Summary
동맥 발가 벗김 부상 다음 재에 내피 세포의 세포 및 분자 메커니즘을 이해하는 것은 혈전증과 동맥의 재 협착을 방지하는 가장 중요하다. 여기에서 우리는 infrarenal 복부 대동맥의 재현 동맥 발가 벗김 부상에 대한 프로토콜을 설명합니다. 절차는 마우스 모델을 사용하여 내피 세포 재생을 조절하는 기전을 연구하기 위해 개발되었다.
Abstract
경피적 혈관 중재 균일 이후 혈전증과 재 협착을 초래할 동맥 발가 벗김 부상을 초래할. 이러한 합병증은 상처 마진 내에 재에 내피 세포의 손상에 기인한다. 그러나 재에 내피 세포의 세포 및 분자 메커니즘을 정의 할 남아있다. 동맥 발가 벗김 후 재 내피 세포 형성을 연구하는 여러 동물 모델을 사용할 수 있지만, 몇 가지 때문에 수술 제한 마우스로 수행됩니다. 이 형질 전환 마우스를 이용 라인 재에 내피 세포의 처리로 특정 유전자의 기여도를 조사 할 수있는 기회를 약화시킨다. 여기서는 외부 혈관 클램프를 사용하여 infrarenal 복부 대동맥에서 동맥 삭박 부상의 재현성 뮤린 모델을 만들기위한 단계별 프로토콜을 제시한다. 피브리노겐과 β-catenin이에 대한 부상 대동맥의 면역 세포 화학 염색 프로 혈전 표면의 노출을 보여각각 그대로 내피 세포의 국경을 거라고. 여기에 제시된 방법은 트랜스 제닉 마우스 모델에서 동맥 삭박 부상을 부과하기위한 고유 실제 공구를 생성 속도의 우수한 생존율 및 상대 기술 용이성의 이점을 갖는다. 이 방법을 사용하여, 연구자는 정상 또는 병리 적 조건하에 재에 내피 세포의 메카니즘을 해명 할 수있다.
Introduction
혈전증과 재 협착은 혈관 풍선 성형술 및 1,2 스텐트 등 경피적 혈관 중재를 받아야 환자에서 심각한 초기와 후기 합병증이다. 몇 가지 전략은 이들 합병증, 특히 이중 항 혈소판 요법 및 약물 방출 스텐트를 해결하는데 이용되어왔다. 그러나, 약간의 초점은 혈전증과 재 협착, 내피 세포 커버리지 (삭박), 즉 손실의 근본 원인에 배치되었습니다. 삭박 손상으로 인해 혈관 벽에 기계적 외상 중재 방법의 불가피한 결과이다. 이 기계적 외상은 혈액 3 순환에 손상 및 기저막 및 혈관 평활근의 보호 내피 층과 노출이 제거 될 수 있습니다. 이 분야에서 내피 세포의 손실뿐만 아니라 혈소판 부착 및 후속 혈전증을 촉진하는 프로 혈전 성 및 염증성 환경을 조성하지만,LSO 마이그레이션 및 신생 내막 비후 및 재 협착 (4)에서 얻어진 혈관 평활근 세포의 증식을 자극한다. 이러한 합병증 및 관련 치료는 인간의 건강에 영향을 미칠 중요한 병적 상태, 특히 재발 성 허혈성 질환 및 출혈 이벤트로 이어집니다.
다시에 내피 상처 여백에서 무 결함 부상의 혈전증과 재 협착 (5) 예방에 가장 중요하다. 스텐트의 범위가 6,7 스트럿과 부검 결과 및 동물 모델을 효과적으로 혈전증의 감소 속도를 보여 주었다. 약물 방출 스텐트는 평활근의 증식과 신생 내막의 증식을 억제하여 재 협착의 비율을 감소 동맥 재 내피 세포 형성에 상당한 장애와 후기 혈전증 3의 증가 속도가 발생할 고안. 불행하게도, 재 내피 세포 형성을위한 메커니즘을 이해하는 것은 주로 AP의 부족에 의해 제한 느린 프로세스왔다propriate 동물 모델 (8).
혈관 손상에 따라 내피 세포와 혈관 평활근 세포의 역할을 이해하기위한 여러 동물 모델 7,9,10 생성되었다. 래트 경동맥 풍선 손상 모델은 가장 특징이 있으며, 총 세포 및 분자 수준에서 11 삭박 손상의 효과를 연구하기 위해 사용되었다. 그럼에도 불구하고, 우수한 생존율과 동맥 발가 벗김 부상의 높은 재현성 쥐 모델은 누락 훨씬 더 다양한 설정에서 혈관 재생을 규명 할 수 여러 유전자 변형 라인을 활용할 필요가있다.
이 원고는 재현하고 수행 간단 동맥 발가 벗김 부상의 쥐 모델을 제시한다. 접근 방식은 여러 유전자 변형 라인에서 최소한의 이환율과 사망률을 보이고있다. 이 때문에, 유전자 변형 마우스 라인의 다양한 숫자,이 모델로 사용될 수있다발가 벗김 부상 후 재 내피 세포 형성의 기초가되는 분자 메커니즘을 규명.
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Protocol
참고 :이 프로토콜은 캘리포니아 로스 앤젤레스 대학에서 동물 연구위원회에 의해 승인되었습니다.
1. 수술 전 준비 및 마취
- 절차 전반에 걸쳐 무균 기술을 준수해야합니다.
- 증기 오토 클레이브를 사용하여 모든 수술 용품을 소독.
- 이 수술하는 동안 시각화를위한 실체 현미경 하에서 적절한 온도 (37 °에 C) 및 장소에 따뜻하게 할 수 있도록 이전 마취 유도 가열 설치류 수술 플랫폼을 켭니다.
- 마취 유도 챔버에 마우스를 위치시키고 1 L / min의 유속으로 4 % 이소 플루 란으로 유도한다.
- 조심스럽게 유도하는 동안 마우스의 호흡 속도 및 발바닥의 피부 색상을 모니터링 할 수 있습니다.
- 호흡 속도의 둔화 후, 유도 챔버에서 마우스를 제거하고 2.5 %의 별도의 원추형 두부 및 유지 보수 이소 플루 란 농도 얼굴 수술 준비를위한 예열 패드에 배치합니다.
- 마취의 적정성을 평가하기 위해 발가락 핀치를 수행합니다.
- 각막에 안과 연고를 적용하고 (5 ㎎ / ㎏) 피하 수술 전 카프로 펜을 관리 할 수 있습니다.
- 장소 마우스 부정사 사용 가위는 복부에서 머리를 제거합니다.
- 멸균 거즈 패드에 적용되는 세 가지 포비돈 요오드의 교류 스크럽 70 % 이소 프로필 알코올로 수술 영역을 준비합니다.
- 장소 마우스 원추형 두부에 얼굴 가열 설치류 수술 플랫폼에서 부정사 모든 사지를 확보하고 복부가 실체 현미경으로 볼 수 있도록 신중하게 위치 마우스입니다.
- 준비된 외과 영역의 각 가장자리를 따라 멸균, 접착제 드레싱을 놓습니다.
- 자발 호흡을 유지하면서 수술시 적절한 마취를 유지 이소 플루 란 농도를 적정.
2. Infrarenal 대동맥 클램핑
- , 메스를 사용하여 approximatel을 시작 복부의 중간 선 아래 3cm의 절개를합니다칼 모양의 과정 열등 y를 0.5 cm.
- 부드럽게 집게로 피부를 철회하고 잘 결합 조직을 잘라 미세 가위를 사용하여 복부 벽에서 떨어져 피부를 해부하다.
- 근육 벽에 0.5 % bupivacaine을의 0.05-0.1 ml에 적용하고 복부 장기를 노출하는 복벽에 2cm 절개를합니다.
- 출혈은 복부 벽을 따라 발생하면 면봉으로 부드럽게 압력을 적용합니다.
- 부드럽게 식염수를 적신 면봉 어플리케이터를 사용하여 내장을 들어 올립니다.
참고 : 복강 외부의 따뜻한 멸균 식염수를 적신 거즈 스폰지에 jejunal과 회장 동맥과 장소에 외상을 피하기 위해주의해야합니다.- 수분 손실을 방지하기 위해 다른 따뜻한, 멸균 식염수를 적신 거즈 스폰지로 장을 커버.
- 직장을 lateralize과 복막을 노출하는 트랙터를 놓습니다.
- retroperitone의 시각화에 필요한 작은 거즈 패드를 배치UM 사용 횟수를 추적.
- 오른쪽 신장의 열등한 극의 수준에서 대동맥에 retroperitonotomy는 측면하기 위해 날카로운 해부 집게를 사용합니다.
주 : 하대 정맥 또는 주변의 혈관을 손상하지 않도록주의하십시오.- 퉁명스럽게 대동맥 떨어져 복막 조직을 해부하다 조심하면 하대 정맥 또는 주변의 혈관을 관통하지.
- 적어도 1 분, 또는 다른 지정된 시간 동안 대동맥을 통해 혈관 클램프를 배치하고 시각적으로 원위부 대동맥의 박동의 부족을 관찰하여 교합을 확인합니다.
- 혈관 클램프를 제거하고 지혈을 확인합니다. 지혈 달성과 혈액의 활성 혈관 외 유출이 볼 수없는 경우 보장된다.
- 복강에 0.5 ㎖의 식염수를 추가하고 식염수가 점점 피가 섞인 될 경우 평가하여 혈관 외 유출을 확인합니다. 이것이 사실 인 경우, 1 분을 보장하기 위해 식염수 침지 어플리케이터를 사용하여 온화한 압력을 적용지혈.
- 복막의 시각화에 도움과 복부에 현장에서의 장을 대체 할 놓인 거즈 패드를 제거합니다.
- 예열 멸균 식염수를 사용하여 복강 관개.
개복술과 피부 3. 폐쇄
- 5-0 꼰, 흡수 단일 실행 봉합사를 사용하여 복벽 근육 층을 닫습니다.
- 상처 클립 이후 다음 1-3 폴리머 접착제의 방울과의 긴밀한 피부는 접착제가 설정되면.
4. 복구 및 수술 후 평가
- 새장 바닥에 음식과 물을 가열 패드에 복구 케이지에 마우스를 전송합니다.
- 밀접하게 호흡 곤란의 징후 마우스를 모니터링 할 수 있습니다. 기관의 가이드 라인에 따라 수술 후 48 시간 동안 매일 카프로 펜 (5 ㎎ / ㎏)을 관리 할 수 있습니다.
- 이 흉골 recum을 유지하기 위해 충분한 의식을 회복 할 때까지 무인 동물을 두지 마십시오bency.
- 음식과 물과의 정상 케이지에 마우스를 돌려줍니다.
- 완전히 회복 될 때까지 다른 동물의 회사에 수술을 한 동물을 반환하지 않습니다.
- 열개 대한 매일 상처를 평가하고 수술 후 14 일에 클립을 제거합니다.
5. 대동맥 박리 및 염색
- 발가 벗김 부상 다음 관심있는 특정 시점을 기준으로 제사를 선택 마우스.
- 이소 플루 란 흡입을 통해 마우스를 희생하고 즉시 혈관 평활근의 이완을 유발하는 5 mg을 메타 콜린 클로라이드로 주입.
- 호흡 정지, 각막 반사와 운동 부족의 부족에 의한 사망 확인 후, 10 분 동안 왼쪽 심장 심실을 통해 100 mmHg로의 관류 압력 인산염 완충 생리 식염수에 4 % 파라 포름 알데히드로 관류.
- 조심스럽게에서 그대로 복부 대동맥을 구분 해부 실체 현미경을 사용하여주변 조직.
- 장골 분기에 신장 동맥과 꼬리에 대동맥 주동이를 가로로 쪼개다와 지느러미 표면을 따라 세로 절개를 통해 열었습니다.
- 더 이상 2 시간 동안 최대 고정 용 내강면이 35mm 실리콘 코팅 접시 있지만 이상 12 시간에 평평 대동맥을 고정. 이어서, 조직 절편 어느 임베디드 또는 얼굴 전체 실장 EN 면역 세포에서 사용될 수있다.
- 마운트는 공 초점 현미경 유리 슬라이드에 coverslip에 직면 내강면 대동맥 스테인드.
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Representative Results
85 마우스는 infrarenal 복부 대동맥 클램핑이 보고서에 기술 된 생존 수술 기법을 겪었다. 생존율은 85.9 %였다. 수술 합병증은 장 출혈과 큰 혈관 천공, 5.9 %와 3.5 %의 사망률의 결과로 각각 (표 1) 포함. 마취에서 회복 한 후, 마우스는 일반적으로 걸어 열등한 사지에 허혈성 손상의 징후를 표시하지 않습니다. 어떤 체중 감소 또는 식욕의 부족은 언급되지 않았다.
(A)없이 (B) 대동맥과 실체 현미경 개복술 및 복막 절개 다음 infrarenal 복부 대동맥의도 1a 및도 1b에 표시 이미지. 도시 된 바와 같이, 대동맥의 폭을 따라 삭박을 위해 그 전체 대동맥 폭을 고정하는 것이 중요하다. 우리의 프로토콜은 발견 날카로운 벤드 슈워츠 마이크로 세르을 사용하여1.75 mm와 '강한'클램프 보도의 턱 폭 벌금은 최소 클램프 시간 대동맥의 전체 폭에 걸쳐 최대 규모의 지속적인 상처를 생산했다. 그러나, 다른 클램프 변수 부상 크기 (도 1C) 여러 가림 시간 간격으로 시험 하였다. 제시된 결과의 나머지는 상술 한 클램프를 사용하여 제조 하였다.
대동맥의 조직 학적 평가는 H & E 염색에 의해 입증로서 기본이되는 평활근 세포 층에 적당한 손상 내피 안감의 완전 발가 벗김을 보여줍니다. 내피의 삭박은 비록 다른도 (그림 2)에, 10 초, 10 분 모두에서 발생한다. 완전한 동맥 삭박 필요한 최적 대동맥 시간 간격을 결정하기 위해, 마우스를 10 초, 1 분, 10 분 동안 클램핑 시행하고, 상기 프로토콜에 기술 된 바와 같이 즉시 분석을 위해 희생되었다. 아르발가 벗김의 클램프 타이밍을 (그림 3) 증가와 함께 증가했다. 10 초, 약 0.75 mm (2)의 불완전하고 누덕 누덕 기운 발가 벗김 부상에서 피브리노겐이 발가 벗김 부상 마커 역할을 누덕 누덕 기운 피브리노겐 염색에 의해 확인되었다. 대동맥 클램프의 십 분 사지 허혈 및 재관류 손상의 위험이 높은 것으로 간주되었다 약 1.2 mm (2)의 완전 무 결함 내피 지역, 클램프의 시간 그러나이 금액을 생산했다. 따라서, 우리는 허혈 손상의 증거없이 근처 완전한 동맥 발가 벗김의 상해를 평균 발가 벗김의 0.88 mm 2 영역을 생성 충분한 대동맥 클램핑, 1 분 간주.
대동맥의 1 분으로 삭박 손상의 정도는 600 μm의 지름 삭박 0.88 mm 영역이 제조 매우 재현 (도 3 및도 4). 그만큼피브리노겐 염색 강도는 나중 시점에서 원래의 손상을 확인하기에 충분하다. (4)는 높은 재현성 부상을 만들어 24 시간 전에 희생 클램핑 대동맥의 1 분을받은 세 마우스 피브리노겐 염색을 보여준다. 여섯 대동맥의 손상 후 24 시간 염색 피브리노겐의 측정 (0.14 = p)를 부상 직후 언급 약 0.88 mm이 부상을 통계적으로 유사한 0.81 mm 2 (그림 5A)입니다. 손상되지 않은 내피 세포에 비해 발가 벗김 부상 (그림 5B)로 재에 내피 세포를, 피브리노겐 염색 위에 놓인 표시와 내피 세포 마이그레이션 부상 쇼 후 상처 마진 24 시간. 평균적으로 0.88 mm 2 삭박 손상을 완전히 재에 내피 세포를 약 3 일. 그러나,이 접근법은 상기 더 큰 삭박 부상을 생성하도록 구성 될 수있다했다. 여러 번, 각 클램핑1 분 동안, 주동이의 infrarenal 대동맥을 따라 꼬리에 3.7 mm 2 삭박 부상을 생산했다. 이 접근법은 손상 중막을했지만, 우리는 상기 클램프 손상의 결과로 복부 대동맥의 박리를 관찰하지 못했다.
이 프로토콜은 infrarenal 복부 대동맥 안전하게 동맥 삭박 부상을 만들고 내피 재생 측정의 목적을위한 뮤린 모델에서 수행 될 수 있음을 보여준다.
그림 1 :. Infrarenal 복부 대동맥 고립은 고립 된 infrarenal 복부 대동맥은 (A)없이 혈관 클램프 (B)로 표시됩니다. 다양한 길이와 클램프를 눌러 강도의 여러 클램프는 일관된 부상 (C)를 제공하는 하나를 선택하는 데 사용되었다. 슈워츠 마이크RO Serrefine (화살표) 최대 연속 상처를 생산했다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 2 :. 비 손상 마우스의 infrarenal 복부 대동맥 부분 (A)의 내피 발가 벗김 H & E 염색의 효율성과 10 초 (B) 및 대동맥 클램프 (C)의 10 분 후. 핵 염색의 결핍에 의해 검증 될 수있는 관은 클램핑 완전히 내피 층 denudes. 또한 평활근 세포 핵의 손실이 중막의 손상을 보여줍니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
도 3. 클램프 시간 관계는 길이 상처 Infrarenal 복부 대동맥을 10 초, 1 분, 10 분 동안 수행 하였다. 바로 부상 다음, 면역 세포는 가짜 수술 및 표시 (A)와 같은 높은 해상도 (B)에서이 시점에 대한 얼굴 욕실 하였다. (보라색) 피브리노겐 부상의 영역을 식별합니다. β-catenin이 (빨간색)은 내피 경계를 식별합니다. 별표 (*)는 상기 클램프 애플리케이션 영역을 표시한다. β 카테닌의 유무 부상의 영역에서 내피 세포의 결여를 나타낸다. (C)을 클램핑하는 시간을 증가 (각 시점을 위해 N = 2) 삭박 면적을 증가시키는 것으로 보여 삭박 부상 영역의 마커로서 피브리노겐 염색법을 사용한다. 오차 막대는 표준 편차를 나타냅니다. 시간을 클릭하세요감수는이 그림의 더 큰 버전을 볼 수 있습니다.
그림 4 :. 1 분 동안 대동맥 클램핑 다음 상해 지역 24 시간의 식별, 대동맥 해부와 내막을 폭로 절단 하였다. 4 % 파라 포름 알데히드에 고정 후, 면역 세포는 en 얼굴 하였다. 피브리노겐 (보라색) 부상의 면적을 식별 (A). 상처 마진 (B) 및 도시 상처 (C) 내에서의 높은 배율. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 5 : 삭박의 재현성부상 및 재에 내피 세포의 식별. 스물 네 시간은 부상 다음, 대동맥은 en 얼굴 진술과에 새롭게 면역 세포로 해부했다. 삭박 부상 용 마커로서 피브리노겐을 사용하여 재현성 부상이 0.81 mm (2)의 평균 삭박 면적 (A)에서 관찰된다 (N = 6). 높은 해상도의 이미지가 보여 그 상처 마진 전시 피브리노겐 염색 및 손상되지 않은 내피 세포 (C)에 비해 마이그레이션 내피 세포 (화살표, 보라색 염색) (B). 오차 막대는 표준 편차를 나타냅니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
표 1. 85 마우스의 수술 및 수술 후 사망률 총 underw85.9 %의 생존율과 엔트 생존 infrafrenal 복부 대동맥 클램핑. 여덟 마우스 (9.4 %)이 때문에 장 출혈 또는 큰 혈관 천공으로 수술을 생존하지 않았다. 네 마우스는 수술 후 사망했다.
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Discussion
때문에 이러한 풍선 혈관 성형술 및 혈관 스텐트 삽입술 등 경피적 중재에 동맥 발가 벗김 부상, 초기와 후기 혈관 혈전증과 재 협착 발생 및 재발 성 허혈성 사건 3,12에 기여한다. 흥미롭게도, 수술, 혈관 클램프는 또한 경피적 여부 13 열려있는 혈관 절차를받는 환자에게 문제의 범위를 확대하고, 동맥 삭박의 원인으로 관여한다. 손상된 내피 세포 형성 재 협착 및 혈전증 상당히 인식 원인이지만, 재에 내피 세포를 둘러싸고있는 분자 메커니즘을 규명하기 어려웠다. 동물 모델은 동맥 발가 벗김 부상 다음 재에 내피 세포의 더 이해를 얻을 수있는 필요성이되었다.
동물 모델을 기존의 동맥 발가 벗김 부상의 세포 및 분자 효과를 연구하기 위해 돼지, 토끼와 쥐 7,9-11 사람들을 포함한다. 설치류 모드ELS 자주 쥐 경동맥 풍선 손상 모델 마우스 와이어 손상 모델 랫트 및 마우스 결찰 모델 (14, 15)를 포함 이용했다. 래트 경동맥 풍선 손상 모델은 가장 특징으로 가장 일반적으로 사용되는 생쥐 린드너 설명 경동맥 손상 절차는 형질 전환 균주를 16, 17를 사용하는 가능성을 넓혔다된다. 유전자 변형 마우스 모델에서는 약리학 적 저해제와 관련된 잠재적 오프 - 타겟 효과 특이성 문제의 발생이 감소하고, 관심있는 특정 요소의 조직 - 특이 적 및 조건 적 절제를 허용 할 수있다. 그럼에도 불구하고, 마우스의 경동맥 손상은 매우 도전적이고 수행하기 어렵다.
여기에 설명 된 infrarenal 복부 대동맥의 쥐 동맥 발가 벗김 모델을 적용하기가 비교적 용이하고 생체 내에서 큰 구경 동맥의 재에 내피 세포의 연구를 할 수 있습니다. 수술 허용 SUR을 나타내85.9 %의 천공되지 비율. 상처 길이는 클램프 턱 치수, 클램프 언론의 강도와 시간 혈관 클램프 용기를 폐색되는 길이에 따라 달라집니다. 이 모델은 높은 재현성 인 0.88 mm 2 삭박 부상을 생산하기 위해 1 분 동안 10 × 1.75 mm의 턱 차원과 '강한'클램프 프레스를 사용합니다. 상처 길이의 변동성은 다른 턱의 크기와 혈관 폐색의 길이가 관찰되었다. 또한 삭박 영역 직렬 입쪽에서 꼬리에 infrarenal 복부 대동맥 클램핑함으로써 확장 될 수있다. 따라서,이 모델은 하나의 연구 목적에 맞게 조작 할 수있다 발가 벗김 부상 크기에 다양한 기능을 제공합니다.
부상에 따라 손상 및 내피 폐쇄 비율의 정도를 평가하기 위해, 면역 세포는 내피 세포의 핵 및 t를 식별 피브리노겐을 식별하는 내피 세포 연접 또는 ERG를 식별 β 카테닌에 대해 발생 된 항체와 다양한 시점에 수행 된그는 지역 부상. 재에 내피 세포가 발생한 때, 피브리노겐 염색 재 내피 세포 형성의 정도에 비해 원래의 부상을 확인 하였다. 피브리노겐의 강한 염색이 크게 내피 세포의 재성장 후 감쇠되는 동안, 충분한 강도도 이상 사일 후 수술 후 원래의 부상을 식별하기 위해이 남아있다.
이 모델은 제한이없는 것은 아니다. 임의의 동물 모델로서, 뮤린 수술 양호한 수술 기법이 필요하고, 학습 곡선을 수반한다. 해부가 제어 할 때때로 불가능 관리, 수행되지 않은 경우 마우스는 신속하게 혈관 천공에 굴복 할 수 있습니다. 수술 사망의 가장 흔한 원인은 각각 5.9 %와 3.5 %에서 장 출혈과 큰 혈관 천공을 포함. 그러나주의 절개로 출혈은 드문 혈액 손실은 일반적으로 우리의 경험에서 아래 0.1 ml의 유지 될 수있다. 대동맥과 적절한 클램프 또한, 적절한 해부위치는 재현 부상에 필수적이다. 말초 동맥 박동을 검사하는 것은 대동맥 모든 복막 조직 부착을 제거 완전한 대동맥 폐색을 확인하는데 사용될 수 있지만, 세척 중단 상처를 얻기에 매우 중요하다. 앞서 언급 한 바와 같이, 중간막 손상 대동맥의 절차에 유의한다. 그러나, 중간 평활근 죽음 이후의 신생 내막의 증식 (18)의 연장 또는 만성 혈관으로 인해 스텐트 시술을 확장하고, 결과의 잘 알려진 결과이다. 우리의 모델에서 내측 손상은 우리가 어떤 수술 후 사망이없고이 마우스는 수술 후 최대 2 개월 살아남은으로, 병리학 적 후유증이 나타나지 않습니다.
우리는 좋은 생존율과 재현성있는 infrarenal 복부 대동맥의 동맥 발가 벗김 부상의 다양한 쥐 모델을 제시한다. 이 모델은 트랜스 제닉 마우스 모델의 다수 동맥 손상을 연구하기위한 필요성을 채운다. 입양 오이 뮤린 모델 f를 정상 및 병리학 적 상태에서 재에 내피 세포의 분자 메커니즘을 규명하기 위해 사용될 수있다.
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Disclosures
저자는 공개 아무것도 없어.
Acknowledgments
이 작품은 MLIA에 건강 (HL130290)의 국립 연구소를 엘리와 재생 의학의 Edythe 넓은 센터에서 보조금 지원 ASS과 AIM, 필립 J. Whitcome 원정대는 AIM하기에 UCLA 교육 프로그램에 줄기 세포 연구하고 있었다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Zeiss Discovery.V12 Stereomicroscope | Zeiss | 495037-9904-000 | |
| Rodent Heated Surgical Platform | Protech International | RES4000 | Heated platform for body temperature maintenance with nosecone for anesthestic maintenance and on which surgical procedure is performed |
| Isoflurane | Henry Schein | 50033 | 4% Induction; 2.5% Maintenance |
| Isoflurane Vaporizer | Summit Medical Equipment | 470062 | |
| Stryker T/Pump Warm Water Recirculator | Kent Scientific | TP-700 | |
| Artifical Tears Lubricant Opthalmic Ointment | Akorn Animal Health | 17478-162-35 | |
| Carprieve (Carprofen) | Norbrook Laboratories | NDC 55529-131-01 | |
| Oster™ A5 Professional Animal Clipper | M.Schneider & Sons Inc. | 78005010 | Use with animal clipper size 40 |
| Adjustable Wire Retractor | Fine Science Tools | 17004-05 | |
| Schwartz Micro Serrefines - Sharp Bend | Fine Science Tools | 18052-03 | |
| Surgical Instruments | Fine Science Tools | sharp dissecting forceps, blunt forceps, fine scissors, spring scissors, hemostat | |
| 0.5% Marcaine | Hospira | 0409-1610-50 | |
| 5-0 Suture, Vicryl | Fisher Scientific | NC0189890 | tapered needle |
| Vetbond | Fisher Scientific | NC0304169 | |
| Falcon® 35 mm Not TC-Treated Easy-Grip Style Bacteriological Petri Dish | Corning | 351008 | |
| Sylgard 184 Silicone Elastomer Kit | Dow Corning | 3097358-1004 | |
| Dissecting pins | Fisher Scientific | NC9681411 |
References
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