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Medicine

Visualização dos Vascular e parênquima regeneração após 70% hepatectomia parcial em ratos normais

doi: 10.3791/53935 Published: September 13, 2016

Abstract

Um procedimento de injecção de silicone modificado foi usado para a visualização da árvore vascular hepática. Este procedimento consistiu na injecção in vivo do composto de silicone, através de um cateter de 26 G, para o portal ou na veia hepática. Após a injeção de silicone, órgãos foram explantados e preparado para micro-CT (μCT) digitalização ex-vivo. O procedimento de injeção de silicone é tecnicamente desafiador. Alcançar um resultado bem-sucedido requer uma vasta experiência microcirúrgica do cirurgião. Um dos desafios deste procedimento envolve a determinação da taxa de perfusão adequada para o composto de silicone. A taxa de perfusão para o composto de silicone tem de ser definido com base na hemodinâmica do sistema vascular de interesse. taxa de perfusão inadequada pode levar a uma perfusão incompleta, dilatação artificial e ruptura de árvores vasculares.

A reconstrução 3D do sistema vascular foi baseado em tomografias e foi realizada comsoftware pré-clínico, tais como HepaVision. A qualidade da árvore vascular reconstruído foi directamente relacionada com a qualidade da perfusão de silicone. Subsequentemente vasculares parâmetros computados indicativos de crescimento vascular, tais como o volume vascular total, foram calculadas com base nas reconstruções vasculares. Contrastando a árvore vascular com silicone permitido para processamento subsequente histológica do espécime após a digitalização μCT. A amostra pode ser submetida a cortes seriados, análise histológica e diapositivos de todo, e, posteriormente, para a reconstrução 3D das árvores vasculares com base em imagens histológicas. Este é o pré-requisito para a detecção de eventos moleculares e sua distribuição em relação à árvore vascular. Este procedimento de injecção de silicone modificado também pode ser usado para visualizar e reconstruir os sistemas vasculares de outros órgãos. Esta técnica tem o potencial de ser aplicados extensivamente para estudos relativos à anatomia vascular e crescimento em vários animais umamodelos de doenças nd.

Introduction

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A regeneração hepática é muitas vezes determinada pela medição do aumento de peso do fígado e do volume e através da avaliação da taxa de proliferação dos hepatócitos 16. No entanto, a regeneração hepática não só é induzir a regeneração do parênquima, mas também a regeneração vascular 6. Portanto, o crescimento vascular devem ser investigados no que diz respeito ao seu papel na progressão da regeneração hepática. A visualização do sistema vascular hepática é crítica para avançar a nossa compreensão da regeneração vascular. Numerosos métodos indirectos foram desenvolvidas para estudar os mecanismos moleculares subjacentes à regeneração vascular hepática. Tradicionalmente, a detecção de citocinas (factor de crescimento endotelial vascular, VEGF) 14, quimiocinas e seus receptores (CXCR4 / CXCR7 / CXCL12) 4 ter sido o esteio para estudar a regeneração vascular. No entanto, um modelo 3D em conjunto com a análise quantitativa da vasculatura acrescentaria anatómica críticainformações para obter uma melhor compreensão da relação importante entre o parênquima hepático e regeneração vascular.

Para visualizar o sistema vascular hepática, o que requer contrastando as árvores vasculares, os ratinhos foram injectados com um agente de contraste radiopaco borracha de silicone directamente para o portal ou árvore vascular venoso hepático. Após a polimerização do silicone e explante do órgão, as amostras de fígado foram submetidos a varrimento μCT usando um aparelho de tomografia computadorizada. Os exames resultaram em representações imagem voxel do silicone de injecção 9 espécimes.

Para o controlo de qualidade, o sistema vascular foi visualizado pela primeira vez em 3D utilizando o software pré-clínico. Segmentação foi realizada através da criação de um limite entre a intensidade de tecidos moles e a intensidade navio. A máscara navio resultante foi visualizada usando renderização superfície. O software também permitiu a determinação manual dos dois parâmetros de Vasculcrescimento ar: comprimento do navio máxima e raio.

