Summary
Vi beskriver en trin-for-trin fremgangsmåde til udførelse af direkte pulp capping på mus tænder for evaluering af pulpa sårheling og reparerende dentin dannelse in vivo.
Protocol
Mus blev købt fra Jackson Laboratory og holdes i et patogen-fri vivarium i UCLA Division Laboratory Animal Medicine (DLAM). Forsøgene blev udført i overensstemmelse med de godkendte institutionelle retningslinier fra Udvalget for kansler Animal Research (ARC # 2016-037).
1. Mus bedøvelse
- Brug otte uger gammel kvinde C57 / BL6-mus (n = 3).
- Bedøve mus ved anvendelse ketamin (80-120 mg / kg af muse vægt) / xylazin (5 mg / kg af muse vægt) opløsninger og administrere intraperitonealt (ip) i en dosis på 10 ml / kg.
- Forbered ketamin (80 - 120 mg / kg) / xylazin (5 mg / kg) opløsninger og administrere dem intraperitonealt (ip) i en dosis på 10 ml / kg.
- Bekræft, at musene er fuldt bedøvet ved at udføre en tå knivspids.
2. Papirmasse-capping Procedure
- Anbring holderen munden i musen mund.
- Fastgør munden på bordet, således at hanannonce vender opad.
- Placer mikroskop (10X) på toppen af mundingen, således at den første maxillary molære er fuldt synligt.
- Brug af ¼-rund bur i en high-speed håndstykket ved 200.000 rpm, fjerne emalje del af tanden i midten, indtil pulpen er synlig gennem det gennemsigtige dentin. papirmasse med boret Udsæt ikke.
- Ved hjælp af en # 15 endodontisk K-fil (diameter på 150 um), perforere gennem dentin og udsætte pulpen.
BEMÆRK: Særlig forsigtighed bør tages, så dentin vragrester ikke bliver skubbet ind i papirmasse. Dette kan undgås ved at dreje K-filen kvartalsvis og derefter trække K-filen ud. - Bland MTA med sterilt H2O ifølge producentens anvisninger. Lever og placer MTA på den blottede pulp med spidsen af opdagelsesrejsende. Brug bagsiden af papiret punkt (fint) til at pakke MTA i den udsatte pulp ved en let banken. Den tykkere side af papiret punkt er flad og tillader derforfor en korrekt kondensering af MTA i den udsatte pulp.
- Etch tanden i 15 s ved at placere 35% phosphorsyre ætsemiddel hvor det bare dækker tanden. Vær særlig omhyggelig med at begrænse placeringen af ætsemiddel, da det kan irritere gingivale væv.
BEMÆRK: ætsemidlet kommer i en sprøjte og benyttes til ru tandoverfladerne så dentale klæbemidler kan strømme i at mediere mikromekanisk binding på tanden. Fordi de er tyktflydende, kan det være selvstændig ved at anvende små mængder direkte på tanden. - Brug negativ-presset sug til at fjerne ætsemidlet. Brug en vatpellet der er let gennemvædet med H2O for at fjerne rester af ætsemidlet. Gentag dette trin, indtil ætsemidlet er helt fjernet fra tanden.
- Ved hjælp af en komprimeret luft duster, forsigtigt tørre tanden.
- Anvende de dentale klæbemidler ved anvendelse bagsiden af papiret punkt.
- Gøre det klæbende lag tyndt med trykluft i 3 s.
- CURE de dentale klæbemidler til 20 s ved hjælp af hærdning lys enhed.
- Placer den flydende komposit i små mængder på tanden, der blev udjævnet med MTA. Brug spidsen af opdagelsesrejsende til at flyde det sammensatte i tand riller.
- Hærde kompositten i 30 s under anvendelse af en lyshærdende enhed til at polymerisere det. Bekræft, at det sammensatte er fuldt hærdet og hård at bruge Explorer.
3. Post-op Care
- Administrere carprofen (5 mg / kg) subkutant (sc) umiddelbart efter pulpen-capping procedure.
- Placer mus på en varmepude med lav effekt til at holde dyrene varm, før de vågner op.
- Retur musene til vivarium til boliger.
4. Tissue Indkøb
- Efter 5 - 6 uger, aflive musene ved cervikal dislokation under en komplet bedøvelsesmiddel tilstand med isofluran.
