Introduction
לויקוציטים דבקים בנימי הריאות (כלומר, marginating-ריאתי (MP) לויקוציטים) 1 הוצג להציג רכב לויקוציטים ברור פעילות ייחודית לעומת לויקוציטים מ תאים חיסוניים אחרים (למשל, מחזור, טחול, מח עצם) 2- 4. לדוגמה, MP-לויקוציטים התערוכה גבוה הרג טבעיים (NK) cytotoxicity התאים מפני תאים סרטניים שונים, לעומת מחזורי הטחול תאי NK, כמו גם RNA שליח הבדיל (mRNA) רמות הפרשה מוגברת של ציטוקינים פרו ואנטי דלקתיים. הרכב של תאים הוא מובחן גם לויקוציטים במחזור כמו שיש MP-לויקוציטים יחס גבוה יותר של חסינות אדפטיבית / מולד לעומת לויקוציטים במחזור (50% לעומת 30%, בהתאמה). מטרת השיטה המוצגת כאן היא לאפשר קצירת סלקטיבית של MP-לויקוציטים, כדי ללמוד תא החיסון חשוב וייחודי זה (אוכלוסיית תאים), וכדי elucidate השפעת מניפולציות שונות (למשל, הפעלה חיסונית) על תאים ספציפיים אלה.
כדי להבין את המשמעות של אוכלוסייה ייחודית זו, חשוב לציין כי מערכת החיסון יכולה לשלוט במחזור תאים סרטניים, micrometastases, ומחלות שיורית באמצעות פונקציות vivo של חסינות בתיווך התא (CMI). יכולת זו באה לידי ביטוי למרות כישלון התקדים של מערכת החיסון על מנת לשלוט בגידול הראשוני, ונתמך על ידי מספיק ראיות vivo בחולי סרטן ומודלים של בעלי חי 5. חשוב לציין, הממצאים הללו הם לעתים קרובות עולה בקנה אחד עם במבחנה במחקרים vivo לשעבר, אשר מדווחים כי רוב תאי הגידול עצמיים עמידים cytotoxicity ידי מחזורי לויקוציטים בדגימות דם מבני אדם ובעלי חיים (נמדד על ידי מבחני רעילות) 6,7. אי התאמה זו ניתן לייחס לקיומה in vivo של אוכלוסיות לויקוציטים שונות, כגון שצויןאוכלוסייה לויקוציטים MP נזכרת, ו-האוכלוסייה שלה במיוחד של תאי NK מופעלים 3. ואכן, תאים סרטניים syngeneic (MADB106), אשר נמצאו להיות עמיד במחזור לויקוציטים טחול, הוצגו להיות lysed ידי תאי MP-NK 3,8. לפיכך, התאים MADB106 'NK עמיד' לכאורה כי גרורות לריאות של fischer344 (F344) חולדות נשלטים על ידי תאים MP-NK, אבל לא על ידי מחזורי או תאי NK הטחול, אשר בדרך כלל נלמדים נתון קלות הגישה שלהם.
מטוהרים פעילים MP-לויקוציטים אינם נגישים באמצעות שיטות קציר רמה לויקוציטים מהריאות, אשר מבוססות על שחיקה רקמת ריאה או 9 שפלה ביולוגית. הגישה שלנו כוללת שני יתרונות מרכזיים לעומת גישות עיבוד רקמות. ראשית, גישת זלוף סלקטיבי יבול MP-לויקוציטים, תוך הפרדה תאים אחרים שמקורן parenchymal ריאות, ביניים, ו compar broncho-מכתשיםtments. שנית, טכניקת זלוף טוב יותר שומרת על השלמות ובין ההוויה הפיזיולוגית של לויקוציטים MP, בניגוד שחיקה והעיבוד ביולוגי גישות הפוגעים בתאים, לשנות המורפולוגיה שלהם, ולגרום לייצור ושחרור של גורמים שונים כי לווסת את הפעילות חיסונית במיוחד לדכא NK cytotoxicity 10.
