Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Medicine
Click here for the English version

Medicine

مثلي هند الاطراف زرع في ماوس

Published: February 12, 2016 doi: 10.3791/53483
Automatic Translation
*1, *1, *2, 3, 4, 1, 1, 1, 1
1Department of Plastic and Reconstructive Surgery, Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) Laboratory, Johns Hopkins University School of Medicine, 2Department of Visceral, Transplant and Thoracic Surgery, Innsbruck Medical University, 3Center for Vascularized Composite Allotransplantation, Department of Plastic and Reconstructive Surgery, Chang Gung Memorial Hospital and School of Medicine, 4Department of General, Visceral and Transplant Surgery, Charite Berlin
* These authors contributed equally

Summary

هذا النموذج رواية للهند مثلي زرع الأطراف الاصطناعية في الماوس، وتطبيق تقنية صفعة غير خياطة لمفاغرة فائقة الاوعية الدموية الدقيقة، ويوفر أداة قوية لفي الجسم الحي الأبحاث المناعية الآلية المتعلقة زرع الطعم الخيفي مركب أوعية دموية (VCA).

Protocol

وأجريت جميع التجارب وفقا لدليل لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية من المعهد الوطني للصحة (NIH) وتمت الموافقة من قبل لجنة جامعة جونز هوبكنز رعاية الحيوان واستخدام (JHUACUC). تم تنفيذ إجراءات محددة في إطار MO13M108 بروتوكول ACUC المعتمدة.

عملية 1. المانحة

  1. إدارة التسكين في نقطة زمنية مناسبة لكل صياغة الدوائية قبل الجراحة. وفقا للرعاية الحيوان وافق واستخدام استخدام بروتوكول 0.1 ملغم / كجم من وزن الجسم من تحت الجلد البوبرينورفين 1 ساعة قبل شق الجلد.
  2. رزين المتبرع مع isoflurane تطبيقها من خلال غرفة ملحقة المرذاذ الأيزوفلورين عند 4٪. الحفاظ على التخدير والتخدير في 2٪ من خلال مخروط الأنف. أداء اصبع القدم سحب قرصة انعكاس لرصد عمق التخدير قبل الشروع في الإجراء.
  3. ارتداء الأقنعة، والعباءات العزلة المتاح وقفازات.
  4. حلق ع الجراحيةعصام، وعلى وجه الخصوص الأطراف الخلفية والفخذ، والإعدادية مع 10٪ بوفيدون - اليود.
  5. استخدام ثنى الحقل العقيمة والأدوات وتعقيمها المجهر عالية التكبير (40X).
  6. جعل الفخذ شق الجلد باستخدام مقص قريب من منطقة منتصف الفخذ ومحيطي ربط شق لترسيم أطرافهم هند من بقية جسم الفأر.
  7. تحديد وتشريح الشريان الفخذي، عرق وعصب. فصل جميع الهياكل الثلاثة باستخدام ملقط ومقص الصغرى.
  8. مرة واحدة يتم تشريح عنيق الأوعية الدموية تقسيم السفن على مستوى الرباط الإربي باستخدام المقص الصغير.
  9. بعد ذلك، مواصلة تقسيم الفردية البطنية (الناحلة وعضلات الفخذ وسطي) ومجموعات العضلات الظهرية 20 قريب على مستوى منتصف الفخذ لفصل الكسب غير المشروع من الحيوان المانحة باستخدام المقص.
  10. القطع عظم الفخذ وقطع في منتصف جسم الفخذ باستخدام المقص.
  11. الموت ببطء الحيوانية فل جرعة زائدة الأيزوفلورينlowed خلع عنق الرحم. تأكيد وقف ضربات القلب والتنفس.
  12. مسح الأطراف مع 2 مل heparinized (30 IE) البرد (4 درجات مئوية) المالحة باستخدام 33 G التنظيف إبرة شنت على حقنة (انظر المواد الجدول).
  13. مكان واحد صفعة بوليميد على الوريد الفخذي والشريان، على التوالي.
  14. التفاف الكسب غير المشروع إلى الشاش القطن الرطب، مكان في طبق بتري وتخزينها في 4 درجات مئوية حتى أقحم.

