Summary
Burada gömülü, etiketli tohum şeritler ve tetrazolyum klorür (TZ) canlılık testi kullanılarak tarla koşullarında tohum hayatta kalma, çimlenme ve dormansi değerlendirmek için bir protokol mevcut.
Introduction
Bu yöntemin genel amacı güvenilir tarla koşullarında zamanla tohum sağkalım değerlendirmektir.
Toprak tohum bankaları geçici veya uzun yıllar 1,2 sürebilir ya toprak yüzeyinde, yüzey çöp içinde veya toprak profilinde içinde dağıtılan dağınık, canlı henüz Filizlenmemiş tohum, bir rezerv bulunmaktadır. Burada sunulan benzer tohum mezar yöntemleri birkaç düzine türleri kullanılarak 17 yıllık çalışmanın uygulandığı zaman, canlı tohumlar 3 test edilen türlerin birçoğu bulundu. Tohum dormansi hayatta fide koşullarının uygun kombinasyonu 4 ortaya çıkana kadar çimlenme tohum bir bloktur. uyuşukluk-serbest bırakılması için harici tetikleme çimlenme sağlar kadar uykuda kalan, tohumlar gibi düşük kış sıcaklıkları, besin sınırlama veya mevsimlik kuraklık gibi zor koşullarda hayatta kalmak için izin verebilirsiniz. uyku hali serbest bırakılması için tetikler f bıraktığı uzatılmış soğuk bileşiklere maruz değişebilirire, ya da hayvan mide asitleri 5 ile aşınmaya veya temas yoluyla tohum ceket fiziksel saldırı. çimlenme ipuçları cins veya belirli bir tür olması ve sık sık geçmiş doğal seçilim sonucu gibi, uyumsuz tohum çimlenme uygunsuz bir zamanda ortaya çıkar, ve tohum ya da fide ölüm veya kötü fide büyümesi neden olabilir hangi olmasıdır. Uyuşukluk dormansi sürümü (örneğin, fiziksel dinlenme, fizyolojik dormansi) mekanizmaları dayalı türde bir dizi ayrılır olsa da, 6 tohum dinlenmesi en az bir bitki biyolojisi konuları anlaşılamamıştır. Böylece, bireysel tohumlar veya ilgili ekolojik koşullarında tohum grupların durumunun değerlendirilmesi için izin alan çalışmaları sadece laboratuarda standart çimlenme testleri güveniyor daha yüksek açıklayıcı güce sahip.
Bilinen tohum özelliklerinin Sömürü uyuşukluk mekanizmaları içgörü sağlayabilir. Tohum dormansi Kontrol eşfizyolojik ve morfolojik faktörler genetik kontrolü de dahil olmak üzere mplex. Uyuşukluk mekanizmalarının genişliği tam bir anlayış henüz aydınlatılamamıştır edilecek olsa da, genel bir model iki bitki hormonları Gibberellik Asit (GA) ve Absisik Asit (ABA) 7 arasında bir geri besleme ilişkisi içeren ortaya çıkmıştır. ABA uykuda durumunu korumak için hizmet ederken onların dinlenmesi için bir fizyolojik bileşeni ile tohum bu genelleştirilmiş modelde, GA, dormansi serbest bırakılması için bir sinyal olarak hizmet vermektedir. Maternal genetik etkiler yanı sıra anne oluşturulan doku ve gelişim sinyalleri 8 ile dinlenmesi ve boyut gibi diğer tohum özellikleri, etkileyebilir anne büyüme ortamı. Anne fizyolojik ipuçları ile birlikte zaman zaman, dormansi muhafaza edebilir harici yapılar (veya tohum kaplamaları) oluşturulur. maternal tohum kaplamaları anne bitkinin genler tarafından kontrol edildiğinden, bunlar tohumun gerçek nükleer genetik makyaj yansıtmayabilir. Bizi vared kırpma vahşi melez bir diziden Helianthus annuus achenes 9,10. Böylece, farklı türler, çapraz tip, veya genotipleri dahil çalışma tasarımları hakkında bilgi toplamaktadır tohum özelliklerine bu anne vs embriyo genetik etkileri didiklemek için haçlar ekoloji ve tohum dinlenmesi, çimlenme ve hayatta kalma genetiği.
