Summary
이 원고 작성 및 복 부 복 부 벽의 결함 (탈 장)의 수리와 관련 된 방법을 설명 합니다. 이 모델은 이식된 재료를 사용 하는 복구 전략을 공부를 사용할 수 있습니다. 이 원고에 돼지 작은 창 자 submucosa와 실험 탈의 복구 예로 제공 됩니다.
Abstract
복 부 복 부 헤 르 니 아 가끔 필요한 herniorraphy (외과 수리) 상대적으로 일반적인 임상 상태 이다. 복 부 복 부 헤 르 니 아 수리는 일반적으로 복 부 벽의 결함에 걸쳐 기계 다리 역할을 물자의 주입을 요구 한다. 또한 돼지 작은 창 자 submucosa (SIS) 등 생체 이식으로 세포 성장에 대 한 격자 역할 하 고 호스트 조직으로 자연스럽 게 통합할 수 있습니다. 이러한 수리 자료의 개발 동물 모델 실험 복 벽 결점 쉽게 만들 수 있습니다 및 받을 재현 방식에서 복구의 사용에서 혜택. 여기 제공 하는 메서드 외과 생성 및 쥐 모델에서 복 부 복 부 헤 르 니 아의 복구에 설명 합니다. SIS는이 모델에는 실험 복 부 복 부 탈 장 복구 하는 데 사용 됩니다 때 그것 빠르게 주입의 28 일 안에 호스트 조직에 통합 됩니다. 조직학, 강력한 fibrovascular 응답 호스트 조직으로 그들의 이식된 재료의 설립 특징 이다. 미래 수정 및 쥐 복 부 헤 르 니 아 모델의 응용 가능성이 남자의 더 긴밀 하 게 모방 일반적인 공동 morbidities 수단으로 당뇨병 또는 비만 동물 포함할 수 있습니다.
Introduction
복 벽 탈 장 선 천 성 결함, 외상 성 부상, 또는 복 벽을 포함 하는 수술 상처의 실패 한 폐쇄의 결과로 발생할 수 있는 일반적으로 부닥친된 임상 문제입니다. 수리는 일반적으로 환자 누구에 복 벽은 봉합으로 단순히 폐쇄 한다 그에 비해는 임 플 란 트 치료에 재발의 감소 속도와 복 벽을 강화 하는 임 플 란 트를 사용 하 여 포함 한다. 1
외과 탈 장 복구는 종종 기계 다리 이식 소재 결함의 필요 합니다. 이와 관련, 합성 및 천연 재료 탈 장 복구에 대 한 사용 되었습니다. 많은 합성 물질은 일반적으로 비 흡수 및 다른 합성 임 플 란 트 결합 비 흡수 재료 중 하나는 흡수 하는 동안 폴 리 프로필 렌, 폴 리 에틸렌 테 레프 탈 산 폴 리 에스테 르, 그리고 확장 된 소계를 포함 polygalactine와 같은 중합체. 1 반면, 자연 소재 임 플 란 트 일반적으로에서 파생 된다 동물 또는 인간 시체 소스. 헤 르 니 아 수리를 위해 사용 하는 천연 재료는 일반적으로 콜라겐 풍부 그리고 ingrowth와 호스트 조직 통합에 대 한 비 계 행동.
개발 하 고 복 부 복 부 탈 장 복구에 대 한 새로운 자료 최적화 욕망 후보 재료의 평가 대 한 적절 한 동물 모델을 필요 합니다. 연구 종, 양, 돼지2 ,3 토끼,4 쥐,5,6,,78 개 등의 다양 한에서 실시 되었습니다. 9 는 쥐를 사용 하 여 이러한 연구의 장점은 그들은 쉽게 처리 모델 유전 가변성의 제어를 위한 수 있도록 타고 난된 종자의 다양 한에서 사용할 수 있는 제공. 더 작은 전반적인 바디 표면 영역 위에 나열 된 다른 종에 비해 쥐의 자연 속에서 실험 될 수 있는 자료의 평가 허용 하는 또한, 그리고, 그러므로, 풍부 하지. 다른 종 대 쥐와 관련 된 추가, 감소 비용 상대적으로 증가 수의 복 부 복 부 탈 장 복구에 사용 하기 위해 화면 후보 물질에 대 한 수 있습니다. 자료에 대 한 고려 사항 일반적으로 외과 의사, 강도, 호스트 조직, 생체 적합성, 그리고 감염에 저항으로 통합 하는 능력으로 취급의 용이성을 포함 합니다.