2. مستلم عملية

  1. إزالة أطرافه الخلفية
    1. إدارة التسكين في نقطة زمنية مناسبة لكل صياغة الدوائية قبل الجراحة. وفقا للرعاية الحيوان وافق واستخدام استخدام بروتوكول 0.1 ملغم / كجم من وزن الجسم من البوبرينورفين SC 1 ساعة قبل شق الجلد.
    2. رزين المتبرع مع isoflurane تطبيقها من خلال غرفة ملحقة المرذاذ الأيزوفلورين عند 4٪. الحفاظ على التخدير والتخدير في 2٪ من خلال مخروط الأنف. أداء اصبع القدم سحب قرصة انعكاس لمراقبة قسمح التخدير قبل الشروع في الإجراء.
    3. استخدام مرهم البيطرية على العينين من الماوس لمنع جفاف بينما تحت التخدير.
    4. حلق المنطقة الجراحية، وبخاصة أطرافه الخلفية والفخذ والإعدادية مع 10٪ بوفيدون - اليود.
    5. جعل الفخذ شق الجلد باستخدام مقص قريب من منطقة منتصف الفخذ ومحيطي ربط شق لترسيم أطرافهم هند من بقية جسم الفأر.
    6. تحديد وتشريح الشريان الفخذي، عرق وعصب وفصل جميع الهياكل الثلاثة باستخدام ملقط ومقص الصغرى.
    7. مرة واحدة يتم تشريح عنيق الأوعية الدموية، وتضييق الأوعية الفخذ على مستوى الرباط الإربي.
    8. قطع الأوعية البعيدة على مستوى الشريان الشرسوفي السطحي.
    9. بعد ذلك، مواصلة تقسيم الفردية البطنية (الناحلة وعضلات الفخذ وسطي) ومجموعات العضلات الظهرية 20 قريب على مستوى منتصف الفخذ لفصل لى هند الأصليميغابايت من الحيوانات المستقبل باستخدام المقص.
    10. القطع عظم الفخذ في منتصف جسم الفخذ باستخدام المقص.
    11. يكوي عضلات الفخذ مقطوع سابقا لمنع النزيف من الموقع تشريح وبالتالي المتلقي فقدان الدم.
  2. غرس
    1. تقليل فقدان السوائل عن طريق لري حقل من المنطوق مع المياه المالحة الدافئة (37 درجة مئوية) وحقن 0.3 مل المالحة الدافئة قبل وبعد العملية.
    2. وضع الكسب غير المشروع في الطريقة التي يعكس وضع التشريحي الدقيق لأطرافه الخلفية الأصلي عن طريق مواءمة عظم الفخذ للمتلقي والكسب غير المشروع وربطها باستخدام إبرة في العمود الفقري 20 G بمثابة مسمار نخاعي.
    3. يلئم مجموعات العضلات البطنية والظهرية باستخدام مواد خياطة للامتصاص (6-0 Polysorb).
    4. ربط الأوعية الفخذ باستخدام تقنية صفعة غير خياطة؛ في التفاصيل، وسحب الجانب المتلقي للسفينة على الأصفاد التي شنت سابقا على متن السفينة تنتهي من غرافت. استخدام 10-0 النايلون خياطة وإجراء التعادل كفافي لإصلاح السفينة المتلقي على الكفة.
    5. التالي الافراج عن المشابك. في هذه المرحلة بصريا تحقق من دوران صفعة وتحديد المواقع المثلى لمنع سوء دوران ومجعد من السفن.
    6. أداء الإرقاء الدقيق باستخدام الكي الكهربائي مع التركيز بشكل خاص على واجهة المانحة المتلقي العضلات ونهايات العظام.
    7. إغلاق الجلد باستخدام خيوط النايلون غير قابل للامتصاص (6-0 Ethilon).
    8. وضع شروط سوي الحرارة عن طريق السماح للحيوان للتعافي في قفصه تحت مصباح التدفئة. مواصلة الرصد المنتظم لمدة 4 على الأقل ساعة قبل إعادته إلى منشأة سكنية.
    9. توفير تسكين الألم بعد العمليات الجراحية مع البوبرينورفين بجرعة 0.1mg / كغ SC كل 6-8 ساعة لمدة 3 أيام.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

