Summary
anestezi domuzlarda tekrarlanan akciğer lavaj insan akut solunum sıkıntısı sendromu (ARDS) önemli yönlerini benzeyen akciğer hasarı neden olur. Bu amaçla, akciğerler, art arda 37 ° C'de% 0.9 tuzlu su ile yıkanır. Protokolün amacı, ARDS araştırma için gaz değişimi ve hemodinamik tekrarlanabilir hafifletme olduğunu.
Abstract
akciğer hasarının çeşitli hayvan modelleri insan akut solunum sıkıntısı sendromu (ARDS) karmaşık patomekanizmaların incelemek ve gelecekteki tedavileri değerlendirmek için var. pulmoner gaz değişimi ve hemodinamik tekrarlanabilir bozulma ile ciddi akciğer hasarı tekrarlanan akciğer ısındı% 0.9 serum fizyolojik ile lavaj (50 ml / kg vücut ağırlığı) kullanılarak anestezi domuzlarda uyarılabilir. Bu modelde klinik uygulanan cihazlarla standart solunum ve hemodinamik izleme de dahil olmak üzere yeni tedavi stratejileri (ilaçlar, çağdaş vantilatör, ekstrakorporeal membran oksijenatörlerinin, ECMO) değerlendirilmesine olanak verir ve tezgah ve Yatağımın arasında köprüdür. Ayrıca, akciğer lavaj akciğer hasarı oluşturulduktan pro- ve anti-enflamatuar sitokinlerin ölçümlerine patojen / endotoksinler bu etkinin enjeksiyon gerektirmez. Modelin bir dezavantajı atelektazik akciğer dokusunun yüksek recruitability olup. Modelin Standardizasyon c sağlamak için, tuzaklardan kaçınmak için yardımcı olurdeneyler arasında omparability ve ihtiyaç duyulan hayvan sayısını azaltmak için.
Introduction
Insan akut solunum sıkıntısı sendromu (ARDS) mortalitesi yoğun araştırma fazla 4 yıl olmasına rağmen 40 ve 50% 1 arasında değerler ile yüksek kalır. akciğer hasarı Hayvan modelleri ölümlerini azaltmak ve uzun vadeli engelli sınırlamak için karmaşık patomekanizmaların veya yeni tedavi yaklaşımlarını araştıran önemli bir rol oynamaktadır.
Çeşitli modeller büyük (örneğin domuzlarda) ya insan ARDS veya küçük hayvanlar (örneğin kemirgenler) yönlerini taklit akciğer hasarı ikna etmek için kurulmuştur. Yöntem oleik asit, pulmoner arter için enfüzyon, bakteri intravenöz (IV) infüzyon ve endotoksinler ya da çekal bağlama ve sepsisi uyaran ARDS neden lastik (CLP) modeli dahil olmak üzere, güçlü bir şekilde farklıdır. Buna ek olarak, büyük tidal hacimler ve yüksek tepe inspiratuar basıncı (ventilatör kaynaklı akciğer hasarı; VILI) doğrudan akciğer yaralanması, duman / yaralanmaları veya akciğer iskemi / reperfüzyon yanmak (I / R) modelleri sıklıkla kullanılır2. Endotoksin ile çalışan CLP model yanı sıra modelini önemli bir dezavantajı, sadece akciğer yaralanmasına bağlı biyotravma analizi engellemektedir yatan iltihabıdır. büyük hayvanlarda VILI olduğu gibi Ayrıca, akciğer hasarı sonuçlanması saatler ya da günler alabilir.
