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Medicine

Infusion IV continue est le traitement de choix pour la route Arginine-vasopressine Receptor Blocker Conivaptan chez des souris pour étudier des maladies évoqués Oedème cérébral

Published: September 1, 2016 doi: 10.3791/54170

Abstract

Accident vasculaire cérébral est l'une des principales causes de morbidité et de mortalité dans le monde. Stroke est compliquée par un œdème cérébral et d'autres événements physiopathologiques. Parmi les joueurs les plus importants dans le développement et l'évolution des accidents vasculaires cérébraux évoqués oedème cérébral est l'hormone arginine-vasopressine et ses récepteurs, V1a et V2. Récemment, le bloqueur des récepteurs conivaptan V1a et V2 a été d'attirer l'attention en tant que médicament potentiel pour réduire l'oedème cérébral après un AVC. Cependant, les modèles animaux qui impliquent des applications conivaptan dans la recherche de course doivent être modifiés en fonction des itinéraires possibles de l'administration. Voici les résultats de 48 h intraveineuse continue (IV) sont comparés avec les traitements intrapéritonéale (IP) de conivaptan après un AVC expérimental chez la souris. Nous avons développé un protocole dans lequel l'occlusion de l'artère cérébrale moyenne a été combinée avec l'installation du cathéter dans la veine jugulaire pour le traitement IV de conivaptan (0,2 mg) ou d'un véhicule. Différentes générations d'animaux ont été traités avec 0,2bol mg de conivaptan ou un véhicule IP par jour. Experimental œdème cérébral AVC évoquée a été évaluée chez des souris après IV continue et traitements IP. La comparaison des résultats a révélé que l'administration IV continue de conivaptan pallie post-ischémique œdème cérébral chez les souris, à la différence de l'administration IP de conivaptan. Nous concluons que notre modèle peut être utilisé pour des études futures applications conivaptan dans le contexte de l'AVC et l'oedème cérébral.

Protocol

Les expériences ont été effectuées en conformité avec les lignes directrices des Instituts nationaux de la santé pour les soins et l'utilisation des animaux dans la recherche et ont été approuvés par le Comité des soins et l'utilisation des animaux suédois Medical Center. Toutes les procédures ont été réalisées avec des techniques aseptiques appropriées. Les animaux expérimentaux utilisés pour l'étude étaient de sexe masculin, âgé de 3 mois, les souris C57 de type sauvage avec le poids corporel 25-27 g.

