Summary
Amyloid-β (A-beta) -inmatade djurmodell möjliggör administration av en definierad kvantitet och arter av Ap-fragment och minskar individuella skillnader inom varje studiegrupp. Detta protokoll beskriver intracerebroventrikulära (ICV) injektion av Ap utan stereotaktiska instrument, vilket möjliggör produktion av Alzheimer-liknande beteendeavvikelser i normala möss.
Introduction
Med tanke på att amyloid-β (A-beta) är ett patologiskt kännetecken för Alzheimers sjukdom (AD), har utvecklingen av AD djurmodeller fokuserat på neural överuttryck av Ap. Eftersom mutationer i amyloidprekursorprotein (APP) eller presenilin (PS) leda till störningar i Ap jämvikt och slutligen till patogenesen av familjär AD 1, musmodeller involverar APP eller PS genmutationer har varit allmänt accepterat. Bland det stora utbudet av transgena möss, proto musmodeller innefattar följande: TG2576, PDApp, APP / PS1 och APP23. I hjärnan dessa möss uppvisar generellt Ap-aggregation och slutligen senila plack; plackbildning följs av betydande kognitiv nedsättning så att de visar dåliga resultat i beteendetester för inlärning och minne. Genereringen av att använda transgena möss som naturligt efterliknar människo AD patologi har därmed bidragit till AD forskarsamhället genom att tillåta oss att övervaka utvecklingen av dikärlsjukdomar. Men med hjälp av transgena möss är oekonomiskt och tidskrävande eftersom det tar månader för möss att utveckla Ap plack och ännu längre tid att visa Ap-inducerad synaptisk eller beteendeavvikelser 2,3. Ursprungligen utvecklats som ett alternativ för att övervinna bristerna i transgena musmodeller, är icke-transgena modeller används också ofta på grund av deras distinkta fördelar. Patogenfria inducerad AD-modeller kan framställas genom direkt injektion av A-beta in i hjärnan, medan AD-liknande kognitiva brister också kan utlösas av andra kemiska och fysiska medel-såsom injektion av neurotoxiska föreningar såsom skopolamin, induktionen av lesioner i kognitionsrelaterade områden såsom hippocampus, eller genom kortikal skada 4. Men den icke-patogena induktion av kognitiv svikt inte alltid motsvarar den grundläggande patofysiologi AD; istället, bara härmar det de symptomatiska resultat. I motsats till en patogen-inducerad AD-modellen, A46; -inmatade musmodell, kan inte bara visa AD-liknande beteendeavvikelser, men kan också uppvisa Ap patologi, den gemensamma nämnaren delas av familjär och sporadisk AD.
Trots att det är svårt att visualisera Ap plack i hjärnvävnaden, är den största fördelen med Ap-injicerade modell som gör det attraktivt för AD undersökning sin styrbarhet. Forskare kan sålla bort de individuella skillnaderna i musmodeller som kan leda till felaktiga uppgifter i narkotikarelaterade studier. Tid läkemedelsbehandling är aktiverad beroende på mekanismen för läkemedelskandidaten; att utarbeta, kan en hämmare av Ap-aggregation tillämpas före injektion av Ap. Dessutom kan utredarna anta att den patogena omvandling som uppstår efter Ap injektionen härrör från Ap exponering eftersom andra faktorer hårt kontrollerad, inklusive individuella skillnader.
I detta protokoll, en levande beskrivning av how att framkalla en AD-liknande fenotyp i normala möss via Ap intracerebroventrikulär (ICV) injektion utan stereotaktiska instrument presenteras. Minimera insättnings provocerade skador på hjärnvävnaden är viktigt att förhindra risken för strukturell skada och skada inducerad inflammation. En bristande skicklighet vid hantering mus leder till oväntade neuronal skada. Vidare tekniker som gör det möjligt lämplig vinkel och djup som skall uppnås under injektionen är särskilt viktigt att kringgå ofta misstag. Förutom en detaljerad, levande förklaring av ICV injektion, är tillförlitligheten hos den modell som produceras av följande protokoll också illustreras i de följande avsnitten. Följande protokoll kan vara en tillförlitlig och lättförståeligt verktyg som bidrar till AD forskning, vilket ger en språngbräda som i slutändan kan leda till en meningsfull upptäckt för AD samhället.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alla djurförsök utfördes i enlighet med National Institutes of Health Guide för vård och användning av försöksdjur (NIH Publications nr 8023, reviderad 1978) och Animal Care och användning kommittén av Institutional Animal Care och användning kommittén KIST (Seoul, Korea).
