Summary
יש צורך בהערכה לא פולשנית של לחץ. מאמר זה מתאר פרוטוקול פשוט באמצעות הדמיה תרמית כדי לזהות תגובה משמעותית בטמפרטורת עין-אזור בציצים הכחולים פראיים ללחץ אקוטי קל.
Abstract
מתח, מושג מרכזי בביולוגיה, מתאר חבילה של תגובות חירום לאתגרים. בין תגובות אחרות, לחץ גורם לשינוי בזרימת דם שגורם לזרם נקי של דם לאיברי מפתח ועלייה בטמפרטורת ליבה. היפרתרמיה מתח מושרה זה משמשת להערכת לחץ. עם זאת, מדידת טמפרטורת ליבה היא פולשני. כזרימת דם היא מנותב אל הליבה, בפריפריה של הגוף יכול להתקרר. מאמר זה מתאר פרוטוקול שבו טמפרטורת גוף היקפית נמדדת הלא פולשני בציצים כחולים פראיים (caeruleus Cyanistes) באמצעות תרמוגרפיה אינפרא אדום. בתחום יצרנו להביא ציפורים למיקום אידיאלי מול המצלמה באמצעות תיבה התגרתה הגדרה. המצלמה לוקחת הקלטת וידאו תרמית קצרה של ציפור באין מפריע לפני החלת לחץ מתון (סגירת התיבה ולכן לכידת ציפור), והתגובה של ציפור שנלכד נרשמה. העור החשוף של העין-האזורהאזור החם ביותר בתמונה. זה מאפשר חילוץ אוטומטי של טמפרטורת עין-אזור מקסימום מכל מסגרת תמונה, ואחריו בצעדים נוספים של סינון נתונים ידני הסרת המקורות הנפוצים ביותר של טעויות (טשטוש תנועה, מהבהב). פרוטוקול זה מספק סדרת זמן של טמפרטורת עין-אזור עם רזולוציה זמנית קנס שמאפשרת לנו ללמוד את הדינמיקה של תגובת הלחץ הלא פולשני. עבודה נוספת צריכה כדי להדגים את התועלת של השיטה להעריך מתח, למשל לבדוק האם תגובת טמפרטורת עין-האזור היא פרופורציונלית לכוחו של גורם הדחק. אם זה יכול להיות אישר, זה יספק שיטה חלופית יקרה של הערכת לחץ בבעלי חיים ויהיה שימושי למגוון רחב של חוקרים מהאקולוגים, ביולוגים שימור, פיזיולוגים לחוקרי רווחת בעלי החיים.
Introduction
מתח הוא מושג מרכזי בביולוגיה, המתאר את תגובת החירום של האורגניזם בתגובה לאתגר סביבתי מנסה להחזיר 1,2 הומאוסטזיס. תחת לחץ, רמת סוכר בדם, חומצות שומן ורמות חומצות אמינו, קצב לב, קצב נשימה וקצב חילוף חומרים בכל העלייה, ודם מוסט מהפריפריה לאיברי הליבה 2. דפוס זה של הגנרית שינויים פיסיולוגיים primes בעלי החיים כדי להיות מסוגל להגיב במהירות ובהסתגלות למערך של אתגרים חברתיים ופיסיולוגיים. בעוד הכרה והבנת לחץ היא בלב של שני טהורים ומיושם מחקר בבעלי חיים, הערכת לחץ בבעלי חיים חסרי רסן עדיין מהווה אתגר.
סמן פיסיולוגי בשימוש נרחב של מתח הוא עלייה ברמות של הורמוני סטרואידי מחזור, כגון קורטיזול וcorticosterone 1,2. כוח גדול של גישה זו הוא שריכוזיהם להגדיל iחלק n ללחץ עוצמה, המאפשר למתח לכמת. עם זאת, סטרואידים הם הורמונים לא "מתח" כשלעצמו, אבל mobilisers של מאגרי אנרגיה 2. כמו רמות סטרואידים כגון לשנות גם עם דרישות אנרגיה, שעה ביום, גיל ומצב פוריות 3,4, כמו גם בתגובה למצבים כנראה חיוביים, כגון הזדמנות הזדווגות 5. רמות סטרואידים, ולכן, יש לפרש בזהירות ובתוך הקשר. מדידת תגובת glucocorticoid ללחץ אקוטי יש גם כמה מגבלות. לחץ אקוטי מעורר תגובה דינמית של התחלת הגדלת רמות סטרואידים ולאחר מכן חוזרים לרמת בסיס 1,2. דגימות glucocorticoid בדרך כלל מתקבלות פולשני, על ידי דגימת דם שהוא דחק בעצמו ולכן יכול להשפיע על רמות הסטרואידים נמדדו 6. יתר על כן ניתן למדוד רמות סטרואידים רק בזמן זה או מעט מאוד points, אשר לא יכול ללכוד וריאציה ברמות שיא ומשך עיתוי או תגובה, הגבלת היכולת שלנו לבחון שינוי בזמן של תגובת לחץ הדינמית בתוך אנשים. שיטות לא פולשנית של דגימת הורמון, כגון מצואה 7, שיער או נוצות 8, למדוד את הרמות ממוצעת בסטרואידים על ציר זמן ארוך יותר, של ימים או חודשים, אם כי שימושי ללמוד גורמי לחץ כרוניים, אינם ישימים לחקר לחץ אקוטי . כאפילו שיטות הטובות ביותר שהוקמו רק להציע נקודת מבט מוגבלת על וריאציה בלחץ אקוטי בקרב אנשים יש צורך במתודולוגיה חלופית במדידות לחץ פיסיולוגיות.
כתגובה ללחץ כרוכה במספר תופעות הפיזיולוגיות יש מועמדים אחרים שיכול להעיד על מתח. בין יתר, באהדה בתיווך דם ערוצי התכווצות כלי דם מהפריפריה לליבת הגוף. ריכוז זה של דם ולכן חום, יחד עם צורה שונותים של thermogenesis מתח מושרה, מחמם את הליבה 9. כמו התחממות כזו, ליבה, כינה היפרתרמיה מתח מושרה (SiH) שימשה גם כסמן של מתח חריף במחקר תרופות 10. SiH בדרך כלל מעלה את טמפרטורת גוף ליבה על ידי 0.5-1.5 ° C בתוך 10-15 דקות של לחץ אקוטי 10. זוהי תופעה יחסית מתועדת היטב כי לחץ ניסיוני נפוצה מיושם לתפוס וטיפול בבעלי חיים יכול להעלות את טמפרטורת גוף ליבה במגוון של מיני יונקים וציפור 11-17. חשוב לציין, SiH בקורלציה עם אינדיקטורים אחרים שהוקמו בלחץ, כגון קצב לב 18, רמות סטרואידים 19 והתנהגות 20,21. וכמו רמות סטרואידים, טמפרטורת ליבה כבר קשורה באופן ליניארי להדגיש רמה בכמה מינים 22. עם זאת, כמו דגימת דם, מדידת טמפרטורת ליבה היא פולשני בעצמו, הדורש o ההכנסההשתלת r של בדיקה 10. טמפרטורת ליבת Baseline מגדילה בהדרגה בכל פעם כאשר הכנסת טיפול או בדיקה וישכנע לחץ יש לחזור 23. ההתפתחויות אחרונות בציוד הקלטת טמפרטורה המאפשרות גישה לנתונים מרחוק עשויים לספק פתרון, לפחות לבעלי חיים גדולים 24.
בתוך אותו המנגנון שיוצר SiH, אם כי, טמון עוד סמן פוטנציאלי של לחץ: התכווצות כלי הדם ההיקפית שזז דם, ואיתו חום, לליבה בו זמנית מתקרר העור 17. בניגוד לטמפרטורת ליבה, טמפרטורת עור ניתן למדוד לחלוטין הלא פולשני, בתרמוגרפיה אינפרא אדום (IRT). IRT ממיר את הקרינה האינפרה-האדומה הנפלטת מפני שטח של אובייקט לטמפרטורה של 25. כמשטח של בעלי חיים יש בדרך כלל כמה כתמים חשופים שמטמפרטורת העור ניתן לגזור ישירות, זה דורש גישה לעור חשוף באופן טבעי (למשל, אזור סביב tהוא עין) או יצירת תיקון חשוף על ידי זמירה פרווה או נוצות. גישה המסופקת לאזור חשוף מתאים של עור ושל בעלי החיים יכולה להיות כל הזמן בשדה הראייה של המצלמה, מצלמות IRT ניתן להשתמש כדי לאסוף מדידות טמפרטורת עור רציפות מרחוק, אולי המאפשרות תגובת הטמפרטורה השלמה להצטלם והשוואה בין פרטים . למרות שזה כבר הוכח בתרנגולות שעולים טמפרטורה מגיבה ללחץ אקוטי 26, חידושו של מחקר זה הוא שהוא מודד את טמפרטורת גוף פני השטח של חיות בר ברזולוציה עדינה יותר מאשר זמנית מחקרים קודמים וגם מראה שיכולה הירידה בטמפרטורת העור הצפויה להיות מזוהה בתחום שבו טמפרטורה, לחות ומזג אוויר משתנה. מטרת מאמר זה היא לתאר את המתודולוגיה ההכרחית למדידת טמפרטורת עור של בעלי חיים בלתי מוגבל באמצעות הדמיה תרמית. אנו משתמשים בלכידה לגרום למתח חריף מתון ב( caeruleus Cyanistes ללא חיים ציצים כחולים, ינאוס 1,758
המחקר בוצע בתקופה שבין ה -17 דצמבר 2013, ו -4 בינואר 2014 באלון נשיר (Quercus spp.) יער במרכז הסקוטי לאקולוגיה ואיכות הסביבה טבעית (סצנה), אוניברסיטת גלזגו בחוף המזרחי של לוך לומונד, סקוטלנד מערב המרכזי (56.13 מעלות N, W 4.13 מעלות). הפרוטוקול כרוך בשלושה שלבים עיקריים: (1) הגדרת התנאים מתאימים שמתחת כדי ללכוד תמונות תרמית מבעלי חיים הנעים ללא, (2) applying לחץ אקוטי בזמן נטילת וידאו תרמית, ו- (3) לחילוץ ועיבוד נתונים מתמונות התרמית שלאחר מכן ניתן להשתמש כדי לאפיין את תגובתו של בעל החיים ללחץ האקוטי. במקרה שלנו נמשך ציפורי שיר חופשי-חיים, הציצי הכחול לתיבת האכלה (הגדרת צילום ועוד) שבו תנאים ללכידת תמונת תרמית היו מותאמות, ולאחר מכן להחיל לחץ לכידה על ידי סגירת תיבת ההאכלה מרחוק כאשר ציפור הייתה בתוך . התיאור של לכידת תמונת תרמית וחילוץ נתונים ספציפי לציוד השתמשנו, ועשוי להשתנות בין מערכות הדמיה תרמית. עיבוד נתונים מתואר באמצעות תוכנת קוד פתוח.
Protocol
הצהרת אתיקה:
העבודה כרוכה שיטת לכידה שגרתית של passerines הקטן חי ללא אושר על ידי הקרן הבריטית לצפרות ופרוטוקול הלכידה לעורר לחץ מתון בציפור בוצעה תחת רישיונות Office Home בריטניה.
1. סט-אפ לצילומים
- צור הגדרת צילומים שבו ציפורים מעודדים למצב את עצמם מול המצלמה (איור 1). ציפור נכנסה להגדרה דרך חור בקיר בקצה אחד ויש לו גישה למזון קרוב לקיר הקצה השני.
- כדי להרגיל את ציפורים להגדרה, לספק מזון מתאים (למשל, גרעיני בוטנים) במזין במשך כמה שבועות לפני ההקלטה. מלבד מתן המזון, לעזוב את הסט-אפ באין מפריע. במהלך תקופה זו, להציב חצובה דמה מול המזין לאפשר ציפורים גם להרגיל למצלמה.
- ביום ההקלטה, להפחית את availability של גרעיני בוטנים בסט-אפ על ידי הסרת כל המזון שנותר מהמזין והחלפתו במזון הכלול במכל שקוף עם חור קטן רק במרכז בחלק העליון שדרכו ציפורים יכולות לגשת המזון. מיקום מיכל האוכל הזה במרכז הכלוב בהיפך הסוף לחור הכניסה.
- מניחים ריבוע קטן של סרט בידוד השחור של פליטה ידועה לזה של integument הטבעי באחת הפינות של הרשת של התיבה כך שהוא מופיע בכל התמונות. צרף את סרט הבידוד השחור לצמד תרמי הקשורים לוגר טמפרטורה שמתעד את הטמפרטורה של סרט הבידוד השחור עם רזולוציה של 0.1 מעלות צלזיוס כל 1 שניות.
- הנח את המצלמה ההדמיה התרמית 50 סנטימטרים ממרכז מלכודת הקופסה כך שכל התיבה מתאימה בתוך השדה של המצלמה של נוף, וציפורים האכלה מיכל ברור תמוקם באזור של המצלמה של מוקד. חבר את המצלמה למחשב נייד, להגדיר את המצלמה כדי להקליט תמונות בממוצע של 7.5 פריימים לשניה (עם חותמת זמן), ולשלוח את התמונות לדיסק הקשיח של המחשב הנייד כדי להינצל שם.
- צרף חוט דיג לדלת המסתובבת של הסט-אפ ולרדד אותו למצב שבו הניסוי סמוי מן העין של ציפורים, אבל ההגדרה עדיין ניתן לצפות - כ -20 מ 'מהסט-אפ.
2. צילומי התגובה של ציפור למתח חריף מתון
- ברגע שציפור נכנסה לתיבת ההאכלה, לעזוב את ציפור ללא הפרעה בתיבה לבערך 5 שניות.
- משוך את חוט הדיג אחרי ציפור בילתה בערך 5 שניות בתיבה כדי לסגור את תיבת ההאכלה. דואג שציפור היא עדיין בקצה הרחוק של התיבה על מנת למזער את הסיכון לפגיעה בציפור.
- מייד לגשת לתיבת ההאכלה ולעמוד ללא תנועה מאחורי המצלמה לכ 3 דקות. אז לשלוף את ציפור מהקופסה ולתת לו ללכת.
- חלץ טמפרטורת מקסימום מכל מסגרת. הערה: הטמפרטורה המרבית כמעט תמיד נרשמה באזור מסביב לעין, מוקף בעור החשוף של טבעת periophthalmic (איור 2), והוא ייקרא בעתיד כטמפרטורת עין-אזור.
- בהדמית תוכנת ניתוח תרמית לחץ לחיצה ימנית על תמונה, "להוסיף" עלילה חדשה למקסימום התמונה. לאחר מכן, לחץ לחיצה ימנית על העלילה שמייצאת נתונים (טמפרטורת עין-אזור וזמן המסגרת נלקחה) לקובץ CSV.
- למחוק מקובץ CSV כל הקווים ממסגרות שבי עין-האזור של ציפור לא היה גלוי לעין.
- עלילה טמפרטורה המקסימלית נגד זמן 27 R, לזהות באופן ידני נקודות שבן קוצים טמפרטורה> 0.2 מעלות צלזיוס בין שתי קריאות רצופות כאשר קרום המצמוץ נמשך מעל העין (מהבהב) ונקודות עם ערכים נמוכים outsidדואר הטווח של טמפרטורות גוף לציפורים 28 (כלומר, כאשר העין האזור היה נראה לעין אבל מטושטש באמצעות בקשה למסגרות מרובות) ולאחר מכן להסיר את השורות הרלוונטיות מקובץ נתונים CSV מיוצר בשלב 3.1.
- למדוד טמפרטורת סביבה.
- הורד את הנתונים (זמן וטמפרטורה לוגר) מוגר הטמפרטורה על מחשב ויצוא לגיליון אלקטרוני.
- כדי לקבל את טמפרטורת הסביבה מתמונת התרמית, בתמונה תרמית ניתוח תוכנה לצייר ריבוע על סרט הבידוד השחור שכיסה את הבדיקה לוגר הטמפרטורה, ואז קליק ימני על הכיכר ובחר 'להוסיף עלילה חדשה' לטמפרטורה הממוצעת של הכיכר.
- לאחר מכן, לחץ לחיצה ימנית על עלילה ש, לייצא את הנתונים (זמן וטמפרטורת IRT) לקובץ CSV. מיזוג סדרת זמן שתי טמפרטורה וכתוצאה מכך לוגר טמפרטורה והתאמת תמונת תרמית לזמן לגיליון אלקטרוני אחד.
- טמפרטורות עין-אזור נכוןמחדש נגד טמפרטורת סביבה. לייצא את הגיליון האלקטרוני שנוצר בשלב 3.4 לתוך קובץ CSV התאמה לזמן. לכל אחת מטמפרטורות עין-שמר האזור להוסיף את ההבדל בין לוגר הטמפרטורה וערכי טמפרטורה המופקת הדמיה התרמית (הזמני לוגר - זמני IRT) נמדד באותו הזמן.
- לבצע סינון אוטומטי כדי להסיר ערכים פחות מדויקים נמוכים עין-אזור טמפרטורה באמצעות אלגוריתם חיפוש שיא (ראה קובץ קוד נוסף) כדי לחלץ את הנקודות הגבוהות ביותר (ולכן מדויקות ביותר) בנתונים באופן אוטומטי.
הערה: אלגוריתם חיפוש השיא מארגן מחדש את נתוני הטמפרטורה לוקטור עם משתמש מוגדר רוחב (תוחלת), מומלץ תוחלת = 3, חילוץ הערך המרכזי בשורות שבי המספרים משני הצדדים נמוכים, כלומר, הפסגות. - השתמש באינטרפולציה ליניארית כדי לסגור את הפערים שהותירו רצפים כאשר אין שיא היה שחולץ, וכאשר העין-האזור לא היה גלוי לעין. השתמש בna.approx הפקודה (v1.7-1 חבילת גן החיות1 בR 27) כדי לתת ערך טמפרטורה אחת לשנייה לכל פרט.
- בקובץ נתוני CVS, להוסיף ערך של 0.2 לכל אחת מטמפרטורות עין-אזור כדי לתקן את ההשפעה של נטילת התמונות דרך רשת.
הערה: בדיקות הראו שכאשר גוף שחור, מחומם לטמפרטורת גוף משוער אומר ציפור ~ 41 המעלות צלזיוס בשלב הפעיל שלה 28, היה צילמה דרך החלון המסורג עם אותו גודל הרשת המשמשת בהגדרת הצילומים, טמפרטורות שנרשמו על ידי המצלמה ההדמיה התרמית באזורים לא מוסתרים על ידי החוטים היו 0.2 מעלות צלזיוס נמוכה מהערכים שהתקבלו ללא הרשת להתערב (הבדל ממוצע = -0.2 ºC ± 0.085 SD, n = 30, טווח טמפרטורה של גוף שחור = 41.6-42.5 מעלות צלזיוס).
הערה: זה הוא גורם התיקון ספציפי לתנאים במחקר זה ועשוי להשתנות עם מכשיר לעשות, וסוג ורוחב של הרשת בין בעלי החיים ואת המצלמה, ובכל מצב צריך להיות הוקם עבור spתנאי מחקר ecific. - מטמפרטורות מקסימום עין-האזור נרשמו מלפני התיבה הייתה סגור לבחור את הערך הגבוה ביותר, אשר תהווינה את טמפרטורת עין-אזור הבסיס של ציפור באין מפריע. להוסיף טמפרטורת עין-אזור בסיס זה כעמודה חדשה לקובץ CVS (בסיס). אחר כך להפחית את הערך הבסיסי מכל עודפי ערך טמפרטורת עין-אזור מרבי, יצירת עמודה חדשה בקובץ נתוני CVS.
הערה: ערך חדש זה עכשיו להביע את התגובה של ציפור ללחץ אקוטי קל כסטייה מטמפרטורה בנקודת ההתחלה ללא הפרעה שלה. - עלילה הסטיות בטמפרטורת עין-אזור מרבי מטמפרטורת עין-אזור הבסיס של כל האנשים מלאחר המלכודת נסגרה באמצעות ggplot הפקודה (v1.0.0 ggplot2 חבילה ב -27 R). צור מרווחי ביטחון של 95% bootstrapped באמצעות mean_cl_boot האופציה (v1.0.0 ggplot2 חבילה ב -27 R). לפרטים ראה קובץ נוסף הקוד.
Representative Results
תוצאות מ -9 ציצים כחולים חיים ללא מוצגות הממחישות את המידע שניתן להשיג מהדמית תרמית ולהוכיח כי האות החזויה של לחץ בטמפרטורת עין-האזור של ציפור ניתן להבחין בבעלי חיים הנעים ללא. כל ציפור צולמה בממוצע של 5.1 ± 0.9 שניות (n = 9) לפני התיבה "הדלת הייתה סגורה. זה אפשר חישוב טמפרטורת עין-האזור של ציפור באין מפריע (טמפרטורה בנקודת ההתחלה) שאליו ניתן להפנות את כל האמצעים לאחר. בבדיקות שנערכו ב -20 בוידאו קליפים תרמית שניות של ציצים כחולים ללא הפרעה מגיעים האכלה בתוך מלכודת (n = 9 ציפורים שונות מאלה המשמשים ליישום של לחץ מתון), מתאמים של r> 0.7 נמצאו להתקיים בין מרבי טמפרטורת עין-אזור שנרשמה במהלך 5 שניות הראשונות, והמקסימום שנרשם בשניות הראשונות 10, 15 ו -20 (איור 3). זה התפרש כמצביע על כך שva המרביlue נרשם בכמה שניות הראשונות שלאחר כניסת המלכודת הייתה נציג של הרמה לטווח הארוך, ואת טמפרטורת עין-האזור הממוצע בכ -5 שניות שקדמו סגירת תיבה מייד שימשה כערך הבסיסי. הציצים הכחולים במדגם זה היה טמפרטורת עין-אזור רמת בסיס ממוצעת של 38.4 C ° ± 0.5 (ממוצע ± SE) ונעו 35.8-39.9 מעלות צלזיוס (n = 9). ברגע שציפור מאכילה במשך 5 שניות כדי לאפשר חישוב טמפרטורת עין-אזור הבסיס, את דלת התיבה נסגרה על ידי הנסיין. כל ציפורים הבחינו בסגירת התיבה כפי שמעידות טיסות ניסיון הבריחה שלהם.
עם סגירת המלכודת, טמפרטורת עין-האזור ירדה במהירות והגיעה לטמפרטורת עין-אזור מינימום ~ 1.3 מעלות צלזיוס מתחת לטמפרטורת הבסיס לאחר ~ 10 שניות (איור 4). איור 4 מראה את העקומה מרוכבים המבוססים על העיינות המרביות טמפרטורת האזור של כל תשעת האנשים ממוצע לכל שנייה. כעיתוי וההיקף של הירידה בטמפרטורת עין-האזור משתנים בין אנשים מסכות עקומה מרוכבים המידה האמיתית של תגובת הטמפרטורה. הירידה בטמפרטורה הממוצעת מחושבת עבור כל אדם בנפרד היא 2.0 ± 0.2 מעלות צלזיוס, והוא הגיע לנקודה הנמוכה ביותר לאחר 9.4 ± 2.8 שניות (ממוצע ± SE). מכאן ואילך, טמפרטורת עין-האזור חזר בהדרגה לכיוון טמפרטורת עין-אזור בסיס מעל 2-3 דקות הבאות, אך לא די להגיע לנקודת ההתחלה עד סוף המשפט.
איור 1. זירת הצילומים. ההגדרה בתחום נועד למשוך ציפורים לשדה הראייה של המצלמה שבו לחץ אקוטי קל יכול להיות מיושם, באמצעות תיבת האכלה. ההגדרה כללה 25 על ידי 14 סנטימטר וסנטימטר 16.5 גבוהה תיבה בנויה מעץ לבוד, עם לוח קדמי של רשת תיל מגולוון עם siz צמצםדואר של 1 ב -2.5 סנטימטר. הרשת מאפשרת קרינת אינפרא אדום לעבור, מה שמאפשר לצלם ציפורים תוך בתוך ההגדרה. רשת תיל נבחרה, כזכוכית ורוב הפלסטיק לא לשדר קרינת אינפרא אדום. חור של 60 מ"מ קוטר נחתך בקיר הקצה השמאלי כדי לאפשר ציפור שנכנסה להגדרה ולהשיג גישה למזון ממוקם בקצה הימני של התיבה. בדיקה וגר הטמפרטורה דחוקה בין שני ריבועים של סרט שחור בידוד (המסומן בחץ שחור) מחוברת לפינה הימנית העליונה של הלוח הקדמי כדי להקליט טמפרטורת ייחוס. הלחץ האקוטי קל מוחל על ציפור בתוך ידי סגירת התיבה. מושך בחוט דיג המחובר לדלת מסתובבת בכניסת החור אפשר ניסוי כדי לסגור את התיבה כאשר ציפור היא בפנים. המצלמה ההדמיה התרמית להגדיר מול המלכודת מתעדת את כל הרצף של אירועים. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר oF נתון זה.
איור 2. תמונה תרמית של מידה כנגד כחולה. רוב הגוף של ציפורי שיר מבודד היטב על ידי נוצות (או על ידי קשקשי רגל מידה פחותה), אבל העור סביב העין חשופה ומקרין ביותר החום בנסיבות רגילות, והוא מוקף integument או רקע הקריר. זו מוצגת בתמונת תרמית זו על ידי הצבע הצהוב (הטמפרטורה הגבוהה ביותר) מסביב לעין, הכתום, צבע אדום, סגול וכחול מסמן טמפרטורות קרירה וקרירות. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
איור 3. Repeatabilities של טמפרטורת בסיס נמדד oתקופות שונות Ver זמן. מקדמי מתאם בין הטמפרטורה המקסימלית שנרשמה ב1-8 שניות הראשונות של סרטון ו'הממוצע של מרביים "בתוך 0.5º של הערך הגבוה ביותר שנרשם לשניות 10, 15 ו -20 הראשונות של קליפ (מיוצג על ידי קווים אדומים, כחולים וירוקים, בהתאמה). כל קטעים היו 20 שניות בזמן (n = 9). במהלך ניתוח ראשוני באמצעות בסיס הנתונים גדולים יותר, מספר "אמצעי המרביים 'חושבו מערך רק 1, ונתן אותו הערך לRho בכל ההשוואות. קטעים אלה הוצאו מהניתוח, ומשאירים רק אלה שבהם אמצעים חושבו מתוך יותר מ 3 מדידות. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
תגובת 4. איורשל טמפרטורת עין-האזור להשמנה. יש אות מאוד ברורה ובולטת של אירוע ההשמנה באה לידי ביטוי בשינוי בטמפרטורת עין-אזור לאורך זמן. כדי להשוות פני אנשים שמשתנים בטמפרטורה הבסיסית שלהם, טמפרטורת עין-אזור שייר, כהפרש של הטמפרטורה בפועל והטמפרטורה הבסיסית של הפרט ש, הוא זמם על הציר האנכי. זה זמם נגד זמן עם סגירת המלכודת כמו 0 והציפור הוסרה מהמלכודת אחרי 3 דקות. הקו האדום מראה את הטמפרטורה הממוצעת שייר והלהקה האפורה מייצגת את מרווח הביטחון של 95%. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
Discussion
מטרת מאמר זה היא לתאר את המתודולוגיה הצורך למדוד שינויים בטמפרטורת עור של החי-חופשי בתגובה ללחץ אקוטי. מחקר זה הוכיח כי שינויים מהירים בטמפרטורת עור קשור לתגובת לחץ אקוטית בעופות בר יכולים לנפול בפח הלא פולשני באמצעות IRT. הליך זה כרוך חמישה שלבים חשובים (1) עיצוב של השדה המתאים באמצעות מערכת הדמיה תרמית ניידת מאוד הגדרה, (2) מדידת הטמפרטורה בסיסית, (3) יישום של לחץ מתון מעורב לכידת ציפור בהגדרה, (4) הודעה הוק אוטומטי דגימה של טמפרטורת עין-אזור ו( 5) כיול של נתוני טמפרטורת חילוץ. המתודולוגיה שתוארה כאן הייתה מוחלת על לכידתו של ציצים כחולים פראיים. טמפרטורות עין-אזור בסיס נציג יכולות להיות שנתפסו קטן כמו 5 שניות. הזמן המשוער יידרש לרשום ציפור אחת בתחום היה על 1 שעות, עם שעה נוספת נדרשה לעבד3 דקות רצף וידאו תרמית.
איסוף נתונים טובים על טמפרטורת העור של חיה דורש תמונות תרמי באיכות גבוהה. מצלמות הדמיה תרמית שונות רק במהותה ממצלמות הגלויות אור במונחים של אורך הגל של הקרינה האלקטרומגנטית שהם מזהים, ולכן רבים מהמושגים שחלו בצילום (לדוגמא, שדה הראייה, עומק השדה) חלים גם בתרמוגרפיה. כנהוג בדרך כלל על ידי צלמים טבע, כל מקום שביקורים של בעלי חיים, כצפוי, שבו טבעי או מלאכותי (למשל, מתקני האכלה) (לדוגמא, אתרי קן), יכולים לשמש לאיסוף תמונות תרמית. משיכת בעלי חיים למצלמה במקום לנסות לעקוב אחריהם למרות שבית הגידול שלהם יש את היתרון של ומאפשר לנו להגדיר את המצלמה מראש, כדי לאסוף תמונה באיכות גבוהה עם הפרעה מינימאלית בהקדם בעלי החיים מגיעים לעין. עם זאת, עם גישה זו, היא חיוני, כדי לבחון או חשבון את ההשפעות שלשההקשר ספציפי של מדידה בלחץ או בטמפרטורת עור. לדוגמא, כאן, ציפורים נמדדו בהקשר האכלה, ואוכל היה בשימוש כדי לפתות באופן פעיל ציצים כחולים להגדרה. מחקר על תרנגולות עולה כי חוויות חיוביות חריפות, כגון הציפייה וצריכתם של פרסי מזון במשפט למידה אסוציאטיבי יכול טמפרטורת עין גם נמוכה יותר 29. ככזה, 'רמות בסיס' של אנשים שנכנסו להגדיר מסוים זה עשויים להיות מושפע על ידי העמותה של מעשה זה עם הפרס. אפשרות זו דורשת מחקר נוסף, אם כי אם קיימים, יהיה צפוי לשפר את הירידה מרמות בסיס כבר נצפה. יתר על כן, thermogenesis מתרחשת בעיכול מזון, אם כי ההשפעות הספציפיות של מזון הנצרך במהלך מדידה בסיסית אינן צפויות להעלות באופן משמעותי את הטמפרטורה בתוך תקופת ההשמנה 3 דקות 30.
מגבלה זו נחשבת, מדידה כל בעלי החיים בבאותו הקשר הוא גם כוח גדול של גישה זו. תוצאות הנציג הראו כי לא הייתה וריאציה גדולה בטמפרטורת עין-אזור בין אנשים לפני הדחק החריף יושם (טמפרטורת עין-אזור בסיס). הווריאציה בטמפרטורת עין תחילת המחקר (מקדם שונה = 3.9%) יכולה להיות בין שאר בשל טעות מדידה או השתקפות אמיתית של הבדלים בין-אישי. תקופת המצלמה IRT נרשמה טמפרטורה של סרט הבידוד השחור מעל 5 שניות כאשר הטמפרטורה של הקלטת לא השתנתה, מקדם הממוצעת של וריאציה היו 0.26% (טווח של 0.08% ל -0.59%). למרות טעות מדידה עשויה להיות גדול יותר בציפור שתזיז אותו בכל זאת מצביע על כך שרוב הווריאציה זו בטמפרטורת עין-אזור בסיס הוא אכן בין אנשים. הרעיון של שגיאת מדידה קטנה יחסית על ציפורים נעו נתמך גם על ידי גבוהות הדירות של טמפרטורת עין-אזור מעל 20 שניות במהלך מדידות הבסיס ( בתגובה ללחץ מתון אקוטי מבוסס היטב לבעלי חיים שציפינו שינויים מהירים בתבנית של זרימת דם, מהפריפריה לליבה באמצעות התכווצות כלי דם בתיווך באהדה שמפחיתה את טמפרטורת עור 17. אזור דו- נבחר כזה סיפק את האזור רק בגוף שהיה מבודדים והוא Associated עם רשת מתמזגת עשירה של כלי דם קטנים, ophthalmicum הרשת שזורה שיכול להשפיע על אובדן החום מהעין 31. במסגרת השיעור המהיר של טכניקת videoing התרמית הצליחה להראות ירידה בטמפרטורת עין-אזור של כ -2 מעלות צלזיוס ב 10 שניות ואחריו העלייה הבאה בטמפרטורה עד למרחק של 0.5 מעלות צלזיוס של בסיס בתוך 3 דקות. למרות קירור היקפי בתגובה ללחץ מתון כבר נרשם בעבר בסביבות 1 דקות במרווחים 17,26, 32, הטכניקה כאן הראתה שירידה בטמפרטורה המרבית עשויה להיות מהירה מאוד. עם רזולוציה נמוכה זמן בסדר הגודל של השפעה זו עלול להחמיץ. זה עשוי להיות חשוב כאשר משווים הבדלים בתגובה ללחץ של אנשים שונים. ההתחממות מחדש של ציפור אחרי 'הילחם או ברח' מהירים תגובה לא חזרו לרמה בסיסית כמו ציפור נשארה בתוך התיבה מצביעה על כך שציפור נשארה מבחינה פיזיולוגית הדגישה. ציפורים היו שחרורד מניסיוני ההגדרה אחרי נקודת חתך נבחר באופן שרירותי של בערך 3 דקות כדי למזער את תקופת האיפוק של החי-חופשי. עם זאת, בעתיד, ניסויים ייתכן שיצטרכו להיות ארוך יותר כדי להקליט את תגובת טמפרטורה המלאה עד טמפרטורת עין-האזור של החיה חזרה לרמה בסיסית, אם מבחינה לוגיסטית אפשרי. פרוטוקול חדש זה כרוך בסדרה של תמונות שנאספו לפני ואחרי הלחץ יושם כעת מאפשר מחקר מפורט של הדינמיקה של התגובה ללחץ אקוטי, והשוואות של נקודות זמן רבות בין בעלי חיים הבודדים. חוזר המשפט הזה בתוך אנשים מעל עונות שונות או תנאי סביבה עשויה לאפשר את ההשפעות של סביבה על בסיס או בטמפרטורת עור דחק פוסט-אקוטית ללהפריד, כדרך אפשרית להערכת לחץ כרונית גם כן. . טמפרטורת עור של ציפור תלויה לא רק בייצור חום וחילוף חומריםזרימת דם, אלא גם על החלפת חום מהקרינה שמש, מהירות רוח והרטבה 25. זה מונע תנאים רטובים וסוער מהקלטות תרמוגרפיות מדויקות. טמפרטורת עין-האזור נרשמה על ידי מצלמה הדמיה תרמית יכולה לפעמים גם לזלזל (שגיאה שלילית) או (שגיאה חיובית) בהערכת. שגיאה חיובית משמעותית תדרוש השקעת אנרגיה, אבל זה היה להימנע על ידי ציפור בתיבת ההאכלה להיות מוגן מפני השמש. מקור אחר אחד משגיאה החיובית כלול כאשר ציפור מצמצה. לפעמים ציפור מושכת בקצרה קרום המצמוץ שלה מעל העין האזור וכפי שהוא מאוחסן באופן פנימי בטמפרטורה קרובה יותר לזה של ליבת הגוף, מצמוץ נותן קריאת טמפרטורה גבוהה ויוצא דופן, כאשר הוא מכסה את גלגל העין. זה, עם זאת, זוהה בקלות כפי שהוא משאיר חתימה מאוד מסומנת וניתן להסיר את המסגרת המושפעת. הסיבה העיקרית לשגיאה שלילית ברישומים שלנו הייתה הצעה לטשטש. כל תנועה מהירה מדי כדי לנפול בפח שרערובדי במסגרת השיעור של המצלמה מבלבל את הנתונים שנתפסו מעין-האזור החם הקטנה של התמונה עם זה של האזור (הצעה לטשטש) מגניב שמסביב, וכתוצאה מכך הערכה נמוכה מדי של טמפרטורת עין-אזור. כך לאחר הסרת שגיאות חיוביות זה הופך את הטמפרטורה המרבית שנמדדה מעין-אזור המדידה מדויקת ביותר וסינון אוטומטי באמצעות פקודת פונקצית פסגות מסיר את הערכים הנמוכים נוטים פחות של טמפרטורות עין-אזור המרביים. בנוסף, כקרינה אינפרא אדומה נספגת על ידי אדי מים, משטח הטמפרטורה נרשמה תושפע לחות היחסית של הסביבה. זה יכול להיות מוסבר על ידי הזנת טמפרטורת אוויר, לחות יחסית ומרחק להתנגד לתמונה תרמית אנליטיים ניתוח תוכנה. עם זאת, גישה יותר מדויקת ויעילה (כמו שנעשה כאן) היא לכלול התייחסות גוף של טמפרטורה ופליטה ידועות בתוך שדה הראייה. במקרה שלנו זה היהרבוע של סרט בידוד שחור עם פליטה של 0.97, שהוא שווה ערך לזה של integument הטבעי 33. זה מאפשר כיול טמפרטורת עין-האזור באמצעות ההבדל בין ערכי טמפרטורה בפועל ותרמית המופקת הדמיה נמדדו עבור סרט הבידוד. הטמפרטורה של הגוף השחור המשטח לאחר מכן ניתן להשתמש כדי לכייל תמונות ברציפות לאורך כל תקופת המדידה. הודות להתקדמות הטכנולוגית בפיתוח במצלמות התרמיות הם כעת ניתן לפרוס מצלמות קלת משקל קטנים מסוגלים לאסוף מסגרות רבות לשנייה על פני תקופות זמן ארוכות. למרות הדמיה תרמית היא טכניקה בשימוש נרחבת במחקר עופות 25, גודל והוצאות של מערכות הדמיה תרמית יש להגביל את השימוש בו בטבע. במחקר זה המערכת הייתה מאוד ניידת, תעלה כ. £ 6000 ורזולוציה גבוהה הניתנת וידאו תרמית מסוגל הלא פולשני לכידת te מדויקנתונים mperature מבעלי חיים המתגוררים ללא ללא הצורך בטיפול בציפור. הקלטה במסגרות מרובות לשנייה מאפשרת מדידות של סדרת זמן ברזולוציה הגבוהה של טמפרטורה היקפית ובכך מספקת את האפשרות לחקור את הדינמיקה של תגובת לחץ האקוטית. זה קשה להשיג עם מדגם glucocorticoid הקונבנציונלי שמוגבל במספר הדגימות שניתן לנקוט בתוך תקופה של זמן. כאן יש לנו חילוץ סדרת זמן של טמפרטורת עין-אזור עם מרווח של 1 שניות, שהיה מספיק כדי להדגים את תגובת טמפרטורת עין-האזור ללחץ אקוטי (לכידה), אבל החלטה זמנית גבוהה יותר תהיה גם אפשרית. ההצטברות של מספר גדול של תמונות, לעומת זאת, דורשת רמה מסוימת של אוטומציה בהפקת מידע מהתמונות. הפרוטוקול מתאר תהליך אוטומטי למחצה פשוט כדי לחלץ את הטמפרטורה המרבית מכל תמונה. היינו מסוגל לעשות את זה כאזור של עניין, עין-Region, תמיד היה המקום החם ביותר בתמונה. ניתוח יכול להיות בעייתי יותר אם האזורים של עניין מורכבים יותר ועשויים לדרוש תוכנת זיהוי תבניות מותאמות אישית שנועדה (למשל, 34). במחקר זה נדרש כמה סינון ידני למצבים שבם טמפרטורת עין-האזור הייתה יתר או אך אותרו בקלות אלה-מוערכים תחת, אבל כמובן אוטומציה נוספת רצויה. המדידות של קירור היקפי מתח מושרה על ידי הדמיה תרמית מספקת תוספת רבת ערך לאמצעים אחרים פיסיולוגיים של מתח וההיבט בלתי פולשני של טכניקה זו היא יתרון מאוד למחקרים נוספים הכוללים בעלי חיים בשבי ופראיים. לכידת תגובת לחץ המלאה, תרמוגרפיה אינפרא אדום ברורה יש פוטנציאל גדול ככלי להערכת לחץ. למרות שכדי להיות אלטרנטיבה לא פולשנית להורמונליים הוקם ומבחני טמפרטורת ליבה, יהיה צורך לאמת צולב בין אמצעים אלה ולקבוע אם טמפרטורת עור מציגה את אותו מידתיות בעוצמה לחץ, כלומר, היקף תגובת טמפרטורת עור יכול לשקף את כוחו של גורם הדחק. מחקר עתידי צריך גם לטפל אם טמפרטורת עור לוכדת לחץ כרוני. בעוד SiH בתגובה ללחץ אקוטי צפוי להיות חשיפה חולפת, חוזרת ונשנית לגורמי לחץ אקוטיים פיזיים או פסיכולוגיים יכול ליצור העלאה כרונית בטמפרטורת גוף ליבת 35,36. אם התכווצות כלי דם מתמשך תורמת להעלאת ליבה זה לא נבדק באופן מפורש. עם זאת, מחקרים על בני אדם גומלים סובלים ממחלות הקשורות ללחץ כרוניים לעשות להראות טמפרטורות אצבע מופחתות 37. תכונה סופית לחקור היא ערכיות: היכולת להבחין חיוביים מאירועים שליליים. מבחני הורמונליים אינו יכולים להבחין הערכיות 5, עם רמות סטרואידים המופיעות לשקף רמה של עירור ולא מתח במיוחד. מחקר על מזג מסרקשבמקום בתרנגולות מקומיות החשופות לגירויים מרתיעים וחיוביים מציע טמפרטורת עור עשויה להיות דומה דומה לעוררות כלליות 22,29. עם זאת, בבני אדם, מצבים רגשיים שונים לעורר שינויים אזוריים ספציפיים בטמפרטורת עור, להתחממות דו- דוגמא וקירור הלחי כשנבהלו 38, אבל בסך הכל ירד טמפרטורת עור כאשר צוחקים 39. השוואות בין אזורים השונים עשויות עדיין לחשוף את מצב רגשי. שימוש בהמלצות שהוצגו במאמר זה, ניתן יהיה להתייחס לכל השאלות הללו, ולאמת את טמפרטורת עור כסמן לא פולשנית של לחץ.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Thermal Imaging Camera | FLIR | A65 (f=25 mm) | Compact (106 x 40 x 43 mm) and low cost |
| Thermal Image Analysis Software | FLIR | ResearchIR v3.4 | Allows high speed thermal video recording and thermal pattern analysis |
| Temperature logger | Gemini Data Loggers | Tinytag Talk 2 TK-4023-PK | Monitors from -40 to +125 °C using accompanying temperature probe |
References
- Romero, L. M., Dickens, M. J., Cyr, N. E. The reactive scope model - A new model integrating homeostasis, allostasis, and stress. Hormones and Behavior. 55, 375-389 (2009).
- McEwen, B. S., Wingfield, J. C. The concept of allostasis in biology and biomedicine. Hormones and Behavior. 43, 2-15 (2003).
- Rensel, M. A., Schoech, S. J. Repeatability of baseline and stress-induced corticosterone levels across early life stages in the Florida scrub-jay (Aphelocoma coerulescens). Hormones and Behavior. 59, 497-502 (2011).
- Wingfield, J. C. Comparative endocrinology, environment and global change. General and Comparative Endocrinology. 157, 207-216 (2008).
- Buwalda, B., Scholte, J., de Boer, S. F., Coppens, C. M., Koolhaas, J. M. The acute glucocorticoid stress response does not differentiate between rewarding and aversive social stimuli in rats. Hormones and Behavior. 61, 218-226 (2012).
- Romero, L. M., Reed, J. M. Collecting baseline corticosterone samples in the field: Is under 3 min good enough. Comparative Biochemistry and Physiology - A Molecular and Integrative Physiology. 140, 73-79 (2005).
- Harper, J. M., Austad, S. N. Fecal glucocorticoids: a noninvasive method of measuring adrenal activity in wild and captive rodents. Physiological and Biochemical Zoology. 73, 12-22 (2000).
- Bortolotti, G. R., Marchant, T. A., Blas, J., German, T. Corticosterone in feathers is a long-term, integrated measure of avian stress physiology. Functional Ecology. 22, 494-500 (2008).
- Oka, T., Oka, K., Hori, T. Mechanisms and mediators of psychological stress-induced rise in core temperature. Psychosomatic Medicine. 63, 476-486 (2001).
- Bouwknecht, A. J., Olivier, B., Paylor, R. E. The stress-induced hyperthermia paradigm as a physiological animal model for anxiety: a review of pharmacological and genetic studies in the mouse. Neuroscience and Biobehavioral Reviews. 31, 41-59 (2007).
- Moe, R. O., Bakken, M. Effects of Handling and Physical Restraint on Rectal Temperature, Cortisol, Glucose and Leucocyte Counts in the Silver Fox (Vulpes vulpes). Acta Veterinaria Scandinavica. 38, 29-39 (1997).
- Cabanac, M., Aizawa, S. Fever and tachycardia in a bird (Gallus domesticus) after simple handling. Physiology, and Behavior. 69, 541-545 (2000).
- Cabanac, A. J., Guillemette, M. Temperature and heart rate as stress indicators of handled common eider. Physiology, and Behavior. 74, 475-479 (2001).
- Carere, C., van Oers, K. Shy and bold great tits (Parus major): body temperature and breath rate in response to handling stress. Physiology, and Behavior. 82, 905-912 (2004).
- Gray, D. A., Maloney, S. K., Kamerman, P. R. Restraint increases afebrile body temperature but attenuates fever in Pekin ducks (Anas platyrhynchos). American Journal of Physiology. Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 294, R1666-R1671 (2008).
- Meyer, L. C. R., Fick, L., Matthee, A., Mitchell, D., Fuller, A. Hyperthermia in captured Impala (Aepyceros melampus.): A fright not flight response. J. Wildl. Dis. 44, 404-416 (2008).
- Busnardo, C., Tavares, R. F., Resstel, L. B. M., Elias, L. L. K., Correa, F. M. Paraventricular nucleus modulates autonomic and neuroendocrine responses to acute restraint stress in rats. Autonomic Neuroscience: Basic, and Cinical. 158, 51-57 (2010).
- Kramer, K., et al. Effect of conditioning on the increase of heart rate and body temperature provoked by handling in the mouse. ATLA Alternatives to Laboratory Animals. 32, 177-181 (2004).
- Lowe, T. E., Cook, C. J., Ingram, J. R., Harris, P. J. Changes in ear-pinna temperature as a useful measure of stress in sheep (Ovis aries). Animal Welfare. 14, 35-42 (2005).
- Ahola, L., Harri, M., Kasanen, S., Mononen, J., Pyykönen, T. Effect of family housing of farmed silver foxes ( Vulpes vulpes ) in outdoor enclosures on some behavioural and physiological parameters. Canadian Journal of Animal Science. 80, 427-434 (2000).
- Harri, M., Mononen, J., Ahola, L., Plyusnina, I., Rekilä, T. Behavioural and physiological differences between silver foxes selected and not selected for domestic behaviour. Animal Welfare. 12, 305-314 (2003).
- Van Bogaert, M. J. V., Groenink, L., Oosting, R. S., Westphal, K. G. C., Van Der Gugten, J., Olivier, B. Mouse strain differences in autonomic responses to stress. Genes, Brain and Behavior. 5, 139-149 (2006).
- Van Der Heyden, J. A. M., Zethof, T. J. J., Olivier, B. Stress-induced hyperthermia in singly housed mice. Physiology and Behavior. 62, 463-470 (1997).
- Singer, C., Ruf, T., Schober, F., Fluch, G., Paumann, T., Arnold, W. A versatile telemetry system for continuous measurement of heart rate, body temperature and locomotor activity in freeranging ruminants. Methods in Ecology and Evolution. 1, 75-85 (2010).
- McCafferty, D. J. Applications of thermal imaging in avian science. Ibis. 155, 4-15 (2013).
- Edgar, J. L., Nicol, C. J., Pugh, C. A., Paul, E. S. Surface temperature changes in response to handling in domestic chickens. Physiology, and Behavior. 119, 195-200 (2013).
- R Core Team. R: A language and environment for statistical computing. R Foundation for Statistical Computing. , Vienna, Austria. At http://www.r-project.org/ (2014).
- Prinzinger, R., Pressmar, A., Schleucher, E. Body temperature in birds. Comparative Biochemistry and Physiology. 99, 499-506 (1991).
- Moe, R. O., Stubsjøen, S. M., Bohlin, J., Flø, A., Bakken, M. Peripheral temperature drop in response to anticipation and consumption of a signaled palatable reward in laying hens (Gallus domesticus). Physiology, and Behavior. 106, 527-533 (2012).
- Secor, S. M. Specific dynamic action: a review of the postprandial metabolic response. Journal of Comparative Physiology B. 179, 1-56 (2009).
- Midtgård, U. Scaling of the brain and the eye cooling system in birds: A morphometric analysis of the ophthalmicum. Journal of Experimental Zoology. 225, 197-207 (1983).
- Edgar, J. L., Lowe, J. C., Paul, E. S., Nicol, C. J. Avian maternal response to chick distress. Proceedings. Biological Sciences / The Royal Society. 278, 3129-3134 (2011).
- Hammel, H. T. Infrared emissivity of some Arctic fauna. Journal of Mammalogy. 37, 375-378 (1956).
- Khaliq, I., Hof, C., Prinzinger, R., Böhning-Gaese, K., Pfenninger, M. Global variation in thermal tolerances and vulnerability of endotherms to climate change. Proceedings. Biological Sciences / The Royal Society. 281, 20141097 (2014).
- Kant, G. J., Ra Bauman,, Pastel, R. H., Myatt, C. A., Closser-Gomez, E., D’Angelo, C. P. Effects of controllable vs. uncontrollable stress on circadian temperature rhythms. Physiology, and Behavior. 49, 625-630 (1991).
- Endo, Y., Shiraki, K. Behavior and body temperature in rats following chronic foot shock or psychological stress exposure. Physiology and Behavior. 71, 263-268 (2000).
- Lin, H. P., Lin, H. Y., Lin, W. L., Huang, A. C. W. Effects of stress, depression, and their interaction on heart rate, skin conductance, finger temperature, and respiratory rate: Sympathetic-parasympathetic hypothesis of stress and depression. Journal of Clinical Psychology. 67, 1080-1091 (2011).
- Pavlidis, I., Eberhardt, N. L., Levine, J. A. Seeing through the face of deception. Nature. 415, 35 (2002).
- Nakanishi, R., Imai-Matsumura, K. Facial skin temperature decreases in infants with joyful expression. Infant Behavior and Development. 31, 137-144 (2008).