Tekrarlayan akciğer lavaj ile yüzey aktif madde ile yıkanmaya akciğer hasarı indüksiyonu, ilk Lachmann et al tarafından tarif edildiği gibi. Kobaylarda 3, yeniden üretilebilir, fonksiyonel ve mekanik uzlaşma, hem de pulmoner vasküler direnç değişiklikleri ile akciğer hasarı uyarılması için bir zaman etkili bir yöntemdir. Gaz değişimi ve hemodinami de tavizler aynı anda 4 derece tekrarlanabilir ise bu modelin adaptasyon mekanik yaklaşık 30-60 kg vücut ağırlığı domuz havalandırmalı için, klinik olarak kullanılan mekanik vantilatör, kateterler ve monitör ile temel araştırmaları destekler. Buna ek olarak, lavaj ile akciğer hasarı indüksiyon değilBüyük hayvanlarda deneyler için tasarlanmış solunum laboratuarlarında yaygın olarak mevcut değildir özel ekipman gerektirir. Bu makalede sunulan model insanlarda kullanım için tasarlanmış, ve ayrıca akciğer fonksiyonunda oluşan bozulma yüksek tekrarlanabilirliği sağlanır bir araştırma gerektiren ekipman (ör fanlar) için uygundur. Bu modelin standardizasyon gerekli hayvan sayısını deneyler arasındaki karşılaştırılabilirlik sağlamak ve azaltmaya yardımcı olur. kasıtlı veya bilinmeyen işe manevraları ile atelektazik akciğer bölgelerinin potansiyel recruitability bu özel modelin ciddi bir sınırlamadır. Aşağıdaki yazıda akciğer hasarı indüksiyonu için lavaj modelinin detaylı bir açıklamasını vermek ve akciğer fonksiyonlarında uzlaşmalar istikrarı karakterize etmek temsili veri sağlar.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Deneyler Deneysel Tıp, Charité Bölümü yürütülmüştür - Universitätsmedizin, Berlin, Almanya (EN DIN ISO 9001 serti fi ed: 2000), ve deneyler öncesinde Berlin, Almanya hayvan araştırmaları için federal yetkililer tarafından onaylandı. Tüm deneylerde kullanıldı laboratuvar hayvan bakımı, ilkeleri, Laboratuar Hayvan Bilimleri, Avrupa ve Alman Derneği'nin kurallarına uygun olarak vardı.
1. Hayvan Refahı ve Laboratuvar Hayvanları
- Bütün deneyler, 30-60 kg ağırlığındaki, 3-4 aylık yaşta ve (Alman ırkı büyük beyaz ×) tam anestezi erkek domuzlarda gerçekleştirilmiştir.
2. Anestezi, Entübasyon ve Mekanik Ventilasyon
- domuz tam bir mide önlemek için anestezi önceki 12 saat boyunca yiyecek kesintisi ama stres en aza indirmek için suya serbest erişim sağlar.
- premedikasyon için bir co enjektedomuz, boyun kasları içine azaperone arasında mbination (3 mg / kg) ve atropin (0,03 mg / kg), ketamin (25 mg / kg) ve ksilazin (3.5 mg / kg), hayvan hala kutusunda tutulurken stresi en aza indirmek için.
- Bir sedyeye hayvan koyun ve anestezi yeterli düzeyde elde edilir kez taşınması için bir bez ile gözleri kapsamaktadır.
- Cerrahi tiyatroya domuz taşıyın ve engelsiz burun tutarak her zaman yeterli spontan solunum sağlamak.
- Oksijen yüksek akış (örneğin 10 L / dk) ile hayvanın burun uygun bir maske ile yüzüstü pozisyonda ve preoxygenate domuz yerleştirin.
- Kulakları birinin üzerine monitörün ilgili sensör takarak periferik oksijen doygunluğu (S p O 2) izleme başlayın. Alkol swapları ile siliniz işlem sonrası kulak damarlarının birine yerleştirilen bir klinik olarak kullanılan periferik damar kateter (genellikle 18 veya 20 G) venöz erişim sağlayın.
NOT: Bunun yerine hiperkloremik asidoz neden olabilir dengeli bir kristalloid solüsyonu normal salin büyük hacimli infüzyon, artan serum laktat konsantrasyonlarının neden ve böylece kan gazı analizi yorumlanması veya engelleyebilir laktat içeren bir çözeltinin infüzyon oysa daha sonra deneylerin sonuçları.
- hayvan (ilk araştırmacı) ve burun yoluyla iki bandaj kayış. doğru pozisyona kafasını taşımak ve orofaringeal yapıları düzeltmek, burun açmak için aşağı diğer bandaj çekmek için yukarı bir bandaj çekin. Bir tarafta (ikinci araştırmacı) için dilini çekin.
- laringoskopun bıçak ile dilini bastırın ve epiglot doğru bıçağı ilerlemek. Not, bu pozisyonda epiglot genellikle domuzların yumuşak damak arkasında sıkışmış.
- Tüp ile epiglottis seferber laringoskopun bıçak ile aşağı doğru bastırın ve entübasyon ses tellerini görselleştirmek.
- Yukarı tüp açarken ses tellerinin sayesinde tüp ilerlemek ve Theisen ve arkadaşları tarafından ayrıntılı olarak açıklandığı gibi Manşeti engeller. 5 NOT: Entübasyon ayrıca araştırmacı eğitimi yanı sıra belli bir kurumun standart prosedürler bağlı yatar pozisyonda mümkün olabilir. Büyük bir tüp çapı daha hızlı girişi ve lavaj sıvısının çıkışı nedeniyle yüzey yıkanma destekler.
- kapnografi ve oskültasyonu kullanarak tüp doğru yerleşimini kontrol edin. Bunun için, kapnogram 'normalde' şeklinde olduğundan emin olun ve klinikte yapılan eşit nefes sesleri her iki ciğerleri oskültasyonu.