أداء زرع الطعم الخيفي مركب أوعية دموية في نموذج الفأر باستخدام تقنية غير خياطة صفعة يسمح لتحقيق ممتازة وطويلة الكسب غير المشروع المدى والحيوان البقاء على قيد الحياة كما هو مبين في الشكل 1. وعلاوة على ذلك، لأنها تمثل وسيلة يمكن الاعتماد عليها للحصول على نتائج قابلة للتكرار الرفض المزروع تدريجي في مركب أوعية دموية زرع الطعم الخيفي كما هو موثق من قبل الصور هو مبين في الشكل 2. H & E الأنسجة من الأنسجة التي تم الحصول عليها من الحيوانات التي تمر رفض يؤكد كذلك ديناميكية قابلة للتكرار الرفض المزروع في هذا النموذج الفئران (الشكل 3).

الشكل 1
الشكل 1. المزروع البقاء على قيد الحياة في الماوس سلالة الجمع بالكامل متطابقة H2 [BALB / ج (H2K د) في C57BL6 (H2K ب)]. وفي حين أن جميع transpl مسانجتم قبول النمل (ن = 10) على المدى الطويل، والمغايرة غير المعالجة (ن = 10) ورفضت تماما داخل والمتوسط ​​من 8-9 أيام. الجلد يعتبر رفض الصف 3 وفقا لمعايير بانف الرفض الكامل في هذه الدراسة. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 2
الشكل 2. السريرية رفض الميزات وديناميكية من بالكامل متطابقة H2 [BALB / ج (H2K د) في C57BL6 (H2K ب)] الفئران مثلي هند الاطراف زرع. (A) الصف السريرية 0، (ب) الصف السريرية 1 ( C) الصف السريرية 2، (د) الصف السريرية 3، و (E) السريرية الصف 4 رفض، (F) على المدى الطويل على قيد الحياة المزروع (POD 100) تعامل مع costimulالحصار أوجه (antiCD40 ماب + CTLA4Ig) نظام القائم. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل (3)
الشكل 3. H & E تلطيخ من الجلد والعضلات في زرع مسانج (A) وخيفي زرع (ب) على POD 8 وكذلك H & E تلطيخ من قاطع الطريق الجلد والعضلات في زرع مسانج (C) وخيفي زرع على POD 8 (D ) (شريط مقياس: 0.1 ميكرون) الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

أوعية دموية المركب زرع الطعم الخيفي، مثل الطرف العلوي وزرع وجه لإعادة الإعمار من العيوب الأنسجة المدمرة، وقد تطورت كخيار علاجي صالحة لمرضى لا قابلة للتعديل للإجراءات التجميلية التقليدية. التقدم التقني في مجال جراحة الترميمية فضلا عن خبرة واسعة مع مناعة قوية والعلاجات تغييري المناعية في زرع الأعضاء الصلبة، يمكن الآن البقاء على قيد الحياة المزروع على المدى الطويل في هذه الفئة من السكان المريض فريد 3،21. ومع ذلك، آثار جانبية كبيرة من كبت المناعة على المدى الطويل اللازمة لصيانة المزروع والبقاء على قيد الحياة لا تزال تحد من تطبيقها على نطاق أوسع من هذه الحياة تعزيز ولكن المنقذة للحياة، وليس طرائق الترميمية 3،22،23. وعلاوة على ذلك، فإن نجاح VCAs على النقيض من زرع الأعضاء الصلبة يعتمد أيضا على تجديد الوقت المناسب للأعصاب المتلقي في المزروع لإعادة يعصب على حد سواء العضلات عن وظيفة الحركة، وكذلكالمكونات الحسية لمسة والإحساس درجة الحرارة إلى استعادة وظيفة. من وجهة نظر المناعية، كما هو الحال في كل من الطب زرع، والهدف الأسمى في زرع الترميمية هو تحقيق حالة من التسامح التشغيلي السماح للقبول لالمزروع دون الحاجة لفترة طويلة الأجل المناعة صيانة 23. وفي هذا الصدد، تطورت الفأرة لتمثيل الرئيسية في نظام نموذج الجسم الحي في البحوث زرع المناعة لبحث سبل تحقيق مستضد خيفي التسامح معين في الجهاز المناعي سليما. وعلاوة على ذلك، فإن H2 مجمع الماوس يشبه المجمع MHC البشري. وهكذا، الفطرية ومرمزة سلالات الفئران تسمح لنموذج السيناريوهات السريرية للإعدادات المعيشة والجهات المانحة جثي ذات الصلة وغير ذات الصلة عن طريق استخدام درجات مختلفة من مستضد خيفي غير متطابقة من مسانج لمزيج سلالة خيفي تماما. توافر الحيوانات المعدلة وراثيا والحيوانات خروج المغلوب محددة بالإضافة إلى جميعالتحقيق الدودة الحلزونية للأدوار وآثار المسارات الجزيئية الفردية والآليات التنظيمية على قبول المناعة، والرفض من خلال توفير إمكانية تفعيل انتقائية أو استنزاف مكونات الخلية أو البروتين. يقابل ذلك من خلال توافر واسعة من وكلاء التشخيصية والعلاجية (على سبيل المثال، الأجسام المضادة) وضعت بشكل فريد لنظام الماوس لفي التجارب المختبرية والدراسات المجراة 24. عموما، هذه الجوانب تجعل من نظام الفئران "المعيار الذهبي" للأبحاث زرع المناعة الأساسي.

