Introduction
وقد اجتذب دراسة plasmonics اهتماما كبيرا نظرا لتطبيقاتها في كثير من المجالات المختلفة 1-4. واحدة من أكثر المجالات التحقيق في plasmonics هو plasmonics السطح، الذي التذبذب الجماعي للإلكترونات التوصيل الأزواج مع الموجات الكهرومغناطيسية الخارجية في واجهة بين المعدن وعازلة. وقد تم اكتشاف plasmonics سطح للتطبيقات المحتملة في مجال البصريات subwavelength، بيوفوتونيك، والفحص المجهري 5،6. وقد اجتذب تعزيز الميداني القوي في حجم صغير جدا من الجسيمات النانوية المعدنية بسبب المترجمة مأكل سطح الرنين (LSPR) اهتماما واسعا، ليس فقط بسبب حساسية استثنائية لأحجام الجسيمات، والأشكال الجسيمات، وخصائص عازلة من الوسط المحيط 7 -10، ولكن أيضا بسبب قدرتها على زيادة ضعيفة بطبيعتها التأثيرات البصرية غير الخطية (11). حساسية استثنائية من LSPR هي قيمة لالحيوي الاستشعار عن بعد وشبه التعبير عن عدم الرضاتقنيات التصوير دينار 12،13. من ناحية أخرى، واستقامة تعزيز هياكل plasmonic يمكن استخدامها في الدوائر المتكاملة الضوئية في تطبيقات مثل التبديل البصرية ومعالجة الإشارات جميع البصرية 14،15. ومن المعروف جيدا أن امتصاص plasmonic يتناسب خطيا لشدة الإثارة عند مستويات منخفضة الحدة. عندما الإثارة قوية بما فيه الكفاية، واستيعاب تصل إلى التشبع. يثير الاهتمام والفضول، في شدة أعلى، واستيعاب يزيد مرة أخرى. وتسمى هذه التأثيرات اللاخطية امتصاص تشبع (SA) 15-17 وعكس امتصاص تشبع (RSA) 18، على التوالي.
ومن المعروف أنه نظرا لLSPR، وتشتت قوي بشكل خاص في هياكل plasmonic. على أساس الكهرومغناطيسية الأساسية، يجب أن يكون الرد من نثر مقابل شدة الحادث الخطي. ومع ذلك، في النانوية، وترتبط ارتباطا وثيقا التشتت والامتصاص عن طريق نظرية مي، وكلاهما يمكن أن يكون البريدxpressed من حيث أجزاء حقيقية وخيالية من ثابت العزل الكهربائي. في ظل افتراض أن GNS واحدة تتصرف كما ثنائي القطب تحت إضاءة خفيفة، ونثر معامل (Q هيئة السلع التموينية) ومعامل الامتصاص (Q ABS) من جسيمات متناهية الصغر plasmonic واحدة وفقا لنظرية مي يمكن التعبير عن 19
حيث x هو 2 πa / λ، لهو نصف قطر الكرة، وم 2 غير ε م / ε د. هنا، ε م وε د تتوافق مع الثوابت عازلة للمعدن والعوازل المحيطة بها، على التوالي. منذ شكل نثر معامل مماثلة لتلك التي من عشرمعامل امتصاص الإلكترونية، وبالتالي من المتوقع أن نلاحظ تشتت تشبع في جسيمات متناهية الصغر plasmonic واحدة 20.
في الآونة الأخيرة، وقد تجلى تشتت تشبع غير الخطية في الجسيمات plasmonic معزولة لأول مرة 21. ومن الجدير بالملاحظة أنه في التشبع الشديد، وشدة تشتت في الواقع انخفضت قليلا عندما ازدادت شدة الإثارة. أكثر بشكل ملحوظ، عندما استمرت شدة الإثارة المتزايدة بعد تناثر أصبحت مشبعة، وارتفعت كثافة نثر مرة أخرى، والتي تبين تأثير القابل للإشباع العكس تناثر 20. وقد أظهرت Wavelength- والدراسات التي تعتمد على حجم وجود علاقة قوية بين LSPR وغير الخطية نثر 21. كثافة وطول الموجة الإعتماد من نثر plasmonic هي مشابهة جدا لتلك التي الاستيعاب، مما يشير إلى آلية مشتركة الكامنة وراء هذه السلوكيات غير الخطية.
من ناحية التطبيقات، فمن كنو جيداسفل أن استقامة تساعد على تحسين القرار المجهر الضوئي. في عام 2007، الإثارة المشبعة واقترح (ساكس) المجهري، والتي يمكن أن تعزز القرار عن طريق استخراج إشارة المشبعة عن طريق تعديل الجيبية الزمني للشعاع الإثارة 22. ويستند المجهر ساكس على مفهوم أنه بالنسبة لنقطة بؤرية ليزر، لشدة أقوى في المركز مما كانت عليه في الهامش. إذا كانت إشارة (إما مضان أو نثر) يسلك سلوك التشبع، يجب أن تشبع تبدأ من المركز، في حين لا تزال الاستجابة الخطية في محيط. ولذلك، إذا كان هناك طريقة لاستخراج سوى جزء المشبعة، فإنه سيترك فقط الجزء المركزي في حين رفض الجزء الطرفي، مما يعزز بشكل فعال في القرار المكانية. من حيث المبدأ، لا يوجد الحد الأدنى القرار في SAX المجهر، طالما يتم التوصل إلى التشبع العميق كما وليس هناك ضرر عينة بسبب الإضاءة الشديدة.
وقد تبين أن resolutioن من التصوير مضان ويمكن تعزيز بشكل كبير من خلال الاستفادة من تقنية SAX. ومع ذلك، مضان يعاني من تأثير photobleaching من. الجمع بين اكتشاف نثر استقامة ومفهوم ساكس، فائقة الدقة المجهر على أساس نثر يمكن أن تتحقق 21. مقارنة microscopies فائقة الدقة التقليدية، والتقنية القائمة على نثر يوفر غير التبييض طريقة النقيض من الرواية. في هذه الورقة، وتعطى وصفا خطوة بخطوة لتحديد الإجراءات المطلوبة للحصول على واستخراج استقامة من نثر plasmonic. ووصف طرق تحديد نثر الغير خطية قدمت عن طريق تغيير شدة الحادث. وسيتم توفير مزيد من التفاصيل لكشف كيف تؤثر هذه الصور الغير خطية من الجسيمات النانوية واحدة، وكيف القرار المكانية يمكن تعزيزها وفقا لذلك بواسطة تقنية SAX.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1. GNS إعداد نموذج
- قبل تحضير العينة، يصوتن 1 مل GNS الحل الغروانية لمدة 15 دقيقة على الأقل بحوالي 40 كيلو هرتز لمنع تجميع الجسيمات، مما قد يتسبب في ذروة LSPR للتحول.
- إسقاط 100-200 ميكرولتر من GNS الغروانية على كوب الشريحة مع سيليكات الألومنيوم المغنيسيوم التجاري (MAS) طلاء لإصلاح الشبكات.
- بعد 1 دقيقة على الأقل، وإزالة الغروانية اضافية عن طريق تنظيف بالماء المقطر. وقت الانتظار يعتمد على كثافة التوزيع المطلوبة من الشبكات. عادة، 1-3 نتائج دقيقة في كثافة المناسبة التي تمكن الجزيئات ليكون من السهل التعرف لأن معظمها معزولة عن بعضها البعض. قد تحدث تجميع كبير إذا كانت فترة الانتظار طويلة جدا.
- تجفيف عينة عن طريق تطهير بغاز النيتروجين.
- (اختياري) لتعيين الشبكات على الزجاج مع ارتفاع القرار، وأداء المجهر الإلكتروني (SEM) في هذه المرحلة 23. وتقدم صورة المثال في شملت رقمه 1، والتي تبين كثافة المميزة لتلك الشبكات. استخدام الانبعاثات مجال SEM للحصول على صورة. مرة واحدة يتم إضافة زيت على العينة (الخطوة التالية)، فإنه سيكون من الصعب إزالة النفط ومراقبة العينة مع SEM.
- إضافة قطرة من النفط مع نفس معامل الانكسار على العينة لتغطية الشبكات وللقضاء على انعكاس قوي من الركيزة الزجاج.
- وضع غطاء زجاجي على أعلى من العينة وختم ذلك بطلاء الأظافر.
- الانتظار 5 دقائق على الأقل حتى يجف طلاء الأظافر. العينة مستعدة الآن.
2. محاذاة الرئيسية المدمج متحد البؤر مجهر
- انظر الشكل 2 لمخطط الإعداد. محاذاة الأبيض مسار الضوء إضاءة للجسم المجهر نفسها. بدوره على مصدر ضوء الهالوجين المجهر، واتباع دليل الصانع المجهر لتحقيق حالة الإضاءة كولر. ضمان البيضاء أشعة ضوء الهالوجين هي موازية تقريبا في الجزء الخلفي منفتحة الهدف، يعكس جزئيا beamsplitter 50/50، ثم نشر نحو الليزر.
- بدوره على المرايا GALVANO للتأكد من أنها لا تزال في الموقف المبدئي الصحيح، وهذا هو، في وسط مجموعة المسح الضوئي.
- وضع اثنين على الأقل من الأهداف، التي أدلى بها ورقة رقيقة من الورق مع حلقات متحدة المركز على ذلك، وعلى طول الطريق ضوء الهالوجين، ومواءمتها مع شعاع الهالوجين.
- لإجراء التصوير، وحدد ليزر 532 نانومتر. لإجراء قياسات التحليل الطيفي، حدد ليزر فائقة متصلة. خلال المواءمة، وينبغي أن تكون قوة الليزر أقل من 10 مللي واط في الفتحة الخلفية للهدف لتجنب استقامة. ثم، collimate شعاع العكس الحادث الليزر إلى شعاع الهالوجين المنتهية ولايته مع المعونة من الهدفين. عندما اكتمال هذه العملية، تم تحقيق المواءمة الخشنة من شعاع الليزر.
- محاذاة شعاع الليزر من خلال مركز الفتحة الخلفية للعدسة الهدف. عادة، استخدام منظمة اوكسفام الدوليةهدف ل الغمر. إضافة قطرة من النفط بين النفط الغمر عدسة موضوعية والعينة GNS. استخدام أنبوب مضخم (PMT) كما كاشف لجمع الإشارات نثر من الشبكات.
- وضع الثقب 20 ميكرون قطر أمام PMT لمنع خارج نطاق التركيز وتشتت الإشارات. بدوره على المرايا GALVANO وPMT (عن طريق البرنامج المدمج منزل)، وضبط الموقف الثقب وارتفاع مرحلة عينة لتحقيق أقصى قدر من إشارات ارتداد مبعثر من الشبكات، ومن ثم مراقبة وGNS الفردية على شاشة الكمبيوتر. ويظهر صورة عينة س ص من الشبكات مع المحاذاة الصحيحة في الشكل 2B.
- قليلا تغيير ارتفاع مرحلة عينة للتحقق من تركيز من التركيز. إذا لم تكن متحدة المركز، وضبط شعاع مع اثنين من المرايا أمام الماسح الضوئي حتى وسط GNS يبقى في نفس الموقف حين يتم تغيير ذروة مرحلة العينة. تأكد من أن الصورة XZ من قوات الأمن الفلسطينية هي مشابهة الشكل 2Cللتأكد من توافقها شعاع الصحيحة. معالجة هاتين الصورتين مع تمرير منخفض والمرشحات على نحو سلس جاوس.
3. توصيف نثر غير خطية
- في انخفاض كثافة الإثارة (أقل من 10 4 W / سم 2)، والحصول على صورة جزيئات الذهب باتباع بروتوكول 2.6.
- فتح الصورة في يماغيج (أو أي صورة أخرى برامج التحليل). رسم خط عبر واحدة من الشبكات في الصورة (انظر الشكل 2B)، واستخدام تحليل -> الملف الشخصي قطعة أدوات يماغيج لاسترداد ملف كثافة نثر. تناسب الشخصية من قوات الأمن الفلسطينية التي اختارها وظيفة جاوس:
حيث y هي قيمة قراءات PMT، ص 0 هو القيمة الأساسية (إن وجدت)، A هو ذروة السعة، ث هو العرض، x هو المكانية تنسيق، وس ج هو coordinat مركز(ه) من وظيفة جاوس. وFWHM من قوات الأمن الفلسطينية المقابلة هي (½ln2) ث. استنادا إلى الفتحة العددية (NA) هدف، وFWHM النظري للPSF متحد البؤر يمكن تشير التقديرات إلى أن ما يقرب من 0.43l / NA، حيث L هو الطول الموجي الإثارة. مقارنة هذين الرقمين للتحقق المواءمة بين نظام التصوير. - زيادة كثافة الإثارة عن طريق تغيير كثافة محايد (ND) مرشح يدويا في الشكل 2A، وتسجيل الصور ارتداد مبعثر في كل مستوى كثافة. تأخذ قيمة إشارة تشتت من وسط كل GNS في شدة الإثارة مختلفة، ورسم منحنى نثر إشارات مقابل شدة الإثارة. تحقق الخطي من النقاط القليلة الأولى، والتي ينبغي أن تظهر وجود علاقة خطية عندما شدة الإثارة منخفضة بشكل كاف. رسم خط على أساس تركيب خطي من النقاط القليلة الأولى. إذا كان انخفاض شدة تشتت النقاط اللاحقة دون هذا الاتجاه الخطي، saturatioحدث ن.
- بعد مراقبة تشتت تشبع، تنخفض تدريجيا كثافة دون عتبة الإشباع، والصورة نفسها الشبكات مرة أخرى لضمان العودة إلى الوراء من السلوكيات غير الخطية.
4. قياس من الطيف التشتت من الذهب Nanosphere واحدة
- لقياس الطيف ارتداد مبعثر من GNS واحدة، استخدام الليزر فائقة متصلة كمصدر ليزر. طول الموجة الأولي من الليزر يتراوح من 450 نانومتر إلى 1750 نانومتر. لإزالة قوة الأشعة تحت الحمراء الزائدة التي قد تسبب ضررا على عينة والمكونات البصرية، ومكان واحد أو اثنين من المرايا اليمين بعد ليزر فائقة متواصلة لتعكس الضوء المرئي، وتستخدم شعاع مقالب لجمع ضوء الأشعة تحت الحمراء الزائد.
- اتبع الإجراءات المحاذاة في القسم 2 لتوجيه الليزر فائقة متصلة في مجهر المسح الضوئي ليزر متحد البؤر. استخدام النطاق العريض 50/50 BS لضمان التغطية الطيفية عبر المدى المرئي كله.
- اكتسابصورة من الشبكات على الزجاج. تحديد موقع GNS واحدة في الصورة، وتحديد بؤرة ضوء النطاق العريض الحادث على الجسيمات.
- استخدام مرآة التقليب أمام PMT لتوجيه إشارة ارتداد مبعثر نحو مطياف، وهو مجهز مع جهاز إلى جانب المسؤول، ومن ثم اتخاذ مجموعة من GNS واحدة مختارة. كن حذرا أن الطيف هنا هو خليط من GNS نثر والخلفية بسبب الانعكاسات من الأسطح الأخرى.
- التبديل إلى كشف PMT، والتقاط صورة أخرى لتأكيد أن الموقف الجسيمات لم يتغير. ثم، تحول التركيز إلى النقطة التي لا الجسيمات موجود. التبديل إلى مطياف، وتأخذ واحدة أكثر الطيف الذي يمثل الخلفية.
- طرح الطيف خلفية من الخطوة 4.5 من الطيف من الخطوة 4.4 للحصول على الطيف ارتداد مبعثر واضح على GNS واحدة.
5. محاذاة SAX مجهر
- انظر الشكل 3لمخطط المجهر SAX، حيث يتم الحصول على التشكيل المثالي الزمني الجيبية من وتيرة ضربات بين اثنين جهري صوتية البصرية (AOMs). أولا، ضبط حجم شعاع من الليزر لتلبية متطلبات AOMs اللاحقة. تقسيم ضوء الليزر 532 نانومتر إلى شعاعين باستخدام الخائن 50/50 شعاع.
- توجيه شعاعين من خلال AOMs اثنين، مع شعاع واحد يمر كل AOM. يجب أن يكون الترددات تحوير للAOMs مختلفين. على سبيل المثال، يمكن للمرء أن يكون على 40.000 ميغاهرتز والآخر في 40.010 ميجا هرتز، مما أسفر عن تردد الفرق من 10 كيلو هرتز. وهذا التردد الفرق يكون أساسيا تضمين التردد و م للإشارات SAX.
- اتخاذ النظام الأول الحزم diffracted من كلا AOMs، والجمع بين شعاعين باستخدام الخائن 50/50 شعاع أخرى. ضبط المرايا بعد AOMs إلى collimate شعاعين.
- إضافة photodetector متصل الذبذبات لمراقبة modulatio الزمنيةن. تقسيم جزء صغير من الليزر مع شريحة زجاجية، وإرسالها إلى photodetector، كما هو مبين في الشكل (3). والتشكيل الصحيح والحزم التداخل، ومراقبة الجيبية كثافة تعديل على التردد و الرئيسي م، مماثلة لتلك التي الموجي هو مبين في الشكل (4).
ملاحظة: خلفية التشكيل يجب أن تكون في أدنى مستوى ممكن لتحقيق أقصى عمق التشكيل. وبالإضافة إلى ذلك، استخدم تحليل فورييه وظيفة من الذبذبات للتأكد من أن التشوه التوافقي للتعديل آخذة في التناقص. لتحقيق التنفيذ الناجح ساكس، وضمان الكمال الجيبية تعديل شدة الإثارة مع التقليل استقامة الأولية. - فصل الانتاج الكهربائي للphotodetector من الذبذبات والاتصال إشارة المدخلات من مكبر للصوت قفل في.
- كما هو مبين في الشكل (3)، محاذاة شعاع الليزر إلى نظام متحد البؤر التالية البروتوكولات السابقة. Hيحرث، ربط الانتاج الكهربائي للPMT إلى مكبر للصوت قفل في كإدخال إشارة.
- استخدام غطاء زجاجي فارغ كما العينة، والتحقق من الخطي للنظام الكشف الكهربائي تدريجيا عن طريق زيادة قوة الإثارة ،، كما هو موضح في الشكل (5)، حيث كاشف هو الخطية أقل من قيمة قراءات من 1-V. في جميع القياسات اللاحقة، ورعاية لكبح قراءات لأقل من هذه القيمة.
- ضبط الانتاج من مكبر للصوت قفل في لتصدير الحجم المطلق للإشارة الجهد. عن طريق تغيير عنصر التوافقي وضع في قناة المرجعية، يجب الحصول على سعة الإشارات ساكس، A 1، A 2، وهلم جرا.
- تصدير الخطية وغير الخطية إشارات من مكبر للصوت قفل في لبطاقة الحصول على البيانات، التي تتلقى أيضا إشارات القيادة الجهد من المرايا GALVANO المسح النقطية. مع المعونة من برنامج ابفيف حسب الطلب، مزامنة الإشارات من مكبر للصوت قفل في وGALVANO المرايا على شكل صورة.
- لتحسين نسبة الإشارة إلى الضوضاء في الصور، حدد بشكل مناسب اكتساب بكسل والأوقات دمج مكبر للصوت قفل في. على سبيل المثال، عندما الرئيسي تضمين التردد و م من الإثارة هو 10 كيلو هرتز، وهذا هو، عندما الفترة 100 μsec، ضبط الوقت التكامل القفل في مكبر للصوت أن يكون على الأقل ثلاث مرات أطول من هذه الفترة. واضاف ان زمن حركة GALVANO مرآة، يتم تعيين سرعة اكتساب في 1500 بكسل في الثانية في وضع التصوير SAX.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
ويبين الشكل 6 الطيف المقاس من 80 GNS نانومتر. ويرد منحنى محسوبة على أساس نظرية مي في نفس المؤامرة، والتي تبين اتفاق ممتاز. ذروة LSPR حوالي 580 نانومتر. في التجربة التالية، وكان الليزر الطول الموجي 532 نانومتر، والتي تم اختيارها لأنها تقع داخل النطاق plasmonic لتعزيز تشتت بصري مع تأثير plasmonic وتمكين نثر التشبع 21.
ويبين الشكل 7 يعرض نثر الصور من جسيمات متناهية الصغر من الذهب واحدة في شدة الإثارة مختلفة، والصف السفلي ملف خط كل جسيم لتسليط الضوء على استقامة. حجم الصورة هو 600 نانومتر × 600 نانومتر، وحجم البكسل 13.8 نانومتر. وكانت سرعة اكتساب 234،000 بكسل في الثانية في وضع التصوير س ص العادي. وقد بلغ متوسط كل صورة على مدى خمس عمليات الاستحواذ لتعزيز إشارة إلى نسبة الضوضاء.
عندما شدة الإثارة أقل من1.5 × 10 6 W / سم 2، وتشتت يعتمد خطيا على شدة الإثارة، وبالتالي فإن الصورة الناتجة من جسيمات متناهية الصغر وحيدة تمثل PSF من شعاع الإثارة، مع لمحة جاوس القياسية. ومع ذلك، عندما لوحظ زيادة كثافة الإثارة إلى 1.7 × 10 6 W / سم 2، تسطيح واضح ليس فقط في الجزء العلوي من قوات الأمن الفلسطينية، ولكن أيضا توسيع للFWHM، مشيرا إلى التشبع. ومن المثير للاهتمام للغاية، وزيادة طفيفة في كثافة أعلى، تصبح كثافة المركزية أقل من الطرفية، مما أدى إلى PSF على شكل دونات. ثم، مع استمرار شدة الإثارة لزيادة وكثافة نثر يزيد مرة أخرى، وكشف عن التشبع العكسي ومما أدى إلى ذروة جديدة في مركز قوات الأمن الفلسطينية.
بالتآمر شدة المركزية للPSFs في شدة الإثارة مختلفة، يتم الحصول على الاعتماد كثافة نثر، كما يتضح من النقاط في الشكل 8. هذا clearl منحنىذ يكشف عن اتجاهات التشبع والسلوكيات التشبع العكسي. كما هو متوقع، فإنه تبدو مشابهة جدا لاعتماد كثافة غير الخطية 15-17 الاستيعاب. وفقا للطريقة نموذجية لتحليل امتصاص غير الخطية، تم استخدام وظيفة متعددة الحدود لتناسب نتيجة تناثر غير الخطية. ومع ذلك، تختلف عن معظم الدراسات امتصاص غير الخطية، التي ثالث ترتيب استقامة كافية لنموذج النتائج، هنا الخامسة واستقامة أمر كان مطلوبا لتناسب بشكل أفضل منحنى نثر.
كما ورد في المادة 5، ومكونات الترددات التوافقية يمكن استخراجها تجريبيا بواسطة مكبر للصوت قفل في، وتعطى النتائج في الشكل 9A. من ناحية أخرى، يمكن حساب المكونات التوافقية من الشكل 8. أولا، استخدام وظيفة متعدد الحدود، حيث I هي شدة الإثارة، لتتناسب مع الشكل 8، لذلك لدينا المعلمات المناسب، α β، γ .... يمكننا ثم أعرب عن intens الإثارةإيتي بوصفها وظيفة التضمين مؤقتا I (ر) = I 0 (1 + كوس (2 πf م ر)) / 2، حيث t هو الوقت، و m هو تضمين التردد، وI 0 هو الحد الأقصى لشدة الإثارة. عن طريق استبدال I (ر) إلى S (I)، وجعل تحويل فورييه لتحويل الناتجة من S (I (ر)) في مجال التردد، لدينا المعادلة التالية تتكون من وظائف دلتا متعددة (δ):
معامل لكل وظيفة الدلتا (A 0، A 1، A 2، الخ) يمثل اتساع إشارة SAX على التردد التوافقي المقابلة. هذه المعاملات، التي تتوافق مع الاشارات SAXالقوة لتر في التوافقيات مختلفة، ويمكن أن تكون مكتوبة وظائف المعلمات المناسب، α β، γ ...:
وأظهرت نتائج حساب في الشكل 9B. المؤامرات التجريبية وحساب تتفق بشكل وثيق، لا سيما في الجوانب التالية اثنين.
أولا، منحنيات 2 و م و 3 و م غير متجانسة، والتي تبين الانخفاضات في شدة معينة على طول المنحنيات. في كلا الرقمين، وهناك ثلاثة الانخفاضات في منحنيات م 2 و، في حين ينظر إلى اثنين من الانخفاضات في منحنيات م 3 و. ثانيا، منحدرات مختلفة مع شدة الإثارة مختلفة. عندما شدة الإثارة ليست عالية، وسفوح 1 و م 2 و م، و 3 و م هي 1 و 2 و 3، على التوالي. ومع ذلك، بعد كل تراجع، منحدرات منحنيات غير الخطية المقابلة تصبح أكبر.
مع الانخفاضات والاختلافات المنحدر، ومن المتوقع PSFs غير تقليدية إذا تم استخراج مكونات غير الخطية عبر تقنية ساكس، عندما تزيد من شدة الإثارة عبر الانخفاضات. ويبين الشكل 10A الأمثلة صورة SAX من 1 و م 2 و م، و3 و مكونات م تردد في شدة الإثارة مختلفة. في الصف الأول، وشدة الإثارة هي 0.7 ميغا واط / سم 2، وهو ما يكفي للحث على مكونات غير الخطية، ولكن السعة ضعيف نسبيا. على هذا المستوى كثافة، المنحدر من 2 و م إشارة هو 2، ومن 3 ل 3 و م إشارة، كما هو مبين في الشكل 9A. إذا يزيد من شدة الإثارة إلى مستوى الانخفاض الأول من 2 و م إشارة، فإن الصور SAX من 2و م إشارة تصبح على شكل دونات، كما هو مبين في الصف الثاني في الشكل 10A. كل من 1 و م و 3 و الصور م لا تزال قوية، في حين أن FWHM من 3 و م PSF هو أصغر بكثير من 1 و م إشارة، ويظهر قرار تعزيز ملحوظا. من التشكيل الجانبي إشارة إلى لوحة أقصى اليمين من نفس الصف، وFWHM من 2 و حلقة م دونات حوالي 110 نانومتر. من ناحية أخرى، الصف الثالث من الشكل 10A يبين أنه عندما يزيد من شدة الإثارة إلى الانخفاض الأول من 3 و م إشارة، فقط 3 و صورة متر يصبح على شكل دونات، مع عرض حلقة 65 نانومتر. في هذه الشدة، وجدت قرار تعزيز ملحوظا عند مقارنة 2 و م إشارة إلى 1 و م احدة.
أرقام 10B 10C وتظهر PS محسوبFS من 2 و م و 3 و إشارات م، على التوالي، في شدة المقابلة التي تؤدي إلى الأشكال دونات. واستندت الحسابات على منحنى المناسب متعدد الحدود في الشكل 9B. منحنيات احتساب إنتاج جيدا ملامح PSFs التجريبية في أقصى اليمين لوحات في الشكل 10A، مؤكدا مرة أخرى مدى ملاءمة نوبة متعدد الحدود الخامس أجل تناثر غير الخطية.
الشكل 1. SEM صورة من تلك الشبكات. قبل تنفيذ عمليات إعداد موضح في الجزء الأول من البروتوكول، فصل بما فيه الكفاية لوحظ الشبكات. مع أكثر من 100 نانومتر بين الشبكات، لا يقترن آثار LSPR لبعضها البعض. شريط مقياس: 100 نانومتر الرجاء انقر هنا لعرضنسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 2. (A) إعداد المجهر المدمج المنزل متحد البؤر 24. (B) س ص صورة مع الشبكات في التركيز. 2 (ج): صورة XZ من قوات الأمن الفلسطينية مع المحاذاة الصحيحة هناك مصادر الليزر اثنين لهذا النظام. هو واحد من 532 نانومتر ليزر مستمرة الموجة، والآخر هو نابض ليزر فائقة متصلة. عند قياس الإشارات نثر، تم استخدام 532 نانومتر مستمرة موجة الليزر كمصدر وPMT كما كشف (مع فلتر خط ليزر إدخالها). لقياس الطيف، اعتمد ليزر فائقة متصلة كمصدر ليزر ومطياف كما كاشف. يتم إرسالها ليزر المختارة من خلال مجموعة من مرشحات الكثافة محايدة للسيطرة على شدة الإثارة. A 50/50 beamsplitter أدلة الليزر في مجهر المسح الضوئي ويسمح نصف إشارات الوراء نثر فيPM T أو مطياف، التي اختارتها مرآة التقليب. في نظام المسح الضوئي، وهناك نوعان من المرايا GALVANO التي تشكل الرأسي والأفقي المسح النقطية في طائرة الوصل من هدف. يتم جمع تناثر الوراء من قبل نفس الهدف وتحويلها إلى إشارات كهربائية من كشف. تتم مزامنة الإشارات مع نظام المسح الضوئي متحد البؤر لتشكيل الصور. وقد استخدم المرحلة PI للحصول على صورة XZ عن طريق تحريك الشبكات محوريا. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 3. الإعداد لSAX المجهري. معظم مكونات هي نفس تلك التي حصلنا عليها من المجهر متحد البؤر (مستطيل أحمر)، ولكن تمت إضافة تعديل الجيبية لشعاع الليزر الإثارة. يظهر الأزرق المستطيل مجمع نموذجيالإعداد ator. أولا، تم تقسيم الليزر الإثارة إلى شعاعين وإرسالها بشكل منفصل من خلال اثنين من AOMs لإنتاج التحويرات عالية التردد مع ترددات مختلفة قليلا. ثم، تم الجمع بين اثنين من الحزم التضمين لإنتاج تعديل الجيبية في وتيرة ضربات بين AOMs اثنين. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الرقم 4. تعديل الحزم مجتمعة بعد AOMs يقاس الذبذبات. Y1 وY2 تشير إلى الحد الأقصى (52.1 ميغاواط) والحد الأدنى (1.2 ميغاواط) قيم شدة التشكيل، على التوالي. Y2 ينبغي أن يكون الصفر لتحقيق التشكيل المثالي. وكان تردد التشكيل الحالي 10 كيلو هرتز. الرجاء انقر هنا لمشاهدة كبيرةنسخة R من هذا الرقم.
الرقم 5. اختبار الخطية من نظام الكشف. عن طريق وضع غطاء زجاجي على المستوى البؤري، تم استخدام انعكاس الليزر الإثارة من واجهة الزجاج / الهواء للتحقق من الخطي للنظام الكشف. خرج إشارة مقابل شدة الإثارة ويظهر الخطي أقل من قيمة قراءات من 1-V. وعلاوة على ذلك، فإن مستوى الضجيج هو أقل بكثير من 10 -4 V، لذلك يوفر النظام مجموعة ديناميكية من 10 4 على الأقل. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الرقم 6. نثر الطيف من 80 GNS نانومتر. النقط الحمراء تشير experimقياسات ental، والخط الأسود يمثل حساب من نظرية مي. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الرقم 7. الصور تناثر GNS من الخطية لعكس التشبع. ويبين الصف العلوي الصور ارتداد مبعثر، والصف السفلي يعطي لمحات إشارة من جسيمات متناهية الصغر المختارة في مختلف شدة الإثارة. الانتقال من الخطي إلى التشبع على عكس لوحظ تشبع واضح. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الرقم 8. كثافة نثرمقابل شدة الإثارة من GNS واحدة. النقاط الزرقاء تتوافق مع نثر كثافة في مركز قوات الأمن الفلسطينية في شدة الإثارة المختلفة، والتي تبين الاستجابات غير الخطية للغاية، بما في ذلك التشبع والتشبع العكسي. المنحنى الأحمر يشير منحنى مناسبا على أساس الخامس أجل وظيفة متعددة الحدود. (صور مستنسخة من الرقم 25.) يرجى النقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.
الرقم 9. الإعتماد كثافة إشارات SAX وفقا ل(A) وتجربة (B) حساب. تم استخراج (A) إشارات SAX بواسطة قفل في مكبر للصوت، وبلغ متوسط كل نقطة البيانات التجريبية أكثر من أربعة 80 نانومتر الشبكات. الخطوط المنقطة تشير سفوح إشارات SAX 25. (B) بعد بروتوكول 5، SAX سيحسبت gnals على أساس الخامس أجل صالح متعدد الحدود في الشكل 8 (صور مستنسخة من الرقم 25) الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الرقم 10. الصور SAX في شدة الإثارة مختلفة. (A) لوحظ تجريبيا 1 و م 2 و م، و 3 و الصور م SAX في شدة الإثارة مختلفة. حجم بكسل 20 نانومتر، وحجم كل صورة هو 750 نانومتر × 750 نانومتر. يتم رسم ملامح كثافة من الكعك في 2 و م و 3 و م في لوحات أقصى اليمين. (B) المحسوبة الملف الشخصي صورة 2 و صورة متر في 0.75 MW / سم 2. (C) المحسوبة الملف الشخصي صورة 3 و </ م> م صورة في 1.1 MW / سم 2. (صور مستنسخة من الرقم 25.) يرجى النقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
في البروتوكول، وهناك العديد من الخطوات الحاسمة. أولا، عند إعداد العينات، لا ينبغي أن يكون كثافة الجسيمات النانوية عالية جدا، لتجنب اقتران plasmonic بين الجسيمات. إذا كان اثنان أو أكثر من الجزيئات قريبة جدا من بعضها البعض، ونتائج اقتران في الطول الموجي LSPR التحول نحو الأطوال الموجية، وبالتالي الحد بشكل كبير من استقامة. ومع ذلك، فإن هذا الأسلوب التصوير خرائط الواقع توزيع وسائط plasmonic، بدلا من الجسيمات نفسها. ولذلك، فإنه من المتوقع أن مع طول موجة الإثارة المناسبة، يمكن للسائط plasmonic اقترن أيضا تظهر استقامة نثر قوية ويمكن تصوير مع تعزيز القرار. ثانيا، من المهم جدا لإنتاج تعديل جيبية نقية داخل شعاع الإثارة، وبالتالي تحفيز استخدام الضرب بين AOMs اثنين. منذ قرار تعزيز تعتمد على استخراج أجزاء غير الخطية (مكونات تردد التوافقية) من تعديل إشارة نثر، إذا الخطيةتشويه موجود في التشكيل الإثارة، ثم استخراج ستكون أكثر صعوبة. بالإضافة إلى ذلك، في النظام الحالي، يتم استخدام الإعداد تداخل لإنتاج تعديل الضرب، وبالتالي فإن المواءمة بين شعاعين في تداخل أمر بالغ الأهمية أيضا لتحقيق مثل كبيرة من عمق التشكيل ممكن. ثالثا، من المهم جدا لضمان استقامة إشارة لا تنشأ من نظام الكشف عن (والذي يتضمن كاشف، مكبر للصوت، تحويل A / D، والكمبيوتر I / O). لذلك، اهتماما خاصا هو ضروري لضمان أن نظام الكشف تعمل ضمن النطاق الديناميكي. يتم تعريف مجموعة ديناميكية مثل منطقة نظام الكشف الخطي، وهذا هو، من مستوى الضوضاء إلى كشف التشبع. في الحالة الراهنة، إشارة الجهد الكشف خطية أقل من 1 V، ومستوى الضوضاء أقل من 10 -4 V. ولذلك، يوفر النظام مجموعة ديناميكية من 10 4 على الأقل. ولضمان استقامة إشارة تأتي منمن جسيمات متناهية الصغر الذهب في حد ذاته، وليس من نظام الكشف، فمن الضروري للحفاظ على القيمة قراءات داخل النطاق الديناميكي. العامل الحاسم الرابع هو الاستقرار الميكانيكي للعينة. خلال توصيف استقامة، فمن الضروري أن النانوية تبقى في نفس المستوى البؤري. سوف الانجراف المحوري للجسيمات متناهية الصغر أو مرحلة عينة تؤثر بشدة على دقة التقييم استقامة. ولذلك، عند العمل مع النانوية، من المهم أن تجد الجسيمات التي لا تتحرك بسهولة في جميع أنحاء تحت الإثارة الخفيفة. من ناحية أخرى، فمن الممكن أيضا للعمل مع عينات نمت من الطباعة الحجرية. في هذه الحالة، والاستقرار المرحلة المجهري هو العامل المحدد الرئيسي. هناك مراحل مع السيطرة على الموقف ردود الفعل التي يمكن أن تعزز بشكل كبير من الاستقرار. بدلا من ذلك، لأن الحركة المرحلة هي عادة بطيئة جدا (على سبيل المثال، 1 ميكرومتر في 10 دقيقة)، فإنه مفيد للحصول على XYZ 3D صورة المكدس، مثل 10 صور مع 100 نانومتر محوري الفراق ن بين الصور المجاورة، في كل قيمة كثافة مختلفة. ثم خلال مرحلة التحليل، وينبغي اختيار ألمع صورة من كل كومة كصورة ممثلة في ذلك كثافة.
من حيث المبدأ، حل التقنيات المعتمدة التشبع، والتي تشمل SAX والمشبعة هيكلة إضاءة المجهر (حركة استقلال جنوب السودان) 26، والمعارض، أي الحد الأدنى طالما ذات الترتيب العالي استقامة (مكونات عالية التردد التوافقي) لا يمكن أن يتحقق. ومع ذلك، من الناحية العملية، فإن القرار لا تزال محدودة بسبب نسبة الإشارة إلى الضوضاء (SNR)، وخاصة عند استخراج العليا مكونات الإستخلاص التوافقي. هناك عدد قليل من الاستراتيجيات التي يمكن أن تعزز SNR. على سبيل المثال، فقد تبين أن وتيرة تعديل تؤثر بشدة SNR 27. ومن الممكن أيضا لتعزيز SNR عن طريق حساب الفرق بين كثافة إشارات غير المشبعة والمشبعة لاستخراج فقط إشارة المشبعة (مخطوطة قيد الإعداد).
الحمار = "jove_content"> ونحن الآن إجراء مقارنة موجزة عن تقنية الحالية للآخرين على جانبين: وعلى النقيض من القرار. كما ذكرنا، على النقيض من صورنا يعكس توزيع وضع plasmonic، أو مكافئ كثافة المحلية plasmonic غير الخطية من الدولة (LDOS). ومن المعروف جيدا أن فقدان الطاقة الإلكترون الطيفي (EELS) أو معان ضوئي ثنائي الفوتون (TPPL) يمكن أن تستخدم أيضا للتحقيق في LDOS. مقارنة EELS، يسمح أسلوب التصوير الضوئي لدينا إمكانات رسم الخرائط LDOS من nanospheres المعادن في العينات البيولوجية. مقارنة TPPL، توفر تقنية لدينا دقة فائقة. من ناحية أخرى، بالمقارنة مع الطرق الأخرى القائمة التي تحقق قرار خارج حدود الحيود، والإنجاز الرئيسي من هذا العمل هو تطوير لعدم التبييض طريقة النقيض من رواية للسوبر قرار المجهري. وقد اعتمدت معظم بعيدة الميدان التقنيات السابقة فائقة الدقة على الغير خطية من fluorophores، بما في ذلك على / قبالة التحول 28-30، أوالتي تشبع الانبعاثات مضان 22،26،31. ومع ذلك، مضان يسلك مشكلة جوهرية من الصور التبييض، وخصوصا في ظل ضوء إضاءة قوية. وأظهرت هذه الدراسة أن تشتت تشبع من الشبكات هو وسيلة واعدة فائقة الدقة المجهر، حيث لا يوجد قضية تبييض 21. مقارنة مع الدراسات السابقة من SAX المجهر الاستفادة مضان، وتعزيز القرار مع تشتت تشبع أعلى من ذلك بكثير في هذا التحقيق، وربما يرجع ذلك إلى الطلب العالي استقامة 22. وبالإضافة إلى ذلك، بخلاف SAX المجهر، وهناك أسلوب آخر فائقة الدقة على أساس التشبع: حركة استقلال جنوب السودان 26. حركة استقلال جنوب السودان يستغل التشكيل المكاني للأطراف لاستخراج الإشارات غير الخطية، في حين SAX المجهري يستخدم التشكيل الزماني. مع الخاصية تشبع هذه نثر غير التبييض، وبالتالي فمن المتوقع أن هذا الاكتشاف يمكن الجمع مع حركة استقلال جنوب السودان لتحسين القرار المكانية في إطار واسع المجال مريضاumination.
في التطبيقات المستقبلية، وهذه التقنية SAX plasmonic يكون مفيدا ليس فقط لحل توزيعات صدى الوضع والديناميات في الدوائر plasmonic، ولكن أيضا لتعزيز قرار من تصوير الأنسجة البيولوجية. وقد تجلى قرار تعزيز مماثل مع غيرها من المواد plasmonic مثل الفضة (غير منشورة)، وكذلك المواد غير plasmonic، مثل السليكون 32. في مجال التصوير فائقة الدقة، SAX المجهر مزاياه في عدة نواح. مقارنة ستوكاستيك المجهر الضوئي التعمير (STORM) وتنشيط الصورة توطين المجهري (PALM)، SAX المجهري لديه أسرع سرعة المسح الضوئي من بضع ثوان فقط لكل صورة. مقارنة استنزاف الانبعاث المستحث (STED) المجهري، مطلوب ليزر واحد فقط لSAX المجهر، والحد بشكل كبير من التعقيد البصرية. بالمقارنة مع حركة استقلال جنوب السودان، وتحسين دقة ساكس في وقت واحد في كل من الاتجاهين الأفقي والمحورية. بالإضافة إلىتحقيق عمق التصوير كافية، وتشتت عشوائي على طول مسار الشعاع من الإثارة أو جمع أمر بالغ الأهمية. لتقنيات واسعة المجال مثل STORM، والنخيل، وحركة استقلال جنوب السودان، ويتم التقاط الصور مع الكاميرا، والتي هي عرضة للتشتت عشوائي من الفوتونات المنبعثة مضان في الأنسجة. لتقنيات نقطة المسح مثل STED وSAX، يتم جمع إشارات مضان بواسطة كاشف نقطة، لذلك هم أكثر قوة ضد تناثر الأنسجة. ومع ذلك، يتطلب STED لوحة المرحلة لإنشاء ملف تعريف دونات شعاع في التركيز، ويمكن أن تدهورت المعلومات المرحلة خلال انتشار شعاع في الأنسجة. لذلك، يجب أن يكون SAX المجهر الأفضل من بين هذه الطرائق لالأنسجة العميقة فائقة الدقة التصوير.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| microscope body | Olympus, Japan | BX-51 | |
| objective lens | Olympus, Japan | UPlanSapo, 100X, NA 1.4 | |
| 80-nm gold colloid | BBI Solutions, UK | EM.GC80 | |
| supercontinuum laser | Fianium, United Kingdom | SC400-2-PP | |
| broadband dielectric mirrors | Thorlabs, USA | BB1-E02 | |
| field emission SEM | JEOL, Japan | JSM-6330F | optional |
| spectrometer | Andor Technology, UK | Shamrock 163 | |
| charge-coupled device | Andor Technology, UK | iDus DV420A-OE | |
| acousto-optic modulators | IntraAction Corp., USA | AOM-402AF1 | |
| lock-in amplifier | Stanford Research Systems, USA | SR-830 | |
| MAS-coated slide glass | Matsunami Glass, Japan, | S9215 |
References
- Fang, N., Lee, H., Sun, C., Zhang, X. Sub-diffraction-limited optical imaging with a silver superlens. Science. 308 (5721), 534-537 (2005).
