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भूतल पैड Electrocardiography का प्रयोग चूहों में myocardial ischemia और reperfusion की चोट की पुष्टि

Published: November 24, 2016 doi: 10.3791/54814
Automatic Translation
1, 1,2
1Department of Biomedical Sciences, James H. Quillen College of Medicine, East Tennessee State University, 2James H. Quillen Veterans Affairs Medical Center

Introduction

दिल की बीमारी से मौत दुनिया भर में 1,2 का प्रमुख कारण बनी हुई है। इतना ही नहीं है बाएं वेंट्रिकल (एल.वी.) सबसे पहलवान चैम्बर, पूरे शरीर 3 के लिए दिल से खून पंप करने के लिए जिम्मेदार है, यह एक आम हृदय की चोट साइट के बाद रोधगलन 4 है। बाएं निलय ऊतक मौत अक्सर सिस्टोलिक दिल की विफलता का परिणाम है। हृदय रोग के पशु मॉडल जैव चिकित्सा अनुसंधान हृदय की उन्नति के लिए जरूरी हैं। चूहों के C57BL / 6 तनाव उनके जल्दी प्रजनन समय, कम लागत के कारण पशु मॉडल के लिए एक लोकप्रिय विकल्प दिया गया और आनुवंशिक परिवर्तन में आसानी है। हृदय रोग के अध्ययन के लिए सबसे murine मॉडल शल्य बाईं कोरोनरी धमनी की लाड शाखा का रोड़ा शामिल है। लाड कभी कभी बाएं कुंठित सीमांत 5,6 कहा जाता है। लाड बाएं निलय पूर्वकाल और Antero पार्श्व दीवारों को रक्त की आपूर्ति करती है। लाड रोड़ा अध्ययनों पूर्वकाल infarctions उत्प्रेरण, कभी कभी int को विस्तार देने के उद्देश्य से कर रहे हैंओ अवर और पार्श्व दीवार क्षेत्रों 7।

दो मॉडल है कि रोधगलन के अध्ययन के लिए अक्सर इस्तेमाल किया जाता जीर्ण रोड़ा रोधगलन और myocardial ischemia / reperfusion चोट शामिल हैं। पुरानी रोड़ा शल्य चिकित्सा के आसपास suturing और स्थायी रूप से लाड के माध्यम से रक्त के प्रवाह को अवरुद्ध करके बनाई गई है। ischemia / reperfusion चोट, आम तौर पर 30-60 मिनट, इस्कीमिक अवधि केवल एक क्षणिक के साथ एक ही रास्ते में बहुत बनाई गई है। क्षणिक ischemia प्राप्त करने के लिए, बालक के आसपास occluding सीवन संबंधों को और एक छोटे से पीई 10 ट्यूब जो दिल की epicardial सतह पर लाड के समानांतर रखा गया है, एक reperfusion की अवधि के द्वारा पीछा जहां ट्यूबिंग और occluding सीवन निकाल दिया जाता है और रक्त है एक बार फिर से धमनी के माध्यम से और मायोकार्डियम में प्रवाह करने की अनुमति दी। ischemia / reperfusion की सर्जरी जो प्रोम शामिल मानव infarctions के इलाज के समानांतर reperfusion चोट की प्रकृति के कारण चिकित्सकीय प्रासंगिक हो समझा कर दिया गया हैपीटी कोरोनरी एंजियोप्लास्टी और स्टेंटिंग धमनी की, या कोरोनरी धमनी बाईपास। आमतौर पर, इन सर्जरी के दौरान, एक माउस दिल में एल.वी. की ischemia दौरे दीवार के दृश्य पीलापन द्वारा पुष्टि की है। हालांकि, बस लगातार निगरानी की शर्तों के तहत एक इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम (ईसीजी) पैड पर सर्जरी के प्रदर्शन से, दृश्य परिवर्तन ईसीजी तरंग में मनाया जा सकता है, जिससे ischemia और माउस मायोकार्डियम के reperfusion की पुष्टि।

हालांकि murine दिल अपने चार संभाग संरचना सहित कई मामलों में मानव हृदय के समान है, दिल भी मतभेद हैं। वयस्क मनुष्य के उस जबकि मिनट (बीपीएम) प्रति 700 धड़कता है ~ 60-100 बीपीएम 8,9 - एक स्पष्ट अंतर वयस्क चूहों की औसत आराम दिल दर 600 है। इसके अतिरिक्त, चूहों में repolarization लहरें, जम्मू और टी, अक्सर विध्रुवण क्यूआर-परिसर में एक स्पष्ट ST-खंड 10 विचार करने के लिए मुश्किल बनाने के साथ विलय। electrocardiographicall की प्रक्रिया जटिलY दौरे की पुष्टि, यह टी लहर और अनुसूचित जनजाति वर्ग है जो मानव में ischemia और रोधगलन चोट के निदान के लिए मार्कर के रूप में इस्तेमाल कर रहे हैं की ऊंचाई है, चिकित्सकीय रूप ST E levation मीटर मैं nfarction या STEMI yocardial के लिए भेजा। मानव और murine waveforms के बीच मुख्य अंतर यह है कि एस-लहर तुरंत पीछा किया जाता है एक जम्मू-लहर कि एक नकारात्मक टी लहर में सीधे स्थानान्तरण होना है। चूहों में तीव्र myocardial ischemia एस लहर घटने के आयाम और के दौरान सीधे एक असामान्य जम्मू-लहर और एक औंधा टी लहर 11 से पीछा किया जाता है। टी लहर चूहों 11 में repolarization के एक महत्वपूर्ण हिस्से का प्रतिनिधित्व करने के लिए नहीं लगता है। नामकरण और माउस बनाम मानव मतभेदों के बावजूद, murine दौरे ischemia और ईसीजी की पुष्टि अभी भी संभव है और अपेक्षाकृत सरल है। तरंग व्याख्या को सरल बनाने की खातिर, SJT के बीच खंड ST-segme के रूप में जाना जाता हैNT के साथ साथ।

2013 में प्रकाशित STEMI दिशा निर्देशों .इस मतलब यह है कि जब तक मरीज की धमनी कोरोनरी धमनी रोड़ा की पहचान से समय सीमा कम से कम 90 मिनट होना चाहिए फिर से खोल दी है कम से कम 90 मिनट 12 के एक मरीज को डोर-टू-गुब्बारा समय सलाह देते हैं। दिल की धड़कन लगातार काम कर रहा है और इसलिए, एक उच्च चयापचय ऑक्सीडेटिव और ऑक्सीजन की खपत 3 के एक उच्च स्तर है। इस के लिए प्रदान करने के लिए, केशिकाओं के एक नेटवर्क के प्रत्येक myocyte 3 करने के लिए उपलब्ध है। यह केवल अपने ऑक्सीजन और पोषक तत्वों की आपूर्ति के निकास के लिए एक दिल की धड़कन में कुछ समय लगता है। एक 90 मिनट की खिड़की में, एक मानव में एक इस्कीमिक हृदय क्षेत्र में प्राप्त 5,400 और 9,000 के बीच दिल ऑक्सीजन युक्त रक्त की कीमत धड़कता से अवरुद्ध कर दिया गया होगा। कि एक ही 90 मिनट विंडो में, एक माउस 54,000 63,000 करने के लिए दिल धड़क रहा होगा। murine ischemia / reperfusion चोट के लिए प्रायोगिक समय अंक 30 और 60 मिनट के बीच आम तौर पर कर रहे हैं।

विकसित करने के महत्वएक murine मॉडल में दौरे ischemia और इस बात की पुष्टि की एक पूरक विधि आईएनजी स्थिरता और myocardial ischemia / reperfusion की पढ़ाई में डेटा के reproducibility पर गहरा प्रभाव पड़ता है। नेत्रहीन ऊतक रंग में बदलाव के लिए दिल के अवलोकन की वर्तमान अभ्यास के रूप में एक खड़े अकेले नैदानिक ​​पर्याप्त नहीं है। इसके अतिरिक्त, ट्यूबिंग के हटाने और सिवनी के बाद reperfusion की गारंटी नहीं है। हालांकि धमनी नहीं रह बंद बंधा हुआ है, धमनी प्रक्रिया के दौरान निरंतर नुकसान हो सकता है और reperfuse करने के लिए असंभव हो सकता है। बल्कि यह दौरे पीलापन और rubor (लाल रंग) की टिप्पणियों पर भरोसा से reperfusion की पुष्टि करने के लिए विद्युतहृद्लेखी परिवर्तन का एक रिकॉर्ड है के लिए फायदेमंद होगा। दिल है कि ischemia / reperfusion चोट के मार्कर नहीं दिखा तो जल्दी से झंडी दिखाकर रवाना किया जा सकता है और कैसे आगे बढ़ना पर एक निर्णय जांचकर्ताओं द्वारा बनाया जा सकता है।

अन्त में, ईसीजी का एक रिकॉर्ड की स्थापना वें भर में आधारभूत से बदलता हैई इस्कीमिक और reperfusion अवधि जांचकर्ताओं प्रारंभिक शल्य चिकित्सा के बाद दिल की निगरानी के लिए जारी रखने के लिए अनुमति देता है। के रूप में सर्जरी पूरा हो गया है जांचकर्ता वर्तमान में दिल की दृष्टि खो के रूप में जल्द ही। ईसीजी सर्जरी के बाद के दिनों के लिए मायोकार्डियम घंटे में होने वाली परिवर्तन में जानकारी हासिल करने के लिए एक सरल तरीका है। सर्जरी के बाद देर से विकसित क्यू लहरों जारी रखा का संकेत है या ऊतक मौत बिगड़ती बता सकता ईसीजी समय बिंदुओं पर दर्ज की गई। हालांकि, प्रभावी ढंग से नए या बिगड़ती विद्युतहृद्लेखी मार्कर जमानत के लिए, एक आधारभूत ईसीजी की तुलना के लिए उपलब्ध होना चाहिए।

इस प्रोटोकॉल का प्रदर्शन करेंगे, तैयार करने के लिए कैसे प्राप्त है, और ischemia और 8 का उपयोग माउस दिल की reperfusion की पुष्टि करने के लिए ईसीजी की व्याख्या - 12 सप्ताह पुराने पुरुष C57BL / 6 चूहों।

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Protocol

जानवरों पर प्रदर्शन सभी शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं की देखभाल और प्रयोगशाला पशु 13 या अन्य उपयुक्त नैतिक दिशा निर्देशों के उपयोग के लिए गाइड के अनुसार बाहर किया जाना चाहिए। प्रोटोकॉल आगे बढ़ने से पहले उचित संस्था में पशु कल्याण समिति द्वारा अनुमोदित किया जाना चाहिए।

1. ईसीजी के लिए तैयारी

नोट: शुरुआत से पहले, दस्ताने, धूप का चश्मा और एक साफ प्रयोगशाला कोट या डिस्पोजेबल गाउन सहित व्यक्तिगत सुरक्षा उपकरण डॉन।

  1. ईसीजी पैड साफ एक गैर-अल्कोहल और गैर-ब्लीच आधारित परिशोधन समाधान का उपयोग कर। धीरे अतिरिक्त समाधान बंद दाग को सुनिश्चित करने के लिए कि इलेक्ट्रोड पैड क्षतिग्रस्त नहीं बन जाता है पोंछ एक नाजुक कार्य का उपयोग करें।
  2. ईसीजी पैड एक हीटिंग सुविधा है, तो यह प्रयोग करें। Anesthetized चूहों के शरीर की गर्मी तेजी से खो देते हैं। 40-42 डिग्री सेल्सियस के लिए पैड गर्मी सर्जरी 14 के दौरान 37 डिग्री सेल्सियस के normothermic शरीर का तापमान बनाए रखने के लिए। शरीर गुस्सा मॉनिटरएक गुदा थर्मामीटर का उपयोग कर ature। शरीर के तापमान ~ 37 डिग्री सेल्सियस के तापमान को बनाए रखने के पैड के रूप में आवश्यक समायोजित करें।
  3. सबसे thoracotomies माउस अपनी पीठ (लापरवाह) पर झूठ बोल के साथ प्रदर्शन कर रहे हैं, यह सुनिश्चित करें कि टॉगल "लापरवाह" स्थापित करने के लिए फ़्लिप किया है। कई ईसीजी पैड का खतरा और लापरवाह स्थितियों के बीच टॉगल करने के लिए एक समारोह है। सही रुख का चयन करने में विफलता विद्युतहृद्लेखी घटनाओं की गलत बयानी में परिणाम कर सकते हैं।
  4. 5% साँस isoflurane और 1 एल / मिनट ऑक्सीजन का उपयोग माउस anesthetize। एक बार माउस anesthetized है, ईसीजी पैड करने के लिए स्थानांतरण माउस एक संज्ञाहरण नाक-कोन से लैस है और 2% और 1 एल / मिनट ऑक्सीजन के लिए isoflurane कम। माउस सुनिश्चित प्रतिक्रिया नहीं करता है जब माउस के पैर संदंश के साथ pinched है द्वारा उचित संज्ञाहरण की पुष्टि करें।
  5. माउस की आंखों पर आंख स्नेहन मरहम की एक पतली कोट लागू करते हुए anesthetized सूखापन और कार्निया नुकसान को रोकने के।
  6. एक गीला के साथ माउस के पंजे साफ सब दिखाई बिस्तर दूर करने के लिए पोंछकि पंजे के लिए अटक जा सकता है या ईसीजी पैड के पंजे से बिजली के उद्यमी के प्रसारण के साथ हस्तक्षेप कर सकते हैं। एक पोंछ के साथ सूखी पंजे।
  7. ईसीजी पैड पर चार धातु इलेक्ट्रोड से प्रत्येक के लिए उच्च प्रवाहकीय इलेक्ट्रोलाइट जेल की एक छोटी राशि (एक डालर की तुलना में थोड़ा पैसा भी छोटे) को लागू करें।
    नोट: केवल जेल की एक छोटी राशि लागू करने के लिए और यकीन है कि के रूप में बहुत ज्यादा जेल यह मुश्किल पैड टेप का उपयोग करने के पंजे को नियंत्रित करने के लिए बनाता है। इसके अतिरिक्त, पंजे सर्जरी के दौरान संयम से बाहर निकलना करने के लिए अगर वे टेप लागू करने से पहले गीले थे संभावना है।
  8. लापरवाह स्थिति में माउस के साथ, अपनी इसी इलेक्ट्रोड (चित्रा 1) के लिए प्रत्येक पंजा को नियंत्रित करने के लिए स्पष्ट चिकित्सा टेप का उपयोग करें। पहली प्रेस टेप के अपने टुकड़ा करने के लिए प्रत्येक पंजा और फिर ईसीजी पैड करने के लिए टेप पालन करें। सुनिश्चित करें कि प्रत्येक संयमित पंजा इलेक्ट्रोलाइट जेल और इलेक्ट्रोड के साथ संपर्क में है।

2. ईसीजी हासिल करना

  1. ईसीजी अधिग्रहण, conf के लिए इस्तेमाल किया उपकरणों के आधार परमशीन igure इतना है कि ईसीजी तरंग वास्तविक समय में देखे जा सकते हैं। एक इकोकार्डियोग्राफी मशीन पर शारीरिक निगरानी सेटिंग्स का उपयोग कर ईसीजी रिकॉर्डिंग के लिए, एक जीवित बी मोड छवि की ईसीजी तरंग स्क्रीन के नीचे के साथ चल रहा होगा।
    नोट: कैसे है कि उपकरण विन्यस्त करने के लिए सबसे अच्छा निर्धारित करने के लिए अलग-अलग मशीन उपयोगकर्ता गाइड देखें।
  2. एक इकोकार्डियोग्राफी मशीन पर बी मोड कुंजी या अन्य ईसीजी रिकॉर्डिंग उपकरणों पर बराबर दबाकर ईसीजी तरंग के वास्तविक समय दृश्य सक्षम करें।
    1. आयाम में मतभेद के लिए खाते में संकल्प समायोजित करें। क्यू लहर के आर-लहर या गर्त (घाटी) के शिखर दृश्य फ्रेम से बाहर हैं, तो संकल्प समायोजित जब तक तरंग की पूरी ऊंचाई मनाया जा सकता है।
      नोट: यह एक इकोकार्डियोग्राफी मशीन पर शारीरिक सेटिंग टैब के तहत किया जा सकता है। वृद्धि पर क्लिक करें या तीर को कम जब तक पूरे तरंग दिख रहा है।
  3. किसी भी समय है कि एक छवि OBT हो रहा हैained, उपकरणों की ईसीजी पैड साफ़ करें। संदंश या उंगलियों के साथ ईसीजी रिकॉर्डिंग के दौरान माउस को छू तरंग परेशान नहीं करेगा। सुनिश्चित करें कि माउस ईसीजी पैड पर अब भी अछूता है और किसी भी ईसीजी रिकॉर्डिंग से पहले।
  4. माउस पर किसी भी शल्य चीरों करने से पहले मशीन की "रिकॉर्ड" या "दुकान" सुविधा का उपयोग करें। इस छवि पर बाद में तुलना के लिए एक आधार रेखा के रूप में इस्तेमाल किया जाएगा।

3. सर्जिकल प्रक्रिया और रिकॉर्डिंग ईसीजी

  1. शुरुआत से पहले (buprenorphine 1.5 माइक्रोग्राम, intraperitoneal) एनाल्जेसिक के साथ anesthetized माउस इंजेक्षन। Ischemia / reperfusion की शल्य चिकित्सा की प्रक्रिया का ब्यौरा भी कहीं और 5 पाया जा सकता है।
  2. रासायनिक या यंत्रवत् शल्य साइट के आसपास बाल निकालें और betadine समाधान के साथ क्षेत्र कीटाणुरहित। घेघा और श्वासनली के लिए एक ऊर्ध्वाधर चीरा समानांतर बनाने के लिए एक छुरी का प्रयोग करें। धीरे जब तक श्वासनली को कवर पतली ऊतक है चीरा के प्रत्येक पक्ष को लिम्फ नोड्स के लिए कदमअवगत कराया। संदंश का प्रयोग, धीरे ऊतक अलग तक श्वासनली की सफेद उपास्थि के छल्ले दिखाई दे रहे हैं।
    नोट: हम आम तौर पर उपयोग नायर बालों को हटाने लोशन। लोशन ~ 1 मिनट के लिए शल्य साइट पर लागू किया जाता है। नायर ने फिर अच्छी तरह खारा या पानी का उपयोग कर से धोया जाता है। इस विधि हमारी प्रयोगशाला में पसंद किया जाता है क्योंकि उच्च संकल्प इकोकार्डियोग्राफी (जो बालों के रोम का पता लगाने कर सकते हैं) से पहले और सर्जरी के बाद किया जाता है। हालांकि, सावधानी ऐसी जननांगों के रूप में संवेदनशील क्षेत्रों से बचने के लिए लिया जाना चाहिए, और फिर अच्छी तरह से धोने नायर बंद संभावित त्वचा जलने से बचने के लिए।
  3. जल्दी से नाक-कोन से माउस की नाक को हटाने और माउस के मुंह में और गले की ओर वेंटिलेशन ट्यूबिंग डालें। जब वेंटिलेशन ट्यूबिंग की नोक उजागर गर्दन क्षेत्र के माध्यम से दिखाई दे रहा है, श्वासनली की शुरुआत के साथ ट्यूब संरेखित। धीरे ट्यूब की ओर wiggle जबकि श्वासनली में टयूबिंग स्लाइड जो नेत्रहीन पुष्टि की जा सकती टी जब तक ऊपर की ओर दबाव लागू करने के पक्ष कीपारदर्शी श्वासनली hrough।
  4. सुनिश्चित करें कि माउस इंटुबैषेण प्रक्रिया के दौरान anesthetized बनी हुई है। इंटुबैषेण से रोकें और नाक शंकु के लिए माउस वापस अगर यह हलचल शुरू होता है।
  5. तार का एक पाश का उपयोग करना, पाश के माध्यम से माउस के सामने दो दांत हुक और टेप स्ट्रिंग ईसीजी पैड करने के लिए समाप्त हो जाती है माउस के सिर स्थिर करने के लिए और वेंटिलेशन ट्यूबिंग सर्जरी के दौरान कदम नहीं करता है सुनिश्चित करने के लिए। जल्दी कृंतक वेंटीलेटर की वेंटिलेशन ट्यूबिंग देते हैं और माउस के वजन के अनुसार वेंटिलेशन सेटिंग्स समायोजित करें। जगह में टेप वेंटिलेशन ट्यूबिंग।
  6. एक धुंध गर्म खारा में भिगो के साथ माउस के संपर्क में श्वासनली कवर सुखाने से ऊतक रखने के लिए।
  7. एक ऊर्ध्वाधर चीरा उरोस्थि के बाईं ओर के साथ एक छुरी का उपयोग करें।
  8. संदंश का प्रयोग, धीरे पेशी परत से प्रावरणी परत अलग। ध्यान से दिखाई रक्त वाहिकाओं को काटने के बिना अंतर्निहित मांसपेशियों परतों में कटौती।
  9. संदंश का प्रयोग, तीसरे पसली हड़पने और पुलऊपर की तरफ धीरे। एक हाथ से पसली पर पकड़ बनाए रखने और शल्य कैंची का उपयोग सावधानी से तीसरे और चौथे पसली के बीच पसलियों के बीच ऊतक में कटौती करने के लिए। सुनिश्चित करें कि फेफड़े क्षतिग्रस्त नहीं कर रहे हैं।
    नोट: फेफड़ों दबाव ढाल की कमी के कारण लगभग तुरंत बाद छाती गुहा शल्य चीरा से हवा निकाल दी है छाती गुहा में गहरी वापस लेना होगा। रुको जब तक फेफड़ों जारी रखने से पहले मुकर चुके हैं।
  10. हड़पने के लिए और धीरे पेरीकार्डियम जो दिल के चारों ओर की पतली परत को अलग करने के संदंश का प्रयोग करें।
  11. retractors डालें या स्वयं एक स्थिति है जहाँ दिल पसलियों के बीच दिखाई दे रहा है में पसलियों स्थानांतरित करने के लिए पसली retractors के रूप में संदंश का उपयोग करें।
    नोट: यह इतना है कि यह संयुक्ताक्षर के प्लेसमेंट के दौरान निचले सही पंजा ओवरलैपिंग है माउस के निचले बाएँ पंजा स्थानांतरित करने के लिए आम बात है। यह दिल की स्थिति के लिए इतना है कि बाएं आलिंद उपांग, या अलिन्द, संयुक्ताक्षर के प्लेसमेंट के दौरान आसानी से दिखाई दे रहा है मदद करता है। जो मान्य ईसीजी डब्ल्यू जागरूक बनोजबकि निचले बाएँ पंजा इलेक्ट्रोड से दूर है aveforms प्राप्त नहीं किया जाएगा। इस कारण से यह बाद suturing संयुक्ताक्षर दौरे ऊतक के माध्यम से लेकिन इससे पहले एक गाँठ कड़ी कर दी गई है पारित कर दिया है इसकी इलेक्ट्रोड के लिए पंजा वापस करने के लिए सलाह दी जाती है।
  12. लाड नेत्रहीन जानें, बाएं अलिन्द के नीचे। तेजी से मायोकार्डियम गहरा लाड के तहत पारित करने के लिए एल.वी. गुहा घुसना करने के लिए पर्याप्त है, लेकिन इतनी गहरी नहीं में 7-0 रेशम पतला suturing सुई डालें। जब तक वहाँ suturing रेशम मुक्त (गैर सुई) suturing संयुक्ताक्षर के अंत पर छोड़ दिया है के बारे में 4 सेमी है के माध्यम से suturing संयुक्ताक्षर खींचो।
  13. एक सरल सीवन गाँठ बाँध के लिए शुरू। एक बार जब suturing रेशम के मुक्त अंत गाँठ के लिए फार्म छोरों के माध्यम से निकाला गया है, को थामने।
  14. संदंश के साथ suturing रेशम के दोनों स्वतंत्र और सुई समाप्त होता होल्डिंग, बनाने गाँठ के नीचे और epicardial सतह के ऊपर पीई 10 ट्यूबिंग का एक ~ 1 सेमी खंड डालें।
  15. माउस के बाएं पंजा पार कर जाता है, तो उसके समर्थक को पंजा लौटने केइलेक्ट्रोड प्रति। गाँठ कस इतना है कि पीई 10 ट्यूबिंग दिल को सिलाई की जाती है। माउस के साथ सभी शारीरिक संपर्क रिलीज ईसीजी दर्ज होने की अनुमति देने के लिए।
  16. के लिए ~ 10 सेकंड के माध्यम से साइकिल के ईसीजी तरंग की अनुमति दें। "रोड़ा के समय" के रूप में ईसीजी तरंग नेत्रहीन और रिकॉर्ड तरंग की जाँच करें। टी लहर 1 मिनट के भीतर आयाम में वृद्धि नहीं करता है, तो संयुक्ताक्षर के स्थान के पुनर्मूल्यांकन।
    1. टी लहर आयाम में वृद्धि नहीं करता है, या तो अध्ययन से पशु त्यागने या संयुक्ताक्षर नियुक्ति को सही करने का प्रयास।
  17. दिखने में एल.वी. की इस्कीमिक सबसे पुष्टि करने के लिए मायोकार्डियम के रंग की जाँच करें।
  18. ईसीजी परिवर्तन और myocardial ischemia रंग परिवर्तन का संकेत मिलता है, तो डबल गाँठ के चारों ओर पीई 10 ट्यूबिंग सिवनी।
  19. गर्म खारा धुंध के साथ खुली छाती गुहा को कवर किया।
  20. रिकार्ड ईसीजी इस्कीमिक अवधि की अवधि के लिए हर 5-10 मिनट।

4. Reperfusion की पुष्टि ईसीजी का प्रयोग

  1. खारा धुंध कोव हटायेछाती गुहा अंगूठी और दिल की कल्पना।
  2. एक ब्लेड का प्रयोग पीई 10 ट्यूबिंग के ऊपर suturing रेशम कटौती करने के लिए। एक बार जब संयुक्ताक्षर कट जाता है, पीई 10 ट्यूबिंग की धारा को हटाने और धीरे मायोकार्डियम से suturing संयुक्ताक्षर को हटा दें।
  3. माउस के साथ सभी शारीरिक संपर्क जारी है और ईसीजी तरंग चक्र के लिए 10 सेकंड के लिए अनुमति देते हैं ~। के रूप में रिकॉर्ड तरंग "Reperfusion का समय है।" ईसीजी waveforms रिकॉर्ड करने के लिए हर 5-10 मिनट तक वांछित प्रयोगात्मक समय बिंदु पर पहुंच गया है जारी रखें।
  4. जरूरत के रूप में आयाम में परिवर्तन के लिए संकल्प को समायोजित करें। टी लहर पीई 10 ट्यूबिंग और संयुक्ताक्षर के हटाने पर परिवर्तन नहीं होता है, तो reperfusion की पुष्टि नहीं की है।
    1. टी लहर ट्यूबिंग के हटाने पर बदल नहीं करता है, या तो अध्ययन से पशु त्यागने या संयुक्ताक्षर नियुक्ति को सही करने का प्रयास।
  5. दिखने में मायोकार्डियम का निरीक्षण इसके अतिरिक्त लाल रंग के लिए वापसी से reperfusion की पुष्टि करने के लिए।
  6. बंद 5-0 से पसलियों के बीच अंतरिक्ष suturing से छाती गुहारेशम सीवन, जबकि यह है कि सर्जरी के दौरान दर्ज किया गया है अतिरिक्त हवा को निष्कासित करने के लिए माउस की छाती को कोमल दबाव लागू करने। तब मांसपेशी परतों और अंत में, त्वचा सीवन। नोट: छाती गुहा के लिए दबाव लागू सभी चूहों में हवा की छाती गुहा खाली करने के लिए पर्याप्त नहीं हो सकता। इसलिए, निकासी की सिरिंज और सुई विधि सुनिश्चित करने के लिए कि सभी हवाई निष्कासित कर दिया गया है नियोजित किया जाना चाहिए।
  7. इलेक्ट्रोड से साँस संज्ञाहरण बंद करने और माउस के पंजे को हटाने से पहले पिछले ईसीजी रिकार्ड। 2 एल / मिनट के लिए ऑक्सीजन बढ़ाने के लिए और वेंटिलेशन बनाए रखने के लिए जब तक माउस चेतना आएगा।
  8. माउस एक निरंतर तापमान नियंत्रित वातावरण, उदाहरण के लिए हीटिंग पैड या गर्म इनक्यूबेटर, रोधगलितांश परिवर्तनशीलता से बचने के लिए ठीक करने के लिए अनुमति दें। सर्जरी के बाद buprenorphine 24 घंटा के साथ माउस को समझो और फिर माउस मुंह बनाना पैमाने द्वारा संकेत के रूप में की जरूरत है।
    नोट: reperfusion के लिए प्रक्रिया भी जू एट अल द्वारा विस्तार से चर्चा की है 5।

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Representative Results

एक सामान्य murine ईसीजी बिजली घटनाओं पी, क्यू, आर, एस, जम्मू और टी पी के लिए वर्णमाला मार्कर के साथ चित्रा 2 में दिखाया गया है प्रारंभिक आलिंद विध्रुवण है। क्यूआर निलय खत्म विध्रुवण की लहर है। जम्मू जल्दी repolarization है और टी विषम repolarization भी वसूली 11 के रूप में जाना प्रतिनिधित्व करता है। यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि कई प्रयोगशालाओं जम्मू-लहर नामकरण का उपयोग नहीं करते हैं और बदले ST-खंड 10,15-17 के रूप में SJT-खंड को देखें। इधर, परिणाम और विश्लेषण के प्रतिनिधि और 40 चूहों की प्रयोगशाला टिप्पणियों के आधार पर बंद कर रहे हैं। ज्यादातर चूहों सर्जरी के पाठ्यक्रम पर समान तरंग प्रगति का प्रदर्शन किया। चूहे कि इसी तरह waveforms प्रदर्शन नहीं किया और विश्लेषण के लिए झंडी दिखाकर रवाना किया गया था और गैर-infarcted जानवरों विचार किया गया। इसी तरंग परिणाम भी जोंग एट अल। 15 द्वारा सूचित किया गया है।

Murine दिल सुतीव्र myocardial ischemia का पहला संकेत क्षेत्रीय ischemia से लाड रोड़ा के कारण ffering आम तौर पर आर-लहर के आयाम के रूप में अच्छी तरह से संयुक्त खंड-खंड अनुसूचित जनजाति के अंतिम ऊंचाई के द्वारा पीछा के hyperacute बढ़ता जा के रूप में वृद्धि दिखाने चित्रा 3 से पता चलता। टी लहर के hyperacute बढ़ता जा। जैसा कि इस आंकड़े में देखा जा सकता है, टी लहर आधारभूत स्थितियों से आयाम में वृद्धि हुई है। हालांकि, यह अभी तक ST-खंड ऊंचाई क्योंकि एस-लहर अभी भी गहरा और नकारात्मक पेश है के रूप में यह आधारभूत तरंग पर नहीं करता है।

आधारभूत ईसीजी विन्यास एक नकारात्मक पेश एस-लहर (चित्रा 2) को प्रदर्शित करता है। समय की प्रगति के रूप में, ईसीजी परिवर्तन का उल्लेख किया जाता है। अनुसूचित जनजाति श्रेणी के एस-लहर के अंत और टी लहर की शुरुआत के बीच क्षेत्र के रूप में परिभाषित किया गया है। इस ST-खंड मनुष्यों में स्पष्ट है। उच्च दिल की दर के कारण, इस क्षेत्र चूहों में विलय कर दिया और एक अतिरिक्त, जल्दी repolarization "जम्मू-लहर" सितम्बर हैएस और टी-तरंगों arates। इसलिए, समविद्युतविभव लाइन या इससे अधिक के लिए एस-लहर की ऊंचाई ST-खंड पदोन्नति के murine संस्करण के रूप में माना जाना चाहिए। चित्रा 4 में जल्दी रोधगलन को ischemia की प्रगति ST-खंड ऊंचाई से देखा जा सकता है। यहाँ एस लहर ऊंचा आयाम पर प्रदर्शित कर रहा है, समविद्युतविभव रेखा से ऊपर। जम्मू-लहर भी उठाया है, खासकर जब आधारभूत तरंग (चित्रा 2) की तुलना में। इसलिए, ST-खंड उठाया है जो चोट / रोधगलन 10 का संकेत है।

चित्रा 5 आधारभूत से एक माउस की प्रगति reperfusion के माध्यम से सभी तरह से पालन करती है। पहले तरंग एक सामान्य साइनस लय जो दर्ज आधारभूत था प्रदर्शित करता है। बाद संयुक्ताक्षर बंधा हुआ था और धमनी अवरोधित बन दूसरी तरंग ईसीजी 1 मिनट प्रदर्शित करता है। इस लाइन पर लाल वृत्त hyperacute टी लहर बढ़ता जा इंगित करता है। तुलना में वाई हैंवें "आधारभूत," यह स्पष्ट है कि टी लहर उठाया है। तीसरे तरंग 5 मिनट के समय बिंदु पर पूरा ST-खंड ऊंचाई से पता चलता है। "1 मिनट ischemia" छवि में, एस-लहर अभी भी नकारात्मक रूप में पेश किया गया था, समविद्युतविभव लाइन गुजर रहा है। हालांकि, 5 मिनट में परिसर के एस हिस्से के रूप में दूर नकारात्मक जम्मू और टी लहरों में प्रगति से पहले यह चाहिए तक पहुँच नहीं है। इस ST-खंड ऊंचाई के रूप में वर्णित है क्योंकि एस और टी लहरों के बीच खंड समविद्युतविभव रेखा से ऊपर उठाया जाता है। क्षेत्रीय ischemia के एक और electrophysiological मार्कर क्यूटी अंतराल 16 जो क्यूआर परिसर की शुरुआत से फैली हुई है और टी लहर के अंत तक जारी चौड़ा है। ischemia के 20 मिनट पर, क्यूटी अंतराल बढ़ गया है और अनुसूचित जनजाति के खंड अभी भी उठाया है। ischemia के 45 मिनट के बाद, क्यूटी अंतराल बनी हुई चौड़ी और अनुसूचित जनजाति-खंड ऊंचा रहता है।

मायोकार्डियम के reperfusion है कि30 मिनट या उससे कम समय के लिए किया गया इस्कीमिक एक माउस में आधारभूत शर्तों के वापस लौटने ईसीजी में परिणाम चाहिए। Preda और Burlacu murine विद्युतहृद्लेखी परिवर्तन, इस्कीमिक समय, और रोधगलितांश गंभीरता 17 के बीच एक संबंध स्थापित किया। यह देखा गया है कि 30 मिनट की अवधि के इस्कीमिक स्थायी ईसीजी परिवर्तन का कारण नहीं था, जबकि 1 घंटा की इस्कीमिक अवधि के स्थायी ईसीजी परिवर्तन का कारण था। इसके अतिरिक्त, ischemia के 24 घंटे के बाद अवरोधित धमनी के reperfusion कोई उबार प्रभाव 17 था। आम तौर पर, क्यू लहरों मामूली नीचे प्रक्षेपण के ठीक पहले विध्रुवण क्यूआर-परिसर के रूप में पहचाना जा सकता है। के रूप में काफी पेशी मौत 10 में स्थापित करने के लिए शुरू होता है महत्वपूर्ण है, या वैकृत क्यू लहरों दौरे की शुरुआत के बाद शीघ्र ही विकसित कर सकते हैं। उल्लेखनीय क्यू लहरों एक विस्तृत क्यू की लहर में जिसके परिणामस्वरूप, इसी आर-लहर की ऊंचाई कम से कम 1/3 के रूप में या उनकी लम्बी समय से परिभाषित कर रहे हैं। मृत मायोकार्डियम deflecting electrica के एक क्षेत्र से महत्वपूर्ण क्यू लहर परिणामइलेक्ट्रोड 7 से दूर एल धाराओं। Reperfusion के 5 मिनट, गहरी के सबूत के बाद, महत्वपूर्ण क्यू तरंगों (चित्रा 5) प्रकट करने के लिए शुरू करते हैं। इसके अतिरिक्त, टी लहर समविद्युतविभव रेखा (चित्रा 5) के लिए आए। reperfusion के 30 मिनट के बाद, नकारात्मक क्यू लहरों रहने की संभावना है और स्थायी रूप से नुकसान दिखा रहे हैं। इस समय बिंदु पर, क्यू लहरों व्यापक और गहरा कर रहे हैं, और संकेत मिलता है कि मरने के हृदय के ऊतकों क्षतिग्रस्त क्षेत्र (चित्रा 5) के आसपास विद्युत धाराओं deflecting है।

निरंतर ischemia के बाद, चोट और रोधगलन के लिए प्रगति बढ़ाया नकारात्मक टी लहर प्रक्षेपण (चित्रा 5, 30 मिनट reperfusion, दूसरी लाल वृत्त) की ओर जाता है। एक सच्चे रोधगलन के कारण इस बढ़ाकर टी लहर प्रक्षेपण आमतौर पर स्थायी 7 होगा। 30 मिनट के reperfusion की तरंग में दूसरा लाल वृत्त क्या एक औंधा टी लहर (चित्रा 5) प्रतीत होता है पता चलता है। तो 5एन डी 30 मिनट टी-तरंगों यह स्पष्ट है कि टी लहर अधिक नकारात्मक पेश है तुलना कर रहे हैं। यह महत्वपूर्ण क्यू लहरों के साथ मिलकर इस दिल को स्थायी ऊतकों को नुकसान के लिए सबूत उपलब्ध कराता है। यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि साँस isoflurane संज्ञाहरण दिल की दर को कम कर देता है, और इसलिए बढ़ जाती है क्यूटी अंतराल। हालांकि, वसूली टी-तरंगों के आयाम अप्रभावित 18 बनी हुई है।

ऊपर उल्लिखित परिवर्तन मात्रात्मक वोल्टेज के संदर्भ में विश्लेषण किया जा सकता है। 6 से पता चलता है कि एक csv फ़ाइल के रूप में शारीरिक डेटा निर्यात डेटा की एक बहुत बड़ी राशि प्रदान करेगा चित्रा। अंशों के-मिलीसेकंड दरों पर ईसीजी मूल्यों (आयाम) की पेशकश के अलावा वहाँ श्वास, तापमान जांच, रक्तचाप कफ आदि से अन्य डेटा शामिल करने के लिए यदि ऐसा है तो इच्छित विकल्प हो सकता है। के रूप में 7 चित्र में दिखाया ये मात्रात्मक डेटा रेखांकन किया जा सकता। पी लहर को पी-लहर से waveforms की एक श्रृंखला रेखांकन एक ईसीजी कल्पना में मदद करता हैविन्यास प्रवृत्ति। 500 एमएस की समय अवधि के बाद से किसी भी कम समय के लिए पर्याप्त waveforms में परिणाम नहीं हो सकता और किसी भी अतिरिक्त समय ग्राफ कर देगा दिखाई बरबाद और electrophysiological घटनाओं को याद किया जा सकता है या मुश्किल पहचान करने के लिए जब एक मानक कंप्यूटर मॉनीटर पर देखा कल्पना करने के लिए एक अच्छा समय सीमा है ।

आकृति 1
चित्रा 1:। ईसीजी पैड पर माउस का सही स्थान इस माउस लापरवाह स्थिति में तैनात है। माउस के पंजे से हर एक ईसीजी सतह पैड पर इसी इलेक्ट्रोड को टेप कर रहे हैं। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्र 2
चित्रा 2: सामान्य Murine आधारभूतईसीजी तरंग। सामान्य murine आधारभूत ईसीजी पत्र पी, क्यू, आर, एस, जम्मू और टी जो दिल में बिजली की घटनाओं का वर्णन करने के लिए इस्तेमाल कर रहे हैं के साथ लेबल है। यहां यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए क्लिक करें।

चित्र तीन
चित्रा 3:। टी लहर ऊंचाई अलावा hyperacute टी लहर या बढ़ता जा के रूप में जाना जाता है। टी लहर परिलक्षित होता है और आधारभूत टी लहर (चित्रा 2) से अधिक है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्रा 4
चित्रा 4:। ST-खंड ऊंचाई यह आंकड़ा displays ST-खंड उन्नयन जो अनुसूचित जनजाति क्षेत्र के रूप में देखा जा सकता है समविद्युतविभव बिंदु की तुलना में अधिक है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्रा 5
चित्रा 5:। एक ischemia / reperfusion सर्जरी के पाठ्यक्रम पर ठेठ ईसीजी परिवर्तन यह आंकड़ा myocardial ischemia / reperfusion सर्जरी की अवधि से अधिक एक माउस निम्नानुसार है। पहले तरंग एक सामान्य साइनस लय जो दर्ज आधारभूत (आधारभूत) था प्रदर्शित करता है। बाद संयुक्ताक्षर बंधा हुआ था और धमनी अवरोधित बन दूसरी तरंग (1 मिनट ischemia) तरंग 1 मिनट प्रदर्शित करता है। इस लाइन पर लाल वृत्त hyperacute टी लहर बढ़ता जा पता चलता है। तीसरे तरंग (5 मिनट Ischemia) पर लाल वृत्त पूरा ST-खंड ऊंचाई प्रदर्शित करता है। fou पर लाल वृत्त RTH तरंग (20 मिनट Ischemia) एक चौड़ी क्यूटी अंतराल और एस लहर अभी भी उठाया है प्रदर्शित करता है। पांचवें तरंग पर लाल वृत्त (45 मिनट Ischemia) प्रदर्शित करता है चौड़ी क्यूटी-खंड और ऊंचा ST-खंड। छठे तरंग (1 मिनट Reperfusion) सातवें तरंग (5 मिनट Reperfusion) को प्रदर्शित करता है गहरी, महत्वपूर्ण क्यू लहर फार्म पर बनाम 45 मिनट ischemia.The लाल वृत्त कोई महत्वपूर्ण परिवर्तन को प्रदर्शित करता है। आठवें तरंग (30 मिनट Reperfusion) में पहली लाल वृत्त महत्वपूर्ण क्यू-तरंगों को प्रदर्शित करता है, जबकि दूसरा लाल वृत्त संभव टी लहर वृद्धि को प्रदर्शित करता है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्रा 6
चित्रा 6:। शारीरिक डेटा यह आंकड़ा के रूप में यह स्प्रेडशीट के लिए .csv फ़ाइल के रूप में निर्यात किया जाता है शारीरिक डेटा से पता चलता है।रेफरी = "https://www.jove.com/files/ftp_upload/54814/54814fig6large.jpg" लक्ष्य = "_blank"> यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्रा 7
चित्रा 7:। रेखांकन एम वी मान ग्राफ इस आंकड़े में दिखाया गया है शारीरिक डेटा फ़ाइल (चित्रा 6) का उपयोग करते हुए लगातार तीन और पूर्ण waveforms से एम वी मान दिखाता है। ग्राफ एक सरल रेखा शारीरिक डेटा फ़ाइल से अंक का उपयोग ग्राफ है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

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Discussion

ईसीजी परिवर्तन का उपयोग कर के रूप में दौरे ischemia और इस बात की पुष्टि के लिए एक पूरक विधि occluding संयुक्ताक्षर की सटीक स्थान सुनिश्चित करता है। संयुक्ताक्षर नियुक्ति की सटीकता जानवरों के बीच डेटा परिवर्तनशीलता को कम करने के लिए महत्वपूर्ण है। एक माउस दिल में लाड कल्पना करने के लिए एक मुश्किल धमनी है। इसलिए, विद्युतहृद्लेखी परिवर्तन के साथ दृश्य पीलापन सप्लीमेंट संयुक्ताक्षर और जिसके परिणामस्वरूप ऊतकों को नुकसान का सही स्थान सुनिश्चित करने में मदद मिलेगी।

चूंकि ईसीजी पैड दिल का एक गैर-आक्रामक दृश्य प्रस्तुत करता है, कई ईसीजी अध्ययन के दौरान प्राप्त किया जा सकता है। इस हृदय परिवर्तन है कि के दौरान और सर्जरी के बाद होने का एक बेहतर समझ प्रदान करने में मदद कर सकते हैं। यह शल्य चिकित्सा की प्रक्रिया के बाद की तुलना के लिए उपयोग करने के लिए आधारभूत ईसीजी प्राप्त करने के लिए महत्वपूर्ण है। बाद में मंच ऊतक मौत और यहां तक ​​कि वेंट्रिकुलर धमनीविस्फार electrophysiological संकेतों और ईसीजी विन्यास बदलाव का विक्षेपण द्वारा मनाया जा सकता है। इस अंतर्दृष्टि प्रदान कर सकता हैदिल की विफलता की प्रगति में।

एचोकर्दिओग्रफिक मशीन का उपयोग कर ईसीजी मापने के फायदे के लिए या ischemia / reperfusion की सर्जरी के बाद पहले की दिल की संरचनात्मक और कार्यात्मक मापदंडों के एक साथ माप शामिल हैं। रिकॉर्ड ईसीजी करने के लिए प्रणाली की सीमाओं उच्च लागत एक इकोकार्डियोग्राफी मशीन खरीदने के लिए शामिल हैं। लेकिन अगर प्रयोगों कई दिनों से अधिक निरंतर ईसीजी निगरानी की आवश्यकता होती है, वहाँ इसी सॉफ्टवेयर है कि रिकॉर्ड और विभिन्न समय अंतरालों पर waveforms विश्लेषण करने के लिए programed जा सकता है के साथ दूरदराज के telemetric ईसीजी इकाइयों सहित ईसीजी रिकॉर्डिंग के लिए उपलब्ध apparatuses की एक किस्म है। हालांकि, ईसीजी टेलीमेटरी इकाइयों में से कई एक आरोपण की प्रक्रिया या विशेष निवास की आवश्यकता होती है। इसके अतिरिक्त, कई वैकल्पिक इलेक्ट्रोड विकल्प इलेक्ट्रोड क्लिप और सुइयों सहित मौजूद हैं। Ischemia thoracotomy के माध्यम से / reperfusion सर्जरी एक अत्यधिक आक्रामक प्रक्रिया है। साथ एक इकोकार्डियोग्राफी मैक ईसीजी पैड का उपयोग करने के फायदेHine सर्जरी के दौरान पशु से जुड़ा कोई तार और कोई अतिरिक्त शल्य प्रक्रिया के साथ गैर इनवेसिव प्रक्रिया में शामिल हैं। हालांकि, जांचकर्ताओं को उनकी प्रयोगशाला और प्रयोगात्मक जरूरतों के लिए सबसे अच्छा उपकरण का निर्धारण करना चाहिए।

जैसा कि पहले उल्लेख, isoflurane संज्ञाहरण दिल की दर कम हो जाती है। इसके अतिरिक्त, isoflurane कश्मीर एटीपी चैनलों के सक्रियण के माध्यम से cardioprotective हो सकता है और इसलिए, रोधगलितांश आकार को कम करने के रूप में कुत्तों 19 में पाया गया है। चूहों में जनरल एनेस्थीसिया इंजेक्शन एजेंटों का उपयोग प्रेरित किया जा सकता है। साँस लेना संज्ञाहरण अधिक से अधिक सुरक्षा प्रदान करता है, विशेष रूप से लंबे समय तक प्रक्रियाओं के लिए। हालांकि, साँस लेना संज्ञाहरण ऐसे परिशुद्धता vaporizers और flowmeters, विशिष्ट साँस लेने की प्रणाली, और कुशल सफाई सिस्टम प्रदूषण को रोकने के लिए के रूप में जटिल और महंगे उपकरण की आवश्यकता है। इंजेक्शन anesthetics के नुकसान के लिए एक प्रारंभिक खुराक, सही लंबे समय तक ane की गहराई नियमन करने का कोई मौका नहीं चुनने में कठिनाई शामिलsthesia, लंबे समय तक वसूली, आदि संज्ञाहरण के चुनाव की प्रक्रिया और अध्ययन का उद्देश्य 20 की लंबाई के अनुसार अनुकूलित किया जाना चाहिए।

ईसीजी चूहों में ischemia / reperfusion चोट की पुष्टि स्थिरता और infarctions के reproducibility में सुधार में मदद मिलेगी के लिए एक पूरक विधि के रूप में उपयोग करते हुए, लेकिन यह भी मात्रात्मक प्रवृत्तियों की स्थापना के माध्यम से तकनीक के भविष्य के अनुप्रयोगों के लिए संभावना को खोलता है। जांचकर्ता कुछ प्रयोगात्मक समूहों के भीतर समान ईसीजी विन्यास देख सकते हैं। उदाहरण के लिए, एक आनुवंशिक रूप से संशोधित पशु समूह सर्जरी के बाद असामान्य रूप से व्यापक क्यूटी अंतराल दिखा रहे हैं जब जंगली प्रकार की तुलना कर सकते हैं। इस जानकारीपूर्ण डेटा यदि जांचकर्ताओं ischemia और चोट का एकमात्र पुष्टि के रूप में दौरे रंग परिवर्तन का उपयोग याद किया गया होता। जंगली प्रकार और ट्रांसजेनिक चूहों के बीच तुलनात्मक अध्ययन के लिए, Lambeth कन्वेंशनों के दिशा निर्देशों के विचार भी मूल्यवान हो सकता है, खासकर उम्र, लिंग के संबंध में, चकाचौंध और जानवरों 21 के randomization।

अंत में, myocardial ischemia / reperfusion चोट के पूरक पुष्टि कई लाभ प्रदान करता है। ईसीजी एक पूरक तकनीक के रूप में उपयोग करना सर्जरी में स्थिरता स्थापित करने में मदद कर सकते हैं। यह प्रयुक्त जानवर की संख्या में कमी, जबकि उच्च गुणवत्ता डाटा उपलब्ध कराने में मदद कर सकता है। यह भी जांचकर्ताओं हृदय में चोट, ऊतक मौत और / या समय के साथ remodeling गैर invasively नजर रखने के लिए अनुमति देता है। अन्त में, ईसीजी myocardial ischemia / reperfusion की पुष्टि के रूप में उपयोग करते हुए मात्रात्मक electrophysiological प्रवृत्तियों स्थापित करने की संभावना प्रदान करता है।

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Materials

Name Company Catalog Number Comments
Vevo 1100 Fujifilm
Visual Sonics		 Echocardiography Machine
Mouse Handling Plate Fujifilm
Visual Sonics		 Heated ECG plate
Signa-Gel  Highly Conductive Multi-
Electrode Gel Parker 15-25 Purpose Electrolyte
Transpore Medical Tape 3M 1527-0
PI-Spray II Pharmaceutical Innovations NDC 36-2013-25 Cleaning agent for ECG plate
C57Bl6 Mice The Jackson Laboratory 000664 Male, 8 - 12 wk
IsoThesia-Isoflurane Henry Schein NDC 1169-0500-1
Excel Microsoft
Systane Nighttime Lubricant Eye Ointment Alcon 65050935
7-0 Perma-Hand Silk Sutures Ethicon 640.O32
5-0 Perma-Hand Silk Sutures Ethicon K809.O32
Surgical Scissors ROBOZ RS-5881
Forceps Fine Science Tools 11052-10
Gauze Bio Nuclear Diagnostics Inc DIS-022B
Needle Holder Fine Science Tools 12565-14
Buprenex CIII  Patterson Veterinary 0-891-9756 Buprenorphine Hydrochloride Analgesic 
Betadine Purdue Products 67618-150-08
Nair Church and Dwight Co. NRSL-22339-05

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References

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चिकित्सा अंक 117 हार्ट इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम ischemia / reperfusion ischemia / reperfusion की चोट रोधगलन
भूतल पैड Electrocardiography का प्रयोग चूहों में myocardial ischemia और reperfusion की चोट की पुष्टि
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Scofield, S. L. C., Singh, K.… More

Scofield, S. L. C., Singh, K. Confirmation of Myocardial Ischemia and Reperfusion Injury in Mice Using Surface Pad Electrocardiography. J. Vis. Exp. (117), e54814, doi:10.3791/54814 (2016).

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