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चेतन, अनर्गल चूहों में नसों में अर्क के साथ गुर्दे सहानुभूति तंत्रिका गतिविधि और रक्तचाप के एक साथ रिकॉर्डिंग के लिए उपंयास दृष्टिकोण ।

Published: February 14, 2018 doi: 10.3791/54120
Automatic Translation
1, 2
1Department of Pediatrics, University of Alberta, 2Department of Physiology & Biophysics, University of Mississippi Medical Center, 3Mississippi Center for Obesity Research

Summary

Anesthetized चूहों गैर शारीरिक प्रणालीगत रक्तचाप है, जो स्वायत्तता रक्त चाप और स्वायत्त तंत्रिका तंत्र के बीच अंतरंग संबंध दिया टोन के सार्थक मूल्यांकन precludes प्रदर्शन । इस प्रकार, एक उपंयास विधि को एक साथ गुर्दे सहानुभूति तंत्रिका गतिविधि और होश चूहों में नसों में अर्क के साथ रक्त दबाव रिकॉर्ड करने के लिए रेखांकित किया है ।

Abstract

गुर्दे सहानुभूति नसों दोनों शारीरिक और pathophysiological घटना के लिए महत्वपूर्ण योगदान करते हैं । गुर्दे सहानुभूति तंत्रिका गतिविधि का मूल्यांकन (RSNA) क्रोनिक गुर्दे की बीमारी, उच्च रक्तचाप, दिल की विफलता, मधुमेह और मोटापा जैसे अनुसंधान के कई क्षेत्रों में बहुत रुचि है । सहानुभूति तंत्रिका तंत्र की भूमिका का स्पष्ट मूल्यांकन इस प्रकार प्रयोगात्मक परिणाम और रोग प्रक्रियाओं की समझ की उचित व्याख्या के लिए आवश्यक है । RSNA को चूहों सहित anesthetized कुतर में पारंपरिक रूप से मापा गया है । हालांकि, चूहों आमतौर पर बहुत कम प्रणालीगत रक्तचाप और संज्ञाहरण और सर्जरी के दौरान कई घंटे के लिए hemodynamic अस्थिरता प्रदर्शन । RSNA की सार्थक व्याख्या इस गैर शारीरिक राज्य द्वारा, सहानुभूति तंत्रिका टोन और हृदय की स्थिति के बीच अंतरंग संबंधों को देखते हुए स्थापित किया गया है । पारंपरिक दृष्टिकोण की इस सीमा को संबोधित करने के लिए, हम सचेत, स्वतंत्र रूप से चलती चूहों में RSNA को मापने के लिए एक नई विधि विकसित की है । चूहों लंबे रक्त दबाव के रूप में अच्छी तरह से एक jugular शिरापरक अर्क कैथेटर और RSNA की प्रत्यक्ष रिकॉर्डिंग के लिए कस्टम डिजाइन द्विध्रुवी इलेक्ट्रोड के सतत निगरानी के लिए रेडियो-telemeters के साथ साधन थे । एक 48-72 घंटे वसूली अवधि के बाद, जीवित रहने की दर १००% थी और सभी चूहों सामांय व्यवहार किया । इस समय-बिंदु पर, RSNA सफलतापूर्वक चूहों के ८०% में दर्ज किया गया था, व्यवहार्य संकेतों के साथ 4 और 5 दिनों के बाद ७०% और चूहों के ५०% में सर्जरी, क्रमशः हासिल की । शारीरिक रक्त दबाव सभी चूहों में दर्ज किया गया (116 ± 2 mmHg; n = 10) । दर्ज RSNA खाने और संवारने, के रूप में अच्छी तरह से साहित्य में स्थापित के साथ वृद्धि हुई है । इसके अलावा, RSNA ganglionic नाकाबंदी और औषधीय एजेंटों के साथ रक्तचाप के मॉडुलन द्वारा मान्य किया गया था । साथ ही, सचेत, स्वतंत्र रूप से चलती चूहों में RSNA की स्पष्ट रिकॉर्डिंग के लिए एक प्रभावी और प्रबंधनीय विधि वर्णित है ।

Introduction

जैव चिकित्सा अनुसंधान के कई क्षेत्रों में चूहों का उपयोग करने में रुचि अनगिनत आनुवंशिक रूप से इंजीनियर मॉडल के विकास के साथ विस्तार करने के लिए जारी है । अधिकांश भाग के लिए, तकनीकी प्रगति शरीर विज्ञान में चूहों की वृद्धि हुई उपयोग के साथ तालमेल रखा है और अब चूहों में महत्वपूर्ण शारीरिक मापदंडों को मापने के लिए विशेष रूप से विकसित लघुकृत उपकरणों की एक प्रभावशाली चयन है. हालांकि चेतन चूहे में स्वायत्त तंत्रिका टोन के प्रत्यक्ष माप के लिए telemetric उपकरणों के लिए एक दशक से अधिक के लिए उपलब्ध किया गया है, होश में चूहों में तंत्रिका गतिविधि का आकलन करने के लिए लघुकृत उपकरणों वर्तमान में उपलब्ध नहीं हैं । जांचकर्ताओं आमतौर पर अप्रत्यक्ष तरीकों के साथ स्वायत्त तंत्रिका तंत्र के योगदान का मूल्यांकन द्वारा इस सीमा दरकिनार (यानी प्लाज्मा या मूत्र catecholamines, औषधीय स्वायत्त नाकाबंदी, रक्त के पैटर्न के वर्णक्रम विश्लेषण दाब/हृदय की दर)1.

हालांकि इन दृष्टिकोणों बहुमूल्य जानकारी प्रदान करते हैं, परिणाम समग्र स्वायत्त स्वर की एक वैश्विक तस्वीर है, बल्कि जांच के तहत घटना को नसों के पृथक आबादी के असतत योगदान खुलासा से । वैकल्पिक रूप से, विशिष्ट नसों से गतिविधि की प्रत्यक्ष रिकॉर्डिंग anesthetized चूहों, जो चिंताओं के एक भीड़ बन गया में मार डाला गया है । यह एक anesthetized माउस में शारीरिक सीमा के भीतर कई घंटे के लिए शल्य चिकित्सा के बाद स्थिर रक्तचाप बनाए रखने के लिए मुश्किल है । वास्तव में, प्रयोगों के इन प्रकार में, रक्तचाप अक्सर रिपोर्ट या बेहद कम स्तर पर प्रस्तुत किया जाता है (यानी 60-80 mmHg बनाम > एक चेतन माउस में 100mmHg)2। हृदय प्रणाली की कमजोरी एक anesthetized माउस तैयारी में प्रदर्शित अक्सर स्वायत्त तंत्रिका गतिविधि का सार्थक मूल्यांकन precludes, रक्तचाप और सहानुभूति टोन3के बीच codependent संबंध दिया, 4.

इस सीमा को संबोधित करने के लिए, गुर्दे सहानुभूति तंत्रिका गतिविधि की प्रत्यक्ष रिकॉर्डिंग के लिए एक नई विधि (RSNA) होश में, अनर्गल चूहों, उनके घर पिंजरों के भीतर अबाधित विकसित किया गया था. इस तकनीक के सफल क्रियान्वयन के लिए शल्य और प्रायोगिक दोनों दृष्टिकोण का विस्तार से वर्णन किया गया है. इस तैयारी के लिए एक साथ RSNA के अलावा radiotelemetry के माध्यम से धमनी दबाव रिकॉर्ड करने के लिए सक्षम बनाता है, जोड़ा क्षमता के साथ नसों में माउस को परेशान किए बिना ब्याज की एजेंटों को भ्रमित करने के लिए ।

चौबीस घंटे सर्जरी के बाद, चूहों सामांय व्यवहार और दर्द या संकट के लक्षण प्रदर्शित नहीं है । प्रायोगिक रिकॉर्डिंग तब शुरू हो सकता है ४८ करने के लिए ७२ घंटे के बाद सर्जरी, जबकि माउस आराम से अपने घर पिंजरे में भोजन, पानी और पर्यावरण संवर्धन के लिए अप्रतिबंधित पहुंच के साथ टिकी हुई है । स्पष्ट RSNA निशान प्रस्तुत कर रहे हैं और इस तंत्रिका जनसंख्या के सामान्य शारीरिक आंदोलनों के लिए विशेषता प्रतिक्रियाओं (जैसे खाने और सौंदर्य के रूप में) पशु के प्रणालीगत रक्तचाप के औषधीय मॉडुलन के अलावा प्रदर्शन कर रहे हैं. RSNA संकेत की गुणवत्ता और विशिष्टता ganglionic नाकाबंदी द्वारा आगे मान्य है । इस पांडुलिपि audiovisual इस तकनीक का एक शुरू में प्रकाशित वर्णन करने के लिए पूरक शामिल5।

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Protocol

प्रायोगिक प्रक्रियाओं के सभी देखभाल और प्रयोगशाला पशुओं के उपयोग के लिए स्वास्थ्य गाइड के राष्ट्रीय संस्थानों के साथ अनुसार कर रहे है और संस्थागत पशु देखभाल और मिसिसिपी चिकित्सा केंद्र के विश्वविद्यालय के उपयोग समिति द्वारा अनुमोदित किया गया ।

1. पशु और आवास

  1. घर चूहों (24-35 ग्राम) संस्थागत प्रयोगशाला पशु सुविधा में आगमन पर.
  2. एक तापमान और आर्द्रता नियंत्रित वातावरण में प्रायोगिक प्रोटोकॉल के सभी चरणों में चूहों मानक कुतर चाउ और नल पानी विज्ञापन libitum प्रस्ताव ।

2. प्रत्यारोपित RSNA इलेक्ट्रोड के अनुकूलित निर्माण

नोट: इलाज और नसबंदी के समय को समायोजित करने के लिए अनुसूचित शल्य चिकित्सा प्रक्रिया के अग्रिम में कुछ दिनों के लिए प्रत्यारोपित RSNA इलेक्ट्रोड का निर्माण (नीचे वर्णित).

  1. कट अछूता स्टेनलेस स्टील के तीन बराबर लंबाई एकाधिक-फंसे तार, २५० मिमी प्रत्येक (तार व्यास ०.०२५४ mm नंगे, ०.१४ मिमी लेपित) । एक स्केलपेल ब्लेड का प्रयोग करें (अधिमानतः #11) को अछूता सामग्री के लगभग 15 मिमी पट्टी के लिए तार की लंबाई में से प्रत्येक के एक छोर से अंतर्निहित धातु बेनकाब ।
    1. टांका एक एकल पुरुष पिन संबंधक (सोने चढ़ाना के साथ पीतल) तारों के केवल दो के नंगे अंत करने के लिए द्विध्रुवी इलेक्ट्रोड बना जाता है (आंकड़ा 1a) । तार नंगे की तीसरी लंबाई के अंत छोड़ दें । यह जमीन तार के रूप में कार्य करेगा ।
    2. एक छोटी पर्ची (~ २.०-२.५ सेमी) १.६ मिमी व्यास गर्मी का टुकड़ा-पिन संबंधक और तार पर ट्यूबिंग हटना पूरी तरह से तार और पिन संबंधक के बीच नए टांका संयुक्त कवर ।
      नोट: headstage एम्पलीफायर में खामियों को दूर किया जाएगा पिन कनेक्टर की नोक उजागर रहना चाहिए.
    3. छोटे चिमटा या hemostats की एक जोड़ी के साथ एक गर्मी बंदूक के ऊपर तार पकड़ो गर्मी के प्रति संवेदनशील टयूबिंग हटना और बिजली पिन संबंधक और तार के बीच कनेक्शन को बचाने के लिए । दूसरा तार/पिन संबंधक के लिए दोहराएं ।
  2. पॉलीथीन टयूबिंग (पीई ९०; इनर व्यास ०.८६ मिमी, बाहरी व्यास १.२७ मिमी) की एक २०० मिमी लंबाई में कटौती । तीन तारों (दो सुराग + जमीन तार) समूह और पीई ९० टयूबिंग में अछूता समाप्त होता है परिचय, उंहें एक साथ थ्रेडिंग के माध्यम से टयूबिंग (आंकड़ा 1b) के खुले अंत करने के लिए ।
    नोट: पीई ९० टयूबिंग समूह के लिए एक म्यान के रूप में कार्य करता है और इलेक्ट्रोड की रक्षा करता है और जमीन तार ।
    1. जमीन के तार की पहचान और इसे पीई ९० म्यान के माध्यम से एक छोटे से आगे यह द्विध्रुवी इलेक्ट्रोड से भेद करने के लिए ले जाता है ।

3. इलेक्ट्रोड टिप का निर्माण

  1. एक विदारक माइक्रोस्कोप के साथ इलेक्ट्रोड तारों की अछूत समाप्त होता है कल्पना । इलेक्ट्रोड तारों को एक साथ बाइंड करने के लिए छोटे पॉलीथीन टयूबिंग (पीई 10, भीतरी व्यास ०.२८ मिमी, बाहरी व्यास ०.६१ मिमी) के एक 5 मिमी लंबे टुकड़े के माध्यम से इलेक्ट्रोड के तीन ढीले सिरों थ्रेड.
    1. तीन इलेक्ट्रोड तारों पर इस पीई 10 टयूबिंग के एक १.५ mm टुकड़ा धागा । इस टयूबिंग अग्रिम 10 पीई के प्रारंभिक 5 मिमी टुकड़ा से दूर २.० mm आराम करने के लिए ।
    2. दो द्विध्रुवी इलेक्ट्रोड के सुझावों पर पीई 10 टयूबिंग का एक दूसरा १.५ mm टुकड़ा धागा करने के लिए कवर और सुझावों को बचाने और उंहें जमीन के तार से अलग करने के लिए सुराग (चित्रा 1C) ।
  2. तारों की कैंची के साथ किसी भी अतिरिक्त लंबाई ट्रिम कर दीजिए ।
  3. गोंद तरल फार्मूला cyanoacrylate गोंद की एक छोटी सी बूंद के साथ इलेक्ट्रोड तारों को पीई 10 टयूबिंग के व्यक्तिगत टुकड़े । नियंत्रण में सुधार और छलकने को कम करने के लिए गोंद ट्यूब के अंत पर एक कुंद 25 गेज सुई रखें ।
    1. पीई 10 और तार के बीच जंक्शन पर सुई टिप प्लेस, तो गोंद की एक छोटी सी बूंद और कल्पना गोंद कोटिंग पीई टयूबिंग के अंदर बांटना ।
    2. गोंद पूरी तरह से रात भर इलाज के लिए अनुमति दें ।

4. रिकॉर्डिंग के लिए इलेक्ट्रोड टिप की ठीक तैयारी

  1. पट्टी द्विध्रुवी इलेक्ट्रोड युक्तियां और एक #11 स्केलपेल ब्लेड के साथ जमीन तार की नोक से अछूता कोटिंग । परेशान या अंतर्निहित कई फंसे तारों को नुकसान नहीं के रूप में यह RSNA संकेत की गुणवत्ता को प्रभावित करेगा ।
  2. पकड़ ५.० मिमी और १.५ मिमी पीई 10 घुमावदार संदंश के साथ लंगर के बीच इलेक्ट्रोड का निर्माण किया और तारों मोड़ एक ९० ° कोण (चित्रा 1 d) के रूप में ।
    नोट: इस पैंतरेबाज़ी स्थिति चाहिए द्विध्रुवी इलेक्ट्रोड जमीन तार के ऊपर होता है, एक इष्टतम स्थिति में तंत्रिका बंडल पालना करने के लिए ।

5. लंगर लगाने की कुरसी का निर्माण

  1. इलेक्ट्रोड को स्थिर करने के लिए एक आसन का निर्माण पॉलीथीन टयूबिंग (भीतरी व्यास २.७० मिमी, बाहरी व्यास ४.०० मिमी) के एक 3 सेमी टुकड़ा काटने के द्वारा exteriorization पर माउस के मध्य स्कंधास्थि क्षेत्र की ओर जाता है ।
    1. पकड़ संदंश के साथ ट्यूबिंग और एक गर्मी बंदूक पर एक छोर पिघला । एक शांत धातु की सतह के लिए सीधा टयूबिंग के गर्म अंत प्रेस एक गोल रिज या "निकला हुआ किनारा" बनाने के लिए ।
    2. इस आसन का निर्माण इलेक्ट्रोड पर धागा, इस तरह निकला हुआ इलेक्ट्रोड टिप की ओर इशारा करते हुए कि.
      नोट: पीई ९० म्यान और कुरसी का संयोजन इलेक्ट्रोड की रक्षा करेगा एक बार जानवर से बाहरी जाता है ।

6. पूर्ण आरोपण इलेक्ट्रोड की नसबंदी

  1. पैकेज पूर्ण इलेक्ट्रोड नसबंदी बैग और ओजोन बंध्याकरण में व्यक्तिगत रूप से (त्सो3) आरोपण से पहले.
    नोट: नसबंदी बैग और प्रक्रिया के विशिष्ट प्रकार के बारे में स्थानीय अस्पताल नसबंदी सुविधा के साथ परामर्श के रूप में यह संस्थानों के बीच अलग है.

7. संज्ञाहरण और सर्जरी के लिए तैयारी

  1. प्रशासन analgesia सर्जरी के शुरू करने से पहले 20 मिनट (2 मिलीग्राम/meloxicam, एस॰सी॰) । एक प्रेरण १००% चिकित्सा ग्रेड ऑक्सीजन के साथ संचार कक्ष में माउस प्लेस । 4% तक पहुंचने के लिए ०.५ की किश्तों में isoflurane संवेदनाहारी का प्रतिशत बढ़ाने के लिए vaporizer सेटिंग्स समायोजित करें । कोमल दबाव के पैर की उंगलियों या सामने और हिंद अंगों के पैर पैड के साथ ही श्वसन दर के धीमा करने के लिए आवेदन किया पलटा प्रतिक्रिया का आकलन करके सर्जिकल विमान का मूल्यांकन करें ।
    1. शल्य तालिका के लिए पशु हस्तांतरण और एक nosecone के माध्यम से 2% isoflurane को १.५ के साथ संज्ञाहरण बनाए रखने एक बार यह शल्य चिकित्सा विमान तक पहुंच गया है और अब पैर की अंगुली चुटकी पलटा प्रदर्शित करता है । दोहराएं पैर की अंगुली-चुटकी प्रतिक्रिया आवधिक और पूरे शल्य प्रक्रिया भर में श्वसन दर का आकलन । सूखापन को रोकने के लिए आंखों के लिए नेत्र मरहम लागू करें ।
    2. जेल से भरा इज़ोटेर्माल गर्मी पैड और इसी शल्य तालिका के साथ हर समय पशु के सामान्य शरीर के तापमान को बनाए रखने. एक 37 डिग्री सेल्सियस पानी स्नान में इज़ोटेर्माल पैड की दुकान और शारीरिक शरीर के तापमान को बनाए रखने के लिए सर्जरी के दौरान जरूरत के रूप में अक्सर पैड की जगह ।
    3. प्रशासन glycopyrrolate (५०-७० µ जी/किग्रा, चमड़े के नीचे (एस॰सी॰)) airway स्राव के अत्यधिक उत्पादन को रोकने के लिए तुरंत संज्ञाहरण के प्रेरण पर । प्रशासन glycopyrrolate की इस खुराक शल्य प्रक्रिया के मध्यबिंदु पर एक दूसरी बार (चरण ९.१).
    4. अपूतित शर्तों के तहत सभी शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं का संचालन । सभी शल्य चिकित्सा उपकरण निर्धारित सर्जरी से पहले autoclaved किया गया है सुनिश्चित करें । (7.2.1) नीचे वर्णित के रूप में शल्य क्षेत्र साफ और प्रक्रिया भर में बाँझ बनाए रखने.
      1. एक चेहरा मुखौटा, autoclaved अलगाव गाउन और बाँझ, एकल उपयोग दस्ताने पहनें । ७०% इथेनॉल के साथ gooseneck लैंप, विदारक गुंजाइश और शल्य तालिका के रूप में सभी बड़े उपकरणों को साफ करें । आवधिक प्रक्रिया के दौरान, शल्य दस्ताने को ७०% इथेनॉल लागू करने के लिए बांझपन सुनिश्चित करते हैं ।
  2. पशु की बाईं ओर से बाल निकालें, ventral गर्दन क्षेत्र और छोटे जानवर बाल कतरनी के साथ पृष्ठीय midscapular क्षेत्र लोमनाशक क्रीम (संवेदनशील त्वचा सूत्र) द्वारा पीछा किया ।
    1. सर्जिकल सफाई समाधान (10% Povidone आयोडीन) और ७०% इथेनॉल के 3 बारी अनुप्रयोगों के साथ इन दो सर्जिकल क्षेत्रों की त्वचा को साफ । सर्जिकल सफाई समाधान के एक अंतिम आवेदन के साथ सर्जिकल क्षेत्र तैयार करें ।

8. RSNA इलेक्ट्रोड के सर्जिकल आरोपण

  1. rostral अंत सर्जन के बाईं ओर इशारा करते हुए, जानवर के बाएं पार्श्व को उजागर करने के साथ अपनी दाईं ओर माउस की स्थिति । एक स्केलपेल (#11) के साथ midscapular क्षेत्र की त्वचा में एक 5 मिमी चीरा बनाओ ।
    नोट: यह साइट है जिस पर RSNA इलेक्ट्रोड होता है बाहरी हो जाएगा ।
    1. एक दूसरा चीरा (< 20 mm) त्वचा में बाएं पार्श्व, सीधा करने के लिए रीढ़ की हड्डी और 2 मिमी ribcage को caudal । सुरंग एक 13G स्टेनलेस स्टील सुई इस चीरा से पृष्ठीय निकास साइट पर चीरा करने के लिए.
      नोट: एक चिकनी, गैर अत्याधुनिक छोड़ने के लिए सुई के तेज किनारों फ़ाइल.
    2. 13G सुई के माध्यम से निष्फल प्रत्यारोपित RSNA इलेक्ट्रोड (कदम 2-6) दर्रा । छोड़ दिया पार्श्व की पेट की मांसपेशी पर झूठ बोल इलेक्ट्रोड टिप छोड़ने के लिए 13G सुई वापस खींचो । इलेक्ट्रोड के एक खंड छोड़ त्वचा के नीचे झूठ बोल जाता है, और शेष पृष्ठीय चीरा से उभर लंबाई छोड़ दें ।
  2. इलेक्ट्रोड टिप को साइड पर रखें. पेट की मांसपेशी में एक चीरा सीधे त्वचा 8.1.1 में बनाया चीरा अंतर्निहित बनाओ । छोटे कपास के साथ पीठ की मांसपेशी के साथ वसा और संयोजी ऊतक अलग-छोड़ दिया गुर्दे का पर्दाफाश करने के लिए applicators इत्तला दे दी ।
    1. सर्जिकल क्षेत्र को माइक्रो-रिट्रैक्टर्स के साथ खोलें और किडनी को वापस लें । गुर्दे neurovascular बंडल, जो अचल गुर्दे नसों और एक व्यवहार्य RSNA संकेत के बाधा रिकॉर्डिंग नुकसान होगा खिंचाव नहीं है ।
      नोट: इस्पात माइक्रो-ट्रैक्टर एक मानक कागज क्लिप और 4-0 रेशम की लंबाई से जमाने जा सकता है । सुनिश्चित करें कि अपूतित तकनीक को संरक्षित करने के लिए इन रिट्रेक्टरों को भी सर्जिकल उपकरणों के साथ निष्फल किया जाता है ।
  3. एक उच्च शक्ति विदारक माइक्रोस्कोप की सहायता से गुर्दे neurovascular बंडल कल्पना । गुर्दे की तंत्रिका बंडल, जो आम तौर पर (लेकिन हमेशा नहीं) गुर्दे की धमनी और नस के साथ चलाता है की पहचान करें । काटना आसपास के ऊतकों से तंत्रिका बंडल ठीक, सीधे संदंश ।
    नोट: गुर्दे तंत्रिका बंडल अपारदर्शी प्रतीत होता है, एक "रस्सी की तरह" चिंतनशील उपस्थिति के साथ, लसीका वाहिकाओं, जो स्पष्ट दिखाई की तुलना में अद्वितीय ।
    1. के रूप में संभव के रूप में कम तंत्रिका बंडल हेरफेर । स्पर्श, खिंचाव या किसी भी समय तंत्रिका बंडल लेने मत करो । ठीक रक्त वाहिकाओं तंत्रिका, या गुर्दे लिम्फ वाहिनी की आपूर्ति बाधित नहीं है क्योंकि इस तंत्रिका की व्यवहार्यता समझौता और तंत्रिका के आसपास सतत लसीका द्रव पूलिंग का उत्पादन होगा/इलेक्ट्रोड, जो बाधा या पूरी तरह से तंत्रिका संकेत काटना होगा ।
    2. गुर्दे तंत्रिका बंडल बरकरार छोड़ दो, जो तंत्रिका की दीर्घकालिक व्यवहार्यता की रक्षा के रूप में अच्छी तरह के रूप में तंत्रिका और इलेक्ट्रोड के बीच स्थिर संपर्क बनाए रखने में मदद मिलेगी (एक खोदी गई तंत्रिका समय और प्राकृतिक शरीर आंदोलनों के साथ इलेक्ट्रोड के बंद हो सकता है अर्थात्).
  4. पेट में RSNA इलेक्ट्रोड टिप परिचय । अपनी स्थिति ऐसे समायोजित करें कि द्विध्रुवी इलेक्ट्रोड टिप और जमीन तार गुर्दे neurovascular बंडल करने के लिए सीधा कर रहे हैं. इसके अलावा इलेक्ट्रोड की स्थिति ऐसी है कि जमीन तार अंतर्निहित ऊतकों के साथ अच्छा संपर्क है और इलेक्ट्रोड गुर्दे वाहिकाओं सेक नहीं है समायोजित, गुर्दे संचलन (चित्रा 1 d) समझौता.
  5. angled संदंश के साथ गुर्दे तंत्रिका बंडल उठा । तंत्रिका के नीचे इलेक्ट्रोड टिप पर्ची, दोनों तारों के साथ सीधे संपर्क में तंत्रिका छोड़ने.
    1. नस/द्विध्रुवी तारों और तीसरे (जमीन) तार (चित्रा 1 डी) के बीच आयल फिल्म का एक छोटा सा टुकड़ा पर्ची ।
      नोट: भिगोने 24 घंटे के लिए ७०% इथेनॉल में तेल फिल्म निष्फल और बाँझ शारीरिक खारा में कुल्ला आरोपण से पहले ।
    2. तंत्रिका या इलेक्ट्रोड तारों के आसपास छोड़ किसी भी द्रव के रूप में छोटे शोषक स्पीयर्स के साथ किसी भी रक्त या तरल पदार्थ के चारों ओर से निकालें तंत्रिका सिग्नल में बाधा या बुझाने होगा ।
    3. जल्दी RSNA संकेत की गुणवत्ता का परीक्षण अगर वांछित (सेटअप नीचे वर्णित) ।
      नोट: यह जल्दी से हवा के लिए जोखिम के रूप में किया जाना चाहिए तंत्रिका सूखी और अपनी व्यवहार्यता समझौता होगा ।
    4. तंत्रिका/इलेक्ट्रोड इकाई के लिए एक दो घटक सिलिकॉन elastomer लागू करें, सुनिश्चित करना है कि सिलिकॉन पूल के तहत और चारों ओर तंत्रिका पूरा विद्युत अलगाव प्रदान करने के लिए (केवल तंत्रिका के शीर्ष पर एक बूंद नहीं अर्थात्) ।
      नोट: सुनिश्चित करें कि इलेक्ट्रोड युक्तियां भी सिलिकॉन में लेपित हैं । जमीन के तार अंतर्निहित ऊतकों के साथ संपर्क में रहना चाहिए और इस प्रकार elastomer इस तार के नीचे पूल करने की जरूरत नहीं है । सिलिकॉन elastomer की एक अनावश्यक बड़ी राशि लागू करने से बचें, के रूप में यह संभवतः गुर्दे रक्त के प्रवाह में बाधा, या समय के साथ प्राकृतिक शरीर आंदोलनों के साथ बेदखल हो सकता है ।
    5. सिलिकॉन elastomer के लिए 1-2 मिनट की अनुमति के लिए पूरी तरह से इलाज है, तो ध्यान से सिलिकॉन के बाहरी किनारों लिफ्ट "संदंश के साथ खाये" और तरल फार्मूला सर्जिकल चिपकने वाला की एक छोटी राशि लागू होते हैं ।
      नोट: ध्यान रखना इस गोंद की एक अत्यधिक राशि लागू नहीं है, क्योंकि यह परिसंचरण या तंत्रिका को फैला है और अपनी व्यवहार्यता समझौता कर सकते हैं ।
  6. सतत, अवशोषित टांके (5-0) के साथ उदर चीरा बंद करें । एक ही सीवन सामग्री के साथ एक समान फैशन में लेटी त्वचा को बंद करें ।

9. रक्तचाप Radiotelemeter का आरोपण

  1. अपनी पीठ पर माउस की स्थिति, सर्जन की ओर इशारा करते हुए rostral अंत के साथ. आवश्यकतानुसार संज्ञाहरण nosecone समायोजित करें । इस बिंदु पर glycopyrrolate की दूसरी खुराक प्रशासन (7.1.3 देखें) ।
  2. एक स्केलपेल (#11) के साथ गर्दन क्षेत्र की त्वचा में एक midline चीरा बनाओ, बस जानवर के निचले जबड़े के नीचे से शुरू और सिर्फ ribcage के ऊपर का विस्तार । अंतर्निहित गर्दन की मांसपेशियों को बेनकाब करने के लिए ग्रंथियों ऊतक अलग । वाम आम मन्या धमनी का पर्दाफाश और आसपास के ऊतकों से अलग.
    नोट: इस के रूप में वृद्धि हुई शल्य चिकित्सा मृत्युदर के लिए नेतृत्व कर सकते है vagus तंत्रिका को नुकसान नहीं महान ध्यान रखना ।
    1. 6-0 रेशम सीवन सामग्री के तीन टुकड़े धमनी के नीचे दर्रा । स्थिति एक सीवन के रूप में अब तक संभव के रूप में rostrally और यह पोत बंद करना टाई । स्थिति एक दूसरे पोत की लंबाई और ढीले टाई के साथ बीच में टांका । caudally के रूप में संभव के रूप में पिछले टांका और टाई ढीला स्थिति ।
    2. rostral-सबसे सीवन और नाल टेप का एक छोटा सा टुकड़ा के साथ nosecone को सुरक्षित वापस लेना । caudal-सबसे सूक्ष्म मच्छर संदंश पोत में रक्त के प्रवाह को प्रतिबंधित करने के साथ सीवन वापस लेना ।
    3. संभव के रूप में rostrally के रूप में ठीक वसंत कैंची के साथ पोत दीवार में एक छोटा सा चीरा बनाओ । पोत में माउस रक्तचाप radiotelemeter कैथेटर परिचय और caudal सीवन के लिए अग्रिम ।
      1. मध्यम टांका को अस्थायी रूप से कैथेटर को स्थिर करने के लिए टाई, caudal कर्षण जारी है और कैथेटर अग्रिम 10 मिमी । जगह में सुरक्षित करने के लिए कैथेटर के आसपास बांध सीवन ।
    4. सुरंग सही पार्श्व के साथ एक चमड़े के नीचे जेब के लिए telemeter शरीर ।

10. आरोपण और Jugular शिरापरक कैथेटर के Exteriorization

  1. सही jugular नस को बेनकाब करने के लिए छोटे सूती-इत्तला applicators का प्रयोग करें । पोत के आसपास 6-0 रेशम टांका सामग्री के दो टुकड़े दर्रा ।
    1. स्थिति एक सीवन के रूप में दूर rostrally के रूप में संभव है और टाई के लिए पोत बंद करना । caudally के रूप में संभव के रूप में दूसरी सीवन स्थिति और धीरे पोत में रक्त के प्रवाह को रोकने के लिए वापस लेना ।
    2. संभव के रूप में rostral सीवन के करीब के रूप में पोत दीवार में एक छोटा सा चीरा बनाने के लिए ठीक वसंत कैंची का प्रयोग करें । Catheterize गर्मी फैला ट्यूबिंग के साथ नस (ओडी १.०२ mm, आयुध डिपो ०.६४ मिमी को बढ़ाकर), जो पूर्व बाँझ शारीरिक खारा के साथ भरा है ।
      नोट: सुनिश्चित करें कैथेटर टिप एक गोल बेवल पोत वेध को रोकने के लिए उत्पादन करने के लिए एक स्केलपेल के साथ कटौती की है । संदर्भ के लिए कैथेटर (मृत अंतरिक्ष) में तरल पदार्थ की मात्रा निर्धारित (कदम 14.4-14.6 नीचे) देखें ।
      1. कैथेटर अग्रिम ~ नस में 8 मिमी । पोत और कैथेटर, साथ ही जेल फार्मूला cyanoacrylate गोंद की एक छोटी सी बूंद के आवेदन के आसपास रेशम टांके बांधने से कैथेटर सुरक्षित ।
  2. माउस को अपनी बाईं ओर रखें । एक 13G स्टेनलेस स्टील सुई का उपयोग पृष्ठीय midscapular क्षेत्र में बाहर निकलने के लिए गर्दन से नसों में कैथेटर सुरंग ।
  3. उसकी पीठ पर माउस की स्थिति । बंद करो निरंतर टांके के साथ गर्दन चीरा ।
  4. प्रवण स्थिति में पशु रखें । शिरापरक कैथेटर पर एक छोटे चमड़े के नीचे बटन धागा । टांके के साथ त्वचा के नीचे बटन सुरक्षित । शिरापरक कैथेटर पर इसी स्टेनलेस स्टील वसंत थ्रेड और कैथेटर की रक्षा करने के लिए त्वचा बटन को सुरक्षित ।

11. बाहरी इलेक्ट्रोड की सुरक्षा की ओर जाता है

  1. सुरक्षित सुरक्षात्मक कुरसी इलेक्ट्रोड की रक्षा के ऊतकों चिपकने के साथ अंतर्निहित मांसपेशी की ओर जाता है । आगे के समर्थन के लिए निकला हुआ किनारा पर अधिक से अधिक त्वचा टांका ।

12. शल्य चिकित्सा के बाद वसूली

  1. सभी चीरा के लिए एंटीबायोटिक मरहम लागू होते हैं ।
  2. एनाल्जेसिक दवा प्रशासन. एनाल्जेसिक दवा की अतिरिक्त खुराक के रूप में वसूली की अवधि के दौरान की जरूरत है अगर पशु दर्द या संकट के लक्षण से पता चलता है प्रशासन ।
  3. एक चयापचय लकड़ी चिप बिस्तर और कागज तौलिया के साथ लाइन में खड़ा पिंजरे में माउस प्लेस को ठीक । लगातार जानवर की निगरानी और यह जब तक यह चेतना प्राप्त करता है और स्टर्नल recumbency बनाए रख सकते है उपेक्षित छोड़ नहीं है । इस बिंदु पर पर्यावरण संवर्धन और खाद्य और जल (ad libitum) का परिचय दें ।
  4. कुंडल इलेक्ट्रोड प्रयोग के समय तक पिंजरे के बाहर होता है.
  5. वसूली के पहले 24 घंटे के लिए एक गर्म गर्मी पैड पर पिंजरे प्लेस । वसूली की अवधि के दौरान शारीरिक खारा के सतत अर्क के लिए एक कुंडा/अर्क प्रणाली के लिए स्टेनलेस स्टील स्प्रिंग और नसों में कैथेटर कनेक्ट (०.५ एमएल/
  6. सुनिश्चित करें कि जानवर अकेले एक समर्पित बाहरी कैथेटर और इलेक्ट्रोड की प्रकृति के कारण पिंजरे में स्थित रहता है ।

13. ब्लड प्रेशर और RSNA रिकॉर्डिंग के लिए प्रायोगिक सेटअप

  1. एक सरल फैराडे पिंजरे के साथ एक स्टेनलेस स्टील के शीर्ष विरोधी कंपन तालिका से लैस ।
    नोट: यह फैराडे पिंजरे एक लकड़ी के फ्रेम और एल्यूमीनियम स्क्रीन जाल के साथ निर्माण किया जा सकता है । बिजली के किसी भी बिजली के शोर को खत्म करने के लिए मेज/फैराडे पिंजरे जमीन ।
  2. फैराडे पिंजरे के भीतर एक ब्लड प्रेशर radiotelemetry रिसीवर रखें ।
  3. संबद्ध दबाव आउटपुट एडाप्टर के लिए radiotelemetry रिसीवर कनेक्ट करें । एक डेटा अधिग्रहण प्रणाली के लिए इस एडेप्टर कनेक्ट रक्तचाप ऑनलाइन रिकॉर्ड करने के लिए ।
  4. मिलाप दो महिला पिन connectors कि इलेक्ट्रोड पुरुष पिन connectors के लिए मानार्थ रहे हैं (पीतल सोने चढ़ाना के साथ) एक बनती, परिरक्षण परमवीर चक्र अछूता केबल के सिरों को. मिलाप केले प्लग करने के लिए इस जोड़ी केबल के विपरीत छोर । एक प्रवर्धन headstage (10x प्रवर्धन) के लिए केले प्लग कनेक्ट ।
  5. एक अंतर एम्पलीफायर के लिए इस एम्पलीफायर कनेक्ट. सेटिंग समायोजित करने के लिए तंत्रिका संकेत x10, 000 को बढ़ाना । फ़िल्टर सेटिंग्स निम्नानुसार समायोजित करें: कम कट, 100Hz; उच्च कट, १००० हर्ट्ज ।
  6. घर radiotelemetry फैराडे पिंजरे के भीतर स्थित रिसीवर पर माउस से युक्त पिंजरे ४८ करने के लिए ७२ घंटे सर्जरी के बाद प्लेस । ब्लड प्रेशर सिग्नल रिकॉर्ड करने के लिए radiotelemetry जांच चालू करें ।
    नोट: सर्जरी से पहले 1 सप्ताह के पाठ्यक्रम पर सेटअप में घर पिंजरे रखने के द्वारा माउस Acclimating इष्टतम है ।
  7. uncoil इलेक्ट्रोड की ओर जाता है और इसी महिला पिन connectors में द्विध्रुवी इलेक्ट्रोड के पिन connectors प्लग (१३.४) ऊपर वर्णित करने के लिए RSNA रिकॉर्डिंग शुरू करते हैं ।
  8. प्रदर्शन और एक साथ एक कंप्यूटर के साथ ब्लड प्रेशर सिग्नल ऑनलाइन रिकॉर्ड, जबकि शारीरिक खारा या ब्याज का समाधान infusing । प्रति सेकंड २५०० नमूनों की न्यूनतम दर पर डेटा रिकॉर्ड.

14. नमूना प्रायोगिक प्रोटोकॉल और RSNA संकेत के सत्यापन

  1. सुनिश्चित करें कि चूहे अपने घर पिंजरे में आराम कर रहे हैं, भोजन और पानी के लिए स्वतंत्र पहुंच के साथ अनर्गल । सामांय उपस्थिति और व्यवहार की पुष्टि करने के लिए संस्थागत पशु देखभाल दिशानिर्देश का पालन करें ।
  2. एक ही तापमान और आर्द्रता नियंत्रित कमरे में चूहों घर जिसमें RSNA रिकॉर्डिंग जगह ले जाएगा । यह सुनिश्चित नसों में अर्क के रूप में ऊपर वर्णित जारी है ।
  3. एक बार जब पशु आधारभूत रक्त दाब और RSNA डेटा के एक घंटे की रिकॉर्डिंग से पहले ऊपर वर्णित रिकॉर्डिंग सेटअप में स्थित है, स्थिरीकरण के कम से 30 मिनट की अनुमति दें । पशु चुपचाप प्राकृतिक आंदोलन सहानुभूति टोन में वृद्धि के साथ जुड़ा हुआ है के बाद से रिकॉर्डिंग के दौरान आराम कर रहा है सुनिश्चित करें । नोट जब पशु सीधे डिजिटल ट्रेस पर रिकॉर्डिंग के दौरान चलती है तो यह विश्लेषण के दौरान अवहेलना की जा सकती है ।
  4. पहले धीरे से baroreflex प्रतिक्रिया का परीक्षण सोडियम nitroprusside की एक बोल्स इंजेक्शन (२.५ µ जी/अर्क लाइन में 25 µ एल की मात्रा में शरीर के वजन के जी/ धीरे ~ ५० µ एल शारीरिक खारा के साथ लाइन फ्लश । सुनिश्चित करें कि कैथेटर मृत अंतरिक्ष मंजूरी दे दी है । 2 से 5 मिनट के लिए ब्लड प्रेशर और RSNA को रिकॉर्ड करें ।
  5. धीरे phenylephrine के एक बोल्स इंजेक्षन (20 µ जी/शरीर के वजन के 25 µ एल में खारा) । साथ फ्लश ~ ५० µ l शारीरिक खारा । सुनिश्चित करें कि कैथेटर मृत अंतरिक्ष मंजूरी दे दी है । एक और 10 से 15 मिनट के लिए ब्लड प्रेशर और RSNA को रिकॉर्ड करें ।
  6. ganglionic अवरोधक, hexamethonium (५० µ g/जी शरीर के वजन में 25 µ l खारा) अर्क रेखा में एक बोल्स इंजेक्शन द्वारा तंत्रिका संकेत की postganglionic प्रकृति की जांच करें । साथ फ् ~ ५० µ l खारा. सुनिश्चित करें कि कैथेटर मृत अंतरिक्ष मंजूरी दे दी है । कई मिनट के लिए रिकॉर्डिंग जारी रखें ।
  7. अवशिष्ट गतिविधि है कि RSNA के विश्लेषण में उपयोग के लिए पृष्ठभूमि शोर का एक आकलन के रूप में hexamethonium प्रशासन के बाद रहता है का प्रयोग करें (नीचे वर्णित) ।
  8. isoflurane की अधिक मात्रा के साथ माउस Euthanize (०.५ की किश्तों में stepwise खुराक 5%) और आगे 30 मिनट के लिए रिकॉर्डिंग RSNA जारी है । नोट: शेष संकेत भी RSNA के विश्लेषण के लिए पृष्ठभूमि शोर का एक अनुमान के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है.

15. डेटा विश्लेषण

  1. कच्चे रक्तचाप और RSNA निशान का विश्लेषण करने के लिए डेटा अधिग्रहण सॉफ्टवेयर का प्रयोग करें ।
    1. डिजिटल एकीकृत और पूर्ण वेव इस सॉफ्टवेयर का उपयोग कर कच्चे RSNA ट्रेस सुधारने । अभिंन सेटिंग्स के लिए "निरपेक्ष अभिंन" का चयन करें; ०.१ सेकंड6का एक समय निरंतर क्षय लागू करें ।
    2. एकीकृत RSNA संकेत का विश्लेषण करें (µV की इकाइयों में प्रदर्शित · s) प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल के प्रत्येक खंड के लिए. रिकॉर्डिंग के क्षेत्रों उपेक्षा जब जानवर के लिए हुआ जा रहा है । आधारभूत और प्रयोग के प्रायोगिक भागों, क्रमशः के लिए ंयूनतम 3 माप ले लो ।
    3. सोडियम nitroprusside या phenylephrine के लिए प्राप्त न्यूनतम और अधिकतम रक्तचाप स्तर पर RSNA का विश्लेषण, baroreflex संवेदनशीलता का आकलन करने के लिए क्रमशः.
    4. औसत व्यक्तिगत माप प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल के प्रत्येक भाग के लिए ऊपर ले लिया एक ही मूल्य उपज है ।
    5. आधार रेखा से RSNA के प्रतिशत परिवर्तन की गणना करके RSNA प्रतिक्रिया को बढ़ाता है, जो १००%7पर निर्दिष्ट है । पूर्ण सांख्यिकीय विश्लेषण के रूप में उपयुक्त ।
      नोट: इस उदाहरण में, RSNA की प्रतिक्रिया का सांख्यिकीय विश्लेषण सोडियम nitroprusside और phenylephrine के लिए एक छात्र के t परीक्षण के साथ पूरा किया गया था; P मान < 0.05 के साथ महत्व स्वीकार किया गया ।

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Representative Results

वर्णित प्रोटोकॉल के बाद, जीवित रहने की दर १००% थी-सभी चूहों इस अध्ययन में साधन बच गया और अच्छी तरह से शल्य प्रक्रिया के बाद बरामद किया । सर्जिकल तैयारी के 24 घंटे के भीतर, सभी चूहों आम तौर पर व्यवहार किया, ठेठ खाने का प्रदर्शन, सौंदर्य और खोजपूर्ण व्यवहार । इस समय किसी भी जानवर ने दर्द या कष्ट का कोई संकेत नहीं दिखाया । ४८ घंटे की सर्जरी के बाद, एक निरीक्षण और स्पष्ट RSNA संकेत 12 चूहों में से 10 में दर्ज किया गया था. यह संकेत इन चूहों में बनाए रखा गया था ७२ घंटे के बाद सर्जरी, लेकिन एक सच RSNA संकेत 7 में दर्ज किया गया था (७०%) चूहों के 4 दिन तक और केवल 5 में (५०%) चूहों दिन 5 के बाद सर्जरी के द्वारा । चूहों कि एक उच्च गुणवत्ता RSNA संकेत इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम संकेतों द्वारा बिजली के शोर या संदूषण के कारण प्रदर्शन नहीं किया euthanization के समय तक अच्छे स्वास्थ्य में अभी भी थे ।

मतलब जागरूक चूहों में धमनी दबाव ४८ घंटे के बाद सर्जरी 116 ± 2 mmHg था, छत्तीसगढ ± 22 bpm (n = 10) के एक इसी मतलब दिल की दर के साथ । इस समय में रक्तचाप और RSNA के एक प्रतिनिधि नमूने के एक साथ रिकॉर्डिंग स्पष्ट रूप से दिखाई और RSNA के विशिष्ट लयबद्ध फटने (चित्रा 2) का प्रदर्शन किया । इस तरह के भोजन और सौंदर्य के रूप में सामांय गतिविधियों के साथ की उंमीद RSNA की ठेठ बढ़ जाती है, के रूप में सीधे मनाया और कर्मियों द्वारा नोट, भी मौजूद थे (चित्रा 3) । उच्च गुणवत्ता RSNA भी जांच के तहत चूहों के ५०% में शल्य चिकित्सा तैयारी (4 चित्रा) के बाद 5 दिनों के लिए क्रमिक रूप से दर्ज किया गया था । रक्तचाप और हृदय की दर 5 दिन की जांच अवधि के लिए स्थिर रहे और मूल्यों को हम बाद के 10 दिनों के बाद शल्य चिकित्सा वसूली (तालिका 1)8के बाद दर्ज किया है से अलग नहीं थे ।

RSNA संकेत को मांय और सत्यापित करें कि यह वास्तव में धमनी baroreflex के साथ entrained है, रक्तचाप औषधीय सोडियम nitroprusside और phenylephrine की नसों में इंजेक्शन के साथ हेरफेर किया गया था । RSNA विशेषता सोडियम nitroprusside-प्रेरित कमी धमनी के दबाव के जवाब में वृद्धि हुई; इसके विपरीत, RSNA धमनी के दबाव में phenylephrine प्रेरित वृद्धि के बाद वस्तुतः खामोश था (चित्रा 5) । मात्रात्मक, सोडियम nitroprusside कम करने के लिए रक्त दबाव 62 ± 3 mmHg, जो RSNA के एक उन्नयन के लिए संगत 77 ± 9% आधार रेखा स्तर (n = 5; P < 0.05, आरेख 6) । इसी प्रकार, निंनलिखित phenylephrine प्रशासन, धमनी दबाव 137 ± 6 mmHg, जो आधार रेखा स्तर नीचे 79 ± 2% से RSNA कम (n = 5) तक पहुंच गया; P < 0.05, आरेख 6) । इसके अलावा, RSNA पूरी तरह से hexamethonium (चित्रा 7) के साथ ganglionic नाकाबंदी के बाद समाप्त हो गया था, RSNA संकेत के बाद ganglionic प्रकृति की स्थापना ।

Figure 1
चित्रा 1: आरोपण गुर्दे सहानुभूति तंत्रिका इलेक्ट्रोड के निर्माण और नियुक्ति. योजनाबद्ध डिजाइन का चित्रण और प्रत्यारोपित गुर्दे सहानुभूति तंत्रिका इलेक्ट्रोड के स्थान की सिफारिश की । (क) द्विध्रुवी पिन connectors और एक तिहाई जमीन के तार के साथ फिट होता है । (ख) तारों को पॉलीथीन के माध्यम से पिरोया जाता है (पीई) ९० टयूबिंग बाहरी सुराग की रक्षा के लिए । (ग) इलेक्ट्रोड टिप के डिजाइन के क्रम में जमीन के तार से द्विध्रुवी सुराग अलग करने के लिए । (घ) इलेक्ट्रोड टिप इष्टतम स्थिति की सुविधा के लिए एक ९० ° कोण पर आमादा है; गुर्दे तंत्रिका बंडल द्विध्रुवी सुराग और मोम आधारित प्रयोगशाला फिल्म के लिए सीधा रखा जाता है भूमि तार कि अंतर्निहित ऊतक के साथ संपर्क में है से सुराग अछूता । 5अनुमति के साथ reproduced । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 2
चित्र 2: धमनी का दबाव और गुर्दे सहानुभूति तंत्रिका गतिविधि (RSNA) के प्रतिनिधि रिकॉर्डिंग । नमूना ट्रेस प्रणालीगत धमनी रक्तचाप, RSNA और एकीकृत RSNA के एक सचेत में एक साथ रिकॉर्डिंग का प्रदर्शन, चुपचाप आराम माउस ४८ घंटे शल्य तैयारी के बाद । 5अनुमति के साथ reproduced । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 3
चित्र 3: गुर्दे सहानुभूति तंत्रिका गतिविधि की प्रतिक्रिया (RSNA) सामांय शारीरिक गतिविधि के लिए । प्रतिनिधि एक साथ प्रणालीगत धमनी रक्तचाप, RSNA और एकीकृत RSNA के दो होश चूहों में ४८ और ७२ घंटे के आधार पर शल्य चिकित्सा और (एक) सक्रिय सौंदर्य या (ख) चुप खाने के प्रारंभ पर एक साथ रिकॉर्डिंग की विशेषता ट्रेस । बड़े तीर आराम से शारीरिक गतिविधि के प्रारंभ का अर्थ है । 5अनुमति के साथ reproduced । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 4
चित्र 4: दीर्घकालिक गुर्दे सहानुभूति तंत्रिका गतिविधि (RSNA) संकेत व्यवहार्यता । एक सचेत, चुपचाप आराम माउस कई दिनों के सर्जिकल तैयारी के बाद में रक्तचाप और RSNA की अनुक्रमिक प्रतिनिधि रिकॉर्डिंग । (A) 2 दिन, (B) 3 दिन, (C) 4 दिन और (D) 5 दिनों के बाद सर्जरी । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 5
चित्र 5: गुर्दे सहानुभूति तंत्रिका गतिविधि के Entrainment (RSNA) धमनी baroreflex के साथ संकेत । के दौरान आराम पर एक सचेत माउस में धमनी का रक्तचाप और RSNA के प्रतिनिधि रिकॉर्डिंग (एक) आधारभूत और बाद नसों में प्रशासन के बाद (ख) सोडियम nitroprusside (ग) phenylephrine द्वारा पीछा किया । 5अनुमति के साथ reproduced । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 6
चित्र 6: धमनी रक्तचाप के लिए गुर्दे सहानुभूति responsivity के Quantitation । सोडियम nitroprusside और phenylephrine के साथ औषधीय हेरफेर करने के लिए धमनी का रक्तचाप और गुर्दे सहानुभूति तंत्रिका गतिविधि (RSNA) की मात्रात्मक प्रतिक्रिया । (क) आधारभूत (काली पट्टी; 116 ± 2 mmHg) और सोडियम nitroprusside के बाद नसों का पालन (ग्रे बार; 62 ± 3 mmHg) और phenylephrine (ओपन बार; 137 ± 6 mmHg) में धमनी दबाव का मतलब है । (ख) सोडियम nitroprusside के दौरान इसी RSNA प्रतिक्रिया (ग्रे बार; 77 ± 9%) या phenylephrine (ओपन बार;-79 ± 2%) । RSNA आधारभूत से एक प्रतिशत परिवर्तन व्यक्त किया है, मतलब ± SEM. * आधारभूत से महत्वपूर्ण अंतर (p < 0.05, n = 5) । 5अनुमति के साथ reproduced । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 7
चित्र 7: गुर्दे सहानुभूति तंत्रिका गतिविधि (RSNA) के बाद ganglionic प्रकृति । (क) आधारभूत पर धमनी रक्तचाप और RSNA का प्रतिनिधि ट्रेस, (ख) hexamethonium और (ग) के साथ ganglionic नाकाबंदी के तुरंत बाद पोस्टमार्टम. 5अनुमति के साथ reproduced । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

पशु आईडी   2d 3d 4d 5d
एक mmhg ११२ ११० १०८ १०९
  बीपीएम ६५७ ५५१ ६२६ ६१६
बी mmhg ११५ १०७ १११ ११०
  बीपीएम ५८२ ६५२ ६६२ ६६८
सी mmhg ११५ ११८ ११३ १११
  बीपीएम ५९१ ५९९ ६८९ ६६४
डी mmhg ११४ ११५ ११६ ११०
  बीपीएम ४५७ ५१३ ५९९ ५३१
ई mmhg १०९ १०९ १०३ १०५
  बीपीएम ६३२ ६८७ ६९९ ६८९

तालिका 1: आधार रेखा 5 लगातार दिनों के बाद सर्जरी पर साधन चूहों में धमनी का दबाव और दिल की दर मूल्यों मतलब है । 5अनुमति के साथ reproduced ।

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Discussion

इस के साथ साथ हम रेखांकित किया है, और प्रदर्शन के लिए जागरूक चूहों में RSNA के लक्षित मूल्यांकन के लिए एक उपंयास विधि मांय, को स्थानांतरित करने के लिए स्वतंत्र और आराम से अपने घर पिंजरों में विश्राम । एक धमनी का दबाव radiotelemeter, एक निवास नसों में अर्क कैथेटर और एक कस्टम डिजाइन द्विध्रुवी RSNA इलेक्ट्रोड के सर्जिकल आरोपण के बाद, चूहों सर्जरी से बरामद किया और ४८ से ७२ घंटे के लिए परेशान छोड़ दिया गया । चूहे आराम से अपने घर पिंजरे में हर समय (प्रयोगात्मक समय सहित) भोजन, पानी और पर्यावरण संवर्धन के लिए अप्रतिबंधित पहुंच के साथ बसे रहे । जांचकर्ता द्वारा सभी आगामी प्रयोगात्मक हेरफेर दूरस्थ था और जानवरों को शांत नहीं किया । गुणवत्ता और RSNA संकेत की व्याख्या के बारे में, इस दृष्टिकोण पूरी तरह से संज्ञाहरण और शल्य चिकित्सा आघात के अवांछनीय और अपरिहार्य शारीरिक जटिलताओं के साथ ही संयम और शारीरिक और मानसिक तनाव के अन्य स्रोतों को हटा पशु । इस प्रकार, इन गंभीर कारकों जो हमेशा सहानुभूति तंत्रिका गतिविधि मापन की व्याख्या प्रभाव प्रभावी ढंग से समाप्त किया गया ।

सभी चूहों अच्छे स्वास्थ्य में थे और के रूप में 24 घंटे के बाद सर्जरी के रूप में जल्दी, चमक, गतिविधि, जवाबदेही, खाने, पीने, सौंदर्य के रूप में के रूप में अच्छी तरह से चंचल और खोजपूर्ण व्यवहार के रूप में विशिष्ट व्यवहार प्रदर्शित किया । सभी जानवरों इन विशेषताओं का प्रदर्शन किया और सक्रिय रूप से प्रदान की पर्यावरण संवर्धन के साथ लगे चाहे या नहीं एक व्यवहार्य RSNA संकेत करने के लिए दर्ज कर सकता था । हालांकि वसूली के लिए पूरी तरह से radiotelemetric जांच के आरोपण के बाद सामांय रक्तचाप बहाल करने की आवश्यकता समय कथित तौर पर 4-7 दिन9के रूप में लंबे समय के रूप में, धमनी दबाव रिटर्न सामांय बहुत जल्दी, के रूप में मूल्यों के द्वारा प्रदर्शन ब्लड प्रेशर और हार्ट रेट के लिए यहां रिपोर्ट दी । वास्तव में, इन हृदय मानकों को पहले इसी तरह के साधन जानवरों जो 10 दिनों के लिए अनुमति दी गई सर्जरी से ठीक8,10में रिपोर्ट के बराबर हैं ।

एक तरल पदार्थ से भरा कैथेटर पर रक्तचाप माप के लिए radiotelemetric जांच का उपयोग करने के लिए विकल्प जानबूझकर किया गया था, के रूप में इस चूहों में तनाव को कम कर देता है और भी अधिक स्पष्ट और विश्वसनीय रक्त और नाड़ी दबाव संकेतों और दिल की दर मूल्यों11पैदावार । telemetric प्रौद्योगिकी का उपयोग करने के लिए रक्तचाप रिकॉर्ड करने के लिए अक्सर फ्लश और heparinized खारा है, जो अनिवार्य रूप से पशु परेशान के साथ तरल पदार्थ भरा धमनी कैथेटर को बनाए रखने की जरूरत के बाद से एक अतिरिक्त लाभ बन गया है पूरी तरह से समाप्त हो गया है । इसके अलावा, शल्य चिकित्सा exteriorizing के दृष्टिकोण, लंगर और नसों में कैथेटर और द्विध्रुवी इलेक्ट्रोड की रक्षा की ओर जाता है आदर्श एक चमड़े के नीचे जेब में सुराग के अस्थायी भंडारण का वर्णन करने के लिए अन्य रिपोर्टों की तुलना में12, हमारे दृष्टिकोण के बाद से भी संक्षिप्त पुनः संज्ञाहरण और तुरंत प्रयोगात्मक रिकॉर्डिंग है, जो निस्संदेह माउस perturb और गुणवत्ता और उत्तम रूप से संवेदनशील स्वायत्त तंत्रिका तंत्र की व्याख्याता समझौता होगा पहले जानवर के सर्जिकल हेरफेर से बचा जाता है डेटा.

यह विधि सच RSNA संकेतों पैदावार, गुणवत्ता जिनमें से एक सुकून में पृष्ठभूमि शोर से स्पष्ट रूप से अलग विद्युत गतिविधि की विशेषता फटने द्वारा प्रदर्शन कर रहे हैं, चुपचाप माउस को आराम । इसके अलावा, RSNA इस तरह के सौंदर्य और शांत खाने के रूप में पशु में शारीरिक गतिविधि के लिए ठेठ जवाबदेही दिखाया के रूप में साहित्य13,14में सूचना दी । प्राकृतिक आंदोलन या पशु की सतर्कता के साथ की उंमीद RSNA में विशेषता बढ़ दिया, यह इस प्रकार ध्यान दें और प्रयोगात्मक विश्लेषण के प्रयोजन के लिए समय की इन अवधि को बाहर करने के लिए और रिकॉर्डिंग के क्षेत्रों पर ध्यान केंद्रित करने के लिए आवश्यक है, जिसके दौरान जानवर चुपचाप आराम कर रहा है । यह डेटा की संभावित गलत व्याख्या को रोकने में मदद करता है । अंय कारकों जो डेटा अशुद्ध अर्थ के लिए नेतृत्व कर सकते है बिजली के शोर या हस्तक्षेप, साथ ही साथ ईसीजी दालों के साथ संकेत संदूषण15शामिल हैं । इलेक्ट्रोड के बाहरी भाग के अत्यधिक आंदोलन भी RSNA संकेत की गुणवत्ता को प्रभावित कर सकते हैं और एक अस्थिर या "ढुलमुल" आधार रेखा के रूप में प्रकट कर सकते हैं. कई बार संकेत हस्तक्षेप के इन स्रोतों दिखाई देते हैं और अनायास एक पूरी तरह से स्पष्ट रिकॉर्डिंग के दौरान गायब हो सकते हैं और विश्लेषण से बाहर रखा जाना चाहिए5,15,16. एक अतिरिक्त विचार है जिस पर रिकॉर्डिंग प्राप्त कर रहे है समय है । यह ध्यान रखें कि रक्तचाप और RSNA circadian लय के साथ बदलती है महत्वपूर्ण है, इसलिए यह संभावित प्रकारक से बचने के लिए दिन के एक ही समय में प्रयोगों का संचालन करने के लिए आदर्श है । इस अध्ययन में, हम रक्तचाप और circadian दोलनों के कारण RSNA की महत्वपूर्ण परिवर्तनशीलता का पालन नहीं किया के रूप में हम 10 बजे और 6 बजे के बीच सभी मापदंडों दर्ज-अच्छी तरह से पशु आवास की सुविधा के दिन के उजाले चक्र के भीतर । इस रिपोर्ट का एक अंय महत्वपूर्ण घटक RSNA संकेत है, जो के रूप में प्रदर्शित की मांयता है, वास्तव में धमनी baroreflex के साथ entrained है । तेजी से कमी और औषधीय प्रेरित ड्रॉप और प्रणालीगत रक्तचाप में वृद्धि के साथ समानांतर में RSNA की ऊंचाई को देखते हुए, धमनी baroreflex सबसे निश्चित रूप से बरकरार था-जो खुद को दर्शाता है कि पूर्णावरोधक के आरोपण एक में radiotelemetry कैथेटर मन्या धमनी सामान्य हृदय समारोह के साथ हस्तक्षेप नहीं करता है. hexamethonium के साथ ganglionic नाकाबंदी पर RSNA संकेत के आभासी गायब होने के आगे postganglionic RSNA की रिकॉर्डिंग की पुष्टि करता है ।

यह चूहों के लिए एक लंबे समय के बाद सर्जरी वसूली अवधि प्रदान करने के लिए आदर्श होगा, लेकिन हम और दूसरों को इस क्षेत्र में समझते हैं कि लंबे समय तक साधन पशुओं, विशेष रूप से चूहों में स्वायत्त नसों की दीर्घकालिक व्यवहार्यता को बनाए रखने, चुनौतीपूर्ण रहता है. हालांकि RSNA संकेत गुणवत्ता कई दिनों के बाद सर्जरी के दौरान कम हो, यह अभी भी मज़बूती से सभी चूहों में कम से लगातार 3 दिनों के लिए सच RSNA रिकॉर्ड और जानवरों के बारे में आधे में 5 दिनों के लिए संभव था । अपने आप में यह उपलब्धि चूहों में स्वायत्त अध्ययन के क्षेत्र में एक सफलता का प्रतीक है. इसके अलावा, इस विधि कीमती ट्रांसजेनिक जानवरों के उपयोग को अधिकतम, के रूप में यह विभिन्न दिनों पर एक ही जानवर में कई प्रयोगात्मक और नियंत्रण परीक्षण रिकॉर्ड करने के लिए संभव है, ज़ाहिर है, परीक्षण आदेश और उचित आधार रेखा रिकॉर्डिंग के यादृच्छिकीकरण के लिए अनुमति प्रत्येक प्रयोग के17से पहले । यह देखने के लिए प्रोत्साहित है दीर्घकालिक सहानुभूति तंत्रिका में आयोजित की रिकॉर्डिंग के बारे में होश कुतर18,19,20 telemetric तंत्रिका रिकॉर्डिंग प्रौद्योगिकियों में चूहों के लिए शामिल है 15,21. चेतन माउस में उपयोग के लिए इस प्रौद्योगिकी के Miniaturization आगामी है और इस बीच में, हम इस तकनीक में सुधार करने के लिए सहानुभूति तंत्रिका तंतुओं की दीर्घायु को बढ़ाने के लिए प्रयोगात्मक खिड़की का विस्तार और शायद एक लंबे समय की अनुमति का प्रयास सर्जरी के बाद समय वसूली । हालांकि, इस विधि एक उपयोगी और आसानी से सुलभ और सस्ती वैकल्पिक/चूहों, जो समर्पित उपकरण और नियमित रूप से डिवाइस में एक निवेश की आवश्यकता है में telemetric तंत्रिका रिकॉर्डिंग प्रौद्योगिकी के भविष्य में किसी भी विकास के लिए पूरक रहना होगा रखरखाव.

चूहों में हृदय और स्वायत्त समारोह का आकलन करने के लिए विश्वसनीय तकनीक के लिए की जरूरत है इतना महान कभी नहीं किया गया है, जैव चिकित्सा अनुसंधान के क्षेत्र में ट्रांसजेनिक माउस मॉडलों में कभी बढ़ती रुचि पर विचार. महान प्रगति शरीर विज्ञान के कई क्षेत्रों में किया गया है, लेकिन वहां अभी भी मानकीकरण और माउस में स्वायत्त समारोह के मूल्यांकन के लिए दृष्टिकोण के अनुकूलन के संदर्भ में जाना अब तक है । तारीख करने के लिए, वहां होश में माउस12में संवेदी तंत्रिका गतिविधि की माप का वर्णन एक रिपोर्ट है । इस दृष्टिकोण मूत्राशय संवेदी तंत्रिका गतिविधि की माप रूपरेखा और संज्ञाहरण और चमड़े के नीचे रखा कैथेटर्स की शल्य चिकित्सा हेरफेर शामिल प्रयोगात्मक रिकॉर्डिंग से पहले तुरंत के रूप में अच्छी तरह से पाठ्यक्रम के दौरान चूहों के शारीरिक संयम प्रायोगिक प्रोटोकॉल12के । इन कारकों को पूरी तरह से वर्तमान दृष्टिकोण है, जो निश्चित रूप से गुर्दे की नसों के अलावा ब्याज की नसों की एक किस्म की रिकॉर्डिंग के लिए सिलवाया जा सकता है के साथ परहेज कर रहे है कि तनाव में जाना जाता है । अभी हाल ही में, चेतन चूहों में सहानुभूति तंत्रिका माप की सूचना दी गई है, तथापि, इन माप मोटे तौर पर शल्य चिकित्सा तैयारी के बाद घंटे आयोजित कर रहे हैं, एनाल्जेसिक प्रशासन का कोई उल्लेख नहीं के साथ22. इन रिपोर्टों के अलावा, स्वायत्त समारोह अंयथा anesthetized चूहों में विशेष रूप से मूल्यांकन किया गया है । साहित्य की एक पूरी तरह से समीक्षा दृष्टिकोण, घंटे की लंबी प्रयोगात्मक अवधि, संवेदनाहारी संयोजन/खुराक, यांत्रिक वेंटिलेशन और अक्सर रचनात्मक करने के लिए कुछ झलक असर राज्य में चूहों को बनाए रखने के लिए उठाए गए उपायों की एक भीड़ पैदावार शारीरिक (यानी ऑक्सीजन पशु की नाक की ओर सीधे उड़ा)23,24,25,26,27,28,29, 30,31. इन अध्ययनों के बीच, रक्तचाप मूल्यों की रिपोर्ट अनुपस्थित रहे हैं, या abysmally कम-प्रणालीगत धमनी दबाव की शारीरिक सीमा से नीचे2। यह कई स्तरों पर समस्याग्रस्त है, लेकिन विशेष रूप से तो जब इन पशुओं में स्वायत्त समारोह का उचित मूल्यांकन का संबंध है, रक्तचाप और स्वायत्त टोन के बीच की स्थापना की कड़ी दी । संवेदनाहारी एजेंटों खुद को सीधे प्रभाव सहानुभूति टोन, कि संज्ञाहरण का सुझाव देने के साथ सहानुभूति गतिविधि को गीला करता है । वास्तव में, सबूत है कि urethane, तीव्र तंत्रिका रिकॉर्डिंग प्रयोगों के लिए सबसे व्यापक रूप से चुना संवेदनाहारी३२, खुराक निर्भर करता है RSNA३३ कम हो जाती है और धमनी baroreflex३४रोकता है. इसके विपरीत, अंय रिपोर्टों का सुझाव है कि urethane सहानुभूति टोन३५बढ़ाता है । दी, इस तरह के अध्ययनों से आम तौर पर एक दर्ज आधारभूत से एक परिवर्तन के रूप में प्रयोगात्मक तंत्रिका गतिविधि की तुलना, लेकिन ऊपर के तहत स्वायत्त तंत्रिका तंत्र की बदल स्थिति-वर्णित शर्तों निर्विवाद तंत्रिका में असतत परिवर्तन का पता लगाने precludes गतिविधि.

इस विधि की चुनौती शल्य चेतन तंत्रिका रिकॉर्डिंग के लिए माउस की सफल तैयारी के लिए आवश्यक कौशल में मुख्य रूप से निहित है । हालांकि honing इन कौशल में निवेश की गुणवत्ता और प्रत्यक्ष RSNA डेटा का उत्पादन विश्वसनीयता द्वारा क्षतिपूर्ति से अधिक है । इस दृष्टिकोण पूरी तरह से प्लाज्मा catecholamine स्तर, जो चूहों में काफी labile है और रक्त की मात्रा है कि humanely एकत्र हो सकता है द्वारा सीमित कर रहे है जैसे स्वायत्त नियंत्रण के अप्रत्यक्ष आकलन से उत्पंन सीमाओं को दरकिनार३६। इसके अलावा, प्लाज्मा catecholamine स्तर के रूप में के रूप में अच्छी तरह से औषधीय स्वायत्त नाकेबंदी का अनुमान समग्र स्वायत्त टोन1 के रूप में विशिष्ट तंत्रिका आबादी के असतत योगदान है, जो आम तौर पर अधिक रुचि के है विरोध किया । बिजली के माध्यम से स्वायत्त स्वर का गणित मूल्यांकन वर्णक्रमीय रक्तचाप और हृदय की दर निशान का विश्लेषण मानव विषयों में स्वायत्त समारोह का मूल्यांकन करने के लिए उपयोगी है, लेकिन इस तकनीक चूहों के लिए अनुकूलनीय नहीं हो सकता है३६,३७. इसलिए, एक होश में तंत्रिका गतिविधि का प्रत्यक्ष नमूना, आराम से आराम माउस के रूप में यह बारीकी से प्राकृतिक, इस विषय के अक्षुण्ण स्वायत्तता की स्थिति को दर्शाता है और चयनित नसों के योगदान के परिष्कृत मूल्यांकन की सुविधा के लिए आदर्श है ब्याज की शारीरिक घटनाएं ।

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Disclosures

लेखकों का खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।

Acknowledgments

S.M.H. स्वास्थ्य अनुसंधान (CIHR) के लिए कनाडा के संस्थानों से postdoctoral फैलोशिप द्वारा समर्थित था, हार्ट एंड स्ट्रोक फाउंडेशन ऑफ कनाडा (HSFC) और अलबर्टा स्वास्थ्य समाधान (AiHS) को नया रूप; J.E.H. राष्ट्रीय हृदय, फेफड़े और रक्त संस्थान PO1HL-५१९७१ से एक अनुदान द्वारा समर्थित है ।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Teflon-coated stainless steel multiple stranded wire A-M Systems 793200 0.001in diameter bare; 0.0055in diameter coated
#11 Scalpel Blade Fisher Scientific ALMM9011
Soldering Iron and solder Any make or model suitable
Male miniature pin connectors A-M Systems 520200 Brass with gold plating
Female miniature pin connectors A-M Systems 520100 Brass with gold plating
Heat Shrink tubing Radio Shack Model #: 278-1610 | Catalog #: 2781610 1.6 mm diameter
Polyethylene 90 (PE90) tubing VWR CA-63018-703 0.86mm inner diameter; 1.27mm outer diameter
Dissecting microscope Leica Microsystems Leica M80 Any make or model also suitable
Polyethylene 10 (PE10) tubing Braintree Scientific PE10 50 FT 0.28mm inner diameter; 0.61mm outer diameter
Super Glue Liquid Loctite n/a Liquid Formula; any brand suitable
Super Glue Gel Loctite n/a Gel Formula; any brand suitable
Polyethylene tubing Scientific Commodities BB31695-PE/13 For pedestal 2.7mm inner diameter; 4.0mm outer diameter
Hospital Sterilization Services & Ozone Sterilization packets Contact local hospital sterilization services
Isoflurane anesthesia Abbott 05260-05
Deltaphase isothermal heat pads & surgical table Braintree Scientific 39OP Keep heat pads warm in a 37°C water bath; Corresponding surgical table essential
Glycopyrrolate Amdipharm Mercury Company Limited n/a
Isoflurane vaporizer system & flow gauge Braintree Scientific VP I Include medical grade oxygen supply
Tissue scissors Fine Science Tools 14173-12
Fine spring scissors Fine Science Tools 15006-09
Small cotton-tipped applicators Fisher Scientific 23400100
Fine Straight Forceps Fine Science Tools 11254-20 #5, FST by Dumont Biologie Tip
Angled Forceps Fine Science Tools 11251-35 #5/45 FST by Dumont
Small Absorbent Spears Fine Science Tools 18105-03
Parafilm Sigma Aldrich BR701605 ALDRICH
Kwik-Sil 2 component Silicone Polymer World Precision Instruments (WPI) KWIK-SIL Purchase extra specialized tips from WPI
5-0 Polysorb Suture Tyco Healthcare n/a
6-0 Silk Suture Braintree Scientific SUT-S 104 Deknatel brand, spool
Radiotelemetry Probe Data Sciences International (DSI) TA11-PAC10
Radiotelemetry Receiver Data Sciences International (DSI) PhysioTel RPC-1
Ambient Pressure Reference Data Sciences International (DSI) Apr-01
Pressure Output Adapter Data Sciences International (DSI) R11CPA
Rena Pulse Tubing Braintree Scientific RPT-040
Infusion Swivel Instech Solomon 375/D/22
Swivel Support Arm & Mount Instech Solomon SMCLA
Polysulfone button  Instech Solomon LW62S/6
Stainless steel spring Instech Solomon PS62
Vetbond surgical adhesive 3M n/a
Triple Antibiotic Ointment Fougera n/a
PowerLab 8 Channel Data Acquisition System & Software ADInstruments PowerLab 8/35
PVC Insulated Cable Belden PVC Audio Connection Cable 32 AWG
Preamplification Headstage Dagan Corporation Model 4002
Differential Amplifier Dagan Corporation EX4-400
Sodium Nitroprusside Sigma Aldrich 71778-25G
Phenylephrine Sigma Aldrich P6126-5G
Sterile Physiological Saline 0.9% NaCl Beckton Dickinson Contact local hospital supplier
hexamethonium Sigma Aldrich H0879-5G
Stainless Steel top anti vibration table n/a n/a Custom designed in-house; Solid steel plate on a benchtop is also suitable
Faraday cage n/a n/a Custom designed and constructed in-house
Small animal hair trimmer n/a n/a Drugstore, men's beard trimmer suitable
Dipilatory Cream n/a n/a Veet brand, sensitive skin formula
10% Povidone Iodine Purdue Products Betadiene
70% Ethanol n/a n/a
Steel microretractors n/a n/a Made in-house. Bend a steel paper clip & loop 4-0 silk to form a retractor
Hemostats Fine Science Tools 13011-12
Heat Gun Fisher Scientific 09-201-27

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References

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चिकित्सा मुद्दा १३२ गुर्दे सहानुभूति तंत्रिका गतिविधि (RSNA) होश चूहों रक्तचाप नसों में अर्क गुर्दे स्वायत्त तंत्रिका तंत्र शल्य दृष्टिकोण
चेतन, अनर्गल चूहों में नसों में अर्क के साथ गुर्दे सहानुभूति तंत्रिका गतिविधि और रक्तचाप के एक साथ रिकॉर्डिंग के लिए उपंयास दृष्टिकोण ।
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Hamza, S. M., Hall, J. E. Novel… More

Hamza, S. M., Hall, J. E. Novel Approach for Simultaneous Recording of Renal Sympathetic Nerve Activity and Blood Pressure with Intravenous Infusion in Conscious, Unrestrained Mice.. J. Vis. Exp. (132), e54120, doi:10.3791/54120 (2018).

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