הריאות הן איבר יעד מרכזי עבור גרורות סרטן ועבור מחלות זיהומיות שונות. כל התאים הממאירים במחזור התאים נגועים לעבור דרך נימי הריאות, בה הם צריכים לעוות ולתקשר עם תאי אנדותל נימים לויקוציטים תושב. בתנאים אלה, תאים במחזור יכולים להיות ממוקדים בקלות על ידי-לויקוציטים MP תושב. נראה, אם כן ביולוג יתרון יש לויקוציטים מופעלים בתא החיסון הזה, וזה חשוב ללמוד אוכלוסייה-MP הייחודית זאת בהגדרות ביולוגיות, ניסיוני, וקליניים שונים. ראוי לציין כי סאיההפעלה החיסונית stemic ידי-מכפילי ביולוגי-תגובה שונות (למשל, חומצה polyinosinic-polycytidylic (פולי לי: C) או מסוג C CPG oligodeoxynucleotides (CPG-C ODN)) הוכחו להפעיל MP-לויקוציטים יותר לויקוציטים במחזור 3, 8,11.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
הנהלים הקשורים בנושאים בעלי חיים אושרו על ידי ועדת טיפול בבעלי חיים מוסדיים השתמש (IACUC) באוניברסיטת תל-אביב.
1. עכברוש פרוטוקול
- תכשירים
- מסדרים 2 פרפר 21 מחטים G. לחלופין, להכין 2 מחטים בוטות פיפיות פרפר 21 G על ידי הגשת הקצה החד של המחט.
- לעקר כלים כירורגיים: 2 זוגות מספריים, מלקחיים קהי פיפיות, hemostat, מלקחי שן-רקמות מעוקרות ידי חיטוי ב 121 מעלות צלזיוס במשך 30 דקות לפחות על כוח משיכת הגדרה (יבשה).
- הכן heparinized PBS (30 יחידות / מ"ל) על ידי הוספת 30 יחידות של הפרין לכל מ"ל של בופר פוספט פתרון (1x PBS). השתמש ב RT. 35 מיליליטר הוא הנפח המינימאלי הדרוש לכל בעלי חיים.
- להזרים heparinized PBS לתוך קווי משאבת peristaltic ואת מחטי הפרפר כדי למנוע בועות אוויר.
- זלוף של הריאות והגבייה-לויקוציטים MP
- להרדימו ממנת יתר של isoflurane 8%. אשר המתת חסד על ידי הפסקת נשימה ניטור.
- לאחר הפסקת נשימה, לפתוח לאלתר את החללים הצפק ובחזה באמצעות מספרי סטרילית מלקחי שן-רקמה. לבצע חתך בבטן קו האמצע לאורך הבטן עד לתהליך xiphoid.
- הרם את החזה באמצעות המלקחיים, חיתוך כלוב צלעות בזהירות משני הצדדים, ללא ניקוב כל איבר פנימי או כלי דם גדולים. קלאמפ hemostat על עצם החזה, rostrally לקפל את בית החזה כדי לחשוף את מורכבות לב-ריאה.
- הכנס מחט פרפר לתוך החדר ימני של הלב, ובתוך כ דק לאסוף את הנפח המקסימאלי של דם לתוך מזרק (~ 6 מיליליטר מבעל חי 250 גרם).
- הצמד את הווריד הנבוב עם hemostat להימנע זלוף לאחור של הכבד (ראה דיון).
- החזק את מחט פרפר בתוך החדר הימני תוך החלפת מזרק המכיל את הדם עם צינור יצוא של pמשאבת eristaltic.
- הכנס מחט פרפר שני מחובר מזרק קציר 5 מ"ל לתוך החדר השמאלי, הימנעות חדירה של מחיצת האף interventricular.
- הפעל את המשאבה peristaltic במהירות של כ 5 מ"ל / דקה בעדינות לאסוף לתוך המזרק מיליליטר הראשון של perfusate כי הם מזוהמים עם דם. המשך עד שהצבע perfusate פונה מכהה אדום חיוור. (מחק את perfuste דם מזוהם).
- ללא הפסקת המשאבה peristaltic, במהירות להחליף את המזרק קציר 5 מ"ל עם מזרק קציר 20 מ"ל ולאסוף 20 מ"ל של perfusate ריאות העסקת מהירות גבוהה יותר של זלוף (עד 7 mL / min). לפקח באופן רציף את זרימת perfusate לתוך מזרק האיסוף, תוך הימנעות היווצרות ואקום.
- להפסיק את הזרימה של המשאבה peristaltic.