Um software pré-clínico foi então usado para a reconstrução 3D de árvores vasculares e subsequente cálculo dos territórios vasculares fornecimento ou drenagem 13. Além disso, este software determinado automaticamente certos parâmetros de crescimento vascular, tais como o comprimento total de todas as estruturas vasculares visíveis também conhecido como o comprimento da aresta ou volume total total do vaso.

O procedimento de silicone perfusão foi realizada em camundongos normais e em ratos que foram submetidos a 70% hepatectomia parcial (HP). Os fígados foram recolhidos a diferentes pontos de tempo de observação após a ressecção para analisar vascular e do parênquima regeneração do fígado utilizando a técnica de visualização e quantificação acima mencionado.

Os objetivos principais deste filme são: (1) demonstrar a injeção delicada técnica necessária para atingir contraste ideal e (2) mostram o potencial fr benefício resultanteom uma análise detalhada da amostra resultantes usando μCT e cortes seriados histológicas. Depois de assistir a este filme, o leitor deve ter uma melhor compreensão de como injetar composto de silicone em um sistema vascular específico e da utilidade e aplicabilidade da técnica.

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Protocol

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Procedimentos envolvendo indivíduos animais foram aprovados pelo Thüringer Landesamt für Verbraucherschutz Abteilung Tiergesundheit und Tierschutz, Alemanha. Porque o sistema venoso portal foi visualizado separadamente a partir do sistema venoso hepático, foram necessários animais separados para as diferentes plantas vasculares.

1. Reagentes Preparação

  1. A heparina-solução salina
    1. Adicionar 0,1 ml de heparina em 10 ml de solução salina (5 UI / ml).
  2. mistura de composto de silicone
    1. Adicionar 2 ml de MV-120 em um tubo de 5 ml. Diluir MV-120 por adição de 3 ml de diluente MV resultante em uma solução a 40%.

Injeção 2. Portal venoso Sistema de Silicone

  1. Laparotomia
    1. Posicione o mouse na câmara de indução da anestesia e anestesiar-lo com isoflurano a 2% e 0,3 L / min de oxigênio.
    2. Corrigir o rato anestesiado na mesa de operação usando a fita com a inalação contínua de 2% éoflurane e 0,3 L / min de oxigénio. Verifique a retirada reflexa toe-pitada do mouse e começar a operação, se o reflexo está ausente.
    3. Faça uma incisão transversal no abdome com uma tesoura para a camada de pele e um coagulador elétrica para a camada muscular. Mover os intestinos para o lado esquerdo, utilizando pontas de algodão e cobrir os intestinos com solução salina gaze embebida.
  2. A inserção de cateter
    1. Dissecar veia porta ao microscópio utilizando micro-fórceps. Coloque um 6-0 sutura de seda por baixo da veia porta extra-hepática, em aproximadamente à distância de 1 mm a sua bifurcação e amarrá-lo livremente para uso posterior.
    2. Injectar solução preparada heparina-soro na veia peniana (masculino) ou veia cava inferior (feminino) para heparinização sistêmica por 5 min.
    3. Insira o de calibre 26 (26 g) de cateter com agulha na veia porta e corrigi-lo com uma pinça
  3. solução salina-heparina e composto de silicone perfusão
    1. Carga Sol heparina-solução salinaution em 5 ml seringa e ligar dispositivo de perfusão. Encher o cateter totalmente com solução de heparina-solução salina para evitar bolhas de ar.
    2. Ligue o tubo de extensão ao cateter e corrigi-los com firmeza. Iniciar a perfusão com solução salina de heparina, com uma taxa de perfusão de 0,4 ml / min.
    3. sutura pré-colocado ligadura de seda 6-0 para fixar o dobro do cateter e bloqueando o fluxo de sangue da veia esplênica e veia mesentérica. Euthanatize o mouse por sangria através de perfusão sob anestesia.
    4. Lavar o fígado utilizando solução salina durante todo o procedimento de perfusão, a fim de mantê-lo úmido.
    5. Adicionar 0,1 ml de agente de cura para o tubo de MV-120. Mudar seringa heparina-solução salina para uma seringa de silicone.
    6. Iniciar a perfusão de silicone com uma taxa de perfusão de 0,2 ml / min, durante cerca de 1 min para prefill o sistema de cateter e para encher o sistema da veia porta. Pare de perfusão silicone quando os vasos na superfície ficar azul.
  4. Amostragem
    1. Manter o fígado in-situ untIL o silicone está totalmente polimerizada depois de aproximadamente 15 a 30 minutos. Dissecar ligamentos que ligam o fígado e órgãos adjacentes, com o cuidado de manter o fígado intacto. Explante o fígado e colocá-lo em formol para fixação.