NOT: Mekanik başarısız veya gecikmiş entübasyon durumunda göğüs kompresyonu ile domuz havalandırın. sıkı uydurma maske ile yüksek akışlı oksijen verirken bu her iki taraftan göğüs kafesinin manuel sıkıştırma gerektirir.
- Sürekli iv tiyopental infüzyonu (20 mg / kg / h) ve fentanil (7 mg / kg / saat) ile anestezi koruyun.
NOT: Gerekli dozaj hayvandan hayvana değişebilir. gözetimsiz hayvan bırakmayın. Hayvan refahı ve bilimsel nedenlerle deney sırasında her zaman yeterli anestezi sağlamak. - kornea refleksleri yokluğunda kontrol edin ve enstrümantasyon sırasında stres / ağrı reaksiyonlar için yakından hayvan izleyin. Enstrümantasyon anestezi yeterli ise kas gevşetici uygulanması olmadan mümkün olmalıdır. Kas gevşemesi deney için gerekli ise, pankuronyum bromid (0.15 mg / kg / saat arasında sürekli bir infüzyon izlemektedir 0.15 mg / kg vücut ağırlığı iv bolus) verilmesini (ör
3. Enstrümantasyon Teknikleri
- Sırtüstü pozisyonda içine hayvan koyun ve planlanan kesi siteleri üzerinde cildi germek için bandaj kullanarak bacakları geri çekin. bir alkol /% 1 iyot solüsyonu gibi bir ameliyat öncesi cilt dezenfektan kullanılarak işletim alanları sterilize edin.
NOT: İşletim alanı sterilize etmek için bir aşağı silin yordamı kullanın ama bu nonsurvival modeldir, çünkü tam aseptik teknikler kullanmayın. cerrahi asepsi seviyesi akciğer hasarı oluşturulduktan aşağıdaki soruşturma bağlıdır. - mandibula ve santral venöz hat ve pulmoner arter kateteri introduser kılıfın yerleştirilmesi için bir neşter kullanılarak deri yoluyla kesme sternum (mümkünse sol veya sağ tarafı) bağlayan hat üzerinde 10 cm'lik bir kesi yapmak. anestezi derinliğinin yeniden değerlendirmek ve gerektiğinde dozu artırmak.
- subkutan doku ve yassı Ayrısma doku forseps ve cerrahi makas kullanılarak. brakiyosefalik ve sternocephalic kaslar görünür bir kez künt görünür forseps veya parmak gibi aletleri kullanarak harici juguler ven kadar kasları arasındaki fasya ayıran prosedürü kısmak gerçekleştirin.
- Kateterin ve modifiye Seldinger tekniği vasıtasıyla uygulama kılıfı dış juguler ven kanüle. Onları sunmadan önce serum fizyolojik ile tüm kateterler yıkayın.
- venöz kan (koyu, titreşimli değil) aspire edilebilir dek Bunun için, damar içine sokma kümesinden ilgili iğne ilerlemek. yaklaşık 15 cm damara kanül aracılığı ile kılavuz teli ilerlemek. İğneyi çıkarın ve damar içine introduser kılıfı ilerlemek. kılavuz teli çıkarın. deney için gerekirse bir santral venöz kateter yerleştirme için aynı işlemi tekrarlayın.
- v aspirasyon ile kateter doğru yerleşimini kontrolenous kan. Standart dikişlerle kapatın.
NOT: Bir perkütan yaklaşım durumunda olduğu gibi bu ven (Şekil 1) gözyaşı, çünkü bir damar genişletici ile ven genişletmek etmeyin. Araştırmacı domuzlarda ultrasonografi eşliğinde kanülasyon teknikleri konusunda eğitim ise ultrason eşliğinde yaklaşım da mümkündür. - gracilis ve arka bacak sartorius kas arasındaki kat tanımlamak (sol veya sağ mümkündür) arteriyel kateter yerleştirme için. Bu femoral arter nabız palpe edilebilir yönlüdür.
- Bir neşter kullanılarak deri yoluyla kat kesme boyunca 5 cm'lik kesi olun.
- Doku forseps ve cerrahi makas kullanılarak subkutan doku ayırın. künt femoral arter seviyesine kasları arasındaki fasya ayıran prosedürü kısmak kullanın. Not bunların kısmak prosedür kranial yaparak safen damarları kesme kaçının.
- ile femur arteri kanüle3.2 de tarif edildiği gibi bir tadil edilmiş Seldinger tekniği. Bir bağ arter çevresinde dolanmıştı ve delinme yerinde kanama durumunda kapatılabilir. mümkünse arka bacağa kan akımı ödün bu adım, kaçınılmalıdır. Standart dikişlerle kapatın.