예를 들어, 돼지 작은 창 자 submucosa (SIS)는 자연 소재 복 부 사 타 구니, 복 부, 횡 격 막 탈 장 복구를 포함 하 여 조직의 복구 표시의 다양 한 사용 되었습니다. 10 , 11 , 12 SIS 호스트 조직으로 급속 하 게 통합 됩니다 및 일반적으로 감염에 저항력이 발견 되었습니다 고 그래서 재료 오염된 분야에서 특정 유틸리티를 있다. 13 , 14 쥐 모델에서 SIS 단축 인장 오류 테스트, 콜라겐 증 착 및 neovascularization 조직 ingrowth의 승진에 의해 결정으로 좋은 인장 강도 취급의 용이성을 시연 하고있다. 6 , 7
결함의 정확한 수술 브리징 후보 복구 자료를 평가할 때 생산적인 모델링의 필수적인 기능입니다. 동물 충분히 마 취 및 무 균 기술은 엄격 하 게 따라 해야 합니다. 또한, 표준 크기의 복 벽 결점 신중 하 게 작성 하 고 다리를 충분히 보호 하는 결함의 여백에 소재 하는 방식으로 될 해야 합니다. 8 이 프로토콜 예를 들어 쥐에서 브리징 SIS를 사용 하 여 복 부 복 부 탈 장 수술 생성 및 복구, 따라야 하는 표준 방법을 제공 합니다.
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Protocol
이 프로토콜에는 동물의 사용 노 틀 담 기관 동물 관리 및 사용 위원회의 대학에 의해 승인 되었다, 모든 규정 및 지침, 그리고 공인 시설에서 실시 된 평가 및 실험실 동물 배려 (AAALAC), 국제 인증 협회.
1. 동물의 선택
- 평판 공급 업체 또는 서식 지에서 취득 병원 체 무료 Sprague Dawley 쥐.
참고: 종종, 시설 수 의사 또는 관리자 수 직접 해당 소스를 조사 합니다. 약 250 g 몸 무게의 쥐가이 절차에 대 한 적합. - 수술 전에 1 일 임상 건강 다는 것을 확인 하는 데 사용 될 동물을 검사 합니다. 이와 관련, 동물의 무게와 몸 상태; 호흡, 열려 있는 상처 나 대 중, 그리고 동물의 일반적인 활동 수준에에서 어떤 이상이 note 수술 기록에 어떤 이상이 고 잠재적인 제외 기준으로 같은 관측을 고려 하십시오.
2. 마 취 및 무 균 수술에 대 한 동물의 준비
- 진통, 쥐 전에 수술. 양쪽 눈을 적용 안과 연 고 2 h에 지속적인된 출시 buprenorphine의 1.1-1.2 mg/kg을 피하 관리 및 관리 2 mL의 멸 균 생리 식 염 수를 피하 따뜻하게.
- Anesthetize 케 타 민 염 산 염 (90mg/kg) 및 xylazine (10 mg/kg)의 복 복용량 쥐. 각 막 dessication를 방지 하기 위해 각 눈에 눈 윤활제의 작은 금액을 적용. 일단 동물 ’ s 호흡은 꾸준한 및 회사 발가락 핀치에 어떤 응답은 더 이상, 쥐에는 마 취 수술에 대 한 충분 한 수준에 도달 했습니다. 마 취의 수락 가능한 수준을 더 깊은의 존재에 의해 확인 될 수 있다 일반 호흡과 눈 (대 창백, 부적당 한 심장 혈관 관류를 제안할 수 있는)의 정상적인 색상.
- 상업용 클리퍼 스는 ventrum에 측면 여백 및 흉 골을 치 골에서 함께 복 부 복 부를 면도. 축축한 종이 수건 지역에 적용 하 여 잘린된 머리를 제거.
- 스크럽 70% 에탄올으로 닦아 뒤를 iodophor 살 균으로 면도 지역. 창 절 개에 대 한 잠재적인 오염 으로부터 격리 될 수 있도록 수술 커튼 적용.
- 돈 메 마른 외과 용 가운, 얼굴 마스크, 머리 보 닛. 철저 하 게 세척 하 고 스크럽 비누와 돈 메 마른 외과 장갑 손을.
3. 생성 및 복 부 복 부 헤 르 니 아 수리
- 수술 전에 압력솥으로 수술 기구를 소독.
- 게 메스를 사용 하는 약 3-4 cm 세로 절 개 복 부 중간 복 부 근육의 수준에 따라. 복 부 벽 부드럽게는 집게와 고는 교육을 통해 작은 여 만듭니다 알바. 기본 내장을 보호 하기 위해 삽입 구멍을 통해 그리고 근육 벽 만드는 베로 보호 가이드 역할을 복 부 구멍으로 집게를 약 2 cm x 2 cm 전체 두께 결함, 양쪽에서 대략 1 cm 옆 절단 교육의 양쪽 끝에 중간의 알바 절 개.
- 결함을 놓고 소재의 기계적 브리징,이 경우 (그림 1), 4 층 SIS 미리 잘라 2 cm x 2 cm 섹션.
참고: 또는, 언더레이 접근 방식을 사용할 수 있습니다 재료의 단면 배치 됩니다 복 부 구멍으로 인테리어 측면에서 결함을 커버. - 봉합 간단한 중단된 봉합 패턴에 4-0 실크 또는 나일론을 사용 하 여 복 벽 근육에 소재는 브리지의 네 모퉁이.
참고: 비 흡수 봉합 사를 사용 하 여 허용 흡수 되기 쉬운 봉합 사 물자 대 수확 시 이식된 재료의 쉽게 식별. - 동등 하 게 간격을 둔 3 개의 추가 봉합 재료의 각 가장자리를 보안 합니다. 복 벽을 통해 내장의 통과 수 있도록 상당한 간격이 존재 하지 않습니다 보장 하기 위해 전체 원주 지 검사 그리고, 이러한 간격이 존재 하는 경우 배치 더 마진을 확보 하 여 추가 봉합.
- 간단한 중단된 패턴에 4-0 흡수 봉합과 피하 조직을 닫습니다. 간단한 중단된 패턴에 적용 하는 봉합도 사용할 수 있습니다 하지만 수술 스테이플, 피부를 닫습니다.
- 방치 하지 마십시오 동물 sternal recumbency;을 회복 하기 위해 충분 한 의식 회복 될 때까지 겪은 다른 동물의 회사를 수술 마 취에서 완전히 복구 되었습니다 때까지 동물을 반환 하지 않는. 이 시간 동안 저체온증을 방지 하기 위해 따뜻한 지역에 동물 유지.
- 검사 동물 매일이 절차를 전체 복구 및 정상적인 치유 받은 그. 수술 후 7-10 일 스테이플 리무버로 피부 스테이플을 제거.
4. 이식 재료의 수확
- 일관성 연구의 요구를 안락사, 이산화탄소 과다 한 챔버에 관리와 채우기 비율 10 ~ 30%, 자주 21-미리 정해진된 시간에 동물의 수술 후 28 일.
- 표준 검 시 도구를 사용 하 여, 피부와 복 부 벽 열고 플 영역을 노출.
참고: 비 흡수 봉합은이 식을 확보 하는 데 사용 했다, 하는 경우 자료로 확인할 수 있습니다 원래 봉합 (그림 2). - 어떤 불리 한 반응 (예를 들어, 상처 dehiscence, 농 양, seroma, 혈 종)와 접착 범위와 기본 내장 끈기를 포함 하 여 어떤 심한 병 적인 관찰 관찰.
- 는 임 플 란 트를 포함 하는 조직의 다양 한 부분을 절단 하 여 임 플 란 트 사이트를 제거 합니다. 10% 중립 버퍼링 된 포 르 말린, 조직학 검사 및 특성화에 대 한 처리에 대 한 준비 등 정착 액에 샘플 배치.
