Summary
Den amyloid-β (Ap) -injected dyremodell gjør administrasjonen av en definert mengde og arter av Ap-fragmenter og reduserer individuelle forskjeller innen hver studie gruppe. Denne protokollen beskriver intracerebroventrikulær (ICV) injeksjon av Ap uten stereotaktiske instrumenter, slik at produksjon av abnormiteter Alzheimer-lignende adferds hos normale mus.
Introduction
Gitt at amyloid-β (Ap) er en patologisk kjennetegn på Alzheimers sykdom (AD), har utviklingen av AD dyremodeller fokusert på nevrale overekspresjon av Ap. Ettersom mutasjoner i amyloid forløper protein (APP) eller presenilin (PS) føre til forstyrrelse av Ap likevekt og til slutt til patogenesen av familiær AD 1, har musemodeller som omfatter APP eller PS-genmutasjoner blitt generelt akseptert. Blant det store utvalget av transgene mus, prototypiske musemodeller inkluderer følgende: TG2576, PDAPP, APP / PS1 og APP23. I hjernen, disse mus oppviser generelt Ap aggregering og til slutt senile plakk; plakkdannelse er etterfulgt av en betydelig kognitiv svikt, slik at de viser dårlig ytelse i atferdstester for læring og hukommelse. Den generasjonen av å bruke transgene mus som naturlig etterligne menneskelig AD patologi har dermed bidratt til AD forskning samfunnet ved å tillate oss å overvåke utviklingen av diSease. Imidlertid, ved bruk av transgene mus er uøkonomisk og tidkrevende fordi det tar måneder for mus å utvikle Ap-plakk, og enda lenger for å vise Ap-induserte synaptiske eller unormal oppførsel 2,3. Opprinnelig utviklet som et alternativ til å overvinne svakhetene i transgene musemodeller, er ikke-transgene modeller også ofte brukt på grunn av deres distinkte fordeler. Patogen-indusert AD-modeller kan fremstilles ved direkte injeksjon av Ap i hjernen, mens AD-lignende kognitive mangler kan også utløses av andre kjemiske og fysikalske midler, for eksempel injeksjon av nevrotoksiske forbindelser slik som scopolamin, induksjon av lesjoner i kognisjon relaterte områder som hippocampus, eller ved kortikal skade fire. Men den ikke-patogene induksjon av kognitiv svikt ikke nøyaktig gjenspeiler fundamentale patofysiologien av AD; i stedet, det bare etterligner sine symptomatiske resultater. I motsetning til dette, et patogen-indusert AD modellen, A46; -injected musemodell, kan ikke bare vise AD-lignende unormal oppførsel, men kan også vise Ap patologi, den felles trekk deles av familiær og sporadisk AD.
Til tross for vanskeligheten med å visualisere Ap-plakk i hjernevevet, er den største fordelen med Ap-injiserte modell som gjør det attraktivt for AD undersøkelse dens kontrollerbarhet. Forskere kan luke ut de individuelle forskjellene i musemodeller som kan føre til feilaktige data i narkotikarelaterte studier. Betimelig medikamentbehandling er aktivert avhengig av mekanismen av legemiddelkandidat; å utdype, kan en inhibitor av Ap aggregering påføres før injeksjonen av Ap. I tillegg kan undersøkere anta at den patogene transformasjon som oppstår etter injeksjon Ap er avledet fra Ap eksponering fordi de andre faktorene er strengt kontrollert, inkludert individuelle forskjeller.