Tohum çimlenme ve hayatta kalma fenotipleri nüfus dinamiklerini nasıl etkilediğini önemli bir örnek kırpma vahşi hibrid bölgelerinde görülebilir. kültür bitkilerinin evcilleştirme sırasında Seçimi en uyuşukluk ortadan kaldırır ve büyüme mevsiminin dışında hayatta kalmak için tohumun yeteneğini azaltır. Oysa kırpma vahşi hibrid bölgelerinde ekili ve vahşi türleri arasında gen akışı, ya da melezleme, tohum bankası dinamikleri üzerindeki potansiyel etkileri ile, vahşi bir nüfus haline ekin allel (ya da genetik varyantları) reintroduce olabilir. ekili ve yabani akrabaları arasındaki melezleri potansiyel sahip olabilir kırpma vahşi hibrid bölgelerinde bulunduekimi (örneğin, kış aylarında) 11 dışında koşullarında hayatta beklenen sadece birkaç fenotipleri ile ara dinlenmesi fenotipleri çeşitli.
Bu yazının amacı, biz saha koşullarında doğal varyasyonu araştırmak için farklı zaman dilimlerinde çimlenme, dormansi ve tohum türlerinin bir dizi hayatta değerlendirebilir tohum mezar şerit yöntemi kullanılarak, nasıl göstermektir. Biz tohum özelliklerine anne ve embriyo genetik etkileri ile ilgilenen beri örnekte, 15 kırpma vahşi melez çapraz türlerinden ayçiçeği tohumu kullandı.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1. Birden fazla Türlerin veya Tek Türlerin Kontrollü çarpılar gelen Seed toplayın
Not: Anne (tohum üreten) ebeveyn olarak vahşi, karma ve mahsul türlerini kullanarak türler Helianthus annuus (ayçiçeği) içinde 15 çapraz türlerinden Bu örnek kullanılan tohum.
- büyüme mevsiminin sonunda, etiketli torbalarda olgun tohum kafaları toplamak. Standart formatta (yani anne x baba) ebeveyn çapraz tip etiketli zarf içerisinde saman ve yer tohumdan temiz bir tohum.
- aynı ebeveyn çapraz türlerinin eşit sayıda tohumun eşit miktarda kullanarak büyük zarf içinde birlikte toplu tohum. Örneğin, aynı anne ve baba anne ile 10 arası türlerinden 100 tohum. belirlenmesi (çapraz tip) bilgilerle zarfları etiketleyin. Bu büyük zarflar Bölüm 2 mezar şeritler doldurulmasında kullanılacak tohum ustalar vardır.
| anne Veli | |||
| babalık Veli | Düzensiz: WXW | F 1: WXC | Mahsul: CXC |
| Düzensiz: WXW | 0% WXW | % 25 F 1 XW † | % 50 CXW † |
| BC: WxF1 veya F1xW | % 12.5 WxBC | % 37,5 F 1 XBc | % 62.5 CxBC |
| F 1: WXC | % 25 wxf 1 † | % 50 F 1 xf 1 | % 75 CXF 1 † |
| F 2: F 1 xf 1 | % 25 wxf 2 | % 50 F 1 xf 2 | % 75 CXF 2 |
| Mahsul: CXC | % 50 WXC † | % 75 F 1 xC † | % 100 CXC |
Tablo 1. Ebeveyn çapraz tEl polinasyon. Ayçiçeği bitki vahşi hibrid çapraz türlerinden imal Dosya türleri tohum gömülme deneyde kullanım için elde tozlaşma üretilmiştir. Tüm çapraz tipleri için, anne ebeveyn ilk olarak listelenir ve baba ebeveyn ikinci listelendi. † ile işaretlenmiş Çapraz tip aynı% kırpma allel ancak farklı anne anne ile karşılıklı çapraz tip çiftleri bir parçasıdır. Pace, Ba ve diğ: Tablo daha önce yayınlanmıştır. (2015) 15.
2. Özel Tohum Defin Şeritler oluşturun
NOT: Bu örnekte, üç kaldırma tarih tedaviler ve 15 çoğaltır vardı, bu yüzden toplam 45 şeritler gerekli. Bu örnek şerit başına 15 bölme yüzden, biz 15, 7 x 10 cm bölmeleri ev için yeterli ince örgülü polyester kumaş ya da sivrisinek örgü gereklidir kullanır. Bkz: Şekil 1.
