Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Neuroscience

Использование однозначных сенсиллы запись для обнаружения обоняния нейронных ответов постельных клопов в Semiochemicals

Published: January 18, 2016 doi: 10.3791/53337

Abstract

Насекомое обонятельная система играет важную роль в обнаружении semiochemicals в окружающей среде. В частности, усиков, которые сенсиллы размещения одного или нескольких нейронов внутри, считаются дают основной вклад в ответ на химические раздражители. Непосредственно запись потенциал действия в обонятельной сенсиллы после воздействия раздражителей, один записи сенсиллы (ССР) методика обеспечивает мощный подход для исследования нейронных ответов насекомых к химическим стимулам. Для кровать ошибка, которая является печально известным паразиты человека, несколько типов обонятельной сенсиллы были охарактеризованы. В этом исследовании мы показали, нервные реакции кровать ошибка обонятельного сенсилл двух химических раздражителей и дозозависимое ответов на одного из них, используя метод SSR. Этот подход позволяет исследователям проводить скрининг на раннее отдельных химических раздражителей на кровать ошибка обонятельного сенсилл, которые обеспечивали бы ценную информацию для развитие новых аттрактантов кровать ошибка или репеллентов и выгод усилия управления ошибка кровать.

Introduction

Общая ошибка кровать Cimex lectularius L (Hemiptera: Cimicidae), в качестве временной эктопаразитов, является обязанным кровососущих насекомых, что означает их выживание, развитие, размножение и требуют источников крови от хозяев, в том числе человека и животных 1,2. Хотя передача вируса редко сообщалось в связи с C. lectularius, клев неприятность порождается заражения серьезно влияет хозяев и физически, и психологически 3. Внедрение и широкое использование химических инсектицидов, особенно ДДТ, снижает риск заражения, и к концу 1950-х годов заражения были на таком низком уровне, что они больше не были серьезной проблемой общественного. Тем не менее, число возможных факторов привели к возрождению в популяциях кровать ошибка по всему миру, таких как сокращение использования инсектицидов, снижение информированности общественности, повышение активности путешествия, и развитие резистентности к инсектицидам 4-9. </ P>

Химические сигналы в окружающей среде обнаружены и признаны насекомых через органы обоняния, таких как антенны и верхней челюсти щупальца. Обонятельный сенсиллы на насекомых антенн играют решающую роль в обнаружении этих химических реплики. Химические молекулы введите усиков кутикулу через поры на поверхности кутикулы. Одоранта связывания белков в лимфатической усиков связываются с этими химическими молекулами и транспортировать их на пахучих рецепторов 10. Одоранта рецепторы и их корецептором от неселективного канала катионов ионов на мембране нервной, который будет деполяризованном раз этих химических молекул признаны одоранта рецепторов 11.

Одно записи сенсиллы (ССР) был разработан для обнаружения внеклеточный изменение потенциала действия, вызванного применением либо химических или нехимических раздражители. Вставив записи электрод в лимфе и сенсиллы электрода сравненияв какой-то другой части тела насекомого (обычно либо сложных глаз или живота), то скорострельность нейронов в ответ на стимулы, могут быть записаны 12. Изменение количества шипов представляют чувствительность насекомых на специфические стимулы. Химические раздражители различных идентичностей и концентрации вызывают различные будет нейронных ответов, с разной скоростью стрельбы и временных структур, и, следовательно, может быть использован для изучения процесса кодирования насекомого конкретных химических веществ.

Для ошибка общего кровать, оба сексуальные формы и тот же шаблон обонятельной сенсилл на антеннах: девять рифленые колышек С сенсилл, 29 волос, как E (E1 и E2) сенсиллы, и одна пара каждого из Dα, Dβ, Dγ гладкой колышек сенсиллы 13,14. В нескольких нейронов были определены в каждом типе сенсиллы, это не легко отличить потенциалов действия от различных нейронов, размещенных в том же сенсиллы, так и для этом эксперименте TOTAчисло л потенциалов действия были подсчитаны офф-лайн для 500 мс периода до и после стимуляции. Количество потенциалов действия после стимуляции затем вычитается из числа потенциалов действия до стимуляции и умножается на два, чтобы количественно определить изменения в скорости стрельбы в каждой отдельной сенсиллы шипами на второй 15.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

1. Подготовка инструментов, стимулов Solutions, и постельных клопов

  1. Готовят 50% -ный раствор KNO 2 (вес / объем) в бутылке 20 мл.
  2. Резкость два вольфрамовых микроэлектродов в КНО раствора 2 при 5 В, неоднократно погружения электродов в вольфрама и из раствора.
    1. Грубо резкость вольфрамовой проволоки путем погружения около 10 мм в вольфрамовой проволоки в и из раствора KNO 2 со скоростью 2 провалов / сек в течение приблизительно 5 мин, которые могут значительно потреблять передний конец вольфрамовой проволоки.
    2. Тонко обострить электрод путем погружения около 1 мм кончика провода в и из раствора со скоростью 2 провалов / сек, по крайней мере 1 мин с тем, чтобы сделать прекрасный и острие электрода. Проверьте диаметр кончика электрода под микроскопом часто, пока не достигнет 0,2-0,5 мкм, которые должны быть достаточно тонкой, чтобы проколоть кутикулу кровать ошибка обонятельного сенсиллы.
      Примечание: В то время как вручную острыйEning электрода, скорость погружение вольфрамовой проволоки в раствор KNO 2 не является постоянным все время. С большим количеством практики, это гораздо легче держать относительно постоянную скорость в заточки электрода. Время заточка также неопределенной зависимости от того, как отлично электрод должен быть. Здесь An конец электрода с диаметром ~ 0,2 мкм достаточен, чтобы проколоть через обонятельный сенсиллы.
  3. Развести каждый из химических раздражителей в диметилсульфоксиде (ДМСО) с аккуратным соединения начальной концентрации 1:10 об / об в качестве исходного раствора. Создание серию разведений декадно зависимости от того, сколько доз, необходимых в эксперименте, вновь ДМСО, от каждого из исходных растворов для каждого химического вещества. Здесь используют 10% (+) - бета-пинен и эвкалиптол.
  4. Поместите голодных или семь дней после подачи взрослых, клопы (мужского или женского пола) от Ft. Дикс колония (подарок от доктора Хейнса в Университете штата Кентукки), которые будут использоваться в тон экспериментировать в чашке Петри.
    Примечание: Там нет точной номер для постельных клопов, помещенных в чашку Петри. Это может быть мало или много.

2. Кровать ошибка Усики Подготовка

  1. Анестезировать ошибки на льду кровать (2-3 мин).
  2. Fix как антенны и тело насекомого на предметное покровного с двухсторонней ленты и снимите ноги с тонкими ножницами.
  3. Используйте маленькую булавку, чтобы мягко коснуться антенны таким образом, чтобы наклеить их на ленте стабильно.
  4. Отдых покровное против маленького шара (~ 1 см в диаметре) стоматологического воска, чтобы облегчить манипуляции и настроить его на нужный угол (~ 90 °) для записи электрода (рис 1).
  5. После защиты разместить кровать ошибка под стерео микроскопом, включите холодного источника света и регулировать интенсивность освещения, пока антенна не будет четко представлена, и сосредоточить микроскоп на второй жгутик антенны кровать ошибка при большом увеличении (720x) ,
    Заметка: Интенсивность освещения, используемого в эксперименте не количественно, что на самом деле зависит от того, как глаза экспериментатора чувствовать интенсивность освещения.

3. Одноместный сенсиллы Запись

  1. Подключите усилитель (10X) с контроллером сбора сигнала, который соединен с компьютером для записи сигнала и визуализации. Включите компьютер и запустите программное обеспечение, например, AutoSpike32 и нажмите режим "Запись" в строке меню. Затем выберите "волна", с тем, чтобы начать запись волновые сигналы.
    Примечание: Плоская линия работает с левой стороны на правую монитора неоднократно сейчас должно быть видно. Здесь окно записи длится 40 сек. Макс записи волна 10 сек. Выбранные частота дискретизации 96000 и цифровой частота дискретизации 240. Существует 0% смещения и нет фильтрации, не устранение для записи сигналов. Все эти настройки параметров в программном обеспечении могут быть изменены по мере необходимости.
  2. <Li> Включить громкоговорителя, подключенного к предусилителю, который используется для представления режим тонизирующее для нейрональных ответов усиков сенсиллы.
  3. Вставьте электрод в брюшную полость стабилизированного кровать ошибка.
    Примечание: электрод был проведен металлической подставке магнитно прикреплены к воздушным столом.
  4. После электрод был подключен к брюшной полости кровать ошибка, отойдите записи электрод, который соединен с предусилителя и манипулировать с помощью микроманипулятора, к заднему концу антенны кровать ошибка в.
  5. Когда запись электрод находится в контакте с правой оконечности антенну, включите микроскопом и найти электрод при низком увеличении.
  6. Регулировка регистрирующего электрода при постепенном увеличении увеличение пока оба электрод и усиков сенсиллы находятся в одной плоскости и четко видны под микроскопом.
    Примечание: К этому времени, микроскоп обычнолы при максимальном увеличении.
  7. Вставьте записи электрод в валу сенсиллы использованием микроманипулятора и пойти немного глубже, если фоновый шум является высоким по сравнению с потенциалом действия.
  8. После того, как четкие потенциалы действия наблюдаются от записанного сенсиллы, заполните микропипетку 10% (+) - бета-пинена. Использование микропипетки внести 10 мкл аликвоты 10% (+) - β-пинена на фильтровальной бумаги полосы (~ 3 х 15 мм), расположенной внутри стеклянной пипетки Пастера.
    1. Подключение загружалась пипетки на выходе из потока импульсов трубки контроллера стимула и поместить кончик пипетки в небольшое отверстие в трубке, ориентированной антенны.
  9. Когда все эти соединения стабилизировались, нажмите на педаль контроллера стимула доставить 0,5 сек затяжку стимула (0,5 л / мин) в непрерывном потоке воздуха увлажненной. Запись потенциалов действия будут начаты одновременно, когда footswitcч подавлен. Процесс записи будет длиться 10 сек, начиная с 1 сек до стимуляции.
  10. Граф потенциалы действия офф-лайн в течение двух периодов 500 мс, один до и один после стимуляции. Вычитание любое изменение в скорости шип в течение 500 мс после стимуляции от спонтанной активности, записанной в течение предыдущих 500 мс и конвертировать отсчеты в обычном масштабе шипы / с умножением их на 2.

4. Стимул Замена в ССР

  1. После того, как ножной переключатель был вызван, доставить 10% (+) - бета-пинен в пипетку на кровать ошибка антенн и записывать ответ на этой конкретной одоранта в течение 10 сек, после чего пипеткой удаляют.
  2. Добавьте еще один новый пипетки с 0,001% эвкалиптол быть проверены. Поместите кусочек фильтровальной бумаги, на которой 10 мкл стимула была применена, в новой пипетки.
  3. Подождите 2-5 мин, пока стимул не будет полностью vaporiзет в стеклянной пипетки. Установите пипетку на выходе из потока импульсов трубки.
  4. Вставьте кончик пипетки в маленькое отверстие трубки, ориентированной на антенне. Нажмите на педаль и начать запись 10 сек.
  5. Отключите пипетки и подготовить другой пипетки с 0,01% эвкалиптол.
  6. Проверьте все остальные дозы эвкалиптол (от 0,001% до 10%) на усиков сенсилл соблюдать дозозависимое ответов. Испытание из наиболее разбавить наименее разбавить дозах.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Одноместный записи сенсиллы является мощным средством расследования используются в исследованиях насекомых химической экологии и нервной физиологии. Исследуя нервные реакции насекомых на различных летучих соединений, особенно тех, считается экологически связанные с выживанием и развитием насекомых, не только дает нам ценную информацию о процессе обоняния насекомых, но также открывает новые перспективные направления, которые потенциально могут привести к развитию новых полезных реагентов для борьбы с вредителями.

Исправлена ​​ошибка, общая кровать, как пресловутый городской вредителя, конечно привлекает внимание многих исследователей. Среди различных областях исследований, связанных с постельных клопов, их механизм обоняние имеет огромное значение для химической экологии постельных клопов. Предыдущие исследования подробно описаны количество и распределение различных типов обонятельных сенсиллы на кроватиошибка антенны. Как показано на рисунке 2А, постельное антенны ошибка обладают четыре сегмента (СК, ЧП, F1 и F2). Большинство обонятельных сенсилл представлены на заднем конце 2-го жгутика (F2), но их распределение заметно отличается для каждого типа: D сенсилл, а именно Dα, Dβ и Dγ, находятся только вдоль внутренней стороне Антенны (фиг.2С), в то время как С и Е (Е1 и Е2) сенсиллы найти на обеих сторонах антенн (Фигура 2В). Поэтому, для того, чтобы гарантировать, что мы записывать нейронную реакцию D сенсилл, точное размещение антенны имеет важное значение.

С обоих половых форм доли кровать ошибка та же картина типов сенсилл и внутренняя сторона их антенн содержит все типы сенсилл, направленных на эту область делает его гораздо проще записать химические реакции всех различных типов сенсилл отдельно на антеннее (3А). В одной записи сенсиллы, отличается обонятельный сенсилл демонстрируют нервные сигналы с совершенно различных действий потенциальных типов и амплитуд (рис 3b). Например, Е сенсиллы известно, есть один или два нейроны внутри, в то время как D Тип сенсиллы дома больше нейронов, чем Е или С сенсилл, производить более сложные потенциалы действия, чем другие, в результате. Амплитуды нейронных ответов C сенсилл намного меньше, чем у других типов сенсиллы.

После того, как электродные соединения были созданы, нервные ответы от каждого типа сенсиллы к каждому стимула могут быть записаны на основе их идентичности и интенсивности. Для некоторых стимулов, которые клопы являются чрезвычайно чувствительными, нейронная реакция может быть очень сильные, и последние несколько секунд после прекращения стимуляции. Например, в ответ на 10% (+) - бета-пинена, клопы показалисильная реакция с огромным скорострельность (≥200 шипы / сек) и супер-устойчивой временной динамики по сравнению с контролем с растворителем в одиночку, как стимула (рис 4А и В). Различные раздражители могут вызывать совершенно разные нервные отклики же сенсиллы и различных концентраций и тот же стимул, скорее всего, чтобы генерировать достаточно различные частоты обжига. Как показано на рисунке 5, увеличение концентрации эвкалиптол поднят огневые частоты от 30 игл / сек на 0,001% до 240 шипы / сек при 10% в зависимости от дозы.

Рисунок 1
Рисунок 1. схема, показывающая процедуру фиксации для клопов. Эта ошибка слой стабилизирован на покровное с антеннами, закрепленной на ленте. Собранный образец затем помещают на магнитную стадии. Ориентация и высота образца Сбыть настроен на соответствующий угол между кроватью ошибка антенн и записи электрода. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

фигура 2
Рисунок 2. Распределение обонятельной сенсилл антенн кровать ошибка. (A) сканирующий электрод микроскоп (SEM) образ антенны кровать ошибка. Антенна имеет четыре сегмента, то Sculpus (СК), Pedecel (ПЭ), первый жгутик (F1), а второй жгутик (F2). Большая часть обонятельного сенсилл находятся на F2, хотя несколько обонятельные сенсиллы также были найдены на F1, который, как полагают, связаны с их функцией обнаружения агрегации феромонов для кровать ошибка 16. (B) СЭМ-изображение внешней стороне F2, в котором находится С и Е olfacТори сенсиллы. (C) СЭМ изображение внутренней стороне F2, которая была найдена в дом все различные типы обонятельной сенсилл: D (Dα, Dβ, Dγ), С и Е. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры ,

Рисунок 3
Рисунок 3. Типичные нервные сигналы различных типов обонятельных сенсилл кровать ошибка антенн. (A) Высокое разрешение РЭМ фотографии каждого типа обонятельной сенсиллы на антеннах кровать ошибка. (Б) Типичные нейронные сигналы различных обонятельной сенсилл перед воздействием стимул. Dα, Dβ, Dγ и С сенсиллы, что дом несколько обонятельные сенсорные нейроны (OSNs), выставочная более сложные потенциалы действия, чем E1 и E2 сенсилл, который совместноntain только один или два OSNs. Амплитуды потенциалов действия из C сенсилл намного меньше, чем в других сенсиллы типов. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Рисунок 4
Рисунок 4. Представитель нейронной ответ на стимулы, которые клопы чувствительны к. (А) трассировки сигнала показывающий типичное нейронную реакцию обонятельного сенсиллы (Dγ) к растворителю, который используется в качестве контроля в отдельной записи сенсиллы. Сигнальные следы установлены, чтобы начать 1 сек до 0,5 сек слоеного стимула. Сигнальные следы продолжить запись в течение 10 сек после начала стимула затяжку. (B), сигнал, показывающий проследить чрезвычайно сильную нервную реакцию обонятельногосенсиллы (Dγ) с ботаническим стимул, 10% (+) - β-пинена. После затяжке (+) - β-пинен доставляется сенсиллы Dγ, OSNs размещены внутри этого сенсиллы увольняют с высокой частотой и длительным временным динамики. Белая полоса выше сигнальной следа указывает интервал 1 сек до воздействия стимула, красная полоса над следа соответствует поставки стимула слоеного на обонятельной сенсиллы, и черная полоса над следа указывает на сигнал, записанный после прекращения стимулом слоеного. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Рисунок 5
Рисунок 5. Представитель дозозависимое ответы OSNs к стимулам. Использование другой ботанический стимул, эвкалиптол как EXAmple, сенсиллы Dγ отображается ответ в зависимости от дозы на различных концентраций эвкалиптол. Как концентрации увеличилась с 0,001% до 10%, частоты стрельбы возросла с 30 шипами / сек до 240 шипов / сек. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Техника Одноместный сенсиллы Запись была широко используется в тестировании нервные реакции насекомых, таких как плодовых мушек, комаров и клопов в различных химических раздражителей в окружающей среде. Эти химические стимулы часто растворяют и разбавляют в общем растворителе, чтобы подготовить различные дозы лечения. Тем не менее, различные растворители могут производить различные темпы высвобождения для раздражителей. Предыдущие исследования на некоторых изученных насекомых, таких как дрозофилы, Anopheles gambiae, Culex quinquefasciatus и Aedes Aegypti есть Обычно используется парафиновое масло в качестве растворителя для растворения стимулы, так как эти насекомые относительно нечувствительны к парафинового масла 17-20. Керосин был также использован в более ранних исследованиях одиночных записи сенсиллы клопов, по той же причине 14. Тем не менее, наиболее часто используемый растворитель не может быть лучшим для каждого вида насекомых. В окSE клопов, как керосин и ДМСО, к которому клопы обладают также нечувствительность, были использованы для растворения стимулы в различных исследованиях 14,15, но те ​​же дозы раздражителей разбавленных в ДМСО-видимому, вызывают более сильные нервные ответов на сенсиллы клопов. Например, ДМСО-раствор R - (+) - лимонена и S - (-) - лимонена, генерируемые нервной реакции ≥70 шипы / сек от Dγ сенсилл кровать ошибка антенн, в то время как масло растворяли лимонен парафин вызвало нервные отклики только ≤25 шипы / сек от Dγ сенсилл. Это уменьшение нервных реакций довольно часто в раздражители, которые были разбавлены парафинового масла, вероятно, из-за более медленной скорости высвобождения парафинового масла по сравнению с ДМСО. Это медленнее скорость высвобождения уменьшает количество стимул доставляется на поверхность сенсиллы и может привести к ошибочному заключению относительно чувствительности насекомых к определенным semiochemicals.

Два критически StePS Для проведения единой записи сенсиллы являются подготовка 1) образец и 2) записи сигнала. Для приготовления образца, так как ошибки кровати имеют очень сильные ноги и активно движется антенны, это очень важно, чтобы удалить все ноги и придерживаться антенны плотно на двухсторонней ленты. В процессе записи сигнала, иногда, позиционно невозможно электрод указать в сенсиллы вала. Если это так, то электрод может проколоть задний конец сенсиллы, который всегда дает очень чистый и четкий сигнал с очень небольшим фонового шума.

Как есть несколько нейроны располагались в D и C типа сенсилл, часто трудно отличить отдельных нейронов, основанных на амплитуд и форм потенциалов действия, произведенных в течение ССР. Тем не менее, он по-прежнему можно увидеть различия в ответах кровать ошибка в на различные стимулы, основанные на комбинированном обжига частоты всех нейронов в той же сensillum. Теоретически клопы чувствительны к определенным стимулам с сильным стимуляции, а нечувствительными к другим стимулам со слабым стимуляции в той же дозе. Поэтому дальнейшие исследования интегрирующих поведения испытаний и информации, их нервной ответ на эти раздражители бы оказать существенную информацию о экологически связанных semiochemicals для постельных клопов.

В этом исследовании, мы также использовали технику SSR проверить нервные реакции обонятельной сенсилл воздействию различных доз раздражителей. Мы наблюдали картину дозозависимое ответов нейронных в кровать ошибка на различных химических веществ. Однако, учитывая сложную обстановку клопы живем, фактическая доза летучих сталкиваются клопов в своих нормальных окрестностях будет очень низкой. В результате, semiochemicals, которые вызывают сильную реакцию нейронной при низких дозах вплоть до 1:10 5 об / об, и 1:10 4 об / об, более вероятно, быть биологически значимым для клопов, чем другие химические вещества Tшляпа функционировать только при высоких дозах. Таким образом, эти semiochemicals, которые действуют в низких дозах, вероятно, играют важную роль в хеморецепции постельных клопов, помогая им найти хозяина или избежать неблагоприятных факторов, и, таким образом, обеспечивают полезное руководство для скрининга обещая кровать ошибок аттрактанты или репелленты для использования в лабораторных и полевых анализов.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Tungsten wire A-M SYSTEMS #716500 Used for preparing the electrode
KNO2 Sigma #310484 Used for sharpening the tungsten wire
AC Power Supply BK Precision 1653A Providing the voltage in sharpening the tungsten wire
Leica Z6 APO Microscope Leica 10447424 Used for observing the sensilla on antennae
Simulus controller Syntech CS-55 Used for controlling the stimulus application
4-Channel USB Acquisition Controller Syntech IDAC-4 Real-time on screen display of all signals before and during recording
Light Source SCHOTT A20500 Providing light sources for observation
Micromanupulator Leica 115378 Used for minor movement of electrode
Speaker Juster 95a Connected with Acquisition Controller IDAC-4 and providing sound for the signal
Magnetic stand Narishige GJ-1 Used to hold the reference electrode, stablized bed bug and stimulus delivery tube
TMC Vibration Isolation Table TMC 63-500 Used for isolating the vibration from the equipments
Coverslip Tedpella 2225-1 Used for holding the bed bug
Double-sided Tape 3M XT6110 Used for stablizing the bed bug on the coverclip
Dental Wax Dentakit DK-R012 Used for supporting the coverclip where bed bug is stablized 