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Representative Results
이식 후 28 일 SIS는 일반적으로 호스트 조직 (그림 2)으로 좋은 법인을 보여 줍니다. 대부분의 경우, 잔여 SIS 명백한, 비록은 조직 이식된 재료를 식별 하 탐험 자주 해야 합니다. 조직학 분석 주로 fibrovascular 조직 및 아주 작은 잔여 SIS 지적 했다 (그림 3) 좋은 조직 설립을 보여주는 총 병 적인 관측을 확인 했다. 이러한 결과 쥐 복 부 복 부 헤 르 니 아 모델의 유틸리티를 보여 줍니다. 쥐 쉽게 획득 하 고 유지 하 고, 일반적으로 수술 후 신속 하 게 복구 하 고. 이식된 소재에 조직 설립 생체 적합성을 나타내고 SIS 조직 ingrowth 위한 격자 역할을 하 고 복구의 기능을 보여 줍니다. 실질적인 조직 설립과도 플 사이트는 복 부 벽에 자료를 확보 하는 데 사용 하는 봉합에 의해 쉽게 식별할 수 있습니다. 그 결과, 헤 르 니 아 수리 자료는 일관 되 고 상대적으로 신속한 방식으로 평가할 수 있습니다.
그림 1: 2의 실험 복 부 복 부 헤 르 니 아 수리를 위해 사용 하는 SIS의 2 cm 섹션 x. SIS 소재는 돼지 작은 창 자 submucosa에서 파생 한 acellular 기질. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 2: SIS 통합 28 일 쥐에 복 부 복 부 헤 르 니 아 다리 이식 후. 안락사, 다음 복 부 복 부 피부는 SIS를 확보 하는 데 사용 하는 실크 봉합에 의해 설명 하는 이식된 재료 노출에 반영 되었다. 참고 SIS로 조직의 ingrowth 이식 호스트 조직으로 통합 되었습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 3: 조직의 Photomicrograph 28 일 SIS 실험 복 부 복 부 탈 장 다리의 주입 다음. SIS는 크게 호스트 조직으로 통합 되었습니다. 화살표 섹션에서 잔여 SIS의 매우 작은 가닥을 표시 (H & E, 40 X). 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
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Discussion
특히 그는 초기 기계 다리를 제공 하 고 호스트 조직으로 통합 하는 큰 관심 복 부 복 부 탈 장 복구에 대 한 자료입니다. 이와 관련, 재료의 다양 한 있다 조사, SIS, 돼지 심장, 돼지 acellular 피부 매트릭스, 등. 6 , 7 이러한 자료의 그 조직 세포 외 매트릭스 나타내고 건설 기계는 세포 마이그레이션할 수 및 증식, 조직 설립을 촉진 역할.
헤 르 니 아 수리 재료의 평가 동물 모델을 쉽게 처리할 수 있으며 그대로 치유 능력을 필요 합니다. 쥐 복 부 헤 르 니 아 모델 수리 재료 비보를 평가 하기 위해 연구에 취급의 용이성에 대 한 수 있습니다. 그것은이 모델 이식된 탈 장 수리 재료를 호스트 응답의 조직학 비교 평가 대 한 사용할 수 입증 되었습니다. 6 이것은 생체 재료, SIS, 같은 복구 메커니즘의 일환으로 호스트 조직으로 정 관 수술을 위해 특히 필수적 이다.
쥐 복 부 복 부 헤 르 니 아 수리 모델 재현성 방식으로 쉽게 수행할 수 있습니다. 적절 한 무 균 기술을 오염 된 수술 필드 치료 응답을 변경할 수 있고 실험 결과의 해석에 따라서 복잡 하 게, 성공을 위해 필수적 이다. 15 여기서 설명 하는 프로토콜은 개별 동물 수술 경험이 성공적으로 탈 창조를 요구 하는 연구를 수행 하는 방법을 제공 하 고 복구 하도록 설계 되었습니다.
여기에 설명 된 절차 복구 자료는 복 부 벽의 외부 가장자리에 연결 지출 접근을 포함 한다. 그것은 또한 수리 재료 결함의 내부 측면에 연결 하는 속지 접근을 사용 하 여입니다. 메쉬를 통해 복 강경 수술 탈 장 수리 일반적으로 속지 방식으로 이루어집니다. 속지 메서드 수 있습니다 복 부 내장으로 임 플 란 트의 큰 직접 접촉을 따라서 다소 임 플 란 트와 내장 사이 adhesiogenesis의 가능성을 증가. 수술 후 유착 형성에 중요 한 임상 문제 이므로 속지 접근을 사용 하 여 밀접 하 게 adhesiogenesis를 검사 하고자 하는 연구 하실 수 있습니다.