رغم وجود العديد من صغيرة 13،16،18،20،25،26 والحيوانات الكبيرة 14،27-29 نماذج وصفها لVCA كما استعرضت مؤخرا من قبل Brandacher وآخرون. 30 فقط عدد قليل جدا في الواقع ينطبق على البحوث الأساسية المناعية الآلية 16 ، 24،30. ويرجع ذلك إلى أوعية صغيرة من الشريان الفخذي الماوس والوريد، فإنه يتطلب تقدما الجراحية وفائقة ميلالتدريب والمهارات crosurgical لأداء مفاغرة ناجحة كعنصر رئيسي من مثلي زرع هند أطرافهم. في حين تشريح دقيق ودقيق لهياكل تشريحية على النحو المناسب حاسمة في هذا النموذج كما هو الحال في النماذج المنشورة سابقا 20،31،32، وقد أظهرت هذه التقنية صفعة منحنى التعلم أقل حاد مقارنة مع مفاغرة خياطة الأوعية الفرعية ملليمتر 16،25 و لا يمكن أن يتحقق في بضعة أشهر تدريب مع الممارسة اليومية الصارمة. بناء على خبرتنا، سيقوم microsurgeon غير مدربين تحتاج 30 -50 محاولات إجرائية لاكتساب مهارات كافية وموثوق بها لتنفيذ هذا النموذج مع معدلات نجاح عالية. لmicrosurgeon من ذوي الخبرة والمدربين تدريبا عاليا 15-30 محاولات ينبغي أن يكون كافيا لإتقان هذا زرع هند ماوس الاطراف القائمة على كفة انخفاض model.The تعقيد الإجراء المقدمة هنا يتجلى من حقيقة أن هذا النهج يتطلب طول السفينة محدود، وبالتالي تشريح. وجدنا اتخاذ رانه السفن المانحين في الرباط الإربي والأوعية المتلقي على مستوى الأوعية شرسوفية سطحية يوفر مدة كافية، على الرغم من الفكرة السائدة بأن تقنية صفعة يتطلب طول إضافي واسعة لتكون قابلة للتطبيق. على سبيل المثال، يصف احد نهج نشرت في وقت سابق على ضرورة السفن الحصاد المانحة على مستوى الأوعية الحرقفية والأوعية المستلم الخارجية على مستوى الأوعية المأبضية 32. وعلاوة على ذلك، مع تقنية الكفة، أداء مفاغرة يتطلب وقتا أقل مقارنة مع تقنية خياطة ويؤدي إلى خفض وقت التشغيل الكلي. في أيدي ذوي الخبرة، يمكن أن تكتمل كل من الإجراءات المانحة والمتلقية في المتوسط ​​من 90 دقيقة. وهذا يمثل تحسنا كبيرا بالمقارنة مع أساليب ذكرت سابقا الذي مددت كانت مدة التخدير المستفيدة من العوامل الرئيسية للنجاح والبقاء على قيد الحياة المحيطة بالجراحة. مما يجعل ضرورة وجود جراح اثنين نهج شرطا أساسيا 31-33.وعلاوة على ذلك، الحد الأدنى لأي نزيف من مواصلة يساهم مفاغرة إلى انخفاض كبير في فقدان الدم، وبالتالي يقلل من الحاجة للإنعاش السوائل من المتلقين، كما هو موضح سابقا محددا آخر للنجاح في هذا النموذج 33. وأخيرا، تمثل تقنية صفعة طريقة مع ميزة كبيرة في التكاليف مقارنة مع ارتفاع تكاليف 11-0 مواد خياطة صغيرة. وبالتالي، تمثل تقنية غير خياطة صفعة الخطوة الأكثر أهمية من البروتوكول الأساسي. في دراسة أنيقة تونغ وآخرون، ومختلف myo- مختلفة واللوحات osteomyocutaneous بما في ذلك أوعية دموية رفرف الفخذ الجلد وقد وصفت على الخروج من عنيق الماوس الفخذ السفينة 32. في حين أن الطريقة المعروضة هنا يركز حصرا على زرع كامل أطرافهم هند ماوس، والمبادئ المبينة يمكن ترجمتها بسهولة والعاملين في مختلف التصاميم رفرف التشريحية الأخرى. الجدير بالذكر هو حقيقة أنه في حين أن تقرير المؤلفين السابقين automutilationأو الالتهام الذاتي من الكسب غير المشروع نتيجة مضاعفات كبيرة خلال بقاء 31،32 بعد العملية لم يلاحظ هذا في تجربتنا. بالإضافة إلى ذلك، والانتعاش السريع وضعف محدود من قدرة الحيوان من التغذية والنظافة الشخصية، يؤكد على أن أقحم مثلي من الساق المزروعة يلحق سوى الحد الأدنى من الاعتلال المتلقي.

النموذج الذي وصفها في هذا المنشور الفيديو يقدم بالإضافة إلى مزايا واضحة للوضع الماوس بالمقارنة مع التقنيات التي تم نشرها مسبقا. أولا وقبل كل شيء، كما ذكر سابقا من قبل مجموعتنا 16، وتقنية صفعة يمكن أن تستخدم في السفن التي يبلغ قطرها التجويف أصغر من 1 مليمتر، مما يسمح للزرع مثلي لالمزروع أطرافه الخلفية. ويوفر هذا النهج الأساس لتوظيف هذا النموذج جنبا إلى جنب في كل المناعية وكذلك الدراسات الفنية للتجديد العصبية المتعلقة VCA 16،25. العصب تجديد له أهمية أساسية لودرع من زرع الترميمية، لأن هذه هي الإجراءات الادخار على غير الحياة التي يتم تحديدها أساسا عن طريق استعادة عيوب وظيفية وجمالية النجاح.

وأقحم مغاير التوضع من رفرف osteomyocutaneous تنشأ من أطرافهم هند هو نموذج إضافي متاحة للجراح 15. في هذا النهج ولكن، الاستئصال الجراحي للهياكل الفائدة المحتملة، مثل الأظافر والجلد غير المشعر من قاطع الطريق، يحد من براعة هذا الأسلوب مقارنة مع زرع مثلي لالمزروع هند أطرافهم دون تغيير تشريحيا. وهذا هو ذات أهمية خاصة في زرع الترميمية كما وصفت هذه الهياكل كهدف من عمليات الرفض غير نمطية في المرضى الذين يعانون إلحاق إجهاد للالمغايرة أيديهم 34. فريدة بطبيعتها إلى المزروع النسيج المركب أوعية دموية هو العنصر العظام، كما يحتوي على أوعية دموية العظام نخاع العظام قابلة للحياة وهو constantlذ تجديد مصدر من مكونات والسلائف الجهاز المناعي المانحة. في حين أن هذا كان ينظر بحذر كمصدر محتمل للالكسب غير المشروع مقابل المضيف المرض (GvHD)، وهذا لم يلاحظ في كل النماذج الحيوانية 35،36 فضلا عن البشر 37. كثيرا على العكس من ذلك في الواقع، كما هو مبين في الدراسات قبل السريرية والسريرية 36 38-40، والجمع بين زرع الأعضاء مع زرع نخاع العظم المانحة أو نقل العظام منتجات مختارة الخلية المستمدة من نخاع يظهر في الواقع آثار مفيدة فيما يتعلق بكمية المناعة اللازمة 21 . وقد أظهرت بعض البروتوكولات حتى التسامح التشغيلية دون الحاجة إلى تثبيط المناعة القائم على المخدرات 41.

