Introduction
心臓病は、世界中の死1,2の主要な原因のまま。だけでなく、それは一般的な心臓の損傷部位心筋梗塞後4体全体3に、心臓から血液をポンピングする責任左心室（LV）ほとんどの筋肉室、です。左心室組織死は、多くの場合、収縮期心不全になります。心臓病の動物モデルは、生物医学、心血管研究の発展のために不可欠です。マウスのC57BL / 6系統は、その迅速な繁殖時間、低コストのために、動物モデルのための普及した選択されていると遺伝的変化に容易にしています。心臓病の研究のためのほとんどのマウスの外科的モデルは左冠動脈のLAD枝の閉塞を伴います。 LADは左鈍角限界5,6と呼ばれることもあります。 LADは、左心室の前部と前外側の壁に血液を供給する。 LAD閉塞の研究は、時々、前部梗塞を誘発int型を拡張することを目的としています劣ると側壁領域7 O。
心筋梗塞の研究のために頻繁に使用される2つのモデルは、慢性閉塞心筋梗塞や心筋虚血/再灌流傷害を含みます。慢性閉塞は、外科的にLADを通る血流をブロックの周りに、永久に縫合することによって作成されます。虚血/再灌流障害にのみ過渡、通常は30〜60分間、虚血期間と同じように多くを作成されます。一過性虚血を達成するために、再灌流期間が続く心臓の心外膜表面上のLADに対して平行に配置されているLAD周囲に閉塞縫合関係と小さなPE-10管は、管と閉塞縫合糸を除去し、血液がある場合再び動脈を通って心筋内に流入させます。虚血/再灌流手術が原因PROMを含む、ヒト梗塞の治療を並列再灌流傷害の性質に臨床的に関連するとみなされていますptの冠動脈血管形成術およびステント留置動脈の、または冠動脈バイパス。一般的に、これらの手術中に、マウス心臓におけるLVの虚血は、心筋壁の可視蒼白によって確認されました。しかし、単純に常時監視条件下心電図（ECG）パッド上に手術を行うことによって、目に見える変化は、それによってマウス心筋の虚血および再灌流を確認し、ECG波形を観察することができます。
マウスの心臓は、その4つのチャンバー構造を含む多くの点で人間の心に似ていますが、心にも違いがあります。成人のそれに対し、分（BPM）あたり700拍れる〜60-100 BPMの8,9 - 1つの明らかな違いは、成体マウスの平均安静時の心拍数は600です。さらに、マウス再分極波のように、JおよびTは、多くの場合、脱分極のQRS群10を識別する明確なSTセグメントを困難と合併します。 electrocardiographicallのプロセスを複雑にするには心筋虚血を確認yが、それは臨床的にSTのE levation mのiが nfarction yocardialまたはSTEMIと呼ばれるヒトにおける虚血および心筋梗塞傷害の診断のためのマーカーとして使用されるT波およびSTセグメントの上昇です。ヒトおよびマウスの波形間の主な違いの一つは、S波がすぐに陰性T波に直接転送J-波で続いているです。マウスにおける急性心筋虚血中にS波の振幅が減少し、直接異常J波と逆T波11が続きます。 T波は、マウス11で再分極のかなりの部分を占めるようには見えません。人間の違い対命名法およびマウスにもかかわらず、マウスの心筋虚血および再灌流のECG確認はまだ実現可能と比較的簡単です。波形の解釈を簡単にするために、SJT間のセグメントは、ST-segmeと呼ばれntは、本明細書。
2013年に公開されたSTEMIガイドライン未満90分12 .Thisの患者ドア・ツー・バルーンの時間をお勧め動脈が再び開かれるまで、患者の冠状動脈閉塞の識別からその時間枠を意味未満90分でなければなりません。鼓動する心臓が常に働いているので、高い酸化代謝および酸素消費3の高いレベルを有しています。これを提供するために、毛細血管のネットワークは、各筋細胞3に提供されています。それは酸素と栄養の供給を排気するために数拍の心を取るだけ。 90分ウィンドウでは、ヒトにおける虚血性心臓領域は、酸素を豊富に含む血液の価値は5400と9000心拍の間に受信することからブロックされています。その同じ90分ウィンドウで、マウスが54,000 63,000に心拍を持っているでしょう。マウス虚血/再灌流傷害の実験時間点は30〜60分の間、典型的です。
開発の重要性マウスモデルにおいて心筋虚血および再灌流を確認する補足的な方法をると、心筋虚血/再灌流研究におけるデータの一貫性と再現性に重大な意味を持っています。視覚的に組織の色の変化のために心を観察する現在の慣行は、スタンドアロン診断として適切ではありません。さらに、チューブおよび縫合糸を除去した後の再灌流は保証されません。動脈がもはやオフに接続されていますが、動脈は、手順の間に被害を受けなかったかもしれないし、再灌流が不可能になる場合があります。むしろ心筋蒼白と発赤（赤色）の観測に頼るよりも、再灌流を確認するために心電図の変化の記録を持っていることが有益であろう。虚血/再灌流傷害のマーカーが表示されませんハーツは、その後すぐにフラグを立てることができ、続行する方法についての決定は、研究者によって作製することができます。
最後に、心電図の記録を確立することは目を通してベースラインからの変化します虚血性および再灌流期間eは研究者は、最初の手術後の心臓の監視を継続することができます。研究者らは現在、すぐに手術が完了すると、心臓の視力を失います。 ECGは、手術後の日に心筋の時間に起こる変化への洞察を得るための簡単な方法です。手術後の時点で記録されたECGは、継続を示すか、組織死を悪化後期開発Q波を開示する可能性があります。しかし、効果的に新規または悪化心電図マーカーをゲージには、ベースラインECGは、比較のために利用可能でなければなりません。
12週齢の雄のC57BL / 6マウス - このプロトコルは、準備取得、および8を使用して、マウスの心臓の虚血および再灌流を確認するために、ECGを解釈する方法について説明します。
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Protocol
動物で実行されたすべての外科的処置は、管理と使用実験動物の13または他の適切な倫理ガイドラインのためのガイドに従って行われるべきです。プロトコルは、先に進む前に、適切な機関で動物福祉委員会によって承認されなければなりません。
1. ECGの準備
注：開始する前に、手袋、眼鏡、きれいな白衣や使い捨てガウンを含む個人用保護具を着用。
- 非アルコールおよび非漂白剤ベースの除染液を使用して、ECGパッドを清掃してください。優しく繊細なタスクを使用した電極パッドが破損しないことを確実にするために過剰の溶液をオフにブロットするワイプ。
- ECGパッドが加熱機能を持っている場合は、それを使用しています。麻酔したマウスは急速に体の熱を失う傾向があります。手術14を通じて37℃の正常体温体温を維持するために、40〜42℃にパッドを加熱します。体の気性を監視します直腸温度計を使用してature。体温〜37℃を維持するために、必要に応じてパッド温度を調整します。
- 最もthoracotomiesは、マウスがそのバック（仰臥位）の上に横たわるを用いて行われるように、トグルは「仰向け」設定に反転していることを確認します。多くのECGパッドが発生しやすいと仰臥位の位置の間で切り替える機能を持っています。右の向きを選択しないと、心電図のイベントの不実表示をもたらすことができます。
- 5％吸入イソフルランおよび1リットル/分の酸素を用いてマウスを麻酔。マウスを麻酔されると、ECGパッドへの転送マウスは、麻酔ノーズコーンを搭載し、2％および1リットル/分の酸素にイソフルランを減らします。マウスの足をピンセットで挟まれたときにマウスが反応しない保証することによって、適切な麻酔を確認してください。
- 麻酔をかけながら乾燥や角膜の損傷を防止するために、マウスの目の上に目の潤滑軟膏の薄いコートを適用します。
- すべての可視寝具を除去するためのウェットワイプでマウスの足をきれいにしてくださいそれは足に貼り付けてもよいし、ECGパッドに足からの電気インパルスの伝達を妨害することができます。ワイプとドライ足。
- ECGパッド上の4つの金属電極のそれぞれに高導電性電解質ゲルの（米ドルダイムより若干小さい）少量を適用します。
注：あまりにも多くのゲルは、それが困難なテープを使用してパッドに足を抑制することが可能になるようにのみ少量のゲルを適用するようにしてください。さらに、足は、彼らがテープを適用する前に湿った場合は、手術中に拘束から抜け出す可能性があります。 - 仰臥位でマウスを使用すると、それに対応する電極（ 図1）に各足を拘束する明確な医療用テープを使用します。最初のテープのその片に各足を押し、ECGパッドにテープを接着。各拘束足が電解質ゲルと電極と接触していることを確認してください。
2. ECGを取得
- ECG取得、confのために使用される機器に応じて、機械igure ECG波形をリアルタイムで可視化することができるようになっています。心エコー検査のマシン上の生理学的監視設定を使用して、心電図記録のために、ライブBモード画像は、画面の下部に沿って実行されているECG波形を持つことになります。
注意：最高のその機器を構成する方法を決定するために、個々のマシンのユーザーガイドを参照してください。 - 心エコー検査機や他のECG記録デバイス上同等にBモードキーを押して、ECG波形のリアルタイム可視化を有効にします。
- 振幅の違いを考慮して、解像度を調整します。 Q波のR波またはトラフ（谷）のピークは視覚フレームの外にある場合は、波形の全体の高さを観測することができるまで、解像度を調整します。
注：これは、心エコー検査機に生理設定]タブの下で行うことができます。波形全体が表示されるまで増減の矢印をクリックします。
- 振幅の違いを考慮して、解像度を調整します。 Q波のR波またはトラフ（谷）のピークは視覚フレームの外にある場合は、波形の全体の高さを観測することができるまで、解像度を調整します。
- 画像はOBTされるべき任意の時間ained、ツールのECGパッドをオフにします。鉗子や指でECG記録時にマウスをタッチすると、波形を乱すます。マウスは、任意の心電図を記録する前に、ECGパッドの上に静止画および手つかずであることを確認してください。
- マウス上の任意の外科的切開を行う前に、マシンの「記録」または「ストア」機能を使用します。この画像は、後の比較のためのベースラインとして使用されます。
3.外科的手順と記録ECG
- 開始する前に、鎮痛剤（ブプレノルフィン、1.5μgの、腹腔内）で麻酔したマウスを注入します。虚血/再灌流手術手順の詳細は、他の場所5見出すことができます。
- 化学的または機械的に手術部位の周りの毛を削除し、ベータダイン溶液でエリアを消毒。食道と気管に垂直切開を平行にするためにメスを使用してください。気管を覆う薄い組織になるまで穏やかに切開部の各側にリンパ節に移動します露出しました。気管の白い軟骨リングが表示されるまで鉗子を使用して、静かに組織を分離します。
注：私たちは、一般的にNairさんの脱毛ローションを使用しています。ローションは、約1分間の手術部位に適用されます。 Nairさんはその後、徹底的に生理食塩水または水を用いて洗い流します。 （毛包を検出することができる）、高分解能心エコー検査は、手術の前および後に行われるので、この方法は、我々の研究室で好ましいです。しかし、注意は、性器などの敏感な部分を避けるように注意する必要があり、その後、徹底的に潜在的な皮膚の火傷を避けるために、Nairさんを洗浄します。 - 迅速ノーズコーンからマウスの鼻を削除して、マウスのと喉に向かって口の中に換気チューブを挿入します。換気チューブの先端が露出した首のエリアを介して表示されている場合には、気管の開始とチューブの位置を合わせます。視覚トンに確認することができる気管にチューブをスライドするまで、上向きの圧力をかけながらゆっくりと左右にチューブ側を小刻み半透明の気管hrough。
- マウスが挿管処置の間に麻酔をかけたままであることを確認してください。挿管から一時停止し、攪拌を開始した場合にノーズコーンにマウスを返します。
- 文字列のループを使用して、ループを介してマウスの2前歯をフックし、文字列がマウスの頭部を安定させ、手術中に動かない換気チューブを確実にするために、ECGパッドに終了テープで固定します。迅速げっ歯類換気装置に換気チューブを接続し、マウスの体重に応じて換気設定を調整します。代わりにテープ換気チューブ。
- 乾燥から組織を維持するために温かい生理食塩水に浸したガーゼでマウスの露出した気管をカバーしています。
- 胸骨の左側に沿ってメスを用いて縦切開を行います。
- 鉗子を使用して、静かに筋肉層から筋膜層を分離します。慎重に目に見える血管を切断することなく、基礎となる筋肉層を切ります。
- 鉗子を使用して、第三リブとプルをつかみます上向きにやさしく。片手で肋骨のグリップを維持し、慎重に第三及び第四肋骨の間の肋間組織を切断する手術用はさみを使用しています。肺が損傷していないことを確認してください。
注：肺が原因で圧力勾配の損失にほとんどすぐに胸腔を外科的切開によって穿刺された後、深い胸の空洞内に収納されます。肺は続行する前に退避するまで待ちます。 - つかみ、静かに心を囲む心膜の薄層を分離するために鉗子を使用してください。
- 開創器を挿入するか、手動で心臓が肋骨の間見える位置にリブを移動するために、リブリトラクタとして鉗子を使用しています。
注：合字の配置中に右下の足をオーバーラップされるように、マウスの左下の足を移動するのが一般的です。これは、左心耳、または耳介は、合字の配置中に容易に見えるように心を配置するのに役立ちます。有効なECGワットがあることに注意してください左下の足は、電極から離れている間aveformsが得られません。この理由は、縫合結紮糸が心筋組織を通ったが結び目が締め付けられる前に渡された後、その電極に足を戻すことをお勧めします。 - 左心耳の下に、視覚的にLADを探します。迅速LADの下を通過するのに十分深くなく、LVの空洞を貫通するように深くない心筋に7-0絹テーパー状縫合針を挿入します。縫合結紮の自由（非針）最後に残された縫合絹の約4cmがあるまでを通して縫合結紮糸を引き出します。
- 単純な縫合糸の結び目を結ぶために開始します。縫合絹糸の自由端は結び目を形成するループを通して引っ張られた後、一時停止。
- 鉗子で縫合絹の自由と針の両端を持ち、形成結び目の下と心外膜表面の上にPE-10チューブの〜1cmのセクションを挿入します。
- マウスの左足を交差されている場合は、そのプロに足を戻します電極あたり。 PE-10チューブは心臓に縫合されるように結び目を締めます。心電図を記録できるようにするために、マウスを持つすべての物理的接触をリリース。
- 〜10秒間を順番にECG波形を許可します。 「オクルージョンの時間」として視覚的にECG波形と記録波形を確認してください。 T波が1分以内に振幅が増加しない場合、合字の配置を見直します。
- T波の振幅が増加し、いずれの試験から動物を捨てるか、合字の配置を修正しようとしていない場合。
- 視覚LVの虚血性杭を確認するために、心筋の色を確認してください。
- ECG変化と心筋の色の変化は、虚血、ダブルノットPE-10チューブの周りに縫合糸を示している場合。
- 温かい生理食塩水ガーゼでオープン胸腔をカバーしています。
- 録音ECG虚血期間の期間ごとに5〜10分。
ECGを使用した再灌流の4確認
- 生理食塩水ガーゼ入り江を削除します胸腔を鳴らすと心を視覚化します。
- PE-10チューブの上に縫合シルクをカットする刃を使用してください。結紮糸が切断されると、PE-10チューブの部分を削除して、静かに心筋から縫合結紮を削除します。
- マウスを使って、すべての物理的接触を解除し、サイクルにECG波形〜10秒を可能にします。記録波形」再灌流の時間。」希望の実験時間点に到達するまでのECG波形ごとに5〜10分を記録し続けます。
- 必要に応じて振幅の変化の解像度を調整します。 T波は、PE-10管結紮の除去時に変更されない場合は、再灌流が確認されていません。
- T波はチューブの除去の際に変更するには、研究から動物を捨てるか、合字の配置を修正しようとしていない場合。
- 視覚さらに赤色への復帰によって再灌流を確認するために心筋を検査します。
- 5-0で肋間スペースを縫合することによって閉じる胸腔絹縫合手術中に入った過剰空気を排出するためにマウスの胸に穏やかな圧力をかけながら。そして、筋肉層、そして最後に、皮膚を縫合。注：胸腔に圧力を適用すると、全てのマウスにおいて、空気の胸腔を排出するのに十分ではないかもしれません。このため、避難の注射器と針の方法は、すべての空気が追放されたことを確認するために使用すべきです。
- 吸入麻酔をオフにし、電極からマウスの足を削除する前に、最後のECGを記録します。 2 L / minに酸素を増加させ、マウスが意識を取り戻すまで、換気を維持します。
- マウスは梗塞の変動を回避するために、一定の温度制御された環境で例えば加熱パッドまたは暖かいインキュベーターを回復することを可能にします。マウスしかめっ面スケールによって示されるように、必要に応じて、その後、手術後ブプレノルフィン24時間でマウスを治療し。
注：再灌流のための手順は、Xu らにより詳細に検討されている5。
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Representative Results
正常マウスのECGは、電気イベントP、Q、R、S、JおよびT. Pためのアルファベットマーカーと、図2に表示され、初期の心房脱分極です。 QRSは心室を超える脱分極の波です。 Jは、早期再分極であり、Tは、リカバリ11として知られている異種の再分極を表します。多くのラボはJ波の命名法を使用し、代わりにSTセグメント10,15-17としてSJT-セグメントを参照していないことに留意すべきです。ここでは、結果および分析は、代表と40匹のマウスの実験室での観察のオフに基づいています。ほとんどのマウスは、手術の過程で同様の波形の進行を示しました。同様の波形を示さなかったマウスを、さらなる分析のためにフラグが設定され、非梗塞動物と考えられました。類似波形の結果はまた、ジョンら 15により報告されています。
マウスの心のsuLAD閉塞に局所虚血からfferingすることは、典型的にR波だけでなく、STセグメントの最終的な標高が続くJT-セグメントの超急性ピーキングの振幅の増大を示し、 図3は 、急性心筋虚血の最初の兆候を示しています。 T波の超急性ピーキング。この図から分かるように、T波は、ベースライン条件からの振幅が増加しています。ただし、これは基線波形の場合と同様にS波がまだ深く負に突出しているため、ST上昇はまだありません。
ベースラインECG構成は、負の突出S波（ 図2）が表示されます。時間が進むにつれて、ECGの変化が認められます。 STセグメントは、S波とT波の開始端部との間の区間として定義されます。このSTセグメントは、ヒトにおいて明らかです。高い心拍数に、このセグメントは、マウスにマージされ、追加、早期再分極「J-波」9月S-及びT波をarates。したがって、等電位線にS波以上の上昇は、ST上昇のマウスバージョンとして考慮されるべきです。 図4に早期梗塞虚血の進行はST上昇によって見ることができます。ここで、S波は、等電位線の上に、高められた振幅で表示しています。 J波はまた、基準波形（ 図2）と比較した場合は特に、上昇します。したがって、STセグメントは、傷害/梗塞10の指標である上昇しています。
図5は 、ベースラインからのすべての方法の再灌流を介して1マウスの進行に従っています。第1の波形を記録し、ベースラインであった正常な洞調律を表示します。結紮糸を縛り、動脈が閉塞さになった後に第2の波形は、ECG 1分が表示されます。このライン上の赤い円が超急性T波のピークを示しています。場合と比較のwi番目の「ベースラインは、「T波が上昇していることは明らかです。第三の波形は、5分の時点で完全なST上昇を示しています。 「1分間の虚血」のイメージでは、S波はまだ等電位線を通過し、マイナスに突出しました。しかし、5分で複合体のS部分は、J-およびT波に進む前に限り負のそれが必要として到達しません。 S-とT波との間のセグメントが等電位線から上昇しているので、これはST上昇として記載されています。局所虚血の別の電気生理学的マーカーは、QRS群の開始から延び、T波の終わりまで続きQT間隔16を拡大しています。虚血の20分では、QT間隔が拡大しているとSTセグメントは依然として上昇しています。虚血の45分後、QT間隔遺跡が広がり、STセグメントは、上昇したままです。
