلك الضوضاء في الخلفية كانت تستخدم لتشغيل الأصوات في تجربة تمثيلية هو مبين في الشكل (3). في هذه التجربة، واستخدمت 7 الفئران B6 الإناث في 9 أسابيع من العمر . لتحديد أفضل فترة اختبار استجابة الإناث لتشغيل الأصوات، وقد تم تحليل المعايير السلوكية بشكل منفصل لأول وآخر دقيقة خمسة من مجموع 10 دقيقة وقت الاختبار.
أولا، لم يكن هناك اختلاف كبير في إجمالي مدة البقاء في غرف A أو B خلال فترة التحقيق قبل التشغيل (الشكل 3A)، مما يدل على أن هناك لم تظهر أي نتائج الجانب bias.The أيضا أنه لا يوجد فرق بين الجانب خلفية الضوضاء والجانب الذكور USVs في عدد الإدخالات الغرفة، وتحليل دقيقة الأولى 5، 5 دقيقة الماضي، ومجموع وقت الاختبار (الشكل 3B). ويبين الشكل 3C ثواني التراكمية للدرةأيون الإقامة في كل غرفة أثناء التشغيل (أي المدة الإجمالية للبقاء في المنطقة الوسطى، ومنطقة الصوت). الموضوعات أنفقت قتا أطول بشكل ملحوظ في الجانب BALB الذكور USV مما كانت عليه في الجانب خلفية الضوضاء عند تحليل دقيقة الأولى 5 (ع = 0.043)، أو على مجموع وقت الاختبار (ع = 0.043). لم تكن هناك اختلافات كبيرة في هذه المعايير عند تحليل قبل الماضي 5 دقائق. لا توجد فروق ذات دلالة إحصائية بين الجانب خلفية الضوضاء والجانب الذكور USVs في المنطقة الوسطى (الشكل 3D). ومع ذلك، أنفقت الإناث B6 قتا أطول بشكل ملحوظ في المنطقة سليمة والبحث في شبكة في الجانب BALB الذكور USV، بالمقارنة مع الجانب خلفية الضجيج، عند تحليل دقيقة 5 الأولى (منطقة الصوت، ص = 0.018، الشكل 3E؛ شبكة ، ص = 0.018، الشكل 3F) أو الكلي وقت الاختبار (منطقة السليمة، ص = 0.028، الشكل 3E، شبكة، ص = 0.043، الشكل 3F). تظهر النتائج بوضوح أن B6 أنثىتقترب أكثر من مستنسخة الذكور USVs من الضوضاء في الخلفية، ولا سيما في أول 5 دقائق.
هذا الاختبار الاختيار الثاني هو المفيد أن نقارن بين خصائص USVs. وفي دراسة سابقة، وكان يستخدم هذا الاختبار لتحديد USV تفضيل إناث الفئران B6 وBALB لUSVs من الذكور من هذه السلالات 11. عند استخدام مزيج تشغيل USVs من B6 (133 المقاطع في 20 ثانية) وBALB (108 المقاطع في 20 ثانية) من الذكور، إناث الفئران من كل من هذه السلالات أظهرت تعد تبحث مرات لUSVs من الذكور من سلالة أخرى من واحدة خاصة بهم (الشكل 4).
الشكل 2. قياس مستوى ضغط الصوت (SPL) التي تم إنشاؤها من قبل NC-سي باعث بوصفها وظيفة من التردد ومن SPL ثابتة تقريبا من حوالي 80 - لوحظ 90 ديسيبل بين 40 و 160 كيلو هرتز. AC الإدخال الأسرىإيه هو 1.3 W في هذه الحالة. وضعت باعث على مسافة 20 مم من مكثف ميكروفون عالية التردد وتتماشى مع وسطها. تم تعديل هذا الرقم من Kihara 19. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 3. B6 استجابة الأنثى إلى خلفية من الضوضاء وBALB ذكر USVs. (A) مدة مجموع الإقامة في الغرف A أو B خلال فترة التحقيق قبل التشغيل. (B) عدد إدخالات الغرفة أثناء التشغيل. (C) مدة مجموع الإقامة في الغرف. (D) إجمالي مدة البقاء في المنطقة الوسطى . (E) مدة مجموع الإقامة في منطقة الصوت. (F) مدة الإجمالية للتفتيش تنسجم. قياسات كليتم إعطاء الفرد في نقطة المؤامرات. قضبان أفقية في كل مؤامرة تشير إلى متوسط. ن = 7؛ * تشير إلى فروق ذات دلالة إحصائية (p <0.05) بين ضجيج الخلفية وUSVs الذكور للمعلمات تحليلها. يلكوكسن قعت رتبة. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الرقم 4. استجابة الأنثى إلى USVs من الذكور من سلالة مختلفة مقابل نفس السلالة. B6 (ن = 6) وBALB (ن = 10) وأظهرت الإناث في هجوع الودق تتعرض لملاءات للالمتسخة الذكور قبل الاختبار مرات أطول مدة للبحث USVs سلالة أخرى. إظهار القيم يعني + الخطأ المعياري. * تشير إلى فروق ذات دلالة إحصائية (p <0.05)؛ يلكوكسن قعت رتبة. تم تعديل هذا الرقم من اسابا
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Acknowledgments