- Lee, B., Kim, S., Kim, H., Lim, Y. The use of plasmonics in light beaming and focusing. 34 (2), 47-87 (2010).
- Lal, S., Link, S., Halas, N. J. Nano-optics from sensing to waveguiding. Nature Photon. 1 (11), 641-648 (2007).
- Kawata, S., Inouye, Y., Verma, P. Plasmonics for near-field nano-imaging and superlensing. Nature Photon. 3 (7), 388-394 (2009).
- Homola, J., Yee, S. S., Gauglitz, G. Surface plasmon resonance sensors: review. Sensor. Actuat. B-Chem. 54 ((1-2)), 3-15 (1999).
- Nie, S., Emory, S. R. Probing single molecules and single nanoparticles by surface-enhanced Raman scattering. Science. 275 (5303), 1102-1106 (1997).
- Hache, F., Ricard, D., Flytzanis, C. Optical nonlinearities of small metal particles - surface-mediated resonance and quantum size effects. J. Opt. Soc. Am. B. 3 (12), 1647-1655 (1986).
- Balamurugan, B., Maruyama, T. Evidence of an enhanced interband absorption in Au nanoparticles: Size-dependent electronic structure and optical properties. Applied Physics Letters. 87 (14), 143105 (2005).
- Link, S., El-Sayed, M. A. Size and temperature dependence of the plasmon absorption of colloidal gold nanoparticles. J. Phys. Chem. B. 103 (21), 4212-4217 (1999).
- Kelly, K. L., Coronado, E., Zhao, L. L., Schatz, G. C. The optical properties of metal nanoparticles: The influence of size, shape, and dielectric environment. J. Phys. Chem B. 107 (3), 668-677 (2003).
- Kauranen, M., Zayats, A. V. Nonlinear plasmonics. Nature Photon. 6 (11), 737-748 (2012).
- Homola, J. Present and future of surface plasmon resonance biosensors. Anal Bioanal Chem. 377 (3), 528-539 (2003).
- Jain, P. K., El-Sayed, I. H., El-Sayed, M. A. Au nanoparticles target cancer. Nano Today. 2 (1), 18-29 (2007).
- Wada, O. Femtosecond all-optical devices for ultrafast communication and signal processing. New J. Phys. 6 (183), Forthcoming.
- Elim, H. I., Yang, J., Lee, J. Y., Mi, J., Ji, W. Observation of saturable and reverse-saturable absorption at longitudinal surface plasmon resonance in gold nanorods. Appl. Phys. Lett. 88 (8), 083107 (2006).
- Ros, I., Schiavuta, P., Bello, V., Mattei, G., Bozio, R. Femtosecond nonlinear absorption of gold nanoshells at surface plasmon resonance. Phys. Chem. Chem. Phys. 12 (41), 13692-13698 (2010).
- De Boni, L., Wood, E. L., Toro, C., Hernandez, F. E. Optical Saturable Absorption in Gold Nanoparticles. Plasmonics. 3 (4), 171-176 (2008).
- Gurudas, U., et al. Saturable and reverse saturable absorption in silver nanodots at 532 nm using picosecond laser pulses. J. Appl. Phys. 104 (7), 073107 (2008).
- Bohren, C. F., Huffman, D. R. Absorption and scattering of light by small particles. , John Wiley & Sons Inc. (1983).
- Chu, S. W., et al. Saturation and reverse saturation of scattering in a single plasmonic nanoparticle. ACS Photon. 1 (1), 32-37 (2014).
- Chu, S. W., et al. Measurement of a saturated emission of optical radiation from gold nanoparticles: application to an ultrahigh resolution microscope. Phys. Rev. Lett. 112 (1), 017402 (2014).
- Fujita, K., Kobayashi, M., Kawano, S., Yamanaka, M., Kawata, S. High-resolution confocal microscopy by saturated excitation of fluorescence. Phys. Rev. Lett. 99 (22), 228105 (2007).
- Smith, K. C. A., Oatley, C. W. The scanning electron microscope and its fields of application. Brit. J.Appl. Phys. 6 (11), (1955).
- Yu, J. Y., et al. A diffraction-limited scanning system providing broad spectral range for laser scanning microscopy. Rev. Sci. Instru. 80 (11), 113704 (2009).
- Lee, H., et al. Point spread function analysis with saturable and reverse saturable scattering. Opt. Express. 22 (21), 26016-26022 (2014).
- Gustafsson, M. G. L. Nonlinear structured-illumination microscopy: Wide-field fluorescence imaging with theoretically unlimited resolution. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 102 (37), 13081-13086 (2005).
- Yonemaru, Y., Yamanaka, M., Smith, N. I., Kawata, S., Fujita, K. Saturated Excitation Microscopy with Optimized Excitation Modulation. ChemPhysChem. 15 (4), 743-749 (2014).
- Betzig, E., et al. Imaging intracellular fluorescent proteins at nanometer resolution. Science. 313 (5793), 1642-1645 (2006).
- Hell, S. W. Far-field optical nanoscopy. Science. 316 (5828), 1153-1158 (2007).
- Huang, B., Wang, W. Q., Bates, M., Zhuang, X. W. Three-dimensional super-resolution imaging by stochastic optical reconstruction microscopy. Science. 319 (5864), 810-813 (2008).
- Heintzmann, R., Jovin, T. M., Cremer, C. Saturated patterned excitation microscopy - a concept for optical resolution improvement. J. Opt. Soc. Am. A. 19 (8), 1599-1609 (2002).
- Tzang, O., Pevzner, A., Marvel, R. E., Haglund, R. F., Cheshnovsky, O. Super-Resolution in Label-Free Photomodulated Reflectivity. Nano Lett. 15 (2), 1362-1367 (2015).
