Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove

Medicine

حقن إنترارينال من doi: 10.3791/54649 Published: July 18, 2017

Introduction

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

وقد استخدمت نماذج القوارض لدراسة العديد من المظاهر المرض البشري، بما في ذلك التهاب الحويضة والكلية والتهابات المسالك البولية (وتي). عدوى المسالك البولية هي مشكلة صحية عالمية، ويمكن أن تؤثر على الأطفال والرجال والنساء من جميع الأعمار. 1 ، 2 ، 3 المظاهر الأولية من التهاب المسالك البولية تشمل التهاب المثانة، وإذا تصعد العدوى على طول الحالب، قد تلحق التهاب الكلى (التهاب الحويضة والكلية). وفي الوقت نفسه، فإن انتشار مرض السكري يقترب من 400 مليون شخص في جميع أنحاء العالم. 4 ، 5 الأهم من ذلك، قد يكون معدل التهاب المسالك البولية أعلى إلى 4 مرات في المرضى الذين يعانون من السمنة المفرطة أو لديهم نوع 2 من مرض السكري، مما أدى إلى زيادة خطر الإصابة المتكررة التهاب المسالك البولية (روتي)، الإنتان، والتليف الكلوي من التهاب الحويضة والكلية، وخلل المثانة. 6 ، 7 ، 8 القوارضنماذج مهمة في دراسة التهاب المسالك البولية، لأن العلاجات بالمضادات الحيوية الحالية تنتج استجابة مستدامة، وقائية فقط في مجموعة فرعية من مرضى التهاب المسالك البولية. لتحسين الرعاية المسالك البولية السريرية، والخطوات الرئيسية هي لفهم آلية روتي وعملياتها الفيزيولوجية المرضية من العدوى الحادة إلى التهاب في التليف، فضلا عن تأثير داء السكري من النوع 2.

والهدف من تحسين النماذج الحيوانية هو تطوير التقنيات التي تسمح بتقييم أكثر دقة لتطور المرض والتدخلات العلاجية. وقد استخدمت عدة نهج مختلفة للحث على التهاب الحويضة والكلية في الفئران و / أو الفئران لدراسة الفيزيولوجيا المرضية من تلف الكلى، وأثر العلاج بالمضادات الحيوية، وغيرها من جوانب المسار الطبيعي للعدوى البولية. وهناك نهج مشترك لإنشاء وتي الوراء هو قسطرة عبر الإحليل. 10 ، 11 ، 12 ، 13 </ سوب> هذا الأسلوب يدخل البكتيريا عبر مجرى البول في المثانة البولية من الحيوانات تخدير. في حين أن هذه التقنية تحاكي عن كثب التهاب الحويضة والكلية البشرية، فإن الإصابة الفعلية وحجم العدوى التهاب الحويضة والكلية يمكن أن تكون متغيرة للغاية بسبب عوامل متعددة بما في ذلك عدم وجود ارتجاع الحالب العفوي أو البولية يفرغ أثناء أو بعد التلقيح مباشرة. 11 ونتيجة لذلك، فإن التباين التجريبي في إحداث العدوى التهاب الحويضة والكلية تصاعدي يمكن أن تحد من فائدة هذا النموذج لدراسة التهابات الكلى فضلا عن الاستراتيجيات العلاجية.

ويصف هذا التقرير نموذج الفئران التهاب الحويضة والكلية الجراحي حيث يتم حقن E. القولونية مباشرة في الكلى الفئران. على الرغم من هذا النموذج الفئران يجري الغازية، وكمية E. القولونية تسليمها إلى الكلى يمكن السيطرة عليها بشكل فعال مما يتيح التهاب الكلى قوية والالتهابات. 14 وفي هذا اإلجراء، نصف أيضاكيف يمكن رصد هذه الالتهابات الكلوية التي يسببها طوليا مع في الجسم الحي التصوير بالرنين المغناطيسي (مري).

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

أجريت جميع الدراسات الحيوانية وفقا لبروتوكولات اللجنة المؤسسية رعاية الحيوان واستخدام (إاكوك) في جامعة كيس ويسترن ريزيرف. مدة العملية الجراحية الموصوفة أدناه حوالي 45-60 دقيقة. إجراء التصوير بالرنين المغناطيسي نفسه حوالي 15 دقيقة لكل نقطة زمنية.

1. التخدير

  1. تخدير الفئران في غرفة إيسوفلوران تعيين في 2٪ إيسوفلوران مختلطة مع الأكسجين لتسهيل التعامل مع الحيوانات وضبط النفس قبل إعطاء التخدير عن طريق الحقن داخل البريتونيا.
  2. بعد 3-5 دقائق من التعرض ل إيسوفلوران، تحقق من أن الحيوان هو تخدير ويعرض أي رد على قرصة أخمص قدميه.
  3. مزيد من الفئران رزين مع حقن داخل البريتوني من مزيج من زيلازين والكيتامين: 75 ملغ / كغ من الكيتامين / 10 ملغ / كغ زيلازين. عند إجراء الحقن داخل البريتوني، ورسم الإبرة للتأكد من أن أجزاء من الأمعاء أو الأعضاء الحيوية الأخرى لم ثقب.
  4. أنانجكت 2 ملغ / كغ من بوبيفاكين تحت الجلد في موقع شق لتوفير تخفيف الألم الموضعية.

2. إعداد منطقة الجراحية

  1. تعقيم الأدوات الجراحية واللوازم قبل أن يتم استخدامها لعملية جراحية ووضع على لوحة الجراحية للعقم. يمكن تعقيم معظم الأدوات واللوازم وإعادة استخدامها.
  2. استخدام قفازات معقمة لجميع العمليات الجراحية.
  3. استخدام الحلاقة الكهربائية لحلق الفراء قبالة الجانب الأيمن للحيوان. يحلق الحيوان من الجزء السفلي من القفص الصدري إلى الجزء العلوي من الساق الخلفية توفير منطقة خالية من الشعر كبيرة للشق.
  4. وضع الحيوان على لوحة جراحية معقمة لعزل المنطقة المطهرة من المناطق المحيطة بها.
  5. فرك الجلد مع مطهر مثل اليود بوفيدون أو بيتادين. بدء الغسل في مركز الموقع الجراحي والانتقال إلى الخارج بطريقة دائرية. كرر ثلاث مرات على الأقل مع مسح جديد من اليود بوفيدون أو بيتادين. فرك الموقع الجراحي مع مسحات الكحول 70٪ حتى الجلد هو واضح، واليود قد تكون سامة إذا امتص.

3. الإجراء الجراحي

  1. الحفاظ على هذا الإجراء تحت ظروف معقمة.
  2. وضع الحيوان تخدير على سرير التدفئة الدافئة في موقف الأيسر الوحشي الأيسر مع الجناح الأيمن تواجه صعودا.
    ملاحظة: يجب توخي الحذر للحفاظ على درجة حرارة الجسم الأساسية للحيوان في 35-37 درجة مئوية لمنع انخفاض حرارة الجسم. وينبغي أيضا تعقيم هذا السرير الاحترار حسب الحاجة للحفاظ على ظروف العقيم.
  3. يشعر القفص الصدري، وجعل صغير 2-3 سم الحق الظهرية خلف الصفاق شق باستخدام حجم العقيمة 10 شفرة مشرط بدءا من الجزء السفلي من القفص الصدري.
  4. وضع الشاش العقيمة طوليا على طول جانبي شق.
  5. تشريح بعيدا الأنسجة تحت الجلد، والدهون، والعضلات من أجل تصور والوصول إلى تجويف البطن. استخدام مقص منحني مايو مقصوص للسماح اختراق أعمقحصص في الجرح وقطع الأنسجة السميكة.
  6. مرة واحدة في الكبد واضحة للعيان ويمكن الوصول إليها، واستخدام ملقط حادة لسحب الكبد صعودا.
  7. باستخدام زوج آخر من ملقط حادة في ناحية أخرى، وفضح الكلى الحق لذلك يجلس خارج تجويف البطن مباشرة.
  8. استخدام إصبع المؤشر والإبهام من اليد اليسرى لعقد الكلى في الموقف. مع اليد اليمنى، ببطء وبشكل مطرد حقن 0.1 مل UTI89 E. القولونية الحل (تركيز بين 1 × 10 8 -1 × 10 9 ) من حقنة معقمة في الحوض الكلوي (الذي يظهر كما فقاعة بيضاء) 15 .
    ملاحظة: إعداد عيار البكتيرية كما هو موضح في المرجع 15 .
  9. وضع شريط من مرقئ قابل للامتصاص على إبرة لمنع تدفق اللقاح في الصفاق. سحب ببطء الإبرة من الحوض الكلوي.
    ملاحظة: ينبغي الحرص على عدم بيرس أو إصابة الأنسجة المحيطة مما أدى إلى إنفكتي خارج الهدفو / أو المضاعفات.
  10. استخدام حقنة أكبر لشطف شامل الكلى مع المياه المالحة العادية قبل وضعها مرة أخرى في تجويف البطن.

4. الغرز

ملاحظة: خياطة التي سيتم دفنها في الأنسجة يجب أن يكون 4-0 غير قابلة للامتصاص خيوط مضفر. يمكن استخدام خيوط امتصاصية أو أحادية الشعاع لأسطح الجسم.

  1. وضع الغرز بالتساوي وعلى مقربة من حافة الأنسجة ممكن لمنع انسداد تدفق الدم. وعادة ما لا يزيد عن 0.3 سم من الحافة أمر ضروري.
  2. فهم الجلد و إفرت قليلا باستخدام زوج من ملقط مسنن غرامة، وتدوير حامل الإبرة في موقف بروناتد في التحضير لثقب الجلد.
  3. دفع الإبرة من خلال سمك كامل من الجلد عن طريق سوبينغ المعصم لتدوير الإبرة وتمريره من خلال الجلد.
  4. كرر هذه العملية لحافة الجلد الأقرب إلى الفرد تنفيذ الإجراء.
  5. شدالغرز بما فيه الكفاية لمعارضة حواف الأنسجة. أي تشديد سوف تعوق إمدادات الدم، بطيئة التئام الجروح وقد يؤدي إلى التفكك.
  6. التعادل قبالة خياطة باستخدام عقدة مربع، كما لو كانت غرزة توقف بسيطة، إلا أنه يتم قطع فقط حبلا قصيرة، وترك حوالي ذيل 3-4 ملم.
  7. بعد ربط غرزة الأولى قبالة، وإعداد لوضع غرزة الثانية حوالي 3 ملم بعيدا عن الأول، ومواصلة خياطة تشغيل.
  8. مرة واحدة يتم التوصل إلى نهاية شق، لا سحب غرزة الماضي تماما من خلال. بدلا من ذلك، استخدام حلقة التي تعقد مع حامل الإبرة هنا كما حبلا قصيرة من أجل التعادل من نهاية البعيدة من إغلاق خياطة.
  9. باستخدام العلاقات أداة، التعادل قبالة خياطة باستخدام عقدة مربع. وهذا يؤدي إلى 3 فروع تلتصق من عقدة الانتهاء في نهاية البعيدة.

5. الحيوان الانتعاش

  1. حقن 2.1 ملغ / كغ يوهيمبين داخل البريتونيا بعد الجراحة لعكس التخدير. اومن المتوقع نيمالس للتعافي تماما من الإجراء الجراحي بعد 3-5 ساعة.
  2. الحفاظ على الحيوان على وسادة التدفئة (لتجنب انخفاض حرارة الجسم) والفراش لينة ماصة بعد الجراحة.
  3. توفير الإماهة مع السوائل عن طريق الفم أو الوريدية حتى يمكن العودة إلى التغذية الطبيعية (في غضون 24 ساعة). حقن حوالي 0.6 مل من محلول ملحي عادي البريتوني مباشرة بعد الجراحة للحد من آثار الجفاف.
  4. توفير تسكين كما هو موضح في إاكوك وافق رعاية الحيوان واستخدام بروتوكول. حقن 5 ملغ / كغ كاربروفين تحت الجلد لإدارة الألم.
  5. مراقبة الشقوق بانتظام للتورم، الافرازات، ألم، أو التفكك.

6. التحقق من صحة عن طريق التصوير بالرنين المغناطيسي

  1. إجراء أنا فيفو تجارب التصوير بالرنين المغناطيسي على حقل كبير الماسحات الضوئية التصوير بالرنين المغناطيسي الحيوانات الصغيرة.
  2. إزالة التخدير مع 3٪ الأيزوفلورين في الأكسجين ووضع الحيوان مع الكلى الحق في إزوسنتر في الماسح الضوئي والتصوير بالرنين المغناطيسيأكلت الترددات الراديوية لفائف. توفير الحيوانات مع 1-2٪ إيسوفلوران التخدير بشكل مستمر في جميع أنحاء إجراء التصوير عن طريق نوسكون.
    ملاحظة: بالنسبة للصور التصوير بالرنين المغناطيسي في الجسم الحي هو مبين في الشكل 1 ، تم استخدام لفائف حجم الفئران الحجم (القطر الداخلي = 72 ملم).
  3. استخدام نظام مراقبة الحيوان ومراقبة للحفاظ على معدل التنفس كل حيوان (40-60 الأنفاس / دقيقة) ودرجة حرارة الجسم الأساسية (35 ± 1 درجة مئوية).
  4. استخدام متعددة شريحة، متعددة صدى تدور صدى الحصول على التصوير بالرنين المغناطيسي للحصول على دقة عالية، محوري T2 المرجحة الصور من كل من المصابة والسيطرة على الكلى. معلمات اكتساب التصوير بالرنين المغناطيسي النموذجية هي زمن التكرار = 5000 ميللي ثانية، وقت صدى = 40 ميللي ثانية، سمك شريحة = 2.0 ملم، في المكان القرار المكاني = 200 ميكرون، 3 متوسطات إشارة، ووقت اكتساب من 8 دقائق.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

تقنيات التصوير الطبي توفر الفرصة لتقييم غير جراحية التهاب المسالك البولية والفعالية العلاجية. لذلك، تم استخدام التصوير بالرنين المغناطيسي للتحقق من صحة تحريض العدوى الحادة بعد حقن 1-2 × 10 7 UTI89 E. القولونية ، وتصور التغيرات في الكلى قبل وبعد الجراحة. ويبين الشكل 1 أ-ب منطقة متزايدة تدريجيا من التهاب الكلى (الأسهم الصفراء). الصور التصوير بالرنين المغناطيسي التي تم الحصول عليها لكل حيوان في أيام 1 و 4 بعد العدوى مساعدة تميز نمو التهاب الحويضة والكلية الحاد.

شكل 1
الشكل 1: محوري T1 مرجحة التصوير بالرنين المغناطيسي صور من E. القولونية - الناجم عن القوارض نموذج التهاب الحويضة والكلية في ( أ ) يوم 1 و ( ب ) يوم 4 بعد العدوى (الأسهم الصفراء).

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

يمكن أن تنتج التهاب الحويضة والكلية الحاد في القوارض (أي الفئران والجرذان) عن طريق القسطرة عبر الإحليل. 16 ، 17 ، 18 هذا الأسلوب العدوى عبر الإحليل هو مفيد في أنه غير الغازية ويحاكي الفيزيولوجيا المرضية البشرية من العدوى الصاعدة. 17 ، 18 ، 19 ، 20 ومع ذلك، يمكن أن يعاني هذا الأسلوب أيضا من معدلات العدوى غير النظامية ومتغيرة E. القولونية الجرعات إلى الكلى بسبب القيود الفسيولوجية مثل التبديد والاختلاف التشريحي. (11) فييرر إت آل. (1971) 6 من 40 (15٪) الكلى الفئران تظهر أدلة على التهاب الحويضة والكلية بعد ضخ E. القولونية في المثانة. 15 وعلاوة على ذلك، مطلوب ضخ المتكررة من E. القولونية عدة مرات في الأسبوع للاعتمادتنتج ببطء التهاب الحويضة والكلية. 15 ، 19

في هذا التقرير، نحن تصف نموذج القوارض البديل التهاب الحويضة والكلية الذي يدخل جراحيا E.coli مباشرة في الحوض الكلوي. الفوائد الأساسية للنموذج الجراحي لتقنية التهاب الحويضة والكلية تشمل إعطاء جرعة ثابتة من تركيز القولونية E. بين 1 × 10 8 - 1 × 10 9 وكذلك حقن البكتيريا في نفس الموقع التشريحي (الحق الحوض الكلوي) لكل حيوان. 15 هذا الحقن المباشر يتجنب متطلبات ارتجاع توفير عدوى أكثر موثوقية، فضلا عن تحديد أكثر دقة من الجرعة المحقونة. عموما، هذا نموذج التهاب الحويضة والكلية الجراحي يوفر خيار بديل للدراسات التي تتطلب عدوى متسقة، قابلة للتكرار مع الحد الأدنى من تأثير مجرى البول الجزر.

تحسين نجاح هذه التقنية الجراحية ما يلي:1) تحقيق التخدير العميق للحد من الحركة التنفسية والسماح وقت العمل كافية. 2) حلق منطقة الجراحة شق لمنع التلوث من المناطق غير المحضرة. 3) التعقيم لمنع إدخال التلوث؛ 4) حقن دقيق من جرعة معروفة من E. القولونية في الحوض الكلوي الفئران. 5) شطف المالحة شامل الكلى بعد الحقن. 6) تقريب وثيق من حواف الجرح عبر خيوط. و 7) رصد المضاعفات داخل الجراحة وبعد العملية مثل انخفاض حرارة الجسم والآثار الجانبية النظامية. على الرغم من أن وسادة التدفئة كان يستخدم لتعزيز راحة الحيوان، وهذا البروتوكول قد يكون أبعد من ذلك باستخدام مستشعر درجة الحرارة المستقيم للحفاظ على درجة حرارة الجسم الأساسية. خطوة أساسية في تحقيق نجاح عملية بقاء هو التخدير المناسب ورصد التنفس الحيوان. الفشل في القيام بذلك يؤدي إلى فترات جراحية طويلة لتحقيق الاستقرار في مستوى التخدير الحيوان والحد من إصابة غير مرغوب فيها بسبب الإفراطاقتراح. العقم المختلط لمنطقة العمل و / أو العدوى غير المقصودة للبريتوني مع بكتريا E. القولونية هي أيضا مضاعفات شائعة مرتبطة بالنموذج الجراحي. ولذلك، فإن التحضير الكافي للأدوات الجراحية الأوتوكلاف، لتعقيم مساحة العمل بأكملها، والجهود الإجرائية للحد من العدوى E. القولونية إضافية كل تساعد في التقليل من وفيات الحيوانات، فضلا عن نتائج العدوى الخاطئة.

على الرغم من فوائد الحقن المباشر للإشريكية القولونية في الكلى، وهذا النموذج الجراحي لالتهاب الحويضة والكلية أيضا قيود متعددة بالمقارنة مع طريقة تسليم ترانسوريثرال. العيب الأكبر لاستخدام نهج الحقن الجراحي المباشر هو الغزو الأصيل لهذه التقنية. ومع ذلك، فإن الوفيات منخفضة إلى حد كبير مع تنفيذ تقنية معقمة المناسبة واستخدام إدارة الألم الكافية، والتحكم في درجة الحرارة عن طريق منصات التدفئة، والمفروشات لينة، ماصة بعد الجراحة إلىضمان الانتعاش السريع. بالإضافة إلى ذلك، أدوات التعقيم الجراحي للتعقيم هي طريقة موثوق بها للغاية وفعالة من حيث التكلفة للتعقيم. وعادة ما يكون التزام الوقت الجراحي الكلي أقل من ساعة واحدة. وعلاوة على ذلك، فإن إدارة التخدير، فضلا عن تسليم المحلية والنظامية للأدوية الألم معايرة لوزن الجسم يضمن تسليم جرعة دقيقة والسلامة الموضوع. وثمة قيد آخر محتمل في النموذج الجراحي هو أن التقنيات الجراحية هي أكثر صعوبة في الفئران بسبب الأحجام التشريحية الأصغر. على النقيض من طريقة ترانسوريثرال التي يمكن تنفيذها في كل من الفئران والفئران، فإن شرط استخدام نماذج الفئران للنموذج الجراحي يزيد من التكلفة الإجمالية للدراسة ويمكن أن تضع قيودا على دراسة مختلف التعديلات الوراثية التي قد تكون متاحة بسهولة أكبر وفعالة من حيث التكلفة في نماذج الماوس. كما ذكر أعلاه، تقييد آخر كبير من الأسلوب الجراحي هو أنه لا يمثل التهاب الحويضة والكلية البشرية كماعن كثب طريقة ترانسوريثرال.

هنا، استخدمنا تقنيات التصوير بالرنين المغناطيسي لتتبع العدوى الكلوية. كما هو مبين في الشكل 1 ، التصوير بالرنين المغناطيسي المسح يوفر القدرة على مراقبة غير الغازية الالتهابات الكلوية مع مرور الوقت. وهناك نهج بديل لتتبع E. التهابات القولونية من خلال وضع العلامات الفلورسنت من البكتيريا. 11 ، 18 ومع ذلك، والتصوير الفلورسنت هو أقل فعالية في هذا النموذج الفئران (على عكس نماذج الماوس) بسبب امتصاص الضوء من الأنسجة مما أدى إلى انخفاض كبير في حساسية الكشف. ولذلك، يوفر التصوير بالرنين المغنطيسي وسيلة أكثر حساسية لتتبع العدوى القولونية في مراحلها الأولى وتوفير المعلومات الإقليمية عن مدى العدوى في ثلاثة أبعاد.

آليات التهاب المسالك البولية / التهاب الحويضة والكلية الحاد الفيزيولوجيا المرضية، والتقدم إلى التليف الكلوي غير مفهومة جيدا. وكلاء العدوى، وتحتالكذب استجابة المضيف المناعي، وردود الفعل الالتهابية تلعب دورا لا يتجزأ، ولكن أهمية كل غير معروف. التحسن في تسليم المستهدفة للبكتيريا إلى الكلى باستخدام هذا الإجراء الحقن المباشر لديه القدرة على زيادة استنساخ التهاب الحويضة والكلية الحاد في نماذج القوارض، وربما لتقييم أكثر دقة التدخلات العلاجية في مرحلة مبكرة لعلاج التهاب المسالك البولية. وقد وضعت هذه الطريقة في البداية كنهج لتحسين تسليم البكتيريا إلى الكلى، ولكن أيضا لديه تطبيق لتسليم الكواشف الأخرى ومسببات الأمراض. هذا الأسلوب يمكن أن تقدم بالمثل فوائد لدراسات التهاب المثانة، التهاب الحويضة والكلية، التهاب المسالك البولية، ومرض الكلى السكري.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Absorbing Pad Fisher 14-127-47
Sterile Cotton Gauze Pad Fisher 22-415-469
Latex Surgical Gloves Henry Schein Animal Health 21540
Curved Mayo Scissors Fisher S17341
Straight Blunt Foreceps Fisher 08-895
Scalpel Handle  Fisher 08-913-5
Sterile Scalpel Blades Fisher 53220
1 ml Luer-Lok Syringe BD Biosciences 309628 For bacterial injections
20 ml Luer-Lok Syringe  BD Biosciences 301031 For saline wash
Hemostat Seneca Medical 240267
23 G 3/4 in. Needle  BD Biosciences 305143
30 G 1 in. Needle  BD Biosciences 305128
U-100 Insulin Syringe Exel International  25846 For medication injections
Isoflurane Henry Schein Animal Health 050033
Xylazine Henry Schein Animal Health 33197 Inject IP
Ketamine Patterson Vetrinary  07-881-9413 Inject IP
Yohimbine (Atipamezole) Patterson Vetrinary  07-867-7097 Inject IP after surgery
Bupivacaine (Marcaine) Patterson Vetrinary  07-890-4584 Inject SQ at site of incision 
4-0 Chromic Gut Suture Ethicon Inc. U203H
4-0 Braided Vicryl Suture Ethicon Inc. J304H
1 ml SubQ Syringe BD Biosciences 309597
E. coli  UTI89 or CFT073 ATCC 700928
Surgicel Absorbable Hemostat Ethicon Inc. ETH1951CS 
Biospec 9.4T MRI  Bruker  94/20 USR

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Saliba, W., Barnett-Griness, O., Rennert, G. The association between obesity and urinary tract infection. Eur J Intern Med. 24, (2), 27-31 (2012).
  2. Semins, M., Shore, A., Makary, M., Weiner, J., Matlaga, B. The impact of obesity on urinary tract infection risk. Urology. 79, (2), 266-269 (2011).
  3. Zilberberg, M., Shorr, A. Secular trends in gram-negative resistance among urinary tract infection hospitalizations in the United States, 2000-2009. Infect Control Hosp Epidemiol. 34, (9), 940-946 (2013).
  4. Whiting, D., Guariguata, L., Weil, C., Shaw, J. IDF diabetes atlas: global estimates of the prevalence of diabetes for 2011 and 2030. Diabetes Res Clin Pract. 94, (3), 311-321 (2011).
  5. Wild, S., Roglic, G., Green, A., Sicree, R., King, H. Global prevalence of diabetes: estimates for the year 2000 and projections for 2030. Diabetes Care. 27, (5), 1047-1053 (2004).
  6. Ma, D., Gulani, V., Seiberlich, N., Liu, K., Sunshine, J., Duerk, J., et al. Magnetic resonance fingerprinting. Nature. 495, (7440), 187-192 (2013).
  7. Lu, L., Sedor, J., Gulani, V., Schelling, J., O'Brien, A., Flask, C. A., et al. Use of diffusion tensor MRI to identify early changes in diabetic nephropathy. Am J Nephrol. 34, (5), 476-482 (2011).
  8. Rosen, D., Hooton, T., Stamm, W., Humphrey, P., Hultgren, S. Detection of intracellular bacterial communities in human urinary tract infection. PLoS Med. 4, (12), e329 (2007).
  9. Torine, L. A. Urinary tract infection: diabetic women's strategies for prevention. Br J Nurs. 20, (13), 791-792 (2011).
  10. Rosen, D., Hung, C., Kline, K., Hultgren, S. Streptozocin-induced diabetic mouse model of urinary tract infection. Infect Immun. 76, (9), 4290-4298 (2008).
  11. Larsson, P., Kaijser, B., Mattsby-Baltzer, I., Olling, S. An experimental model for ascending acute pyelonephritis caused by Escherichia coli or proteus in rats. J Clin Pathol. 33, (4), 408-412 (1980).
  12. Gupta, R., Ganguly, N., Ahuja, V., Joshi, K., Sharma, S. An ascending non-obstructive model for chronic pyelonephritis in BALB/c mice. J. Med. Microbiol. 43, (1), 33-36 (1995).
  13. Fernandes, P., Shipkowitz, N., Bower, R. Murine models for studying the pathogenesis and treatment of pyelonephritis. Adv. Exp. Med. Biol. 224, 35-51 (1987).
  14. Kaye, D. The effect of water diuresis on spread of bacteria through the urinary tract. J. Infect. Dis. 124, (3), 297-305 (1971).
  15. Fierer, J., Tainer, L., Braude, A. Bacteremia in the pathogenesis of retrograde E. coli pyelonephritis in the rat. Am. J. Pathol. 64, (2), 443-456 (1971).
  16. Nickel, J., Olson, M., Costerton, J. Rat model of experimental bacterial prostatitis. Infection. 19, (3), S126-S130 (1991).
  17. Hagberg, L., Engberg, I., Freter, R., Olling, S., Eden, C. Ascending, unobstructed urinary tract infection in mice caused by pyelonephritogenic Escherichia coli of human origin. Am Soc Microbiol. 40, (1), 273-283 (1983).
  18. Kurosaka, Y., Ishida, Y., Yamamura, E., Takase, H., Otani, T., Kumon, H. A non-surgical rat model of foreign body-associated urinary tract infection with Pseudomonas aeruginosa. Microbiol. Immunol. 45, (1), 9-15 (2001).
  19. Anderson, B., Jackson, G. Pyelitis, an important factor in the pathogenesis of retrograde pyelonephritis. J Exp Med. 114, (3), 375-384 (1961).
  20. Anderson, J. Vesico-ureteric reflux. J R Soc Med. 55, (6), 419-426 (1962).
حقن إنترارينال من<em&gt; الإشريكية القولونية</em&gt; في نموذج الجرذ من التهاب الحويضة والكلية
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Gupta, K., Donnola, S. B., Sadeghi, Z., Lu, L., Erokwu, B. O., Kavran, M., Hijaz, A., Flask, C. A. Intrarenal Injection of Escherichia coli in a Rat Model of Pyelonephritis. J. Vis. Exp. (125), e54649, doi:10.3791/54649 (2017).More

Gupta, K., Donnola, S. B., Sadeghi, Z., Lu, L., Erokwu, B. O., Kavran, M., Hijaz, A., Flask, C. A. Intrarenal Injection of Escherichia coli in a Rat Model of Pyelonephritis. J. Vis. Exp. (125), e54649, doi:10.3791/54649 (2017).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
simple hit counter