- arteriyel kateter ve dönüştürücü sistemi santral venöz hattı bağlayın ve izlemeye başlamak için atmosfer (sıfır) ve ya 200 mmHg (arteriyel hat) ya da 50 mmHg (santral venöz hat) karşı hem kalibre.
- (Toraks yarısı yüksekliği hakkında yatar pozisyonda domuzlarda) sağ atrium yükseklikte tüm basınç dönüştürücüler yerleştirin.
- Mesanenin kateterizasyon için bir neşter kullanılarak mesane üzerindeki deri yoluyla kesme küçük (4-5 cm) kesi yapın. Yine, künt araçlar kullanılarak deri altı dokusu ayırın.
- o görüntülenmiştir sonra mesanenin duvarında bir purse-string sütür (1-2 cm çapında) gerçekleştirin.
NOT: dikişler n gerekirBu delikler içinden idrarın kaybına neden olur çünkü ot kesesi ilgili duvarların tüm katları boyunca nüfuz. - , Dikiş ortasında minimal kesi yapmak idrar kateteri tanıtmak, damıtılmıs 10 ml balon engellemek, hafif direnç hissedilir kadar geri kateteri çekin ve kateter etrafında purse-string sütür kapatın. Standart sütür ile cilt kapatın.
Pulmoner Arter Kateterinin 4. Giriş
- (Kateterin boyutuna bağlı olarak) pulmoner arter kateteri balonun içine hava 0.5-1 ml enjekte edilir ve balonun olası hasar kontrolü yapın. Yine balon söndürün.
- Basınç dönüştürücü sistemine pulmoner arter kateteri bağlayın ve atmosfer (sıfır) ve 100 mmHg karşı PAC kalibre (Şekil 2 ve 3).
- 10 1 için introdüser kılıf (sönük balon) ile pulmoner arter kateteri tanıtmakkılıf uzunluğuna bağlı olarak 5 cm.
- balon şişirmek (balon bunun için kılıf yapmamışlar vardır) ve basınç ve hemodinamik monitörde tipik dalga formları izlerken daha pulmoner arter kateteri ilerlemek.
- Sağ atrium, sağ ventrikül ve pulmoner arter için tipik olan dalga formları görünür iken PAC Advance ve pulmoner kapiller wedge basıncı (PCWP) eğrisi (Şekil 4) göründüğünde ilerleyen durdurun. balon söndürün.
NOT: balon sönük sonra PCWP-dalga yok olması ve pulmoner arter basıncı dalga görünür olmalıdır. Aksi takdirde, kateter muhtemelen arter (otomatik kama pozisyonu) kalıcı tıkanıklığı ile sonuçlanan bir pulmoner arter içine çok sokulur. Bu durumda, pulmoner arter basıncı dalga ciddi komplikasyonların önlenmesi (kan damarının örneğin rüptürü) görüntüye gelene dek geri kateteri çekin 6. <li> balon kateter ciddi komplikasyonların önlenmesi geri çekilir her sönük olduğundan emin olun.
NOT: Pulmoner arter kateteri sık sık yanlışlıkla domuzlarda alt kaval ven yoluyla karaciğer damarlarında içine ilerletilir. Böylece, kateter geri çekin ve sağ ventrikül yaklaşık 30 cm sonra ulaşılır değilse, baştan başlamak.
5. Pulmoner Arter Termodilusyon Tekniği ve hemodinamik ölçümler
- Kalp hızı, sistolik, diyastolik gibi tüm hemodinamik değerleri kopyalamak ve hemodinamik monitörden arter basıncı (MAP), pulmoner arter basınçları ve santral venöz basınç (CVP) anlamına gelir.
- PCWP derhal ölçün. Bunun için, pulmoner arter kateter balonu şişirmek ve doğru PCWP eğrisi (Şekil 4) görüntülendiğinden emin olun. monitörden ekspiryum sonunda pulmoner kapiller basıncı (PCWP) kopyalayın. Hemen (Madde 4.2.4) sonradan balon Söndür. Deflbalon yedik, kateter geri çekin ve 4.2.2 de açıklandığı gibi doğru PCWP eğrisi görmek için yapamıyorsanız yeniden konumlandırmak.
- termistör ve kardiyak output (CO) ölçümü için monitör pulmoner arter kateteri santral venöz lümen ve konut yoluyla uygun bir akış bağlayın. Sonraki monitör ile birlikte kateter (kırmızı kapaklı) distal sıcaklık portuna bağlamak.
- Monitör başlatın ve zaman-sıcaklık eğrileri izlemek ve böylece pulmoner arter termodilusyon tekniği 7 kardiyak çıkışı (CO) ölçmek için 'bolus CO' seçeneğini seçin.
- Basın 'Enj Cilt' ve soğutulan tuzlu su hacmini (burada sunulan deneylerde 5 mi) seçin. Bir önceki ekrana dönmek. Basın 'kateter' ve kullanılan pulmoner arter kateteri boyutunu seçin. Bir önceki ekrana dönmek.
- Seç 'bolus başlangıç' izlenerek ve mümkün olduğu kadar hızlı bir şekilde 4 ° C arasındaki bir sıcaklıkta, normal tuzlu su 5 ml enjektegövde boyunca akış. Ölçüm tamamlanana kadar bekleyin ve ilgili zaman-sıcaklık eğrisi monitörde görüntülenir. monitörden CO değeri kopyalayın.
- 5.3.4 de açıklandığı gibi ventilatör solunum döngüsü boyunca randomize sırayla hızlı bir şekilde 5 ölçümleri gerçekleştirmek. yüksek ve en düşük değeri göz ardı ve kalp debisi ortalama değerini hesaplamak için kalan üç kullanın.
NOT: Bu izleme kurulumu bir Edwards Uyanıklık monitörü model VGS1 tarif edilmiştir. Kurulum monitör bağlı olarak değişebilir. Bununla birlikte, kateterin doğru enjeksiyon salin hacim olarak boyutunu seçmek için gereklidir. Bazı monitörler bir hesaplama sabiti seçimi gerektirir tuzlu ve kateter boyutu kodları ilgili tutar. sabitler genellikle kateterin ambalaj içinde bir broşürde bulunmaktadır. Deney boyunca aynı sıcaklıkta tuzlu edin (<5 ° C) Doğru kuv sağlamak içinEMENTS. elektrolit alımı ve homeostasis kesin ölçümler içeren çalışmalar için% 5 glukoz çözümleri yerine tuzlu su kullanın.
- Tüm parametreler kaydedildi ve bu arter ve miks venöz kan örnekleri içi pulmoner sağdan sola şant hesaplanmasını sağlayacak alınmıştır emin olun.
- Tutanak tüm derhal solunum gelen tepe ve plato inspiratuar basınç gibi solunum verileri gerekli ya da deney herhangi bir zaman noktasında veri tamamlamak için transpulmoner basınç ölçüm gibi ek ölçümler yapmak.
6. Akciğer yıkama sıvıları Akciğer Yaralanması tetikleyebilecek
- Hayvan 1.0 bir F I O 2 ile havalandırılan emin olun ve lavaj işlemi için 2-4 cm H 2 O PEEP ayarlayın. solunum gelen hayvan çıkarın.
- ısıtılmış normal steril tuzlu su ile akciğerlere (37 ° C, 50 ml / kg vücut ağırlığı) doldurun. Bunun için, bir huni önceden doldurmak ve bağlayınuygun bir elastik tüp ile endotrakeal tüp. hayvan üzerinde huni 1 m yükseltmek ve mümkün olduğunca çabuk ciğerlerine tuzlu dökün. hidrostatik basınç, tüm akciğer bölüme tuzlu tahsis edecek.
NOT: Steril serum fizyolojik patojenlerin ve hayvanın mümkün septik dekompansasyon pulmoner yıkama önlemek için kullanılır. hipotonik sıvılar hayvanın acil akciğer ödemi, elektrolit dengesizliği ve ölüme neden olur çünkü% 0,9 tuz kullanımı önemlidir. yüzey yıkamak en üst düzeye çıkarmak için bir lavaj sonra tuz kullanmayın. - MAP altına 50 mmHg düştüğünde dolum durdurun.
NOT: Sadece hemodinamik parametreler ve S p O 2 hayvan akciğer lavaj sırasında ventilatör çıkarılmış olduğundan, dekompansasyon için hayvan izlemek için kullanılabilir. - Zemin seviyesinde el huni indirin pasif lavaj sıvısını boşaltın ve oksijenlenme için ventilatöre hayvan bağlayın.
- un BekleHayvan dengeler (MAP ve S p O 2 artış) ve mümkün olduğunca kısa sürede lavaj tekrar til. re-lavaj zaman çerçevesi 5 dk geçmemelidir.
NOT: hemodinamik dekompansasyon durumunda iki lavaj arasındaki hayvanın İstikrar sistemik hipotansiyon tedavisi için vazopresörlerin kullanımını önlemek için, ve daha fazla hipoksemi karşılaşmaya işe manevraları önlemek için hizmet vermektedir. Hayvanlar O 2 / F I O 2 oranları azaltılmış P rağmen oksijenasyonu sağlamak için lavaj sırasında 1.0 bir F I O 2 ve aşağıdaki deneylerle havalandırılan. Lavaj sırasında 2-4 cm H 2 O da PEEP ayarlanması atelektazi hızlı oluşumunu teşvik edecektir. Ancak, PEEP ARDS Berlin da tanımlanabilir akciğer hasarı oluşturulduktan sonra ya da 5 cm H2O Yukarıda ayarlanmalıdır. PEEP hiçbir işe manevrası veya değiştirmek izin Deneme sırasında, ilgili herhangi bir araştırmacı kaynaklı önyargı önlemek içinakciğer hasarının şiddetine s. - S p O 2 hemodinamik bozulma ve uzlaşma bağlı ikinci veya üçüncü lavaj sonrasında arteriyel kan gazı örneği alın.
- P Bir O 2 / F I O 2 oranı (Horowitz indeksi) yineleyerek lavaj ısrarla O 2 1.0 ve PEEP ≥ 5 cmH2O O. F I en az 60 dakika süreyle 100 mmHg'nin altında ölçülür
- hemodinamik dekompansasyonunu önlemek amacıyla 7.25 yukarıda arteriyel pH değerini tutmak için lavaj döneminde ventilatör hızını ayarlayın.
- Bir O 2 / F I O 2 oranı (Horowitz endeksi) ısrarla 60 dakika boyunca 100 mmHg'nin altında ölçülür P kez surfaktan yıkama modeline dayalı deney / tedaviye başlamak.
NOT: açıklandığı gibi akciğer hasarı oluşturulduktan sonra, akciğer fonksiyonlarında değişiklikler, saatlerce stabil kalır bozulmaz, hatta ventilatör ayarlarına bağlı olarak artıracaktır.
NOT: Bu hayvan modeli yüzey arınma ve atelektazi sonucu oluşumu dayanmaktadır. Bu nedenle, atelektazik akciğer bölgelerinin işe yol açabilir belirtilen ventilatör ayarları, herhangi bir sapma kısmen bu modelin standardizasyonu lavaj zararlı etkisini tersine çevirmek ve engel olacaktır, (PIP veya PEEP artış).
Deney ve Ötenazi 7. Sonu
- Tüm ölçümler yapılır ve veri deney bitmeden emniyete olduğundan emin olun.
- ayrıca sürekli anestezi 0.5 mg fentanil enjekte edilir ve en az 5 dakika bekleyin. merkez hattı kullanarak hızlı bir şekilde potasyum en az 60 mmol ardından tiyopental (en az 1000 mg) aşırı dozda enjekte edilir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
P O 2 / F I O 2 -ratio akciğer lavaj sırasında düşüşler, ancak tek bir lavaj tam olarak etkisi tahmin etmek zordur. Biz itibaren P bir O 2 100 mmHg'nin altında / F I O 2 -ratio bir azalma tespit etmek için üçüncü lavaj arteriyel kan gazı örnekleri almaya başlar. P bir azalma sonra 2 / f O 2 -ratio 100 aşağıdaki mmHg elde edilir, bir O, bu oran gerektiren PEEP ≥ 5 cm H2O bir saat süreyle 100 mm Hg altında kalması Bu resmen ARDS Berlin tanımını karşılayacak akciğer hasarı indüksiyon, sağlar. Kan gazları ve hemodinami eşlik eden değişiklikler (Şekil 5) ventilatör ayarlarına bağlı olarak geliştirmek bile, saat 'stabil' kalması daha da bozulabilir ya da olacak. P O 2 / F I O 2 -ratio 100 mmHg du yukarıdaki artış yapar durumdadeney süresi (Şekil 5) boyunca hayvanın kendiliğinden iyileşme önlemek için yukarıda tarif edildiği gibi bir saat başlangıç döneminde de, daha lavaj yapılır. Akciğer rahatsızlığı, hiperkapni ve hipoksi (Şekil 5) atelektazik bölgeleri artan her lavajla PAP artar. PAP değerler genellikle üç kat iki artırmak, ancak tek bir lavaj sırasında 60-70 mmHg üzerinde artırabilir. Bu hayvanın ani hemodinamik dekompansasyonu ve ölümle sonuçlanabilir. Bu model, ortalamalar genel ölüm oranı% 10-15.
Şekil 1: Enstrüman Tablosu Down Cut Prosedür sonra Seldinger Tekniği ile bir Santral Venöz Kateter ve İntrodüser Kılıf Tanıtımı için. kan damarı direkt kanülasyon için bir vazodilatör kullanmayın, unutmayın. PAC pulmoner arter kateteri anlamına gelir.
Şekil 2:. Pulmoner Arter Kateter bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Şekil 3:. Şişirilmiş balon ile Pulmoner Arter Kateter bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız.
0fig4.jpg "/>
Şekil 4:. Görünür Dalga Şematik Çizim pulmoner arter kateter ilerlemek kroki genellikle yaklaşık 40 kg vücut ağırlığı domuzlarda kateterin hangi ekleme derinlikte görülebilir hangi dalga tasvir ederken. PCWP pulmoner kapiller basıncı demektir. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Şekil 5:. P için bireysel Ölçülen değerler bir O 2 / F I O 2 Oran ve Üç Domuzlar ortalama Pulmoner Arter Basıncı (OPAB) P O 2 oksijenin kısmi tansiyon, F I O 2 solunan oksijenin fraksiyonu anlamına gelir. veriler kurumda atölye sırasında kaydedildi.P diğer ikisi 100 mmHg'nin altında bir hayvanda akciğer lavaj sonra O 2 / F I O 2 oranı artar kalır oysa ki unutmayın. Makalede açıklandığı gibi Böylece, bu hayvan daha lavaj almış olmalısınız. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Bu makalede, adım öğretim bir adım nedeniyle tekrarlanan akciğer lavaj tarafından yüzey arınma için domuzlarda ağır akciğer hasarı ikna etmek için açıklanır. Bu özel yöntem akciğer fonksiyonlarında ve pulmoner vasküler dirençte bir tekrarlanabilir ve karşılaştırılabilir bozulma sağlar. Bir O 2 / F I O 2 oranı 100 mmHg'nın altında azalmış ve bir saat süreyle 100 mm Hg altında kalır P kadar domuz lavaj zorunludur. Bir kez, bu hiçbir işe manevraları 4,8 yürütülen sürece en az 4-8 saat akciğer hasarı kurtarmak değil, genellikle hayvanların elde edilir. Bu protokol bağlılık aynı hayvan modeli kullanarak farklı deneylerden elde edilen bulgular arasında karşılaştırılabilirlik artırmak için yardımcı olur.
lavaj ile akciğer hasarı indüksiyon çeşitli sınırlamalar vardır. İlk olarak, tekrarlanan yıkama sıvıları büyük atelektazi, periva oluşumu dahil olmak üzere insan ARDS histopatolojik özelliklerinden bazıları nedenscular ödem oluşumu ve alveoler-kapiller membran kalınlıkta bir artış. Oysa, şiddetli epitel hasar veya hyalin membran oluşumu gibi bazı önemli özellikleri bu model 2,9 bulunmaz.
İkincisi, yüksek inspiratuar basınç ve artan PEEP'in işe etkisi oleik asit veya E. intratrakeal kurulum infüzyon yoluyla bağlı akciğer hasarı daha köpeklerde lavaj kaynaklı akciğer hasarı daha yüksek görünmektedir E. coli (pnömoni modeli) 10. Böylece, lavaj modeller gibi farklı havalandırma rejimlerin etkisi test etmek için hızlı, uygun bir yöntem olabilir, ancak araştırmacı, arzu edilmediği zaman herhangi alveol işe önlemek için dikkatli olmak zorunda. Bizim tecrübelerimize göre, akciğer fonksiyonu ve pulmoner vasküler dirençte ödünler sürece hiçbir kazara istihdam manevraları gibi, saatlerce stabil kalır. Ama, hayvan bozulabilir ve hatta ventilatöre bağlı artırabilirayarlar.
Üçüncü olarak, akciğer hasarı enflamatuar tepki büyük modeller arasında ve ayrıca türler arasında değişiklik göstermektedir. Domuz lavaj modellerinde TNFa gibi, örneğin inflamatuar mediatörlerin rolü hâlâ 9 tartışmalıdır.
Dördüncüsü, bu model genellikle yoğun bakım tıpta kullanılan karmaşık enstrümantasyon ve izleme prosedürleri gerektirir. Buna ek olarak, ani hemodinamik değişikliklere maruz kalan hipoksik büyük hayvanlarda anestezi bakımı gereklidir. Böylece, büyük hayvan araştırma ve yoğun bakım tıp eğitimi sadece deneyimli müfettişlerin bu model ile çalışması gerekir.
Son olarak, akciğer lavaj ile akciğer hasarı indüksiyon ani hemodinamik dekompansasyon ve hayvan sonuçta ölüme neden olabilir. kadar hayvanların% 10-15 indüksiyon döneminde ölebilir. Bizim tecrübelerimize göre bu MAP 50 mmHg veya S p altına düştüğü durumda, genellikle </ sub> O ani iskemik kalp yetmezliği ile sonuçlanan% 70 altında 2 düşer. İzleme 50-60 mmHg üzerinde mPAP bir artış sağ ventrikül yetmezliği ve hayvanın ölümüne neden olacaktır, çünkü lavaj sırasında pulmoner arter basıncı (OPAB) ölümlerinin azaltılması da mümkündür anlamına gelir. Bizim deneyim sağ ve işlem sırasında lavaj ve izleme hemodinami sırasında eş zamanlı olarak ortaya çıkabilir sol ventrikül yetmezliğinde ölümlerini azaltmak için önemlidir. Biz, devam eden bir lavaj durdurmak lavaj sıvısı drenaj ve biz 50 mmHg'nin altında MAP bir azalma kaydetmek her hayvan havalandırın. Bununla birlikte, yıkama sıvıları yüzey aktif önemli miktarda boşaltılmasında bir hızlı bir şekilde yapılmalıdır. P, bir O 2 / f O 2 oranı 100 mm Hg altına düştüğü zaman, en az bir saat süre ile, bu eşiğin üzerinde artmamalıdır. Bu pratik bir yaklaşım akciğer hasarı bir süre etkili indüksiyon sağlar.
Bu modda avantajıl tedavi stratejileri değerlendirilmesinde onların hassas sayılmasına olanak tanıyan sırasında akciğer fonksiyonu ve pulmoner vasküler dirençte göre uyarlık olduğunu. Ayrıca, hayvanların büyüklüğü klinik olarak kullanılan kateter, endotrakeal tüpler, küçük memeliler (örneğin kemirgenler) tamamen kullanılamaz vantilatörler ve monitörlerin kullanımını destekler. Buna ek olarak, elde edilen veri formatı (termodilüsyon tekniği ile, örneğin kardiyak output ölçümleri) yoğun bakım hekimleri bilinen başucu duruma karşılaştırılabilir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Evita Infinity V500 | Dräger | intensive care ventilator | |
| Vigilance I | Edwards | monitor | |
| Vasofix Braunüle 20G | B Braun | 4268113B | peripheral vein catheter |
| Mallinckrodt Tracheal Tube Cuffed | Covidien | 107-80 | 8.0 mm ID |
| MultiCath3 | Vygon | 157,300 | 3 lumen central venous catheter, 20 cm length |
| Leader Cath Set | Vygon | 115,805 | arterial catheter |
| Percutaneus Sheath Introducer Set | Arrow | SI-09600 | introducer sheath for pulmonary artery catheter of 4-6 Fr., 10 cm length |
| Swan-Ganz True Size Thermodilution Catheter | Edwards | 132F5 | pulmonary artery catheter, 75 cm length |
| Flow through chamber thermistor | Baxter | 93-505 | for measuring cardiac output |
| urinary catheter | no specific model requiered |
References
- Rubenfeld, G. D., et al. Incidence and Outcomes of Acute Lung Injury. N Engl J Med. 353 (16), 1685-1693 (2005).
- Ballard-Croft, C., Wang, D., Sumpter, L. R., Zhou, X., Zwischenberger, J. B. Large-animal models of acute respiratory distress syndrome. Ann Thorac Surg. 93 (4), 1331-1339 (2012).
- Lachmann, B., Robertson, B., Vogel, J. In vivo lung lavage as an experimental model of the respiratory distress syndrome. Acta Anaesthesiol Scand. 24 (3), 231-236 (1980).
- Donaubauer, B., et al. Low-dose inhalation of an endothelin-A receptor antagonist in experimental acute lung injury: ET-1 plasma concentration and pulmonary inflammation. Exp Biol Med (Maywood). 231 (6), 960-969 (2006).
- Theisen, M. M., et al. Ventral recumbency is crucial for fast and safe orotracheal intubation in laboratory swine. Lab Anim. 43 (1), 96-101 (2009).
- Kelly, C. R., Rabbani, L. E. Videos in clinical medicine. Pulmonary-artery catheterization. N Engl J Med. 369 (25), 35 (2013).
- Forrester, J. S., et al. Thermodilution cardiac output determination with a single flow-directed catheter. Am Heart J. 83 (3), 306-311 (1972).
- Deja, M., et al. The inhaled ET(A) receptor antagonist LU-135252 acts as a selective pulmonary vasodilator. Clin Sci (Lond). 103, Suppl 48 21-24 (2002).
- Matute-Bello, G., Frevert, C. W., Martin, T. R. Animal models of acute lung injury. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 295 (3), 379-399 (2008).
- Kloot, T. E., et al. Recruitment maneuvers in three experimental models of acute lung injury. Effect on lung volume and gas exchange. Am J Respir Crit Care Med. 161 (5), 1485-1494 (2000).
