Summary
Амилоида-β (Ар) -injected животная модель делает возможным введение определенного количества и видов A & beta фрагментов и уменьшает индивидуальные различия внутри каждой исследуемой группе. Этот протокол описывает интрацеребровентрикулярное (ICV) инъекции А без стереотаксической инструментов, что позволяет производство болезни Альцгеймера-подобных поведенческих нарушений у нормальных мышей.
Introduction
Учитывая, что амилоид-бета (Ар) является патологическим признаком болезни Альцгеймера (AD), разработка моделей AD животных была сосредоточена на нервной оверэкспрессии A & beta. Поскольку мутации в амилоидного белка - предшественника (АРР) или пресенилина (PS) приводят к нарушению равновесия Ар и в конечном счете к патогенез семейной AD 1, мышиные модели с участием APP или PS мутации гена были общепринятыми. Среди широкого спектра трансгенных мышей, прототипами мышиные модели включают в себя следующее: TG2576, PDAPP, APP / PS1 и APP23. В головном мозге у таких мышей обычно имеют агрегации и Ар в конечном итоге старческих бляшек; формирование бляшек сопровождается значительным когнитивных нарушений, таких, что они показывают низкую эффективность в поведенческих тестах обучения и памяти. Поколение с использованием трансгенных мышей, которые естественным образом имитировать патологии человека AD, таким образом, способствовал исследованию AD общества, что позволяет нам контролировать прогрессирование диСиз. Тем не менее, с использованием трансгенных мышей , неэкономично и требует много времени , поскольку она занимает месяцы для мышей развивать A & beta ; бляшками и даже больше , чтобы показать , Ар-индуцированной Synaptic или поведенческие отклонения 2,3. Первоначально разработан как альтернатива для преодоления недостатков трансгенных мышиных моделей, нетрансгенные модели также широко используются из-за их различных преимуществ. Модели патоген-индуцированной AD может быть получен путем прямой инъекции A & beta; в мозг, в то время как AD-как когнитивные нарушения также могут быть вызваны другими химическими и физическими средствами, такими как инъекции нейротоксических соединений, таких как скополамин, индукции очагов поражения в познании , связанных с таких областях, как гиппокамп, либо коркового повреждения 4. Тем не менее, не патогенны индукция когнитивных нарушений не точно отражает фундаментальную патофизиологии нашей эры; вместо этого, он имитирует только его симптоматические результаты. В отличие от этого, модель А. Д. патоген-индуцированной, А46; -injected модель мыши, может не только показать AD-подобные поведенческие отклонения, но также может демонстрировать, Ар патологию общий признак разделяемое семейного и спорадического нашей эры.
Несмотря на трудности, чтобы визуализировать Ар бляшек в тканях мозга, самое большое преимущество Ар-впрыскивается модель, которая делает его привлекательным для исследования АД является его управляемость. Исследователи могут отсеять индивидуальные различия в моделях мыши, которые могут привести к ошибочным данным в исследованиях, связанных с наркотиками. Своевременное медикаментозное лечение включается в зависимости от механизма кандидата препарата; разработать, ингибитор агрегации Ар может быть применен до инъекции А. Кроме того, исследователи могут предположить, что патогенный преобразование, которое возникает после того, как Ар инъекции происходит от воздействия, так как Ар другие факторы, жестко контролируются, в том числе индивидуальные различия.
В этом протоколе, яркое описание часоввл индуцировать AD-подобный фенотип у нормальных мышей через A & beta; интрацеребровентрикул (ICV) инъекции без стереотаксической инструментов представлена. Сведение к минимуму вносимые спровоцированного повреждения ткани мозга имеет важное значение для предотвращения возможности структурного повреждения и поражения индуцированных воспалением. Отсутствие навыка в обращении мыши приводит к неожиданным нейроповреждения. Кроме того, методы, обеспечивающие соответствующий угол и глубину, чтобы достичь в процессе инъекции, особенно важны для обхода частых ошибок. В дополнение к детальным, яркое объяснение инъекции ICV, надежность модели, рассчитанной по следующим протоколом также может быть проиллюстрирована в следующих разделах. Следующий протокол может быть надежным и легко понять инструмент, который вносит свой вклад в исследования AD, тем самым обеспечивая ступенькой, что в конечном счете может привести к значимому открытию для AD общества.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Все эксперименты на животных проводились в соответствии с национальными институтами здравоохранения Руководство по уходу и использованию лабораторных животных (NIH публикации N 8023, пересмотренный 1978), а также с животными по уходу и использованию комитета Institutional животных по уходу и использованию комитета KIST (Сеул, Корея).