- Fjern forsigtigt overkæben ud af bunden af kraniet og sætte det ind i en 50-ml rør. Fastgør entire maxilla, der indeholder både papirmasse-udjævnede tand og den kontralaterale reducerede tand i 4% paraformaldehyd i PBS, pH 7,4, ved 4 ° C natten over, og derefter gemme det i en ethanolopløsning 70%.
BEMÆRK: Paraformaldehyd er giftigt og kræftfremkaldende. Den korrekte brug paraformaldehyd bør overvåges som skitseret i standard operationelle procedurer (SOP). - Scan musen maxillae hjælp af μCT scanning. For at sikre maxillae under scanningen, wrap prøverne med gaze vædet med 70% ethanol og placere dem i 15-ml cellekultur rør.
5. μCT Scanning
- Forbered prøverne for μCT scanning. Kort beskrevet wrap prøverne med gaze gennemvædet med 70% ethanol og sikres i en generisk 15-mL cellekultur konisk rør. Monter slangen på μCT scannebordet, som skitseret i producentens instruktioner.
- Indstil røntgenkilde til en strøm på 145 uA, en spænding på 55 kVp, og en eksponeringstid på 200 ms.
- Udfør erhvervelse billede med μCT scanneren på en 20-um opløsning og med en 0,5 mm Al-filter.
- Rekonstruere billedet og visualisere det 11.
- Når μCT scanningen er færdig, starter afkalkning med 5% EDTA og 4% saccharose i PBS (pH 7,4) i 2 uger.
6. Tissue Behandling og farvning
- Integrer de kalkfattige væv i paraffin. Før indlejring, trim overkæben ved at lave en sagittal snit straks forreste til den første molar. Mens indlejring, placere denne overflade nedad, således at den længdesnit af den første molære er skærefladen.
- Ved hjælp af mikrotom, forberede 5 um tykke slides. Papirmasse-capping områder normalt falder sammen med distopalatal (DP) rod, der kan bruges som en milepæl. Fastslå den præcise interesseområde ved at undersøge histologi under lysmikroskop og sammenligne de μCT billeder.
- For H & E-farvning, deparaffinize og rehydrere objektglassene med xylen (2 x) og serielt fortyndet ethanol (100% EtOH 2x, 95% EtOH 2x, og 70% EtOH 1x).
- Skyl objektglassene med rindende vand fra hanen.
- Pletten med Hematoxylinopløsning i 2,5 min og skylles med ledningsvand.
- Dyp dias i 95% ethanol i 1 min.
- Pletten med eosin-opløsning i 1 minut og skyl med vand fra hanen.
- Dehydrere med serielt fortyndet ethanol (70% EtOH 1x, 95% EtOH 2x, og 100% EtOH 3x) og xylen (3x).
- Monter dias med monteringsløsning.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Her viste vi trin-for-trin procedurer til at udføre pulp capping på mus tænder. Et af de vigtigste aspekter af pulp capping i mus er at have det rette apparat. I denne henseende har den mikroskop med en 10X forstørrelse er afgørende (figur 1A). For at oprette en klasse-I-lignende præparat i tanden, brugte vi en ¼-rund grat i en elektrisk høj hastighed håndstykke ved 200.000 rpm (figur 1B). Alternativt andre motorer, herunder dem, der bruger trykluft, kan anvendes til fremstilling af en tand.
I figur 2A-2E, er vist repræsentative trin til udførelse papirmasse udjævningen. Klasse-I-lignende præparat blev udført (figur 2B). Fordi en vandtåge kan drukne mus under proceduren, er dets anvendelse ikke anbefales. Af denne grund er det vigtigt at forberede tanden under forsigtig og intermittent slagtilfælde for at undgå overophedning. Anvendelsen af trykluft anbefales også at tilvejebringe køling virkninger. Mens udsætte papirmasse med en endodontisk fil, tage forsigtighed ikke at skubbe dentin affald ind i papirmasse, da dette kan forstyrre data fortolkning i reparerende dentin dannelse (figur 2C). Dette kan undgås ved hjælp af trykluft. På samme måde bør MTA placeres på den eksponerede pulp uden at skubbe for langt ind i papirmasse. MTA placering kan opnås ved anvendelse af bagsiden af papiret punkt med let banken bevægelser (Figur 2D). Efter MTA placering, bør tanden rengøres med H 2 O-gennemblødt bomuld pellets for at fjerne eventuel resterende MTA i rillerne, hvilket kan interferere med bindingen af kompositten på tanden. Der anvendes konventionelle metoder til komposit restaurering, herunder ætsning tandoverfladerne, priming og bonding med lim, og placere og kurere flydende kompositter (Figur 2E).
Seks uger efter pulp capping blev musene høstet, og ovenfra blev fotograferet for at bekræfte, at det sammensatte stadig var intakt (figur 3A). μCT scanning viste signifikant recession af pulpalt plads i pulp-udjævnede gruppe (figur 3B), hvilket tyder på, at reparerende dentin blev dannet i papirmasse. De kalkfattige væv prøver blev udsat for H & E farvning for yderligere at undersøge histologisk dannelsen af reparerende dentin in vivo. I kontrolgruppen, odontoblastic lag (OB) var tydeligt indlysende omkring kanterne af dentin (figur 4A - 4C). I modsætning hertil pulp-capping gruppe havde betydelige mængder af reparative dentin (RD) udformet i pulpale rum (figur 4D - 4F). Interessant, afslørede en nærmere undersøgelse, at reparerende dentin (RD) udviste et typisk kendetegn for dentin (f.eks s triated linjer repræsenterer dentinale tubuli, rød pil), såvel som den for knogle (f.eks osteocytter repræsenterer indfangede osteoblaster, sorte pilespidser). Når vi farvet for Dentin Matrix Protein 1 (DMP1), en markør for odontogent differentiering 12, fandt vi en signifikant stigning i DMP1 ekspression i pulpen af pulpen-afsluttede tand sammenlignet med den for den ikke-reducerede tand (figur 5A og 5B) , hvilket indikerer, at reparative dentin blev dannet inden pulpen.
Figur 1: Opsætning af udstyr til Pulp-capping Procedure. (A) En mikroskop (10X) til visualisering af muse tand. (B) Den hurtige håndstykket og den elektriske motor motor til fremstilling af et klasse I forberedelse til at eksponere pulpen.= "_ Blank"> Klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 2: Repræsentative Trin i Capping Procedure. (A) Ikke tilberedt tand på maxillary første molær i en mus. (B) Indledende emalje fjernelse ved hjælp af kvartalet-runde bur. (C) Pulp eksponering ved hjælp af den endodontiske fil. (D) MTA placering i den udsatte pulp. (E) Composite restaurering placering på tanden. Linjen repræsenterer 500 um. Klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 3: Klinisk Præsentation og μCT Scanning af Pulp-udjævnede og reducerede Tooth i mus. (A) Occlusal visning af muse maxillae på pulpen-afsluttede tand (venstre) og ikke-reducerede tand (højre). (B) De tværsnitsundersøgelser μCT billeder af maxillae. Linjen repræsenterer 500 um. Klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 4: histologiske tegn på Reparative Dentin Formation In Vivo. (AC) H & E-farvning af det ikke-reducerede maxillary første molær i en mus ved 100X, 200X og 400X. (DE) H & E-farvning af pulpen-udjævnede maxillary første molær i en mus ved 100X, 200X og 400X. Baren repræsenterer 100 um (OB = odontoblast lag; RD = reparerende dentin, sorte pilespidser =osteocytter; rød pil = dentinale tubuli). Klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 5: immunhistokemisk farvning af DMP1. (A) DMP1 farvning af ikke-reducerede maxillary første molær i en mus ved 400X. (B) DMP1 farvning af papirmasse-udjævnede maxillary første molar i en mus på 400X. Linjen repræsenterer 100 um. Klik her for at se en større version af dette tal.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
I øjeblikket er der adskillige forskellige eksperimentelle modeller at validere in vivo effekter af dentale materialer, stilladser, eller vækstfaktorer for odontogent differentiering over dental pulp stamceller (DPSC'er) 13. Disse modeller inkluderer ektopisk autolog transplantation af DPSC'er ind i et organ, såsom nyrekapslen eller subkutan transplantation af DPSC'er til immunkompromitterede mus med stilladser 14,15. Imidlertid er disse metoder begrænset i at deres odontogent virkning på DPSC'er ikke udføres i ortotopisk papirmasse miljø. På den anden side, er ortotopisk transplantation ind i papirmasse eller pulp-capping procedurer på en tand, der anvendes i større dyr 16,17. Selv om disse modeller er værdifulde i at evaluere odontogent potentiale i ortotopisk miljø, anvendelsen af disse modeller er stort set observerende i naturen, giver begrænsede mekanistiske indblik i papirmasse sårheling og reparerende dentin formation. I denne artikel præsenterer vi en detaljeret metode til at udføre pulp-udjævningen i mus. Dette trin-for-trin procedure omfatter bedøve musene, forberede klasse-I-lignende hulrum, placere papirmasse-capping materialer, høst maxillae, analysere med μCT scanning, og vurdere vævsprøver for reparerende dentin formation. Vores pulp-capping musemodel vil være medvirkende til at undersøge de grundlæggende molekylære mekanismer i pulpalt sårheling in vivo i forbindelse med reparerende dentin ved at muliggøre brugen af transgene eller knockout-mus, som er bredt tilgængelige i forskningsverdenen.
Nylige undersøgelser viste adskillige musemodeller, hvor dentin-dannelse blev observeret 18,19. Saito et al. skabt en klasse-I-lignende præparat uden eksponering papirmasse, som stimulerer reaktionære, ikke reparerende, dentin formation. Både reaktionære dentin og reparerende dentin er klassificeret som tertiær dentin, Som danner følgende ydre stimulering til tanden. Men i modsætning reaktionære dentin, som er dannet ved eksisterende odontoblasts, er reparative dentin dannet af odontoblast-lignende celler, såsom DPSC'er, når pulpen bliver eksponeret og odontoblastic lag overtrædes 20. Derfor er det ikke udgør en egentlig pulp-capping procedure i klinikken. I en anden undersøgelse blev glasionomer brugt til at lægge loft papirmasse eksponering 19. Viste imidlertid en klinisk undersøgelse, at glasionomer induceret kronisk inflammation, men ikke reparerende dentin 21. I denne henseende vores pulp-capping musemodel bedre repræsenterer den faktiske papirmasse-capping procedure i patienter.
Det er bemærkelsesværdigt, at når vi høstede mus efter mere end 6 uger, reparative dentin dannelse forekom i hele pulpakammeret og rodkanaler (figur 4). En sådan observation er ret uventet, da vi forventede reparative dentin formationen ved JUNktion mellem pulpen-capping materiale og pulp. Imidlertid er potent mineralisering af pulpen også observeret i kliniske omgivelser, især i relativt unge patienter 22. Fordi de 8 uger gamle mus anvendt i denne undersøgelse anses for at være "unge voksne" 23 er der mulighed hvorved disse mus stadig harbor betydelig odontogent potentiale. Derfor ville det være værd at undersøge aldrende virkninger af reparerende dentin dannelse i mus.
Vores histologiske undersøgelser afslørede, at skønt reparative dentin blev klart formet i pulpen-udjævnede tand, der var karakteristika både dentin og knogledannelse, hvilket fremgår af tilstedeværelsen af dentinale tubuli (rød pil) og osteocyter (sorte pilespidser) i den reparative dentin (figur 5). Sådanne iagttagelser antyder, at reparative dentin dannelse kan induceres ved lokalt bosiddende odontoblast-lignende dental pulp stamceller, såvel som infiltrating mesenchymstamceller fra den omgivende knogle.
Sammenlignet med dentin-dannende celler, vi fandt ingen dentin-resorberende celler i pulpen, som bestemt ved tartrat-resistent syrephosphatase (TRAP) farvning (data ikke vist). Faktisk pulpalt eller periapical inflammation inducerer osteoklastdannelse på knogleoverfladen omkring tanden, men ikke på dentinoverflader grund som-endnu-ukendte mekanismer 24. Notatet, der var en klar afgrænsning mellem det eksisterende dentin og det nydannede reparerende dentin (figur 4). En tidligere undersøgelse har vist et lignende fænomen; når en tand ekstraheres i nærværelse af bisphosphonat eller anti-RANKL-antistof, som begge inhiberer funktionerne af osteoklaster var der tydelige afgrænsninger mellem eksisterende lamellar knogle og nydannede vævet knogle 25. Dette begreb støtter yderligere fravær af dentin-resorberende celler i pulpen. Kollektivt vores etablerede musemodel ville provide unikke muligheder for at undersøge mekanismerne i papirmasse sårheling og reparerende dentin dannelse in vivo.