1. Dans l' induction de l' AVC Vivo

  1. Pré-enduire le Filament avec la résine dentaire Avant la chirurgie.
    1. Coupez un long morceau de 12 mm de filament à partir d'un fil de suture 7-0 en nylon. Mélanger 2 parties de la résine avec une partie du durcisseur, puis plonger immédiatement l'extrémité du filament dans le mélange pour couvrir environ un tiers de la longueur totale. Retirer rapidement et vérifiez qu'elle est recouverte d'une couche à surface lisse de résine dentaire.
    2. Air sécher le filament pendant 2 heures avant de l'utiliser.
  2. Placez la souris dans unn chambre d'anesthésie à induction (2 L de volume), et régler le débit de 1,5% d'isoflurane dans 25% air ambiant enrichi en oxygène à 2 L / min d'entrer dans la chambre.
  3. Laissez la souris pour rester dans la chambre d'induction jusqu'à entièrement anesthésié, 8 tel que déterminé par l' absence de réponse à la queue pincée.
  4. Placez la souris sur la table d'opération avec un coussin chauffant, et régler la concentration d'isoflurane sur 1% pour l'entretien de l'anesthésie livré spontanément à travers le cône de nez.
  5. Couper les poils à l'avant et l'arrière du cou, et pulvériser le cou avec de l'alcool à friction. Appliquer une pommade ophtalmique vétérinaire sur les deux yeux.
  6. Pour surveiller en permanence la température du corps, utiliser une sonde de température rectale reliée à affichage numérique pendant la chirurgie.
  7. Placez la souris en position couchée, appliquer une solution à 10% gommage povidone-iode pour la désinfection, couvrir d'un drap stérile, et ensuite faire une incision médiane le long du cou avec une lame chirurgicale taille 10 scalpel.
  8. <li> ligaturer temporairement l'artère gauche commune carotide (CCA) avec une suture 6.0 de soie.
  9. Placez un autre lien sur l'artère carotide externe gauche (ECA).
  10. Placez un clip microvasculaire sur l'artère carotide interne (ICA).
  11. Coupez un petit trou sur l'artère carotide externe avec des ciseaux microvasculaires. Insérez un filament en 7-0 suture en nylon enduit de résine dentaire dans l'ouverture de la CEA, et avancer cephalically, tout en retirant le clip, jusqu'à sentir une résistance (environ 5-7 mm à partir du point de la CCA de bifurcation).
  12. Placer une attache temporaire sur l'artère carotide interne pour fixer le filament en position. Reportez - vous à la figure, la figure 1A. Fermer la peau avec une suture de soie, et d'infiltrer la plaie à l'avant du cou avec 0,2 ml de bupivacaïne à 0,5%, comme dans l'étape 2.6.
  13. Laissez la souris pour réveiller de l'anesthésie et de reprendre conscience dans une chambre de récupération pendant 60 min. Ne pas laisser l'animal sans surveillance jusqu'à ce qu'il ait retrouvéconscience suffisante pour maintenir décubitus sternale.
  14. Test de la souris pour le déficit neurologique notation (NDS) comme suit: 0 = fonction normale du moteur, 1 = flexion du torse et des forelimb controlatéral sur hayon élévateur, 2 = encerclant le côté controlatéral, mais la posture normale au repos, 3 = penchant à controlatéral côté au repos, 4 = pas d' activité motrice spontanée. 4,9
    1. Pour les tests NDS, soulevez la souris par la queue et les placer sur une surface plane pour l'observation (2-3 min). Vous pouvez également observer les souris dans la chambre de récupération. Exclure les souris qui présentent NDS inférieur à 2 à partir de l'expérience due à l'occlusion insuffisante de la MCA.
      Remarque: la technique de Laser Doppler peut être utilisé pour confirmer MCA occlusion 9-11.
  15. Re-anesthésier l'animal après 60 minutes de récupération dans la chambre d'aspiration tel que décrit ci-dessus, restériliser l'incision cutanée précédente avec une solution à 10% de gommage povidone-iode, et de rouvrir la plaie chirurgicale de ladevant le cou en coupant et en enlevant la suture de soie.
  16. Pour retirer le filament de la CEA effectuer les étapes suivantes:
    1. Placez un clip microvasculaire sur la CIA. Détachez la suture sur la CIA et tirer le filament hors tout en maintenant pince ouverte.
    2. Fermez le clip et placer un lien sur la CEA proximalement à la coupe.
    3. Retirez le clip et retirer la ligature de la CCA pour rétablir le flux sanguin vers le cerveau. Consultez le diagramme, la figure 1B.

2. Installation de la IV Catheter dans la veine jugulaire pour Rafale traitement de 48 heures

Remarque: Procéder à l'installation du cathéter immédiatement après l'étape 1.16.3 sans éveil de la souris.

  1. Utiliser deux tailles différentes de tubes flexibles insérer le tube interne (0,94 mm de diamètre extérieur, pour contenir le médicament perfusé) dans le tube extérieur (3,18 mm de diamètre extérieur, pour la protection du tube interne).
  2. Placer la souris en position couchée, appliquer une solution à 10% de gommage povidone-iode pour la désinfection, et de faire une incision de 1 cm à l'arrière du cou avec une lame chirurgicale taille 10 scalpel. Tournez la souris dans la position couchée, restériliser l'avant du cou avec une solution à 10% de gommage povidone-iode, et de rouvrir la plaie chirurgicale sur le devant du cou. Tunnel du tube sous la peau de l'incision faite sur le dos à l'avant du cou, et extérioriser de la plaie ouverte de 1 cm.
  3. Enlever le tissu adipeux sous-cutané à partir du côté gauche de l'avant du cou d'environ 1 cm latéralement de la ligne médiane. Repérez la veine jugulaire gauche, placez deux attaches le long de la veine 5 mm, et légèrement étirer la veine. Faire un petit trou sur la veine jugulaire entre les deux liens avec des ciseaux microvasculaires; insérez la pointe du tube 5 mm caudale intérieure profonde (vers le cœur).
  4. Fixer le tube avec les deux attaches dans la veine jugulaire. Fermez la peau sur le devant du cou avecune suture 3-0 en soie. Reportez - vous à la figure, la figure 1C.
  5. Fixer le tuyau à la peau sur le dos du cou avec un fil de suture, et raccorder le tuyau à une pompe microperfusion IV grâce à un pivot. Le pivot permet la libre circulation des souris à l'intérieur de la cage avec plein accès à la nourriture et de l'eau.
  6. Infiltrer les incisions de la peau sur l'avant et l'arrière du cou avec 0,2 ml de bupivacaïne à 0,5% pour prévenir la douleur post-opératoire.
    Remarque: Selon les protocoles d'animaux spécifiques institutionnels, les animaux peuvent être traités avec des opioïdes, les AINS, ou des antibiotiques avant et après l'opération. Cependant, les traitements mentionnés peuvent modifier les résultats de ischémiques résultats de l'AVC (voir la section Discussion). 11-14
  7. Laisser l'animal de se réveiller dans la chambre de récupération, puis loger l'animal dans une cage séparée jusqu'à ce que le point de l'expérience de fin. Ne pas laisser l'animal sans surveillance jusqu'à ce qu'il ait repris connaissance suffisante pour maintenir sternaldécubitus.
  8. Régler le débit de perfusion pour en continu 48 h traitement IV de conivaptan (0,14 mg / ml dans 5% de dextrose) ou d'un véhicule à 1,5 ml / kg / h, 4 et commencer la perfusion.
    Remarque: Le montant total de la IV conivaptan infusé devrait être d'environ 0,2 mg / souris / jour dans un volume total de 1,44 ml.
    Remarque: Effectuez intrapéritonéale (IP) injection de conivaptan deux fois par jour avec une quantité totale de 0,2 mg dans 1,44 ml de dextrose à 5%. Mettre en œuvre l' injection IP a été décrit comme précédemment. 15 Retiens souris en saisissant la peau de la face postérieure du corps et de la queue. Injecter conivaptan ou d'un véhicule dans le quadrant inférieur gauche de l'abdomen en utilisant un / 02.01 aiguille G 26 pouces. 15
  9. Observer les animaux deux fois par jour pendant toute la durée de l'expérience (48 heures). Laisser les animaux ont accès à la nourriture et de l'eau. Si l'animal présente des signes de détresse ou de dyspnée consulter un vétérinaire. Si l'euthanasie est nécessaire pour l'animal dans dist sévèreress reportez-vous à l'étape 3.1 ci-dessous, et exclut l'animal de l'étude.

3. Évaluation de l'AVC évoqués Oedème cérébral au Point final

  1. Sacrifiez la souris par-dessus-anesthésier avec 5% d'isoflurane.
  2. Utilisez un scalpel pour faire une incision de la peau sur l'os du crâne le long de la ligne médiane, et se rétracter la peau pour exposer l'ensemble du crâne sur le cerveau. Partant du foramen magnum, couper l'os du crâne latéralement le long du périmètre du cerveau de chaque côté, et soulevez-le avec précaution sans toucher le cerveau en dessous. Sectionner le cerveau de la colonne vertébrale et les nerfs attachés à la base du crâne.
  3. Enlever le cerveau, le séparer du bulbe olfactif et le cervelet et le cerveau disséquer le long de la fissure interhémispherique dans les hémisphères cérébraux ischémiques et non ischémiques, comme décrit précédemment. 9
  4. Évaluer l' œdème cérébral en comparant humide à sec ratios (WDR) comme décrit précédemment 4,9. Peser les tissusavant et après séchage pendant 3 jours à 100 ° C dans un four. Calculer la teneur en eau du cerveau (BWC) en% H 2 O = (poids de 1 sec. / Poids humide.) X 100%.

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Representative Results

La température corporelle des animaux était dans les limites physiologiques et stable tout au long de la procédure chirurgicale d'AVC induction. Deux souris qui présentaient NDS inférieur à 2 immédiatement après MCAO ont été exclus de l'étude.

MCAO chez la souris produit un volume de l'infarctus dans l'hémisphère ipsilatéral à 48 h. Évaluation des tranches de TTC teinté montre que 50% environ de l'hémisphère est affectée par l' infarctus après MCAO (figure 1D), tel que publié par Zeynalov, E. et Dore, S., 2009. 10 Le début de l' AVC ischémique cérébral provoque de graves la privation de tissus du cerveau en oxygène et en nutriments. En conséquence de cette hypoxie tissulaire locale du cerveau, les neurones et les cellules gliales meurent, qui forment la partie infarcie du cerveau. La figure 1D montre des coupes de cerveau de souris représentant touchés par l' infarctus MCAO induite et donne une estimation de la taille d'une blessure.

Évaluation de la teneur en eau du cerveau (BWC) à 48 h après 60 min induction MCAO a révélé que conivaptan IV administré (0,2 mg / jour) réduit de manière significative l' œdème cérébral dans les deux hémisphères ipsilatéral et controlatéral, (figure 2A). En revanche, IP-traitement de conivaptan de 0,2 mg par jour bolus n'a pas réussi à produire des effets positifs similaires sur course évoqués œdème cérébral (figure 2B).

Confirmation de l'effet de conivaptan sur le plasma et l'osmolalité urinaire a été obtenue chez tous les animaux de laboratoire au point de l'expérience de fin. Conivaptan traitée IV ou IP accrue du plasma et une diminution de l'osmolalité urinaire chez toutes les souris 4 valeurs de l' osmolalité du plasma chez les souris étaient les suivantes:. 313 ± 4,4 mOsm / kg (véhicule, IV) , par rapport à 355 ± 7,5 * mOsm / kg (conivaptan, IV) , comme précédemment publié, 4 et 340 ± 7,7 mOsm / kg (véhicule, IP) vs.383 ± 8,8 * mOsm / kg (conivaptan, IP). Les valeurs d'osmolalité de l' urine chez la souris sont les suivantes: 1210,6 ± 13,4 mOsm / kg (véhicule, IV) , par rapport à 595,0 ± 57,4 * mOsm / kg (conivaptan, IV), comme précédemment publiées, 4 et 1535,0 ± 80,9 mOsm / kg (véhicule, IP) vs 242,0 ± 23,2 * mOsm / kg (conivaptan, IP). Toutes les données sont présentées comme moyenne ± SEM, * p ≤0.05 par rapport au témoin correspondant.

Figure 1
Figure 1:. Schéma du modèle expérimental de la course, l' installation du cathéter IV, et le volume de l' infarctus représentant à 48 heures après un AVC Position du filament (en bleu) pré-enduits de résine (vert) dans l'artère interne gauche de la carotide (ICA) lors de l'occlusion (A) et le temps de reperfusion (B). Position correcte de la pointe de tube flexible dans la veine jugulaire gauche (C). Experimental accident vasculaire cérébral chez la souris produit un volume de l'infarctus dans l'hémisphère ipsilatéral à 48 h. Les souris ont été sacrifiées 48 heures après la MCAO, et les cerveaux ont été enlevés, comme décrit dans le protocole (étapes 3.1 à 3.3). Les cerveaux ont été coupés en sections épaisses de 2 mm, et on les colore avec TTC (D). Figure 1D a été modifié de l'article original par Zeynalov, E. et Dore, S., 2009. 10 S'il vous plaît cliquer ici pour voir une version plus grande de cette figure.

Figure 2
Figure 2: Effets de intraveineuse continue (IV) et intrapéritonéale (IP) conivaptan (0,2 mg / jour) sur les traitements AVC évoqués oedème cérébral Conivaptan traitement IV a été administré pendant 48 heures.. traitement Conivaptan administré IV réduit post-ischémique oedème cérébral dans le h ipsilatéral et controlatéralEmisphere (A). Figure 2A a été modifié de l'article original par Zeynalov et al., 2015. traitement 4 Conivaptan IP pendant 48 heures n'a pas réussi à réduire l' œdème cérébral causé par un AVC expérimental, n = 10 dans chaque groupe. Les souris a subi MCAO avec reperfusion comme décrit dans le protocole ci-dessus (étapes 1.1.1-1.15.3). Ensuite, les injections IP de conivaptan (0,2 mg) ont été administrés immédiatement, à 22 h et 46 h de reperfusion. Les souris ont été sacrifiées; Les cerveaux ont été enlevés et séchés à l'étuve, comme décrit dans le protocole (étapes 3.1 à 3.4). (B) Toutes les données sont présentées sous forme de moyenne ± SEM, * p <0,05 vs contrôle correspondant. S'il vous plaît cliquer ici pour voir une version plus grande de cette figure.

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Discussion

Cette étude a une valeur importante pour la recherche de la course préclinique. Cette étude révèle que continue perfusion IV de conivaptan (0,2 mg / jour) après un AVC expérimental chez la souris réduit efficacement l'œdème cérébral après 48 heures de traitement. L'effet de l'injection IP de la même dose de conivaptan sur l'oedème cérébral a également été étudiée. traitement Conivaptan par les deux voies IV et IP produit aquaresis chez la souris comme indiqué par: 1) augmentation de l'osmolalité plasmatique légèrement au-dessus des niveaux physiologiques; et 2) diminution de l'osmolalité urinaire due à un blocage de la réabsorption de l'eau dans le rein. Par conséquent, sur la base des résultats du traitement, nous signaler que la méthode de livraison IV a des effets bénéfiques supplémentaires importants sur la formation d'oedème AVC évoqués.

Notre principale conclusion est que le traitement IV produit un meilleur effet sur l'oedème cérébral atténuation que la voie IP pour conivaptan. Conivaptan est un V1a et V2 antagoniste du récepteur combiné, disponible pour une utilisation clinique pour corhyponatrémie rect, le volume sanguin et de l' osmolalité 16 Conivaptan a été montré. pour corriger l' hyponatrémie chez les patients présentant diverses conditions. 17 disponibilité clinique de conivaptan suggère que son exploration dans le contexte de l' oedème cérébral peut entraîner la traduction du laboratoire au chevet rapide. L' utilisation de expérimentaux sélectifs bloquants V1a des récepteurs livrés intracérébroventriculaire a été prouvée pour réduire les pertes post-ischémique formation cerveau oedème décrit par d' autres chercheurs. 3,18 Cependant, ni le médicament utilisé dans ces études , ni la voie de traitement pour les médicaments suggère une éventuelle application clinique dans le futur proche.

Les mécanismes par lesquels l'ischémie cérébrale et AVP cause de l'oedème cérébral sont complexes. Cependant, certains acteurs moléculaires importants sont sodium et chlorure co-transporteurs 19,20 et récepteurs V1a qui sont localisés dans les parois vasculaires à l'interface du Bureau. Le V2 effet de blocage des conivaptan est responsable de l'excrétion de excess l' eau par le rein et l' élévation de l' osmolalité du sang, ce qui peut aussi aider à prévenir le développement d' un œdème cérébral. 21 Ces mécanismes peuvent encore être en jeu lorsque conivaptan est livré directement dans la circulation pour éviter les barrières tissulaires qui peuvent réduire la disponibilité de conivaptan. Cependant, la justification de la dose et la durée du traitement a été basée sur des observations précédemment publiées. 4 Il reste à déterminer si conivaptan atteint le site ischémique du cerveau après une diminution induite par des blessures de la circulation sanguine régionale. Il doit également être étudié si le cerveau reçoit une quantité suffisante de conivaptan pour produire les effets locaux souhaitables, comme la prévention de la vasoconstriction en bloquant les récepteurs V1a dans les artères cérébrales.

Le protocole expérimental a été conçu pour répondre à la question du choix de la voie d'conivaptan de traitement. D'après les résultats, l'étude fournit un appui solide pour la voie d'conivaptan ad IVministration. Toutefois, les étapes les plus critiques du protocole devaient être mis en place et affiné afin de détecter des différences significatives dans les résultats du traitement après un AVC chez la souris. Parmi ces étapes sont les suivantes: 1) la durée de la MCAO (60 min); 2) la dose journalière (0,2 mg), et le débit d'infusion (1,5 ml / kg / h); et 3) la durée du traitement (48 heures). Durée du MCAO détermine le degré de l'insulte ischémique qui est extrêmement crucial pour le protocole parce qu'il irréversiblement endommage le tissu cérébral. Trop grave d'une blessure, il serait difficile pour l'animal de survivre pendant 48 heures, ou les animaux pourrait devenir moins sensibles au traitement de conivaptan contre l'oedème cérébral. D'autre part, la durée de MCAO moins de 60 min peut être insuffisante pour induire une lésion ischémique chez la souris, et, par conséquent, ne produirait pas un oedème cérébral. La dose et la durée du traitement ont été choisis sur la base des recommandations de la FDA pour l' utilisation de conivaptan. 16 Cependant, il a été rapporté quela dose humaine pour conivaptan n'a pas été efficace chez des souris pour réduire l'oedème cérébral après un AVC. Par conséquent, la dose doit être augmentée de 10 fois pour les souris, qui ont amené une protection significative contre post-ischémique oedème cérébral. 4 L'importance de choisir le débit de perfusion correcte est que cela peut affecter le volume total de sang, la pression artérielle et de l' accumulation de liquide interstitiel si le taux dépasse largement le taux suggéré. Cependant, les mesures de volume sanguin total et la pression artérielle serait très instructif.

induction chirurgicale de la MCAO est une procédure invasive et nécessite une attention précise à toutes les étapes du protocole, et il est important de connaître les conseils de dépannage pour la technique. Certaines complications chirurgicales inattendues, comme des saignements artérielle excessive due à une artère accidentellement déchirée réduisent le taux de réussite pour l'expérience et d'augmenter le taux de mortalité. Cependant, le saignement veineux peut être arrêté en appliquant une légère pression wvec une éponge stérile.

Ce protocole décrit une induction unilatérale de l'ischémie cérébrale, ce qui implique que l'occlusion MCA est produite soit à droite ou à gauche de la MCA. Toutefois, le protocole peut être modifié en fonction du côté préféré de MCA occlusion et l'installation cathéter IV du chirurgien. Figure 1 diagramme représente un dessin des parties les plus critiques de la procédure MCAO, Figure 1A et B, le protocole d'installation de cathéter intraveineux, Figure 1C, et les tranches représentatives du cerveau de MCAO induite par l' infarctus du cerveau au point final de l'expérience (48 h), comme précédemment publié, 10 Figure 1D. Bien que le diagramme et les tranches de cerveau représentatives impliquent que la MCAO a été induite sur le côté gauche du cerveau, nous ne prévoyons pas des différences considérables dans les résultats si MCAO a été induite sur le côté droit du cerveau aussi longtemps que la cohérence dans tout le enétude des pneus est maintenue.

Au cours de la période de récupération après la chirurgie et de l'anesthésie, les animaux peuvent éprouver de la détresse à cause de la douleur post-opératoire et les déficits neurologiques graves. Dans de nombreux cas, la prise en charge de la douleur post-opératoire peut se limiter à utiliser uniquement des anesthésiques locaux tels que la bupivacaïne à 0,5%. AVC dû à un accident vasculaire cérébral chez l' homme ainsi que coup expérimental chez la souris implique des facteurs physiopathologiques tels que l' inflammation, l' infarctus cérébral, et un œdème cérébral. 9 Ces événements physiopathologiques sont engagés par des acteurs moléculaires clés tels que cyclooxygénases (COX) 13 et G-protéine apparentée récepteurs. 22 Interférence avec les voies moléculaires qui impliquent COX peut être causée par les médicaments AINS, 13 si elles ont été utilisées dans ces paramètres. Les opioïdes agissent sur ​​leurs récepteurs qui sont liés à la protéine G et des seconds messagers 12 et peuvent altérer les résultats physiopathologiques de l' AVC, 11 et le résultats de cette étude. Ces facteurs limitent l'utilisation de médicaments contre la douleur chez les souris postopératoires.

En résumé, notre étude explore la possibilité de réorientation conivaptan comme un objectif de grande envergure. Notre modèle animal de l'induction de la course expérimentale suivie en continu IV infusion de conivaptan a été montré pour produire des résultats cohérents qui suggèrent son utilisation potentielle chez les patients victimes d'AVC. Plus précisément, nous avons démontré que le modèle de traitement IV continue de conivaptan après un AVC pour prévenir les blessures du cerveau secondaire peut être utilisé pour l'étude préclinique chez la souris. Cette étude avait pour but d'offrir une alternative application du traitement de conivaptan comme un outil supplémentaire pour étudier l'oedème cérébral chez la souris après un AVC parce que la traduction rapide en milieu clinique peut sauver la vie des patients en soins intensifs.

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Disclosures

Les auteurs n'ont rien à dévoiler.

Acknowledgments

Nous remercions Swedish Medical Center pour fournir le financement et les installations. Nous remercions également Craig Hospital pour l'utilisation généreuse de l'espace de laboratoire.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Heated Pad K&H Manufacturing Inc 1060
Temperature Monitor with Rectal Probe Physitemp 7029
Silk Suture Spool, 6-0 Surgical Specialties Corporation SP114
Silk Suture on a Needle, 3-0 Ethicon 1684G
Nylon Suture, 7-0 Ethicon 1696G
Dental Resin Polysiloxane with Hardener Heraeus Kulzer 65817930
Microinfusion IV Pump Kent Scietific GT0897
Swivel 22GA Instech 375/22PS
Laboratory Tubing, 0.94 mm x 0.51 mm Dow Corning 508-002
Laboratory Tubing, 3.18 mm x 1.98 mm Dow Corning 508-009

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Gueniau, C., Oberlander, C. The kappa opioid agonist niravoline decreases brain edema in the mouse middle cerebral artery occlusion model of stroke. J Pharmacol Exp Ther. 282, 1-6 (1997).
  2. Krafft, P. R., et al. Etiology of stroke and choice of models. Int J Stroke. 7, 398-406 (2012).
  3. Vakili, A., Kataoka, H., Plesnila, N. Role of arginine vasopressin V1 and V2 receptors for brain damage after transient focal cerebral ischemia. J Cereb Blood Flow Metab. 25, 1012-1019 (2005).
  4. Zeynalov, E., Jones, S. M., Seo, J. W., Snell, L. D., Elliott, J. P. Arginine-Vasopressin Receptor Blocker Conivaptan Reduces Brain Edema and Blood-Brain Barrier Disruption after Experimental Stroke in Mice. PloS one. 10, e0136121 (2015).
  5. Med Lett Drugs Ther.. Conivaptan (Vaprisol) for hyponatremia. The Medical letter on drugs and therapeutics. 48, 51-52 (2006).
  6. Zhao, X. Y., et al. Effect of arginine vasopressin on the cortex edema in the ischemic stroke of Mongolian gerbils. Neuropeptides. 51, 55-62 (2015).
  7. Manaenko, A., Chen, H., Kammer, J., Zhang, J. H., Tang, J. Comparison Evans Blue injection routes: Intravenous versus intraperitoneal, for measurement of blood-brain barrier in a mice hemorrhage model. J Neurosci Methods. 195, 206-210 (2011).
  8. Adams, S., Pacharinsak, C. Mouse anesthesia and analgesia. Curr Protoc Mouse Biol. 5, 51-63 (2015).
  9. Zeynalov, E., et al. The perivascular pool of aquaporin-4 mediates the effect of osmotherapy in postischemic cerebral edema. Crit Care Med. 36, 2634-2640 (2008).
  10. Zeynalov, E., Dore, S. Low doses of carbon monoxide protect against experimental focal brain ischemia. Neurotox Res. 15, 133-137 (2009).
  11. Zeynalov, E., Nemoto, M., Hurn, P. D., Koehler, R. C., Bhardwaj, A. Neuroprotective effect of selective kappa opioid receptor agonist is gender specific and linked to reduced neuronal nitric oxide. J Cereb Blood Flow Metab. 26, 414-420 (2006).
  12. Ma, M. C., Qian, H., Ghassemi, F., Zhao, P., Xia, Y. Oxygen-sensitive {delta}-opioid receptor-regulated survival and death signals: novel insights into neuronal preconditioning and protection. J Biol Chem. 280, 16208-16218 (2005).
  13. Ahmad, M., Zhang, Y., Liu, H., Rose, M. E., Graham, S. H. Prolonged opportunity for neuroprotection in experimental stroke with selective blockade of cyclooxygenase-2 activity. Brain Res. 1279, 168-173 (2009).
  14. Meisel, C., et al. Preventive antibacterial treatment improves the general medical and neurological outcome in a mouse model of stroke. Stroke. 35, 2-6 (2004).
  15. Miner, N. A., Koehler, J., Greenaway, L. Intraperitoneal injection of mice. Appl Microbiol. 17, 250-251 (1969).
  16. Adis International Limited. Conivaptan: YM 087. Drugs in R&D. 5, 94-97 (2004).
  17. Murphy, T., Dhar, R., Diringer, M. Conivaptan bolus dosing for the correction of hyponatremia in the neurointensive care unit. Neurocrit Care. 11, 14-19 (2009).
  18. Liu, X., Nakayama, S., Amiry-Moghaddam, M., Ottersen, O. P., Bhardwaj, A. Arginine-vasopressin V1 but not V2 receptor antagonism modulates infarct volume, brain water content, and aquaporin-4 expression following experimental stroke. Neurocrit Care. 12, 124-131 (2010).
  19. Wallace, B. K., Jelks, K. A., O'Donnell, M. E. Ischemia-induced stimulation of cerebral microvascular endothelial cell Na-K-Cl cotransport involves p38 and JNK MAP kinases. Am J Physiol Cell Physiol. 302, C505-C517 (2012).
  20. O'Donnell, M. E., et al. Intravenous HOE-642 reduces brain edema and Na uptake in the rat permanent middle cerebral artery occlusion model of stroke: evidence for participation of the blood-brain barrier Na/H exchanger. J Cereb Blood Flow Metab. 33, 225-234 (2013).
  21. Walcott, B. P., Kahle, K. T., Simard, J. M. Novel treatment targets for cerebral edema. Neurotherapeutics. 9, 65-72 (2012).
  22. Shen, Z., et al. Inhibition of G protein-coupled receptor 81 (GPR81) protects against ischemic brain injury. CNS Neurosci Ther. 21, 271-279 (2015).

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Médecine numéro 115 modèle de course Souris Cerebral Artery Occlusion Moyen Oedème cérébral barrière hémato-encéphalique l'infarctus cérébral perfusion continue
Infusion IV continue est le traitement de choix pour la route Arginine-vasopressine Receptor Blocker Conivaptan chez des souris pour étudier des maladies évoqués Oedème cérébral
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Zeynalov, E., Jones, S. M., Elliott, More

Zeynalov, E., Jones, S. M., Elliott, J. P. Continuous IV Infusion is the Choice Treatment Route for Arginine-vasopressin Receptor Blocker Conivaptan in Mice to Study Stroke-evoked Brain Edema. J. Vis. Exp. (115), e54170, doi:10.3791/54170 (2016).

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