1. Подготовка животных
- Подготовьте группу 7-недельных самцов мышей ICR (или C57BL / 6).
- Пусть мыши пройти через процесс акклиматизации в течение 3-7 дней после транспортировки, чтобы восстановить гомеостаз. В общем, поместить группу 4-5 мышей в каждой клетке и поддерживать их при температуре 22-23 ° C и 40% влажности, с 12/12 ч цикле свет / темнота. Обеспечение водой и продуктами питания в неограниченном количестве .
Примечание: Процесс акклиматизации имеет решающее значение для обеспечения восстановления от стресса судоходства и адаптации к новым жильем, продовольствием, водой, и запах, а также новую клетку и световой цикл. В этом эксперименте мышей были размещены в индивидуальном Вентилируемые Клеток (ВАХ), расположенный в SpeВозбудитель специфичны Free (SPF) -grade объект - Взвешивание каждой мыши и исключить предметы, вес которых отклоняется на ± 10% от среднего значения.
- Разделите предметы на две группы: на транспортном средстве вводили группу (A (-)) и A & beta; инъецированных группа (A & beta; (+)). Если эксперимент для проверки эффективности конкретного кандидата наркотиков, разделить мышей на четыре группы: (1) A (-) / лекарственное средство (-), (2) A (-) / лекарственное средство (+), (3) A & beta; (+) / лекарство (-), и (4) A & beta; (+) / лекарство (+).
2. Пептид A & beta; Получение
- Treat пептиды A & beta ; , полученные путем химического синтеза 5 или из коммерческих источников, с предварительно охлажденным 1,1,1,3,3,3-гексафтор-2-пропанол (HFIP) растворять любые агрегаты и сделать пептиды гомогенные 6 ,
- Разрушать ультразвуком решение A & beta; / ГФИП в водяной бане ультразвуковом в течение 5 мин (при комнатной температуре), осторожно вихре, и инкубировать раствор в течение 30 мин при комнатной температуре. Удалите ГФИС полностью за счет испарения с азотоми не хранить гомогенного A & beta при -80 ° С до использования.
- Готовят мономеры A & beta; (. 100 мкМ Ар, 10% ДМСО, 90% PBS), делают 1 мМ A & beta; диметилсульфоксид (ДМСО), и запас разбавить его в 10 раз в фосфатном буферном растворе (PBS)
- Подготовка A & beta; олигомеры.
- Выдержите раствор мономера A (содержащий A & beta (1-42) или A (1-40)) (этап 2.2.) При 37 ° С в течение 3 или 7 дней, соответственно.
- Поместите раствор Ар в запаянной трубке в молнии мешок, содержащий влажное бумажное полотенце, чтобы обеспечить во влажной среде, чтобы предотвратить испарение воды в течение инкубационного периода.
- Подтвердить подготовленные олигомеров A & beta ; посредством электрофореза в додецилсульфата натрия сульфат-полиакриламидном геле (SDS-PAGE) с фотоинициированного сшиванию немодифицированных белков 6.
- Подготовка контрольного раствора PBS, содержащего 10% ДМСО для инъекций транспортного средства ICV.
3. Шприц Подготовка
Примечание: Сжатие Parafilm приведет к глубине, превышающей 3,6 инъекции мм вентрально. Для того, чтобы предотвратить парафином от сжатия во время ввода иглы, плотно завернуть иглу несколько раз.
4. Ар-впрыскивается мышь Модель Приготовление
Примечание: Очистите операционное поле с дезинфицирующим средством для поддержания стерильных условий и стерилизации всех хирургических инструментов для ICV инъекции с использованием 70% этанола и УФ-облучения.
- Обезболить мыши путем внутрибрюшинной инъекции смеси ксилазином (20 мг / кг) и tiletamine & bull; HCl / zolazepam & bull; HCl (80 мг / кг) до инъекции ICV. Поместите курсор на теплый коврик для поддержания ее температуры тела в то время как под наркозом и подтвердить адекватную анестезию путем оценки ответа футов пинч.
- Применить стерильный PBS , капли в оба глаза , чтобы предотвратить сухость роговицы во время процедуры (Фиг.1В).
- Подготовьте два зеркала, нарисовав несколько прямых вертикальных линий на их поверхности в случае difficuLTY инъекционного шприца перпендикулярно.