- הפקה לויקוציטים
- צנטריפוגה perfusate במשך 10 דקות ב g 400 ×.
- לשאוב את הנוזל.
- הוסף 10 מ"ל PBS או בינוני, צנטריפוגות ב 400 XG במשך 10 דקות, לשאוב את הנוזל. חזור על פעולה זו פעמיים. שימוש PBS או בינוני תלוי בשימוש הסוגר של המדגם.
- הוסף 20 מ"ל PBS או בינוני, צנטריפוגות ב 400 XG במשך 10 דקות, לשאוב את הנוזל.
- מחדש את התאים לריכוז הרצוי, מבוסס על השימוש במדגם (FACS, PCR, וכו ').
2. עכבר פרוטוקול
- תכשירים
- מסדרים 2 פרפר 25 מחטים G. לחלופין, להכין 2 מחטים בוטות פיפיות פרפר 25 G על ידי הגשת הקצה החד של המחט.
- לעקר כלים כירורגיים: 2 זוגות מספריים, מלקחיים קהי פיפיות, hemostat, מלקחי שן-רקמות מעוקרות ידי חיטוי ב 121 מעלות צלזיוס במשך 30 דקות לפחות על כוח משיכת הגדרה (יבשה).
- הכן heparinized PBS (30 יחידות / מ"ל) על ידי הוספת 30 יחידות של הפרין לכל מ"ל של תמיסת 1x PBS. השתמש ב RT. 25 מיליליטר הוא הנפח המינימאלי הדרוש לכל בעלי חיים.
- streאני heparinized PBS לתוך קווי משאבת peristaltic ואת מחטי הפרפר כדי למנוע בועות אוויר.
- זלוף של הריאות והגבייה-לויקוציטים MP
- להרדימו ממנת יתר של isoflurane 8%. אשר המתת חסד על ידי הפסקת נשימה ניטור.
- לאחר הפסקת נשימה, לפתוח לאלתר את החללים הצפק ובחזה באמצעות מספרי סטרילית מלקחי שן-רקמה. לבצע חתך בבטן קו האמצע לאורך הבטן עד לתהליך xiphoid.
- הרם את החזה באמצעות המלקחיים, חיתוך כלוב צלעות בזהירות משני הצדדים, ללא ניקוב כל איבר פנימי או כלי דם גדולים. קלאמפ hemostat על עצם החזה, rostrally לקפל את בית החזה כדי לחשוף את מורכבות לב-ריאה.
- הצמד את הווריד הנבוב עם hemostat להימנע זלוף לאחור של הכבד (ראה דיון).
- הכנס מחט פרפר המחובר לצינור היצוא של משאבת peristaltic לתוך ven התקיןtricle של הלב, וכן מחט פרפר שני מחובר מזרק קציר 2 מ"ל לתוך החדר השמאלי של הלב, avoidingpenetration של מחיצת האף interventricular.
- הפעל את המשאבה למהירות של כ 2 מ"ל / דקה לאסוף את מיליליטר הראשון של perfusate דם מזוהמים לתוך המזרק קציר עד perfusate פונה מכהה אדום חיוור (מחק את perfuste דם מזוהם).
- ללא הפסקת המשאבה peristaltic, במהירות להחליף את המזרק קציר 2 מ"ל עם מזרק קציר 10 מ"ל ולאסוף 10 מ"ל של perfusate ריאות העסקת מהירות גבוהה יותר של זלוף (עד 4 מ"ל / דק '). לפקח באופן רציף את זרימת perfusate לתוך מזרק האיסוף, תוך הימנעות היווצרות ואקום.
- להפסיק את הזרימה של המשאבה peristaltic.
- הפקה לויקוציטים
- צנטריפוגה perfusate במשך 10 דקות ב g 400 ×.
- לשאוב את הנוזל.
- הוסף 10 מ"ל PBS או בינוני, צנטריפוגות ב 400XG במשך 10 דקות, לשאוב את הנוזל. חזור על פעולה זו שלוש פעמים. שימוש PBS או בינוני תלוי בשימוש הסוגר של המדגם.
- הוסף 10 מ"ל PBS או בינוני, צנטריפוגות ב 400 XG במשך 10 דקות, לשאוב את הנוזל.
- מחדש את התאים לריכוז הרצוי, מבוסס על השימוש במדגם (FACS, PCR, וכו ').
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
תערוכת MP-תא קומפוזיצית משנה לויקוציטים שונה לעומת מחזורים לויקוציטים. באמצעות ניתוח תזרים cytometry, תת-אוכלוסיות לויקוציטים זוהו לכמת ולאפיין את הרכב של שני מחזורי לויקוציטים MP. גרנולוציטים ו לימפוציטים זוהו מבוסס על מחליקי קדימה והצד. בתוך לימפוציטים, NKRP-1 תאים בהירים זוהו תאי NK, CD3 + כתאי T, RM1 + כמו מונוציטים, ו CD4 + / CD8 + / CD25 + שימשו לזיהוי תת-אוכלוסיות של תאי T. immunocytes המולד, כוללים גרנולוציטים, מונוציטים, ותאי NK, היווה 52% (± 1.52%) מהאוכלוסייה MP-לויקוציטים, לעומת 27.9% (± 0.66%) במחזור (p <0.05). נהפוך הוא, תת-אוכלוסיות של תאי T, כולל CD4 +, תאי CD4 + CD8 + T, והרגולציה (CD4 + CD25 +)בתאי T, וכן תאים דנדריטים, הציגו לאחוזים קטנים יותר בתא MP לעומת המחזור (p <0.005; n = 8). תשואת תא בתא MP של זן זה מהווה של כ -3 מיליון לויקוציטים (איור 1).
בתוך תאי NK, שני תת-אוכלוסיות ניכרות, על בסיס גודל התא. באמצעות פיזור העלילה של פיזור קדימה על ידי תיוג NKRP-1, תאי NK חולקו תאי NK קטנים וגדולים. תא MP מפגין אחוז של פי 3 גבוה של תאי NK הגדולים (~ 30%) לעומת המחזור (~ 10%), ואילו המספר הכולל של תאי NK דומה (איור 2). יתר על כן, באמצעות assay לשחרור 4 שעות התקן 51 Cr, cytotoxicity אנטי הסרטני NK כנגד תאים שונים של גידולי היעד נמדד 8. זמן קצר, assay זה מעריך את הסכום של 51 Cr שוחרר מתאי גידול כתוצאה רעילה ספציפית על ידי תא NKים. היכולת של תאי NK מתא MP כדי lyse תאים סרטניים עולה במחזור תאי NK (איור 3), כפי שבא לידי ביטוי הוא נגד MADB106 הקו הסלולרי syngeneic (איור 3 א), וקו התאים הסטנדרטי YAC-1 (איור 3) . בנוסף, גירוי מערכת החיסון באמצעות in vivo פולי ואני אדמיניסטרציה C מייצרת השפעה עמוקה יותר על cytotoxicity NK של תאים MP-NK מאשר על תאי NK כאשר קו תא המטרה MADB106 משמש (איור 3 א).
רכב איור 1. משנה לויקוציטים שונה המאפיין את תא MP לעומת המחזור בחולדות F344. בתא MP, את החלק היחסי של חסינות מולדת מושווה גדול כדי המקביל שלה במחזור (52% לעומת 28%), בעוד השכיחות של תאי T תערוכת הבדל מול (עמ '0; 0.005; n = 8). נא ללחוץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
איור 2. גברת אחוז תאי NK גדולים בתא MP לעומת זרימת תאי MP-NK הציג פי שלושה אחוז גבוה יותר של תאי NK הגדולים לעומת תאי NK (30% לעומת 10%, בהתאמה;. P < 0.05), בעוד המספר הכולל של תאי NK דומה. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
איור 3. רעילות גבוהה NK בתא MP לעומת מחזור.(א) MADB106 תאים היעד - תאי NK שנקטפו מתא MP הציג cytotoxicity ניכרת נגד שורות התאים, ואילו תאי NK מראים cytotoxicity בשנת vivo גירוי מערכת החיסון על ידי פולי I:. C מגביר cytotoxicity NK בתא MP, אבל לא במחזור הדם. (ב) YAC-1 תאי יעד - תאי NK שנקטף מתא MP הציג cytotoxicity גבוה לעומת תאי NK נגד שורת תאי תקן זה. גירוי מערכת החיסון על ידי פולי לי: C מגביר cytotoxicity NK בשני בתא MP ואת מחזור הדם. מספרי תא NK נשלטו להערכת cytotoxicity. הנתונים באים לידי ביטוי כממוצע ± SEM. אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
השיטה המוצגת כאן מאפשרת קצירת סלקטיבית ולומדים של האוכלוסייה הייחודית של לויקוציטים MP. לעומת מחזורי או לויקוציטים טחול, אוכלוסיית MP מאופיינת רכב מובהק של תת-אוכלוסיות לויקוציטים, רמות הפעלה גבוהות, שחרור גבוה של ציטוקינים שונים, ורמות גבוהות יותר של mRNA תומך ציטוקינים אנטי דלקתי 2,3. באופן ספציפי, אנחנו הראינו כי תאי MP-NK הם יותר ציטוטוקסיות מאשר תאי NK דם נגד תאי יעד שונים 3,4, ולהביע רמות גבוהות יותר של-γ אינטרפרון. בסך הכל, התוצאות שלנו מראות כי לויקוציטים MP-NK יש cytotoxicity יותר מאשר תאי NK, ובכך עשוי לרמז משמעות ביולוגית גדולה בשליטת גרורות שמקורן דם וגרורות ריאתי. לכן, טחול או במחזור לויקוציטים לא צריך להיחשב כתקן זהב או אוכלוסיית ברירת מחדל עבור משקף מצב אימונולוגית, ומחקרי אדם commonly להסתמך אך ורק על מחזורים לויקוציטים יש לפרש בזהירות. יתר על כן, כפי מחלות שונות במיוחד להסב את הריאות, חסינות צריכה להיחקר בתוך האיבר הזה, ואת תא MP יש להבחין בין הודעת ביניים, parenchymal, ו ברונקו-מכתשים תת-מדורים, כפי שאכן המקרה שימוש בגישה זלוף שלנו.
כדי להבטיח את ההצלחה של הליך זה, חשוב מאוד (i) לפתוח את הבטן וחללי חזה במהירות הבאה להשלים בהפסקת הנשימה, כדי לשמור על לחץ דם המאפשר איסוף דם מקסימאלי לב, וכן (ii) להימנע תוספת רצויה ניקוב של חדר הלב דרך השימוש במחטי פרפר פיפיות בוטה. מכשול מרכזי נוסף הוא האפשרות של זיהום דם בתוך perfusate הריאות. ככל מיליליטר הראשון של הריאות perfusate מזוהמים בדם הלב, הם צריכים להיות מושלך כפי שמודגם. כדי להשיג סטנדרטיזציה בין aniיונקים, הקריטריון להתחיל לאסוף את perfusate MP מבוסס על מעבר צבע מאדום כהה אדום חיוור. בנוסף, מומלץ מהדק את הווריד הנבוב עם hemostat הלא משונן, כדי למנוע טפטוף לאחור של הכבד, במיוחד אם רוצה לאסוף גם marginating תאים בכבד באמצעות זלוף רצוף של הכבד. בעוד לאסוף את perfusate מן החדר השמאלי, חשוב לא לחדור מחצה interventricular. לאחרונה, הפרין ב PBS המשמש זלוף חיונית לניתוק האוכלוסייה MP-לויקוציטים מן הנימים, ולכן יש להשתמש.
תקלות כמה עלולות להתרחש בעת ביצוע הליך זה, אבל רובם הם לתיקון. אם קיימת דליפה מאתר חדירת המחט לתוך הלב, הוא הציע לאטום את שריר הלב מקרע באמצעות מלקחיים פחוסת-חוטם עם טיפים משוננים סביב מחט פרפר. אם מחט מחליק החוצה, STOp משאבת peristaltic, מחדש להכניס את המחט לתוך האתר החדיר מקורי, ולהפעיל מחדש את המשאבה. אם זרימת אוסף מפסיקה, לעצור את הלחץ ואקום איסוף, למקם מחדש את המחט בתוך החדר, ולהפעיל מחדש את האוסף. אם אטריום השמאל הוא מנופח, והוא לא מופחת על ידי אוסף מתמשך, להפחית את קצב הזרימה של המשאבה. באופן כללי, שיעור זרימה peristaltic גבוה עלול לפגוע היווצרות כלי הדם, ואת הריאות עשויות להיות נפוחות.
