Introduction
Theiler s Murina encefalomyelit virus (TMEV) är en neurotrop enkelsträngat RNA-virus som envist infekterar murina centrala nervsystemet (CNS). I mottagliga möss, infektion med TMEV orsakar en immunmedierad, kronisk progressiv demyeliniserande sjukdom, som kallas TMEV-inducerad demyeliniserande sjukdom (TMEV-IDD). Experimentell infektion av möss tar en sjukdomsförlopp som liknar den som ses hos progressiva former av multipel skleros (MS). TMEV-IDD kännetecknas av två skilda faser: den akuta fasen och den kroniska fasen. Den akuta fasen är en mild, vanligtvis subklinisk encefalit 1,2. Den andra, kronisk fas, med början ungefär en månad efter infektion, består av en långsamt framåt funktionshinder som kännetecknas av demyelinisering, inflammation, och axonal skada 1,2. Svagheten observerades hos möss är förknippad med spasticitet och ibland svåra tonic spasmer.
Eftersom det finns inga medications att förbättra den progredierande funktionsnedsättning hos patienter, forskare särskilt lockade av TMEV-IDD, vilket motsvarar en optimal djurmodell för att övervaka effekterna av sjukdomsmodifierande läkemedel på sjukdomsförloppet. Men i möss samt i MS-patienter, övervakning av handikapputveckling kräver en kontinuerlig klinisk observation under långa tidsperioder. Hos möss, kan långtidsövervakning för funktionsnedsättning åstadkommas med Rotarod prestandatest.
Rotarod bruksprov är en standard beteendetest som utvärderar motorrelaterade funktioner såsom koordination, balans och trötthet hos gnagare. Mössen måste hålla balansen på en roterande stång, som roterar under kontinuerlig acceleration; tiden latens att falla från denna stav registreras. Djur med neurologisk dysfunktion inte kan stanna på den roterande stången så länge kontroller, och de normalt släpper ut när varvtalet överskrider sinamotorkapacitet. Ju mer neurologisk försämring djuren har, desto snabbare de faller ut stav, och kortare tid latens är.
Fördelen med Rotarod test över de traditionella visuella poängsystem är att den genererar ett mål, mätbara variabel tids latens-vilket i slutändan kan användas för statistiska analyser för att kvantifiera effekterna av behandlingar och experimentella förfaranden 3.
I laboratoriet för neuroimmunologi (LONI) vid Dartmouth, möss utsattes för en anpassning protokoll, där de testas före TMEV infektion för att bekanta sig med maskinen och att bedöma deras normala "baseline" balans koordination och motorstyrning 4, 5. När baslinjen är etablerad och mössen infekterade med TMEV testas de en gång eller två gånger i veckan under en period av flera månader. Själva testprotokollet varar i genomsnitt 150 dagar, vilket möjliggör en bedömning avminskningen av balans, koordination, och motorstyrning under hela loppet av demyeliniserande sjukdom.
Flera hundra TMEV-IDD och skenbehandlade möss har testats hittills för neurologisk dysfunktion vid Dartmouth. Dessa möss hade fått olika immunmodulerande behandlingar, men ingen farmakologisk agent har visat sig vara effektiva i att lindra funktionsnedsättning 6,7. Denna artikel och relaterade protokoll beskriver hur man karakterisera progressiv neurologisk försämring visas av TMEV-IDD möss. Särskilt erbjuder protokollet rekommendationerna från särskilda provningsparametrar som tros vara allmänt lämpliga för att studera neurologiskt handikapp hos TMEV-IDD möss med användning av Rotarod testet. Detta förfarande ger en baslinje mot att bedöma (1) betydelsen av denna musmodell för progressiv MS och (2) dess användbarhet för att testa behandlingar som syftar till att behandla progressiva neurologiska sjukdomar som MS. Det är tydligt attRotarod bruksprov och den nuvarande optimerade testparametrar och protokoll är inte bara användbar på att upptäcka progressiv neurologisk funktionsnedsättning i TMEV-IDD musmodell, men är också användbara i att upptäcka försämringar i andra virusinducerade och / eller genetisk musmodeller av neurodegenerativa sjukdomar.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alla djur arbete utnyttjar protokoll granskade och godkända av Institutional Animal Care och användning kommittén (IACUC) vid Geisel School of Medicine vid Dartmouth.
1. musmodell
- Induktion av TMEV-inducerad demyeliniserande sjukdomar
- Flytta burar som innehåller 4 till 6 veckor gamla kvinnliga SJL / jhan möss från racket till en bekväm arbetsutrymme. Markera möss (t.ex. med ett öronmärke eller öra punch) för att möjliggöra individuell bedömning av kliniska och histologiska sjukdom.
- Rita 30 pl TMEV infekterande lager (2 x 10 6 plackbildande enheter, PFU) i PBS i en spruta 29 gauge insulin och nål.
- Förbered gas maskin anestesi: kontrollera systemet för att säkerställa närvaron av tillräckliga mängder av syre och isofluran under hela förfarandet.
- Slå på flödesmätaren till en L / min. Placera djuret in i induktionskammaren och försegla toppen. Slå på vaporizer till 3,5% och övervaka djuret tills liggande.
- Ta bort djuret från kammaren och testa musen genom att klämma trampdynan för att säkerställa tillräcklig anestesi. Brist på svar på en stark nypa indikerar adekvat anestesi.
- Rengör injektionsstället med 70% isopropylalkohol.
- Injicera 30 pl TMEV infecting lager in i den högra cerebrala hemisfären på fri hand injektion (Figur 1). Injektionsstället är ungefär halvvägs mellan öga och öra linje och precis utanför mittlinjen.
- Återgå musen för att innehavet bur en gång helt alert och mobil (vanligen 3-5 minuter).
- Avliva möss genom avblodning eller hjärt perfusion tre till sex månader efter TMEV infektion, beroende på den snabba utvecklingen av sjukdomen.
2. Rotarod Analys
- Den Rotarod Apparat
- Testmöss innan TMEV infektion att bekanta sig med denmaskin och bedöma deras normala baslinje balans koordination och motorstyrning.
- Starta anpassning protokollet om -5 dagar efter infektion (dpi, dvs 5 dagar innan TMEV infektion).
- Låt mössen att acklimatisera sig till testrummet under minst 30 min före Rotarod testning, för att ge dem möjlighet att anpassa sig till miljön.
- Se till att både Rotarod enheten och datorn är inkopplade och anslutna till varandra (Figur 2).
- Förinställda Rotarod med -5 dpi utbildning protokollparametrar, som beskrivs i tabell 1.
- Spara arbetsfilen med datum och identifieringsinformation den.
- Flytta buren innehåller truppen som ska testas från stativet till ett bord intill Rotarod. Möss är vanligtvis testas i squads av fyra.
- Plocka upp en mus i svansen och placera den på stången, vänd bort från operatören. Upprepa för den andra genom den fjärde musen. Om en mus falls eller hoppar, placera den tillbaka i sitt körfält på Rotarod tills alla möss är på plats. Ignorera om några möss vända för att möta operatören.
- Efter att ha laddat alla mössen, tryck på "Enter" -knappen för att starta experimentet. Beakta timers startar automatiskt och rotationer per minut (rpm) på displayen för varje bana.
- Som varje djur faller från stången, registrera hastigheten hos stången vid tidpunkten för hösten, såväl som varaktigheten av tid djuret kvar på stången. Staven kommer att fortsätta att rotera tills det sista djuret har fallit från stångenheten.
- Efter alla möss har fallit, använd en servett för att ta bort eventuella fekal Boli och urin från stången. Närvaro av urin och fekalt material kan påverka förmågan hos möss att gripa stången.
- Efter en 3-min vila, ger mössen en andra och sedan en tredje försök. Den maximala tiden per enda rättegång är 240 sek. Administrera totalt 3 prov under varje test dag.
- Återgå mössen till sina hem bur och returnera dem tillbaka till racket. Vid slutet av den experimentella sessionen, rengör Rotarod med tvål och vatten för att avlägsna allt fekalt material av maskinen.
- Torka rent bottenplattan med etanol 70%. Spraya ner hela maskinen med klordioxid för att desinficera.
- På dagarna - 4, - 3, - 2, och - en pi, förinställda Rotarod med lämplig utbildning protokollparametrar, som beskrivs i tabell 1, och upprepa steg 2.1.2 till 2.1.12.
- Efter att ha fått de grundläggande åtgärderna, infektera möss med TMEV. Låt en 6-dagars pi återhämtningsperiod.
| Protokoll | testar dag | Frekvens | Starthastighet (rpm) | maxHastighet (rpm) | Acceleration | prövningar | DET JAG |
| (rpm / s) | (N x sek) | (min) | |||||
| Utbildning | - 5 dpi | 1 dag | 1 | 12 | 03/01 | 3x240 sek | 3 |
| - 4 dpi | 1 dag | 1 | 13 | 03/01 | 3x240 sek | 3 | |
| - 3 dpi | 1 dag | 1 | 14 | 03/01 | 3x240 sek | 3 | |
| - 2; - 1 dpi | 1 dag | 5 | 40 | 03/01 | 3x240 sek | 3 | |
| Experimentell | Från 7-50 dpi | 2 / vecka | 5 | 40 | 30/05 | 3x240 sek | 3 |
| Från 51 till 150 dpi | 1 vecka | 5 | 40 | 30/05 | 3x240 sek | 3 |
Tabell 1: Rotarod parametrar i utbildning och experimentella protokoll.
- Rotarod Försöksprotokoll
- Den 7 dpi, förinställda Rotarod med lämpliga försöksprotokollparametrar, som beskrivs i tabell 1. Upprepa steg 2.1.2 till 2.1.10.
- Vid slutet av försöket # 3, väga varje mus och göra en del av kroppsvikten på databladet. Rengör och desinficera Rotarod enligt steg 2.1.11 och 2.1.12.
- Testa mössen två gånger i veckan för följande 6 veckor, såsom beskrivits ovan. Efter 6 veckor (där mössen har sannolikt nått en platå fas) 8,9, testa mössen en gång i veckan med samma Experimental-protokollet. Själva testprotokollet varar i genomsnitt 150 dagar, beroende på den specifika sjukdomsförloppet.
- Neurologisk Funktionell index
- Exportera rådata till ett kalkylblad och analysera resultaten.
- Express data som gångtid (Figur 3A): detta är den normala gångtid plus passiva rotationstiden minus rotationsfördröjningstiden (tabell 2) 10. Beräkna medelvärdet gångtid av de tre försök per dag.
- Uttrycka data som en neurologisk funktionell index (NFI; figur 3B).
- Beräkna baslinjen prestanda tröskel för varje enskild mus. Tröskel baslinjen prestanda bestäms som medelvärdet av alla drifttider från dag + 15 till + 45 pi 6,7.
- Beräkna NFI som medelvärdet av de tre senaste genomsnittliga körtider dividerat med baslinjen prestanda tröskeln den specifika mus 6,7 </ Sup>.
OBS: Om den testade körtider för en mus på dag + 72 + 76, och + 79 pi är 55 sek, 45 sek, och 50 sek, och baslinjen tid för samma mus var 135 sek, den NFI för det mus på 79 dpi blir [(45 + 50 + 55) / 3] / 135 eller 0,37.
- Uttrycka data som en justerad NFI (adjNFI Figur 3C): justera NFI data genom en populationsvärdet för den enda experiment.
- Beräkna adjNFI genom att dividera NFI värdet av den genomsnittliga NFI erhållits genom skenbehandlade gruppen på den specifika dagen.
| Termin | Definition |
| Normal gångtid | Den totala tiden musen bringar aktivt körs på den roterande stången, dvs latens att falla. |
| Passiv rotationstid | amount tid musen har kvar på stången i den passiva rotationsläge. |
| Rotation fördröjningstid | Den tid musen blir kvar på stången under den passiva rotationsläge |
| Passivt rotationsläge | När musen griper tag i stången och roterar utan att behöva pendla. |
| Total sessionstiden | Sammanlagda tid musen blir kvar på den roterande stången under sessionen. |
| baslinje prestanda | Pre-skada motorprestanda bedöms bestämma den minsta prestandatröskel. |
| Neurologisk funktion index (NFI) | Klinisk index, som jämför varje mus motorprestanda, dvs gångtid, när som helst på dess prestanda. |
| Justerat neurologisk funktion index (adjNFI) | När en normalisering används för att justera NFI data genom en populationsvärdet förden enda experiment. |
| populationsvärdet | Genomsnittlig NFI värde som erhålls genom den skenbehandlade gruppen vid en specifik dag. |
Tabell 2: Definitioner av Rotarod parametrar för att kvantifiera neurologisk försämring.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Syftet med detta representativt experiment var att jämföra den neurologiskt handikapp som induceras av den Daniels (DA) stam och Bean stam av TMEV. När det gäller den aktuella studien fick en grupp av 32 kvinnliga SJL möss infekterade intrakranialt med TMEV, antingen DA-stammen (n = 16) eller bönor stammen (n = 16), och deras kliniska tecken övervakades över tiden. En ytterligare grupp av 20 möss skenbehandlade (dvs saltlösning injicerades intrakraniellt) och tjänstgjorde som frisk kontrollgrupp.
Rotarod prestandatest användes för att utvärdera den kroniska sjukdomsprogression i TMEV-infekterade möss och skenkontroller. Möss individuellt öra märkt och utsattes för anpassningsprotokollet dagligen i veckan före injektion av TMEV och sedan till själva testprotokollet som varade 125 dagar. För varje testning dag, gångtid, definierad som längden på timig musen stannade på stången, förvarades individuellt för varje mus som medelvärdet av de 3 försöken för den dagen. Rotarod data är också uttryckt som NFI och som sken normaliserad adjNFI.
Såsom visas i fig 3A, påverkade infektion med TMEV negativt de gångtider hos mössen. En upprepad-åtgärder tvåvägs ANOVA visade en signifikant effekt av TMEV infektion (F = 56,76, p <0,0001) samt en signifikant effekt av tiden (F = 3,26, p <0,0001) och en tidsbehandlings interaktion (F = 8,065, p <0,0001). Följande Dunnetts multipla jämförelser tester visade att båda grupperna av TMEV-infekterade möss hade signifikant lägre NFI värden än de falska möss (p ≤ 0,01, figur 3B). Skillnaden var statistiskt signifikant med början på dag + 61 pi fram till slutet av uppföljningen (Figur 3B). Det fanns ingen skillnad comparing funktionsnedsättning hos möss som infekterats med bönan stammen och som smittats med DA-stammen vid alla tidpunkter (p> 0,5, figur 3C).
Figur 1:. Intrakraniell Injektion att utföra intrakraniella injektioner, är musen gas bedövas och fastspända på en fast yta. Upp till 30 | j, l är säkert injiceras i mushjärna. Injektionsstället är ungefär halvvägs mellan öga och öra linje och precis utanför mittlinjen. En 30 G nål tränger direkt kraniet och en insulinspruta används lämpligen för att förhindra nålen från att sträcka sig alltför djupt in i hjärnan. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 2:. Rotarod Apparatur Rotarod testet är en standard neurobehavioral analys, i vilken möss är utbildade för att köras på en roterande stav och är tt för hur länge de kan hålla på stången som det snabbar sakta upp. Stången är upphängd ovanför en bur golv, och möss naturligtvis försöka att stanna på stången för att undvika att falla till marken. Nedgången från staven till basen på instrumentet inte orsakar någon skada på mössen. A) En standard Rotarod Utrustningen består av en motordriven spö med konstanta eller accelererande hastighet. B) Paneler dela staven i skilda köer, varje lämpar sig för ett enskilt djur. Totalt antal 4 möss kan testas under varje försök. C) Stången är 1,18 i. (Ca 3 cm) i diameter, och dess yta är räfflad, vilket gör att möss för att få ett bättre grepp. Nedgången av musen exakt spåras av en fotostråle somregistrerar automatiskt den tid som spenderas på stången. Den experimentella data registreras i en dator efter mössen har alla fallit från staven. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 3:. Rotarod Performance Test i TMEV-infekterade möss och Sham-kontroller rotarod test genomfördes för att mäta motorns funktion av sken, DA-infekterade, and Bean-infekterade möss. Förutom gångtid (sek) (A), var Rotarod uppgifter också uttryckt som en neurologisk funktion index (NFI) (B), och en sham-normaliserad justerade NFI (adjNFI) (C). Latensen att falla från en accelererande Rotarod mättes i tre försök per dag. Data presenteras som medelvärde ± standardfel för medelvärdet (SEM). Blue cirkel, n = 16 böna-infekterade möss; röda fyrkanter, n = 16 DA-infekterade möss; svarta trianglar, n = 20 skenbehandlade kontroller. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Trots vissa begränsningar, representerar Rotarod bruksprov ett viktigt verktyg för att bedöma motorisk funktion och dysfunktion i TMEV-IDD liksom effekten av farmakologisk intervention på progress av handikapp hos möss.
Rotarod-test beskrevs första gången 1957 som ett verktyg för mätning av neurologiska brister hos gnagare 11. Gnagare måste gå på en roterande stång, med ökande rotationshastighet, och försöker undvika att falla till marken. Latensen att falla registreras och används som en kvantitativ slutpunkt för motorik: ju mer neurologisk försämring djuren har, desto snabbare de faller ut stav. Den klara fördelen med detta test under de traditionella visuella poängsystem är att det genererar en objektiv variabel som kan användas för statistiska ändamål att kvantifiera effekterna av behandlingar och experimentella förfaranden för handikapp progression 3. Visuella poängsystem som rätande Reflex-test kan vara att föredra som en enklare och snabbare test för att bedöma rörelseapparaten förmågor hos möss. Dessa system saknar precision en mer kvantitativt test som Rotarod prestandatest, och de bör därför inte användas för att övervaka naturhistoria eller fenotypiska förändringar av möss med mild och progressiv neurologisk försämring. Å andra sidan, är visuella tester som den rätande reflex testet särskilt anpassad till möss som är för ung eller för drabbade som ska testas på Rotarod.
För att undvika snedvridna bedömningar av Rotarod testet, testparametrar (dvs storlek, hastighet och acceleration av den roterande stången, mängd utbildning som ges till djuret, och sista databehandling) måste noggrant replik 3. Idag är Rotarod bruksprov fortfarande den vanligaste motor beteendetestet, men det finns lite enighet om den idealiska testparametrar för att producera optimala resultat. Vi har funnitstudier med TMEV-IDD möss som har använt stavdiameter 1,18-1,6 i. (3-4 cm) 12,13, fast Hastigheterna av 5-10 rpm 12,13, och acceleration av 5-10 varv / min 12-14. Det är dock inte känt om dessa slutsatser om neurologiska skillnader skulle generalisera till andra testförhållanden. Det nuvarande protokollet erbjuder rekommendationer av särskilda provningsparametrar som optimerade och är därför lämplig för att studera progressiv neurologisk funktionsnedsättning i musmodellen TMEV-IDD MS använda Rotarod testet. Speciellt innan man börjar på en Rotarod motoriken studie på möss, är det rekommenderat att ett antal potentiellt viktiga faktorer-bland annat baslinjen prestanda och passiva rotationsövervägas.
Först, om baslinjen prestanda: utövas och oinfekterade möss förbättra motorprestanda över tiden, så småningom nå en stabil platå under flera dagar eller veckor 8,9. Detta är the följd av den normala processen för motorisk inlärning. Emellertid är denna förbättring inte permanent, och om möss är kvar otränade i flera dagar, kommer deras motorprestanda på den roterande staven sjunka snabbt 9. Därför är en grundläggande prestanda bestämning viktigt att skilja mellan motorisk inlärning och faktiska återhämtning efter en terapeutisk intervention, liksom mellan en fysiologisk motorprestanda fall och försämring på grund av ett försöksförfarande.
Vår optimerade Rotarod protokollet räknar med att utbilda TMEV-IDD möss från + 15 till + 45 dpi (dvs, mellan akut encefalit, som sker inom + 3 till + 12 dpi, och sen kronisk demyeliniserande sjukdom, som utvecklas från + 30 till + 40 dpi) 15. Detta gör det möjligt för utvärdering av motorprestanda som en följd av progressiv demyelinisering och därmed utesluter alla bidrar underskott på grund av den tidiga encefalit. Helst ska Rotarod utbildning utföras föresjukdomsinduktion. Men i syfte att utveckla en kronisk infektion i CNS, SJL-möss måste injiceras med viruset innan de 7: e veckan av ålder 16. Eftersom det är allmänt accepterat att i åldrarna djur som Rotarod testet kan utföras på är 8 till 26 veckor 17, en effektiv träning kan inte slutföras i möss före TMEV infektion.
Utbildning och utgångs utvärdering av prestanda är också viktigt att utesluta effekten av låg motivation, låg basal prestanda och låg kompetens lärande. Varje djur är olika, och dessa skillnader måste beaktas i en motor resultatutvärdering. Detta är bäst åtgärdas med hjälp av en baslinje prestanda normaliserad index, även känd som en NFI. Detta index svarar också för resultatförändringar som kan observeras hos möss vid olika testsessioner. Prestanda variabilitet är ett vanligt problem i beteendetestning, främst på grund av faktorer utanför den experimentellaprotokoll, såsom låg motivation och tidigare erfarenheter av djuret. Den genomsnittliga kör gånger under de senaste tre tidpunkterna för varje mus ger en uppskattning av den centrala tendens distribution som förväntas om prestanda förblir stabil. Detta står för dag-till-dag individuella prestationer variabilitet. Allvarlig neurologiskt handikapp definieras då av NFI-värden av mindre än eller lika med 0,3, medan relativt opåverkade möss poängsätts med NFI-värden större än eller lika med 0,7. Tyvärr har denna strategi inte helt ta bort problemet som motiverande förändringar kan påverka motorns prestanda. För att ytterligare ta itu med detta problem, kan möss tränas med tillägg av specifika motiverande funktioner, såsom mild mat förlust före träning eller ökad rädsla för att falla på grund av justerbar fallande höjder 17,5-23,5 in. (44,5 till 60 cm).
För det andra, när det gäller passiva rotationer eller looping: kanske viktigaste hotet mot valifuktigheten av Rotarod data är förekomsten av passiva rotationer som uppstår när musen kan hänga på och rotera passivt som stången fyller 18 år. Även passiv rotation observeras på Rotarod, särskilt i möss har problem samordnings motor, kan detta coping beteende resultera i slutet faller ut stav, som felaktigt skulle indikera en brist på motoriken. Därför är en sekundär mått på störd motorisk koordination, som bör beaktas i dataanalysen, räkningen av antalet gånger musen vänder runt stången utan att falla av. Dessutom är passiv rotation påverkas starkt av uppgiftsparametrar såsom diametern, hastighet och acceleration grad av stången 18. Det inte finns några perfekta lösningar för att minska risken för passiv rotation, men en möjlig upplösning kan vara användningen av en stång med en större diameter (dvs 1,18-3,15 in. (3-8 cm)) eller mindre uttalade åsar, så att något minska grepp musen. </ P>
En begränsning av Rotarod effektivitetstesten är att bedömningen motorn är begränsad till en kort observationstid. Dessutom kan testning vid olika tidpunkter i ljus-mörkercykel ändra resultatet av beteendetestning 19. Således, för att övervinna dessa frågor, finns flera företag som utvecklar innovativa hem bur analyssystem som ger 24/7 övervakning av gnagare beteenden. Dessa övervakningssystem utgör säkerligen den nyaste och mest spännande teknik som finns i gnagare beteendeforskning, men är fortfarande mycket dyra och inte alltid tillgängliga för forskningslaboratorier.
Sammanfattningsvis är Rotarod bruksprov en relativt enkel, billig och väldefinierad test för långsiktig utvärdering av neurologiskt handikapp hos TMEV-IDD, en musmodell av progressiv MS. Fördelen med detta test under de traditionella kliniska symptom score system är att det genererar en objektiv variabel för att quantify effekterna av olika droger, villkor och förfaranden för motorisk funktion. Med tanke på robustheten Rotarod prestandatest, genom att tillämpa några enkla försiktighetsåtgärder, som beskrivits ovan, ger detta förfarande en baslinje mot att bedöma (1) betydelsen av TMEV-IDD musmodell för progressiv MS och (2) dess användbarhet för att testa behandlingar som syftar till att behandla progressiva neurologiska sjukdomar som MS.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Mice SJL/JCrHsd 4 to 6 weeks old | Envigo | #052 | |
| TMEV virus stock | |||
| Isoflurane vaporizer | Harvard Apparatus | #340471 | |
| Insulin Syringes U- 100 29 g x 0.5 cc | BD | #328203 | |
| Rotamex-5 4 Lane Rota-Rod for Mice with RS-232 and Software | Columbus Instruments | #0890M |
References
- Lipton, H. L. Theiler's virus infection in mice: an unusual biphasic disease process leading to demyelination. Infect Immun. 11, 1147-1155 (1975).
- Pachner, A. R. A Primer of Neuroimmunological Disease. , Springer. New York. (2012).
- Rustay, N. R., Wahlsten, D., Crabbe, J. C. Assessment of genetic susceptibility to ethanol intoxication in mice. Proc Natl Acad Sci U S A. 100, 2917-2922 (2003).
- McGavern, D. B., Zoecklein, L., Drescher, K. M., Rodriguez, M. Quantitative assessment of neurologic deficits in a chronic progressive murine model of CNS demyelination. Exp Neurol. 158, 171-181 (1999).
- Zoecklein, L. J., et al. Direct comparison of demyelinating disease induced by the Daniel's strain and BeAn strain of Theiler's murine encephalomyelitis virus. Brain Pathol. 13, 291-308 (2003).
- Gilli, F., Li, L., Campbell, S. J., Anthony, D. C., Pachner, A. R. The effect of B-cell depletion in the Theiler's model of multiple sclerosis. J Neurol Sci. 359, 40-47 (2015).
- Li, L., et al. The effect of FTY720 in the Theiler's virus model of multiple sclerosis. J Neurol Sci. 308, 41-48 (2011).
- Homanics, G. E., Quinlan, J. J., Firestone, L. L. Pharmacologic and behavioral responses of inbred C57BL/6J and strain 129/SvJ mouse lines. Pharmacol Biochem Be. 63, 21-26 (1999).
- Balkaya, M., Krober, J. M., Rex, A., Endres, M. Assessing post-stroke behavior in mouse models of focal ischemia. J Cerebr Blood F Met. 33, 330-338 (2013).
- Columbus Instruments Rotamex-5 Manual. , 1-33 (2005).
- Dunham, N. W., Miya, T. S. A note on a simple apparatus for detecting neurological deficit in rats and mice. J Am Pharm Ass. 46, 208-209 (1957).
- Ulrich, R., Kalkuhl, A., Deschl, U., Baumgartner, W. Machine learning approach identifies new pathways associated with demyelination in a viral model of multiple sclerosis. J Cell Mol Med. 14, 434-448 (2010).
- Lynch, J. L., Gallus, N. J., Ericson, M. E., Beitz, A. J. Analysis of nociception, sex and peripheral nerve innervation in the TMEV animal model of multiple sclerosis. Pain. 136, 293-304 (2008).
- Pirko, I., Johnson, A. J., Lohrey, A. K., Chen, Y., Ying, J. Deep gray matter T2 hypointensity correlates with disability in a murine model of MS. J Neurol Sci. 282, 34-38 (2009).
- Oleszak, E. L., Chang, J. R., Friedman, H., Katsetos, C. D., Platsoucas, C. D. Theiler's virus infection: a model for multiple sclerosis. Clin Microbiol Rev. 17, 174-207 (2004).
- McCarthy, D. P., Richards, M. H., Miller, S. D. Mouse models of multiple sclerosis: experimental autoimmune encephalomyelitis and Theiler's virus-induced demyelinating disease. Methods Mol Biol. 900, Clifton, N.J. 381-401 (2012).
- International Mouse Phenotyping Resource of Standardised Screens. , Available from: Rotarod. https://www.mousephenotype.org/impress/protocol/158/12 (2016).
- Bohlen, M., Cameron, A., Metten, P., Crabbe, J. C., Wahlsten, D. Calibration of rotational acceleration for the rotarod test of rodent motor coordination. J Neurosci Methods. 178, 10-14 (2009).
- Hopkins, M. E., Bucci, D. J. Interpreting the effects of exercise on fear conditioning: the influence of time of day. Behav Neurosci. 124, 868-872 (2010).