- Поместите одно зеркало (M1) в непосредственной близости от тела мыши, а другой (M2) в передней части головы. Keep M1 параллельно воображаемой средней линии между двумя глазами мыши и расположить M2 перпендикулярно M1, так что обе плоскости образуют угол 90 ° (фиг.1С). Поместите M1 на левой стороне мыши, если исследователь является правой рукой. Поместите M1 на правой стороне мыши, если исследователь левша.
- Спрей 70% этанола на середину лба мыши и протереть сухим ватным тампоном. Не мокрой слишком большой площади лба, чтобы избежать снижения температуры тела из-за испарения спирта.
- Протрите ту же область на лбу с 2% -ным раствором хлоргексидина, используя чистую ватные тампоны. Повторные scrubbings спиртом и хлоргексидина для общей сложности три раза каждый.
Примечание: При необходимости, бреют волосы на лбу мыши для того, чтобы свести к минимуму возность загрязнения - Найдите брегмы.
- Используя большой и указательный палец, плотно удерживая кожу лба, прямо над двумя глазами в той степени, что оба глаза торчат. Перетащите кожу назад, чтобы сделать лоб тугой и свести к минимуму движения черепа под кожей.
- Форма невидимый треугольник, назначив три вершины: два глаза мыши и точки, где большой и указательный палец встречаются, брегма. (Цифры 1B, Красная стрелка: брегма)
- Найдите точку впрыска с рулеткой: -1,0 ± 0,06 мм кзади от темени, 1,8 ± 0,1 мм сбоку от стреловидного шва и 2,4 мм в глубину (рис 1D, голубых звезд: точек впрыска в каждом полушарии). (Для мышей В6: -0,9 мм задние, боковые 1,7 мм и 2,2 мм в глубину)
- Наполните шприц 10 мкл раствора или транспортного средства Ар с избытком раствора, с тем, чтобы избежать случайного нагнетания воздуха.
- Поместите шприц в готочка е инъекции (описанный в протоколе 4.7). Сделать шприц перпендикулярно к плоскости точки инжекции. Align отражение изображения шприца в обоих зеркал с нарисованными линиями на зеркалах с фиксированной точки (рис 1C).
- Начинают введение иглы до тех пор, парафильмом обертывание не достигает кожи.
- Держите руки держа шприц устойчивый и использовать другую руку, чтобы ввести 5 мкл раствора Ар или транспортного средства, медленно, в течение 5 сек, без паузы. Убедитесь, что шприц остается перпендикулярным повсюду. После завершения инъекции, подождите 3 до 5 секунд перед снятием шприца для диффузии.
- Если предположить, что исходное положение треугольника, оказывают умеренное давление, чтобы защитить череп от любых ненужных движений. Удалите шприц без наклона.
- Поместите Ар-впрыскивается мышь на теплую площадку для восстановления и поддержания его грудины лежачее. Не оставляйте без присмотра мышь, пока он не приходит в сознание и не возвращают мOuse к клетке, содержащей нехирургических мышей до тех пор, пока полностью восстановилась.
- Промойте шприц в соответствии с этапами 3,3-3,6.
- Послеоперационно контролировать подвижность мышей и проверить наличие каких-либо признаков инфекции или болезни у мышей в течение 5-7 дней.
Рисунок 1. A & beta ; Инъекции в область ICV (A) парафильмом обернутая игла шприца по сравнению с неизмененной иглой шприца. (B) PBS падает на глаза , чтобы предотвратить сухость; треугольник, образованный на лбу мыши с большим пальцем, указательный палец, а два глаза мыши, а также мнимое по средней линии на равном расстоянии от каждого глаза; (C) два зеркала (M1 и M2) с несколькими вертикальными линиями , проходящими на поверхности , чтобы помочь перпендикулярна инъекции иглы шприца; (D) треугольник с точками впрыска, Indicованные, как голубые звезды (-1,0 ± 0,06 мм от темени и 1,8 ± 0,1 мм сагиттальной) на каждом полушарии мыши; Зеленая стрелка: парафильмом, Красная стрелка: брегма Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.
5. Подтверждение Ар инъекций по Y-лабиринте и мозга Анализы
- Оценить рабочую память A & beta-мышей , инъецированных с помощью тестов Y-лабиринте 3,7,8
- Подождите, через 3 дня после инъекции для возникновения дефицита памяти.
- Выполните тесты Y-образном лабиринте с помощью черной пластиковой лабиринт с тремя одинаковыми руками меченый А, В, и С, каждый из которых разветвляется на 120 ° углом от центра лабиринта (ширина х длина х высота 10 см х 40 см х 12 см).
- Поместите курсор в начале руки (рука A) и позволяют субъект свободно исследовать лабиринт в течение 8 минут.
- Измерьте количество записей в каждой руке и вычислить чередующеесяСкорость данию каждого субъекта 3,9.
- Непосредственно исследовать посмертных мозги, чтобы проверить, если инъекции ориентирована на ICV регион соответствующим образом.
- Обезболить мышью по той же методике, как описано в разделе 4.1. Затем жертву мышь путем смещения шейных позвонков.
- Обезглавьте мыши и снимите кожу, чтобы подвергать черепа с помощью хирургических ножниц. Удалить ткани и мышцы от черепа.
- Сделайте надрезы на ламбдовидного швом (между теменной и interparietal костей) без повреждения мозга. Удалить затылочной и interparietal кости, затем теменной и лобной кости. Удалите черепную кость с помощью пинцета и изолировать мозг от черепа, подняв мозговых оболочек.
- Промыть мозг в охлажденном стерильного физиологического раствора и сократить ICV область мозга в корональной направлении с хирургическим ножом (Рисунок 2).
- Подтвердите области инжекции, основанный на след вставки иглу наткани мозга (рисунок 2). Проверьте, если игла след достигла одного из желудочков. Если игла след не отвечает или проходят через желудочки, исключить данные этого субъекта из анализа результатов эксперимента.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
В этом разделе представлены примеры результатов, которые могут быть получены путем подтверждения агрегации и оценки Ар Y-лабиринте дефицита памяти. Используя всю длину Ар был произведен (1-42) пептид из 42 аминокислот, смеси мономеров A & beta ; , олигомеров и фибрилл (рисунок 3). Через HFIP-индуцированной стадии одномеризации, были получены относительно однородные мономеры (полоса В). После 7 дней инкубации, различные размеры агрегатов A (Lane C) разработана. Тримеры и тетрамеры были доминирующими видами среди олигомерных форм A & beta. Пространственная рабочая память была оценена в A & beta; инъецированных мышей с помощью чередований в тесте Y-лабиринте. Последовательность выбора рычага и количество Всего записей руки были записаны в то время как каждая мышь может свободно исследовать лабиринт. Чем больше неповрежденными когнитивные способности, тем больше мышь должна иметь тенденцию входить в менее недавно посетил руку, Alternating свой выбор руки. Ар-впрыскивается группа мышей показали значительно более низкие показатели чередование, что указывает на развитие когнитивных нарушений (Рисунок 4).
Рисунок 2. Примеры ICV инъекций (A) Иллюстрация срезов мозга в корональной направлении , представляющих расположение темени 10 и приемлемого диапазона впрыска (-1,0 ± 0,06 мм от темени и 1,8 ± 0,1 мм сагиттальной). (B - C) случай успешной инъекции ICV (B: вид сверху всего мозга, C: корональных разрез , показывающий боковые желудочки , заполненные с синим красителем); (D - E) случай неудачной инъекции ICV (D: вид сверху всего мозга, E: корональных разрез , показывающий третий и четвертый веntricles заполненные синим красителем) Голубой круг и стрелка: впрыскивается сайт, Blue Star:. потенциальная точка впрыска Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.
Рисунок 3. Подтверждение подготовили бета видов с помощью SDS-PAGE. A & beta ; пептиды разделяли с помощью SDS-PAGE с фотоинициированного сшиванию немодифицированных белков. Пептидные полосы визуализировали путем окрашивания серебром; полоса (А) маркерный белок, полоса (B) A & beta ; мономер (до инкубации), и инкубированные вида A & beta ; полоса (С). Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.
Рисунок 4. Y-лабиринтов поведенческие тесты. Процент Чередование Aβ- или транспортное средство вводили мышам-группы по испытанию на Y-лабиринте. Белый твердый график: транспортное средство (A & beta; (-), п = 10). Чередующиеся график: A & beta; впрыском (A & beta; (+), п = 9). Статистический анализ проводили с односторонним ANOVA с последующим апостериорных сравнений Бонферрони (* Р <0,05, ** Р <0,01, *** р <0,001). Столбики ошибок представляют SemS. Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Наиболее важным шагом в этом протоколе является ICV инъекция A & beta. Этот протокол предназначен для введения A & beta в ICV области мышей без стереотаксической инструментов 11,12. Перед началом эксперимента, предварительный период практики инъекций с синим красителем вместо A & beta; должно иметь место для достижения достаточной ловкости. Сразу после инъекции агента, необходимо, чтобы проверить, был ли инъекции пигмента выполнены должным образом. Осторожно вынуть мозг и проверить, была ли соответствующая область окрашена синим цветом. Пигментированные линия должна доходить до, но не должно превышать, глубину ICV региона. Минимум скорости успех 90%, что обычно достигается после того, как 50 или более ICV инъекций, предлагается. Во время инъекции ICV, во избежание повреждения кровеносных сосудов путем введения сагиттального синуса (близко к темени нулевой точки).
