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Bioengineering

के आवेदन Published: October 7, 2016 doi: 10.3791/54487

Abstract

कंकाल की मांसपेशी, स्थायी कार्यात्मक और / या कॉस्मेटिक घाटे (जैसे, बड़ा मांसपेशियों की हानि (VML) दर्दनाक चोट, बीमारी और विभिन्न, जन्मजात आनुवंशिक और अधिग्रहण की स्थिति से उत्पन्न बहुत आम हैं। ऊतक इंजीनियरिंग और पुनर्योजी चिकित्सा प्रौद्योगिकियों भारी राशि के पुनर्योजी क्षमता के बावजूद संभावित एक चिकित्सकीय समाधान प्रदान करने के लिए। हालांकि, उचित कार्यात्मक उपायों के अनुदैर्ध्य आकलन के साथ संयोजन में जैविक रूप से प्रासंगिक पशु मॉडल के उपयोग VML-तरह की चोटों के इलाज के लिए बेहतर पुनर्योजी चिकित्सा विज्ञान के विकास के लिए महत्वपूर्ण हैं। उस संबंध में, एक वाणिज्यिक पेशी लीवर प्रणाली लंबाई, तनाव, बल और कंकाल की मांसपेशी में वेग मापदंडों को मापने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। हम इस प्रणाली के संयोजन के रूप में एक उच्च शक्ति, द्वि-चरण उत्तेजक, साथ के पूर्वकाल और्वी डिब्बे के सक्रियण के जवाब में इन विवो बल उत्पादन को मापने के लिए इस्तेमाल किया, चूहे hindlimb। हम previ हैously tibialis पूर्वकाल (टीए) पेशी पर VML चोट के कार्यात्मक प्रभाव है, साथ ही हमारे ऊतक इंजीनियर मांसपेशियों की मरम्मत (TEMR) तकनीक से घायल टीए पेशी के इलाज के बाद कार्यात्मक वसूली की सीमा का आकलन करने के लिए इस उपकरण का इस्तेमाल किया। इस तरह के अध्ययन के लिए, एक anaesthetized चूहे के बाएं पैर सुरक्षित रूप से एक footplate एक servomotor से जुड़े करने के लिए लंगर डाले है, और आम peroneal तंत्रिका मांसपेशियों के संकुचन और पैर की dorsiflexion बटोर दो percutaneous सुई इलेक्ट्रोड से प्रेरित है। peroneal तंत्रिका उत्तेजना प्रेरित मांसपेशियों के संकुचन उत्तेजना आवृत्तियों (1-200 हर्ट्ज) की एक सीमा से अधिक मापा जाता है, बल उत्पादन में एक अंतिम पठार है कि शिखर धनुस्तंभीय बल का सही निर्धारण के लिए अनुमति देता है सुनिश्चित करने के लिए। VML चोट की हद तक के रूप में अच्छी तरह से इलाज के बाद कार्यात्मक वसूली की डिग्री के मूल्यांकन के अलावा, इस पद्धति आसानी से पेशी शरीर विज्ञान और pathophysiology के विविध पहलुओं का अध्ययन करने के लिए लागू किया जा सकता है। इस तरह के एक दृष्टिकोण थानेदारमांसपेशियों की मरम्मत और उत्थान के लिए बेहतर चिकित्सा विज्ञान के और अधिक तर्कसंगत विकास के साथ सहायता uld।

Introduction

कंकाल की मांसपेशी की चोट या बीमारी 1,2 के जवाब में मरम्मत के लिए एक उल्लेखनीय आंतरिक क्षमता है। प्रयोगात्मक, इस पुनर्योजी प्रतिक्रिया की मजबूती में अच्छी तरह से अध्ययन, उदाहरण के लिए पशु मॉडल में दर्ज किया गया है, myotoxins (जैसे, cardiotoxin) 3-7 के आवेदन के बाद कंकाल की मांसपेशियों की क्षति, मरम्मत और उत्थान के समय पाठ्यक्रम। अधिक विशेष रूप से, व्यापक cardiotoxin प्रेरित मांसपेशियों की क्षति, उत्थान उपग्रह कोशिकाओं द्वारा मध्यस्थता है (मांसपेशी फाइबर 8 की 38-67%) के बाद, निवासी स्टेम कोशिकाओं अंततः कार्यात्मक मांसपेशी फाइबर 4,9-13 बनने के लिए परिपक्व है। अंतिम परिणाम के बाद नुकसान स्वस्थ, बल-उत्पादक मांसपेशियों के ऊतकों को 14-16 के कार्यात्मक उत्थान बढ़ जाती है। हालांकि विवरण इस रिपोर्ट के दायरे से बाहर अच्छी तरह से कर रहे हैं, मांसपेशियों के उत्थान के लिए यंत्रवत आधार canoni उपयोग कई प्रजातियों से कई प्रकार की कोशिकाओं का सावधानी से करवाया घटनाओं को दर्शाता हैकैलोरी संकेत दे रास्ते दोनों ऊतक विकास और morphogenesis 5,17-21 के लिए महत्वपूर्ण। महत्वपूर्ण बात है, myotoxin प्रेरित उत्थान तथ्य से सक्षम किया गया है कि बाह्य मैट्रिक्स, न्यूरोनल इन्नेर्वतिओन और रक्त वाहिका छिड़काव संरचनात्मक रूप cardiotoxin प्रेरित मांसपेशियों की क्षति 3,8,22 निम्नलिखित बरकरार रहेगा। इसके विपरीत, इन महत्वपूर्ण ऊतक संरचनाओं और घटक हैं, परिभाषा से, पूरी तरह से VML चोट के संदर्भ में अनुपस्थित; जहां ऊतक के फ्रैंक हानि, कारणों में से एक किस्म की वजह से स्थायी कार्यात्मक और कॉस्मेटिक घाटे 23-25 में यह परिणाम है।

अतिरिक्त संदर्भों की एक किस्म में, मांसपेशियों की मरम्मत और उत्थान myotoxin प्रेरित मांसपेशियों की क्षति के साथ तुलना में VML चोट के बाद, कंकाल की मांसपेशी उत्थान और मरम्मत के लिए यंत्रवत आधार की बेहतर समझ के साथ जुड़े चुनौतियों के बावजूद, अच्छी तरह से जैविक रूप से उपयोग द्वारा कार्य किया जाएगा अनुदैर्ध्य एक साथ संयोजन में प्रासंगिक पशु मॉडलप्रासंगिक कार्यात्मक उपायों के ssessments। इस के साथ साथ के रूप में चर्चा की, चूहे hindlimb के अध्ययनों से यह अंत करने के लिए एक शानदार मॉडल प्रणाली प्रदान करते हैं। अधिक विशेष रूप से, पूर्वकाल और्वी डिब्बे की मांसपेशियों (tibialis पूर्वकाल, extensor digitorum longus (EDL) और hallicus longus (एच एल)), जो पैर की dorsiflexion के लिए जिम्मेदार हैं, आसानी से पहचान की है और छेड़छाड़ कर रहे हैं। इसके अलावा, वे प्रमुख रक्त वाहिकाओं (श्रोणिफलक और शाखाओं) द्वारा सेवा कर रहे हैं, और तंत्रिकाओं (sciatic और शाखाओं, peroneal सहित) innervated हैं पैर 26-28 की लंबाई चल रहा है। इस तरह के रूप में, एक चूहे hindlimb मॉडल का उपयोग सीधे विवो में कंकाल की मांसपेशी समारोह / विकृति का आकलन करने के लिए कर सकते हैं, या इसी कंकाल की मांसपेशी समारोह पर रक्त वाहिकाओं या नसों में विकृति से संबंधित परिवर्तन के और अधिक अप्रत्यक्ष प्रभाव का मूल्यांकन करने के लिए। या तो परिदृश्य में, रोग की गंभीरता, साथ ही उपचार की प्रभावकारिता पेशी बल उत्पादन (टोक़) और इसी पैर मीटर के एक समारोह के रूप में निर्धारित किया जा सकताovement 29-34।

आदर्श रूप में, बल माप ऊतकीय पढ़ाई के साथ कर रहे हैं और जीन अभिव्यक्ति और अधिक कड़ाई से कंकाल की मांसपेशी के संरचनात्मक और आणविक स्थिति का मूल्यांकन करने के लिए विश्लेषण करती है। बेसिक ऊतक विज्ञान और immunohistochemistry, उदाहरण के लिए, मांसपेशियों का आकार, मांसपेशी फाइबर संरेखण, बाह्य मैट्रिक्स संरचना, नाभिक के स्थान, सेल नंबर, और प्रोटीन स्थानीयकरण के बारे में सवालों के जवाब देने में सक्षम हैं। जीन एक्सप्रेशन विश्लेषण, बारी में, आणविक तंत्र को प्रभावित / मांसपेशी फाइबर, रोग राज्यों, और चयापचय गतिविधि की परिपक्वता मिलाना सकता है की पहचान के लिए आवश्यक है। इन तरीकों में महत्वपूर्ण जानकारी प्रदान करते हैं, वे आम तौर पर टर्मिनल समापन का प्रतिनिधित्व करते हैं, और सबसे महत्वपूर्ण बात, वे सीधे कंकाल की मांसपेशी की कार्य क्षमता को संबोधित करने के लिए असफल हो, और इस प्रकार है, बल्कि प्रेरणा से correlative हैं। हालांकि, जब ऊतकीय अध्ययन और जीन अभिव्यक्ति विश्लेषण कार्यात्मक measur के साथ संयोजन के रूप में मूल्यांकन कर रहे हैंते, तो, बल उत्पादन और कार्यात्मक उत्थान के तंत्र को ठीक ढंग से पहचाना जा सकता है।

इस संबंध में एक मांसपेशी की क्षमताओं का निर्माण बल इन विट्रो में मापा जा सकता है, बगल में, या vivo में। सभी तीन दृष्टिकोण दोनों के फायदे और सीमाएं हैं। इन विट्रो प्रयोग में, उदाहरण के लिए, मांसपेशियों में पूरी तरह से अलग है और जानवर के शरीर से हटा दिया है। रक्त वाहिकाओं और नसों कि मांसपेशियों की आपूर्ति के प्रभावों को दूर करके, ऊतक के सिकुड़ा क्षमता एक कसकर नियंत्रित बाहरी वातावरण 35 में निर्धारित किया जा सकता है। सीटू मांसपेशी परीक्षण में, इन विट्रो तैयारी के साथ मांसपेशियों के रूप में अलग किया जा करने के लिए अनुमति देता है हालांकि, , तंत्रिका वितरण और रक्त की आपूर्ति बरकरार रहेगा। बगल में प्रयोगात्मक मॉडल का लाभ यह है कि जबकि इन्नेर्वतिओन और रक्त की आपूर्ति न्यूनतम 36 आनाकानी कर रहा है एक व्यक्ति मांसपेशियों का अध्ययन करने की अनुमति देता है। दोनों मेइन विट्रो में और सीटू प्रयोगों में, औषधीय उपचार किसी भी आसपास के ऊतकों को मापा जाता है या सिकुड़ा प्रतिक्रियाओं 37 पर संचार प्रणाली के प्रभाव के प्रभाव के लिए खाते में करने के लिए बिना अधिक सीधे लागू किया जा सकता है। हालांकि, विवो समारोह परीक्षण में, के रूप में वर्णित है, इसकी देशी वातावरण में 38 मांसपेशी समारोह के मूल्यांकन के लिए कम से कम इनवेसिव तकनीक है, और (यानी, longitudinally) समय के साथ बार-बार किया जा सकता है। जैसे, यह नीचे चर्चा का केन्द्र बिन्दु होगा।

इस संबंध में percutaneous ब्याज की मांसपेशियों, या मोटर तंत्रिका कि यह काम करता है के पास डाला इलेक्ट्रोड, पेशी के लिए एक बिजली के संकेत प्रदान करते हैं। एक ट्रांसड्यूसर फिर सक्रिय मांसपेशियों में परिणामी लंबाई या बल परिवर्तन के रूप में एक पूर्व निर्धारित, अनुकूलित सॉफ्टवेयर प्रोटोकॉल द्वारा निर्देशित उपाय। इन आंकड़ों से, मांसपेशियों के भौतिक गुणों निर्धारित किया जा सकता है। इन के लिए शामिलसीई आवृत्ति, अधिक से अधिक टिटनेस, बल-वेग, कठोरता, लंबाई तनाव और थकान। मांसपेशियों की लंबाई या बल भी लगातार आयोजित किया जा सकता है ताकि मांसपेशियों अनुबंध isometrically या isotonically। महत्वपूर्ण बात, इन प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल तेजी से प्रदर्शन किया जा सकता है आसानी से दोहराया है, और customized- सभी जबकि पशु anaesthetized है और दिनों घंटे की वसूली की अवधि के साथ। एक भी पशु कई बार परीक्षण के लिए, इस प्रकार की बीमारी मॉडल या चिकित्सीय प्लेटफार्मों / प्रौद्योगिकियों के मूल्यांकन के अनुदैर्ध्य अध्ययन को सक्षम करने विवो बल में से गुजरना कर सकते हैं।

के रूप में वर्णित है, एक उच्च शक्ति के साथ संयोजन के रूप में एक वाणिज्यिक पेशी लीवर प्रणाली, द्वि-चरण उत्तेजक विवो मांसपेशी समारोह परीक्षण में प्रदर्शन करने की उत्तेजना के माध्यम से पैर की dorsiflexion को चूहे hindlimb की tibialis पूर्वकाल पेशी के योगदान का मूल्यांकन करने के लिए प्रयोग किया जाता है peroneal तंत्रिका। हम एक प्रोटोकॉल है कि विशेष रूप से पुनर्योजी चिकित्सा / ती का मूल्यांकन करने के लिए बनाया गया है विकसित किया हैमांसपेशियों की मरम्मत के लिए ssue इंजीनियरिंग प्रौद्योगिकियों चूहे टीए मांसपेशी की दर्दनाक VML चोट के बाद। यह ध्यान दिया जाना चाहिए; EDL और एचएल आदेश विशेष टीए मांसपेशी का मूल्यांकन करने के लिए (वे कुल tibialis पूर्वकाल टोक़ के लगभग 15-20% peroneal तंत्रिका उत्तेजना (कोरोना निम्नलिखित मापा के लिए खाते में पूर्वकाल और्वी डिब्बे से बाहर विच्छेदित किए जाने की जरूरत एट अल।, 2013) )। क्योंकि इस दृष्टिकोण मांसपेशी शरीर क्रिया विज्ञान / समारोह की व्यापक अनुदैर्ध्य विश्लेषण प्रदान करता है, यह या शारीरिक जांच के कई अन्य प्रकार के रूप में अच्छी तरह से रोग की एक किस्म चिकित्सीय क्षेत्रों पर 39 महत्वपूर्ण यंत्रवत अंतर्दृष्टि डाला सकता है। उदाहरण के लिए, विवो मांसपेशी समारोह परीक्षण में व्यायाम शरीर क्रिया विज्ञान, ischemia / reperfusion अनुसंधान, मायोपथी, तंत्रिका क्षति / न्यूरोपैथी और Vasculopathy, सार्कोपीनिया, और पेशी अपविकास 40 के अध्ययन के लिए लागू है।

Protocol

सभी जानवरों को मानवता का व्यवहार कर रहे थे और सभी प्रोटोकॉल वर्जीनिया IACUC के विश्वविद्यालय द्वारा अनुमोदित किया गया।

1. उपकरण तैयारी

  1. सुनिश्चित करें कि सभी मशीनों को ठीक से जुड़े हुए हैं।
  2. कंप्यूटर पर बारी, उच्च शक्ति का द्वि-चरण उत्तेजक और दोहरे मोड लीवर प्रणाली द्वारा पीछा किया।
  3. इस समय, संज्ञाहरण कक्ष 2% isoflurane के साथ आपूर्ति में जानवरों की जगह है, और इतना है कि मंच 37 डिग्री सेल्सियस तक गरम किया जाता है हीटिंग तत्व पर बारी।
  4. 70% इथेनॉल में इलेक्ट्रोड इतनी जगह है कि polytetrafluoroethylene (PTFE) लेपित सुझावों के डूबे हुए हैं और डिवाइस और सॉफ्टवेयर की स्थापना करते हुए कीटाणुरहित किया जाएगा।
  5. जानें, और डेस्कटॉप पर लीवर प्रणाली नियंत्रण सॉफ्टवेयर खुला।
    नोट: यह सॉफ्टवेयर कार्यात्मक परीक्षण करने की जरूरत होगी।

2. सॉफ्टवेयर सेटअप

  1. एक बार प्रोग्राम (चित्रा 1 ए) खोला है, पैरामीटर को बदलनेवांछित मूल्यों को सेटअप मेनू के तहत त्वरित Stim के लिए है।
    नोट: इस प्रोटोकॉल में, सभी मापदंडों "भागो समय (s)", जो 180 सेकंड (चित्रा 1 बी) में बदल जाता है के अपवाद के साथ पूर्व निर्धारित स्तरों पर बने हुए हैं।
  2. सेटअप मेनू के तहत एक स्वत: सहेजना फ़ोल्डर बनाएँ।
  3. एक प्रकार सक्षम खिड़की लेबल "स्वत: सहेजना बेस" का पता लगा। इनपुट नमूना के नाम, उदाहरण के लिए "Rat1 की तारीख-timepoint"। सीधे "स्वत: सहेजना बेस" टाइप सक्षम खिड़की के बाईं ओर, "स्वत: सहेजना सक्षम करें।" करने के लिए बॉक्स पर क्लिक करें
  4. नियंत्रण स्क्रीन के शीर्ष पर, "Sequencer" का चयन करें। एक नयी विंडो खुलेगी। नई विंडो के तल पर, "ओपन अनुक्रम" का चयन करें। एक नयी विंडो खुलेगी। premade अनुक्रम का चयन करें और ठीक क्लिक करें। आवृत्ति सहित अनुक्रम पैरामीटर, उत्तेजनाओं की अवधि, और बाकी समय के साथ एक प्रोटोकॉल सूची में नामित किया विंडो में विकास होगा: अनुक्रम संपादक (चित्रा 1 सी)। क्लिक करें "लोड अनुक्रम" -> & #34; विंडो बंद करें "।
  5. > "लाइव डेटा की निगरानी" - वास्तविक समय वर्तमान और उत्तेजना देखने के लिए, "फाइल" का चयन करें। एक नयी विंडो खुलेगी।
  6. नए लाइव डेटा विंडो में, लपेटकर समारोह का उपयोग कर, या मैन्युअल अधिकतम और न्यूनतम y- मानों स्क्रीन पर प्रदर्शित प्रवेश द्वारा परीक्षण के लिए प्रारूप स्क्रीन।

3. पशु सेट-अप

नोट: सभी बल माप एक 11 सप्ताह पुरानी लुईस चूहे के हैं। वहाँ मांसपेशियों और बल उत्पादन (न्यूटन में) के बीच एक रैखिक संबंध है। इसलिए, चूहे बढ़ जाती है की उम्र के रूप में, पैर द्वारा उत्पादित बल मूल्यों के रूप में अच्छी तरह से वृद्धि करनी चाहिए।

  1. सुनिश्चित करें कि पशु संज्ञाहरण कक्ष से हटाने से पहले एनेस्थीसिया की उचित विमान में है। पूरी तरह से टखने और एक बिजली के बाल क्लिपर का उपयोग कर प्रयोगात्मक पैर की श्रोणि के बीच पार्श्व पक्ष पर सभी बालों को हटा दें।
    नोट: संज्ञाहरण के समुचित विमान हासिल की है जब जानवर मैंएक पैर की अंगुली चुटकी करने के लिए गैर जिम्मेदार है। यह दिशा-निर्देशों के प्रत्येक संस्था के पशु देखभाल और उपयोग समिति द्वारा प्रस्तुत पालन करने के लिए आवश्यक है।
  2. लापरवाह स्थिति में पशु रखें, यह सुनिश्चित जानवर की नाक संज्ञाहरण नाक शंकु में सुरक्षित है, तो यह संज्ञाहरण की पर्याप्त गहराई पर बनी हुई है।
  3. तीन स्वतंत्र knobs (चित्रा 2) द्वारा पेडल तंत्र की स्थिति को विनियमित। knobs के (ए और बी) का उपयोग करना, पैर पेडल समायोजित अपनी अब तक छोड़ दिया और न्यूनतम स्थिति पर पेडल तंत्र जगह है, क्रमशः। इस जानवर के पैर की सही स्थिति जबकि बाद में जोड़तोड़ के लिए कमरे में छोड़ सक्षम हो जाएगा। इस स्थिति में, उपकरण या तो की ओर या आगे प्रयोगकर्ता से दूर स्थानांतरित करने के लिए इतना है कि पशु पैर एक सीधे विमान में निहित ट्रैक की बाईं तरफ घुंडी का उपयोग करें।
  4. आयोडीन और शराब के तीन परिवर्तन के साथ पैर साफ करें। आयोडीन 30 सेकंड के लिए पैर पर रहना चाहिए।
  5. जानवर या मंच समायोजित करें(2A चित्रा, डी) इतना है कि विस्तारित पैर पैर की एकमात्र और पैर पैडल के बीच पूरी संपर्क सुनिश्चित करता है।
  6. चिकित्सा टेप का उपयोग करना, पैर प्लेट (चित्रा 2 डी) के खिलाफ जानवर के पैर सुरक्षित। यह महत्वपूर्ण है कि एड़ी पेडल और पूरे पैर के नीचे के खिलाफ फ्लश है फ्लैट है और परीक्षण के दौरान थाली से हटाना नहीं होंगे।
  7. पैर स्थिर करने के लिए clamping तंत्र का पता लगा। एलन रिंच मोड़ से दूर पैर के आंदोलन को कम करने और यह जगह में बंद करने के लिए पर्याप्त में स्थिर पिन पुश।
  8. इस स्थिति में, या तो की ओर या दूर प्रयोगकर्ता से तंत्र स्थानांतरित करने के लिए घुंडी सी का उपयोग इतना है कि टखने, टिबिया और फीमर एक सीधी रेखा (चित्रा -2) में झूठ बोलते हैं। सुनिश्चित करें कि पैर पैडल के साथ समानांतर है। पाठ्यक्रम और तंत्र की पीठ पर पाया ठीक knobs पर समायोजन करने, धीरे धीरे टखने स्थानांतरित करने के लिए इतनी पैर और टिबिया एक 90 ° स्थिति में हैं।
  9. continuई इसलिए फीमर पैर स्थानांतरित करने के लिए और टिबिया एक 90 डिग्री के कोण सीधा (चित्रा 2 बी) पर हैं। इस बिंदु पर, पशु इलेक्ट्रोड के लिए तैयार है।

4. इलेक्ट्रोड की नियुक्ति

  1. "त्वरित Stim" सक्रिय लेबल "त्वरित Stim" नारंगी रंग के बटन पर क्लिक करके।
  2. tibialis पूर्वकाल के समीपस्थ अंत पर अल्पज्ञता दोनों इलेक्ट्रोड की जगह और इलेक्ट्रोड सुझावों चारों ओर ले जाने तक spikes को लाइव मॉनिटर पर देखा जाता है। आदर्श रूप में, spikes 0.4 एन के आसपास होना चाहिए
    नोट: इलेक्ट्रोड आसन्न और peroneal तंत्रिका के विमान, बारी में, घुटने से और टिबिया के लिए सीधा laterally चलाता है जो करने के लिए ओर्थोगोनल रखा जाना चाहिए।
  3. एक सुई मुश्किल से पेशी परत में अब तक पियर्स डर्मिस करने के लिए पर्याप्त है, और डालें। जब तक spikes के आसपास 0.6 एन सम्मिलित सुइयों को लाइव मॉनिटर पर देखा जाता है चारों ओर अन्य इलेक्ट्रोड ले जाएँ और उन्हें एक शौक दबाना या चिकित्सा टेप का उपयोग जगह में दबाना।
  4. एdjust मोटे और ठीक समायोजन अधिक से अधिक बल उत्पादन खोजने के लिए।
  5. उच्च शक्ति का द्वि-चरण उत्तेजक पर, वहाँ केंद्र में दो knobs के लिए किया जाएगा। एक "सीमा" लेबल है और अन्य "समायोजित"। वांछित अधिकतम amperage के लिए "सीमा" घुंडी बारी।
    नोट: चोटियों धीरे धीरे परिमाण में वृद्धि होगी, और अधिकतम amperage किस स्तर पर लगातार तीन stimulations समान सिकुड़ा प्रतिक्रियाओं में परिणाम के रूप में चुना गया है। आवश्यकता से amperage उच्च मोड़ का विरोध, अधिकतम amperage अनुबंध करने के लिए पूरे मांसपेशियों को प्रोत्साहित करेंगे, लेकिन किसी भी उच्च वर्तमान पड़ोसी की मांसपेशियों की भर्ती का परिणाम देगा और संभावित रूप में अच्छी तरह से विरोधी।
  6. "सीमा" है कि मांसपेशियों को प्रोत्साहित करने के लिए इस्तेमाल किया जाएगा का प्रतिशत निर्धारित करने के लिए "समायोजित" घुंडी बारी। इस बिंदु पर, बल के आसपास 1.0 एन पढ़ना चाहिए यह वर्तमान में वृद्धि या कमी की आवश्यकता हो सकती है।
  7. इलेक्ट्रोड पुनः जाँच यकीन है कि वे सुरक्षित हैं बनाने के लिए। रुकेंत्वरित Stim।
  8. "लाइव डाटा" खिड़की पर, "शुरू अनुक्रम" क्लिक करें।
  9. वापस नियंत्रण स्क्रीन करने के लिए जा रहे हैं, और नारंगी "त्वरित Stim" बटन के ऊपर स्थित "विश्लेषण" बटन पर क्लिक करके घटता निगरानी जारी है। धनुस्तंभीय वक्र 60 हर्ट्ज उत्तेजना के आसपास आकार लेना शुरू करना चाहिए।

5. उत्तेजना और साफ फिनिशिंग

  1. बाद अनुक्रम समाप्त हो गया है, इलेक्ट्रोड को हटाने और 70% शराब के साथ साफ साफ। कवर में इलेक्ट्रोड रखें।
  2. घुटने दबाना विलंब और संज्ञाहरण बंद कर देते हैं। संज्ञाहरण गैस से पशु निकालें और हीटिंग पैड पर प्रवण स्थिति में जानवरों की जगह, अभी भी। कुछ ही मिनटों के बाद isoflurane गैस बंद कर दिया गया है चूहे ऑक्सीजन रखने के लिए के लिए 100% 2 हे पर चूहे बनाए रखें। पशु शुरू में स्थानांतरित कर सकते हैं, लेकिन पशु वापस लौटने नहीं है पिंजरे के लिए जब तक पशु चेतना आएगा। मांसपेशियों का दर्द देखा जाता है तोवसूली पर, NSAID की एक खुराक के रूप में अपने जानवरों की देखभाल समिति द्वारा निर्दिष्ट दी जानी चाहिए।
  3. 1.2 चरण में सूचीबद्ध उपकरणों के सभी बंद कर दें, सॉफ्टवेयर बंद है, और डेटा विश्लेषण जारी है।
  4. मंच और पैर पेडल नीचे साफ कर लें।

6. डेटा विश्लेषण

नोट: डेटा विश्लेषण एक दृश्य इस प्रयोगशाला द्वारा डिजाइन और प्रयोगशाला प्रोटोकॉल के अनुसार फिट करने के लिए किया जाता है। विश्लेषण मूल्यों, महत्व के डेटा अंक, और प्रक्रिया के अन्य पहलुओं को उपयोगकर्ता के इरादे के आधार पर बदल जाएगा।

  1. डेटा विश्लेषण सॉफ्टवेयर खोलें।
  2. एक समय में कई डेटा फ़ाइलों (नमूने) के विश्लेषण सक्षम करने के लिए उच्च Throughput मेनू पर क्लिक करें। का चयन करें "सेना आवृत्ति" विश्लेषण।
  3. "उठाओ फ़ाइलें" बटन पर क्लिक करें और वांछित के रूप में के रूप में कई सहेजे गए डेटा फ़ाइलों को खोलने के।
  4. "मैनुअल" कर्सर प्लेसमेंट विधि बॉक्स में चयन करें।
    नोट: इस उपयोगकर्ता Dat के सभी विश्लेषण करने की अनुमति देगाएक एक वांछित टाइमस्टैम्प के भीतर, के रूप में कार्यक्रम का विरोध करने के लिए स्वचालित रूप से विश्लेषण स्थान का चयन करें।
  5. 2. करने के लिए अंत कर्सर टाइमस्टैम्प मूल्य बदलें "विश्लेषण" बटन (चित्रा -1) पर क्लिक करें।
  6. तालिका बचाने के लिए और एक स्प्रेडशीट का उपयोग कर डेटा का विश्लेषण, बटन ACSII करने के लिए "तालिका सहेजें पर क्लिक करें। इस फ़ाइल की बचत होगी, और यह एक बाद में समय पर एक स्प्रेडशीट के साथ खोला जा सकता है।
  7. स्प्रेडशीट में सहेजे गए डेटा फ़ाइल खोलें।
  8. लेबल "निरपेक्ष अधिकतम" एक अतिरिक्त स्तंभ बनाएँ, और आधारभूत और प्रत्येक नमूना के लिए अधिकतम मूल्यों के बीच अंतर का निर्धारण। इस कुल अधिकतम शक्ति प्रत्येक आवृत्ति में उत्पादन प्रदान करेगा।
  9. टोक़ का निर्धारण करने के लिए, लीवर हाथ की लंबाई से प्रत्येक बल मूल्य बढ़ा।
    नोट: इस मामले में, यह है कि जानवर के पैर की लंबाई द्वारा प्रतिनिधित्व किया जाएगा। इस प्रोटोकॉल 30 मिमी की औसत प्रयोगात्मक निर्धारित मूल्य का उपयोग करता है। उपयोगकर्ता अब एमए के लिए मूल्यों को निर्धारित किया गया हैximum टोक़ प्रत्येक आवृत्ति पर उत्पादन किया।
  10. एक टोक़ आवृत्ति वक्र, या, अधिकतम टोक़ सभी उत्तेजना आवृत्तियों भर पशु द्वारा उत्पादित के रूप में इन मूल्यों ग्राफ।
    नोट: यह पहचान की है और नमूनों के बीच तुलना का एक बिंदु के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है।

Representative Results

धनुस्तंभीय वक्र उप इष्टतम परिणामों से इष्टतम परिणाम भेद करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। यह वक्र आमतौर पर 60 हर्ट्ज की एक आवृत्ति पर फार्म के लिए शुरू होता है। अच्छे परिणाम प्राप्त करने के लिए महत्वपूर्ण कारक मांसपेशियों को प्रोत्साहित करने के लिए इतना है कि वह अपने अधिक से अधिक बल पैदा करता है और टिटनेस के दौरान कहा कि बल का कहना है की क्षमता है। आदर्श वक्र एक निर्बाध, तेज, खड़ी उत्तेजना के समय में तेजी से बढ़, कम से कम दोलनों के साथ एक फ्लैट पठार चरण के द्वारा पीछा किया, और एक निर्बाध, तेज खड़ी कमी उत्तेजना की समाप्ति पर (चित्रा 4) की अवधि होनी चाहिए। आदर्श की अवस्था से विचलन संकेत मिले हैं कि मांसपेशियों थका हुआ है (चित्रा 5 डी) कर रहे हैं या कि मांसपेशियों को ठीक से अधिक से अधिक बल का उत्पादन करने के लिए प्रेरित किया जा रहा नहीं जाता है (चित्रा 5 ब - सी)। उत्तरार्द्ध आम तौर पर stimula दौरान मांसपेशी फाइबर की अधिक से अधिक भर्ती की विफलता के लिए अग्रणी गलत इलेक्ट्रोड नियुक्ति का परिणामtion। एक ख़ास विशेषता है कि शोधकर्ता की अनुमति देता है तो यह निर्धारित करने के लिए एक गैर आदर्श वक्र गलत इलेक्ट्रोड नियुक्ति या रोग परिवर्तन का नतीजा है करने के लिए पेशी धनुस्तंभीय वक्र पूरा (जुड़े हुए) या अधूरा (unfused) है या नहीं है। एक unfused, अधूरा धनुस्तंभीय वक्र इंगित करता है कि इलेक्ट्रोड गलत कर रहे हैं, मांसपेशियों में संकुचन एक अधिक से अधिक का अनुभव नहीं है, जिसके परिणामस्वरूप। के रूप में के रूप में नियंत्रण, या एक सिकुड़ा प्रतिक्रिया है कि अधिक तेजी से वर्दी की तुलना में अधिक से अधिक संकुचन में कमी आई मांसपेशियों में एक रोग परिवर्तन का एक उदाहरण देखा जा सकता है।

इस प्रक्रिया के पाठ्यक्रम पर प्राप्त की चोटियों के तीन अलग अलग प्रकार के विभिन्न इलेक्ट्रोड और पैर पदों का प्रतिनिधित्व करते हैं और चित्रा 3 में देखा जा सकता है। पहले चोटियों 0.4N के आसपास हो सकता है और होती है जब सही इलेक्ट्रोड नियुक्ति त्वचा (चित्रा पर अल्पज्ञता चुना गया है जाएगा 3 ए)। चोटियों के दूसरे सेट ज हैigher आयाम, आम तौर पर लगभग 0.5-0.6N (चित्रा 3 बी) और होती है जब इलेक्ट्रोड डर्मिस के माध्यम से बेध। बाद इन प्राप्त कर रहे हैं, पैर और पैर बल उत्पादन, जो हासिल की है अधिकतम करने के लिए समायोजित कर रहे हैं, जब लगभग 1N या अधिक से अधिक (चित्रा 3 सी) के लिए शिखर आयाम बढ़ जाती है। इस बिंदु पर, त्वरित Stim बंद किया जा सकता है और इस क्रम शुरू हो सकता है। ये दिशा-निर्देश सटीक और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य परिणामों को सुनिश्चित करने और प्रोटोकॉल भर कुंजी चौकियों कर रहे हैं।

अंतिम परिणाम की जानकारी है कि उपयोगकर्ता के बल परीक्षण और प्रयोगात्मक डिजाइन से निकाले के आधार पर अलग अलग तरीकों से किया जा सकता है। इस प्रोटोकॉल में, अधिकतम शक्ति उत्तेजना की आवृत्तियों के सभी भर में मापा जाता है, लेकिन अन्य डेटा बिंदुओं एक विशेष शोधकर्ता या आवेदन के लिए महत्वपूर्ण हो सकता है। एक उदाहरण उत्तेजना की आवृत्ति, जिस पर धनुस्तंभीय वक्र आकार लेना शुरू होता है। टीवह डेटा पिछले एक या बाद में प्रयोग से प्राप्त एक ही पशु पर, या अलग-अलग उपचार समूहों के बीच तुलना के लिए अन्य परिणामों की तुलना की जा सकती है। सेना के उत्पादन isometric बल की गणना और अधिक से अधिक मनाया संकुचन पर उम्र के प्रभाव का एक और अधिक निष्पक्ष मूल्यांकन प्रदान करने के लिए शरीर द्रव्यमान द्वारा सामान्यीकृत किया जा सकता है। हालांकि अलग-अलग शरीर के वजन और उम्र के जानवरों के विभिन्न अधिकतम बलों का उत्पादन होगा, धनुस्तंभीय वक्र के आकार सभी समूहों के बीच लगातार जब प्रक्रिया सही ढंग से किया जाता है होना चाहिए।

आकृति 1
चित्रा 1: लीवर प्रणाली नियंत्रण और विश्लेषण के लिए डेटा विश्लेषण सॉफ्टवेयर का अवलोकन (ए) नियंत्रण सॉफ्टवेयर का अवलोकन जब कार्यक्रम के उद्घाटन।। (बी) के लिए मानकों "त्वरित Stim।" (सी) बल आवृत्ति उत्तेजना के लिए उदाहरण अनुक्रम। (डी यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्र 2
चित्रा 2:। चूहा की पोजिशनिंग और प्लेसमेंट उपकरण में पैर की (ए) के लिए महत्वपूर्ण पहलुओं चूहे बाएं पैर को सुरक्षित footplate से जुड़ी एक लापरवाह स्थिति में है। दाहिने पैर, पैर, जांघ और द्वारा किए गए कोणों परिक्रमा कर रहे हैं। (बी) के टखने के द्वारा बनाई गई सही कोण पर प्रकाश डाला है। (सी) पैर चाहिए पैर से शरीर के लिए एक सीधी विमान में गठबंधन किया। (डी) इलेक्ट्रोड नियुक्ति समानांतर और peroneal तंत्रिका के विमान को orthogonal है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्र तीन
चित्रा 3: प्रतिनिधि चोटियों अधिक से अधिक बल उत्पादन करने के लिए सही इलेक्ट्रोड प्लेसमेंट का महत्व दिखाते (ए) आधारभूत चोटी धनुस्तंभीय भी अल्पज्ञता रखा इलेक्ट्रोड के साथ मनाया हिमायती हैं।। (बी) सही जगह में डाला इलेक्ट्रोड के साथ बड़े चोटियों। (सी) बड़े चोटियों पैर और पैर पदों के रूप में इष्टतम पूर्व अनुक्रम शिखर आयाम करने के लिए सही इलेक्ट्रोड नियुक्ति संकेत से संक्रमण बेहतर समायोजित कर रहे हैं।/ftp_upload/54487/54487fig3large.jpg "लक्ष्य =" _blank "> यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्रा 4
चित्रा 4:। 100 हर्ट्ज पर इष्टतम धनुस्तंभीय अवस्था इस वक्र बढ़ जाती है और तेजी से कम हो जाती है और एक फ्लैट पठार चरण है। यह उदाहरण सही इलेक्ट्रोड नियुक्ति और अधिक से अधिक बल उत्तेजना इंगित करता है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्रा 5
चित्रा 5:। उप इष्टतम धनुस्तंभीय 100 हर्ट्ज पर प्राप्त घटता के प्रतिनिधि उदाहरण (ए) छूट के बाद, इस वक्र आधारभूत नीचे डालता है। इस उत्तेजना का संकेत हैविरोधी के। (बी - डी) ये रेखांकन अनुचित इलेक्ट्रोड नियुक्ति और मांसपेशी फाइबर के असमान भर्ती का परिणाम है। पठार चरणों बड़े दोलनों (बी), एक ऊपर की ओर ढलान (सी), या एक नीचे ढलान (डी) प्रदर्शित करता है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

Discussion

इस प्रोटोकॉल चूहा hindlimb के पूर्वकाल और्वी डिब्बे पर विवो मांसपेशी समारोह परीक्षण में प्रदर्शन के लिए एक अपेक्षाकृत सरल विधि को दर्शाता है। मांसपेशी समारोह परीक्षण के अन्य रूपों, पूर्व vivo सहित और सीटू के प्रोटोकॉल में भी मांसपेशियों में शरीर विज्ञान के बारे में महत्वपूर्ण जानकारी प्रदान कर सकते हैं। हालांकि, इन विवो समारोह परीक्षण के महत्व को अपने noninvasive प्रकृति में निहित है, और तथ्य यह है कि यह सबसे सही मांसपेशियों उत्तेजना की अंतर्जात तंत्र स्मरण दिलाता है। दोनों पूर्व vivo के लिए और सीटू परीक्षण, पट्टा और / या मांसपेशियों में सामने आ रहे हैं, और इसलिए, नम रखा या 41,42 जलमग्न किया जाना चाहिए। विवो में परीक्षण आघात और सूजन के confounding चर है कि शल्य चिकित्सा के लिए आवश्यक प्रक्रियाओं की वजह से हो सकता है निकालता है सीटू मांसपेशी समारोह परीक्षण में के लिए; यह विशेष रूप से महत्वपूर्ण है अगर प्रयोग के लक्ष्य भड़काऊ और सेलुलर प्रक्रियाओं की जांच करने के लिए है इन विवो परीक्षण छोटी सी शल्य चिकित्सा कौशल के रूप में पेशी अपने परिवेश से अलग नहीं है और सटीक समुद्री मील की आवश्यकता मांसपेशियों / कण्डरा फिसलन कम करने के लिए नहीं है की आवश्यकता 41 (के लिए मामला है सीटू या पूर्व vivo परीक्षण में)। इसके अलावा, पर्याप्त अभ्यास के साथ, सही इलेक्ट्रोड नियुक्ति की गति और जल्दी से मांसपेशियों की अधिक से अधिक बल उत्पादन प्राप्त करने के लिए यह सुनिश्चित करना होगा कि प्रोटोकॉल पूरा होने के तेजी से है और दोनों जानवरों के भीतर और एक ही उपकरण के विभिन्न 39 उपयोगकर्ताओं को भर में reproducible- समायोजन करने की क्षमता । यह, के रूप में सचित्र टीए पेशी के लिए और अधिक प्रत्यक्ष जांच के लिए कम सुलभ synergistic मांसपेशियों (EDL और एच एल) के छांटना करने से पहले पूरे पूर्वकाल और्वी घटक के एक आकलन के साथ शुरू करने के लिए फायदेमंद है। इस दृष्टिकोण का प्रयोग, एक नहीं बल्कि जल्दी तकनीक की महारत हासिल कर सकते हैं। प्रक्रिया यहाँ बताया दर्शाता है और एक शक्ति मंगलवार की उपयोगिता पर प्रकाश डाला गया है, जबकिequency प्रोटोकॉल टिटनेस प्रेरित और अधिकतम शक्ति एक मांसपेशी द्वारा उत्पादित निर्धारित करने के लिए, उन कार्यात्मक परीक्षण के प्रकार (s) है कि सबसे अच्छा उनकी विशिष्ट प्रयोग (एस) और अनुसंधान लक्ष्यों को सूचित करेंगे निर्धारण करना चाहिए।

वहाँ कई महत्वपूर्ण कदम है कि ध्यान से उत्तेजना मानकों की एक किस्म के लिए पेशी से, क्रम में इष्टतम और प्रतिलिपि प्रस्तुत प्रयोगात्मक परिणामों को सुनिश्चित करने में किया जाना चाहिए वह यह है कि लगातार अधिक से अधिक बल उत्पादन कर रहे हैं। प्रमुख विशेषताओं में से कई चित्रा 2 में रेखांकित कर रहे हैं। हालांकि, उचित स्थान और उत्तेजक इलेक्ट्रोड की स्थिरता peroneal तंत्रिका की प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य अधिक से अधिक उत्तेजना के लिए एक पूर्ण शर्त है। इस संबंध में इलेक्ट्रोड अल्पज्ञता रखा जाना चाहिए। यही कारण है कि यदि इलेक्ट्रोड नियुक्ति भी गहरी है, एक प्रतिपक्षी मांसपेशियों के प्रत्यक्ष बिजली की उत्तेजना जोखिम है, इस प्रकार पूर्वकाल और्वी डिब्बे का मनाया सिकुड़ा प्रतिक्रिया की भयावहता कम हो रही है। इसके अलावा,दो इलेक्ट्रोड संभव के रूप में एक-दूसरे के करीब के रूप निकटता में रखा जाना चाहिए आसपास त्वचा और संयोजी ऊतक के बिजली के प्रतिरोध को कम करने के लिए। सामान्य तौर पर, इलेक्ट्रोड स्थिति पैर सीधे जहां यह gastrocnemius पूरा करने के लिए tibialis पूर्वकाल के किनारे ट्रेसिंग करने के लिए घुटने के करीब है और औसत दर्जे अक्सर पर्याप्त बल उत्पादन पैदावार। यह भी सुनिश्चित करता है कि इलेक्ट्रोड peroneal तंत्रिका, जो बारी में, टिबिया के लिए सीधा और पार्श्व घुटने से नीचे पैर चलाता है के विमान से सटे और orthogonal रखा जाता है। हालांकि, जानवरों के बीच शारीरिक रचना में प्राकृतिक परिवर्तनशीलता सुनिश्चित करने के लिए कि इलेक्ट्रोड नियुक्ति मामला-दर-मामला आधार पर अनुकूलित है निरंतर सतर्कता की आवश्यकता है। जैसे, वहाँ परीक्षण और इलेक्ट्रोड नियुक्ति जाता है कि काफी उपयोगकर्ता के अनुभव से कम के साथ जुड़े त्रुटि के एक निश्चित स्तर है। बार की संख्या इलेक्ट्रोड पियर्स त्वचा में सूजन और सूजन को कम करने के लिए कम से कम किया जाना चाहिए, जो मुझे कम हो जाती हैasured बल उत्पादन। यह जहां सुई शुरू में रखा जाता है पर निर्भर करता है, लेकिन यह kneecap के आसपास के क्षेत्र में सुई दो बार ले जाएँ या कम विशेष रूप से करने के लिए सिफारिश की है। अंत में, एक बार इलेक्ट्रोड जानवर के पैर में रखा जाता है, मामूली समायोजन के पैर की स्थिति और वर्तमान इलेक्ट्रोड के माध्यम से दिया करने के लिए किया जा सकता है। जबकि एक साथ बल एक भी चिकोटी से उत्पादित की निगरानी यह किया जाना चाहिए। इलेक्ट्रोड नियुक्ति के अलावा, समायोजन भी इलेक्ट्रोड भर दिया वोल्टेज के लिए बनाया जा सकता है। हालांकि, यहां वर्णित व्यवस्था में, यह महत्वपूर्ण है जब बल उत्पादन को बढ़ाने के लिए एक रास्ता के रूप में वोल्टेज बढ़ रही सावधानी का उपयोग करने के लिए है क्योंकि बढ़ा वोल्टेज नसों कि अंदर आना प्रतिपक्षी मांसपेशियों को प्रोत्साहित करेंगे।

वहाँ तीन प्रमुख तकनीकी चिंताओं है कि यह सुनिश्चित करने के लिए कि इलेक्ट्रोड नियुक्ति इष्टतम रहता निगरानी की जानी चाहिए रहे हैं। सबसे पहले, anesthetized जानवर के पैर सुरक्षित रूप से होना चाहिएपैर पेडल तंत्र, जो मांसपेशियों की ताकत के उत्पादन (चित्रा 2) के उपाय करने के लिए लंगर डाले। पैर सुरक्षित रूप से लंगर नहीं है, तो सच बल पेशी द्वारा उत्पादित अधूरे बल ट्रांसड्यूसर में अनुवाद किया जा सकता है। अस्थिर पैर निर्धारण भी सामान्य मांसपेशियों के संकुचन से परे गति के रूप में इलेक्ट्रोड का इष्टतम नियुक्ति को खोने का जोखिम का परिचय (यानी पैर footplate से दूर जा रहा है) उनके सतही स्थिति से इलेक्ट्रोड के विस्थापन के कारण या उन्हें पूरी तरह से हटाना कर सकते हैं। या तो परिदृश्य मापा बल में कमी होगी। दूसरा, जानवर के शरीर पूरी तरह से लापरवाह और एक सीधी विमान (चित्रा 2) में गठबंधन किया जाना चाहिए। जानवरों के शरीर की सही स्थिति श्वसन के कारण पैर की मामूली आंदोलनों को रोकता है, और यह भी पैर और कमर की घुमा को कम करता है, बेहतर प्लेसमेंट और उत्तेजक इलेक्ट्रोड के निरंतर संपर्क सक्षम करने से। तीसरा, सही स्थिति और घुटने के प्रस्तोता Criti हैकैलोरी सुनिश्चित करने के लिए कि पैर स्थिर बनी हुई है, और इस प्रकार, उत्तेजक इलेक्ट्रोड का इष्टतम नियुक्ति को स्थिर peroneal तंत्रिका की लगातार सक्रियण की अनुमति के लिए मदद करता है।

वहाँ कुछ अतिरिक्त अंक है कि जोर दिया जाना चाहिए रहे हैं। सबसे पहले, वाणिज्यिक पेशी लीवर प्रणाली बाएं पैर पर परीक्षण करने के लिए बनाया गया है, हालांकि सेटअप के रूप में अच्छी तरह से सही पैर पर परीक्षण प्रदर्शन करने के लिए संशोधित किया जा सकता है। दूसरा, मांसपेशियों लीवर प्रणाली, जानवर के आकार के आधार पर चुना जा सकता है, तो उपयोगकर्ताओं को यह सुनिश्चित करना चाहिए कि इस्तेमाल किया मंच मापने के लिए और बल पसंद के पशु मॉडल द्वारा उत्पादित समर्थन करने के लिए पर्याप्त है। उपकरण मंच के लिए परीक्षण योग्य मांसपेशियों कि उन लोगों के तल का विस्तार या पैर के dorsiflexion प्रेरित करने के लिए सीमित कर रहे हैं। तीसरा, यह फिर से जोर दिया जाना चाहिए कि इलेक्ट्रोड नियुक्ति चुनौतीपूर्ण हो सकता है और धैर्य की आवश्यकता है और तकनीक में महारत हासिल करने के लिए अभ्यास कर सकते हैं। इलेक्ट्रोड भी नियमित रूप से उपयोग के साथ जल्दी से सुस्त हो जाते हैं, तो यह कई अतिरिक्त एस के लिए उपयोगी हैएक बार यह अल्पज्ञता त्वचा चुभन मुश्किल हो जाता है के लिए टिकट। तीसरा, प्रोटोकॉल इस रिपोर्ट में वर्णित विशिष्ट उत्तेजना दृश्यों और डेटा विश्लेषण प्रक्रियाओं का इस्तेमाल करता है। पेशी लीवर प्रणाली नियंत्रण सॉफ्टवेयर और डेटा विश्लेषण सॉफ्टवेयर और डाटा प्रदान करता है यह कई अन्य प्रयोगात्मक सवाल और जवाब कर सकते हैं इसलिए, इसकी उपयोगिता क्या इस के साथ साथ उल्लिखित है परे फैली हुई है। जैसे, उन सॉफ्टवेयर प्रोटोकॉल (s) इस अखबार में प्रस्तुत की सीमाओं से परे पता लगाने के लिए प्रोत्साहित किया जाता है। इन छोटे सीमाओं के बावजूद, विवो मांसपेशी समारोह परीक्षण में एक शक्तिशाली तरीका है क्योंकि यह न्यूनतम इनवेसिव है और कई मौकों पर ही पशु पर, एक विस्तारित समय सीमा से अधिक है, किया जा सकता है स्वास्थ्य और सिकुड़ा कंकाल की मांसपेशी की क्षमता का निर्धारण करने के लिए है। संक्षेप में, फ़ायदेमंद उपयोगिता के इस प्रकार की प्रणाली विशेष रूप से चूहे hindlimb में कंकाल की मांसपेशी की चोट या बीमारी के लिए उपन्यास के उपचारों के प्रभाव का परीक्षण करने में माहिर बनाता है।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Isothesia Henry Schein Animal Health 05260-04-04
Isoflurane Vaporizer-Funnel Fill Vet Equip 911103
Inlet Adaptor for Vaporizer Vet Equip 911124
Outlet Adaptor for Vaporizer Vet Equip 911125
Tabletop Anaesthesia Machine Vet Equip 901801
Compressed oxygen gas Praxair N/A
VaporGuard Activated Charcoal Filter Vet Equip 931401
T/Pump Professional water heater Stryker N/A set on Continuous Therapy Time at 38/100 for temperature
Transpore Surgical Tape 3M 1527S-1 rip in half to make thinner strips
A5 Golden animal clippers Oster 078005-050-002
Povidone-Iodine Solution Aplicare 82-227K
Alcohol Swabs
200 proof Ethanol Decon labs diluted to 70% with deionized water
cotton tipped applicators Puritan 836-WC
Teflon coated electrodes-Monopolar needle electrode Chalgren Enterprises 111-725-24TP
servomotor Cambridge Technology Model 6650LR
Dual Mode Lever System Aurora Scientific Inc Model 305C-LR-FP contact manufacturer to order
Signal Interface Aurora Scientific Inc Model 604A
High-Power, Bi-Phase Stimulator Aurora Scientific Inc Model 701C
Data analysis software Aurora Scientific Inc DMAv5.110 software
Muscle lever system control software Aurora Scientific Inc DMCv5.400 software

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References

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जैव अभियांत्रिकी अंक 116, मांसपेशियों में बल उत्पादन peroneal तंत्रिका उत्तेजना tibialis पूर्वकाल पीछे की ओर मुडना ऊतक इंजीनियरिंग पुनर्योजी चिकित्सा कंकाल की मांसपेशी उत्थान बड़ा मांसपेशियों की हानि मांसपेशियों की बीमारी पैथोलॉजी
के आवेदन<em&gt; Vivo</em&gt; ऊतक मूल्यांकन के लिए चूहा tibialis पूर्वकाल के कार्यात्मक परीक्षण इंजीनियर कंकाल की मांसपेशी की मरम्मत
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Mintz, E. L., Passipieri, J. A.,More

Mintz, E. L., Passipieri, J. A., Lovell, D. Y., Christ, G. J. Applications of In Vivo Functional Testing of the Rat Tibialis Anterior for Evaluating Tissue Engineered Skeletal Muscle Repair. J. Vis. Exp. (116), e54487, doi:10.3791/54487 (2016).

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