نموذج ومنهجية يتضح من هذا المنشور حققت 100٪ على المدى الطويل البقاء على قيد الحياة الحيوانية في المانحة مسانج - مجموعات المستفيدة (الشكل 1)، وكذلك أظهرت أنماط جيدا اتسم من accepta الكسب غير المشروعالامتحانات التنافسية الوطنية والرفض في مجموعات سلالة خيفي كما هو موضح في الشكلين 2 و 3. وعلاوة على ذلك، والجلد كهدف أساسي واضح على رفض في VCA، يتبع نمطا استنساخه من 4 سيناريوهات سريرية مختلفة من رفض الربط مع تلك الخاصة VCA الإنسان كما حددها تصنيف العمل بانف 2007 VCA 42، مما يجعل هذا النموذج للترجمة وخاصة التي تحتوي على الجلد. وهكذا، وهذا نموذج الفأر موثوق بها للغاية لزرع الترميمية قبل كل شيء، يقدم توفر نظام نموذجي المناعية تنوعا من سلالات الفئران محددة وراثيا الفطرية والمعدلة وراثيا والذي يفتح الاحتمالات عن الدراسات التشخيصية والتداخلية مع تأثير متعدية على VCA السريري.

الحاجة إلى المهارات الأساسية المجهرية قبل الشروع في اتقان تقنية وصفها ويمكن اعتبار وجود قيود لهذا النموذج، ومع ذلك، فإنه هو نفسه العقبة الرئيسية أمام أي نموذج الفأر المجهرية. الخميسالصورة، يهدف هذا البروتوكول الفيديو في المقام الأول إلى توفير microsurgeon محنك مع نهج بديل للالتحام الاوعية الدموية الدقيقة في الفئران في نموذج الجسم الحي لزرع الطعم الخيفي مركب أوعية دموية. وعلاوة على ذلك، فإن النموذج يسمح للزرع عنصر نخاع العظام أوعية دموية سليمة، فضلا عن استخدام نموذج وظيفي في مجال البحوث تجديد الأعصاب.

وفي الختام، أنشأنا رواية، وتنوعا، ونموذج الفأر يمكن الاعتماد عليها لزرع أطرافه الخلفية مثلي باستخدام تقنية صفعة غير خياطة، الذي يفتح الباب لميكانيكي الأساسية، فضلا عن البحوث متعدية تتعلق بأي جانب من جوانب VCA.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Acknowledgments

وأيد هذا العمل من قبل الجيش والبحرية والمعاهد الوطنية للصحة، والقوات الجوية، VA والشئون الصحية لدعم جهود AFIRM الثاني، تحت رقم جائزة W81XWH-13-2-0053. الجيش الأمريكي للبحوث الطبية اقتناء آخر، 820 شارع تشاندلر، فورت ديتريك MD 21702-5014 هو منح وإدارة المكاتب الاستحواذ. الآراء والتفسيرات والاستنتاجات والتوصيات هي آراء الكاتب ولا أيدت بالضرورة من قبل وزارة الدفاع.

فإن الكتاب أود أن أشكر جيسيكا العزي، طبيب بيطري، كارولين غاريت، طبيب بيطري وجولي واتسون، طبيب بيطري لدعم البيطري الممتاز خلال هذه الدراسة.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Suture, 6-0 Nylon MWI 31849
Suture, 6-0 Polysorb MWI 72667
Suture, 10-0 Nylon Aero Surgical TK-107038
Polyimide Tubing, Size 25 Vention Medical 141-0023
Polyimide Tubing, Size 27 Vention Medical 141-0015
Microvascular Clamps (Single) Synovis 00396
Microvascular Clamps (Double) Synovis 00414
Micro-Scissors Synovis SAS-18
Micro-Forceps Synovis FRS-15 RM-8
Micro-Dilators Synovis FRS-15 RM-8d.1
Micro-Needledriver Synovis C-14
Micro-Clamp Applicator Synovis CAF-4
Micro-Flushing Needle Hamilton 10MM, 30°, 33G
Lactated Ringers Solution Fisher Scientific NC9968051
Buprenorphine DEA Number required; Obtained from hosptial pharmacy.
Enrofloxacin; Baytril Bayer Health Care 186599
Heparin Obtained from hosptial pharmacy