Injeção 3. hepática venosa Sistema de Silicone

  1. Execute laparotomia como foi executado no passo 2.1 e expor campo operatório totalmente.
  2. A inserção de cateter
    1. Dissecar veia porta ao microscópio utilizando micro-fórceps. Coloque um 6-0 sutura de seda por baixo da veia porta extra-hepática, em aproximadamente à distância de 1 mm a sua bifurcação e amarrá-lo livremente para uso posterior.
    2. Injectar solução preparada heparina-soro na veia peniana (masculino) ou veia cava inferior (feminino) para heparinização sistêmica por 5 min.
    3. Insira um cateter 26 G (cateter 1) com agulha na veia porta e corrigi-lo com uma pinça. Insira outro 26 G cateter (sonda 2) com agulha na veia cava inferior e corrigi-lo com uma pinça.
    4. Ligadura dos ramos da veia cava inferior (incluindo veias renais direita e esquerda) e sua extremidade distal usando 6-0 sintética, monofilamento, fio de polipropileno não absorvível.
  3. solução salina-heparina e composto de silicone perfusão
    1. Carregar solução de heparina salina em 5 ml seringa e ligar dispositivo de perfusão. Encher um cateter completamente com solução de heparina-solução salina para evitar bolhas de ar. Ligue o tubo de extensão de cateter 1 e corrigi-lo com força. Iniciar a perfusão com solução salina de heparina, a uma taxa de 0,4 ml / min.
    2. sutura pré-colocado ligadura de seda 6-0 para fixar o dobro do cateter e bloqueando o fluxo de sangue da veia esplênica e veia mesentérica. Euthanatize o mouse por sangria através de perfusão sob anestesia.
    3. Lavar o fígado utilizando solução salina durante todo o procedimento de perfusão, a fim de mantê-lo úmido. Adicionar 0,1 ml de agente de cura para o tubo de MV-120. Troca heparina-solução salina com uma seringa seringa de silicone.
    4. Colocar um grampo na suprahepatic veia cava inferior para obstruir a saída do fígado.
    5. Ligue o tubo de extensão de catéter 2 e começar a perfusão de silicone com uma taxa de perfusão de 0,2 ml / min durante aproximadamente 2 minutos para alcançar um volume vascular hepática objectivo como relatado. Pare de perfusão silicone quando os vasos na superfície ficar azul.
  4. Amostragem
    1. Dissecar ligamentos hepáticas, evitando qualquer dano ao fígado. Explante o fígado e colocá-lo em formol para fixação.

4. Micro-CT (μCT) Scanning

Para digitalizar a amostra do fígado explantado usando μCT, são necessários os seguintes passos.

  1. Leve a amostra do fígado para fora da solução de fixação. Coloque o fígado para a cama μCT. Coloque a cama μCT com a amostra de fígado para o μCT.
  2. Adquirir topograma antes de iniciar a digitalização. Use um subscan para a amostra de fígado pequeno e duas subscans para grandes amostras.
  3. Selecione uma81; protocolo CT com uma alta resolução (por exemplo, HQD-6565-390-90). Este protocolo adquire 720 projeções com 1.032 x 1.012 pixels, durante uma rotação completa com o tempo de varredura de 90 segundos por sub-scan. Inicie a digitalização μCT.