비록 쥐가 일반적으로 매우 신속 하 게 수술 다음 복구, 수술 합병증에 대 한 몇 가지 가능성이 존재 합니다. 예를 들어 일부 쥐 피부 봉합, 심지어 스테이플 제거 됩니다. 절 개 상처 오픈 되 면 쥐 한다 안락사 하거나 다시 취 고 피부 폐쇄. 비록 드문, 피부와 복 부 벽 오픈 간격을 발견 하는 경우는 동물을 안락사 해야 한다. 이러한 모든 경우에 참석 수 의사 같은 동물의 즉시 형성 해야 한다.
여기에 설명 된 모델 이전에 표시 된 대로 많은 장점이 있다. 그러나, 그것은 쥐, 등 quadraped에서 복 부 복 부 헤 르 니 아의 모델링 사람에 게 번역 제한 인식 되어야 한다. 또한, 많은 임상으로 관련 된 탈 장 당뇨병, 비만, 등 결합 조직 결함 공동 morbidities 연결 될 여겨진다, 때문에 정상적인 동물에서 복구 전략의 평가의 변환 값 복잡 수는 모델입니다. 그럼에도 불구 하 고, 쥐 모델 헤 르 니 아 수리 재료의 상대적으로 신속 하 고 쉽게 평가 수 있습니다.
미래 수정 및 쥐 복 부 헤 르 니 아 모델의 응용 가능성이 남자의 더 긴밀 하 게 모방 일반적인 공동 morbidities 수단으로 당뇨병 또는 비만 동물 포함할 수 있습니다. 마찬가지로, 조직 복구를 돕기 위해 유도 만능 줄기 세포 방법의 평가이 모델에서 유틸리티를 찾을 가능성이 것입니다.
이 모델의 성공적인 사용을 위한 중요 한 단계는 동물 및 수술 기술 들 가운데에 있습니다. 무 균 기술 감염의 기회를 최소화 하는 방법으로 사용 되어야 한다. 적절 한 마 취와 무 통 수술 동물 편안 하 고 수술 절 개 폐쇄 남아 되도록 모니터링 뿐 아니라 필수, 있습니다. 중요 한 것은 때 복 벽 결점의 가장자리에 소재 확보, 외과 의사는 피하 공간으로 복 부 내장의 통행을 허용할 수 없는 채용과 모든 가장자리는 보안 설정 해야 합니다.
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Disclosures
저자 (CJ) 중 쿡 생명 공학, Inc., 의료 학년 누나의 제조 업체에 의해 채택 된다.
Acknowledgments
저자가이 작품의 기술적 측면에 대 한 그녀의 지원에 대 한 발레리 슈뢰더를 감사 하 고 싶습니다. 이 모델의 개발에 관련 된 일 쿡 생명 공학, Inc. (웨스트 라파예트, 인디애나 미국)에 의해 지원 되었다.
Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Isoflurane (Isoflo) | Henry Schine Animal Health | 17579 | gas anesthetic |
Optixcare Eye Lubricant | Henry Schine Animal Health | OPX4240 | Ocular lubricant |
Oster clippers | Henry Schine Animal Health | 6092 | hair clippers |
Betadine surgical scrub | Henry Schine Animal Health | 1618 | antiseptic iodophor |
Sterile scalpel | Henry Schine Animal Health | 329 | #10 scalpel |
9" x 12" disposable surgical drape | Braintree Scientific, Inc. | SP-RPS | Surgical drape |
4-0 nylon suture | Braintree Scientific, Inc. | SUT 812 | Suture material |
4-0 Absorbable Suture | Henry Schine Animal Health | 29242 | Synthetic absorbable suture |
9 mm Autoclips and applier | Braintree Scientific, Inc. | ACS KIT | Surgical staples for closure of skin incision |
Torbugesic/analgesic | Henry Schein Animal Health | 12084 | Butorphanol tartarate for post-operative analgesia |
Small intestinal submucosa (SIS) | Cook Biotech, Inc. | Implant material for bridging experimental abdominal wall defect | |
Rats | Harlan, Inc. | Sprague Dawley | Animal for hernia modeling |
References
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