После инъекции Ар, статистически значимое ухудшение памяти было наблюдатьd между A & beta; впрыском группы и контрольной группы, получавшей Y-лабиринте поведенческие тесты. Различные типы поведенческих экспериментов могут быть применены , чтобы проверить степень когнитивных нарушений, таких , как вода Моррис лабиринте 13, распознавания объектов, а также пассивные тесты избегания, а также страха кондиционирования. Водный лабиринт Морриса используется для изучения гиппокампа пространственные нарушения памяти, в то время как страх кондиционирования используется для тестирования гиппокампа-зависимой ассоциативного обучения и миндалины-гиппокампа связь. Распознавание объектов одного конкретного объекта подходит для измерения АД , связанных с когнитивными нарушениями, а также пассивного избегания может быть использован для проверки способности животного вспомнить отвращающей стимул 3. Важно, чтобы подготовить мышей аналогичного веса и возраста, если они будут подвергнуты поведенческих тестов с использованием поражения электрическим током, такие как страх кондиционирования и пассивных тестов уклонения. Рекомендуется, чтобы вышеупомянутые тесты должны быть выполненыв течение 10 дней с момента появления дефицита памяти. Так как было подтверждено , что Ар встречается в гиппокампе после ICV инъекции 14, дальнейшие исследования являются оправданными , чтобы найти поведенческие тесты с участием других областей мозга с сродства ICV-закачиваемой А.
Получение пептидов A & beta; и выбор времени инъекции ICV должны быть тщательно разработаны в зависимости от экспериментальных целей, и должны включать в себя рассмотрение: (1) Разновидности A & beta; (мономеры, олигомеры, фибриллы, или смесь); (2) изоформы A & beta ; (Aβ40, усеченной, А 42 Aβ25-35 и другие) 15-18; (3) временные точки Ар инъекции; и (4) время запаздывания после облучения Ар. Например, инъекции А мономеров рекомендуется, если у мышей будут подвергнуты введение лекарственных средств, которые ингибируют ненормальных деятельность A & beta; мономеров, таких, как агрегирование. Инъекции растворимых олигомеров A & beta; suggested, если исследование направлено на оценку нейротоксичность или воспаление, вызванное олигомеров. Инъекция высоко агрегированных видов A & beta ; рекомендуется , если исследование направлено на изучение нерастворимого A & beta и связанной с ними патологии 7,19. Если эксперимент направлен на тест потенции ингибиторов агрегации A & beta;, соединение, как правило, должны быть применены до того, или вместе с, в A & beta;, в то время как A & beta;-клиринговые агенты или противовоспалительные соединения должны быть введены после инъекции Ар.
По сравнению с трансгенными или хронических моделей нашей эры, Ар-впрыскивается модель мыши позволяет исследователям контролировать концентрацию A & beta;, начало AD-подобных фенотипов, а также одновременное развитие большого количества сумасшедших мышей. Эти преимущества обеспечивают свободу в отношении экспериментального проектирования и широкий спектр возможностей для исследователей. Учитывая патогенез АД более тесно связан с хроническим воздействием, а не внезапный всплеск A &# 946; концентрация в головном мозге, дополнительные эксперименты с использованием трансгенных моделей рекомендуется усилить выводы, полученные от использования A & beta-инъекционные модели мыши. Кроме того, поскольку тау-белок является еще одной важной причиной нашей эры, развитие тау и A & beta моделей инъекции мышей может дополнительно продвинуть исследований AD общество.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Acknowledgments
Это исследование было поддержано грантом Кореи медицинских технологий R & D проекта через Институт Корея Индустрия здоровья развития (Хиди), финансируемого Министерством здравоохранения и социального обеспечения, Республики Корея (номер гранта: H14C04660000).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| ICR mouse | Orientbio | male, 6-8 weeks, 27-29 g of body weight | |
| C57BL/6 mouse | Orientbio | male, 6-8 weeks, 21-23 g of body weight | |
| Amyloid-beta1-42 | in house synthesis | stock concentration: 1 mM/DMSO, injected concentration: 100 μM/10% DMSO and 90% PBS | |
| ICV injection syringe (26s gauge) | Hamilton | 80308 | |
| Evans blue dye (EBD) | abcamBIochemicals | ab120869 | 1% EBD in PBS |
| DMSO | Sigma | D2650 | |
| PBS | gibco | 10010-023 | |
| Gradi-GelTM II Gradient PAGE Analysis Kit | ELPiS Biotech | EBS-1056 | 15% Gel |
| Precision Plus ProteinTM Dual Xtra Standards | Bio-Rad | 161-0377 | |
| Silver-Staining Kit | GE-Healthcare | 17-1150-01 | |
| LabDiet | Orientbio | 5053 |
References
- Kam, T. I., Gwon, Y., Jung, Y. K. Amyloid beta receptors responsible for neurotoxicity and cellular defects in Alzheimer's disease. Cell Mol Life Sci. 71, 4803-4813 (2014).