5. histológicos cortes seriados

  1. Incorporar o modelo de fígado em parafina como um todo após a digitalização μCT. Amostra cortada em secções de parafina todo 4μm, resultando numa série de secções de 2.000 a 2.500.
  2. seções mancha com técnica de coloração adequada para visualizar eventos moleculares de interesse, como Ki-67 como marcador de proliferação e HMGB1 como um marcador de dano isquêmico. Determinar seqüência de coloração em relação à questão científica.
  3. Use um scanner de slides inteira para digitalizar as secções coradas.
  4. Execute 3D-reconstrução da árvore vascular (s) (já possível) e visualizar 3D-distribuição dos eventos moleculares em relação à árvore vascular (pesquisa em andamento).

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Representative Results

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Critérios de qualidade

A qualidade da injecção de silicone pode ser julgada a olho nu durante o procedimento. As pequenas embarcações na superfície do fígado preencher gradualmente com o composto azul. Se a estrutura vascular normal foi observada sobre a superfície do fígado, a qualidade da injecção de borracha de silicone foi boa. Se o volume de perfusão foi insuficiente, os pequenos vasos na superfície do fígado não foram totalmente preenchido. Em contraste, mais de enchimento causado a ruptura vascular, tal como indicado por manchas azuis irregulares sobre a superfície do órgão. Ambos estão a causar dificuldades em cima do 3D-reconstrução em última análise, tornando um procedimento de um fracasso.

Para uma melhor avaliação da qualidade de injeção, foi realizada a digitalização μCT seguido de reconstrução vascular 3D usando software pré-clínica. Injection estava determinado a ser bem sucedida when segmentação resultou na visualização de uma árvore vascular completa intacta, sem estruturas rompidos indicados pelo extravasamento visível. Se a árvore vascular pareceu incompleta (Fig. 1A), o volume de perfusão foi insuficiente. Se mais de uma árvore vascular apareceu ou extravasamento foi visto (Fig. 1B), o volume de perfusão ou a pressão era insuficiente. Esta foi a razão mais provável para um fracasso. A pressão de perfusão pode, teoricamente, variar um pouco dependendo da viscosidade da solução. A viscosidade é dependente do tempo de polimerização decorrido entre a mistura do composto e a injecção no sistema vascular. Uma vez que algumas manipulações é necessária para a mistura e injecção, intervalo de tempo pode variar ligeiramente entre 3 min a 5 min.

Se a solução é de baixa viscosidade, pressão de perfusão é baixo. Neste caso, o composto pode transferir para a árvore vascular não injectada através do sistema sinusoidalque conduz a um volume ligeiramente maior de perfusão. Se a solução é adicionalmente polimerizado que conduzem a uma viscosidade mais elevada, a pressão de perfusão irá subir, fazendo com perturbações dos vasos e extravasamento.

Determinação do Volume de Perfusão Objectivo

Desde perfusão ou hiperperfusão inadequada causaria falha da injeção, padronizar o volume de perfusão foi considerado. Conforme relatado 2, 6% do volume hepática é ocupada pelo sangue e 44% do sangue no fígado reside nos grandes vasos (por exemplo, artéria hepática, veia portal). Volume do fígado em ratos é de cerca de 1,3 ml 11. Portanto, o volume vascular total do sistema venoso portal em ratinhos normais foi estimado na faixa entre 0,03 ml e 0,04 ml. taxa de fluxo foi ajustada para 0,2 ml / min e o tempo total de perfusão foi ajustada para cerca de um minuto, resultando num volume total injectadode cerca de 0,2 ml.

Este volume aparentemente elevada é necessária, uma vez que o sistema de cateter deve ser previamente cheia, que leva cerca de 0,1-0,15 mL. Um volume adicional de 0,05 ml é necessário para encher a veia porta hepática proximal entre hilo e a ligação do cateter. A taxa de fluxo para injecção na veia hepática também foi ajustado para 0,2 ml / min, mas o tempo total de perfusão foi prolongado para 2 min, resultando num volume total mais elevada de cerca de 0,4 ml. o volume vascular intra-hepática total foi assumido como sendo semelhante ao volume total vascular veia porta. No entanto, o volume necessário para encher a veia cava intra-hepática entre a ligação e a braçadeira infrahepatic suprahepática foi estimada com 0,2 ml.

Taxa de sucesso

Um total de 49 animais foram submetidos a injeção de silicone: 22 animais no sistema de PV e 27 animais em thsistema HV e. A nossa taxa de sucesso de injecção foi de 55% (12/22) no grupo pv e 89% (24/27) no grupo HV. Tendo em conta que o grupo PV foi usada para estabelecer a técnica de injecção de silicone no início (n = 4), a taxa de sucesso da injecção para o sistema PV deve efectivamente ser superior a 55%. No entanto, as imagens μCT obtidos com estas injeções foram adequados para a reconstrução 3D e análise quantitativa. Além disso, as plantas vasculares a partir de qualquer PV ou HV de 36 ratos pode ser reconstruída com o software Imalytics pré-clínica.

Parênquima e Vascular Regeneração

Uma vez resolvido μCT série de amostras de fígado de murino após hepatectomia foi submetido a uma análise qualitativa. Parenquimatosa regeneração de crescimento consistia em 3D do fígado remanescente. regeneração vascular foi definido como o tecido que exibiu um aumento nocomprimento e diâmetro do tronco vascular, com os seus principais ramos e crescimento de ramos terminais adicionais, tanto na veia porta e árvore venosa hepática.

Atualmente, vários parâmetros quantitativos adequados para descrever o crescimento vascular e da relação entre a regeneração do parênquima hepático e regeneração vascular estão sob investigação. Estes incluem parâmetros indicativos de crescimento vascular, incluindo o comprimento vascular máxima (Fig. 2), o raio vascular e densidade vascular em termos de volume total vascular comprimento / fígado ou do volume de volume / vascular fígado.

O volume total do fígado e do volume de lobos do fígado selecionados foram calculados. Em fígados normais, o volume total do fígado variaram de 1,2 ml a 1,6 ml (n = 6, incluindo tanto o grupo pv e grupo HV). Ele diminuiu para 0,6 a 0,7 ml depois de realizar uma ressecção hepática estendida removendo a esquerda lateral e lobo mediano. O volume do fígado aumentou continuamente durante o crescimento do fígado. Por dia pós-operatório 7 (POD 7), o volume do fígado aumentou para aproximadamente 88% do seu volume original, ou seja, 2,6 vezes. O aumento do volume do fígado relacionada com a recuperação de peso do fígado.

volumes vasculares totais do sistema PV e sistema de HV foram computados. o volume vascular total do sistema de HV foi maior do que no sistema PV, porque parte da intra-hepático da veia cava inferior foi incluído. o volume vascular total do sistema de PV variaram de 0,05 a 0,08 ml em ratos normais. Ele diminuiu para 0,03 a 0,04 ml, depois 70% hepatectomia parcial. Por POD 7, o volume vascular total do fígado remanescente aumentou para 100% do volume original. o volume vascular total de HV variaram de 0,14 a 0,16 ml. o volume vascular diminuiu de 0,08 para 0,09 ml após ressecção. Na primeira semana de pós-operatório, o volume vascular total do fígado aumentou b remanescentey 94% do valor original.

À medida que a relação entre os resultados, aumento do volume vascular e volume do parênquima, uma densidade vascular foi calculado, mais precisamente a fração de volume vascular (volume vascular dividido pelo volume do fígado). Isto revelou que a fração de volume vascular manteve-se relativamente estável durante todo o processo de regeneração.

Visualização 3D de eventos moleculares

Depois CT-digitalizar os espécimes selecionados foram submetidos a cortes seriados, cedendo até 2000 lâminas, que eram totalmente digitalizada e usada para reconstruir o portal, bem como a árvore venosa hepática 12. Este é o pré-requisito para o futuro visualização 3D de eventos moleculares durante a regeneração em relação à árvore vascular crescendo.

"Figura Figura 1. Monitoramento da qualidade da injeção de silicone. Um. Preenchimento incompleto da veia porta inferior direita (seta na esquerda) e veia porta caudado (seta à direita) foram visualizados em software Imalytics pré-clínica como descontinuidades da árvore vascular. Isto indicou uma pressão de perfusão ou perfusão volume inadequado ou a existência de bolhas de ar. B. Extravasamento de veia porta inferior direita foi visualizado que indicou rompimento de um vaso devido à pressão inadequada ou hiperperfusão. Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figura 2
Figura 2. Medida do comprimento do navio máxima da direitainferior da veia porta. Para determinar o comprimento do vaso máxima, um ponto inicial e um ponto final foram colocados na raiz e a extremidade distai da veia inferior direita do portal (VPID) da máscara vascular (azul e magenta marcadores de bola) no software pré-clínico. O comprimento do percurso vascular do VPID (10,95 mm) foi obtido como parte de avaliar o "Caminho tortuosidade". Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

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Discussion

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Contrastando a árvore vascular por injecção de silicone e digitalização μCT foi introduzido em modelos de tumor e modelos de doenças neurológicas frequentemente para estudar a progressão 5,7,8,10 angiogénico. Melhorias na metodologia de injecção de silicone foram feitas no presente estudo para visualizar e quantificar o crescimento vascular após hepatectomia parcial em ratos.

Há uma série de passos críticos que necessitam de atenção para conseguir uma boa qualidade de perfusão. Primeiro de tudo, a heparinização sistémica é altamente recomendado antes de descarregar o fígado com solução salina ou com heparina para evitar a coagulação do sangue no interior do fígado. Eliminação das bolhas de ar do tubo também é importante para conseguir uma boa qualidade de perfusão de silicone. A determinação da taxa de perfusão e pressão deve primeiro ser baseada em parâmetros hemodinâmicos fisiológicas 17. O tempo de perfusão reflete o volume injetado total e é estimada tomando o intravascular esperadovolume e o volume prefilling do sistema de cateter em conta.

O silicone é um composto altamente viscoso que difere a partir de sangue ou soro fisiológico. Portanto, vários ensaios são necessárias para ajustar a taxa de perfusão e pressão. A manutenção de taxa de fluxo constante de injecção e a pressão é necessária para evitar a dilatação severa ou mesmo a ruptura de pequenos vasos. O tempo de perfusão é definida de acordo com o volume de injeção necessária estimada. No entanto, a perfusão deve ser imediatamente interrompida quando o composto azul torna-se visível em vasos sobre a superfície do fígado. Caso contrário, o silicone pode escorrer para sinusóides e em outro sistema vascular que irá interferir com a reconstrução e análise posterior.

Normalmente, silicone é perfundido sistematicamente através do ventrículo esquerdo em relatórios mais publicados 1,3,15. O ventrículo esquerdo é fácil expor a permitir o livre acesso ao local da injeção. No entanto, a desvantagem é que esta via é RAterap indirecto porque o agente de contraste tem de passar pela circulação antes de chegar ao local de interesse. Portanto, o procedimento cirúrgico da técnica de injecção de silicone foi modificado neste estudo. Em contraste com a via indirecta frequentemente seleccionado de aplicação executado por outros, o composto de silicone foi directamente injectado no sistema vascular de interesse, em vez de todo o corpo de contraste. Deste modo, a velocidade e o volume de perfusão pode ser melhor controlada. O sistema venoso portal hepático e sistema venoso pode ser perfundido e reconstruída separadamente para análise individual mais tarde, como mostrado no vídeo.