I denne protokollen, en levende beskrivelse av how å indusere en AD-lignende fenotype i normale mus via Ap intracerebroventrikulær (ICV) injeksjon uten stereotaktiske instrumenter er presentert. Minimalisering av innsettings-fremkalt skade på hjernevevet er avgjørende for å hindre muligheten for strukturelle skader og lesjon-indusert inflammasjon. En mangel på dyktighet i mus håndtering fører til uventede neuronal skade. Videre teknikker som muliggjør passende vinkel og dybde som skal oppnås i løpet av injeksjonen er spesielt viktig for å omgå hyppige feil. I tillegg til et detaljert, levende forklaring av ICV injeksjon, er påliteligheten av modellen produsert av følgende protokoll også illustrert i følgende avsnitt. Den følgende protokollen kan være en pålitelig og lett forståelig verktøy som bidrar til AD forskning, for derved å tilveiebringe en byggestein som kan til slutt føre til en meningsfylt oppdagelse for AD samfunnet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle dyreforsøk ble utført i samsvar med National Institutes of Health Guide for omsorg og bruk av forsøksdyr (NIH publikasjoner nr 8023, revidert 1978) og med Animal Care og bruk komité Institutional Animal Care og bruk komité Kist (Seoul, Korea).
1. Animal Forberedelse
- Forberede en gruppe på syv uker gamle ICR hannmus (eller C57BL / 6).
- La musene går gjennom en akklimatiserings fremgangsmåte for 3-7 dager etter transport for å gjenopprette homeostase. Generelt, plasserer en gruppe på 4-5 mus i hvert bur, og opprettholde dem ved 22-23 ° C og 40% fuktighet, med en 12/12 timers lys / mørke syklus. Gi vann og mat ad libitum.
Merk: akklimatisering prosessen er avgjørende for å tillate utvinning fra stress av frakt og tilpasning til nye boliger, mat, vann, og lukter så godt som nytt bur og lys syklus. I dette eksperimentet ble musene plassert i Individuelt Ventilerte Bur (IVCs) ligger i Spekrete Patogen Gratis (SPF) -grade anlegget - Vei hver mus og inkluderer fag som vekt avviker ± 10% fra gjennomsnittet.
- Del fagene inn i to grupper: en bil-injisert gruppe (Ap (-)) og en Ap-injisert gruppe (Ap (+)). Hvis forsøket er å teste effekten av en bestemt medikamentkandidat, dele musene i fire grupper: (1) Ap (-) / medikament (-), (2) Ap (-) / medikament (+), (3) Ap (+) / medikament (-), og (4) Ap (+) / medikament (+).
2. Ap Peptide Forberedelse
- Behandle Ap-peptider, avledet ved kjemisk syntese 5 eller fra kommersielle kilder, med på forhånd avkjølt 1,1,1,3,3,3-heksafluor-2-propanol (HFIP) for å løse opp eventuelle aggregater og for å gjøre peptidene homogene 6 .
- Sonikere Ap / HFIP oppløsning i et vann-bad-sonikator i 5 minutter (ved romtemperatur), forsiktig vortex, og inkuber løsningen i 30 minutter ved RT. Fjern HFIP helt via fordampning med nitrogenog lagre det homogene Ap ved -80 ° C inntil bruk.
- Fremstille Ap-monomerer: (. 100 uM Ap, 10% DMSO, 90% PBS) lage en Ap mM dimetylsulfoksyd (DMSO) lager og fortynne den 10-ganger i fosfatbufret saltvann (PBS)
- Forbered Ap-oligomerer.
- Inkuber Ap monomer oppløsning (inneholdende Ap (1-42) eller Ap (1-40)) (trinn 2.2.) Ved 37 ° C i 3 eller 7 dager, henholdsvis.
- Plasser Ap oppløsning i et forseglet rør i en glidelås pose inneholdende en våt papirhåndkle for å tilveiebringe en fuktig miljø for å hindre at vann fordamper i løpet av inkubasjonsperioden.
- Bekrefte fremstilte Ap oligomere via natriumdodecylsulfat-polyakrylamid gelelektroforese (SDS-PAGE) med foto-indusert tverrbinding av umodifiserte proteiner 6.
- Fremstille kontroll PBS-løsning inneholdende 10% DMSO for kjøretøyet ICV injeksjon.