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Bartonicka, T., Gaisler, J. Seasonal dynamics in the numbers of parasitic bugs (Heteroptera, Cimicidae): a possible cause of roost switching in bats (Chiroptera, Vespertilionidae). Parasitol Res. 100 (6), 1323-1330 (2007).
  2. Thomas, I., Kihiczak, G. G., Schwartz, R. A. Bed bug bites: a review. Int J Dermatol. 43 (6), 430-433 (2004).
  3. Anderson, A. L., Leffler, K. Bed bug infestations in the news: a picture of an emerging public health problem in the United States. J Environ Health. 70 (9), 24-27 (2008).
  4. Boase, C. Bed bugs (Hemiptera: Cimicidae): an evidence-based analysis of the current situation. Sixth international conference on urban pests. OOK-Press Kft. Robinnson, W., Bajomi, D. Budapest, Hungary, , (2008).
  5. Doggett, S. L., Geary, M. J., Russell, R. C. The Resurgence of bed bugs in Australia: with notes on their ecology and control. Environ Health. 4 (2), 30-38 (2004).
  6. Ter Poorten, M. C., Prose, N. S. The return of the common bedbug. Pediatr Dermatol. 22 (3), 183-187 (2005).
  7. Yoon, K. S., Kwon, D. H., Strycharz, J. P., Craig, S., Lee, S. H., Clark, J. M. Biochemical and molecular analysis of deltamethrin resistance in the common bed bug (Hemiptera: Cimicidae). J Med Entomol. 45 (6), 1092-1101 (2008).
  8. Wang, L., Xu, Y., Zeng, L. Resurgence of bed bugs (Hemiptera: Cimicidae) in mainland China. Fla Entomol. 96 (1), 131-136 (2013).
  9. Haynes, K. F., Potter, M. F. Recent progress in bed bug management. Advanced technologies for managing insect pests. Ishaaya, I., Palli, S. R., Horowitz, A. R. , Springer. New York. 269-278 (2013).
  10. Carey, A. F., Carlson, J. R. Insect olfaction from model systems to disease control. Proc Natl Acad Sci. 108 (32), 12987-12995 (2011).
  11. Leal, W. S. Odorant reception in insects: roles of receptors, binding proteins, and degrading enzymes. Annu Rev Entomol. 58, 373-391 (2013).
  12. Den Otter, C. J., Behan, M., Maes, F. W. Single cell response in female Pieris brassicae. (Lepidoptera: Pieridae) to plant volatiles and conspecific egg odours. J Insect Physiol. 26 (7), 465-472 (1980).
  13. Levinson, H. Z., Levinson, A. R., Muller, B., Steinbrecht, R. A. Structural of sensilla, olfactory perception, and behavior of the bed bug, Cimex lectularius., in response to its alarm pheromone. J Insect Physiol. 20 (7), 1231-1248 (1974).
  14. Harraca, V., Ignell, R., Löfstedt, C., Ryne, C. Characterization of the antennal olfactory system of the bed bug (Cimex lectularius). Chem Senses. 35 (3), 195-204 (2010).
  15. Liu, F., Haynes, K. F., Appel, A. G., Liu, N. Antennal olfactory sensilla responses to insect chemical repellents in the common bed bug, Cimex lectularius. J Chem Ecol. 40 (6), 522-533 (2014).
  16. Olson, J. F., Moon, R. D., Kells, S. A., Mesce, K. A. Morphology, ultrastructure and functional role of antennal sensilla in off-host aggregation by the bed bug, Cimex lectularius. Arthropod Struct Dev. 43 (2), 117-122 (2014).
  17. Bruyne, M., Foster, K., Carlson, J. R. Odor coding in the Drosophila antenna. Neuron. 30 (2), 537-552 (2001).
  18. Qiu, Y. T., Loon, J. J. A., Takken, W., Meijerink, J., Smid, H. M. Olfactory coding in antennal neurons of the malaria mosquito, Anopheles gambiae. Chem Senses. 31 (9), 845-863 (2006).
  19. Ghaninia, M., Ignell, R., Hansson, B. S. Functional classification and central nervous projections of olfactory receptor neurons housed in antennal trichoid sensilla of female yellow fever mosquito, Aedes aegypti. Eur J Neurosci. 26 (6), 1611-1623 (2007).
  20. Hill, S. R., Hanson, B. S., Ignell, R. Characterization of antennal trichoid sensilla from female southern house mosquito, Culex quinquefasciatus Say. Chem Senses. 34 (3), 231-252 (2009).

Tags

Неврология выпуск 107 клоп обоняние обонятельные нейроны рецептора потенциал действия один записи сенсиллы
Использование однозначных сенсиллы запись для обнаружения обоняния нейронных ответов постельных клопов в Semiochemicals
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Liu, F., Liu, N. Using SingleMore

Liu, F., Liu, N. Using Single Sensillum Recording to Detect Olfactory Neuron Responses of Bed Bugs to Semiochemicals. J. Vis. Exp. (107), e53337, doi:10.3791/53337 (2016).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter