Abstract
Slagtilfælde er en af de hyppigste årsager til sygelighed og dødelighed i verden. Slagtilfælde kompliceres af hjerneødem og andre patofysiologiske begivenheder. Blandt de vigtigste spillere i udvikling og videreudvikling af slagtilfælde-fremkaldte hjerneødem er det hormon arginin-vasopressin og dets receptorer, V1a og V2. For nylig har V1a og V2-receptor blocker conivaptan tiltrukket opmærksomhed som et potentielt lægemiddel til at reducere hjerneødem efter slagtilfælde. Men dyremodeller, som involverer conivaptan applikationer i slagtilfælde forskning skal ændres på grundlag af mulige administrationsveje,. Her resultaterne af 48 timers kontinuerlig intravenøs (IV) sammenlignes med intraperitoneal (IP) conivaptan behandlinger efter eksperimentel slagtilfælde hos mus. Vi udviklede en protokol, hvor mellem-cerebral arterieokklusion blev kombineret med kateter installation i halsvenen til intravenøs behandling af conivaptan (0,2 mg) eller vehikel. Forskellige kohorter af dyr blev behandlet med 0,2mg bolus af conivaptan eller køretøj IP dagligt. Eksperimentel slagtilfælde fremkaldte hjerneødem blev evalueret i mus efter kontinuerlig IV og IP-behandlinger. Sammenligning af resultaterne viste, at kontinuerlig intravenøs administration af conivaptan letter post-iskæmisk hjerneødem i mus, i modsætning til IP administration af conivaptan. Vi konkluderer, at vores model kan anvendes til fremtidige studier af conivaptan applikationer i forbindelse med slagtilfælde og hjerneødem.
Protocol
Eksperimenter blev udført i overensstemmelse med retningslinjerne fra National Institutes of Health for pasning og anvendelse af dyr i forskning og blev godkendt af det svenske Medical Center Animal Care og brug Udvalg. Alle procedurer blev udført med passende aseptisk teknik. Forsøgsdyr anvendes til undersøgelsen var mænd, 3 måneder gammel, vildtype C57 mus med kropsvægt den 25.-27 g.
1. In Vivo Stroke Induktion
- Pre-coat glødetråden med Dental Resin før operationen.
- Skær en 12 mm langt stykke filament fra en 7-0 nylonsutur. Bland 2 dele af harpiksen med 1 del hærder, og derefter straks dyppe spidsen af filamentet i blandingen til at dække ca. 1/3 af hele længden. Fjern det hurtigt og kontroller, at det er dækket med en glat overflade lag dental harpiks.
- Lufttørre glødetråden i 2 timer før anvendelse.
- Placer musen i enn anæstesi induktion kammer (2 L volumen), og indstille strømmen af 1,5% isofluran i 25% oxygenberiget rumluft ved 2 l / min går ind i kammeret.
- Tillad musen til at forblive i induktionen kammeret, indtil fuldt bedøvet, 8 som bestemt ved manglende reaktion på hale knivspids.
- Placer musen på operationsbordet med en opvarmet pude, og sæt isofluran koncentration på 1% til vedligeholdelse af anæstesi leveret spontant gennem næsen kegle.
- Clip hår på forsiden og bagsiden af halsen, og spray halsen med sprit. Påfør veterinær oftalmologiske salve på begge øjne.
- Til kontinuerligt at overvåge kropstemperaturen, så brug en rektal temperatur sonde forbundet med digital display under operationen.
- Placer musen i liggende stilling, gælder povidon-jod 10% krat løsning til desinfektion, dække med et sterilt afdækningsstykke, og derefter foretage en midtlinie incision langs halsen med en størrelse 10 kirurgisk skalpel. <li> Midlertidigt ligere venstre carotis arterie (CCA) med 6,0 silke sutur.
- Placer en anden slips på venstre ydre carotidarterie (ECA).
- Placer en mikrovaskulære klip på det interne halspulsåre (ICA).
- Skær et lille hul på den eksterne carotidarterie med mikrovaskulære saks. Indsæt en glødetråd lavet 7-0 nylon sutur belagt med dental harpiks ind i åbningen i ECA, og fremme det cephalically, samtidig fjerne klippet, indtil modstand mærkes (ca. 5-7 mm fra tvedeling punkt i CCA).
- Placer en midlertidig slips på den interne carotidarterie for at sikre glødetråden i stilling. Se diagrammet, figur 1A. Luk huden med silkesutur, og infiltrere såret på forsiden af halsen med 0,2 ml 0,5% bupivacain, som i trin 2.6.
- Tillad musen til at vågne fra bedøvelsen og kommer til bevidsthed i et opsving kammer i 60 minutter. Lad ikke dyret uden opsyn, indtil det har genvundettilstrækkelig bevidsthed til at opretholde brystbenslymfeknuderne recumbence.
- Test musen for neurologisk deficit scoring (NDS) som følger: 0 = normal motorik, 1 = fleksion af torso og kontralateral forben på læssebagsmæk, 2 = kredser til den kontralaterale side, men normal kropsholdning i hvile, 3 = hælder til kontralaterale side i hvile, 4 = ingen spontan motorisk aktivitet. 4,9
- For NDS test, løfte musen i halen og sted på en flad overflade til observation (2-3 min). Alternativt, observere mus i opsvinget kammer. Udelukke mus, der udviser NDS lavere end 2 fra eksperimentet på grund af utilstrækkelig okklusion af MCA.
Bemærk: Laser Doppler-flowmetri teknik kan anvendes til at bekræfte MCA-okklusion 9-11.
- For NDS test, løfte musen i halen og sted på en flad overflade til observation (2-3 min). Alternativt, observere mus i opsvinget kammer. Udelukke mus, der udviser NDS lavere end 2 fra eksperimentet på grund af utilstrækkelig okklusion af MCA.
- Re-bedøver dyret efter 60 minutters opsving i induktion kammeret som beskrevet ovenfor, re-sterilisere det foregående hudincision med 10% povidon-iod krat opløsning og genåbne operationssåret påforan halsen ved at skære og fjerne silkesutur.
- For at fjerne glødetråden fra Revisionsretten udføre følgende trin:
- Placer en mikrovaskulære klip på ICA. Løsne sutur på ICA og træk glødetråd ud, mens du holder klip åben.
- Luk klemmen og placere et slips på ECA proksimalt til snittet.
- Fjern clipsen og fjern ligatur fra CCA at genoprette blodstrømmen til hjernen. Se diagrammet, figur 1B.
2. Installation af et IV-kateter i halsvenen for Kontinuerlig 48 timer Behandling
Bemærk: Fortsæt til installation af kateteret umiddelbart efter trin 1.16.3 uden vækkelse af musen.
- Bruge to forskellige størrelser af fleksible slange: Indsæt den indvendige slange (0,94 mm udvendig diameter til at indeholde det lægemiddel, der infunderes) ind i det ydre rør (3,18 mm udvendig diameter, for beskyttelse af den indre slange).
- Pblonde musen i bugleje, anvendes 10% povidon-iod krat opløsning til desinfektion, og gøre en 1 cm incision på bagsiden af halsen med en størrelse 10 kirurgisk skalpel. Vend musen ind i liggende stilling, re-sterilisere forsiden af halsen med 10% povidon-iod krat opløsning og genåbne operationssåret på forsiden af halsen. Tunnel slangen under huden fra indsnit på bagsiden til forsiden af halsen, og eksteriorisere den fra det åbne sår 1 cm.
- Fjern subkutane fedtvæv fra venstre side af forsiden af halsen omkring 1 cm til siden fra midterlinjen. Find den venstre halsvene, placere to bånd langs venen 5 mm fra hinanden, og lidt strække venen. Lav et lille hul på halsvenen mellem de to bånd med mikrovaskulære saks; spidsen af den indre slange 5 mm dyb kaudalt (mod hjertet).
- Fastgør slangen med begge bånd til halsvenen. Luk huden på forsiden af halsen meden 3-0 silke sutur. Se diagrammet, figur 1C.
- Fastgør slangen til huden på bagsiden af halsen med en sutur, og tilslut slangen til en microinfusion IV pumpe gennem en svirvel. Den drejelige tillader fri bevægelighed for mus inde i buret med fuld adgang til mad og vand.
- Infiltrere huden indsnit på for- og bagsiden af halsen med 0,2 ml 0,5% bupivacain at forhindre postoperativ smerte.
Bemærk: Afhængigt af institutionelle særlige animalske protokoller, kan dyrene behandles med opioider, NSAID eller antibiotika præ- og postoperativt. Imidlertid kan nævnte behandlinger ændre resultaterne af iskæmisk slagtilfælde udfald (se Diskussion afsnit). 11-14 - Så dyret kan vække om recovery kammeret, og derefter at huse dyret i et separat bur indtil endepunktet af eksperimentet. Lad ikke dyret uden opsyn, indtil det har genvundet tilstrækkelig bevidsthed til at opretholde brystbenslymfeknudernerecumbence.
- Indstil infusionshastighed ved kontinuerlig 48 timers IV behandling af conivaptan (0,14 mg / ml i 5% dextrose) eller vehikel ved 1,5 ml / kg / time, 4 og start infusionen.
Bemærk: Den totale mængde IV infused conivaptan bør være ca. 0,2 mg / mus / dag i et samlet volumen på 1,44 ml.
Bemærk: Udfør Intraperitoneal (IP) injektion af conivaptan to gange dagligt med en samlet mængde på 0,2 mg i 1,44 ml 5% dextrose. Implementere IP-injektion blev som tidligere beskrevet. 15 Begrænse mus ved at gribe huden af den bageste overflade af kroppen og halen. Injicere conivaptan eller køretøjet i venstre nedre kvadrant af maven ved anvendelse af en 26 G / 1/2 inch nål. 15 - Overhold dyrene to gange om dagen for hele varigheden af forsøget (48 timer). At dyrene kan få fuld adgang til mad og vand. Hvis dyret udviser tegn på angst eller dyspnø konsultere en dyrlæge. Hvis eutanasi er nødvendig for dyret i alvorlig distryk henvises til trin 3.1 nedenfor, og udelukke dyr fra undersøgelsen.
3. Evaluering af Stroke-fremkaldt hjerneødem i slutningen punkt
- Sacrifice musen ved over-bedøve med 5% isofluran.
- Brug en skalpel til at lave en incision i huden over kraniet knogle langs midterlinjen, og trække huden for at blotlægge hele kraniet over hjernen. Begyndende ved foramen magnum, skåret kraniet lateralt langs omkredsen af hjernen på hver side, og løft den forsigtigt uden at røre hjernen under den. Skille hjernen mod rygsøjlen og nerverne fastgjort på basen af kraniet.
- Fjern hjernen, adskille den fra lugtekolben og cerebellum, og dissekere cerebrum langs interhemispheric revne i iskæmiske og ikke-iskæmiske cerebrale hemisfærer, som tidligere beskrevet. 9
- Vurdere hjerneødem ved at sammenligne våd-til-tørre forhold (WDR) som tidligere 4,9 beskrevet. afvejes vævfør og efter tørring i 3 dage ved 100 ° C i en ovn. Beregn hjerne vandindhold (BWC) i% H2O = (1-tørvægt. / Vådvægt.) X 100%.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Kropstemperatur dyrene var inden for det fysiologiske område og stabil i den kirurgiske procedure for slagtilfælde induktion. To mus der udviste NDS lavere end 2 umiddelbart efter MCAO blev udelukket fra undersøgelsen.
MCAO i mus producerer infarktvolumen i den ipsilaterale hemisfære ved 48 timer. Evaluering af TTC-farvede skiver viser, at ca. 50% af halvkuglen påvirkes af infarkt efter MCAO (figur 1 D), som er offentliggjort af Zeynalov, E. og Dore, S., 2009. 10 Starten af hjernen iskæmisk slagtilfælde forårsager alvorlig berøvelse af hjernevæv i ilt og næringsstoffer. Som et resultat af denne lokale hjernevæv hypoxi, neuroner og gliaceller dør, som udgør den infarcerede del af hjernen. Figur 1D viser repræsentative musehjerne skiver ramt af MCAO-induceret infarkt, og giver en vurdering af størrelsen af en skade. Evaluering af hjernens vandindhold (BWC) ved 48 timer efter 60 min MCAO induktion afslørede, at conivaptan administreret IV (0,2 mg / dag) reducerer hjerneødem i begge ipsilaterale og kontralaterale hemisfærer, (figur 2A) betydeligt. I modsætning hertil IP-behandling af conivaptan med 0,2 mg bolus dagligt undladt at frembringe tilsvarende positive virkninger på slagtilfælde-evoked hjerneødem (figur 2B). Bekræftelse af conivaptan effekt på plasma og urin osmolalitet blev opnået i alle forsøgsdyr ved slutpunktet af eksperimentet. Conivaptan behandlede IV eller IP forøget plasma og nedsat urinosmolalitet i alle mus 4 plasmaosmolalitet værdier hos mus var som følger:. 313 ± 4.4 mOsm / kg (køretøj, IV) vs. 355 ± 7,5 * mOsm / kg (conivaptan, IV) som tidligere offentliggjort, 4 og 340 ± 7,7 mOsm / kg (køretøjer, IP) vs.383 ± 8,8 * mOsm / kg (conivaptan, IP). Urinosmolalitet værdier i mus var som følger: 1210,6 ± 13,4 mOsm / kg (køretøj, IV) vs. 595,0 ± 57,4 * mOsm / kg (conivaptan, IV), som tidligere publiceret, 4 og 1535,0 ± 80,9 mOsm / kg (vehikel, IP) vs. 242,0 ± 23,2 * mOsm / kg (conivaptan, IP). Alle data præsenteres som gennemsnit ± SEM, * p ≤0.05 vs. tilsvarende kontrol. 
Figur 1:. Diagram over den eksperimentelle slagtilfælde model, IV-kateter installation, og repræsentative infarktvolumen ved 48 timer efter slagtilfælde holdning glødetråden (vist med blåt) præ-coatet med harpiks (grøn) i venstre arteria carotis interna (ICA) under okklusion (A) og reperfusion tid (B). Korrekt placering af den fleksible slange spids i den venstre halsvene (C). Experimental slagtilfælde i mus producerer infarktvolumen i den ipsilaterale hemisfære ved 48 timer. Mus blev aflivet ved 48 timer efter MCAO, og hjernerne blev fjernet, som beskrevet i protokollen (trin 3,1-3,3). Hjerner blev skåret i 2 mm tykke snit og farvet med TTC (D). Figur 1D er blevet ændret fra den oprindelige artikel af Zeynalov, E. og Dore, S., 2009. 10 Klik her for at se en større version af dette tal. 
Figur 2: Virkninger af kontinuert intravenøs (IV) og intraperitoneal (IP) conivaptan (0,2 mg / dag) behandlinger på slagtilfælde-evoked hjerneødem Conivaptan IV-behandling blev administreret i 48 timer.. Conivaptan behandling administreret IV reducerede post-iskæmisk hjerneødem i ipsilaterale og kontralaterale hEmisphere (A). Figur 2A er blevet ændret fra den oprindelige artikel af Zeynalov et al., 2015. 4 Conivaptan IP behandling i 48 timer ikke reduceret hjerneødem forårsaget af eksperimentel slagtilfælde, n = 10 i hver gruppe. Mus gennemgik MCAO med reperfusion som beskrevet i protokollen ovenfor (trin 1.1.1-1.15.3). Så IP injektioner af conivaptan (0,2 mg) blev givet umiddelbart, ved 22 timer og 46 timer af reperfusion. Mus blev aflivet; hjernerne blev fjernet og tørret i ovnen, som beskrevet i protokollen (trin 3,1-3,4). (B) Alle data er præsenteret som gennemsnit ± SEM, * p <0,05 vs tilsvarende kontrol. Klik her for at se en større version af dette tal.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Denne undersøgelse har vigtig værdi for præklinisk slagtilfælde forskning. Denne undersøgelse viser, at kontinuerlig intravenøs infusion af conivaptan (0,2 mg / dag) efter eksperimentel slagtilfælde hos mus effektivt reducerer hjerneødem efter 48 timers behandling. Virkningen af IP-injektion af den samme dosis af conivaptan på hjerneødem blev også undersøgt. Conivaptan behandling af både IV og IP ruter producerer aquaresis i mus som angivet ved: 1) stigning i plasma osmolalitet lidt over fysiologiske niveauer; og 2) fald i urinosmolalitet grund blokering af vand reabsorption i nyrerne. Derfor er baseret på resultaterne behandling, rapporterer vi, at IV leveringsmetode har yderligere vigtige gavnlige virkninger på slagtilfælde-fremkaldt ødem dannelse.
Vores store fund er, at IV behandling produceret bedre effekt på hjerneødem lindring end IP rute for conivaptan. Conivaptan er et kombineret V1a og V2 receptorantagonist, tilgængelig til klinisk anvendelse til correkte hyponatriæmi, blodvolumen og osmolalitet. 16 Conivaptan har vist sig at korrigere hyponatriæmi hos patienter med forskellige betingelser. 17 Klinisk tilgængeligheden af conivaptan antyder, at dens efterforskning i forbindelse med hjerneødem kan resultere i hurtig bench-til-bedside oversættelse. Anvendelse af eksperimentelle selektive V1a receptorblokkere leveret intracerebroventrikulært har vist sig at reducere post-iskæmisk hjerneødem dannelse beskrevet af andre forskere. 3,18 Men hverken den brugte i disse undersøgelser narkotika eller ruten behandling for narkotika tyder på mulig klinisk anvendelse i nær fremtid.
Mekanismer, som hjerneiskæmi og AVP årsag hjerneødem er komplekse. Men nogle vigtige molekylære spillere er natrium og klorid co-transportører 19,20 og V1a receptorer, der er lokaliseret i vaskulære vægge på BBB-grænsefladen. V2 blokerende virkning af conivaptan er ansvarlig for udskillelse af for strams vand i nyrerne og elevation af blod osmolalitet, hvilket også kan bidrage til at forebygge udvikling af hjerneødem. 21 Disse mekanismer kan stadig være i spil, når conivaptan leveres direkte ind i kredsløbet for at undgå vævsbarrierer der kan reducere conivaptan tilgængelighed. Men begrundelsen for dosis og varigheden behandling var baseret på tidligere offentliggjorte observationer. 4 Det er endnu ikke fastslået, om conivaptan når iskæmiske stedet for hjernen efter skade-inducerede fald i den regionale blodgennemstrømning. Det skal også undersøges, om hjernen modtager tilstrækkelig mængde conivaptan at producere de ønskede lokale effekter, såsom forebyggelse af vasokonstriktion ved at blokere V1a receptorer i cerebrale arterier.
Den eksperimentelle protokol er designet til at behandle spørgsmålet om valg til behandling rute for conivaptan. Baseret på resultaterne, giver undersøgelsen stærk støtte til IV rute conivaptan annonceUddeling. Men havde brug for mest kritiske trin i protokol, der skal etableres, og finjusteret for at konstatere væsentlige forskelle i behandlingsresultater efter slagtilfælde i mus. Blandt disse trin er: 1) varigheden af MCAO (60 min); 2) den daglige dosis (0,2 mg), og infusionshastigheden (1,5 ml / kg / time); og 3) længden af behandlingen (48 timer). Varighed MCAO bestemmer graden af den iskæmiske skade, som er meget afgørende for protokollen, fordi det definitivt skader hjernevævet. For streng af en skade ville gøre det vanskeligt for dyret at overleve i 48 timer, eller dyrene kan blive mindre reagerer på conivaptan behandling mod hjerneødem. På den anden side, varighed af MCAO mindre end 60 min kan være utilstrækkelig til at inducere en iskæmisk insult i musen, og derfor ikke ville producere hjerneødem. Dosis og længden af behandlingen blev valgt baseret på FDA anbefalinger til conivaptan brug. 16 imidlertid er det blevet rapporteret, atden humane dosis for conivaptan var ikke effektiv i mus for at reducere hjerneødem efter slagtilfælde. Derfor havde den dosis, der skal øges 10 gange for mus, som inducerede signifikant beskyttelse mod postiskæmisk hjerneødem. 4 betydningen af at vælge den korrekte infusionshastighed er, at det kan påvirke det samlede blodvolumen, blodtryk og interstitiel væske ophobning hvis satsen langt overstiger den foreslåede sats. målinger af samlede blodvolumen og blodtryk, ville imidlertid være meget informativ.
Kirurgisk induktion af MCAO er en invasiv procedure, og kræver præcis opmærksom på alle trin i protokollen, og det er vigtigt at kende de tips til fejlfinding for teknikken. Nogle uventede kirurgiske komplikationer, såsom overdreven arteriel blødning på grund af en utilsigtet revet arterie reducere succesraten for eksperimentet og øge dødeligheden. Dog kan venøs blødning stoppes ved at anvende let tryk wed en steril svamp.
Denne protokol beskriver en ensidig induktion af hjerneiskæmi, hvilket indebærer, at MCA-okklusion fremstilles enten til højre eller venstre MCA. Imidlertid kan protokollen modificeres afhængig af kirurgens foretrukne side af MCA-okklusion og installation IV-kateter. Figur 1 diagram viser en tegning af de mest kritiske dele af MCAO procedure, figur 1A og B, IV-kateter installation protokol, figur 1C, og de repræsentative hjernen skiver af MCAO-induceret hjerne infarkt ved endepunktet af forsøget (48 timer), som tidligere publicerede, 10 Figur 1D. Selv om diagram og de repræsentative hjernen skiver indebærer, at MCAO blev induceret i venstre side af hjernen, vi ikke forventer dramatiske forskelle i resultater, hvis MCAO blev induceret i højre side af hjernen, så længe sammenhæng i hele endæk undersøgelse opretholdes.
I løbet af tilbagebetalingsperioden efter operationen og anæstesi, kan dyrene opleve nød på grund af post-operative smerter og alvorlige neurologiske underskud. I mange tilfælde kan den postoperative smertebehandling være begrænset til kun at bruge lokalbedøvelse såsom 0,5% bupivacain. Slagtilfælde på grund af hjerneblødning hos mennesker samt eksperimentelle slagtilfælde hos mus involverer patofysiologiske faktorer såsom inflammation, hjerne infarkt, og hjerneødem. 9 Disse patofysiologiske begivenheder er i indgreb med centrale molekylære aktører såsom cyclooxygenaser (COX) 13 og G-protein relaterede receptorer. 22 Indgreb i de molekylære veje, der involverer COX kan være forårsaget af NSAID medicin, 13, hvis de blev brugt i disse indstillinger. Opioider handle på deres receptorer, der er knyttet til G-protein og andet budbringere 12 og kan ændre patofysiologiske resultater af slagtilfælde, 11 og resultatets med denne undersøgelse. Disse faktorer begrænser brugen af smertestillende medicin i mus postoperativt.
Sammenfattende vores undersøgelse undersøger muligheden for nyorientering conivaptan som et vidtrækkende mål. Vores dyremodel for eksperimentel slagtilfælde induktion efterfulgt af kontinuerlig intravenøs infusion af conivaptan har vist sig at give ensartede resultater, der antyder dens potentielle anvendelse i patienter med slagtilfælde. Mere specifikt har vi vist, at modellen med kontinuerlig intravenøs behandling af conivaptan efter slagtilfælde for at forebygge sekundære hjerneskade kan anvendes til præklinisk undersøgelse i mus. Denne undersøgelse havde til formål at tilbyde et alternativ anvendelse af conivaptan behandling som et supplerende redskab til at studere hjerneødem i mus efter slagtilfælde, fordi hurtig oversættelse til kliniske omgivelser kan livreddende for patienter i intensiv behandling.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har intet at afsløre.
Acknowledgments
Vi takker Swedish Medical Center for at levere finansiering og faciliteter. Vi takker også Craig Hospital for den generøse brug af laboratorie plads.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Heated Pad | K&H Manufacturing Inc | 1060 | |
| Temperature Monitor with Rectal Probe | Physitemp | 7029 | |
| Silk Suture Spool, 6-0 | Surgical Specialties Corporation | SP114 | |
| Silk Suture on a Needle, 3-0 | Ethicon | 1684G | |
| Nylon Suture, 7-0 | Ethicon | 1696G | |
| Dental Resin Polysiloxane with Hardener | Heraeus Kulzer | 65817930 | |
| Microinfusion IV Pump | Kent Scietific | GT0897 | |
| Swivel 22GA | Instech | 375/22PS | |
| Laboratory Tubing, 0.94 mm x 0.51 mm | Dow Corning | 508-002 | |
| Laboratory Tubing, 3.18 mm x 1.98 mm | Dow Corning | 508-009 |
References
- Gueniau, C., Oberlander, C. The kappa opioid agonist niravoline decreases brain edema in the mouse middle cerebral artery occlusion model of stroke. J Pharmacol Exp Ther. 282, 1-6 (1997).
- Krafft, P. R., et al. Etiology of stroke and choice of models. Int J Stroke. 7, 398-406 (2012).
- Vakili, A., Kataoka, H., Plesnila, N. Role of arginine vasopressin V1 and V2 receptors for brain damage after transient focal cerebral ischemia. J Cereb Blood Flow Metab. 25, 1012-1019 (2005).
- Zeynalov, E., Jones, S. M., Seo, J. W., Snell, L. D., Elliott, J. P. Arginine-Vasopressin Receptor Blocker Conivaptan Reduces Brain Edema and Blood-Brain Barrier Disruption after Experimental Stroke in Mice. PloS one. 10, e0136121 (2015).
- Med Lett Drugs Ther.. Conivaptan (Vaprisol) for hyponatremia. The Medical letter on drugs and therapeutics. 48, 51-52 (2006).
- Zhao, X. Y., et al. Effect of arginine vasopressin on the cortex edema in the ischemic stroke of Mongolian gerbils. Neuropeptides. 51, 55-62 (2015).
- Manaenko, A., Chen, H., Kammer, J., Zhang, J. H., Tang, J. Comparison Evans Blue injection routes: Intravenous versus intraperitoneal, for measurement of blood-brain barrier in a mice hemorrhage model. J Neurosci Methods. 195, 206-210 (2011).
- Adams, S., Pacharinsak, C. Mouse anesthesia and analgesia. Curr Protoc Mouse Biol. 5, 51-63 (2015).
- Zeynalov, E., et al. The perivascular pool of aquaporin-4 mediates the effect of osmotherapy in postischemic cerebral edema. Crit Care Med. 36, 2634-2640 (2008).
- Zeynalov, E., Dore, S. Low doses of carbon monoxide protect against experimental focal brain ischemia. Neurotox Res. 15, 133-137 (2009).
- Zeynalov, E., Nemoto, M., Hurn, P. D., Koehler, R. C., Bhardwaj, A. Neuroprotective effect of selective kappa opioid receptor agonist is gender specific and linked to reduced neuronal nitric oxide. J Cereb Blood Flow Metab. 26, 414-420 (2006).
- Ma, M. C., Qian, H., Ghassemi, F., Zhao, P., Xia, Y. Oxygen-sensitive {delta}-opioid receptor-regulated survival and death signals: novel insights into neuronal preconditioning and protection. J Biol Chem. 280, 16208-16218 (2005).
- Ahmad, M., Zhang, Y., Liu, H., Rose, M. E., Graham, S. H. Prolonged opportunity for neuroprotection in experimental stroke with selective blockade of cyclooxygenase-2 activity. Brain Res. 1279, 168-173 (2009).
- Meisel, C., et al. Preventive antibacterial treatment improves the general medical and neurological outcome in a mouse model of stroke. Stroke. 35, 2-6 (2004).
- Miner, N. A., Koehler, J., Greenaway, L. Intraperitoneal injection of mice. Appl Microbiol. 17, 250-251 (1969).
- Adis International Limited. Conivaptan: YM 087. Drugs in R&D. 5, 94-97 (2004).
- Murphy, T., Dhar, R., Diringer, M. Conivaptan bolus dosing for the correction of hyponatremia in the neurointensive care unit. Neurocrit Care. 11, 14-19 (2009).
- Liu, X., Nakayama, S., Amiry-Moghaddam, M., Ottersen, O. P., Bhardwaj, A. Arginine-vasopressin V1 but not V2 receptor antagonism modulates infarct volume, brain water content, and aquaporin-4 expression following experimental stroke. Neurocrit Care. 12, 124-131 (2010).
- Wallace, B. K., Jelks, K. A., O'Donnell, M. E. Ischemia-induced stimulation of cerebral microvascular endothelial cell Na-K-Cl cotransport involves p38 and JNK MAP kinases. Am J Physiol Cell Physiol. 302, C505-C517 (2012).
- O'Donnell, M. E., et al. Intravenous HOE-642 reduces brain edema and Na uptake in the rat permanent middle cerebral artery occlusion model of stroke: evidence for participation of the blood-brain barrier Na/H exchanger. J Cereb Blood Flow Metab. 33, 225-234 (2013).
- Walcott, B. P., Kahle, K. T., Simard, J. M. Novel treatment targets for cerebral edema. Neurotherapeutics. 9, 65-72 (2012).
- Shen, Z., et al. Inhibition of G protein-coupled receptor 81 (GPR81) protects against ischemic brain injury. CNS Neurosci Ther. 21, 271-279 (2015).