وأيد هذا العمل من خلال منحة في والمعونة من أجل JSPS الزملاء إلى AA. عن طريق المنح في والمعونة للبحوث العلمية في المجالات المبتكرة لJSPS الزملاء (رقم 4501 ورقم 25132712) لTK؛ وبمنحة مشروع بحثي التي تمنحها جامعة أزابو. الشكل 2 وأعيد طبعه من Kihara، T.، هارادا، T.، وKoshida، N. يفر متوافق مع تلفيق وخصائص nanocrystalline السيليكون بواعث الموجات فوق الصوتية التي يسببها حراريا. في: أجهزة الاستشعار والمحركات A: المادية، وحجم 125، إلسفير، ص. 426، (2006)، بإذن من السيفير.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Soundproof chamber | Muromachi Kikai | ||
| Small cage | CLEA Japan | CL-0113-1 | |
| Middle cage | CLEA Japan | CL-0103-1 | |
| Ultrasound condenser microphones | Avisoft Bioacoustics | CM16/CMPA | |
| A/D converter | Avisoft Bioacoustics | UltraSoundGate116H | |
| Audio software | Avisoft Bioacoustics | RECORDER USGH | |
| Adobe Audition 3.0 / Audio editing software | Adobe Systems | Adobe Audition 3.0 | |
| Nc-Si emitter | Original | not commercially available but it is planned to be so in near future | |
| D/A converter | National Instruments | NI USB-6251 BNC | |
| Attenuator | Original | ||
| Amplifier | Yamatake | ||
| PC | Windows 7 professional | Intel® core i7-2600K CPU @ 3.4GHz, 8GB RAM, 64-bit operating system | |
| Event recorder Excel-macro / Event-scoring software | original | Programmed by Naoto Akagawa & Takeru Yamamoto | |
| CCD Camera | |||
| Rubber plates (made of elastomer resin) | Tokyo bouon | TI-75BK B4 | Cut them to the proper size http://www.piano-bouon.jp/shopping/?pid=1329272401-447630&ca=6&p=3 |
| Giemsa's azur eosin methylene blue solution | Merck Millipore | 1.09204.0500 |
References
- Panksepp, J. B., et al. Affiliative behavior, ultrasonic communication and social reward are influenced by genetic variation in adolescent mice. PLoS One. 2 (4), e351 (2007).
- Scattoni, M. L., Ricceri, L., Crawley, J. N. Unusual repertoire of vocalizations in adult BTBR T+tf/J mice during three types of social encounters. Genes Brain Behav. 10 (1), 44-56 (2010).
- Hammerschmidt, K., Radyushkin, K., Ehrenreich, H., Fischer, J. The structure and usage of female and male mouse ultrasonic vocalizations reveal only minor differences. PLoS One. 7 (7), e41133 (2012).
- Merten, S., Hoier, S., Pfeifle, C., Tautz, D. A role for ultrasonic vocalisation in social communication and divergence of natural populations of the house mouse (Mus musculus domesticus). PLoS One. 9 (5), e97244 (2014).
- Amato, F. R., Moles, A. Ultrasonic vocalizations as an index of social memory in female mice. Behav. Neurosci. 115 (4), 834-840 (2001).
- Chabout, J., et al. Adult male mice emit context-specific ultrasonic vocalizations that are modulated by prior isolation or group rearing environment. PLoS One. 7 (1), e29401 (2012).
- Ehret, G. Infant rodent ultrasounds–a gate to the understanding of sound communication. Behav. Genet. 35 (1), 19-29 (2005).
- Holy, T. E., Guo, Z. Ultrasonic songs of male mice. PLoS Biol. 3 (1), e386 (2005).
- Portfors, C. V. Types and functions of ultrasonic vocalizations in laboratory rats and mice. J. Am. Assoc. Lab. Anim. Sci. 46 (1), 28-34 (2007).
- Holfoth, D. P., Neilans, E. G., Dent, M. L. Discrimination of partial from whole ultrasonic vocalizations using a go/no-go task in mice. J. Acoust. Soc. Am. 136 (6), 3401 (2014).
- Neilans, E. G., Holfoth, D. P., Radziwon, K. E., Portfors, C. V., Dent, M. L. Discrimination of ultrasonic vocalizations by CBA/CaJ mice (Mus musculus) is related to spectrotemporal dissimilarity of vocalizations. PLoS One. 9 (1), e85405 (2014).
- Hammerschmidt, K., Radyushkin, K., Ehrenreich, H., Fischer, J. Female mice respond to male ultrasonic ‘songs’ with approach behaviour. Biol. Lett. 5 (5), 589-592 (2009).
- Musolf, K., Hoffmann, F., Penn, D. J. Ultrasonic courtship vocalizations in wild house mice, Mus musculus musculus. Anim. Behav. 79 (3), 757-764 (2010).
- Asaba, A., et al. Developmental social environment imprints female preference for male song in iice. PloS one. 9 (2), e87186 (2014).
- Uematsu, A., et al. Maternal approaches to pup ultrasonic vocalizations produced by a nanocrystalline silicon thermo-acoustic emitter. Brain Res. 1163, 91-99 (2007).
- Okabe, S., et al. The effects of social experience and gonadal hormones on retrieving behavior of mice and their responses to pup ultrasonic vocalizations. Zoolog. Sci. 27 (10), 790-795 (2010).
- Okabe, S., et al. Pup odor and ultrasonic vocalizations synergistically stimulate maternal attention in mice. Behav. Neurosci. 127 (3), 432-438 (2013).
- Shinoda, H., Nakajima, T., Ueno, K., Koshida, N. Thermally induced ultrasonic emission from porous silicon. Nature. 400 (6747), 853-855 (1999).
- Kihara, T., Harada, T., Koshida, N. Wafer-compatible fabrication and characteristics of nanocrystalline silicon thermally induced ultrasound emitters. Sensor. Actuat. A-Phys. 125 (2), 422-428 (2006).
- Kikusui, T., et al. Cross fostering experiments suggest that mice songs are innate. PloS One. 6 (3), e17721 (2011).
- McLean, A. C., Valenzuela, N., Fai, S., Bennett, S. A. Performing Vaginal Lavage, Crystal Violet Staining, and Vaginal Cytological Evaluation for Mouse Estrous Cycle Staging Identification. J. Vis. Exp. (67), e4389 (2012).
- Nelson, J. F., Felicio, L. S., Randall, P. K., Sims, C., Finch, C. E. A longitudinal study of estrous cyclicity in aging C57BL/6J mice: I. Cycle frequency, length and vaginal cytology. Biol. Reprod. 27 (2), 327-339 (1982).
- Tomihara, K., et al. Effect of ER-beta gene disruption on estrogenic regulation of anxiety in female mice. Physiol. Behav. 96 (2), 300-306 (2009).
- Zheng, Q. Y., Johnson, K. R. Hearing loss associated with the modifier of deaf waddler (mdfw) locus corresponds with age-related hearing loss in 12 inbred strains of mice. Hear. Res. 154 (1-2), 45-53 (2001).
- Haga, S., et al. The male mouse pheromone ESP1 enhances female sexual receptive behaviour through a specific vomeronasal receptor. Nature. 466 (7302), 118-122 (2010).
- Grimsley, J. M., Monaghan, J. J., Wenstrup, J. J. Development of social vocalizations in mice. PLoS One. 6 (3), e17460 (2011).
- Sugimoto, H., et al. A role for strain differences in waveforms of ultrasonic vocalizations during male-female interaction. PLoS ONE. 6 (7), (2011).
- Hanson, J. L., Hurley, L. M. Female presence and estrous state influence mouse ultrasonic courtship vocalizations. PLoS One. 7 (7), e40782 (2012).
- Wang, H., Liang, S., Burgdorf, J., Wess, J., Yeomans, J. Ultrasonic vocalizations induced by sex and amphetamine in M2, M4, M5 muscarinic and D2 dopamine receptor knockout mice. PLoS One. 3 (4), (2008).
- Moles, A., Kieffer, B. L., D'Amato, F. R. Deficit in attachment behavior in mice lacking the mu-opioid receptor gene. Science. 304 (5679), 1983-1986 (2004).
- Hiramoto, T., et al. Tbx1: identification of a 22q11.2 gene as a risk factor for autism spectrum disorder in a mouse. Hum. Mol. Genet. 20 (24), 4775-4785 (2011).
- Ey, E., et al. Absence of deficits in social behaviors and ultrasonic vocalizations in later generations of mice lacking neuroligin4. Genes Brain Behav. , (2012).
- Roy, S., Watkins, N., Heck, D. Comprehensive analysis of ultrasonic vocalizations in a mouse model of fragile X syndrome reveals limited, call type specific deficits. PLoS One. 7 (9), e44816 (2012).
