Introduction
מודלים מכרסמים שימשו כדי לחקור תופעות רבות של המחלה האנושית, כולל pyelonephritis וזיהומים בדרכי השתן (UTI). UTI הם בעיה בריאותית גלובלית, והוא יכול להשפיע על ילדים, גברים ונשים בכל הגילאים. 1 , 2 , 3 הביטוי הראשוני של UTI כולל דלקת שלפוחית השתן, ואם הזיהום עולה לאורך השופכן, זיהום כליות (pyelonephritis) עשוי לעקוב. במקביל, שכיחות הסוכרת מתקרבת ל -400 מיליון איש ברחבי העולם. 4 , 5 חשוב לציין כי שכיחות UTI עשויה להיות גבוהה פי 4 בחולים הסובלים מהשמנת יתר או סוכרת מסוג 2, מה שמוביל לסיכון מוגבר לדלקת UTI חוזרת (rUTI), אלח דם, פיברוזיס כליות מדלקת פילונפריטיס, וחוסר תפקוד של שלפוחית השתן. 6 , 7 , 8 מכרסמיםמודלים חשובים לחקר UTI, משום שטיפולים אנטיביוטיים עכשוויים מייצרים תגובה מתמשכת ומניעה רק בקבוצת משנה של חולי UTI. כדי לשפר את הטיפול UTI הקליני, הצעדים העיקריים הם להבין את המנגנון של RUTI ואת התהליכים הפתופיזיולוגיים שלה מפני דלקת חריפה לדלקת פיברוזיס, כמו גם את ההשפעה של סוכרת מסוג 2.
המטרה של שיפור מודלים של בעלי חיים היא לפתח טכניקות המאפשרות הערכה מדויקת יותר של התקדמות המחלה והתערבויות טיפוליות. כמה גישות שונות שימשו כדי לגרום pyelonephritis חולדות ו / או עכברים ללמוד את הפתופיזיולוגיה של נזק לכליות, את ההשפעה של טיפול אנטיביוטי, וכן היבטים אחרים של הקורס הטבעי של UTIs. גישה נפוצה להקים UTI מדרדר הוא צנתור transurethral. 10 , 11 , 12 , 13 </ Sup> שיטה זו מציגה חיידקים דרך השופכה לתוך שלפוחית השתן של בעלי חיים הרדים. בעוד טכניקה זו מקרוב מדמה pyelonephritis האדם, ההיארעות בפועל ואת גודל של זיהום pyelonephritis יכול להיות משתנה מאוד בגלל מספר גורמים, כולל חוסר ריפלוקס אוורטרי ספונטנית או הימנעות השתן במהלך או מיד לאחר חיסון. 11 כתוצאה מכך, השתנות הניסוי בגידול זיהום pyelonephritis עולה יכול להגביל את התועלת של מודל זה כדי לחקור זיהומים כליות, כמו גם אסטרטגיות טיפוליות.
דוח זה מתאר מודל כירורגי pyelonephritis חולדה שבו E. coli מוזרק ישירות לתוך הכליה חולדה. למרות מודל חולדה זה פולשני, כמות E. coli נמסר כליה ניתן לשלוט באופן יעיל המאפשר דלקת כליות חזקה דלקת. 14 במסגרת הליך זה, אנו מתארים גםאיך אלה המושרה זיהומים כליות ניתן לפקח longitudinally עם in vivo מגנטית תהודה הדמיה (MRI).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
כל המחקרים בבעלי חיים בוצעו על פי פרוטוקולים מאושרים לטיפול בבעלי חיים מוסדיים ושימוש ועדת (IACUC) באוניברסיטת קייס ווסטרן ריזרב. משך הליך כירורגי המתואר להלן הוא כ 45-60 דקות. הליך MRI עצמו הוא כ 15 דקות עבור כל נקודת זמן.
1. הרדמה
- הרדים עכברוש בחדר isoflurane להגדיר ב 2% isoflurane מעורבב עם חמצן כדי להקל על טיפול בבעלי חיים וריסון לפני מתן הרדמה הזרקת תוך - peritoneally.
- לאחר 3-5 דקות של חשיפה isoflurane, לבדוק כי החיה הוא הרדים ולא מציג שום תגובה על קמצוץ הבוהן.
- עוד חולדה מסודר עם זריקה תוך-צפית של תערובת של xylazine ו ketamine: 75 מ"ג / ק"ג קטמין / 10 מ"ג / ק"ג xylazine. בעת ביצוע זריקות intra-פריטונאלי, למשוך בחזרה את המחט כדי להבטיח חלקים של המעי או איברים חיוניים אחרים לא נקברו.
- אנידלקת 2 מ"ג / ק"ג של bupivacaine תת עורית באתר החתך לספק הקלה על כאב מקומי.
2. הכנת אזור כירורגי
- לעקר מכשירים כירורגי ואספקה לפני שהם משמשים לניתוח לפרוס על כרית כירורגי סטריליות. רוב המכשירים והאספקה יכול להיות autoclaved ושימוש חוזר.
- השתמש כפפות סטריליות עבור כל הליכים כירורגיים.
- השתמש תער חשמלי לגלח את הפרווה מן הצד הימני של החיה. לגלח את החיה מהחלק התחתון של הצלעות כלוב לחלק העליון של הרגל האחורית מתן אזור גדול ללא שיער עבור החתך.
- מניחים את החיה על כרית כירורגי סטרילי לבודד את האזור מחטא מן האזורים הסמוכים.
- לשפשף את העור עם חיטוי כגון povidone יוד או betadine. התחל את קרצוף במרכז האתר כירורגית ולעבור החוצה באופן מעגלי. חזור לפחות שלוש פעמים עם מחיקת חדש של יוד פובידון או betadine. לשפשף את האתר כירורגי עם 70% אלכוהול ספוגי עד העור הוא ברור, כמו יוד עשוי להיות רעיל אם נספג.
3. הליך כירורגי
- שמור על הליך זה בתנאים aseptic.
- למקם את החיה הרדים על המיטה חימום חם בעמדה decubitus שמאל לרוחב עם האגף הימני פונה כלפי מעלה.
הערה: יש להקפיד לשמור על טמפרטורת הגוף הליבה של החולה ב 35-37 מעלות צלזיוס כדי למנוע היפותרמיה. מיטה זו התחממות צריך גם להיות מעוקרים לפי הצורך כדי לשמור על תנאים aseptic. - להרגיש על כלוב צלעות, ולעשות חתך קטן 2-3 ס"מ ימין retroperitoneal הגב באמצעות גודל סטרילי 10 להב סכין מנתח החל בחלק התחתון של הצלעות כלוב.
- המקום גזה סטרילית longitudinally לאורך כל צד של החתך.
- לנתח משם את הרקמה התת עורית, שומן, ואת השרירים על מנת לדמיין ולגשת חלל הבטן. השתמש מספריים Mayo מעוקל להב לאפשר חדירה עמוקה יותרRation לתוך הפצע ו לחתוך רקמות עבות.
- לאחר הכבד הוא גלוי בבירור ונגיש, להשתמש מלקחיים קהה כדי לסגת את הכבד כלפי מעלה.
- באמצעות זוג אחר של מלקחיים קהה ביד השנייה, לחשוף את הכליות הנכונה כך שהוא יושב ממש מחוץ חלל הבטן.
- השתמש באצבע המצביע ובאגודל היד השמאלית כדי להחזיק את הכליה במצב. עם היד הימנית, לאט לאט בהזרקה 0.1 מ"ל UTI89 E. coli פתרון (ריכוז בין 1 x 10 8 -1 x 10 9 ) מזרק סטרילי לתוך האגן הכליות (המופיע כמו בועה לבנה) 15 .