Der er en begrænsning til pulpen-capping musemodel. Genetiske makeups mellem mennesker og mus er klart forskellige. Det komplette genom er blevet sekventeret i mennesker og mus, og der er omkring 85% lighed i protein-kodende regioner mellem mus og mennesker 26,27. I tråd med dette begreb, blev det foreslået, at fund relateret til pulp capping dyr ikke nødvendigvis afspejler de hos mennesker 28. Ikke desto mindre er dyremodeller flittigt brugt i forskerkredse at rekapitulere humane sygdomme in vivo, såsom collagen-induceret arthritis for leddegigt 29, ovariactomy-induceret knogletab for osteoporose 30, lipopolysaccharid (LPS) indgivelse til systemisk chok 31, og ligatur placering for parodontitis 32. Som sådan pulpen-capping mouSE model vil være vigtigt at undersøge de molekylære mekanismer i papirmasse sårheling og reparerende dentin dannelse in vivo. Ikke desto mindre, ligesom andre dyremodeller, tolkning og validering af resultaterne fra pulp-capping musemodel bør vurderes omhyggeligt.
Sammenfattende den nuværende undersøgelse viser succesfuld pulp capping i mus. I modsætning til andre kendte modeller, vil denne pulp-capping musemodel et uvurderligt forskningsværktøj inden for papirmasse regenerering og reparerende dentin dannelse fordi det giver: 1) en mulighed for at udnytte bredt tilgængelige gensplejsede musestammer at belyse de underliggende mekanismer ved molekylært niveau og 2) en økonomisk effektiv måde at opnå statistisk signifikante resultater ved at øge stikprøvestørrelser. Yderligere undersøgelser venter, herunder objektiv kvantificering af reparerende dentin dannelse in vivo, aldersrelaterede afhængige effekter af reparerende dentin dannelse, Evaluation af klinisk tilgængelige pulp-capping materialer, og validering af molekylære determinanter, der er nødvendige for korrekt pulpale sårheling og reparerende dentin regenerering.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Acknowledgments
Denne undersøgelse blev støttet af R01DE023348 (RHK) fra NIDCR / NIH og fakultetet Research Grant (RHK) fra Rådet om Forskning for Akademisk Senat i Los Angeles Division fra University of California.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| BM-LED stereo microscope | MEIJI Techno | Microscope | |
| Optima MCX-LED | Bien Air Dental | 1700588-001 | Electic motor engine |
| isoflurane | Henry schein animal health | NDC 11695-0500-2 | |
| 1/4 round bur | Brasseler | 001092T0 | |
| Endodontic K-file | Roydent | 98947 | |
| ProRoot MTA | Dentsply | PROROOT5W | MTA |
| Paper point | Henry schein | 100-3941 | |
| Ultra-Etch | Ultradent product Inc. | Phosphoric acid etchant | |
| OptiBond SoloPlus | Kerr | 29669 | Adhesives |
| Coltolux LED | Coltene/whaledent Inc. | C7970100115 | Curing light unit |
| Characterization tint | Bisco | T-14012 | Flowable composite |
| Skyscan | Breuker | 1275 | uCT scanner |
| Microm | Thermo | HM355S | Microtome |
| Hematoxyline-1 | Thermo Scientific | 7221 | |
| Eosin-Y | Thermo Scientific | 7111 | |
| Cytoseal 60 | Thermo Scientific | 8310-16 | Mounting solution |
References
- Dye, B., Thornton-Evans, G., Li, X., Iafolla, T. Dental caries and tooth loss in adults in the United States, 2011-2012. NCHS Data Brief. (197), 197 (2015).
- Bagramian, R. A., Garcia-Godoy, F., Volpe, A. R. The global increase in dental caries. A pending public health crisis. Am J Dent. 22 (1), 3-8 (2009).