- Her tohum şerit için kumaş 20 x 105 cm şerit keserek başlayın.
- Daha sonra ikiye kumaşı katlayın, ölçün ve bölmeleri işaretleyin. Bir HIG kullanarakh-sıcaklık tutkal tabancası, bir kısa (10 cm) ucunu mühür. Tutkal biraz, fakat tamamen soğuduktan sonra, bir yalıtım oluşturmak için bir araya kumaş tarafı basın.
DİKKAT: Cilde temas uzamış ise Yüksek sıcaklık tutkal ve yapıştırıcı tabancası uçları yanıklara neden olabilir. - Her bölme işareti açık kısa sonuna kadar katlanmış kenarından Tutkal hatları. bölmeleri arasında deliksiz mühürler sağlamak için tutkal çizgisinde birlikte iki kumaş tarafı basın. bölmeleri arasında göç tohumları deneysel hata katkıda bulunur.
NOT: Şimdi bölmeleri oluşturulmuş olduğunu, katlanmamış kenar tohum ve onların kimlik bilgilerini (çapraz tip adı) almak için açık ve hazır kalmalıdır. - Rastgele her şerit için bölmelere tohum çapraz türleri atayın.
- tohum muntazam sayısı (her bölüm için 20 Bu örnekte kullanılan) tohum bölmeleri doldurun. Onlar edebiliyoruz böylece etiketler için, cut-to-fit plastik bahçe dart endüstriyel kalıcı işaretleri kullanmakmezar dayanabilir.
NOT: Alternatif etiketleme yöntemleri kullanılabilir. - Her bölme tohum ve etiket ile doldurulduktan sonra, yüksek sıcaklık tutkal tabancası ile hemen bölmesini kapatın. tüm tohum şeridi tamamen kapalı kadar devam edin. tekrarlanan, blok ve / veya tedavi bilgileri birinci bölme genel şerit etiketleyin.
NOT: Biz zamansal giderim, blok vardı ve blok içinde şeritler çoğaltmak beri çalışma için, bu bilgilerin tümünü dahil. - Bir sonraki şerit geçmeden önce gerektiği gibi bölmeleri ve spot tutkal arasındaki boşlukların kontrol edin.
- tohum muntazam sayısı (her bölüm için 20 Bu örnekte kullanılan) tohum bölmeleri doldurun. Onlar edebiliyoruz böylece etiketler için, cut-to-fit plastik bahçe dart endüstriyel kalıcı işaretleri kullanmakmezar dayanabilir.
Ayrı bölmelere için çapraz tip kimlik gösteren mezar şeridi Şekil 1. Defin tohum şerit şematik. Örnek. Anne ebeveyn ikinci listelenen baba ebeveyn ile ilk sırada listelenir. Renkler farklı anne ebeveynlik belirtmekürün için F 1 melez için mavi, vahşi sarı ve kırmızı ile. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
3. Alanında Tohum Şeritler Bury
- Evin şeritler belirtilen derinliğe kadar araziler Dig. analizde subplot gibi (bu örnekte, çapraz tip) ana arsa ve bölme kimlik olarak kullanılmak üzere şeritler rasgele kaldırma tarihi sağlamak için düzenlenmiş olan tek tek blok şeritler atama.
- toprakla şeritler örtün. Kesim metal örgü donanım bez gömülü şeritler üzerinde araziler ve yeri 10 cm'den büyük olması. toprak kenarları ve kapak bez kenarları korumak için U-işaretçilerine kullanın.
NOT: Bu kaplama Burrowing tohum yırtıcı hariç içindir. Başka bir seçenek olarak, Mercer ve ark., 13 inşa edilmiş ve saha loca yoğun gopher basınç nedeniyle tohum şeritleri çevrili donanım bez kutuları gömülüyon.) - şerit konumu ve kaldırma tarihleri açık yazılı kayıtları tamamlayacak ayırt renkli haritacılara ait bayrakları yerleştirin.
4. Şeritler ÇıkardıSARAYBOSNA ve Seed değerlendirin
- Belirli bir kaldırma bugüne kadar atanan tohum şeritleri Kazıp. onlar tohum değerlendirme yer alacak laboratuvar ulaşana kadar serin, nemli ortamda şeritler koruyun. Bu ıslak gazete şeritleri ambalaj ve taşıma veya gece boyunca nakliye için bir soğutucu yerleştirerek gerçekleştirilebilir.
- şeritler yeterli olduğunu, dış enkaz olacak karanlık değil tohumlar temizlenene kadar su içinde şeritlerden çamur ve toprak durulayın.
- Bir anda açık bir bölme kesmek için makas kullanın. çimlenmiş tohum sayın ve bunları kaldırın. Açıkça ölü tohumlar (örneğin, çürüyen ya da çürümüş tohumlar) sayın. ayrıca, Filizlenmemiş uyuyan ve ölü tohumları ayırmak için etiketli, ıslak Petri boyutlu kurutma kağıdı üzerine Filizlenmemiş tohumları yerleştirin.
- Filizlenmemiş ile Petri kapları yerleştirin25 ° C / 10 ° C 12 saat gündüz / gece: Standart çimlenme koşulları için bir büyüme odası setine tohumları. Tohumlar bir hafta çimlenme izin verin. , Canlı olarak bu saymak, ancak saha koşullarında çimlenme yoktu çünkü Filizlenmemiş anlamına herhangi.
- Büyüme odası işlemden sonra deneme tetrazolyum klorit (TZ) 13 kullanılarak canlılık açısından Filizlenmemiş tohumları kalmıştır. Bunu başarmak için, AOSA Tetrazolium Test Handbook 14 kullanılarak çalışma türleri için TZ uygun bir yüzde çözelti hazırlayın. Bu örnek için, bir% 1 çözeltisi kullanılır.
- yarısında Filizlenmemiş tohumları kesin ve bir yarısını yerleştirin embriyo ve endosperm tohum karşılamak için yeterli TZ çözeltisi içeren bir Petri kabındaki görünür idi (tohumlar, bu tamam yüzer olabilir).
- 30 ° C'ye ayarlanmış bir inkübatöre TZ Petri kapları yerleştirin ve 3 saat beklemek. arzu edildiği takdirde daha yüksek sıcaklıklar, daha hızlı bir reaksiyon neden olur, ancak bir risk overstaining: Not.
<li> inkübatör Petri kutularına çıkarın ve değerlendirir. lekesiz tohumlar ölü iken kendi embriyolar kırmızı lekeli tohumlar, germinable bulunmaktadır. ayırt edici marjinal durumlarda ve özellikle türler üzerinde daha fazla ayrıntı için AOSA Tetrazolium Test El Kitabı danışın.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Çeşitli anne ebeveynlik ve kırpma alel yüzdesi (Tablo 1) ile çapraz tip yüzde Filizlenmemiş çimlenmiş çıkarma tarihleri arasında farklılık ve ölü tohum (Şek. 2 ve 3). Üçüncü kaldırma (yay) tarafından Filizlenmemiş tüm tohumlar gerçekten atıl olduğu tespit edildi ise Filizlenmemiş tohumların TZ testini kullanarak, biz, ikinci kaldırma (erken ilkbahar) (Tablo 2) bazı gerçekten uyuyan tohumları bulundu.
Genel olarak, düşük mahsul alel yüzdeleri geç sonbaharda (Şek. 2) 'de uyumsuz çimlenme azalır. Erken bahar kaldırma, tüm çapraz tip yüksek çimlenme vardı, ama onların oranı ölü ve Filizlenmemiş (Şek. 3) farklıydı. anne vahşi çapraz tip Filizlenmemiş kalma olasılığının daha yüksek iken, özellikle ekin anne soy ile çapraz tip yüksek mortalite vardı. bahar tarafından,çimlenme bazı çapraz türleri için reddetti. karşı sezgisel iken, bu durum daha önce çapraz türleri çimlenme için mezar şeritler içinde tohum ölüm muhtemeldir. Buna göre, mortalite daha mahsul gibi çapraz tipleri için yüksek (yani, daha yüksek mahsul alel yüzdeleri olanlar) mahsul anne veliler tarafından üretilen (Şek. 3)
Geç sonbaharda ilk boşaltılması esnasında Şekil 2. Çimlenme. İlk çıkarma tarihindeki ayçiçeği kırpma vahşi çapraz tiplerinin Çimlenme, geç sonbaharda. Çapraz tip işaretli olarak mahsul alel oranları artırmak suretiyle y-ekseninde düzenlenmektedir. Anne ebeveyn, her çapraz türü için ilk olarak listelenir. Aynı harf tarafından takip Çimlenme en küçük kareler ortalamaları (se çubuklar ile) çoklu karşılaştırmalar için Tukey-Kramer ayarı kullanarak önemli ölçüde farklı değildir. Şekil önce yayımlanmıştır: PacE, ve ark. (2015) 15. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Şekil 3. Yüzde Çimlendirilmiş, erken ilkbaharda (C), bahar için ikinci kaldırma (erken ilkbahar) ve üçüncü kaldırma (yay) erken ilkbaharda (A), yay (B) çimlenmiş. Yüzde, Filizlenmemiş yüzde Filizlenmemiş ve mortalite ( D) ve erken ilkbaharda (E) ve yay (F) kaldırma tarihleri ölü oranında. Ayçiçeği kırpma vahşi melez çapraz türleri ile bitki alel oranları artırmak suretiyle düzenlenir çoğu bitki gibi y-ekseni üst ve y ekseni altındaki en vahşi benzeri üzerinde. Çapraz tip anne ebeveyn ilk olarak listelenir. En küçük karelerAynı harf tarafından takip (se barlar), çimlenmiş Filizlenmemiş ve ölü tohum için anlamı çoklu karşılaştırmalar için Tukey-Kramer ayarı kullanarak önemli ölçüde farklı değildir. Şekil önce yayımlanmıştır: Pace, ve diğerleri (2015) 15.. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
| çapraz tip | TZ Hareketsiz | Standart hata |
| WXW | 0.071 | 0,0131 |
| WxBC | 0.041 | 0.0126 |
| WxF1 | 0.089 | 0.0136 |
| WxF2 | 0.054 | 0.0126 |
| F1xW | 0 | 0.0126 |
| F1xBC | 0.013 | 0.0126 |
| WXC | 0.075 | 0,0131 |
| F1xF1 | 0.007 | 0.0126 |
| F1xF2 | 0.013 | 0.0126 |
| CXW | 0 | 0.0126 |
| CxBC | 0 | 0.0126 |
| F1xC | 0 | 0.0126 |
| CxF1 | 0 | 0.0126 |
| CxF2 | 0 | 0.0126 |
| CXC | 0 | 0.0126 |
Kalıcı bir tohum bankasına katkıda muhtemel Tablo 2. tohumları. En küçük kareler ikinci (erken ilkbahar) kaldırılması da Filizlenmemiş tohumların yüzde uyuyan kısmı için gelir. Tohumlar tetrazolyum klor kullanılarak uygulanabilir olduğu tespit edilmiştiruygun bir çimlendirme koşullarında inkübasyondan sonra ide. ., Ve diğerleri (2015) 15 Pace: Tablo önceden yayımlanmıştır.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Burada alanında önceden seçilen zaman aralıklarında tohum çimlenmesi, dormansi ve çeşitli tohum stoklarının mortalite gözlemlemek için tohum mezar şeritleri kullanmak için yöntemler sunuyoruz. tek tek paketler, paketlerin oluşturulması üzerinde şerit ve kompartman yapı (1) hız yalan yerine şeritler kullanmanın avantajları; ve (2) kullanım kolaylığı ve bir paket atlama veya istem dışı bir kaldırma tehlikesi olmadan bir hareket birden fazla bölme kaldırma hızı. Toprak zor ve saha koşullarının soğuk olduğunda Burada sunulan örnekte kaldırma tarihleri iki kış aylarında olduğu gibi, bu yöntem emek ve insan hatası riskini azaltır. Tohum şeritleri de araştırmacılar alanında insan hatasından değiştirilemez bir şekilde laboratuvarda bölmeli yerleri rastgele izin vererek deneysel lojistik yardım. kaldırma kez seçim yoluyla bu biz tahmin doğal çimlenme süreleri genişliği kapsayantohum bankası ile ilgili çıkarımlar yapmak için dinamikler-bizim örnek potansiyeli hibrit tohum tohum bankası inat ve gelecekteki nüfus katkıda için mümkün. Bu yöntemin bir sınırlama bölümleri arasında tohum bazı geçiş tohumun büyüklüğüne bağlı olarak, kaçınılmaz olabilir olmasıdır. Bu nedenle, (ve protokolde belirtildiği gibi) araştırmacıların tohum göç en aza indirmek için bölmeler arasındaki yüksek sıcaklık yapıştırıcı mühürler iki kez kontrol çok önemlidir.
tohum mezar deneyleri ile bazı sorunlar zamanlaması hakkında kurnazca düşünerek önlenebilir. Çalışma türlerinin doğal döngüleri ve çalışma amaçlarıyla ilgili zamanlarda mezar ve kaldırma tarihleri seçin. Bu kadar kısa sürede doğal tohum mümkün olan döken sonra bitki için en iyisidir. kaldırma Tarihler, normal çimlenme davranışının değerlendirilmesi için yoğun fide çıkışı zamanının gözleme dayalı seçilmelidir; önceki tarihlere eklenmesi de araştırmacılar, erken çimlenmesini yakalayabilirsiniz. because önceki çalışma bazı maladaptif çimlenme bazı çapraz tipte uyuşukluk eksikliği tamamlamak nedeniyle meydana olduğunu belirtti vardı, biz sadece bir kaç hafta mezar (kaldırma 1, geç sonbaharda) 15, 16 sonra çok erken kaldırma tarihini seçti.
Bireysel paketler üzerindeki şeritler avantajı bir düzine veya daha fazla bölme, gömülü kaldırılır ve sulama veya besin tedavilere birden kaldırma tarihleri her şeyi içeren karmaşık deneysel tasarımlar için izin biri olarak değerlendirilebilir olmasıdır. Müfettişler onlar temel etkisi olduğu anlayışı ile en çok endişe tedavileri izin blokları inşa etmek özen göstermelisiniz. Bizim örnek zamanla tohum davranışı vurguladı, ancak diğer tedaviler bu alan düzeni dikkate gerektirmez ve deneysel tasarım aşamasında blokları içinde düzenleme çoğaltmak istiyorum uygulanabilir. rastgele blok içinde şerit mezar konumunu atayarak, kaldırma zamanı ana etki olarak analiz edilebilir.
<Değerlendirme başlamadan önce, tüm şerit Petri ölçekli kurutma kağıdı önceden etiketlenmiş yığın hazırlanması Tohum şeritler çıkarılmasından sonra p class = "jove_content"> insan hatayı azaltır. Benzer şekilde, açılış ve bir seferde tek bir bölme değerlendiren doğruluğunu korumaya yardımcı olur. büyüme odalarına Filizlenmemiş tohumları yerleştirirken, gündüz ve gece sıcaklıkları çalışma türleri için en uygun tohum çimlenme koşullara uyan emin olun. Standart çimlenme koşulları (25 ° C / 10 ° C 12 saat gün / gece) türlerinin geniş bir çeşitliliği için uygun olabilir, ancak bu tüm türler için durum böyle değildir.Tohum boyama desenleri TZ tedavisi uygulanması ve değerlendirilmesi kuvvetle çalışma sonucu etkilediğini düşünün. Büyüme odası tedaviden sonra Filizlenmemiş tohumları değerlendirirken, belirli bir tür için TZ doğru konsantrasyonu için literatürü (veya AOSA Tetrazolium Test Handbook 14) başvurun. yargılamak iken bireysel TZ lekeli seeds, tohum canlılığı ve topraktan çıkan ve bir fide üretmek mümkün olabilir doku, solunum gösterebilir lekeli tohumları-zayıf çimlenmeye bir tohumun yeteneği arasındaki farkı hatırlamak önemlidir. Bu gerçekten uyuyan tohumlar optimum çimlenme koşulları altında Filizlenmemiş kalır olanlardır belirtti, ancak test edildiğinde hala güçlü yaşayabilir. Bu tohumlar kalıcı tohum bankasına katkıda bulunmak ve gelecek yıllarda çimlenmeye muhtemel tek tohumlarıdır.
Bu yöntemlerin uygulamaları bir dizi burada özetlenen ötesinde mümkündür. Tohum mezar şeritler deneysel birimleri ve deneysel tasarımlar hemen her sayı için özelleştirilebilir. Bunlar farklı türler, tohum boyutları, ya da koşullar / tedavileri karşılaştırmak için uygulanabilir. Bu yöntemlerle ilgili bina ekolojik ilgili bağlamda birçok türün temel tohum biyolojisi bilgilerini derinleştirmek potansiyeline sahiptir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Small coin envelopes | Any | ||
| Large coin envelopes | Any | ||
| fine meshed polyester mosquito netting | Any | ||
| high-temperature glue gun | Any | ||
| high-temperature glue stick refills | Any | ||
| Industrial permenant markers | Any | ||
| plastic garden labels | Any | ||
| scissors | Any | ||
| Shovel | Any | ||
| Metal mesh hardward cloth | Any | ||
| Surveyor's flags, multiple colors | Any | ||
| Wet newspaper | Any | ||
| cooler | Any | ||
| blotter paper | Any | ||
| petri dishes | Any | ||
| Temp. controlled growth chamber | Any | ||
| razor blades | Any | ||
| Petri dishes | Any | ||
| Tetrazolium chloride | Any | ||
| water | Any | ||
| heat incubator | Any |
References
- Walck, J. L., Baskin, J. M., Baskin, C. C., Hidayati, S. N. Defining transient and persistent seed banks in species with pronounced seasonal dormancy and germination patterns. Seed Sci Res. 15 (3), 189-196 (2005).
- Alexander, H. A., Schrag, A. M. Role of soil seed banks and newly dispersed seeds in population dynamics of the annual sunflower. Helianthus annuus. J Ecol. 91, 987-998 (2003).
- Burnside, O. C., Wilson, R. G., Weiseberg, S., Hubbard, K. Seed longevity of 41 weed species buried 17 years in eastern and western. Weed Sci. 44 (1), 74-86 (1996).
- Baskin, C. C., Baskin, J. M. Seeds: Ecology, biogeography, and evolution of dormancy and Germination. , Academic Press. San Diego, CA. (2001).
- Finch-Savage, W. E., Leubner-Metzger, G. Seed dormancy and the control of germination. New Phytol. 171, 501-523 (2006).
- Baskin, J. M., Baskin, C. C. A classification system for seed dormancy. Seed Sci Res. 14 (1), 1-16 (2004).
- Donohue, K., et al. Environmental and genetic influences on the germination of Arabidopsis thaliana in the field. Evolution. 54 (4), 740-757 (2005).
- Roach, D. A., Wulff, R. D. Maternal effects in plants. Ann Rev Ecol Syst. 18, 209-235 (1987).
- Pace, B. A., Alexander, H. M., Emry, J. D., Mercer, K. L. Seed fates in crop-wild hybrid sunflower: crop allele and maternal effects. Evol Appl. 8 (2), 121-132 (2015).
- Alexander, H. M., Emry, D. J., Pace, B. A., Kost, M. A., Sparks, K. A., Mercer, K. L. Roles of maternal effects and nuclear genetic composition change across the life cycle of crop-wild hybrids. Am J Bot. 101 (7), 1176-1188 (2014).
- Stewart, N. C., Matthew, J., Halfhill, D., Warwick, S. I. Transgene introgression from genetically modified crops into their wild relatives. Genetics. 4, 806-817 (2003).
- Mercer, K. L., Shaw, R. G., Wyse, D. L. Increased germination of diverse crop-wild hybrid sunflower seeds. Ecol Appl. 16, 845-854 (2006).
- Delouche, J. C., Still, T. W., Rapset, M., Lienhard, M. The tetrazolium test for seed viability. Mississippi Sta Uni Ag Exp Sta Techn Bull. 51, 1-63 (1962).
- Association of Official Seed Analysts. Tetrazolium Testing Handbook. , 653 Constitution Avenue NE, Washington, DC 20002, USA. (2010).
- Alexander, H. M., Emry, D. J., Pace, B. A., Kost, M. A., Sparks, K. A., Mercer, K. L. Roles of maternal effects and nuclear genetic composition change across the life cycle of crop-wild hybrids. Am J Bot. 10 (7), 1176-1188 (2014).
- Weiss, A. N., Primer, S. B., Pace, B. A., Mercer, K. L. Maternal effects and embryo genetics: germination and dormancy of crop-wild sunflower hybrids. Seed Sci Res. 23, 241-255 (2013).