הערה: הכן את titer בקטריאלי כמתואר בסעיף 15 . - מניחים רצועת המוסטאט absorbable מעל המחט כדי למנוע יצוא של inoculum לתוך הצפק. לאט לאט למשוך את המחט מתוך האגן הכליות.
הערה: יש להקפיד לא לחדור או להדביק הרקמות הסובבות וכתוצאה מכך infecti היעדו / או סיבוכים. - השתמש מזרק גדול לשטוף היטב את הכליה עם מלוחים רגילים לפני הצבת אותו בחזרה חלל הבטן.
4. התפרים
הערה: תפר כי יהיה קבור ברקמות צריך להיות 4-0 לא absorbable קלוע sutures. ניתן להשתמש בחומרי תפירה נספגים או מונופילמנטיים למשטחי גוף.
- מניחים את התפרים באופן שווה, קרוב ככל האפשר לקצה רקמות כדי למנוע חסימה של זרימת הדם; בדרך כלל לא יותר מ 0.3 ס"מ מן הקצה יש צורך.
- לתפוס את העור להסיט אותו מעט באמצעות זוג מלקחיים שיניים בסדר, לסובב את המחט בעל למצב pronated לקראת פירסינג העור.
- כונן את המחט דרך עובי מלא של העור על ידי supinating את פרק כף היד כדי לסובב את המחט ולהעביר אותו דרך העור.
- חזור על תהליך זה על קצה העור הקרוב ביותר לאדם המבצע את ההליך.
- לְהַדֵקהתפרים מספיק כדי להתנגד קצוות רקמות. כל לחץ חזק יותר יפריע לאספקת הדם, ריפוי פצעים איטי ויכול לגרום להרס.
- לקשור את תפר באמצעות קשרים מרובעים, כאילו זה היה תפר קטוע פשוט, אלא רק את גדיל קצר הוא חתך, משאיר על זנב 3-4 מ"מ.
- לאחר תפר הראשון כבר כבוי, להכין למקום תפר השני על 3 מ"מ מן הראשון, ולהמשיך את תפר פועל.
- לאחר סיום החתך הוא הגיע, לא למשוך את תפר האחרון לחלוטין דרך. במקום זאת, להשתמש בלולאה אשר מוחזק עם מחזיק מחט כאן כמו גדיל קצר על מנת לקשור את קצה דיסטלי של תפר הסגירה.
- באמצעות קשרים המכשיר, לקשור את תפר באמצעות קשרים מרובעים. התוצאה היא 3 גדילי דבק מן הקשר הושלמה בקצה הדיסטלי.
5. התאוששות בעלי חיים
- להזריק 2.1 מ"ג / ק"ג Yohimbine intra-peritoneally לאחר הניתוח כדי להפוך את ההרדמה. אNimals צפויים להתאושש לחלוטין מהליך כירורגי לאחר 3-5 שעות.
- שמור את החיה על כרית חימום (כדי למנוע היפותרמיה) ו מצעים רכים סופג לאחר הניתוח.
- לספק rehydration עם נוזלים אוראליים או פרקטראליים עד שהוא יכול לחזור להאכלה רגילה (בתוך 24 שעות). להזריק כ 0.6 מ"ל של תמיסת מלח תמיסת peritoneally מיד לאחר הניתוח להגביל את ההשפעות התייבשות.
- ספק כאבים כפי שתואר IACUC אישרה טיפול בבעלי חיים פרוטוקול שימוש. להזריק 5 מ"ג / ק"ג carprofen תת עורית לניהול כאב.
- מעקב אחר חתכים באופן קבוע עבור נפיחות, exudate, כאב, או dehiscence.
6. אימות באמצעות הדמיה תהודה מגנטית
- התנהגות i vivo MRI ניסויים על שדה גבוה בעלי חיים קטנים MRI סורקים.
- להשרות הרדמה עם isoflurane 3% חמצן ומיקום החיה עם הכליה הנכונה ב isocenter בסורק ה- MRI ו מתאיםאכלו רדיו. לספק לבעלי חיים 1-2% הרדמה isoflurane ברציפות לאורך כל הליך הדמיה באמצעות nosecone.
הערה: בתמונות MRI של vivo שמוצג באיור 1 , נעשה שימוש בגליל נפח של חולדה (בקוטר פנימי = 72 מ"מ). - השתמש ניטור בבעלי חיים מערכת בקרה כדי לשמור על קצב הנשימה של כל חיה (40-60 נשימות / דקות) ואת טמפרטורת הגוף הליבה (35 ± 1 ° C).
- השתמש רב פרוסה, הד הד ספין MRI הרכישה כדי להשיג ברזולוציה גבוהה, T2 משוקלל תמונות משוקלל של כליות נגוע והבקרה. פרמטרים אופייניים לרכישת MRI הם זמן חזרה = 5,000 msec, זמן הד = 40 msec, עובי פרוסה = 2.0 מ"מ, רזולוציה מרחבית במטוס = 200 מיקרומטר, 3 ממוצעי אותות וזמן רכישה של 8 דקות.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
טכניקות ההדמיה הרפואית מציעות את האפשרות להעריך באופן לא פולשני את היעילות של UTI ואת היעילות הטיפולית. לכן, MRI נוצל כדי לאמת אינדוקציה של זיהום חריף לאחר הזרקה של 1-2 x 10 7 UTI89 E. coli , וכן לדמיין את השינויים בכליה לפני ואחרי הניתוח. איור 1a-b מראה אזור הולך וגובר של זיהום בכליות (חיצים צהובים). תמונות MRI שהתקבלו עבור כל בעל חיים בימים 1 ו 4 לאחר זיהום לעזור לאפיין את הצמיחה של דלקת חריפה pyelonephritis.
איור 1: T1 משוקלל MRI תמונות מ E. קולי המושרה דגם Rodent של Pyelonephritis ב ( א ) יום 1 ו ( ב ) יום 4 לאחר זיהום (חיצים צהובים).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
עולה pyelonephritis חריפה מכרסמים (כלומר עכברים וחולדות) יכול להיות מיוצר על ידי צנתור transurethral. 16 , 17 , 18 שיטה זו זיהום transurethral הוא יתרון בכך שהוא לא פולשני ומחקה את הפתופיזיולוגיה האנושית של זיהום עולה. 17 , 18 , 19 , 20 עם זאת, שיטה זו יכולה גם לסבול שיעורי זיהום לא סדיר משתנה E. מינון coli לכליה בשל מגבלות פיזיולוגיות כגון היעלמות וריאציה אנטומית. 11 Fierer et al. (1971) דיווחו על 6 מתוך 40 (15%) כליות חולדה מראה עדויות של pyelonephritis לאחר עירוי של E. coli לתוך שלפוחית השתן. 15 נוסף על כך, נדרשו עירויים חוזרים ונשנים של E. coli מספר פעמים בשבוע כדי לאמודAblyone לייצר pyelonephritis. 15 , 19
בדו"ח זה, אנו מתארים מודל חלופי pyelonephritis מכרסם אשר מציג באופן כירורגי E.coli ישירות לתוך האגן הכליתי. היתרון העיקרי של המודל הכירורגי של טכניקת pyelonephritis כולל ניהול של מינון עקבי של ריכוז coli בין 1 x 10 8 - 1 x 10 9 כמו גם הזרקה של החיידקים באותו אתר אנטומי (אגן כליה ימין) עבור כל בעל חיים. 15 זו הזרקה ישירה נמנע הדרישה reflux מתן זיהום אמין יותר, כמו גם קביעת מדויקת יותר של מינון מוזרק. בסך הכל, מודל זה pyelonephritis כירורגי מספק אפשרות חלופית למחקרים הדורשים זיהום עקבי, לשחזור עם השפעה מינימלית של reflux השופכה.
מיטוב ההצלחה של טכניקה זו כירורגית כוללים:1) השגת הרדמה עמוקה להגבלת תנועת הנשימה ולאפשר זמן עבודה מספיק; 2) גילוח השטח של החתך כירורגי כדי למנוע זיהום באזורים שאינם prepped; 3) עיקור למניעת זיהום; 4) הזרקת זהיר של מנה ידועה של coli לתוך האגן הכליות חולדה; 5) לשטוף מלוחים יסודית של הזרקת פוסט הכליה; 6) קרוב קירוב של הקצוות הפצע באמצעות התפרים; ו - 7) ניטור של סיבוכים תוך אופרטיביים שלאחר הניתוח כגון היפותרמיה ותופעות לוואי מערכתיות. למרות כרית חימום שימש כדי לשפר את נוחות בעלי החיים, פרוטוקול זה עשוי להיות מותאם עוד יותר באמצעות חיישן טמפרטורה רקטלית לשמור על טמפרטורת הגוף הליבה. צעד מפתח בהשגת ניתוח הישרדות מוצלח הוא הרדמה נכונה ומעקב אחר הנשימה של החיה. אי ביצוע זה גורם פעמים ניתוח ממושך כדי לייצב את רמת ההרדמה של בעלי חיים להגביל פגיעה בלתי רצויה עקב מוגזםתְנוּעָה. סטריליות מפוקחת של אזור העבודה ו / או זיהום לא מכוונת של פריטוניום עם חיידקי קולי E. הם גם סיבוכים נפוצים הקשורים עם המודל הכירורגי. לכן, הכנה נאותה כלי הניתוח החיטוי, כדי לעקר את סביבת העבודה כולה, מאמצים פרוצדורליים להגביל זיהומים נוספים E. coli כל לסייע בהפחתת תמותה בבעלי חיים, כמו גם תוצאות זיהום שגויות.
למרות היתרונות של הזרקה ישירה של E. coli לתוך הכליה, מודל זה כירורגי של pyelonephritis יש גם מגבלות רבות בהשוואה לשיטת משלוח transurethral. החיסרון הגדול ביותר באמצעות גישה הזרקת כירורגית ישירה היא הפולשנות הטבועה של הטכניקה. עם זאת, התמותה היא נמוכה במידה ניכרת עם יישום של טכניקה סטרילית נכונה ושימוש נאותה ניהול כאב, בקרת טמפרטורה באמצעות רפידות חימום, וכן רך, סופג תשתית שלאחר הניתוחלהבטיח שחזור מהיר. בנוסף, החיטוי כלים כירורגית עבור עיקור היא שיטה אמינה ביותר וחסכונית עבור סטריליזציה. המחויבות הזמן כירורגי הכולל הוא בדרך כלל פחות מ 1 שעות. יתר על כן, הממשל של הרדמה, כמו גם משלוח מקומי ומערכתי של תרופות כאב מכויל למשקל הגוף מבטיח משלוח המינון המדויק ובטיחות הנושא. מגבלה נוספת פוטנציאל המודל הכירורגי היא כי טכניקות כירורגיות קשה יותר בעכברים בשל הגדלים אנטומיים קטנים יותר. בניגוד לשיטת transurethral כי ניתן ליישם הן חולדות ועכברים, הדרישה להשתמש במודלים חולדה עבור המודל כירורגי מגדיל את העלות הכוללת של המחקר והוא יכול להציב אילוצים על המחקר של שינויים גנטיים שונים שעשויים להיות זמינים יותר ו חסכונית מודלים העכבר. כאמור, מגבלה משמעותית נוספת של השיטה הכירורגית היא שהיא אינה מייצגת pyelonephritis אנושיתמקרוב כמו שיטת transurethral.
כאן, השתמשנו בטכניקות MRI כדי לעקוב אחר זיהומים כליות. כפי שמוצג באיור 1 , סריקת MRI מספקת את היכולת לא פולשנית לפקח על זיהומים כליות לאורך זמן. גישה חלופית למעקב זיהומים E. coli היא באמצעות תיוג פלורסנט של החיידקים. 11 , 18 עם זאת, הדמיה פלואורסצנטית היא פחות יעילה במודל חולדה זו (בניגוד מודלים העכבר) עקב ספיגת האור על ידי הרקמה וכתוצאה מכך מופחת באופן משמעותי רגישות זיהוי. לכן, MRI מספק אמצעי רגיש יותר כדי לעקוב אחר זיהומים E. קולי בשלבים הראשונים שלהם כדי לספק מידע אזורי על מידת הזיהום בשלושה מימדים.
המנגנונים של UTI / חריפה pyelonephritis פתופיזיולוגיה, ואת ההתקדמות כדי fibrosis הכליות הם הבינו היטב. המזהמים, מתחתשוכב התגובה המארחת החיסונית, ותגובות דלקתיות לשחק תפקיד אינטגרלי, אבל המשמעות של כל אחד אינו ידוע. השיפור במיקוד ממוקד של חיידקים לכליה באמצעות הליך הזרקת ישיר זה יש פוטנציאל להגדיל את שחזור של דלקת חריפה של pyelonephritis במודלים מכרסמים, ואולי כדי להעריך בצורה מדויקת יותר בשלב מוקדם התערבויות טיפוליות לטיפול ב- UTI. שיטה זו פותחה בתחילה כגישה לייעול אספקת חיידקים לכליה, אבל יש גם בקשה למסירה של ריאגנטים אחרים פתוגנים. שיטה זו יכולה להציע יתרונות דומים למחקרים של דלקת שלפוחית השתן, pyelonephritis, UTI, ומחלת כליות סוכרתית.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Absorbing Pad | Fisher | 14-127-47 | |
| Sterile Cotton Gauze Pad | Fisher | 22-415-469 | |
| Latex Surgical Gloves | Henry Schein Animal Health | 21540 | |
| Curved Mayo Scissors | Fisher | S17341 | |
| Straight Blunt Foreceps | Fisher | 08-895 | |
| Scalpel Handle | Fisher | 08-913-5 | |
| Sterile Scalpel Blades | Fisher | 53220 | |
| 1 ml Luer-Lok Syringe | BD Biosciences | 309628 | For bacterial injections |
| 20 ml Luer-Lok Syringe | BD Biosciences | 301031 | For saline wash |
| Hemostat | Seneca Medical | 240267 | |
| 23 G 3/4 in. Needle | BD Biosciences | 305143 | |
| 30 G 1 in. Needle | BD Biosciences | 305128 | |
| U-100 Insulin Syringe | Exel International | 25846 | For medication injections |
| Isoflurane | Henry Schein Animal Health | 050033 | |
| Xylazine | Henry Schein Animal Health | 33197 | Inject IP |
| Ketamine | Patterson Vetrinary | 07-881-9413 | Inject IP |
| Yohimbine (Atipamezole) | Patterson Vetrinary | 07-867-7097 | Inject IP after surgery |
| Bupivacaine (Marcaine) | Patterson Vetrinary | 07-890-4584 | Inject SQ at site of incision |
| 4-0 Chromic Gut Suture | Ethicon Inc. | U203H | |
| 4-0 Braided Vicryl Suture | Ethicon Inc. | J304H | |
| 1 ml SubQ Syringe | BD Biosciences | 309597 | |
| E. coli UTI89 or CFT073 | ATCC | 700928 | |
| Surgicel Absorbable Hemostat | Ethicon Inc. | ETH1951CS | |
| Biospec 9.4T MRI | Bruker | 94/20 USR |
References
- Saliba, W., Barnett-Griness, O., Rennert, G. The association between obesity and urinary tract infection. Eur J Intern Med. 24 (2), 27-31 (2012).
- Semins, M., Shore, A., Makary, M., Weiner, J., Matlaga, B. The impact of obesity on urinary tract infection risk. Urology. 79 (2), 266-269 (2011).
- Zilberberg, M., Shorr, A. Secular trends in gram-negative resistance among urinary tract infection hospitalizations in the United States, 2000-2009. Infect Control Hosp Epidemiol. 34 (9), 940-946 (2013).
- Whiting, D., Guariguata, L., Weil, C., Shaw, J. IDF diabetes atlas: global estimates of the prevalence of diabetes for 2011 and 2030. Diabetes Res Clin Pract. 94 (3), 311-321 (2011).
- Wild, S., Roglic, G., Green, A., Sicree, R., King, H. Global prevalence of diabetes: estimates for the year 2000 and projections for 2030. Diabetes Care. 27 (5), 1047-1053 (2004).
- Ma, D., Gulani, V., Seiberlich, N., Liu, K., Sunshine, J., Duerk, J., et al. Magnetic resonance fingerprinting. Nature. 495 (7440), 187-192 (2013).
- Lu, L., Sedor, J., Gulani, V., Schelling, J., O'Brien, A., Flask, C. A., et al. Use of diffusion tensor MRI to identify early changes in diabetic nephropathy. Am J Nephrol. 34 (5), 476-482 (2011).
- Rosen, D., Hooton, T., Stamm, W., Humphrey, P., Hultgren, S. Detection of intracellular bacterial communities in human urinary tract infection. PLoS Med. 4 (12), e329 (2007).
- Torine, L. A. Urinary tract infection: diabetic women's strategies for prevention. Br J Nurs. 20 (13), 791-792 (2011).
- Rosen, D., Hung, C., Kline, K., Hultgren, S. Streptozocin-induced diabetic mouse model of urinary tract infection. Infect Immun. 76 (9), 4290-4298 (2008).
- Larsson, P., Kaijser, B., Mattsby-Baltzer, I., Olling, S. An experimental model for ascending acute pyelonephritis caused by Escherichia coli or proteus in rats. J Clin Pathol. 33 (4), 408-412 (1980).
- Gupta, R., Ganguly, N., Ahuja, V., Joshi, K., Sharma, S. An ascending non-obstructive model for chronic pyelonephritis in BALB/c mice. J. Med. Microbiol. 43 (1), 33-36 (1995).
- Fernandes, P., Shipkowitz, N., Bower, R. Murine models for studying the pathogenesis and treatment of pyelonephritis. Adv. Exp. Med. Biol. 224, 35-51 (1987).
- Kaye, D. The effect of water diuresis on spread of bacteria through the urinary tract. J. Infect. Dis. 124 (3), 297-305 (1971).
- Fierer, J., Tainer, L., Braude, A. Bacteremia in the pathogenesis of retrograde E. coli pyelonephritis in the rat. Am. J. Pathol. 64 (2), 443-456 (1971).
- Nickel, J., Olson, M., Costerton, J. Rat model of experimental bacterial prostatitis. Infection. 19 (3), S126-S130 (1991).
- Hagberg, L., Engberg, I., Freter, R., Olling, S., Eden, C. Ascending, unobstructed urinary tract infection in mice caused by pyelonephritogenic Escherichia coli of human origin. Am Soc Microbiol. 40 (1), 273-283 (1983).
- Kurosaka, Y., Ishida, Y., Yamamura, E., Takase, H., Otani, T., Kumon, H. A non-surgical rat model of foreign body-associated urinary tract infection with Pseudomonas aeruginosa. Microbiol. Immunol. 45 (1), 9-15 (2001).
- Anderson, B., Jackson, G. Pyelitis, an important factor in the pathogenesis of retrograde pyelonephritis. J Exp Med. 114 (3), 375-384 (1961).
- Anderson, J. Vesico-ureteric reflux. J R Soc Med. 55 (6), 419-426 (1962).
