Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Bioengineering
Click here for the English version

Bioengineering

Bygging av Modular Hydrogel blad for Micropatterned Macro-skalert 3D Cellular Arkitektur

Published: January 11, 2016 doi: 10.3791/53475
Automatic Translation
1, 1, 1
1Department of Bio and Brain Engineering, Korea Advanced Institute of Science and Technology (KAIST)

Abstract

Hydrogeler kan mønstres på mikro-skala ved hjelp av microfluidic eller micropatterning teknologier for å gi en in vivo-lignende tre-dimensjonale (3D) vev geometri. De resulterende 3D hydrogeldannende basert cellekonstruksjoner er blitt innført som et alternativ til dyreforsøk for avanserte biologiske studier, farmakologiske analyser og organtransplantasjons applikasjoner. Selv hydrogel-baserte partikler og fibre kan lett fremstilles, er det vanskelig å manipulere dem for vev rekonstruksjon. I denne video beskriver vi en fremstillingsmetode for micropatterned alginat hydrogel-plater, sammen med deres sammenstilling for å danne en makroskala 3D cellekultursystem med kontrollert cellulære mikromiljø. Ved hjelp av en tåke formen av kalsiumgeleringsmiddel, er tynne hydrogel-plater enkelt genereres med en tykkelse i området fra 100 - 200 pm, og med nøyaktige micropatterns. Kan cellene dyrkes sammen med den geometriske veiledning av hydrogel-plater ifrittstående forhold. Videre kan hydrogel arkene lett manipuleres ved hjelp av en mikropipette med en ende snitt spissen, og kan settes sammen til flerlagsstrukturer ved å stable dem ved hjelp av en mønstret polydimetylsiloksan (PDMS) ramme. Disse modulære hydrogel ark, som kan fabrikkert ved hjelp av en lettvint prosess, har potensielle anvendelser av in vitro legemiddelanalyser og biologiske studier, inkludert funksjonelle studier av mikro- og makro og vev rekonstruksjon.

Introduction

Hydrogeler er spesielt lovende biomaterialer, og er forventet å være viktig i grunnleggende biologi, farmakologiske analyser og medisin. 1 Biofabrication hydrogel-baserte cellekonstruksjoner er blitt foreslått for å redusere bruken av dyreforsøk, 2,3 erstatte transplant vev, 4 og forbedre celle-baserte analyser. 5,6 Vann inneholdende (hydro-) viskoelastiske materialer (geler) tillate et stort antall celler som skal innkapsles, og opprettholdes i et stillas struktur for å styre 3D cellulære mikromiljø. I kombinasjon med veiledning av microfluidic eller micropatterning teknologier, kan geometrien til hydrogel konstruksjonene styres nøyaktig på celle skala. Til dags dato, en rekke former av hydrogeler, inkludert partikler, 7 - 9 fiber, 10 - 12 og ark, 13-15 har vært brukt som bygningsenheter i bottom-up hensiktssmerter til fabrikasjon av makro-skala flercellede arkitekturer.

Begge hydrogel-baserte partikler og fibre har vært lett og raskt fremstille for applikasjoner som mikro-skala cellulære miljøer med kontrollene ved hjelp av fluidtekniske microfluidic enheter. Men som de grunnleggende enheter av konstruerte vev, ville det være komplisert å omorganisere dem og å utvide sitt volum som makro-skala konstruksjoner. 16 Det er vanskeligere å oppnå makro skalert konstruksjoner enn å produsere mikron-størrelse grunnmodulene. Arklignende enheter av hydrogel-baserte konstruksjoner kan anvendes for å øke volumet av stillasene via en enkel monteringsprosessen. Consequentially, stablede lag av hydrogel-plater gir ikke bare en volumetrisk økning, men også en geometrisk utstrekning i et 3D-rom.

Vi har tidligere rapportert en fremgangsmåte for fremstilling micropatterned hydrogel-plater, 13. - 15 sammen med deres sammenstilling til multi-layEred cellulære arkitekturer. Teknikken gjør det mulig kompleks micropatterning og modulær design av cellulære konstruerer via en stable prosess med lagdelte strukturer. Ved fabrikasjon av stablede modulære hydrogel-plater, som er micropatterned, kan en 3D-cellekultursystem med kontrollert makro-skala cellulære mikromiljø bli realisert. Denne filmen protokollen beskriver et enkelt, men kraftig fremstillingsmetode som kan anvendes for å konstruere modulære hydrogel-plater, basert på human lever carcinoma cellelinje (HepG2). Vi viser her enkel manipulering av disse mønstrede modulære hydrogel ark, og deres sammenstilling til en multi-lagdelt struktur.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

1. Klargjøring av Micropatterned Former og Hydrogeler

  1. Gi de ønskede mikro-skala mønstre ved hjelp av SU-8 fotoresist på overflaten av en silisiumskive via en standard to-trinns fotolitografisk teknikk 15,17 for støping av PDMS former. Eksemplet bruker en lever lobule lignende mesh mønster (figur 1).
  2. Vei ut PDMS og et herdemiddeloppløsning med et forhold på 1: 5 (dvs. 12,5 g av PDMS og 2,5 g av herdemiddel).
  3. Bland 15 g av løsningen grundig, avgasse bobler i et vakuumkammer, og deretter spre den blandede oppløsningen på en micropatterned overflaten av silikonplaten jevnt i en foliestøpe tallerken.
  4. Plasser silikonplaten på en 65 ° C oppvarmet plate i 90 min på en flat overflate for å kurere PDMS.
  5. Fjern de herdede PDMS fra casting fatet og silikonplaten.
  6. Skjær kantene av PDMS og plassere den på en 100 mm petriskål med diameterden micropatterned siden opp.
  7. Vask micropatterned herdede PDMS på petriskålen ved bruk av 70% etanol og destillert vann for primær sterilisering. Deretter tørker dem helt i 10 minutter i en ovn ved 65 ° C.
  8. Oppløs og bland O / N 3 g av et pulverformet ikke-ionisk overflateaktivt middel i 100 ml destillert vann, og skaper en 3% (vekt / volum) beleggoppløsning.
  9. Plasser micropatterned PDMS formene i en plasmarenser og rense dem for en min (85 W, 0,73 mbar) for å gi en hydrofil overflate, for å lette tilsetningen av vandige væsker. Deretter belegge overflaten av PDMS med 100 ml overflateaktiv oppløsning i minst 3 timer (ORO / N) ved å bruke en laboratorie rocker.
  10. Vask den overflateaktive oppløsning fra PDMS formene og tørk dem helt i en ovn ved 65 ° C i 10 min. Deretter sterilisere hver micropatterned formen ved eksponering for ultrafiolett (UV) stråling i løpet av 30 min.

2. Forbered cellesuspensjonen i en Hydrogel Precursor

  1. Tilforberede hydrogel forløper, oppløse 0,1 g natrium alginat-pulver i 10 ml fosfatbufret saltvann (PBS), og skaper en 1% (w / v) alginat forløper. Å løse opp pulveret helt, inkuber og bland dem O / N.
  2. Filtrer løsningen gjennom et 0,22 um filter koblet til en 1 ml sprøyte.
  3. Culture de HepG2-cellene i Dulbeccos modifiserte Eagles medium (DMEM) supplert med 10% føtalt bovint serum og 1% penicillin-streptomycin på en konvensjonell vevskulturskål inntil 70% - 80% konfluens i en 5% CO2 fuktet inkubator ved 37 ° C .
  4. Vask cellene en gang ved hjelp av PBS, og deretter trypsineres dem ved å tilsette 1 ml av 0,05% trypsin-EDTA i 4 minutter i en 5% CO2 fuktet inkubator ved 37 ° C. Sentrifuger cellene er høstet fra kulturen fatet ved 250 x g i 3 min og resuspendert ved hjelp av 1 ml PBS Etter fjerning av supernatanten.
  5. Telle antall enkelt distribuerte celler i PBS bruker en automatisert celledisk.
  6. Etter sentrifugering ved 250 x g i 3 min og fjerning av PBS, tilsett 1 ml av 1% (w / v) natrium alginat løsning på de resterende cellepellet og bland dem forsiktig ved hjelp av pipettering. Den endelige tetthet såing av cellene bør være 5 x 10 6 - 10 7 celler / ml. Inkuber celle / hydrogel suspensjon i en 5% CO2 fuktet inkubator ved 37 ° C.

3. Lasting og Cross-linking av Cell / Hydrogel Suspension

  1. Oppløs 1,47 g kalsiumklorid dehydrere i 100 ml DDH 2 O for å fremstille en tverrbindingsmiddel (dvs., 100 mM CaCl 2 · 2 H 2 O i DDH 2 O).
  2. Skyll ut det indre av en luftfukter med ultralyd transducer bruker 70% etanol, og fyll den med 200 ml tverrbindingsreagens. Luftfukteren er 110 mm bred, 300 mm lang og 170 mm dyp (dvs. 110 mm x 300 mm x 170 mm (B x H x D)).
  3. Plasser micropatterned PDMSstøpeformer i en plasmarenser og rense dem i 1 min ved 85 W for å skape en hydrofil overflate.
  4. Stadig laste 7,2 mL av godt blandet celle / hydrogel oppheng i kanten av micropattern i formen. Eksemplet bruker en lever lobule lignende mesh mønster (figur 1). Volumet av suspensjonen avhenger av topografisk mønster.
  5. For å oppnå gelering av celle / hydrogel suspensjon, slå på luftfukteren og kontroller at luftfukteren produserer en tåke av tverrbindingsreagens. Spray den kryssbindende reagensen inn i hydrogelen forløper i 5 min, som dekker den topografiske overflaten av PDMS formene innenfor et område på 5 cm.
    Merk: Avstander lengre og kortere enn 5 cm kan forårsake ufullstendig og ujevn gelering, hhv. Sørge for at luftfukteren har en sprayhastighet på 250 ml / time, og produserer 20 ml tåke av tverrbindingsmiddel i 5 min.
  6. Etter kryssbinding prosessen, slå av luftfukter og fylle PDMS molds med PBS.

4. Håndtering av enkelt Modular Hydrogel Sheets

  1. Løsner hver herdet hydrogel ark fra micropatterned formene via pipettering PBS forsiktig rundt i hydrogel arket ved hjelp av en 200 mL pipette tips.
  2. Plukk opp hver flytende hydrogel ark ved hjelp av en slutt snitt 1000 mL pipette slutten. Hver leveren lobule lignende mesh hydrogel ark har dimensjoner på 8 mm x 8,7 mm, og være 100 - 200 um tykt.
  3. Overføre en enkelt lag av hydrogel arket inn i 1 ml av DMEM i en 12-brønners plate, og kulturen cellene in vitro på en flytende måte ved hjelp av hydrogel konstruere som en enhet komponent i 12-brønns plate i løpet av en uke i en 5 % CO2 fuktet inkubator ved 37 ° C. Utveksle kulturmediet annenhver dag.

5. Montering av flerlags Hydrogel Sheets

  1. Gjenta trinn 1,1 til 1,5 for å fremstille en PDMS ramme med dimensjoner på 18 mm x 18 mm x 4 mm (W xH x D), og som inneholder 170-um-høy søyle strukturer på den nedre overflate. Bruke 42 g av blandingen av PDMS og herdemiddel, med samme forhold som i trinn 1.2. Plasser en spesialisert polykarbonat forme på silikonplaten for PDMS rammen for å skape en indre ramme med dimensjoner på 8 mm x 9 mm x 2 mm (W x H x L).
  2. Sterilisere PDMS rammen og 180-um-pore nylon filterpapir nedsenket i destillert vann og pinsett i en autoklav i 15 minutter ved 121 ° C.
  3. Plasser det steriliserte PDMS rammen på en fjerdedel av en bit av nylonfilterpapir (med en diameter på 5 cm) i en 60-mm petriskål.
  4. Overføre en modulær hydrogel ark inn i det indre av PDMS rammen ved hjelp av en ende snitt 1000 mL pipettespissen. De hydrogel ark som brukes for montering bør dyrkes i minst en dag etter at de ble fabrikkert.
  5. Juster kanten av hver modul hydrogel arket med PDMS rammen med en tom 200 mL pipette tips.
  6. Gjenta trinn 5,4 og 5,5 ved hjelp av modulære hydrogel ark for å danne en bunke med 4 - 6 lag.
  7. Fjerne kulturmediet ved å føre den ut gjennom søylekonstruksjoner på bunnen av PDMS rammen. Deretter tilsett 2 ul av alginat-oppløsning (2% vekt / volum) ved et hjørne av multi-lags konstruksjon.
  8. Spray en tåke av kryssbindingsmiddel i 30 sekunder på det flerlags-konstruksjon for å feste kantene av hvert lag med de i et annet. Bruke 2 ml tåke av tverrbindingsmiddel (ved en sprayhastighet på 250 ml / time).
  9. Skyll flerlags konstruksjon forsiktig med 400 mL DMEM og fjern PDMS rammen med pinsett.
  10. Løsne den lagdelte konstruksjon av filterpapiret ved å tørke forsiktig med en celle løfter etter tilsetning av 4 ml DMEM.
  11. Overfør den lagdelte konstruksjon i en 6-brønners plate inneholdende 3 ml av DMEM ved hjelp av filterpapir, og kulturen cellene in vitro på en flytende måte, med den hydrogel som konstruereen multi-cellulær skala stillaset i 6-brønns plate i løpet av en uke i en 5% CO2 fuktet inkubator ved 37 ° C. Utveksle kulturmediet annenhver dag.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Vi har beskrevet manipulasjon og fabrikasjon av frittstående cellulære hydrogel ark. Som vist i figur 1, har vi fremstilt micropatterned PDMS former, og celle-inneholdende hydrogel ble fylt på den hydrofile overflaten av disse støpeformer og kryssbundet ved hjelp av en luftfukter for å generere en aero tåke av geleringsmiddel. Etter frigjøring fra formene, HepG2-celler ble dyrket i frittstående hydrogel-plater med forskjellige mønstre (figur 2). Således er de tynne hydrogel arkene gitt en 3D-kultur miljø. Videre kan modulære hydrogel-plater settes sammen ved å legge platene ved hjelp av en mikropipette med en ende snitt spiss, og ved hjelp av en PDMS ramme, som muliggjør 3D makroskala cellekultur (figur 3).

Figur 1
Figur 1. Flow Chart Viser fabrikasjon av en hydrogel blad og Multi-lags Hydrogel blad. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figur 2
Figur 2. Frittstående 3D ​​Cell Culture in Various Hydrogel blad. Den fremstillingsmetode for sprøyting tverrbindingsreagens aktivert nøyaktig fordelingen av alginat hydrogel på mikro-skala. Videre kan de fabrikkerte hydrogel arkene høstes fra formen og manipuleres lett i frittstående forhold. HepG2-celler ble dyrket i mønstret og en flat hydrogel ark (A), hydrogel-plater med sekskantsøyler (B), mesh (C), lever lobule lignende mesh (D), en rekke hull (E), og multiple microcomb-lignende mikrofibre (f). De skala barer er som følger:. 500 mikrometer (A, D, F), 100 mikrometer (B, C), og 2 mm (E) Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figur 3
Figur 3. Montering av Micropatterned Hydrogel blad for makro-skala Cellular konstruksjoner. Ulike typer hydrogel arket kan settes sammen via lag-på-lag stabling med justering, inkludert montering av fem hydrogel ark som inneholder HepG2 celler farget med grønn fluorescens og NIH3T3 celler farget med rød fluorescens (A). En sammenstilling av micropatterned hydrogel ark med utvidet rørledning struktur (B) gitt høyere celleviabilitet thaved at ikke-mønstrede hydrogel ark (C) etter 7 dager. Levedyktighet ble vurdert ved farging HepG2 celler med calcein-AM (levende celler vist som grønn) og ethidium homodimer-1 (døde celler vist som rød). Skala barer:. 500 mikrometer (A) og 200 mikrometer (B, C) ​​Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Denne protokollen er en enkel metode for fremstilling av modulære hydrogel ark, og montering av dem til å danne 3D cellulære stillaser.

For å konstruere klare mønstrede alginat strukturer i en kort tid, bør vi identifisere en tverrbinding prosess som kan skape tilstrekkelig stive strukturer for å opprettholde de komplekse micropatterns fra formen, samt opprettholde cellenes levedyktighet og metabolisme. Vi har utviklet en tverrbinding prosessen, inkludert en sol-gel-overgangen, for å sprøyte en tverrbindingsmiddel ved hjelp av en luftfukter i form av en tåke. Uten denne tverrbindingsprosessen, kunne mikro-skala mønstre ikke genereres i form av et tynt hydrogel konstruere med begrenset diffusive dybde (100 - 200 um), som har høy diffusiv permeabilitet for metabolitter og næringsstoffer. Videre, sammenlignet med eksisterende diffusjons-baserte metoder, som krever 30 - 60 min, 18 - 20 kryssbindings timeg var relativt kort (3 - 5 min).

Dessuten var det også vanskelig å manipulere de tynne hydrogel-plater, som var mekanisk stabil bare i et flytende medium. Som vist i figur 1, ble den tynne hydrogelstruktur enkelt og stabilt håndteres og manipuleres ved hjelp av en ende snitt konvensjonell spiss for overførselen mellom forskjellige dyrkningsbetingelser. Ved hjelp av generasjon og manipulasjon teknikker, kunne vi gir ikke bare en enkeltlags ark i en flytende måte for potensielle bruksområder i legemiddelanalyser men også stablet multi-layer strukturer, med mulige bruksområder som stillaser for vev-lignende konstruksjoner.

Lagdelte cellulære arkitekturer kan genereres ved å stable de modulære enkeltlags ark hydrogel (figur 3A). Hvert modul hydrogel arket kan inneholde forskjellige celletyper, og kan bli utsatt for forskjellige dyrkingsbetingelser. Disse flerlags konstruksjoner kan deretter selektivt assemblødde. Imidlertid kan ganske enkelt stable hydrogel ark fører til celle-nekrose innenfor den sammensatte struktur når totaldybden overskrider begrenset diffusive dybde (figur 3C). For å overvinne dette problemet, vil det være nødvendig å justere mikromaskemønstre, for eksempel lever lobule lignende maskene, når flerlags hydrogel-plater er sammenstilt. Vi krever derfor en PDMS ramme med samme interiør mønster som grensen av hydrogel ark for å justere stablet hydrogel ark. Dermed kan innrettede hull-matrise micropatterns i den sammensatte maske hydrogel-plater anvendes for å danne ekspanderte rørledningsstrukturer, til rette for mer effektiv transport av næringsstoffer for forbedret celle-levedyktighet (figur 3B).

En begrensning ved denne teknikk er fraværet av celle-matriks-vekselvirkninger i alginat hydrogel. Alginat kan ikke gi celleadhesjonsprosesser ligander for in vivo-lignende celle-matriksinteraksjoner; 21 men gjør det aver mekaniske og geometriske effekter som en 3D-celle-innkapsle stillas med celle-celle interaksjoner. For primære celler og stamceller, kan alginat anvendes følgende modifikasjon med RGD-holdige peptider, 21 eller i kombinasjon med kollagen eller gelatin. 14,18 En annen begrensning er at når celleinnstøpt hydrogel-plater er fremstilt med lav celletetthet nedenfor 5 x 10 6 celler / ml, konstruksjon av flerlags-struktur kan føre til svake bindinger mellom de hydrogel ark fordi bare kanten av strukturen er festet ved bruk av tilleggs alginat. Imidlertid kan lagene stables kompakt som et enkelt stillas via dreneringsstrukturer under PDMS rammen. I tillegg kan høyere tetthet av celler i hydrogel arkene sprer på overflaten så vel som i laget etter en dag kultur, som ville bidra til bindinger mellom lagene som vist i figur 3A.

Hydrogel ark fabricasjon og manipulasjon teknikk som er beskrevet her, kan være tilpasset de in vitro kultursystemer og vev-lignende cellemodeller for å gi en in vivo-lignende mikromiljø for applikasjoner, inkludert cellulære analyser og ingeniør kunstige organer. Denne teknikken kan brukes til cellebaserte assays stoff og biologiske undersøkelser som krever forskjellig geometrisk 3D-cellulær mikro- og macroenvironments som inneholder forskjellige celler eller hydrogel-typer.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Sylgard 184 Silicone Elastomer Kit Dow Corning Corporation 000000000001064291
Pluronic F-127 Sigma-Aldrich P2443 Powdered nonionic surfactant 
Alginic acid sodium salt, low viscosity Alfa Aesar B25266
Calcium chloride dihydrate Sigma-Aldrich C7902
Ultrasonic humidifier MediHeim MH-2800 Modified equipment, Maximum sprayed rate: 250 ml/hr
Nylon net filter hydrofilic, 180 μm EMD Millipore NY8H04700
Polycarbonate mold Customized mold for fabrication of a PDMS frame pattern

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Hoffman, A. S. Hydrogels for biomedical applications. Adv. Drug Deliv. Rev. 64 (Supplement), 18-23 (2012).
  2. Lan, S., Starly, B. Alginate based 3D hydrogels as an in vitro co-culture model platform for the toxicity screening of new chemical entities. Toxicol. Appl. Pharm. 256 (1), 62-72 (2011).
  3. Szot, C. S., Buchanan, C. F., Freeman, J. W., Rylander, M. N. 3D in vitro bioengineered tumors based on collagen I hydrogels. Biomaterials. 32 (31), 7905-7912 (2011).
  4. Lim, F., Sun, A. M. Microencapsulated islets as bioartificial endocrine pancreas. Science. 210 (4472), 908-910 (1980).
  5. Koh, W. G., Itle, L. J., Pishko, M. V. Molding of hydrogel microstructures to create multiphenotype cell microarrays. Anal. Chem. 75 (21), 5783-5789 (2003).
  6. Xu, Y., et al. A Microfluidic Hydrogel Capable of Cell Preservation without Perfusion Culture under Cell-Based Assay Conditions. Adv Mater. 22 (28), 3017-3021 (2010).
  7. Um, E., Lee, D. S., Pyo, H. S., Park, J. K. Continuous generation of hydrogel beads and encapsulation of biological materials using a microfluidic droplet-merging channel. Microfluid. Nanofluid. 5 (4), 541-549 (2008).
  8. Lee, D. H., Lee, W., E, U. m, Park, J. K. Microbridge structures for uniform interval control of flowing droplets in microfluidic networks. Biomicrofluidics. 5 (3), 034117 (2011).
  9. Lee, D. H., Bae , C. Y., Han, J. I., Park, J. K. In situ analysis of heterogeneity in the lipid content of single green microalgae in alginate hydrogel microcapsules. Anal. Chem. 85 (18), 8749-8756 (2013).
  10. Yamada, M., Sugaya, S., Naganuma, Y., Seki, M. Microfluidic synthesis of chemically and physically anisotropic hydrogel microfibers for guided cell growth and networking. Soft Matter. 8 (11), 3122-3130 (2012).
  11. Yamada, M., et al. Controlled formation of heterotypic hepatic micro-organoids in anisotropic hydrogel microfibers for long-term preservation of liver-specific functions. Biomaterials. 33 (33), 8304-8315 (2012).
  12. Onoe, H., et al. Metre-long cell-laden microfibres exhibit tissue morphologies and functions. Nat. Mater. 12 (6), 584-590 (2013).
  13. Lee, W., Son, J., Yoo, S. S., Park, J. K. Facile and Biocompatible Fabrication of Chemically Sol−Gel Transitional Hydrogel Free-Standing Microarchitectures. 12 (1), 14-18 (2011).
  14. Lee, W., et al. Cellular hydrogel biopaper for patterned 3D cell culture and modular tissue reconstruction. Adv. Healthcare Mater. 1 (5), 635-639 (2012).
  15. Bae, C. Y., Min, M. K., Kim, H., Park, J. K. Geometric effect of the hydrogel grid structure on in vitro formation of homogeneous MIN6 cell clusters. Lab Chip. 14 (13), 2183-2190 (2014).
  16. Bruzewicz, D. A., McGuigan, A. P., Whitesides, G. M. Fabrication of a modular tissue construct in a microfluidic chip. Lab Chip. 8 (5), 663-671 (2008).
  17. Choi, S., Park, J. K. Two-step photolithography to fabricate multilevel microchannels. Biomicrofluidics. 4 (4), 046503 (2010).
  18. Lee, B. R., et al. In situ formation and collagen-alginate composite encapsulation of pancreatic islet spheroids. Biomaterials. 33 (3), 837-845 (2012).
  19. Cabodi, M., Choi, N. W., Gleghorn, J. P., Lee, C. S., Bonassar, L. J., Stroock, A. D. A microfluidic biomaterial. J. Am. Chem. Soc. 127 (40), 13788-13789 (2005).
  20. Choi, N. W., Cabodi, M., Held, B., Gleghorn, J. P., Bonassar, L. J., Stroock, A. D. Microfluidic scaffolds for tissue engineering. Nat. Mater. 6 (11), 908-915 (2007).
  21. Rowley, J. A., Madlambayan, G., Mooney, D. J. Alginate hydrogels as synthetic extracellular matrix materials. Biomaterials. 20 (1), 45-53 (1999).

Tags

Bioteknologi 3D cellekultur 3D Alginat Assembly bioteknologi Bottom-up tilnærming HepG2 Hydrogel ark Micropattern Modular tissue engineering
Bygging av Modular Hydrogel blad for Micropatterned Macro-skalert 3D Cellular Arkitektur
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Son, J., Bae, C. Y., Park, J. K.… More

Son, J., Bae, C. Y., Park, J. K. Construction of Modular Hydrogel Sheets for Micropatterned Macro-scaled 3D Cellular Architecture. J. Vis. Exp. (107), e53475, doi:10.3791/53475 (2016).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter