Abstract
Um procedimento de injecção de silicone modificado foi usado para a visualização da árvore vascular hepática. Este procedimento consistiu na injecção in vivo do composto de silicone, através de um cateter de 26 G, para o portal ou na veia hepática. Após a injeção de silicone, órgãos foram explantados e preparado para micro-CT (μCT) digitalização ex-vivo. O procedimento de injeção de silicone é tecnicamente desafiador. Alcançar um resultado bem-sucedido requer uma vasta experiência microcirúrgica do cirurgião. Um dos desafios deste procedimento envolve a determinação da taxa de perfusão adequada para o composto de silicone. A taxa de perfusão para o composto de silicone tem de ser definido com base na hemodinâmica do sistema vascular de interesse. taxa de perfusão inadequada pode levar a uma perfusão incompleta, dilatação artificial e ruptura de árvores vasculares.
A reconstrução 3D do sistema vascular foi baseado em tomografias e foi realizada comsoftware pré-clínico, tais como HepaVision. A qualidade da árvore vascular reconstruído foi directamente relacionada com a qualidade da perfusão de silicone. Subsequentemente vasculares parâmetros computados indicativos de crescimento vascular, tais como o volume vascular total, foram calculadas com base nas reconstruções vasculares. Contrastando a árvore vascular com silicone permitido para processamento subsequente histológica do espécime após a digitalização μCT. A amostra pode ser submetida a cortes seriados, análise histológica e diapositivos de todo, e, posteriormente, para a reconstrução 3D das árvores vasculares com base em imagens histológicas. Este é o pré-requisito para a detecção de eventos moleculares e sua distribuição em relação à árvore vascular. Este procedimento de injecção de silicone modificado também pode ser usado para visualizar e reconstruir os sistemas vasculares de outros órgãos. Esta técnica tem o potencial de ser aplicados extensivamente para estudos relativos à anatomia vascular e crescimento em vários animais umamodelos de doenças nd.
Introduction
A regeneração hepática é muitas vezes determinada pela medição do aumento de peso do fígado e do volume e através da avaliação da taxa de proliferação dos hepatócitos 16. No entanto, a regeneração hepática não só é induzir a regeneração do parênquima, mas também a regeneração vascular 6. Portanto, o crescimento vascular devem ser investigados no que diz respeito ao seu papel na progressão da regeneração hepática. A visualização do sistema vascular hepática é crítica para avançar a nossa compreensão da regeneração vascular. Numerosos métodos indirectos foram desenvolvidas para estudar os mecanismos moleculares subjacentes à regeneração vascular hepática. Tradicionalmente, a detecção de citocinas (factor de crescimento endotelial vascular, VEGF) 14, quimiocinas e seus receptores (CXCR4 / CXCR7 / CXCL12) 4 ter sido o esteio para estudar a regeneração vascular. No entanto, um modelo 3D em conjunto com a análise quantitativa da vasculatura acrescentaria anatómica críticainformações para obter uma melhor compreensão da relação importante entre o parênquima hepático e regeneração vascular.
Para visualizar o sistema vascular hepática, o que requer contrastando as árvores vasculares, os ratinhos foram injectados com um agente de contraste radiopaco borracha de silicone directamente para o portal ou árvore vascular venoso hepático. Após a polimerização do silicone e explante do órgão, as amostras de fígado foram submetidos a varrimento μCT usando um aparelho de tomografia computadorizada. Os exames resultaram em representações imagem voxel do silicone de injecção 9 espécimes.
Para o controlo de qualidade, o sistema vascular foi visualizado pela primeira vez em 3D utilizando o software pré-clínico. Segmentação foi realizada através da criação de um limite entre a intensidade de tecidos moles e a intensidade navio. A máscara navio resultante foi visualizada usando renderização superfície. O software também permitiu a determinação manual dos dois parâmetros de Vasculcrescimento ar: comprimento do navio máxima e raio.
Um software pré-clínico foi então usado para a reconstrução 3D de árvores vasculares e subsequente cálculo dos territórios vasculares fornecimento ou drenagem 13. Além disso, este software determinado automaticamente certos parâmetros de crescimento vascular, tais como o comprimento total de todas as estruturas vasculares visíveis também conhecido como o comprimento da aresta ou volume total total do vaso.
O procedimento de silicone perfusão foi realizada em camundongos normais e em ratos que foram submetidos a 70% hepatectomia parcial (HP). Os fígados foram recolhidos a diferentes pontos de tempo de observação após a ressecção para analisar vascular e do parênquima regeneração do fígado utilizando a técnica de visualização e quantificação acima mencionado.
Os objetivos principais deste filme são: (1) demonstrar a injeção delicada técnica necessária para atingir contraste ideal e (2) mostram o potencial fr benefício resultanteom uma análise detalhada da amostra resultantes usando μCT e cortes seriados histológicas. Depois de assistir a este filme, o leitor deve ter uma melhor compreensão de como injetar composto de silicone em um sistema vascular específico e da utilidade e aplicabilidade da técnica.
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Protocol
Procedimentos envolvendo indivíduos animais foram aprovados pelo Thüringer Landesamt für Verbraucherschutz Abteilung Tiergesundheit und Tierschutz, Alemanha. Porque o sistema venoso portal foi visualizado separadamente a partir do sistema venoso hepático, foram necessários animais separados para as diferentes plantas vasculares.
1. Reagentes Preparação
- A heparina-solução salina
- Adicionar 0,1 ml de heparina em 10 ml de solução salina (5 UI / ml).
- mistura de composto de silicone
- Adicionar 2 ml de MV-120 em um tubo de 5 ml. Diluir MV-120 por adição de 3 ml de diluente MV resultante em uma solução a 40%.
Injeção 2. Portal venoso Sistema de Silicone
- Laparotomia
- Posicione o mouse na câmara de indução da anestesia e anestesiar-lo com isoflurano a 2% e 0,3 L / min de oxigênio.
- Corrigir o rato anestesiado na mesa de operação usando a fita com a inalação contínua de 2% éoflurane e 0,3 L / min de oxigénio. Verifique a retirada reflexa toe-pitada do mouse e começar a operação, se o reflexo está ausente.
- Faça uma incisão transversal no abdome com uma tesoura para a camada de pele e um coagulador elétrica para a camada muscular. Mover os intestinos para o lado esquerdo, utilizando pontas de algodão e cobrir os intestinos com solução salina gaze embebida.
- A inserção de cateter
- Dissecar veia porta ao microscópio utilizando micro-fórceps. Coloque um 6-0 sutura de seda por baixo da veia porta extra-hepática, em aproximadamente à distância de 1 mm a sua bifurcação e amarrá-lo livremente para uso posterior.
- Injectar solução preparada heparina-soro na veia peniana (masculino) ou veia cava inferior (feminino) para heparinização sistêmica por 5 min.
- Insira o de calibre 26 (26 g) de cateter com agulha na veia porta e corrigi-lo com uma pinça
- solução salina-heparina e composto de silicone perfusão
- Carga Sol heparina-solução salinaution em 5 ml seringa e ligar dispositivo de perfusão. Encher o cateter totalmente com solução de heparina-solução salina para evitar bolhas de ar.
- Ligue o tubo de extensão ao cateter e corrigi-los com firmeza. Iniciar a perfusão com solução salina de heparina, com uma taxa de perfusão de 0,4 ml / min.
- sutura pré-colocado ligadura de seda 6-0 para fixar o dobro do cateter e bloqueando o fluxo de sangue da veia esplênica e veia mesentérica. Euthanatize o mouse por sangria através de perfusão sob anestesia.
- Lavar o fígado utilizando solução salina durante todo o procedimento de perfusão, a fim de mantê-lo úmido.
- Adicionar 0,1 ml de agente de cura para o tubo de MV-120. Mudar seringa heparina-solução salina para uma seringa de silicone.
- Iniciar a perfusão de silicone com uma taxa de perfusão de 0,2 ml / min, durante cerca de 1 min para prefill o sistema de cateter e para encher o sistema da veia porta. Pare de perfusão silicone quando os vasos na superfície ficar azul.
- Amostragem
- Manter o fígado in-situ untIL o silicone está totalmente polimerizada depois de aproximadamente 15 a 30 minutos. Dissecar ligamentos que ligam o fígado e órgãos adjacentes, com o cuidado de manter o fígado intacto. Explante o fígado e colocá-lo em formol para fixação.
Injeção 3. hepática venosa Sistema de Silicone
- Execute laparotomia como foi executado no passo 2.1 e expor campo operatório totalmente.
- A inserção de cateter
- Dissecar veia porta ao microscópio utilizando micro-fórceps. Coloque um 6-0 sutura de seda por baixo da veia porta extra-hepática, em aproximadamente à distância de 1 mm a sua bifurcação e amarrá-lo livremente para uso posterior.
- Injectar solução preparada heparina-soro na veia peniana (masculino) ou veia cava inferior (feminino) para heparinização sistêmica por 5 min.
- Insira um cateter 26 G (cateter 1) com agulha na veia porta e corrigi-lo com uma pinça. Insira outro 26 G cateter (sonda 2) com agulha na veia cava inferior e corrigi-lo com uma pinça.
- Ligadura dos ramos da veia cava inferior (incluindo veias renais direita e esquerda) e sua extremidade distal usando 6-0 sintética, monofilamento, fio de polipropileno não absorvível.
- solução salina-heparina e composto de silicone perfusão
- Carregar solução de heparina salina em 5 ml seringa e ligar dispositivo de perfusão. Encher um cateter completamente com solução de heparina-solução salina para evitar bolhas de ar. Ligue o tubo de extensão de cateter 1 e corrigi-lo com força. Iniciar a perfusão com solução salina de heparina, a uma taxa de 0,4 ml / min.
- sutura pré-colocado ligadura de seda 6-0 para fixar o dobro do cateter e bloqueando o fluxo de sangue da veia esplênica e veia mesentérica. Euthanatize o mouse por sangria através de perfusão sob anestesia.
- Lavar o fígado utilizando solução salina durante todo o procedimento de perfusão, a fim de mantê-lo úmido. Adicionar 0,1 ml de agente de cura para o tubo de MV-120. Troca heparina-solução salina com uma seringa seringa de silicone.
- Colocar um grampo na suprahepatic veia cava inferior para obstruir a saída do fígado.
- Ligue o tubo de extensão de catéter 2 e começar a perfusão de silicone com uma taxa de perfusão de 0,2 ml / min durante aproximadamente 2 minutos para alcançar um volume vascular hepática objectivo como relatado. Pare de perfusão silicone quando os vasos na superfície ficar azul.
- Amostragem
- Dissecar ligamentos hepáticas, evitando qualquer dano ao fígado. Explante o fígado e colocá-lo em formol para fixação.
4. Micro-CT (μCT) Scanning
Para digitalizar a amostra do fígado explantado usando μCT, são necessários os seguintes passos.
- Leve a amostra do fígado para fora da solução de fixação. Coloque o fígado para a cama μCT. Coloque a cama μCT com a amostra de fígado para o μCT.
- Adquirir topograma antes de iniciar a digitalização. Use um subscan para a amostra de fígado pequeno e duas subscans para grandes amostras.
- Selecione uma81; protocolo CT com uma alta resolução (por exemplo, HQD-6565-390-90). Este protocolo adquire 720 projeções com 1.032 x 1.012 pixels, durante uma rotação completa com o tempo de varredura de 90 segundos por sub-scan. Inicie a digitalização μCT.
5. histológicos cortes seriados
- Incorporar o modelo de fígado em parafina como um todo após a digitalização μCT. Amostra cortada em secções de parafina todo 4μm, resultando numa série de secções de 2.000 a 2.500.
- seções mancha com técnica de coloração adequada para visualizar eventos moleculares de interesse, como Ki-67 como marcador de proliferação e HMGB1 como um marcador de dano isquêmico. Determinar seqüência de coloração em relação à questão científica.
- Use um scanner de slides inteira para digitalizar as secções coradas.
- Execute 3D-reconstrução da árvore vascular (s) (já possível) e visualizar 3D-distribuição dos eventos moleculares em relação à árvore vascular (pesquisa em andamento).
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Representative Results
Critérios de qualidade
A qualidade da injecção de silicone pode ser julgada a olho nu durante o procedimento. As pequenas embarcações na superfície do fígado preencher gradualmente com o composto azul. Se a estrutura vascular normal foi observada sobre a superfície do fígado, a qualidade da injecção de borracha de silicone foi boa. Se o volume de perfusão foi insuficiente, os pequenos vasos na superfície do fígado não foram totalmente preenchido. Em contraste, mais de enchimento causado a ruptura vascular, tal como indicado por manchas azuis irregulares sobre a superfície do órgão. Ambos estão a causar dificuldades em cima do 3D-reconstrução em última análise, tornando um procedimento de um fracasso.
Para uma melhor avaliação da qualidade de injeção, foi realizada a digitalização μCT seguido de reconstrução vascular 3D usando software pré-clínica. Injection estava determinado a ser bem sucedida when segmentação resultou na visualização de uma árvore vascular completa intacta, sem estruturas rompidos indicados pelo extravasamento visível. Se a árvore vascular pareceu incompleta (Fig. 1A), o volume de perfusão foi insuficiente. Se mais de uma árvore vascular apareceu ou extravasamento foi visto (Fig. 1B), o volume de perfusão ou a pressão era insuficiente. Esta foi a razão mais provável para um fracasso. A pressão de perfusão pode, teoricamente, variar um pouco dependendo da viscosidade da solução. A viscosidade é dependente do tempo de polimerização decorrido entre a mistura do composto e a injecção no sistema vascular. Uma vez que algumas manipulações é necessária para a mistura e injecção, intervalo de tempo pode variar ligeiramente entre 3 min a 5 min.
Se a solução é de baixa viscosidade, pressão de perfusão é baixo. Neste caso, o composto pode transferir para a árvore vascular não injectada através do sistema sinusoidalque conduz a um volume ligeiramente maior de perfusão. Se a solução é adicionalmente polimerizado que conduzem a uma viscosidade mais elevada, a pressão de perfusão irá subir, fazendo com perturbações dos vasos e extravasamento.
Determinação do Volume de Perfusão Objectivo
Desde perfusão ou hiperperfusão inadequada causaria falha da injeção, padronizar o volume de perfusão foi considerado. Conforme relatado 2, 6% do volume hepática é ocupada pelo sangue e 44% do sangue no fígado reside nos grandes vasos (por exemplo, artéria hepática, veia portal). Volume do fígado em ratos é de cerca de 1,3 ml 11. Portanto, o volume vascular total do sistema venoso portal em ratinhos normais foi estimado na faixa entre 0,03 ml e 0,04 ml. taxa de fluxo foi ajustada para 0,2 ml / min e o tempo total de perfusão foi ajustada para cerca de um minuto, resultando num volume total injectadode cerca de 0,2 ml.
Este volume aparentemente elevada é necessária, uma vez que o sistema de cateter deve ser previamente cheia, que leva cerca de 0,1-0,15 mL. Um volume adicional de 0,05 ml é necessário para encher a veia porta hepática proximal entre hilo e a ligação do cateter. A taxa de fluxo para injecção na veia hepática também foi ajustado para 0,2 ml / min, mas o tempo total de perfusão foi prolongado para 2 min, resultando num volume total mais elevada de cerca de 0,4 ml. o volume vascular intra-hepática total foi assumido como sendo semelhante ao volume total vascular veia porta. No entanto, o volume necessário para encher a veia cava intra-hepática entre a ligação e a braçadeira infrahepatic suprahepática foi estimada com 0,2 ml.
Taxa de sucesso
Um total de 49 animais foram submetidos a injeção de silicone: 22 animais no sistema de PV e 27 animais em thsistema HV e. A nossa taxa de sucesso de injecção foi de 55% (12/22) no grupo pv e 89% (24/27) no grupo HV. Tendo em conta que o grupo PV foi usada para estabelecer a técnica de injecção de silicone no início (n = 4), a taxa de sucesso da injecção para o sistema PV deve efectivamente ser superior a 55%. No entanto, as imagens μCT obtidos com estas injeções foram adequados para a reconstrução 3D e análise quantitativa. Além disso, as plantas vasculares a partir de qualquer PV ou HV de 36 ratos pode ser reconstruída com o software Imalytics pré-clínica.
Parênquima e Vascular Regeneração
Uma vez resolvido μCT série de amostras de fígado de murino após hepatectomia foi submetido a uma análise qualitativa. Parenquimatosa regeneração de crescimento consistia em 3D do fígado remanescente. regeneração vascular foi definido como o tecido que exibiu um aumento nocomprimento e diâmetro do tronco vascular, com os seus principais ramos e crescimento de ramos terminais adicionais, tanto na veia porta e árvore venosa hepática.
Atualmente, vários parâmetros quantitativos adequados para descrever o crescimento vascular e da relação entre a regeneração do parênquima hepático e regeneração vascular estão sob investigação. Estes incluem parâmetros indicativos de crescimento vascular, incluindo o comprimento vascular máxima (Fig. 2), o raio vascular e densidade vascular em termos de volume total vascular comprimento / fígado ou do volume de volume / vascular fígado.
O volume total do fígado e do volume de lobos do fígado selecionados foram calculados. Em fígados normais, o volume total do fígado variaram de 1,2 ml a 1,6 ml (n = 6, incluindo tanto o grupo pv e grupo HV). Ele diminuiu para 0,6 a 0,7 ml depois de realizar uma ressecção hepática estendida removendo a esquerda lateral e lobo mediano. O volume do fígado aumentou continuamente durante o crescimento do fígado. Por dia pós-operatório 7 (POD 7), o volume do fígado aumentou para aproximadamente 88% do seu volume original, ou seja, 2,6 vezes. O aumento do volume do fígado relacionada com a recuperação de peso do fígado.
volumes vasculares totais do sistema PV e sistema de HV foram computados. o volume vascular total do sistema de HV foi maior do que no sistema PV, porque parte da intra-hepático da veia cava inferior foi incluído. o volume vascular total do sistema de PV variaram de 0,05 a 0,08 ml em ratos normais. Ele diminuiu para 0,03 a 0,04 ml, depois 70% hepatectomia parcial. Por POD 7, o volume vascular total do fígado remanescente aumentou para 100% do volume original. o volume vascular total de HV variaram de 0,14 a 0,16 ml. o volume vascular diminuiu de 0,08 para 0,09 ml após ressecção. Na primeira semana de pós-operatório, o volume vascular total do fígado aumentou b remanescentey 94% do valor original.
À medida que a relação entre os resultados, aumento do volume vascular e volume do parênquima, uma densidade vascular foi calculado, mais precisamente a fração de volume vascular (volume vascular dividido pelo volume do fígado). Isto revelou que a fração de volume vascular manteve-se relativamente estável durante todo o processo de regeneração.
Visualização 3D de eventos moleculares
Depois CT-digitalizar os espécimes selecionados foram submetidos a cortes seriados, cedendo até 2000 lâminas, que eram totalmente digitalizada e usada para reconstruir o portal, bem como a árvore venosa hepática 12. Este é o pré-requisito para o futuro visualização 3D de eventos moleculares durante a regeneração em relação à árvore vascular crescendo.
Figura 1. Monitoramento da qualidade da injeção de silicone. Um. Preenchimento incompleto da veia porta inferior direita (seta na esquerda) e veia porta caudado (seta à direita) foram visualizados em software Imalytics pré-clínica como descontinuidades da árvore vascular. Isto indicou uma pressão de perfusão ou perfusão volume inadequado ou a existência de bolhas de ar. B. Extravasamento de veia porta inferior direita foi visualizado que indicou rompimento de um vaso devido à pressão inadequada ou hiperperfusão. Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Figura 2. Medida do comprimento do navio máxima da direitainferior da veia porta. Para determinar o comprimento do vaso máxima, um ponto inicial e um ponto final foram colocados na raiz e a extremidade distai da veia inferior direita do portal (VPID) da máscara vascular (azul e magenta marcadores de bola) no software pré-clínico. O comprimento do percurso vascular do VPID (10,95 mm) foi obtido como parte de avaliar o "Caminho tortuosidade". Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
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Discussion
Contrastando a árvore vascular por injecção de silicone e digitalização μCT foi introduzido em modelos de tumor e modelos de doenças neurológicas frequentemente para estudar a progressão 5,7,8,10 angiogénico. Melhorias na metodologia de injecção de silicone foram feitas no presente estudo para visualizar e quantificar o crescimento vascular após hepatectomia parcial em ratos.
Há uma série de passos críticos que necessitam de atenção para conseguir uma boa qualidade de perfusão. Primeiro de tudo, a heparinização sistémica é altamente recomendado antes de descarregar o fígado com solução salina ou com heparina para evitar a coagulação do sangue no interior do fígado. Eliminação das bolhas de ar do tubo também é importante para conseguir uma boa qualidade de perfusão de silicone. A determinação da taxa de perfusão e pressão deve primeiro ser baseada em parâmetros hemodinâmicos fisiológicas 17. O tempo de perfusão reflete o volume injetado total e é estimada tomando o intravascular esperadovolume e o volume prefilling do sistema de cateter em conta.
O silicone é um composto altamente viscoso que difere a partir de sangue ou soro fisiológico. Portanto, vários ensaios são necessárias para ajustar a taxa de perfusão e pressão. A manutenção de taxa de fluxo constante de injecção e a pressão é necessária para evitar a dilatação severa ou mesmo a ruptura de pequenos vasos. O tempo de perfusão é definida de acordo com o volume de injeção necessária estimada. No entanto, a perfusão deve ser imediatamente interrompida quando o composto azul torna-se visível em vasos sobre a superfície do fígado. Caso contrário, o silicone pode escorrer para sinusóides e em outro sistema vascular que irá interferir com a reconstrução e análise posterior.