- Elder, G. A., Gama Sosa, M. A., De Gasperi, R. Transgenic mouse models of Alzheimer's disease. Mt Sinai J Med. 77, 69-81 (2010).
- Bryan, K. J., Lee, H., Perry, G., Smith, M. A., Casadesus, G. Methods of Behavior Analysis in Neuroscience Frontiers in Neuroscience. Buccafusco, J. J. , (2009).
- Van Dam, D., De Deyn, P. P. Animal models in the drug discovery pipeline for Alzheimer's disease. Br J Pharmacol. 164, 1285-1300 (2011).
- Choi, J. W., Kim, H. Y., Jeon, M., Kim, D. J., Kim, Y. Efficient access to highly pure beta-amyloid peptide by optimized solid-phase synthesis. Amyloid. 19, 133-137 (2012).
- Rahimi, F., Maiti, P., Bitan, G. Photo-induced cross-linking of unmodified proteins (PICUP) applied to amyloidogenic peptides. J Vis Exp. , (2009).
- Kim, H. V., et al. Amelioration of Alzheimer's disease by neuroprotective effect of sulforaphane in animal model. Amyloid. 20, 7-12 (2013).
- Jackson, L. L. VTE on an elevated T-maze. J Comp Psychol. 36, 9 (1943).
- Kim, H. Y., et al. Taurine in drinking water recovers learning and memory in the adult APP/PS1 mouse model of Alzheimer's disease. Sci Rep. 4, 7467 (2014).
- Paxinos, G., Franklin, B. J. The Mouse Brain in Stereotaxic Coordinates. 2nd edn. , Academic Press. (2001).
- Ledo, J. H., et al. Amyloid-beta oligomers link depressive-like behavior and cognitive deficits in mice. Mol Psychiatry. 18, 1053-1054 (2013).
- Laursen, S. E., Belknap, J. K. Intracerebroventricular injections in mice. Some methodological refinements. J Pharmacol Methods. 16, 355-357 (1986).
- Bromley-Brits, K., Deng, Y., Song, W. Morris water maze test for learning and memory deficits in Alzheimer's disease model mice. J Vis Exp. , (2011).
- Figueiredo, C. P., et al. Memantine rescues transient cognitive impairment caused by high-molecular-weight abeta oligomers but not the persistent impairment induced by low-molecular-weight oligomers. J Neurosci. 33, 9626-9634 (2013).
- Haley, T. J., McCormick, W. G. Pharmacological effects produced by intracerebral injection of drugs in the conscious mouse. Br J Pharmacol Chemother. 12, 12-15 (1957).
- Harkany, T., et al. Neuroprotective approaches in experimental models of beta-amyloid neurotoxicity: relevance to Alzheimer's disease. Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry. 23, 963-1008 (1999).
- Wang, D., et al. The allosteric potentiation of nicotinic acetylcholine receptors by galantamine ameliorates the cognitive dysfunction in beta amyloid25-35 i.c.v.-injected mice: involvement of dopaminergic systems. Neuropsychopharmacology. 32, 1261-1271 (2007).
- Yamada, K., Nabeshima, T. Animal models of Alzheimer's disease and evaluation of anti-dementia drugs. Pharmacol Ther. 88, 93-113 (2000).
- Cho, S. M., et al. Correlations of amyloid-beta concentrations between CSF and plasma in acute Alzheimer mouse model. Sci Rep. 4, 6777 (2014).
