Summary
Her præsenterer vi en protokol til vurdering af frø efterladte, spiring og vækstdvale under markforhold ved hjælp begravet, mærket frø strips og tetrazoliumchlorid (TZ) levedygtighed test.
Introduction
Det overordnede mål med denne metode er at pålidelig vurdering frø overlevelse over tid under markforhold.
Soil frøbanker er en reserve af spredte, levedygtige endnu uspirede frø fordelt enten på jordoverfladen, inden overfladen kuld, eller i jorden profil, der vil kunne overleve forbigående eller i mange år 1,2. Når frø nedgravning metoder svarende til dem, der præsenteres her blev anvendt på en 17-årig undersøgelse ved hjælp af flere dusin arter blev levedygtige frø findes i mange af de testede tre arter. Seed vækstdvale er en blok til frø spiring indtil passende kombination af betingelser for sætteplante overlevelse opstår fire. Resterende hvilende kan tillade frø at overleve barske forhold, såsom lave vintertemperaturer, næringsstof begrænsning eller sæsonbestemt tørke, indtil en ekstern udløser hviletilstand-release giver mulighed for spiring. Udløser til hviletilstand-release kan variere fra udsættelse for udvidede kolde, forbindelser efterladt af fire, eller fysisk angreb på frøskallen gennem slid eller kontakt med mave dyr syrer 5. Som spireevne stikord kan være slægter eller arter specifikke og ofte skyldes fortiden naturlig udvælgelse, utilpasset frøspiring er, at der opstår på et upassende tidspunkt, og kan resultere i frø eller sætteplante dødelighed eller dårlig sætteplante vækst. Mens vækstdvale er blevet klassificeret i en række typer baseret på mekanismerne i hviletilstand frigivelse (fx fysisk vækstdvale, fysiologisk vækstdvale), 6 frø hviletilstand er fortsat en af de mindst forståede emner i plantebiologi. Således feltstudier, der tillader vurdering af status for de enkelte frø eller grupper af frø i henhold til relevante økologiske forhold har højere forklaringsgrad end dem, der blot stole på standard spireevne test i laboratoriet.
Udnyttelse af kendte frø egenskaber kan give indsigt i mekanismerne i dvale. Kontrol af frø vækstdvale er complex, herunder genetisk kontrol af fysiologiske og morfologiske faktorer. Mens en fuld forståelse af bredden i hviletilstand mekanismer er endnu ikke klarlagt, har en generel model opstået, indebærer en feedback-forhold mellem de to plantehormoner gibberellinsyre (GA) og abscisinsyre (ABA) 7. I denne generaliseret model for frø med en fysiologisk komponent til deres hviletilstand, GA tjener som signal for hviletilstand frigivelse, mens ABA tjener til at opretholde den sovende tilstand. Maternal genetiske virkninger samt den maternelle vækstmiljø kan påvirke vækstdvale og andre frø træk, såsom størrelse, gennem moderen genererede væv og udviklingsmæssige signaler 8. Maternelt genererede eksterne strukturer (eller frø belægninger) kan opretholde hviletilstand, til tider i kombination med fysiologiske signaler. Da maternelle frø belægninger styres af moderen plantens gener, kan de ikke afspejler frøet faktiske nukleare genetiske make-up. Vi har osed de Helianthus annuus nøddefrugt fra en vifte af afgrøde-vilde hybrid krydser at drille disse mødres vs. embryo genetiske effekter på frø egenskaber 9,10. Således studiedesign, der omfatter forskellige arter, cross typer eller genotyper kan indsamle oplysninger om økologi og genetik frø hviletilstand, spiring og overlevelse.
Et vigtigt eksempel på, hvordan frøspiring og overlevelse fænotyper kan påvirke populationsdynamik kan ses i afgrødespecifikke vilde hybrid zoner. Udvælgelse under domesticering af dyrkede planter fjerner det meste vækstdvale og reducerer et frø overlevelsesevne uden for vækstsæsonen. Alligevel gen flow, eller hybridisering mellem dyrkede og vilde typer i afgrødespecifikke vilde hybrid zoner kan genindføre afgrøde alleler (eller genetiske varianter) i en vild population, der kan påvirke de frø bank dynamik. Hybrider mellem dyrkede og vilde slægtninge potentielt findes i afgrødespecifikke vilde hybrid zoner kan haveen række mellemliggende hviletilstand fænotyper, med kun et par fænotyper forventes at overleve betingelserne uden for dyrkning (f.eks vintermånederne) 11.