3. Sprøyte Forberedelse
Merk: Kompresjon av Parafilm vil føre til dybden av injeksjonen som overstiger 3,6 mm ventralt. For å hindre at Parafilm fra å bli komprimert under nålestikk, tett vikle nålen flere ganger.
4. Ap-injisert Mouse Model Forberedelse
Merk: Rengjør betjeningsfeltet med et desinfeksjonsmiddel for å opprettholde sterile forhold og sterilisere alle kirurgiske instrumenter for ICV injeksjon med 70% etanol og UV eksponering.
- Bedøve mus ved intraperitoneal injeksjon av en blanding av xylazin (20 mg / kg) og tiletamin HCl / zolazepam-HCl (80 mg / kg) før den ICV injeksjon. Plasser musen på en varm mat for å opprettholde sin kroppstemperatur mens bedøvet og bekreft adekvat anestesi ved å vurdere foten-pinch respons.
- Påfør sterile PBS synker til begge øynene for å hindre hornhinnen tørrhet under prosedyren (figur 1B).
- Forbered to speil ved å tegne flere rette vertikale linjer på deres overflater i tilfelle difficulty injisere sprøyten loddrett.
- Plasserer et speil (M1) rett ved siden av kroppen av mus og den andre (M2) i fronten av hodet. Hold M1 parallelt med den imaginære midtlinjen mellom de to øynene til mus og ordne M2 vinkelrett på M1, slik at de to plan danner en 90 ° vinkel (figur 1C). Plasser M1 på venstre side av musen hvis forskeren er høyrehendt. Plasser M1 på høyre side av musen hvis forskeren er venstrehendt.
- Spray 70% etanol på midten av pannen av musen og gni den med tørre bomullspinner. Ikke fukt altfor stor del av et område av pannen for å unngå reduksjon av kroppstemperaturen på grunn av fordampning av alkoholen.
- Tørk det samme området på pannen med 2% klorheksidin løsning med en ren bomullspinner. Gjenta scrubbings med alkohol og klorheksidin for totalt tre ganger hver.
Merk: Hvis det er nødvendig, barbere håret på pannen av musen for å minimere imidleheten av forurensning - Finn bregma.
- Ved hjelp av tommelen og pekefingeren, tett hold huden i pannen, rett over de to øynene til den grad at begge øynene stikker ut. Dra huden tilbake for å gjøre pannen stram og minimere skallen bevegelser under huden.
- Danner en usynlig trekant ved å tildele tre hjørnene: de to øynene til mus og punktet der tommelen og pekefingeren møtes, bregma. (Tall 1B, Rød pil: bregma)
- Finn injeksjonspunktet med målebånd: -1,0 ± 0,06 mm posteriort for bregma, 1,8 ± 0,1 mm lateralt for sagittal sutur, og 2,4 mm i dybden (figur 1D, blå stjerner: injeksjon poeng i hver halvkule). (For B6 mus: -0,9 mm posterior, 1,7 mm lateral, og 2,2 mm i dybden)
- Fylle sprøyten med 10 pl Ap løsning eller kjøretøy med overskudd av oppløsning, for å unngå utilsiktet luftinjeksjon.
- Plasser sprøyten på the injeksjonspunkt (beskrevet i protokollen 4,7). Gjøre sprøyten vinkelrett på planet av injeksjonspunktet. Align reflekterte bilder av sprøyten i begge speil med de opptrukne linjer på speil fra en fast perspektiv (figur 1C).
- Begynn å sette inn nålen helt til Parafilm innpakning når huden.
- Hold hånden som holder sprøyten stødig og bruke andre hånden til å injisere 5 mL av Ap-løsning eller kjøretøy, sakte over 5 sek uten pause. Sørg for at sprøyten forblir vinkelrett gjennom. Etter endt injeksjon, vente 3-5 sekunder før du tar sprøyten for diffusjon.