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Khalifian, S., et al. Facial transplantation: the first 9 years. Lancet. , (2014).
  2. Petruzzo, P., Dubernard, J. M. The International Registry on Hand and Composite Tissue allotransplantation. Clin. Transpl. , 247-253 (2011).
  3. Shores, J. T., Brandacher, G., Lee, W. A. Hand and Upper Extremity Transplantation: An Update of Outcomes in the Worldwide Experience. Plast. Reconstr. Surg. , (2014).
  4. Levi, D. M., et al. Transplantation of the abdominal wall. Lancet. 361, 2173-2176 (2003).
  5. Strome, M., et al. Laryngeal transplantation and 40-month follow-up. N.Engl.J. Med. 344, 1676-1679 (2001).
  6. Rose, K. G., Sesterhenn, K., Wustrow, F. Tracheal allotransplantation in man. Lancet. 1, 433 (1979).
  7. Hofmann, G. O., et al. Allogeneic vascularized transplantation of human femoral diaphyses and total knee joints--first clinical experiences. Transplant. Proc. 30, 2754-2761 (1998).
  8. Hu, W., et al. A preliminary report of penile transplantation. Eur. Urol. 50, 851-853 (2006).
  9. Brannstrom, M., et al. Livebirth after uterus transplantation. Lancet. , (2014).
  10. Sarhane, K. A., et al. Diagnosing skin rejection in vascularized composite allotransplantation: advances and challenges. Clin. Transplant. 28, 277-285 (2014).
  11. Schneeberger, S., Khalifian, S., Brandacher, G. Immunosuppression and monitoring of rejection in hand transplantation. Tech. Hand Up. Extrem. Surg. 17, 208-214 (2013).
  12. Lee, W. P., et al. Relative antigenicity of components of a vascularized limb allograft. Plast. Reconstr. Surg. 87, 401-411 (1991).
  13. Sucher, R., et al. Hemiface allotransplantation in the mouse. Plast. Reconstr. Surg. 129, 867-870 (2012).
  14. Ibrahim, Z., et al. A modified heterotopic swine hind limb transplant model for translational vascularized composite allotransplantation (VCA) research. J Vis Exp. , (2013).
  15. Oberhuber, R., et al. Murine cervical heart transplantation model using a modified cuff technique. J Vis Exp. , (2014).
  16. Sucher, R., et al. Mouse hind limb transplantation: a new composite tissue allotransplantation model using nonsuture supermicrosurgery. Transplantation. 90, 1374-1380 (2010).
  17. Maglione, M., et al. A novel technique for heterotopic vascularized pancreas transplantation in mice to assess ischemia reperfusion injury and graft pancreatitis. Surgery. 141, 682-689 (2007).
  18. Sucher, R., et al. Orthotopic hind-limb transplantation in rats. J Vis Exp. , (2010).
  19. Zou, Y., Brandacher, G., Margreiter, R., Steurer, W. Cervical heterotopic arterialized liver transplantation in the mouse. J. Surg. Res. 93, 97-100 (2000).
  20. Zhang, F., et al. Development of a mouse limb transplantation model. Microsurgery. 19, 209-213 (1999).
  21. Schneeberger, S., et al. Upper-extremity transplantation using a cell-based protocol to minimize immunosuppression. Ann. Surg. 257, 345-351 (2013).
  22. Azari, K., Brandacher, G. Vascularized composite allotransplantation. Curr Opin Organ Transplant. 18, 631-632 (2013).
  23. Pomahac, B., Gobble, R. M., Schneeberger, S. Facial and hand allotransplantation. Cold Spring Harb. Perspect. Med. 4, (2014).
  24. Chong, A. S., Alegre, M. L., Miller, M. L., Fairchild, R. L. Lessons and limits of mouse models. Cold Spring Harb. Perspect. Med. 3, a015495 (2013).