Formålet med dette manuskript er at vise, hvordan, ved hjælp af frø begravelse strimmel metode, kan vi vurdere spiring, vækstdvale, og overlevelse af en række frø typer på forskellige tidsperioder for at undersøge deres naturlige variation under markforhold. I vores eksempel, vi ansat solsikkefrø fra 15 afgrødespecifikke vilde typer hybrid cross da vi er interesseret i maternelle og embryonale genetiske effekter på frø egenskaber.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1. Saml Frø fra flere Dyreart eller kontrollerede krydsninger af en enkelt art
Bemærk: Dette eksempel brugt frø fra 15 cross typer inden arten Helianthus annuus (solsikke) ved hjælp af naturen, hybrid, og afgrødetyper som moderens (seed producerende) forælder.
- Ved slutningen af vækstsæsonen, indsamle modne frø hoveder i mærkede poser. Clean frø fra bukkene og sted frø i kuverter mærket med forældrenes krydstype i standardformat (dvs. moderens x fædrene).
- Bulk frø sammen i store kuverter hjælp lige store mængder af frø fra et lige antal identiske forældrenes typer cross. For eksempel 100 frø fra 10 cross typer med samme mødrene og fædrene forældre. Mærk konvolutterne med at identificere (cross type) information. Disse store kuverter er frø mastere til brug ved fyldning nedgravning strimler i afsnit 2.
| maternal Parent | |||
| faderlig Parent | Wild: WxW | F 1: WXC | Crop: CXC |
| Wild: WxW | 0% WxW | 25% F 1 x B † | 50% CxW † |
| BC: WxF1 eller F1xW | 12,5% WxBC | 37,5% F 1 XBC | 62,5% CxBC |
| F 1: WXC | 25% WxF 1 † | 50% F 1 xF 1 | 75% CXF 1 † |
| F 2: F 1 xF 1 | 25% WxF 2 | 50% F 1 xF 2 | 75% CXF 2 |
| Crop: CXC | 50% WXC † | 75% F 1 xC † | 100% CXC |
Tabel 1. Parental cross types produceret fra hånd bestøvning. Sunflower afgrødespecifikke vilde hybrid cross typer blev produceret med hånd-bestøvning til brug i frø begravelse eksperiment. For alle cross typer, den maternelle forælder vises først og de faderlige forælder opført sekunder. Cross typer markeret med † er en del af gensidige cross typen par med samme% afgrøde alleler men forskellige mødre forældre. Tabel er tidligere blevet offentliggjort i: Pace, BA et al. (2015) 15.
2. Opret brugerdefinerede Seed Begravelse Strips
BEMÆRK: I dette eksempel, vi havde tre fjernelse dato behandlinger og 15 gentagelser, så vi krævede 45 strips alt. Dette eksempel bruger 15 rum pr striben så, vi krævede nok finmasket polyesterstof eller myggenet til at huse 15, 7 x 10 cm rum. Se figur 1.
- Start ved at skære en 20 x 105 cm strimmel af stof til hvert frø strimmel.
- Mål og markere rum, så fold stoffet i halve. Ved hjælp af en high-temperatur lim pistol, forsegle en kort (10 cm) ende. Når limen køler en smule, men ikke helt, trykke på stof siderne sammen om at skabe et segl.
ADVARSEL: Høj temperatur lim og lim pistol tips kan forårsage forbrændinger, hvis kontakt med huden er forlænget. - Lim linjer fra den foldede kant til den åbne korte ende på hvert rum varemærke. Tryk de to stof vrang langs lim linjer for at sikre sæler uden huller mellem rum. Frø migrerer mellem rummene bidrager til eksperimentelle fejl.
BEMÆRK: Nu, der er blevet skabt rummene, bør den udfoldede kant forblive åben og klar til at modtage frø og deres identificerende oplysninger (krydstype navn). - Tilfældigt tildele frø cross typer at rum til hver strimmel.
- Fyld frø rum med en ensartet antal frø (20 for hvert rum anvendes i dette eksempel). Til etiketter bruge industrielle permanente markører på cut-til-fit plast haven dart, så de er i stand tilmodstå begravelse.
BEMÆRK: Der kan anvendes andre metoder mærkning. - Efter hvert rum er fyldt med frø og dets etiket, straks forsegle rummet med høj temperatur lim pistol. Fortsæt indtil hele frø strimmel er fuldstændig forseglet. Label samlede strimmel i det første rum med gentagelse, blok og / eller information behandling.
BEMÆRK: For vores undersøgelse, da vi havde tidsmæssige flytninger, blokke, og kopiere strips inden for blokke, vi medtaget alle disse oplysninger. - Check for huller mellem rum og spot lim efter behov, før man går videre til den næste strimmel.
- Fyld frø rum med en ensartet antal frø (20 for hvert rum anvendes i dette eksempel). Til etiketter bruge industrielle permanente markører på cut-til-fit plast haven dart, så de er i stand tilmodstå begravelse.
Figur 1. Begravelse frø strimmel skematisk. Eksempel på begravelse strimmel viser krydstype identifikation for individuelle rum. Maternal forælder er opført først med faderlig forælder opført sekunder. Farver indikerer forskellige mødres slægtskab,med gul for naturen, blå for F 1 hybrid, og rød for afgrøden. Klik her for at se en større version af dette tal.
3. Bury Seed Strips i Field
- Grave plots til den angivne dybde til hus strimler. Tildel strips til individuelle blokke i hvilke strimler er tilfældigt anbragt for at muliggøre fjernelse dato, der skal anvendes som den vigtigste plot og rum identitet (i dette eksempel, cross typen) som subplot'et i analysen.
- Cover strips med jorden. Cut metalnet hardware klud til at være 10 cm større end plots og sted over nedgravede strimler. Brug U-stifter til at sikre kanter og dække klud kanter med jord.
BEMÆRK: Denne overdækning er for at udelukke gravende frø rovdyr. Som en anden mulighed, Mercer et al. 13 konstrueret og begravet kasser med hardware klud, der omgav de frø strips grundet intenst gopher pres på deres felt location.) - Placer farvede landmåler s flag til at skelne strimmel placering og fjernelse datoer for at supplere klare skriftlige optegnelser.
4. Udgrav Strips og evaluere Seed
- Grave op frø strips tildelt en given fjernelse dato. Vedligehold strimlerne i et køligt fugtigt miljø, indtil de når laboratoriet, hvor frø evaluering vil finde sted. Dette kan opnås ved at pakke strimlerne i våd avis og anbringe dem i en køler til transport eller overnight shipping.
- Skyl mudder og jord fra strimler i vand, indtil strimler er rene nok, at ekstern vragrester vil ikke obskure frø.
- Brug en saks til at klippe åbne et rum ad gangen. Tæl spiret frø og fjerne dem. Tæl klart døde frø (f.eks rådnende eller putrefied frø). Placer uspirede frø på mærket, våd Petri størrelse trækpapir til yderligere skelne uspirede, hvilende, og døde frø.
- Placer petriskåle med uspiretfrø til et vækstkammer indstillet til standard spiringsbetingelser: 25 ° C / 10 ° C 12 timer dag / nat. Tillad frø en uge til at spire. Enhver, der, tæller disse som levedygtig, men uspirede da de ikke spire under markforhold.
- Efter vækstkammeret behandling, test resterende uspirede frø til levedygtighed ved hjælp tetrazoliumchlorid (TZ) 13. For at opnå dette, udgør en procent opløsning af TZ passende for undersøgelsens arter ved hjælp af AOSA Tetrazolium Test Handbook 14. I dette eksempel er en 1% opløsning anvendes.
- Skær uspirede frø i halve og placere den ene halvdel var embryonet og frøhviden er synlige i en petriskål indeholdende nok TZ løsning til at dække frøene (frø kan flyde, det er i orden).
- Placer TZ petriskåle i en inkubator indstillet til 30 ° C og vente 3 timer. Bemærk: Højere temperaturer vil resultere i en hurtigere reaktion, hvis det ønskes, men overstaining er en risiko.