1. Animaliska Beredning
- Förbereda en grupp på 7 veckor gamla ICR-möss (eller C57BL / 6).
- Låt möss gå igenom en acklimatisering process för 3-7 dagar efter transport för att återställa homeostas. I allmänhet placera en grupp av 4-5 möss i varje bur och underhålla dem vid 22-23 ° C och 40% luftfuktighet, med en 12/12 timmar ljus / mörker-cykel. Tillhandahålla vatten och mat ad libitum.
Obs! Acklimatisering processen är avgörande för att tillåta återhämtning från stress av sjöfart och anpassning till nya bostäder, mat, vatten, och luktar liksom en ny bur och ljus cykel. I detta experiment, var mössen inrymda i individuellt ventilerade Burar (IVCs) som är belägna i den Specifik Pathogen Free (SPF) -grade anläggning - Väg varje mus och utesluta patienter vars vikt avviker ± 10% från genomsnittet.
- Dela upp de ämnen i två grupper: en fordons-injicerade gruppen (A-beta (-)) och en A-beta-injicerade gruppen (A-beta (+)). Om experimentet är att testa effektiviteten av en viss läkemedelskandidat, dela upp mössen i fyra grupper: (1) A-beta (-) / läkemedel (-), (2) A-beta (-) / drog (+), (3) aP (+) / läkemedel (-), och (4) AP (+) / läkemedel (+).
2. Ap-peptid Framställning
- Behandla Ap-peptider, härledda genom kemisk syntes 5 eller från kommersiella källor, med pre-kyld 1,1,1,3,3,3-hexafluor-2-propanol (HFIP) för att lösa upp eventuella aggregat och att göra peptiderna homogena 6 .
- Sonikera Ap / HFIP-lösning i ett med vatten icke badsonikator under 5 min (vid RT), svagt virvel, och inkubera lösningen under 30 min vid RT. Avlägsna HFIP helt via indunstning med kvävgasoch lagra den homogena aP vid -80 ° C fram till användning.
- Förbered Ap monomerer: (. 100 iM AP, 10% DMSO, 90% PBS) gör en mM Ap dimetylsulfoxid (DMSO) lager och späda ut det 10-faldigt i fosfatbuffrad saltlösning (PBS)
- Förbered Ap oligomerer.
- Inkubera monomerlösningen aP (innehållande A-beta (1-42) eller A-beta (1-40)) (steg 2,2.) Vid 37 ° C under 3 eller 7 dagar, respektive.
- Placera A-beta-lösning i ett förseglat rör i en blixtlåsförsedd påse innehållande en våt pappershandduk för att ge en fuktig miljö för att förhindra vattenavdunstning under inkubationsperioden.
- Bekräfta beredda Ap oligomerer via natriumdodecylsulfat-polyakrylamidgelelektrofores (SDS-PAGE) med fotoinducerad tvärbindning av icke modifierade proteiner 6.
- Förbered kontroll PBS-lösning innehållande 10% DMSO för fordonet ICV injektion.
3. Spruta Framställning
Notera: Komprimering av Parafilm kommer att leda till djupet av insprutningen som överstiger 3,6 mm ventralt. För att förhindra att Parafilm från att komprimeras under nålinförande, tätt linda nålen flera gånger.
4. Ap-injicerade musmodell Förberedelse
Obs: Rengör operationsområdet med ett desinfektionsmedel för att upprätthålla sterila förhållanden och sterilisera alla kirurgiska instrument för ICV injektion med 70% etanol och UV-exponering.
- Söva musen genom intraperitoneal injektion av en blandning av xylazin (20 mg / kg) och tiletamin HCl / zolazepam HCl (80 mg / kg) före ICV-injektion. Placera musen på en varm matta för att bibehålla sin kroppstemperatur medan bedövas och bekräfta adekvat anestesi genom att bedöma mul- nypa respons.
- Applicera sterilt PBS droppar i båda ögonen för att förhindra hornhinnan torrhet under förfarandet (Figur 1B).
- Bered två speglar genom att rita flera raka vertikala linjer på sina ytor vid difficulty injicera sprutan vinkelrätt.
- Placera en spegel (M1) intill kroppen av musen och den andra (M2) framför huvudet. Hålla M1 parallellt med den imaginära mittlinjen mellan de två ögonen på musen och ordna M2 vinkelrätt mot M1, så att de båda planen bildar en 90 ° vinkel (Figur 1C). Placera M1 på vänster sida av musen om forskaren är högerhänt. Placera M1 på höger sida av musen om forskaren är vänsterhänt.
- Spray 70% etanol på mitten av pannan på musen och gnugga den med torra bomullspinnar. Blöt inte för stort av ett område med pannan för att undvika minskning av kroppstemperaturen på grund av avdunstning av alkoholen.
- Torka samma område i pannan med 2% klorhexidin lösning med en ren bomullspinnar. Upprepa scrubbings med alkohol och klorhexidin för totalt tre gånger vardera.
Obs: Om det behövs, raka håret i pannan på musen för att minimera möjheten för kontaminering - Lokalisera bregma.
- Med tummen och pekfingret, tätt hålla ned huden på pannan, direkt ovanför de två ögon för den grad att båda ögonen sticker. Dra huden tillbaka för att göra pannan spänd och minimera skalle rörelser enligt huden.
- Bildar en osynlig triangel genom att tilldela tre hörn: de två ögonen på musen och den punkt där tummen och pekfingret möts, bregma. (Figurerna 1B, Röd pil: bregma)
- Leta reda på insprutningspunkten med måttband: -1,0 ± 0,06 mm posteriort bregma, 1,8 ± 0,1 mm i sidled till sagittala suturen och 2,4 mm djup (figur 1D, blå stjärnor: injektionspunkter i varje halvklotet). (För B6 möss: -0,9 mm bakre, 1,7 mm i sidled och 2,2 mm på djupet)
- Fyll sprutan med 10 pl Ap lösning eller fordon med överskott av lösning för att undvika oavsiktlig luftinsprutning.
- Placera sprutan på the insprutningspunkten (beskriven i protokoll 4,7). Göra sprutan vinkelrätt mot planet för injicering. Justera reflekterade bilder av sprutan i båda speglar med de ritade linjerna på speglarna från ett fast perspektiv (Figur 1C).
- Börja att föra in nålen tills den parafilm omslag når huden.
- Håll sprutan hand som håller stadigt och använda andra handen för att injicera 5 pl av Ap lösning eller ett fordon långsamt över 5 sekunder utan paus. Se till att sprutan förblir vinkelrät hela. Efter avslutad injektion, vänta 3-5 sekunder innan du tar bort sprutan för diffusion.
- Förutsatt den ursprungliga triangeln läge, utövar måttligt tryck för att skydda skallen från onödiga rörelser. Ta bort sprutan utan att luta.
- Placera AP-injicerade musen på varma pad för återvinning och behålla sin sternala VILA. Lämna inte musen utan uppsikt tills det återfår medvetandet och inte tillbaka mOuse till en bur som innehåller icke-kirurgisk möss tills den har återhämtat sig helt.
- Tvätta i sprutan enligt steg 3,3-3,6.
- Postoperativt övervaka rörligheten hos möss och kontrollera alla tecken på infektion eller sjukdom i möss i 5-7 dagar.
Figur 1. Ap Injektion i ICV-regionen (A) Parafilm förpackade sprutnål jämfört med en omodifierad sprutnålen. (B) PBS faller på ögonen för att förhindra torrhet; den triangel som bildas i pannan på musen med tummen, pekfingret, och de två ögon mus samt den tänkta mittlinjen på samma avstånd från varje öga; (C) två speglar (M1 och M2) med flera vertikala linjer dragna på ytorna för att hjälpa vinkelrät injektion av injektionsnålen; (D) på triangeln med insprutningspunkterna, indicated som blå stjärnor (-1,0 ± 0,06 mm från bregma och 1,8 ± 0,1 mm sagittally) på varje hemisfär av mus; Grön pil: parafilm, Röd pil: bregma klicka god här för att se en större version av denna siffra.
5. Bekräftelse av Ap Injektion av Y-labyrint och Brain Analyser
- Bedöm arbetsminnet av Ap-injicerade möss av Y-labyrinttest 3,7,8
- Vänta 3 dagar efter injektionen för uppkomsten av minnesbrister.
- Utföra de Y-maze tester med användning av en svart plast labyrint med tre identiska armar märkta A, B och C, vilka var och förgrenar sig vid en 120 ° vinkel från centrum av labyrinten (bredd x längd x höjd, 10 cm x 40 cm x 12 cm).
- Placera en mus i början armen (arm A) och göra det möjligt för föremål för fritt utforska labyrinten i 8 min.
- Mät antalet poster i varje arm och beräkna alternation hastigheten för varje ämne 3,9.
- Direkt undersöka obduktion hjärnor för att kontrollera om injektionen riktade ICV regionen på lämpligt sätt.
- Söva musen med samma förfarande som beskrivs i avsnitt 4.1. Sedan offra musen genom halsdislokation.
- Halshugga musen och ta bort huden för att exponera skallen med kirurgisk sax. Ta bort vävnader och muskler från kraniet.
- Göra nedskärningar på lambdoid suturen (mellan parietala och interparietal ben) utan att skada hjärnan. Ta skallbenet och interparietal ben, sedan parietalceller och pannben. Ta skallbenet med pincett och isolera hjärnan från skallen genom att lyfta upp hjärnhinnorna.
- Tvätta hjärnan i kyld steril saltlösning och skär ICV region av hjärnan i den koronala riktningen med en kirurgisk kniv (figur 2).
- Kontrollera injektionsområdet grundar sig på spår av nålen insättning påhjärnvävnad (Figur 2). Kontrollera om nålen spår har nått en av kamrarna. Om nålen spår inte uppfyller eller passera genom kamrarna, utesluta att patientens data från analys av de experimentella resultaten.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Det här avsnittet visar exempel på resultat som kan erhållas genom bekräftelse av Ap-aggregation och Y-labyrint bedömning av minnesbrister. Med användning av fullängds-A-beta (1-42) peptid av 42 aminosyror, blandning av A-beta-monomerer, oligomerer och fibriller (Figur 3) producerades. Genom HFIP-inducerad monomerise steg, var relativt homogena monomerer (Lane B) erhålls. Efter 7 dagars inkubering, olika storlekar av Ap-aggregat (Lane C) utvecklats. Trimerer och tetramerer var den dominerande arten bland oligomera former av Ap. Spatial arbetsminnet bedömdes i Ap-injicerade möss via växlingar i Y-labyrinttestet. Sekvensen av armen val och det totala antalet arm poster registrerades medan varje mus fick fritt utforska en labyrint. Ju mer intakt den kognitiva förmågan, desto mer musen har en tendens att gå in i mindre besökte nyligen arm, alternating dess arm val. Ap-injicerade mus-gruppen visade signifikant lägre alternering priser, vilket indikerar utvecklingen av kognitiva brister (Figur 4).
Figur 2. Exempel på ICV injektioner (A) Illustration av hjärnsektioner i koronalriktningen representerar placeringen av bregma 10 och injektion acceptabelt område (-1,0 ± 0,06 mm från bregma och 1,8 ± 0,1 mm sagittally). (B - C) ett fall av framgångsrik ICV injektion (B: uppifrån av hela hjärnan, C: koronalt snitt som visar laterala ventriklarna fyllda med blå färg); (D - E) ett fall av misslyckade ICV-injektion (D: vy ovanifrån av hela hjärnan, E: koronalt snitt som visar den tredje och fjärde ventricles fyllda med blå färg) Blå cirkel och pil: injektionsstället, blå stjärna. potentiell insprutningspunkten Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 3. Bekräftelse av framställda en p arter via SDS-PAGE. Ap-peptider separerades med SDS-PAGE med fotoinducerad tvärbindning av icke modifierade proteiner. Peptidbanden visualiserades genom silverfärgning; bana (A) proteinmarkör, bana (B) Ap-monomer (före inkubation), och spår (C) ruvade Ap arter. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 4. Y-maze beteendetester. Procent växlingen mellan Aβ- eller fordons-injicerade möss grupper på Y-labyrinttestet. Vitt fast graf: fordon (Ap (-), n = 10). Randig graf: Ap-injicerade (Ap (+), n = 9). Statistiska analyser utfördes med en envägs ANOVA följt av Bonferroni post-hoc-jämförelser (* P <0,05, ** P <0,01, *** P <0,001). Felgränserna representerar SEM. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Det viktigaste steget i detta protokoll är ICV injektion av Ap. Detta protokoll är utformad för att injicera Ap i ICV regionen möss utan stereotaktiska instrument 11,12. Innan du börjar ett experiment, bör en preliminär period av praxis injektioner med ett blått färgämne i stället av Ap äga rum för att uppnå tillräcklig skicklighet. Omedelbart efter injektion är det nödvändigt att kontrollera om pigmentet injektion utfördes på korrekt sätt. Ta försiktigt ut hjärnan och kontrollera om lämplig region färgades blå. Den pigmenterade raden bör nå till, men inte överskrida, djupet av den ICV-regionen. Ett minimum av en 90% framgång, som i allmänhet uppnås efter 50 eller fler ICV injektioner, föreslås. Under ICV injektion, undvika att skada blodkärlen genom att injicera sinus sagittalis (nära till bregma nollpunkten).
Efter Ap injektion, statistiskt signifikant minnesförsämring var observerad mellan Ap-injicerade gruppen och kontrollgruppen med användning av Y-maze beteendetester. Olika typer av beteendeförsök kan användas för att testa graden av kognitiv försämring, såsom Morris vattenlabyrinten 13, objektigenkänning, och passivt undvikande test samt rädsla konditione. Morris vattenlabyrint används för att undersöka hippocampus rumsliga minnesbrister, medan rädsla konditione används för att testa hippocampus beroende associativ inlärning och amygdala-hippocampus kommunikation. Objektigenkänning av ett visst objekt är lämplig för mätning av AD relaterad kognitiv försämring, och passivt undvikande kan användas för att testa ett djurs förmåga att komma ihåg den obehagligt stimulus 3. Det är viktigt att förbereda möss av samma vikt och ålder, om de kommer att utsättas för beteendetester använder elchocker, som rädsla konditionering och passivt undvikande test. Det rekommenderas att de ovan nämnda testerna skall utförasinom 10 dagar efter debut av minnesbrister. Eftersom det bekräftas att AP finns i hippocampus efter ICV injektion 14, är ytterligare undersökningar garanteras hitta beteendetester omfattar andra områden i hjärnan med affinitet för ICV-injicerade Ap.
Framställningen av Ap-peptider och tidpunkten för ICV injektion bör noggrant utformade beroende på den experimentella ändamål, och bör inkludera beaktande av: (1) de arter av Ap (monomerer, oligomerer, fibriller, eller en blandning); (2) isoformen av Ap (Aβ40, Aβ42, stympad Aβ25-35 och andra) 15-18; (3) tidpunkterna för Ap injektion; och (4) fördröjningstiden efter det att A-beta-exponering. Till exempel injektion av Ap monomerer rekommenderas om möss kommer att utsättas för administration av läkemedel som hämmar den onormala aktiviteter Ap monomerer, såsom aggregering. Injektionen av lösliga Ap-oligomerer är suggested om studien syftar till att bedöma neurotoxicitet eller inflammation inducerad av oligomerer. Injektionen av starkt aggregerade Ap arter rekommenderas om utredningen syftar till att studera olöslig AP och tillhörande patologi 7,19. Om ett experiment syftar till att testa styrkan hos Ap-aggregation hämmare, bör föreningen i allmänhet appliceras före, eller tillsammans med, Ap, medan Ap-clearing medel eller antiinflammatoriska föreningar skall administreras efter Ap injektion.
Jämfört med transgena eller kroniska modeller av AD, tillåter Ap-injicerade musmodell forskare att reglera koncentrationen av AP, uppkomsten av AD-liknande fenotyper, och den samtidiga utvecklingen av ett stort antal dementa möss. Dessa fördelar ger frihet när det gäller experimentell design och ett brett utbud av möjligheter för forskare. Med tanke på patogenesen av AD närmare avser kronisk exponering snarare än en plötslig ökning i A &# 946; koncentration i hjärnan, är ytterligare experiment med användning av transgena modeller rekommenderas att stärka de slutsatser som härrör från användning av Ap-injicerade musmodeller. Dessutom, eftersom det tau-protein är en annan viktig orsak till AD, utvecklingen av tau och Ap injektion musmodeller kan ytterligare påskynda AD forskningssamhället.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Acknowledgments
Denna forskning stöddes av ett bidrag på Korea Health Technology R & D Project via Korea Health Industry Development Institute (KHIDI), som finansieras av ministeriet för hälsa och välfärd, Sydkorea (licensnummer: H14C04660000).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| ICR mouse | Orientbio | male, 6-8 weeks, 27-29 g of body weight | |
| C57BL/6 mouse | Orientbio | male, 6-8 weeks, 21-23 g of body weight | |
| Amyloid-beta1-42 | in house synthesis | stock concentration: 1 mM/DMSO, injected concentration: 100 μM/10% DMSO and 90% PBS | |
| ICV injection syringe (26s gauge) | Hamilton | 80308 | |
| Evans blue dye (EBD) | abcamBIochemicals | ab120869 | 1% EBD in PBS |
| DMSO | Sigma | D2650 | |
| PBS | gibco | 10010-023 | |
| Gradi-GelTM II Gradient PAGE Analysis Kit | ELPiS Biotech | EBS-1056 | 15% Gel |
| Precision Plus ProteinTM Dual Xtra Standards | Bio-Rad | 161-0377 | |
| Silver-Staining Kit | GE-Healthcare | 17-1150-01 | |
| LabDiet | Orientbio | 5053 |
References
- Kam, T. I., Gwon, Y., Jung, Y. K. Amyloid beta receptors responsible for neurotoxicity and cellular defects in Alzheimer's disease. Cell Mol Life Sci. 71, 4803-4813 (2014).