השיטה המתוארת במסמך זה מאפשר קצירת סלקטיבית של האוכלוסייה לויקוציטים MP בהליך פשוט יחסית. בהתחשב בכך אוכלוסייה זו מפגין מאפיינים ייחודיים בהשוואה לויקוציטים מ תאים חיסוניים אחרים, וכי אוכלוסייה זו עשויה להיות חשיבות ביולוגית וקלינית לאורגניזם, אנו מציעים את השימוש בשיטה זו כאשר ריאלי, במיוחד כאשר לומדים תהליכים הקשורים ריאות ומחלות. זה עדיין לא ידוע אם תאי MP, אשר מתגוררים הריאה capillטלה עם תאי קציר, הבשיל בתוך הריאות, או אם הם היו לשמור על המאפיינים שלהם בצאתו הריאות. כפי לויקוציטים מ תאים אחרים עשויים שלא לשקף את הפרופיל של אוכלוסיית MP, וכפי שזה אינו נגיש בבני אדם, אנחנו עוד מציעים ניצול בשיטה זו כדי להבהיר סמנים ביולוגיים במחזור ספציפי מתואמת עם מאפייני MP ייחודיים.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
החוקרים אין לי מה לחשוף.
Acknowledgments
המחברים ועבודה זו נתמכו # מענק NIH / NCI R01CA172138 (כדי SBE).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Autoclud Peristaltic pump | |||
| Butterfly needle | OMG | 26G | |
| Butterfly needle | OMG | 21G*3/4" | |
| Syringe | Pic solution | 1 ml | |
| Syringe | Pic solution | 2.5 ml | |
| Syringe | Pic solution | 5 ml | |
| Syringe | Pic solution | 10 ml | |
| Syringe | Pic solution | 25 ml | |
| Blunted-edged forceps | |||
| Scissors | |||
| hemostat | |||
| Tissue forceps | |||
| Heparin sodium porcine mucosa (perservative free) | Sigma Aldrich |
References
- Kuebler, W. M., Goetz, A. E. The marginated pool. Eur Surg Res. 34, 92-100 (2002).
- Benish, M., et al. The marginating-pulmonary immune compartment in mice exhibits increased NK cytotoxicity and unique cellular characteristics. Immunol Res. 58, 28-39 (2014).
- Melamed, R., et al. The marginating-pulmonary immune compartment in rats: characteristics of continuous inflammation and activated NK cells. J Immunother. 33, 16-29 (2010).
- Shakhar, G., et al. Amelioration of operation-induced suppression of marginating pulmonary NK activity using poly IC: a potential approach to reduce postoperative metastasis. Ann Surg Oncol. 14, 841-852 (2007).
- Smyth, M. J., Godfrey, D. I., Trapani, J. A. A fresh look at tumor immunosurveillance and immunotherapy. Nat Immunol. 2, 293-299 (2001).
- Talmadge, J. E., Meyers, K. M., Prieur, D. J., Starkey, J. R. Role of NK cells in tumour growth and metastasis in beige mice. Nature. 284, 622-624 (1980).
- Grimm, E. A., Mazumder, A., Zhang, H. Z., Rosenberg, S. A. Lymphokine-activated killer cell phenomenon. Lysis of natural killer-resistant fresh solid tumor cells by interleukin 2-activated autologous human peripheral blood lymphocytes. J Exp Med. 155, 1823-1841 (1982).
- Melamed, R., et al. Marginating pulmonary-NK activity and resistance to experimental tumor metastasis: suppression by surgery and the prophylactic use of a beta-adrenergic antagonist and a prostaglandin synthesis inhibitor. Brain Behav Immun. 19, 114-126 (2005).
- O'Dea, K. P., et al. Lung-marginated monocytes modulate pulmonary microvascular injury during early endotoxemia. Am J Respir Crit Care Med. 172, 1119-1127 (2005).
- Sorski, L., Melamed, R., Ben-Eliyahu, A unique role for marginating-pulmonary and marginating-hepatic NK cells in cancer anti-metastatic surveillance and in immunotherapy. Annual Meeting of the Psychoneuroimmunology Research Society, Philadelphia, USA.(2014, , (2014).
- Levi, B., et al. Continuous stress disrupts immunostimulatory effects of IL-12). Brain Behav Immun. 25, 727-735 (2011).
