Abstract
Electrochemotherapy (ECT) هو نهج المحلي الذي يستخدم لعلاج الأورام الصلبة من histologies مختلفة. ويستند آلية على غشاء الخلية permeabilization عن طريق "Electroporation لل". لتحقيق "Electroporation لل" من الخلايا، يتم إنشاء نبضات كهربائية بواسطة مولد وتسليمها إلى الأنسجة المستهدفة عن طريق استخدام الأقطاب الكهربائية. Electroporation للهو أسلوب المادي الذي يستخدم لإدخال جزيئات، مثل الأدوية القاتلة للخلايا، في الخلايا التي لا يمكن أن يمر غشاء الخلية من تلقاء نفسها. في electrochemotherapy، في الوقت الراهن، يتم استخدام سيسبلاتين وبليوميسين سريريا. فعالية مضادة للورم Electrochemotherapy عالية، على سبيل المثال تصل إلى استجابة كاملة 100٪ من الخلايا البدينة الكلاب الأورام وقد تحقق أقل من 2 سم 3. بالإضافة إلى ذلك، electrochemotherapy يمكن أن تستخدم لعلاج الأورام غير صالحة للعمل. واحدة من الخصائص المهمة للelectrochemotherapy هو أنه يمكن أن تكون فعالة كعلاج لمرة واحدةفقط. ومع ذلك، في حالة فشل أو استجابة الورم جزئية ويمكن تكرار ذلك عدة مرات مع فعالية مساوية أو تحسينها. Electrochemotherapy هو بالفعل العلاج القياسي للأورام الجلدية وتحت الجلد من histologies مختلفة في الأورام البشري والطب البيطري. وعلاوة على ذلك، العديد من الدراسات السريرية استغلال electrochemotherapy للأورام عميقة الجذور هي مستمرة.
Introduction
العلاج بالصدمات الكهربائية هو أسلوب الجر المحلية لعلاج أورام histologies مختلفة. النتائج الاجتثاث من المخدرات التي يسببها قتل الخلية، والتي هي نتيجة لزيادة تراكم المخدرات في الخلايا بسبب تغير نفاذية غشاء الخلية الناجمة عن النقل المباشر للنبضات الكهربائية على الجلد حول الورم بعد حقن intratumoral أو في الوريد من الدواء. الآلية الرئيسية من العلاج بالصدمات الكهربائية هو تعزيز فعالية الأدوية القاتلة للخلايا عن طريق زيادة تراكم المخدرات داخل الخلايا، التي electropermeabilization غشاء الخلية (Electroporation لل) 1،2. يسبب Electroporation للزيادة امتصاص الدواء من اثنين التخلاء: بليوميسين وسيسبلاتين، والتي هي الأدوية ماء مع ضعف نفاذية الغشاء. ويرجع ذلك إلى زيادة السمية الخلوية من بليوميسين وسيسبلاتين في موقع تطبيق نبض الكهربائية، وهناك حاجة إلى جرعات الدواء منخفضة لفعالية مضادة للورم جيدة وبالتالي لا أو الحد الأدنى من الآثار الجانبية النظامية من الأدوية وobservالطبعة 3. وهناك سمة أخرى من العلاج بالصدمات الكهربائية هو تأثير الورم antivascular الذي ينتج أولا في قفل الأوعية الدموية، أي، انخفاض تدفق الدم داخل الورم، وبالتالي الإبقاء على التخلاء داخلها، وثانيا في الأوعية الدموية وتعطيل العمل، أي، القتل المباشر من الخلايا البطانية من الأوعية الدموية الصغيرة مما يؤدي إلى ورم ثانوي موت الخلايا 4-6. الآلية الثالثة من فعالية مضادة للورم العلاج بالصدمات الكهربائية هو تنشيط الجهاز المناعي كما ECT يتسبب استجابة مناعية بواسطة المستضد الورم سفك في محيط الورم. مشاركة الجهاز المناعي هو أمر حاسم لاستئصال كامل الورم 7.
وقد أظهرت ECT إمكانات كبيرة في علاج الأورام البشري، حيث يتم استخدام العلاج بالصدمات الكهربائية بالفعل كعلاج القياسية للأورام الجلدية وتحت الجلد حيث يعرض ما يصل إلى 80٪ من الردود موضوعية 3. بالإضافة إلى ذلك، يستخدم العلاج بالصدمات الكهربائية في العديد من الدراسات السريرية علاج الانبثاث ورم في المخ
كما أظهرت دراسة مقارنة الجراحة مع العلاج بالصدمات الكهربائية في علاج أورام الخلايا البدينة في الكلاب أن العلاج مع العلاج بالصدمات الكهربائية أسفرت عن 70٪ من الردود كاملة في حين أسفرت عملية جراحية في 50٪ من الردود الكاملة 11 مما يدل على أن العلاج بالصدمات الكهربائية هو العلاج تعادل الجراحة. بالإضافة إلى ذلك، ECT يمثل طريقة بديلة لعلاج الأورام الصلبة إلى العلاج الجراحي، وتحديدا في تلك الحالات عند أصحابها لا يوافق على عملية جراحية أو إذا كانت الأورام يصعب المكوس مع هوامش واضحة يرجع في معظمه إلى همالموقع (على سبيل المثال، التسلل الأوعية الرئيسية، وأورام الرأس أو الساق، في منطقة الشرج، إلخ). والهدف من هذه الورقة هو تحديد الإجراءات التشغيلية للECT إعطاء تعليمات لاستخدام سيسبلاتين وبليوميسين في تركيبة مع تطبيق نبضات كهربائية من أجل علاج مأمونة ومناسبة الأورام الجلدية وتحت الجلد في الكلاب والقطط.
Protocol
تمت الموافقة على هذا البروتوكول من قبل اللجنة الأخلاقية التابعة لوزارة الزراعة والغابات والغذاء ويتبع مبادئها التوجيهية. تم التحقق من صحة البروتوكول على أكثر من 80 الكلاب والقطط 20.
يتكون العلاج بالصدمات الكهربائية لإدارة سيسبلاتين أو بليوميسين والتعرض العقيدات الورم إلى نبضات كهربائية: ملاحظة.
1. اختيار المريض
ملاحظة: اختيار المريض يسمح للطبيب لتحديد ما إذا كان المريض غير مناسبة أو عدم الاستفادة من هذا العلاج.
- تقييم تاريخ المريض (بيانات عامة عن عمر، وتولد والجنس وجود أي أمراض متزامنة، نوع الورم، وتطور الورم مع مرور الوقت، والعلاجات السابقة ونتائجها، وتكرارها، وسرعة تكرار، توقعات المالك عن نجاح التنفيذ ل العلاج).
- إجراء الفحص البدني للمريض
- تقييم الورم في التفاصيل من اجل مأك الممكن التشخيص التفريقي السريري وإجراء نضح إبرة دقيقة لتقييم الخلايا واحتمال خزعة الأنسجة لتقييم الأنسجة من أجل تحديد منطقة العلاج: إذا تم عرض ورم الغازية المحتملة علاج هوامش واسعة (اتخاذ قرار حول حجم هوامش المعالجة وفقا لتوصيات لأي علاج آخر لنفس النوع من الورم، على سبيل المثال، الصاري ورم الخلايا 2R ≤ 1 سم، ينبغي أن يعامل 1 سم الهامش، ص - دائرة نصف قطرها).
- تقييم عدد وحجم العقيدات من أجل إعداد نهج العلاج.
- الفحص العام
- تنفيذ فحص عام كامل من أجل جعل انطلاق المرض وتحقق:
- إذا لم يكن هناك مرض المتزامنة الأخرى التي يمكن أن يحول دون علاج، إذا كان المريض لديه تاريخ من أي عدوى مزمنة (وفقا لعلم الأوبئة في منطقة معينة) أو المرض الذي يمكن أن يغير الدموية أو coagulat محصنة بوساطةالتغييرات أيون (إجراء اختبارات محددة)، إذا كان هذا الحيوان قادر على الصمود أمام سلسلة من sedations عميقة و / أو التخدير العام، وإذا كان المريض يعاني من حساسية للسيسبلاتين (الجرعة المعيارية هي 60-70 ملغم / م مساحة سطح الجسم 2/21 د) أو بليوميسين أو قد حصل على جرعة تراكمية من بليوميسين تتجاوز 400،000 وحدة دولية / م 2.
- استخدام تقنيات التصوير التشخيصي (التصوير الشعاعي للصدر وفحص الموجات فوق الصوتية للبطن) من أجل التحقق من أي الانبثاث الممكنة وفقا لنوع الورم.
- تنفيذ فحص عام كامل من أجل جعل انطلاق المرض وتحقق:
2. تحليل مختبر
- العمل في الدم
- أداء الدم الكامل يحلل مع لوحة الكيمياء الحيوية للنيتروجين اليوريا في الدم (BUN)، والكرياتينين، ألانين، الألانين (ALT)، الفوسفاتيز القلوية (AF) والكالسيوم لاستبعاد أمراض الكلى والكبد المزمنة المتقدمة والممكنة متلازمات الأباعد الورمية الأكثر شيوعا لتحديد المرحلة السريرية التي قد يكون لها EFfect على التكهن.
- هل تحليل الدم محددة إضافية:
- في حال عدم إعطاء المريض أي دواء قد تؤدي لتغيير التغيرات في قدرة التجلط، والتحقق من الشخصية التخثر.
- في حالة استخدام العلاج الغازية (أقطاب إبرة)، والتحقق من عدد الصفائح الدموية. يجب أن يكون عدد الصفائح الدموية> 100 أو في الحالة هو <100، والوضع تجلط الدم (PT، APTT، الفيبرينوجين، D-ديمر) يجب أن تكون طبيعية.
- في حالات محددة وفقا لأمراض الأورام والحالة السريرية للمريض فحص البروتين الكلي، الزلال، الفسفور، الصوديوم (نا) والبوتاسيوم (K)، كلوريد (الكلور) وتركيز الليباز.
- ورم (ق) التحليل النسيجي
- تحليل الأنسجة غير ضرورية إذا تم إجراء تشخيص الخلايا سابقا. في حالة بعض أنواع الأورام حيث الصف النسيجي هو عامل حاسم النذير (على سبيل المثال، الخلايا البدينة الأورام) أداء الهيماتوكسيلين ويوزين ستاining 16.
ملاحظة: خزعة (الجراحي أو "لكمة") ويمكن إجراء قبل العلاج بالصدمات الكهربائية خلال نفس الزيارة. في أي حال، فإن الممارسة السريرية الجيدة لتشخيص نوع الورم.
ملاحظة: بعد تقييم الحالة بالكامل مناقشة مستفيضة وتوضيحات مع الحاجة صاحب الحيوان. شرح لمالك ما هو العلاج بالصدمات الكهربائية وما يمكن توقعه من العلاج بالصدمات الكهربائية من حيث النتائج السريرية. مناقشة مع المالك مسار العلاج: عدد جلسات العلاج بالصدمات الكهربائية تحت التخدير العام أو التخدير العميق، والمدة الإجمالية للعلاج، وتكلفة العلاج، واحتمالات تكرار. الحصول على موافقة خطية من المالك في حالة إدراج المريض ضمن تجربة سريرية من العلاج بالصدمات الكهربائية، وإذا كان المريض مؤهلا فعلا.
- تحليل الأنسجة غير ضرورية إذا تم إجراء تشخيص الخلايا سابقا. في حالة بعض أنواع الأورام حيث الصف النسيجي هو عامل حاسم النذير (على سبيل المثال، الخلايا البدينة الأورام) أداء الهيماتوكسيلين ويوزين ستاining 16.
3. اختيار العلاج القيد
ملاحظة: للحصول على العلاج بالصدمات الكهربائية في الكلاب تستخدم سيسبلاتين وبليوميسين. لECT في القطط استخدام بليوميسين فقط، كما هو بطلان سيسبلاتين في القطط.
- حساب حجم العقيدات الورم باستخدام الصيغة V = ab²π / 6 ( "أ" هو قطرها أكبر من العقيدات الورم و "ب" قطر العقيدات ورم عمودي "أ") أو V = abcπ / 6 ( " و"،" ب "و" ج "هي ثلاثة أقطار عمودي من العقيدات ورم).
4. خيارات طريقة التشغيل
- اختيار من الأقطاب الكهربائية
ملاحظة: من المهم أن تختار نوع القطب الأمثل كما يؤثر على تكوين قطب مجال التوزيع الكهربائي في الأنسجة. يتم استخدام نوعين من القطب: لوحة وإبرة كهربائية. أقطاب لوحة تحمل لوحات الفولاذ المقاوم للصدأ متوازيين: المسافة الداخلية بين أقطاب تعتمد على حجم الورم وقدرة مولد النبضات الكهربائية. عادة ما تكون المسافةتوين الأقطاب هو 6-8 ملم. أقطاب الإبرة يمكن ترتيبها في الصفوف (مجموعة موازية) أو في الهندسة سداسية. القطب سداسية لديه إبرة وسط و6 الإبر في مجموعة دائرية. يتم تطبيق نبضات بين الأقطاب في مجموعة دائرية وبينها وبين مركزية واحدة. يتم تطبيق نبضات في كلا الاتجاهين بين كل زوج من الأقطاب الكهربائية. اختر نوع القطب وفقا لعمق العقيدات الورم وتوفير Electroporation للمناسبة في كل المطلوب المنطقة المعالجة. اختيار الأقطاب وفقا لالنسيج المستهدف معينة. بشكل عام، كلا النوعين من الأقطاب الكهربائية يمكن استخدامها لعلاج. - اختيار وإعداد سيسبلاتين أو بليوميسين
يتكون العلاج بالصدمات الكهربائية للإدارة intratumoral من سيسبلاتين أو بليوميسين أو الوريد من بليوميسين والتعرض العقيدات الورم إلى نبضات كهربائية: ملاحظة.- حدد تثبيط الخلايا المناسب وطريق إدارتها.
- حل كاريتاس الدوليةsplatin (رابطة الدول المستقلة diamminedichloroplatinum الثاني)، إذا حصلت على شكل مسحوق، في الماء المقطر في تركيز 1 ملغ / مل (وإلا صيدلانيا ويمكن استخدام الحلول التي يجري اعدادها). إعطاء سيسبلاتين intratumorally.
- حل بليوميسين في محلول فسيولوجي بتركيز 3 ملغ / مل وإعطاء intratumorally أو عن طريق الوريد.
- تخدير
ملاحظة: اعتمادا على طريقة التشغيل (الجدول 1) التخدير العميق أو التخدير العام يمكن استخدامها.- تقييم المريض وفقا للجمعية الأمريكية لأطباء التخدير "(ASA) تصنيف الوضع المادي وفقا لنوع الورم بسبب متلازمات الأباعد الورمية الممكنة.
- التخدير العميق
- استخدام medetomidine (0.08 ملجم / كجم) أو مزدوج medetomidine الجمع (0.025 ملغ / كلغ) مع طرطرات بوتورفانول (0.1 ملغ / كلغ) في الكلاب أو اتباع إجراءات موحدة لالتخدير العميق في مستشفى خاص.
- تخدير عام
- <لى> يمهد للتخدير مع آسيبرومازين (0.02 ملجم / كجم) والميثادون (2 ملغ / كغ).
- ثلاثون دقيقة في وقت لاحق لحث التخدير العام مع ثيوبنتال (5 ملغ / كلغ) أو البروبوفول (1 ملغ / كلغ).
- وضع أنبوب القصبة الهوائية والحفاظ على التخدير مع isoflurane في الأكسجين تسليمها عن طريق T-قطعة الدائرة مخدر.
- أثناء التخدير استخدام العلاج دعم السوائل مع حل هارتمان بمعدل 10 مل / كغ / ساعة والتسكين مع جرعة واحدة من دواء analgetic غير الستيرويد (على سبيل المثال، كاربروفين 2-4 ملغ / كغ).
- استخدام مرهم العين لمنع جفاف بينما تحت التخدير. بعد العلاج، والإشراف على المريض حتى يستعيد وعيه كافية لالاستلقاء القصية. إبقاء المريض في العيادة لمدة 2 إلى 4 ساعات.
ملاحظة: الإجراءات القياسية لتخدير عام في مستشفى خاص ويمكن أيضا أن يتبع.
ملاحظة: يتم تدريب الموظفين التشغيل مشغلي العلاج بالصدمات الكهربائية (DVM)، التخدير والمساعدين.
- للتخدير و / أو استخدام التخدير العام جميع المعدات المطلوبة وفقا لإجراءات التخدير.
- لإجراء العلاج بالصدمات الكهربائية رؤية جميع المواد المطلوبة في قائمة المواد.
ملاحظة: التعرض قطرة من الجلد للأدوية موانع الأورام نادرا ما يسبب مشاكل حادة. لا يتم امتصاصها سيسبلاتين وبليوميسين من خلال الجلد السليم. قد يسبب تهيج سيسبلاتين الوحيد. يمكن أن تحدث سيسبلاتين وبليوميسين تسرب عند حقن العقيدات ثابتة أو الأورام. في حالة الإصابة عصا إبرة، وغسل مع وفرة المياه ورعاية الجرح وفقا للممارسة الطبية القياسية.
- حماية المشغل والمساعدين المحيطة بها مع الأقنعة والقفازات. في حالة تعرض الجلد لسيسبلاتين أو حل بليوميسين، وشطف فورا وبوفرة المياه. إعداد تدابير السلامة الأحيائية وفقا لبرنامج ضمان الجودة الامتثال للوائح المحلية حول استخدام مضاد للسرطان المخدرات، إن وجدت.
ملاحظة: يمكن أن يتم التطبيقات الكهربائية والبقول بها مع مولد النبضات الكهربائية. عادة، الجهاز هو نبض مولد مربع الموجة مع برنامج متكامل واجهة تعمل باللمس لتحديد النبضات الكهربائية المصممة مسبقا. وهي مجهزة حامل الكهربائي باليد مع زر تفعيل نبض تعلق على مولد بواسطة حبل. إيصال النبضات الكهربائية يمكن السيطرة عليها من قبل التبديل القدم. مولد النبضات الكهربائية يجب أن تستوفي معايير الاتحاد الأوروبي: 2006/95 / CE من 12/12/2006 بشأن المواد الإلكترونية المستخدمة داخل حدود الجهد محددة، 2004/108 / CE من 12/15/2004 بشأن التوافق الكهرومغناطيسي، وينبغي أن تكون متوافقة مع لوائح ادارة الاغذية والعقاقير.
ملاحظة: تتطبيق البريد النبضات الكهربائية يتبع إدارة intratumoral من سيسبلاتين أو بليوميسين، أو الوريد من بليوميسين. عند إدارة تثبيط الخلايا intratumorally ينبغي أن تطبق ببطء لمنع التسرب. لعن طريق الوريد وينبغي تطبيق التخلاء الإدارة في بلعة دائم حوالي 30 ثانية. ويستخدم هلام المياه القائمة لتحقيق اتصال جيد بين الجلد والأقطاب، إما لوحة أو إبرة، وتحقيق أقل متجانسة توزيع الحقل الكهربائي. يجب أن يكون التوصيل من المواد الهلامية بين 0،5-1 S / م 17،18. كان التوصيل الكهربائي للهلام يستخدم 0.5 S / م. ينبغي أن توضع الأقطاب لوحة في مثل هذه الطريقة التي يتم شمل الورم بينهما. وعلاوة على ذلك، من أجل تحقيق توزيع أفضل للمجال الكهربائي يجب أن يتم تنفيذ تطبيق نبضات كهربائية مرتين في اتجاه عمودي. إذا كان الورم أكبر من المسافة بين الأقطاب، يجب تطبيق أقطاب النجمر من هوامش الورم (بما في ذلك هامش أمان) والتقدم باتجاه مركز الورم. في حالة أقطاب الإبرة، ينبغي الحرص على أن يتم إدراج كل الإبر في الأنسجة لتحقيق التوزيع المناسب للالحقل الكهربائي. ليست هناك حاجة لتطبيق هلام. خلاف ذلك، فإن الإجراء هو نفسه كما في حالة من الأقطاب الكهربائية لوحة.
- يزيل الشعر على الجلد في المنطقة من تطبيق نبضات كهربائية
- إدارة سيسبلاتين أو بليوميسين. إذا كانت تدار تثبيط الخلايا الانتظار عن طريق الوريد لمدة 8 دقائق والفاصل الزمني للتسليم النبضات الكهربائية هي 20 دقيقة. إذا كانت تدار تثبيط الخلايا intratumorally البدء بتطبيق النبضات الكهربائية على الفور (في حدود 1 دقيقة بعد الحقن).
- قبل تطبيق نبضات كهربائية تطبيق هلام المياه القائمة على الجلد نزعه.
- لأقطاب لوحة تستخدم هذه المعلمات نبض: مدة النبضة 100 μsec، السعة إلى قطب كهربائي نسبة مسافة 1300 V / سم، وتواتر 1 هرتز أو 5 كيلو هرتز. تقديم كل شوط من 8 نبضات كهربائية أحادية القطب في قطارين من أربعة البقول، مع 1 فترة ثانية، في اتجاهين متعامدين.
- لأقطاب الإبرة مع صفوف استخدام المعلمات نبض: مدة النبضة 100 μsec، السعة إلى قطب كهربائي نسبة مسافة 1000 V / سم، وتواتر 1 أو 5 كيلو هرتز. كل شوط من النبضات الكهربائية أحادية القطب يتكون من ثمانية البقول.
- لأقطاب الإبرة، وترتيب في سداسية معلمات التكوين واستخدام نبض: مدة النبضة 100 μsec. القطب سداسية لديه الجهد ثابت من 730 V (إذا كانت المسافة بين الأقطاب هو 7 ملم، 1040 V / سم)، مع تردد من 5 كيلو هرتز وعدد من البقول يعتمد على عدد من الإبر. في حالة من 7 الإبر يتم تطبيق 24 البقول
- التخلص من جميع المواد الملوثة (المحاقن والإبر، قارورة، الشاش، والقفازات) في وعاء مخصص للحرق.
> 5. متابعة
ملاحظة: في كل زيارة، يتم قياس العقيدات الورم مع الفرجار رنيه وتصويرها. تخدم هذه الزيارات أيضا من أجل تقييم الآثار المحلية والنظامية الجانبية المحتملة. وسجل استجابة للعلاج بعد 4 أسابيع بناء على معايير "معايير التقييم استجابة في الأورام الصلبة" (RECIST) 19 بمثابة استجابة كاملة (CR) - اختفاء العقيدات، واستجابة جزئية (PR) - ما لا يقل عن 30٪ انخفاض في مجموع أقطار الآفة المستهدفة، مع الأخذ كمرجع أقطار خط الأساس المبلغ، مرض التقدمية (PD) - على الأقل زيادة بنسبة 20٪ في مجموع أقطار الآفات المستهدفة، مع الأخذ كمرجع أصغر المبلغ قيد الدراسة، المرض مستقر (SD) - لا انكماش كافيا للتأهل للعلاقات العامة، ولا زيادة كافية في التأهل لPD، تؤخذ على أنها إشارة أصغر أقطار المبلغ. لجميع التعاريف استجابة والحد الأدنى المطلوب لمدة 4 أسابيع لتشوalifying كل نوع من الاستجابة. يتم احتساب وقت رصد مثل الفاصلة بين تاريخ المعالجة الأولى وتاريخ الفحص الأخير من المريض. يتم تحديد الآثار الجانبية المحتملة وفقا لسمية على نطاق والبيطرية التعاونية الأورام مجموعة (VCOG - CTCAE) 20 في كل امتحان المتابعة.
- تحديد موعد 1 أسبوع بعد العلاج. تحديد موعد بعد 2 أسابيع من العلاج. تحديد موعد بعد 4 أسابيع من العلاج. بعد 4 أسابيع تحديد موعد مرة واحدة في الشهر.
Representative Results
تقدم حالة وجود ورم الخلايا البدينة تقع على الجفن من كلب. وعولج المريض مع سيسبلاتين حقن intratumorally وتطبيق 8 النبضات الكهربائية باستخدام أقطاب كهربائية لوحة.
وكان حجم الورم 5 مم. ويرجع ذلك إلى منطقة حساسة من موقع التخدير العام الورم تم استخدامها. وفقا لحجم الورم 0.5 مل (0.5 ملغ) من سيسبلاتين تم حقن intratumorally. واحدة دقيقة بعد الحقن طبقت النبضات الكهربائية باستخدام لوحة إلكترود 8 ملم. تم تطبيق تشغيل واحد فقط من نبضات كهربائية. بعد العلاج وأشرف على المريض حتى استعاد وعيه كافية. صدر المريض بعد ساعتين. بعد أسبوع واحد جاء المريض لفحوص منتظمة. الورم متقرحة وكانت المنطقة المحيطة الورم منتفخة قليلا. تم قياس الورم عن طريق رنيه الفرجار وتصويرها. بعد شهر واحد من المعاملهر لوحظ أي دليل آخر على الورم. تم إغلاق الجرح وكان ينظر الندبة مع الثعلبة في موقع العلاج. بعد العلاج الكلب لم تظهر أي علامات الألم، وقد تم الحفاظ على وظيفة جفن أثناء فترة الشفاء بأكملها والآثار التجميلية بعد العلاج ممتازة.
الشكل 1. العلاج Electrochemotherapy. وهذا الرقم يظهر الكلب قبل العلاج (A)، أسبوع واحد (B)، شهر واحد (C)، وبعد ثلاثة أشهر من العلاج (D). ورم الخلايا (A) سارية على الجفن السفلي. ومن العمر 2.5 سنة الكلب الملاكم الألماني مع حجم الورم من 5 ملم قبل العلاج. (ب) بعد العلاج بدأ الورم إلى تتقرح والأنسجة المحيطة بالمنطقة electroporated أصبحت منتفخة قليلا. اثنين من نحنEKS بعد العلاج قشرة شكلت في موقع الورم وسقطت قبالة (لا يظهر). (C) بعد شهر من electrochemotherapy لوحظ أي دليل على الورم وكان ينظر الندبة مع الثعلبة في موقع الورم. (د) ثلاثة أشهر بعد electrochemotherapy إجمالي إعادة الاندمال بتشكل النسيج الظهاري، وقعت في موقع الورم. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
| طريقة التشغيل (OM) | ||
| عدد وحجم وموقع الورم عقيدات | ا | ب |
| 1-3 العقيدات <1 سم مكعب الجلد والفم الأورام | √ | |
| > 3 العقيدات، أي الجلد حجم والأورام عن طريق الفم الرأس | √ | |
| أي عدد، أي حجم من الجلد وأورام الفم رئيس | √ | |
ويستند الجدول 1. اختيار طريقة التشغيل على عدد من العقيدات الورم وحجمها التخدير العميق = OM و؛ التخدير العام = OM B.
| العلاج الكيميائي المخدرات / حجم الورم | تطبيق Intratumoral | تطبيق في الوريد |
| جرعة سيسبلاتين (1 ملغ / مل) <1 سم 3 | 1 مل (1 ملغ) / سم 3 من ورم | |
| سيسبلاتين الجرعة (1 ملغ / مل)> 1 سم 3 | 0.5-1 مل (0.5-1 ملغ) / سم 3 من ورم | |
| جرعة بليوميسين (3000 وحدة دولية / مل) <1 سم 3 | 0.5 مل (1500 وحدة دولية) / سم 3 من tumo ص | 300 وحدة دولية / كغ |
| جرعة بليوميسين (3000 وحدة دولية / مل)> 1 سم 3 | 0،5-1 مل (1،500-3،000 وحدة دولية) / سم 3 من ورم | 300 وحدة دولية / كغ |
الجدول 2. حجم الحقن المناسب من التخلاء وفقا لمسار الإدارة وحجم الورم في الكلاب.
| العلاج الكيميائي المخدرات / حجم الورم | تطبيق Intratumoral | تطبيق في الوريد |
| جرعة بليوميسين (3000 وحدة دولية / مل) <1 سم 3 | 0.5 مل (1500 وحدة دولية) / سم 3 من ورم | 300 وحدة دولية / كغ |
| جرعة بليوميسين (3000 وحدة دولية / مل)> 1 سم 3 | 0،5-1 مل (1500 - 3000 وحدة دولية) / سم 3 من ورم | 300 وحدة دولية / كغ |
الحمار = "jove_content" FO: المحافظة على together.within الصفحات = "1"> الجدول 3. حجم الحقن المناسب من التخلاء وفقا لحجم الورم في القطط.
Discussion
وقد ثبت Electrochemotherapy أن تكون فعالة جدا ضد الأورام الأولية المختلفة أو الانبثاث في الكلاب والقطط. Electrochemotherapy يمكن استخدامها مع نية العلاجية للعقيدات جلدية أو تحت الجلد ورم الانفرادي أو متعددة أو كعلاج مساعد لعملية جراحية. العلاج القياسي من خيار لعدة أورام في الكلاب، بما في ذلك أورام الخلايا البدينة، هو الاستئصال الجراحي للورم. وأظهرت دراسة مقارنة لعملية جراحية لعلاج القياسية لECT في علاج أورام الخلايا البدينة في الكلاب أن العلاج مع العلاج بالصدمات الكهربائية أسفرت عن 70٪ من الردود كاملة في حين أسفرت عملية جراحية في 50٪ من الردود الكاملة 11 مما يدل على أن العلاج بالصدمات الكهربائية هو العلاج تعادل الجراحة.
لفعالية مضادة للورم واضح من العلاج بالصدمات الكهربائية يجب الوفاء به، والتي هي الخطوات الحاسمة ضمن بروتوكول شرطين. أول واحد هو إدارة التخلاء. وجود الدواء في الأنسجة المستهدفة يحدد كفاءة العلاج بالصدمات الكهربائيةكما الدواء يجب أن تكون موجودة داخل الخلايا من أجل قتلهم. عندما حقن المخدرات intratumorally، وعلامة على الاحتفاظ الأنسجة الجيد هو تبييض الأنسجة. أيضا، يمكن أن تحدث بعض تسرب محلول بعد تناوله من خلال الثقوب التي تنتجها الإبرة في الورم أو في الناخر الأنسجة أثناء مواصلة جلسات العلاج بالصدمات الكهربائية. وهكذا، ليصل إلى 1 ملغم / سم 3 (سيسبلاتين) أو 3000 UI / سم 3 (بليوميسين) تركيزات يمكن أن تكون ثم نظرية بحتة في تلك الحالات، ومع ذلك، فإن الهدف هو محاولة للاحتفاظ بقدر حل ممكن في الأنسجة المستهدفة. وبالإضافة إلى ذلك، ينبغي أن تطبق النبضات الكهربائية في أسرع وقت ممكن من أجل الحصول على تأثير vasoconstricting الذي يساهم في الاحتفاظ الحل.
طريقين مختلفين لإقامة يمكن استخدامها مع العلاج بالصدمات الكهربائية: intratumoral والوريد. فعالية مضادة للورم العلاج بالصدمات الكهربائية مع سيسبلاتين intratumoral أو بليوميسين أو مع بليوميسين الوريد يماثل 21 في حين ايلىctrochemotherapy مع تطبيق في الوريد من سيسبلاتين هو أقل فعالية 22 ولذا يستخدم سيسبلاتين فقط في إدارة intratumoral. ميزة أخرى هامة من المخدرات سيسبلاتين هو أن استخدامه في القطط هو بطلان كما ثبت سيسبلاتين أن تكون شديدة السمية في القطط 23. إذا كان المريض يعاني من واحدة أو عدد قليل من العقيدات، ومن ثم أوصى طريقا intratumoral. وإذا كان عدد من العقيدات يتجاوز ~ 5 العقيدات، ومن ثم أوصى طريق الوريد. حقن Intratumoral من سيسبلاتين لديه بعض فعالية مضادة للورم حتى من دون تطبيق النبضات الكهربائية، في حين بليوميسين، نظرا لطبيعتها ماء عالية، لا. لذلك، سيسبلاتين هو أول عقار من خيار إذا كان التطبيق intratumoral ممكن في الكلاب. هذا مهم جدا لأنه من الشرط الثاني الذي يجب الوفاء بها للعمل مضاد للأورام فعالية العلاج بالصدمات الكهربائية، وهذا هو تغطية الورم كله مع حقل كهربائي عال بما فيه الكفاية. للحصول على زيادة في الخليةغشاء permeabilization، المجال الكهربائي الناجم داخل الأنسجة يجب أن تتجاوز عتبة معينة. توزيع الحقل الكهربائي في الأنسجة يعتمد على الأقطاب، وبالتالي فإنه من المهم أي نوع من الأقطاب الكهربائية المستخدمة. لوحة أو أقطاب مجموعة موازية يمكن استخدامها بأمان للأورام سطحية صغيرة 24. إذا كانت الأورام أكثر سمكا وأكبر، أقطاب سداسية هي أكثر ملاءمة. حقيقة مهمة هي أن تطبيق نبضات كهربائية يمكن أن تتكرر، بحيث يتم تغطية منطقة الورم كله، بما في ذلك هوامش الأمان. منذ نبضات كهربائية تسبب قفل الأوعية الدموية، ويجب أن يبدأ تطبيقها من على حافة منطقة الورم، نحو وسطها.
حاليا، والحد من هذه التقنية هو توافر الأقطاب الذي يحول دون علاج الأورام العميقة الجذور. ومع ذلك، فإن تكوين أقطاب هي ميزة التكنولوجية التي يتطور بسرعة، والآن تستخدم مجموعات مختلفة من الأقطاب الكهربائية وأو إدارات محددة طويلة إبرة كهربائية واحدة لالانبثاث من أورام القولون والمستقيم في الكبد 25، الانبثاث العظام 7، لينة ساركوما الأنسجة 26، أقطاب endoluminal لالقولون والمستقيم والمعدة والأورام المريء 27 و قابلة للتوسيع '' مظلة '' نوع أقطاب لعلاج أورام المخ 8 .
العلاج بالصدمات الكهربائية يمكن أن تكون فعالة كعلاج لمرة واحدة فقط، ولكن في حالة فشل أو استجابة الورم جزئية ويمكن تكرار ذلك عدة مرات مع تحسين الفعالية. العلاج بالصدمات الكهربائية هو العلاج الجر المحلية. فعاليته المحلية هو ما يصل الى 80٪ من الورم السيطرة المحلية ولكن دون تأثير ملحوظ على الانبثاث البعيدة 7، والذي هو قيد آخر من العلاج. لذلك، لتحقيق استجابة النظامية، العلاج بالصدمات الكهربائية يمكن أن تكون مجتمعة مع غيرها من العلاجات. في الآونة الأخيرة، اقترحنا الجمع بين العلاج بالصدمات الكهربائية مع تطبيق آخر الطبية الحيوية من Electroporation لل، أي electrotransfer الجينات من molec المناعيةule انترلوكين 12 (IL-12)، والذي يعرف لنشاط مضاد للأورام لها. وقد تم بالفعل أظهرت مزيج من العلاج بالصدمات الكهربائية وelectrotransfer الجينات مع IL-12 ليكون العلاج الآمن المشترك مع أي آثار جانبية وورم المحلية الجيدة مع ارتفاع معدل استجابة كاملة 28، والتي منعت تكرار النقائل البعيدة.
وفي الختام، ومزايا electrochemotherapy هي بساطته، مدة قصيرة من جلسات العلاج، الجرعات القاتلة للخلايا منخفضة وآثار جانبية ضئيلة. وبالإضافة إلى ذلك، يتم تنفيذ ذلك في العيادة الخارجية، وبالتالي فإن المرضى الذين لا يكون البقاء في المستشفى.
في الوقت الحاضر، وتوفر مولدات مختلفة من البقول الكهربائية في السوق آخذ في الازدياد، مما يؤدي أيضا إلى خفض سعر المولدات مع أي خسارة في الاعتمادية ومما يجعل electrochemotherapy أكثر بأسعار معقولة. ويجب أن يؤدي كل لتوسيع نطاق استخدام هذا العلاج في الطب البيطري.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Cisplatin Kobi | Fresenius Kobi Oncology, Hampshire, Great Britain | cytostatic drug | |
| Bleomycin PCH | Pharmachemie B.V., Haarlem, Dutch | cytostatic drug | |
| AquaUltra Basic | Ultragel, Budapest, Hungary | water based gel | |
| Electropulsator ELECTROvetS13 | Leroy biotech, Toulouse, France | square-wave pulse generator |
References
- Mir, L. M., Orlowski, S., Belehradek, J. Jr, Paoletti, C. Electrochemotherapy potentiation of antitumour effect of bleomycin by local electric pulses. Eur J Cancer. 27 (1), 68-72 (1991).
- Sersa, G., Cemazar, M., Miklavcic, D. Antitumor effectiveness of electrochemotherapy with cis-diamminedichloroplatinum(II) in mice. Cancer Res. 55 (15), 3450-3455 (1995).
- Sersa, G., et al. Electrochemotherapy in treatment of tumours. Eur J Surg Oncol. 34 (2), 232-240 (2008).
- Sersa, G., Cemazar, M., Miklavcic, D., Chaplin, D. J. Tumor blood flow modifying effect of electrochemotherapy with bleomycin. Anticancer Res. 19 (5B), 4017-4022 (1999).
- Markelc, B., Sersa, G., Cemazar, M. Differential mechanisms associated with vascular disrupting action of electrochemotherapy: intravital microscopy on the level of single normal and tumor blood vessels. PLoS One. 8 (3), e59557 (2013).
- Bellard, E., et al. Intravital microscopy at the single vessel level brings new insights of vascular modification mechanisms induced by electropermeabilization. J Control Release. 163 (3), 396-403 (2012).
- Sersa, G., et al. Electrochemotherapy of tumors as in situ vaccination boosted by immunogene electrotransfer. Cancer Immunol Immunother. 64 (10), 1315-1327 (2015).
- Linnert, M., Iversen, H. K., Gehl, J., et al. Multiple brain metastases - current management and perspectives for treatment with electrochemotherapy. Radio Oncol. 46 (4), 271-278 (2012).
- Bianchi, G., Campanacci, L., Donati, D. Electrochemotherapy in bone metastases: results of a phase II study. 7th Conference on Experimental and Translational Oncology, , Association of Radiology and Oncology. Portorož, Slovenia. 46-47 (2013).
- Edhemovic, I., et al. Intraoperative electrochemotherapy of colorectal liver metastases. J Surg Oncol. 110 (3), 320-327 (2014).
- Kodre, V., et al. Electrochemotherapy compared to surgery for treatment of canine mast cell tumours. In Vivo. 23 (1), 55-62 (2009).
- Spugnini, E. P., et al. Electrochemotherapy for the treatment of recurring aponeurotic fibromatosis in a dog. Can Vet J. 54 (6), 606-609 (2013).
- Tozon, N., Pavlin, D., Sersa, G., Dolinsek, T., Cemazar, M. Electrochemotherapy with intravenous bleomycin injection: an observational study in superficial squamous cell carcinoma in cats. J Feline Med Surg. 16 (4), 291-299 (2014).
- Tamzali, Y., et al. Successful treatment of equine sarcoids with cisplatin electrochemotherapy: a retrospective study of 48 cases. Equine Vet J. 44 (2), 214-220 (2012).
- Mali, B., et al. Tumor size and effectiveness of electrochemotherapy. Radiol Oncol. 47 (1), 32-41 (2013).
- Blackwood, L., et al. European consensus document on mast cell tumors in dogs and cats. Vet Comp Oncol. 10 (3), e1-e29 (2012).
- Ivorra, A., Al-Sakere, B., Rubinsky, B., Mir, L. M. Use of conductive gels for electric field homogenization increases the antitumor efficacy of electroporation therapies. Phys Med Biol. 53 (22), 6605-6618 (2008).
- Suzuki, D. O. H., Marques, C. M. G., Rangel, M. M. M. Conductive Gel Increases the Small Tumor Treatment With Electrochemotherapy Using Needle Electrodes. Artif Organs. , (2016).
- Eisenhauer, E. A., et al. New response evaluation criteria in solid tumours: revised RECIST guideline (version 1.1). Eur J Cancer. 45 (2), 228-247 (2009).
- Veterinary Co-operative Oncology Group (VCOG). Veterinary Co-operative Oncology Group - Common Terminology Criteria for Adverse Events (VCOG-CTCAE) following chemotherapy or biological antineoplastic therapy in dogs and cats v1.0. Veterinary and Comparative Oncology. 2 (4), 195-213 (2004).
- Cemazar, M., et al. Electrochemotherapy in veterinary oncology. J Vet Intern Med. 22 (4), 826-831 (2008).
- Sersa, G. Electrochemotherapy: animal model work review. Methods Mol Med. 37, 119-136 (2000).
- Knapp, D. W., Richardson, R. C., DeNicola, D. B., Long, G. G., Blevins, W. E. Cisplatin toxicity in cats. J Vet Intern Med. 1 (1), 29-35 (1987).
- Cemazar, M., Golzio, M., Sersa, G., Rols, M. P., Teissie, J. Electrically-assisted nucleic acid delivery to tissues in vivo: where do we stand? Curr Pharm Des. 12 (29), 3817-3825 (2006).
- Edhemovic, I., et al. Electrochemotherapy: a new technological approach in the treatment of metastases in the liver. Technol Cancer Res Treat. 10 (5), 475-485 (2011).
- Campana, L. G., et al. Electrochemotherapy treatment of locally advanced and metastatic soft tissue sarcomas: results of a non-comparative phase II study. World J Surg. 38 (4), 813-822 (2014).
- Soden, D. M., et al. Successful application of targeted electrochemotherapy using novel flexible electrodes and low dose bleomycin to solid tumours. Cancer Lett. 232 (2), 300-310 (2006).
- Cemazar, M., Avgustin Ambrozic, J., Pavlin, D., Sersa, G., Poli, A., Krhac Levacic, A., Tesic, N., Lampreht Tratar, U., Rak, M., Tozon, N. Efficacy and safety of electrochemotherapy combined with peritumoral IL-12 gene electrotransfer of canine mast cell tumours. Vet Comp Oncol. , (2016).