持っている心筋の再灌流30分以下のため、虚血性されて、マウスでベースラインの条件に戻っECGをもたらすはずです。プレダとBurlacuは、マウスの心電図の変化、虚血時間、および梗塞の重症度17との間の相関関係を確立しました。これは、1時間の虚血期間は永続的なECG変化を生じなかったのに対し、30分の虚血期間は永続的なECG変化を引き起こさなかったことが観察されました。さらに、虚血の24時間後の閉塞動脈の再灌流にはサルベージ効果17を有していませんでした。通常、Q波はちょうど脱分極のQRS群の前にわずかに下向きの投影として識別することができます。かなりの筋肉の死は10に設定し始めると重要な、または病的なQ波は、心筋虚血の発症後すぐに開発することができます。有意なQ波は、広いQ波、その結果、対応するR波の高さの少なくとも1/3として、またはそれらの伸長時間により定義されます。死んだ心筋偏向エレクトリカの地域からの重要なQ波の結果離れて電極7からリットル電流。再灌流の5分後、深く、重要なQ波の証拠が（ 図5）現れ始めます。さらに、T波が等電位線（ 図5）に戻ります。再灌流の30分後、負のQ波が残り、おそらく永久的な損傷を示しています。この時点で、Q波は、広くて深いあり、死にかけ心臓組織を損傷領域（ 図5）の周りに電流を偏向していることを示します。
連続虚血後、傷害および梗塞への進行は、強化された負のT波の突起（ 図5、30分間の再灌流、第二の赤い円）につながります。真の梗塞にこの強化されたT波の投影は、通常7永久的なものになります。 30分間の再灌流波形の第二の赤い丸は逆T波（ 図5）のように見えるかを示しています。 5 Aの場合ND 30分のT波は、T波がより負に突出していることは明らかであると比較されます。重要なQ波と相まってこれは、この心臓に永久的な組織損傷のための証拠を提供します。吸入イソフルラン麻酔は、心拍数を減少させ、したがって、QTインターバルを増加させることに留意すべきです。しかし、回復のT波の振幅が18影響を受けないままです。
上記の変化を定量的に電圧の観点から分析することができる。.csvファイルとして生理的データをエクスポートすることは非常に大量のデータを提供します6に示す図 。フラクション-のミリ秒の速度でECG値（振幅）を提供することに加えて、所望であれば、他の呼吸データ、温度プローブ、血圧カフ等を含めるためのオプションがあってもよいです。 図7に示すように、これらの定量的データをグラフ化することができます。P波にP波から一連の波形をグラフ化ECGを視覚化するのに役立ちます設定の傾向。任意の少ない時間が十分に波形が生じないことがありますので、500ミリ秒の期間は、視覚化するには良い時間枠であり、任意の追加の時間は、グラフが標準的なコンピュータモニタ上で見たときに、雑然とした電気生理学的イベントは逃したかを認識することは困難することができる表示されるようになります。
図1：ECGパッド上でマウスの正しい配置はこのマウスは、仰臥位に位置しています。マウスの足の各1は、ECG表面パッド上の対応する電極にテープで固定されている。 この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。
図2： 通常のマウスのベースラインECG波形。通常のマウスのベースラインECGは、心臓内の電気的事象を記述するために使用される文字P、Q、R、S、JおよびTで標識されている。 この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。
図3：T波の昇格も超急性T波またはピーキングとして知られています。 T波が増幅され、ベースラインT波（図2）よりも高い。され、この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。
図4：ST 上昇このフィギュアdispl。STセグメントとして観察することができるAYS ST上昇は、等電点よりも高くなっている。 この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。
図5： 虚血/再灌流手術の過程で典型的な心電図変化この図は、心筋虚血/再灌流手術の期間にわたって1マウスに従います。第1の波形を記録し、ベースライン（ベースライン）であった正常洞調律が表示されます。結紮糸を縛り、動脈が閉塞さになった後に第2の波形（1分間の虚血）は、波形1分が表示されます。このライン上の赤い円が超急性T波のピークを示しています。第三の波形（5分虚血）上の赤い円は、完全なST上昇が表示されます。酔っ上の赤い丸 r番目の波形（20分虚血）が広がったQT間隔とS波は依然として上昇しているが表示されます。第五の波形（45分虚血）ディスプレイ上の赤い円は、QT-セグメントを拡幅し、STセグメント上昇しました。第六波形（1分間の再灌流）が第七波形（5分間の再灌流）に赤い丸が深く、重要なQ波のフォームが表示されischemia.The 45分対有意な変化を表示しません。第八波形（30分の再灌流）の最初の赤い円は、第二の赤い丸が可能なT波の増強を表示しながら、大幅なQ波が表示されます。 この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。
図6：それはスプレッドシートへの.csvファイルとしてエクスポートされる生理学的データは、この図は、生理学的データを示しています。REF = "https://www.jove.com/files/ftp_upload/54814/54814fig6large.jpg"ターゲット= "_空白">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。
図7：mVの値グラフ化は、この図に表示されるグラフは、生理学的データファイル（図6）を使用して、3回連続で完全な波形からmVの値を示しています。グラフは、生理学的データファイルからのポイントを使用して簡単な線グラフである。 この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。
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Discussion
心筋虚血および再灌流を確認するための補助的な方法として、ECG変化を使用すると、閉塞リガチャーの正確な配置を保証します。合字配置の精度は、動物間のデータのばらつきを低減させるために重要です。マウス心臓におけるLADは、視覚化することが困難な動脈です。したがって、心電図変化に視覚蒼白を補充する結紮の正確な配置を確保し、組織損傷を生じるであろう。
ECGパッドは、心臓の非侵襲的なビューを提供していますので、複数のECGは、研究の過程で取得することができます。これは、中および手術後に起こる心臓の変化のより良い理解を提供するのに役立ちます。外科手術後の比較のために使用するベースラインECGを得るために重要です。後段組織死、さらに心室瘤は、電気生理学的信号のたわみ及びECG構成の変更により観察することができます。これは、洞察力を提供することができます心不全の進行に。
心エコー検査機を用いてECGを測定することの利点は、前または虚血/再灌流手術後の心臓の構造的および機能的パラメータの同時測定を含みます。レコードECGに対するシステムの制限は、心エコー検査機を購入するために高いコストが含まれています。実験は複数日にわたって一定のECGモニタリングを必要とする場合は、様々な時間間隔で波形を記録し、分析するためにプログラムさすることができ、対応するソフトウェアを使用してリモート遠隔測定ECGユニットを含むECG記録のために利用可能な装置の様々なものがあります。しかし、ECGの遠隔測定ユニットの多くは、移植手順や特殊な生息地を必要とします。さらに、多くの代替電極オプションは、電極クリップや針などの存在します。開胸術を介した虚血/再灌流手術は侵襲性の高い手順です。心エコー検査のMacにECGパッドを使用する利点ハインは、手術や余分な外科手術中に動物に接続されていないワイヤで非侵襲的な手順が含まれます。しかし、研究者らは彼らの研究室や実験的なニーズに最適な機器を決定する必要があります。
前述したように、イソフルラン麻酔は、心拍数を減少させます。さらに、イソフルランはK ATPチャネルの活性化を介して、心臓保護することができ、したがって、犬19で発見されているように、梗塞サイズを減少させます。マウスでの全身麻酔は、注射剤を用いて誘導することができます。吸入麻酔は、特に長期の手続きのために、より高い安全性を提供します。しかし、吸入麻酔は、汚染を防止するために、このような精密な気化器と流量計、特定の呼吸システム、および効率的な捕捉システムとして複雑で高価な装置を必要とします。注射用麻酔薬の欠点は、初期投与量を選択することの難しさ、正確長時間のANEの深さを調節するチャンスがないを含みますsthesia、長期の回復など麻酔の選択は、研究20の手順と目的の長さに応じて適合させなければなりません。
マウスでは虚血/再灌流障害を確認するための補助的な方法として、ECGを使用すると、梗塞の一貫性と再現性を向上させるだけでなく、定量的な傾向を確立を通じて技術の将来の応用の可能性を開きます。研究者らは、特定の実験グループ内の類似のECG構成することがあります。野生型と比較した場合、例えば、遺伝的に改変された動物群は、手術後の異常に広いQTインターバルを示すことができます。研究者らは、虚血および再灌流傷害の唯一の確認として心筋の色の変化を使用する場合は、この有益なデータが見逃されたであろう。野生型およびトランスジェニックマウスとの間の比較研究のために、ランベスの表記ガイドラインへの配慮は、特に年齢、性別に関しては、価値があります、まばゆいばかりの動物21のランダム化。
結論として、心筋虚血/再灌流傷害の補足確認は、複数の利点を提供しています。補足技術としてECGを使用すると、手術で一貫性を確立することができます。これは、より高い品質のデータを提供しながら、使用する動物の数を減少させるに役立つことができます。また、研究者は心臓損傷、組織死および/または時間をかけて非侵襲的に改造を監視することができます。最後に、心筋虚血/再灌流の確認としてECGを使用して定量的な電気生理学的な傾向を確立する可能性を提供しています。
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Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Vevo 1100 | Fujifilm Visual Sonics |
Echocardiography Machine | |
| Mouse Handling Plate | Fujifilm Visual Sonics |
Heated ECG plate | |
| Signa-Gel | Highly Conductive Multi- | ||
| Electrode Gel | Parker | 15-25 | Purpose Electrolyte |
| Transpore Medical Tape | 3M | 1527-0 | |
| PI-Spray II | Pharmaceutical Innovations | NDC 36-2013-25 | Cleaning agent for ECG plate |
| C57Bl6 Mice | The Jackson Laboratory | 000664 | Male, 8 - 12 wk |
| IsoThesia-Isoflurane | Henry Schein | NDC 1169-0500-1 | |
| Excel | Microsoft | ||
| Systane Nighttime Lubricant Eye Ointment | Alcon | 65050935 | |
| 7-0 Perma-Hand Silk Sutures | Ethicon | 640.O32 | |
| 5-0 Perma-Hand Silk Sutures | Ethicon | K809.O32 | |
| Surgical Scissors | ROBOZ | RS-5881 | |
| Forceps | Fine Science Tools | 11052-10 | |
| Gauze | Bio Nuclear Diagnostics Inc | DIS-022B | |
| Needle Holder | Fine Science Tools | 12565-14 | |
| Buprenex CIII | Patterson Veterinary | 0-891-9756 | Buprenorphine Hydrochloride Analgesic |
| Betadine | Purdue Products | 67618-150-08 | |
| Nair | Church and Dwight Co. | NRSL-22339-05 |
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