- Forutsatt at den opprinnelige trekant stilling, utøver moderat trykk for å beskytte skallen fra unødvendige bevegelser. Fjern sprøyten uten å vippe.
- Plasser Ap-injiserte mus på varm pad for utvinning og opprettholde sin sternal recumbency. Ikke la musen uten tilsyn til det gjenvinner bevisstheten, og ikke returnere mOuse til et bur som inneholder ikke-kirurgisk mus før den er helt frisk igjen.
- Vask sprøyten i henhold til trinn 3,3-3,6.
- Postoperativt overvåke mobilitet av mus og se etter tegn på infeksjon eller sykdom i mus i 5-7 dager.
Figur 1. Ap Injeksjon i ICV regionen (A) Parafilm-innpakket sprøyte nål i forhold til en umodifisert sprøytespissen.; (B) PBS faller på øynene for å hindre tørrhet; trekanten dannet på pannen av musen med tommelen, pekefingeren, og de to øynene til mus samt imaginære midtlinjen like langt fra hvert øye; (C) to speil (M1 og M2) med flere vertikale linjer trukket på overflaten for å hjelpe vinkelrett injeksjon av sprøytenålen; (D) trekanten med injeksjon poeng, indiskrerte som blå stjerner (-1,0 ± 0,06 mm fra bregma og 1,8 ± 0,1 mm sagittally) på hver halvkule av mus; Grønn pil: Parafilm, pil Red: bregma Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
5. Bekreftelse av Ap Injeksjon av Y-labyrint og Brain Analyser
- Vurdere arbeidsminne av Ap-injiserte mus ved Y-labyrint tester 3,7,8
- Vent 3 dager etter injeksjonen for utbruddet av hukommelsessvikt.
- Utfør Y-labyrint tester ved bruk av et svart plast labyrint med tre identiske armer som er merket A, B og C, som hver forgrener seg videre ved en 120 ° vinkel fra midten av labyrinten (bredde x lengde x høyde, 10 cm x 40 cm x 12 cm).
- Plasser en mus i starten arm (arm A) og la underlagt fritt utforske labyrinten i 8 min.
- Mål antall oppføringer i hver arm og beregne alternasjon sats på hvert fag 3,9.
- Direkte undersøke post mortem hjerner for å sjekke om injeksjons målrettet ICV region på riktig måte.
- Bedøve musen ved den samme fremgangsmåte som beskrevet i avsnitt 4.1. Da ofrer musen ved halshugging.
- Halshogge musen og fjerne huden å eksponere skallen hjelp kirurgisk saks. Fjern vev og muskler fra kraniet.
- Gjør kutt på bakhode sutur (mellom parietal og interparietal bein) uten å skade hjernen. Fjern occipital og interparietal bein, så parietal og frontale bein. Fjern kraniebein ved hjelp av pinsett og isolere hjernen fra skallen ved å løfte opp hjernehinnene.
- Vask hjernen hos kjølt sterilt saltvann og kutte ICV region av hjernen i den koronale retning med en kirurgisk kniv (figur 2).
- Bekreft injeksjon region basert på spor av nålen innsetting påhjernevev (figur 2). Sjekk om nålen spor har nådd en av ventriklene. Hvis nålen spor ikke oppfyller eller passere gjennom ventriklene, utelukke at fagets data fra analyse av de eksperimentelle resultatene.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Denne delen viser eksempler på resultater som kan oppnås ved bekreftelse av Ap aggregering og Y-labyrint vurdering av hukommelsessvikt. Ved hjelp av full-lengde Ap (1-42) peptid med 42 aminosyrer, blanding av Ap-monomerer, oligomerer, og fibriler (figur 3) ble fremstilt. Gjennom HFIP-indusert monomerization trinnet, ble relativt homogene monomerer (Lane B) oppnådd. Etter 7 dagers inkubasjonstid, ulike størrelser av Ap-aggregater (Lane C) utviklet. Trimerer og tetramerer var den dominerende arten blant oligomere former for Ap. Spatial arbeidsminnet ble vurdert i Ap-injisert mus via vekslinger i Y-labyrint test. Sekvensen av arm valg og det totale antallet arm er ført opp mens hver mus fikk lov til å utforske fritt labyrinten. Jo mer intakt kognitiv evne, bør mer musen har en tendens til å gå inn i mindre besøkte nylig arm, alternating sin arm valg. Ap-injiserte mus gruppen viste betydelig lavere veksling priser, noe som indikerer utvikling av kognitive mangler (figur 4).