Normalmente, silicone é perfundido sistematicamente através do ventrículo esquerdo em relatórios mais publicados 1,3,15. O ventrículo esquerdo é fácil expor a permitir o livre acesso ao local da injeção. No entanto, a desvantagem é que esta via é RAterap indirecto porque o agente de contraste tem de passar pela circulação antes de chegar ao local de interesse. Portanto, o procedimento cirúrgico da técnica de injecção de silicone foi modificado neste estudo. Em contraste com a via indirecta frequentemente seleccionado de aplicação executado por outros, o composto de silicone foi directamente injectado no sistema vascular de interesse, em vez de todo o corpo de contraste. Deste modo, a velocidade e o volume de perfusão pode ser melhor controlada. O sistema venoso portal hepático e sistema venoso pode ser perfundido e reconstruída separadamente para análise individual mais tarde, como mostrado no vídeo.
A limitação deste processo modificado é a dificuldade técnica. É um desafio para executar com êxito uma injeção intraportal utilizando o composto altamente viscoso em camundongos, porque a estrutura vascular é tão delicada. É bastante fácil de destruir os vasos durante o procedimento. Assim, a dissecção de veia porta e inse cateterrtion deve ser realizado com cuidado.
Contrastante das árvores vasculares e subsequente imaging μCT dos fígados explantados é uma ferramenta útil para visualizar e quantificar a regeneração vascular após hepatectomia parcial. vasculares parâmetros quantitativos podem ser utilizados para uma melhor compreensão da cinética de crescimento vascular na progressão da regeneração hepática. Além disso, a reconstrução 3D de ambos os sistemas vasculares hepáticas com base em cortes seriados é tecnicamente viável, embora representando uma carga de trabalho enorme.
Esta técnica pode ser aplicada em vários modelos em que a visualização e a quantificação do crescimento vascular é importante. Além disso, a visualização 3D de eventos moleculares em relação à árvore vascular subjacente é ao alcance. Exemplos de eventos moleculares de interesse poderia ser a detecção do marcador de proliferação, tais como o Ki-67 ou marcadores de danos isquémicos, tais como a HMGB1. Avaliar o ev molecular espacialmente resolvidaentos na vizinhança da árvore vascular regeneração dentro do parênquima hepático em regeneração é o pré-requisito para multi-escala de modelagem sistemas avançados de biologia. Esta técnica de injeção de silicone é um passo experimental para alcançar este objetivo.
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Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| PERFUSOR® VI | B.BRAUN | 87 222/0 | |
| Pipetus®-akku | Hirschmann | 9907200 | |
| Pipets | Greiner | 606180 | |
| micro scissors | Fine Science Tools (F·S·L) | No. 14058-09 | |
| micro serrefine | Fine Science Tools (F·S·L) | No.18055-05 | |
| Micro clamps applicator | Fine Science Tools (F·S·L) | No. 18057-14 | |
| Straight micro forceps | Fine Science Tools (F·S·L) | No. 00632-11 | |
| Curved micro forceps | Fine Science Tools (F·S·L) | No. 00649-11 | |
| needle-holder | Fine Science Tools (F·S·L) | No. 12061-01 | |
| 1 ml syringe | B.Braun | 9161406V | |
| 5 ml syringe | B.Braun | 4606051V | |
| extension and connection lines | B.Braun | 4256000 | 30 cm, inner ø 1.2 mm |
| 6-0 silk (Perma-Hand Seide) | Ethicon | 639H | |
| 6-0 prolene | Ethicon | 8711H | |
| Microfil® MV diluent | FLOW TECH, INC | ||
| Microfil® MV - 120 | FLOW TECH, INC | MV - 120 (blue) | |
| MV curing agent | FLOW TECH, INC | ||
| Heparin 2500 I.E./5 ml | Rotexmedica | ETI3L318-15 | |
| Saline | Fresenius Kabi Deutschland GmbH | E15117/D DE | |
| Imalytics Preclinical software | Experimental Molecular Imaging, RWTH Aachen University, Germany | ||
| HepaVision | Fraunhofer MEVIS, Bremen, Germany | ||
| NanoZoomer 2.0-HT Digital slide scanner | Hamamatsu Electronic Press, Japan | C9600 | |
| Tomoscope Duo CT | CT Imaging GmbH, Erlangen, Germany | TomoScope® Synergy |
References
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