- Elder, G. A., Gama Sosa, M. A., De Gasperi, R. Transgenic mouse models of Alzheimer's disease. Mt Sinai J Med. 77, 69-81 (2010).
- Bryan, K. J., Lee, H., Perry, G., Smith, M. A., Casadesus, G. Methods of Behavior Analysis in Neuroscience Frontiers in Neuroscience. Buccafusco, J. J. , (2009).
- Van Dam, D., De Deyn, P. P. Animal models in the drug discovery pipeline for Alzheimer's disease. Br J Pharmacol. 164, 1285-1300 (2011).
- Choi, J. W., Kim, H. Y., Jeon, M., Kim, D. J., Kim, Y. Efficient access to highly pure beta-amyloid peptide by optimized solid-phase synthesis. Amyloid. 19, 133-137 (2012).
- Rahimi, F., Maiti, P., Bitan, G. Photo-induced cross-linking of unmodified proteins (PICUP) applied to amyloidogenic peptides. J Vis Exp. , (2009).
- Kim, H. V., et al. Amelioration of Alzheimer's disease by neuroprotective effect of sulforaphane in animal model. Amyloid. 20, 7-12 (2013).
- Jackson, L. L. VTE on an elevated T-maze. J Comp Psychol. 36, 9 (1943).
- Kim, H. Y., et al. Taurine in drinking water recovers learning and memory in the adult APP/PS1 mouse model of Alzheimer's disease. Sci Rep. 4, 7467 (2014).
- Paxinos, G., Franklin, B. J. The Mouse Brain in Stereotaxic Coordinates. 2nd edn. , Academic Press. (2001).
- Ledo, J. H., et al. Amyloid-beta oligomers link depressive-like behavior and cognitive deficits in mice. Mol Psychiatry. 18, 1053-1054 (2013).
- Laursen, S. E., Belknap, J. K. Intracerebroventricular injections in mice. Some methodological refinements. J Pharmacol Methods. 16, 355-357 (1986).
- Bromley-Brits, K., Deng, Y., Song, W. Morris water maze test for learning and memory deficits in Alzheimer's disease model mice. J Vis Exp. , (2011).
- Figueiredo, C. P., et al. Memantine rescues transient cognitive impairment caused by high-molecular-weight abeta oligomers but not the persistent impairment induced by low-molecular-weight oligomers. J Neurosci. 33, 9626-9634 (2013).
- Haley, T. J., McCormick, W. G. Pharmacological effects produced by intracerebral injection of drugs in the conscious mouse. Br J Pharmacol Chemother. 12, 12-15 (1957).
- Harkany, T., et al. Neuroprotective approaches in experimental models of beta-amyloid neurotoxicity: relevance to Alzheimer's disease. Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry. 23, 963-1008 (1999).
- Wang, D., et al. The allosteric potentiation of nicotinic acetylcholine receptors by galantamine ameliorates the cognitive dysfunction in beta amyloid25-35 i.c.v.-injected mice: involvement of dopaminergic systems. Neuropsychopharmacology. 32, 1261-1271 (2007).
- Yamada, K., Nabeshima, T. Animal models of Alzheimer's disease and evaluation of anti-dementia drugs. Pharmacol Ther. 88, 93-113 (2000).
- Cho, S. M., et al. Correlations of amyloid-beta concentrations between CSF and plasma in acute Alzheimer mouse model. Sci Rep. 4, 6777 (2014).