Figur 2. Eksempler på ICV injeksjoner (A) Illustrasjon av hjernen seksjoner i koronale retning som representerer plasseringen av bregma 10 og akseptabel injeksjonsområde (-1,0 ± 0,06 mm fra bregma og 1,8 ± 0,1 mm sagittally). (B - C) et tilfelle av vellykket ICV injeksjon (B: grunnriss av hele hjernen, C: koronale snitt som viser laterale ventrikler fylt med blått fargestoff); (D - E) et tilfelle av mislykket ICV injeksjon (D: ovenfra hele hjernen, E: koronale delen viser den tredje og fjerde ventricles fylt med blå farge) Blå sirkel og pil: injiserte området, Blue star. potensial injeksjonspunktet Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 3. Bekreftelse på utarbeidet en beta arter via SDS-PAGE. Ap-peptider ble separert ved SDS-PAGE med foto-indusert kryssbinding av umodifiserte proteiner. Peptid bånd ble visualisert ved hjelp av sølvfarging; lane (A) protein markør kjørefelt (B) Ap monomer (før inkubasjon), og lane (C) ruges Ap-arter. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 4. Y-labyrint atferdstester. Prosent vekslingen av Aβ- eller kjøretøy-injisert mus grupper på Y-labyrint test. Hvitt faststoff diagram: kjøretøy (Ap (-), n = 10). Stripet diagram: Ap-injiserte (Ap (+), n = 9). Statistiske analyser ble utført med enveis ANOVA etterfulgt av Bonferroni post-hoc-sammenligninger (* P <0,05, ** p <0.01, *** p <0,001). Feilstolpene representerer SEM. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Det viktigste i denne protokollen er ICV injeksjon av Ap. Denne protokollen er utformet for å injisere Ap inn i ICV region av mus uten stereotaktiske instrumenter 11,12. Før et eksperiment, må en innledende periode med praksis injeksjoner med et blått farvestoff i stedet for Ap finne sted for å oppnå tilstrekkelig bevegelighet. Umiddelbart etter injeksjonen, er det nødvendig å kontrollere om pigmentet injeksjonen ble utført riktig. Forsiktig ta ut hjernen og sjekke om den aktuelle regionen ble farget blå. Den pigmenterte linje skal komme til, men ikke overstige dybden av ICV regionen. Et minimum på 90% suksessrate, noe som vanligvis oppnås etter 50 eller flere ICV injeksjoner, er foreslått. Under ICV injeksjon, unngå skader på blodkar ved å injisere det sagittale sinus (nær til bregma nullpunktet).