A limitação deste processo modificado é a dificuldade técnica. É um desafio para executar com êxito uma injeção intraportal utilizando o composto altamente viscoso em camundongos, porque a estrutura vascular é tão delicada. É bastante fácil de destruir os vasos durante o procedimento. Assim, a dissecção de veia porta e inse cateterrtion deve ser realizado com cuidado.

Contrastante das árvores vasculares e subsequente imaging μCT dos fígados explantados é uma ferramenta útil para visualizar e quantificar a regeneração vascular após hepatectomia parcial. vasculares parâmetros quantitativos podem ser utilizados para uma melhor compreensão da cinética de crescimento vascular na progressão da regeneração hepática. Além disso, a reconstrução 3D de ambos os sistemas vasculares hepáticas com base em cortes seriados é tecnicamente viável, embora representando uma carga de trabalho enorme.

Esta técnica pode ser aplicada em vários modelos em que a visualização e a quantificação do crescimento vascular é importante. Além disso, a visualização 3D de eventos moleculares em relação à árvore vascular subjacente é ao alcance. Exemplos de eventos moleculares de interesse poderia ser a detecção do marcador de proliferação, tais como o Ki-67 ou marcadores de danos isquémicos, tais como a HMGB1. Avaliar o ev molecular espacialmente resolvidaentos na vizinhança da árvore vascular regeneração dentro do parênquima hepático em regeneração é o pré-requisito para multi-escala de modelagem sistemas avançados de biologia. Esta técnica de injeção de silicone é um passo experimental para alcançar este objetivo.

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Materials

Name Company Catalog Number Comments
PERFUSOR® VI B.BRAUN 87 222/0
Pipetus®-akku Hirschmann 9907200
Pipets Greiner 606180
micro scissors Fine Science Tools (F·S·L) No. 14058-09
micro serrefine Fine Science Tools (F·S·L) No.18055-05
Micro clamps applicator Fine Science Tools (F·S·L) No. 18057-14
Straight micro forceps Fine Science Tools (F·S·L) No. 00632-11
Curved micro forceps Fine Science Tools (F·S·L) No. 00649-11
needle-holder Fine Science Tools (F·S·L) No. 12061-01
1 ml syringe B.Braun 9161406V
5 ml syringe B.Braun 4606051V
extension and connection lines B.Braun 4256000 30 cm, inner ø 1.2 mm
6-0 silk (Perma-Hand Seide) Ethicon 639H
6-0 prolene Ethicon 8711H
Microfil® MV diluent FLOW TECH, INC
Microfil® MV - 120 FLOW TECH, INC MV - 120 (blue)
MV curing agent FLOW TECH, INC
Heparin 2500 I.E./5 ml Rotexmedica ETI3L318-15
Saline Fresenius Kabi Deutschland GmbH E15117/D DE
Imalytics Preclinical software Experimental Molecular Imaging, RWTH Aachen University, Germany
HepaVision Fraunhofer MEVIS, Bremen, Germany
NanoZoomer 2.0-HT Digital slide scanner Hamamatsu Electronic Press, Japan  C9600
Tomoscope Duo CT  CT Imaging GmbH, Erlangen, Germany TomoScope® Synergy

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Xie, C., Wei, W., Schenk, A., Schwen, L. O., Zafarnia, S., Schwier, M., Gremse, F., Jank, I., Dirsch, O., Dahmen, U. Visualization of Vascular and Parenchymal Regeneration after 70% Partial Hepatectomy in Normal Mice. J. Vis. Exp. (115), e53935, doi:10.3791/53935 (2016).More

Xie, C., Wei, W., Schenk, A., Schwen, L. O., Zafarnia, S., Schwier, M., Gremse, F., Jank, I., Dirsch, O., Dahmen, U. Visualization of Vascular and Parenchymal Regeneration after 70% Partial Hepatectomy in Normal Mice. J. Vis. Exp. (115), e53935, doi:10.3791/53935 (2016).

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