<li> Fjern petriskåle fra inkubatoren og evaluere. Frø, der har farvet rødt i deres embryoner er spiredygtige, mens ufarvede frø er døde. Kontakt AOSA Tetrazolium Testing Håndbog for flere detaljer om karakteristiske marginale sager og særlige arter.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Cross typer med varieret moderens herkomst og afgrøde allel procent (tabel 1) afveg tværs fjernelse datoer i procent spiret, uspiret, og døde frø (fig. 2 og 3). Brug af TZ afprøvning af uspirede frø, fandt vi nogle virkelig hvilende frø ved den anden fjernelse (tidligt forår) (tabel 2), mens alle frø uspirede af den tredje fjernelse (forår) sig at være virkelig hvilende.
Generelt lavere afgrøde allel procenter reducerede utilpasset spiring i det sene efterår (fig. 2). Ved fjernelse tidlige forår, alle cross typer havde høj spiring, men adskilte sig i deres andel døde og uspiret (fig. 3). Især cross typer med afgrøde maternel herkomst havde højere dødelighed, mens moderen vilde cross typer var mere tilbøjelige til at forblive uspiret. I foråret,spiring faldt for nogle cross typer. Mens counter-intuitive, dette skyldes sandsynligvis frø dødelighed inden for nedgravning strimler til tidligere spirende cross typer. Derfor dødeligheden var højere for flere afgrøder-lignende typer cross (dvs. dem med højere afgrøder allel procenter) produceret af afgrøder maternelle forældre (fig. 3)
Figur 2. Spiring ved første afhentning i det sene efterår. Spiring af solsikke afgrødespecifikke vilde typer cross på det første afhentning dato, i det sene efterår. Cross typer er organiseret på y-aksen ved at øge afgrøde allel procenter som markeret. Maternal forælder er opført først for hver cross type. Spiring mindste kvadraters midler (med SE søjler) efterfulgt af samme bogstav er ikke signifikant forskellige ved hjælp af en Tukey-Kramer justering for multiple sammenligninger. Figur har tidligere været offentliggjort i: Pace, et al. (2015) 15. Klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 3. Procent spiret, uspiret, og dødelighed for den anden fjernelse (tidligt forår) og tredje fjernelse (forår). Procent spirede for tidlige forår (A), fjeder (B), procent uspiret for tidlige forår (C), forår ( D), og procent døde for tidlige forår (E) og fjeder (F) fjernelse datoer. Sunflower crop-wild hybrid cross typer er organiseret ved at øge afgrøde allel procenter, med den mest afgrøde-lignende oven på y-aksen og den mest vild-lignende ved bunden af y-aksen. Cross typen maternal forælder er angivet først. mindste kvadratersbetyder for spirede, uspiret og døde frø (med SE søjler) efterfulgt af det samme bogstav er ikke signifikant forskellige ved hjælp af en Tukey-Kramer justering for multiple sammenligninger. Figur har tidligere været offentliggjort i: Pace, et al (2015) 15.. Klik her for at se en større version af dette tal.
| Cross typen | TZ Dormant | standard Error |
| WxW | 0,071 | 0,0131 |
| WxBC | 0,041 | 0,0126 |
| WxF1 | 0,089 | 0,0136 |
| WxF2 | 0,054 | 0,0126 |
| F1xW | 0 | 0,0126 |
| F1xBC | 0,013 | 0,0126 |
| WXC | 0,075 | 0,0131 |
| F1xF1 | 0,007 | 0,0126 |
| F1xF2 | 0,013 | 0,0126 |
| CxW | 0 | 0,0126 |
| CxBC | 0 | 0,0126 |
| F1xC | 0 | 0,0126 |
| CxF1 | 0 | 0,0126 |
| CxF2 | 0 | 0,0126 |
| CXC | 0 | 0,0126 |
Tabel 2. Frø vil kunne bidrage til en vedvarende frøbank. Mindste kvadraters betyder for procent hvilende brøkdel af uspirede frø på den anden (tidlige forår) fjernelse. Frø blev bestemt til at være rentabel ved hjælp tetrazolium kloride efter inkubation i gunstige spiringsbetingelser. Tabel er tidligere blevet offentliggjort i: Pace et al (2015) 15..
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Her præsenterer vi metoder til at bruge frø nedgravning strips til at observere frøspiring, hviletilstand og dødelighed af forskellige frø bestande på forud valgte tidsperioder på området. Fordelene ved at anvende strimler snarere end individuelle pakker ligger i (1) hastigheden af strimlen og rum konstruktion løbet oprettelse af individuelle pakker; og (2) den lethed og hastighed af fjernelse flere rum i en bevægelse uden fare for at udelade en pakke eller fjerne en utilsigtet. Som to af fjernelse datoer i eksemplet præsenteret her var i løbet af vintermånederne, når jorden er hård og markforhold er kolde, denne metode reducerer både arbejdskraft og at risikoen for fejl. Seed strimler også støtte eksperimentelle logistik ved at tillade forskere til at randomisere miljømediumspecifikke steder i laboratoriet på en måde, som ikke kan ændres af menneskelige fejl på området. Gennem udvælgelse af flytteudgifter gange, omfattede bredden af forudsagte naturlige spireevne gange vi vari stand til at drage slutninger om frøbank dynamik-i vores eksempel muligheden for hybrid frø til at fortsætte i frøbank og bidrage til kommende populationer. En begrænsning ved denne fremgangsmåde er, at nogle migration af frø mellem rum kan være uundgåelig, afhængigt af størrelsen af frøene. Af denne grund (og som anført i protokollen) er det vigtigt, at undersøgere dobbelttjekke højtemperatur lim tætninger mellem rummene for at minimere frø migration.
Nogle problemer med frø nedgravning eksperimenter kan undgås ved at tænke klogt om timing. Vælg nedgravning og fjernelse datoer til tider er relevante for de naturlige cyklusser af undersøgelsens art og de mål undersøgelsens. Det er bedst at plante så hurtigt efter naturlig frøfaldet som muligt. Datoer fjernelse bør vælges på grundlag af observationer af top sætteplante fremkomsten tid til vurdering af normal spiring adfærd; tilsætning af tidligere datoer tillader også forskere at fange tidlig spiring. BecABrug vores tidligere arbejde havde vist, at nogle utilpasset spiring blev forekommende på grund af fuldstændig mangel på hviletilstand i nogle cross typer, valgte vi en meget tidlig fjernelse dato kun et par uger efter begravelsen (fjernelse 1, sene efterår) 15, 16.
Fordelen ved strips end individuelle pakker er, at et dusin eller flere rum kan blive begravet, fjernet, og vurderes som én, der giver mulighed for komplekse forsøgsdesign involverer alt fra flere fjernelse datoer til kunstvanding eller behandlinger næringsstoffer. Efterforskere bør sørge for at konstruere blokke, der tillader de behandlinger, de er mest bekymret med forståelse for at være den vigtigste effekt. Vores eksempel understregede frø adfærd over tid, men andre behandlinger kan anvendes som ville kræve overvejelse af feltet layout og replikere arrangement inden for blokke under den eksperimentelle design fasen. Ved tilfældigt tildele strimmel begravelse position inden for blokke, kan fjernelse tid analyseres som den vigtigste effekt.
<p class = "jove_content"> Efter fjernelse af frø strimler, forbereder en pre-mærket stak af Petri-størrelse trækpapir for hele striben før vurderingen begynder reducerer menneskelige fejl. Tilsvarende åbning og evaluere et enkelt rum ad gangen hjælper med at bevare nøjagtigheden. Ved placering uspirede frø i væksten kamre, skal du sørge for, at dag- og nattemperaturer matcher optimale frøspiring betingelser for undersøgelsens arter. Mens standard spiringsbetingelser (25 ° C / 10 ° C 12 timer dag / nat) kan være passende for en lang række forskellige arter, er dette ikke tilfældet for alle arter.Tænk, at TZ behandling ansøgning og evaluering af frø farvede mønstre stor indflydelse undersøgelse resultat. Ved vurderingen af uspirede frø efter vækstkammeret behandling, konsultere litteraturen (eller AOSA Tetrazolium Testing Handbook 14) til den korrekte koncentration af TZ for en given art. Mens dømme individuel TZ farves seeds, er det vigtigt at huske forskellen mellem levedygtighed frø og et frø evne til at spire-svagt farvede frø kan indikere respiring væv, hvilket kan være ude af stand til at dukke op fra jorden og producere en frøplante. Det erklærede, virkelig hvilende frø er dem, der forbliver uspirede under optimale spiring betingelser, men når testet stadig stærkt levedygtige. Disse frø er de eneste frø vil kunne bidrage til en vedvarende frøbank og spire i de kommende år.
En række anvendelser for disse metoder er mulige ud over de her skitserede. Seed nedgravning strips kan tilpasses til stort set alle række eksperimentelle enheder og eksperimentelle design. De kan anvendes til at sammenligne forskellige arter, frø størrelser eller tilstande / behandling. Med udgangspunkt i disse metoder har potentiale til at uddybe kendskabet til basisfrø biologi mange arter i et økologisk relevant kontekst.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Small coin envelopes | Any | ||
| Large coin envelopes | Any | ||
| fine meshed polyester mosquito netting | Any | ||
| high-temperature glue gun | Any | ||
| high-temperature glue stick refills | Any | ||
| Industrial permenant markers | Any | ||
| plastic garden labels | Any | ||
| scissors | Any | ||
| Shovel | Any | ||
| Metal mesh hardward cloth | Any | ||
| Surveyor's flags, multiple colors | Any | ||
| Wet newspaper | Any | ||
| cooler | Any | ||
| blotter paper | Any | ||
| petri dishes | Any | ||
| Temp. controlled growth chamber | Any | ||
| razor blades | Any | ||
| Petri dishes | Any | ||
| Tetrazolium chloride | Any | ||
| water | Any | ||
| heat incubator | Any |
References
- Walck, J. L., Baskin, J. M., Baskin, C. C., Hidayati, S. N. Defining transient and persistent seed banks in species with pronounced seasonal dormancy and germination patterns. Seed Sci Res. 15 (3), 189-196 (2005).
- Alexander, H. A., Schrag, A. M. Role of soil seed banks and newly dispersed seeds in population dynamics of the annual sunflower. Helianthus annuus. J Ecol. 91, 987-998 (2003).
- Burnside, O. C., Wilson, R. G., Weiseberg, S., Hubbard, K. Seed longevity of 41 weed species buried 17 years in eastern and western. Weed Sci. 44 (1), 74-86 (1996).
- Baskin, C. C., Baskin, J. M. Seeds: Ecology, biogeography, and evolution of dormancy and Germination. , Academic Press. San Diego, CA. (2001).
- Finch-Savage, W. E., Leubner-Metzger, G. Seed dormancy and the control of germination. New Phytol. 171, 501-523 (2006).
- Baskin, J. M., Baskin, C. C. A classification system for seed dormancy. Seed Sci Res. 14 (1), 1-16 (2004).
- Donohue, K., et al. Environmental and genetic influences on the germination of Arabidopsis thaliana in the field. Evolution. 54 (4), 740-757 (2005).
- Roach, D. A., Wulff, R. D. Maternal effects in plants. Ann Rev Ecol Syst. 18, 209-235 (1987).
- Pace, B. A., Alexander, H. M., Emry, J. D., Mercer, K. L. Seed fates in crop-wild hybrid sunflower: crop allele and maternal effects. Evol Appl. 8 (2), 121-132 (2015).
- Alexander, H. M., Emry, D. J., Pace, B. A., Kost, M. A., Sparks, K. A., Mercer, K. L. Roles of maternal effects and nuclear genetic composition change across the life cycle of crop-wild hybrids. Am J Bot. 101 (7), 1176-1188 (2014).
- Stewart, N. C., Matthew, J., Halfhill, D., Warwick, S. I. Transgene introgression from genetically modified crops into their wild relatives. Genetics. 4, 806-817 (2003).
- Mercer, K. L., Shaw, R. G., Wyse, D. L. Increased germination of diverse crop-wild hybrid sunflower seeds. Ecol Appl. 16, 845-854 (2006).
- Delouche, J. C., Still, T. W., Rapset, M., Lienhard, M. The tetrazolium test for seed viability. Mississippi Sta Uni Ag Exp Sta Techn Bull. 51, 1-63 (1962).
- Association of Official Seed Analysts. Tetrazolium Testing Handbook. , 653 Constitution Avenue NE, Washington, DC 20002, USA. (2010).
- Alexander, H. M., Emry, D. J., Pace, B. A., Kost, M. A., Sparks, K. A., Mercer, K. L. Roles of maternal effects and nuclear genetic composition change across the life cycle of crop-wild hybrids. Am J Bot. 10 (7), 1176-1188 (2014).
- Weiss, A. N., Primer, S. B., Pace, B. A., Mercer, K. L. Maternal effects and embryo genetics: germination and dormancy of crop-wild sunflower hybrids. Seed Sci Res. 23, 241-255 (2013).