Etter Ap injeksjon, statistisk signifikant svekket hukommelse var observered mellom den Ap-injiserte gruppen og kontrollgruppen ved hjelp av Y-labyrint adferdstester. Forskjellige typer av atferdsmessige eksperimenter kan brukes for å teste graden av kognitiv svikt, for eksempel Morris vannlabyrint 13, objektgjenkjenning, og passive unngåelses tester samt frykt kondisjonering. Morris vannlabyrint anvendes for å undersøke hippocampus romlig hukommelsessvikt, mens frykt anlegget brukes til å teste hippocampus-avhengig assosiativ læring og amygdala-hippocampus kommunikasjon. Gjenstand gjenkjennelse av en spesiell gjenstand er egnet til måling av AD relatert kognitiv svekkelse, og passiv unngåelse kan brukes til å teste et dyrs evne til å huske motvilje-stimulus 3. Det er viktig å fremstille mus av samme vekt og alder hvis de vil bli utsatt for adferdstester som benytter elektrisk støt, som frykt kondisjonering og passive unngåelses tester. Det anbefales at de nevnte prøver skal utføresinnen 10 dager etter utbruddet av hukommelsessvikt. Siden det er bekreftet at Ap er funnet i hippocampus post-ICV injeksjon 14, er ytterligere undersøkelser garantert å finne atferdsmessige tester som involverer andre områder av hjernen med affinitet ICV-injisert Ap.
Utarbeidelsen av Ap-peptider og tidspunktet for ICV injeksjon bør nøye utformet avhengig av den eksperimentelle formål, og bør omfatte vurdering av: (1) arter av Ap (monomerer, oligomerer, fibriller, eller en blanding); (2) isoformen av Ap (Aβ40, Aβ42, avkortet Aβ25-35, og andre) 15-18; (3) tids interessante Ap injeksjon; og (4) den forsinkelsestid etter at Ap eksponering. For eksempel anbefales injeksjon av Ap-monomerer hvis mus vil bli utsatt for administrering av legemidler som hemmer unormal aktivitet av Ap-monomerer, slik som aggregering. Injeksjon av løselig Ap-oligomerer er suggested hvis Studien tar sikte på å vurdere nevrotoksisitet eller betennelse indusert av oligomerer. Injeksjon av høyt aggregerte Ap-arter anbefales hvis etterforskningen skal studere uløselig Ap og relatert patologi 7,19. Hvis et eksperiment som mål å teste styrken av Ap-hemmere, bør det sammensatte generelt påføres før, eller sammen med, Ap, mens Ap-clearing agenter eller anti-inflammatoriske stoffer bør administreres etter Ap injeksjon.
Sammenlignet med transgen eller kroniske modeller av AD, gjør det mulig for Ap-injiserte mus modell forskere for å kontrollere konsentrasjonen av Ap, utbruddet av AD-lignende fenotyper, og den samtidige utvikling av et stort antall demente mus. Disse fordelene gir frihet med hensyn til eksperimentell design og et bredt spekter av muligheter for forskere. Vurderer patogenesen av AD tettere knyttet til kronisk eksponering heller enn en plutselig bølge i A &# 946; konsentrasjon i hjernen, blir ytterligere forsøk under anvendelse av transgene modeller anbefales å styrke konklusjonene utledet fra å benytte Ap-injiserte musemodeller. I tillegg, siden den tau-protein er en annen viktig årsak til AD, utvikling av tau og Ap-injeksjon muse-modeller kan ytterligere å fremme AD Research Society.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Acknowledgments
Denne forskningen ble støttet av en bevilgning av Korea Health Technology R & D-prosjektet gjennom Korea Health Industry Development Institute (KHIDI), finansiert av Helsedepartementet og velferd, Republikken Korea (tilskudd nummer: H14C04660000).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| ICR mouse | Orientbio | male, 6-8 weeks, 27-29 g of body weight | |
| C57BL/6 mouse | Orientbio | male, 6-8 weeks, 21-23 g of body weight | |
| Amyloid-beta1-42 | in house synthesis | stock concentration: 1 mM/DMSO, injected concentration: 100 μM/10% DMSO and 90% PBS | |
| ICV injection syringe (26s gauge) | Hamilton | 80308 | |
| Evans blue dye (EBD) | abcamBIochemicals | ab120869 | 1% EBD in PBS |
| DMSO | Sigma | D2650 | |
| PBS | gibco | 10010-023 | |
| Gradi-GelTM II Gradient PAGE Analysis Kit | ELPiS Biotech | EBS-1056 | 15% Gel |
| Precision Plus ProteinTM Dual Xtra Standards | Bio-Rad | 161-0377 | |
| Silver-Staining Kit | GE-Healthcare | 17-1150-01 | |
| LabDiet | Orientbio | 5053 |
References
- Kam, T. I., Gwon, Y., Jung, Y. K. Amyloid beta receptors responsible for neurotoxicity and cellular defects in Alzheimer's disease. Cell Mol Life Sci. 71, 4803-4813 (2014).