  25. Lin, C. H., et al. The neck as a preferred recipient site for vascularized composite allotransplantation in the mouse. Plast. Reconstr. Surg. 133, 133e-141e (2014).
  26. Shapiro, R. I., Cerra, F. B. A model for reimplantation and transplantation of a complex organ: the rat hind limb. J. Surg. Res. 24, 501-506 (1978).
  27. Leto Barone, A. A., et al. The gracilis myocutaneous free flap in swine: an advantageous preclinical model for vascularized composite allograft transplantation research. Microsurgery. 33, 51-55 (2013).
  28. Mathes, D. W., et al. A preclinical canine model for composite tissue transplantation. J. Reconstr. Microsurg. 26, 201-207 (2010).
  29. Barth, R. N., et al. Prolonged survival of composite facial allografts in non-human primates associated with posttransplant lymphoproliferative disorder. Transplantation. 88, 1242-1250 (2009).
  30. Brandacher, G., Grahammer, J., Sucher, R., Lee, W. P. Animal models for basic and translational research in reconstructive transplantation. Birth Defects Res C Embryo Today. 96, 39-50 (2012).
  31. Foster, R. D., Liu, T. Orthotopic hindlimb transplantation in the mouse. J. Reconstr. Microsurg. 19, 49 (2002).
  32. Tung, T. H., Mohanakumar, T., Mackinnon, S. E. Development of a Mouse Model for Heterotopic Limb and Composite-Tissue Transplantation. J. Reconstr. Microsurg. 17, 267-274 (2001).
  33. Zhang, F., Shi, D. Y., Kryger, Z., Moon, W. Development of a mouse limb transplantation model. Microsurgery. 19 (5), 209-213 (1999).
  34. Schneeberger, S., et al. Atypical acute rejection after hand transplantation. Am. J. Transplant. 8, 688-696 (2008).
  35. Mathes, D. W., et al. Stable mixed hematopoietic chimerism permits tolerance of vascularized composite allografts across a full major histocompatibility mismatch in swine. Transpl. Int. 27, 1086-1096 (2014).
  36. Yamada, Y., et al. Use of CTLA4Ig for induction of mixed chimerism and renal allograft tolerance in nonhuman primates. Am. J. Transplant. 14, 2704-2712 (2014).
  37. Sachs, D. H., Kawai, T., Sykes, M. Induction of tolerance through mixed chimerism. Cold Spring Harb. Perspect. Med. 4, a015529 (2014).
  38. Kawai, T., et al. HLA-mismatched renal transplantation without maintenance immunosuppression. N. Engl. J. Med. 358, 353-361 (2008).
  39. Kawai, T., Sachs, D. H. Tolerance induction: hematopoietic chimerism. Curr Opin Organ Transplant. 18, 402-407 (2013).
  40. Kawai, T., Sachs, D. H., Sykes, M., Cosimi, A. .B. HLA-mismatched renal transplantation without maintenance immunosuppression. N. Engl. J. Med. 368, 1850-1852 (2013).
  41. Leventhal, J., et al. Chimerism and tolerance without GVHD or engraftment syndrome in HLA-mismatched combined kidney and hematopoietic stem cell transplantation. Sci. Transl. Med. 4, 124-128 (2012).
  42. Cendales, L. C., et al. The Banff 2007 working classification of skin-containing composite tissue allograft pathology. Am. J. Transplant. 8, 1396-1400 (2008).

Tags

الطب، العدد 108، الفأر، أوعية دموية المركب زرع الطعم الخيفي، هند الاطراف زراعة، علم المناعة، غير خياطة قميص تقنية
مثلي هند الاطراف زرع في ماوس
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Furtmüller, G. J., Oh, B.,… More

Furtmüller, G. J., Oh, B., Grahammer, J., Lin, C. H., Sucher, R., Fryer, M. L., Raimondi, G., Lee, W. P. A., Brandacher, G. Orthotopic Hind Limb Transplantation in the Mouse. J. Vis. Exp. (108), e53483, doi:10.3791/53483 (2016).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter