Introduction
La capacità di combinare approcci genetici e biochimici ha fatto Drosophila un organismo particolarmente adatto per biochimica e biologia molecolare studi 1-3. Questi studi spesso richiedono grandi quantità di materiale biologico, non solo da mosche adulte, ma anche da larve 4, pupe 5 e gli embrioni 6-8. Per ottenere grandi quantità di materiale, i ricercatori hanno mosche coltivate utilizzando grandi contenitori noti come volare "gabbie di popolazione". Queste gabbie sono costituiti da un cilindro di plastica coperta da una rete su entrambi i lati per consentire l'introduzione del cibo all'interno della gabbia senza le mosche fuga. Queste gabbie possono essere fatti in casa 9-11 o acquistati da una società (vedi tabella di materiali specifici / apparecchiature).
Un importante vantaggio di utilizzare questo sistema per coltivare un gran numero di mosche è che il ciclo della mosca della frutta 12 può essere controllato in modo che tutte le mosche sviluppano in un relatively sincronizzato maniera. Questa sincronizzazione si ottiene semina nuovi embrioni, alimentando larve / mosche e sacrificare le mosche adulte, a volte precisi. Utilizzando una popolazione mosca sincronizzato è particolarmente utile per studi di sviluppo 13.
L'inizio di una nuova gabbia popolazione da pochi mosche è un processo che richiede tempo molti cicli di amplificazione 9-11. Anche utilizzando contenitori più grandi, come le bottiglie di coltura mosca o minicages, l'intero processo può durare per mesi. Per evitare questo passaggio che richiede tempo, molti laboratori di Drosophila mantengono regolarmente tali gabbie. È più conveniente per iniziare una nuova gabbia a partire da una raccolta di embrioni da una gabbia popolazione già stabilito. In generale, la maggior parte dei laboratori mantengono gabbie popolazione di tipo selvatico, come Oregon R o Canton S. Questo manoscritto presenta un protocollo dettagliato per mantenere la mosca gabbie di popolazione.
Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Bacto-Agar | Beckton Dickinson | 214010 | |
Curity practical cotton roll | Kendall | 2287 | |
Dry yeast | Affymetrix | 23540 | |
Filter paper | GE Healthcare Life Science | 1001-085 | |
Foam tube plugs | Jaece | L800-D2 | 50 mm Diameter x 55 mm Length |
Fly population cage | Flystuff | 59-116 | 9″ Diameter x 14.4″ Length. Includes the nets for the cage. |
Meat tray | Genpak | 1002S (#2S) | 8.25 x 5.75 x 0.5 inches |
Molasses | Grandma´s | ||
Plastic container | Rubbermaid | 4022-00 | |
Plastic film | Glad | ||
Phosphoric acid | Fisher Scientific | S 93326 | Toxic. Handle in Chemistry Hood |
Propionic acid | Fisher Scientific | A258-500 | Toxic. Handle in Chemistry Hood |
Stainless steel sieve #100 | VWR | 57324-400 | |
Stainless steel sieve #40 | VWR | 57324-272 | |
Stainless steel sieve #30 | VWR | 57324-240 | |
Sucrose | MP | 152584 | |
Tegasept | LabScientific | FLY5501 | |
Triton-X100 | Fisher Scientific | BP151-500 |
References
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