- Elder, G. A., Gama Sosa, M. A., De Gasperi, R. Transgenic mouse models of Alzheimer's disease. Mt Sinai J Med. 77, 69-81 (2010).
- Bryan, K. J., Lee, H., Perry, G., Smith, M. A., Casadesus, G. Methods of Behavior Analysis in Neuroscience Frontiers in Neuroscience. Buccafusco, J. J. , (2009).
- Van Dam, D., De Deyn, P. P. Animal models in the drug discovery pipeline for Alzheimer's disease. Br J Pharmacol. 164, 1285-1300 (2011).
- Choi, J. W., Kim, H. Y., Jeon, M., Kim, D. J., Kim, Y. Efficient access to highly pure beta-amyloid peptide by optimized solid-phase synthesis. Amyloid. 19, 133-137 (2012).
- Rahimi, F., Maiti, P., Bitan, G. Photo-induced cross-linking of unmodified proteins (PICUP) applied to amyloidogenic peptides. J Vis Exp. , (2009).
- Kim, H. V., et al. Amelioration of Alzheimer's disease by neuroprotective effect of sulforaphane in animal model. Amyloid. 20, 7-12 (2013).
- Jackson, L. L. VTE on an elevated T-maze. J Comp Psychol. 36, 9 (1943).
- Kim, H. Y., et al. Taurine in drinking water recovers learning and memory in the adult APP/PS1 mouse model of Alzheimer's disease. Sci Rep. 4, 7467 (2014).
- Paxinos, G., Franklin, B. J. The Mouse Brain in Stereotaxic Coordinates. 2nd edn. , Academic Press. (2001).
- Ledo, J. H., et al. Amyloid-beta oligomers link depressive-like behavior and cognitive deficits in mice. Mol Psychiatry. 18, 1053-1054 (2013).
- Laursen, S. E., Belknap, J. K. Intracerebroventricular injections in mice. Some methodological refinements. J Pharmacol Methods. 16, 355-357 (1986).
- Bromley-Brits, K., Deng, Y., Song, W. Morris water maze test for learning and memory deficits in Alzheimer's disease model mice. J Vis Exp. , (2011).
- Figueiredo, C. P., et al. Memantine rescues transient cognitive impairment caused by high-molecular-weight abeta oligomers but not the persistent impairment induced by low-molecular-weight oligomers. J Neurosci. 33, 9626-9634 (2013).
- Haley, T. J., McCormick, W. G. Pharmacological effects produced by intracerebral injection of drugs in the conscious mouse. Br J Pharmacol Chemother. 12, 12-15 (1957).
- Harkany, T., et al. Neuroprotective approaches in experimental models of beta-amyloid neurotoxicity: relevance to Alzheimer's disease. Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry. 23, 963-1008 (1999).
- Wang, D., et al. The allosteric potentiation of nicotinic acetylcholine receptors by galantamine ameliorates the cognitive dysfunction in beta amyloid25-35 i.c.v.-injected mice: involvement of dopaminergic systems. Neuropsychopharmacology. 32, 1261-1271 (2007).
- Yamada, K., Nabeshima, T. Animal models of Alzheimer's disease and evaluation of anti-dementia drugs. Pharmacol Ther. 88, 93-113 (2000).
- Cho, S. M., et al. Correlations of amyloid-beta concentrations between CSF and plasma in acute Alzheimer mouse model. Sci Rep. 4, 6777 (2014).