- Koliniotou-Koumpia, E., Tziafas, D. Pulpal responses following direct pulp capping of healthy dog teeth with dentine adhesive systems. J Dent. 33 (8), 639-647 (2005).
- Tarim, B., Hafez, A. A., Cox, C. F. Pulpal response to a resin-modified glass-ionomer material on nonexposed and exposed monkey pulps. Quintessence Int. 29 (8), 535-542 (1998).
- Tziafa, C., Koliniotou-Koumpia, E., Papadimitriou, S., Tziafas, D. Dentinogenic responses after direct pulp capping of miniature swine teeth with Biodentine. J Endod. 40 (12), 1967-1971 (2014).
- Dammaschke, T., Stratmann, U., Fischer, R. J., Sagheri, D., Schafer, E. A histologic investigation of direct pulp capping in rodents with dentin adhesives and calcium hydroxide. Quintessence Int. 41 (4), 62-71 (2010).
- Jegat, N., Septier, D., Veis, A., Poliard, A., Goldberg, M. Short-term effects of amelogenin gene splice products A+4 and A-4 implanted in the exposed rat molar pulp. Head Face Med. 3, 40 (2007).
- Paterson, R. C., Radford, J. R., Watts, A. The response of the rat molar pulp of two proprietary calcium hydroxide preparations. Br Dent J. 151 (6), 184-186 (1981).
- Sela, J., Ulmansky, M. Reaction of normal and inflamed dental pulp to Calxyl and zinc oxide and eugenol in rats. Oral Surg Oral Med Oral Pathol. 30 (3), 425-430 (1970).
- Maurice, C. G., Schour, I. Experimental cavity preparations in the molar of the rat. J Dent Res. 34 (3), 429-434 (1955).
- Skyscan, N. V. NRecon user manual. , Available from: http://bruker-microct.com/next/NReconUserGuide.pdf (2011).
- Sohn, S., et al. The Role of ORAI1 in the Odontogenic Differentiation of Human Dental Pulp Stem Cells. J Dent Res. 94 (11), 1560-1567 (2015).
- Kim, S., Shin, S. J., Song, Y., Kim, E. In Vivo Experiments with Dental Pulp Stem Cells for Pulp-Dentin Complex Regeneration. Mediators Inflamm. 2015, 409347 (2015).
- Gronthos, S., Mankani, M., Brahim, J., Robey, P. G., Shi, S. Postnatal human dental pulp stem cells (DPSCs) in vitro and in vivo. Proc Natl Acad Sci U S A. 97 (25), 13625-13630 (2000).
- Yu, J., et al. Odontogenic capability: bone marrow stromal stem cells versus dental pulp stem cells. Biol Cell. 99 (8), 465-474 (2007).
- Zhu, X., et al. Transplantation of dental pulp stem cells and platelet-rich plasma for pulp regeneration. J Endod. 38 (12), 1604-1609 (2012).
- Iohara, K., et al. Dentin regeneration by dental pulp stem cell therapy with recombinant human bone morphogenetic protein 2. J Dent Res. 83 (8), 590-595 (2004).
- Saito, K., Nakatomi, M., Ida-Yonemochi, H., Ohshima, H. Osteopontin Is Essential for Type I Collagen Secretion in Reparative Dentin. J Dent Res. , (2016).
- Hunter, D. J., et al. Wnt Acts as a Pro-Survival Signal to Enhance Dentin Regeneration. J Bone Miner Res. , (2015).
- Goldberg, M., Kulkarni, A. B., Young, M., Boskey, A. Dentin: structure, composition and mineralization. Front Biosci (Elite Ed). 3, 711-735 (2011).
- Nascimento, A. B., Fontana, U. F., Teixeira, H. M., Costa, C. A. Biocompatibility of a resin-modified glass-ionomer cement applied as pulp capping in human teeth). Am J Dent. 13 (1), 28-34 (2000).
- Bogen, G., Kim, J. S., Bakland, L. K. Direct pulp capping with mineral trioxide aggregate: an observational study. J Am Dent Assoc. 139 (3), 305-315 (2008).
- Miller, R. A., Nadon, N. L. Principles of animal use for gerontological research. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 55 (3), 117-123 (2000).
- Shah, A., Song, M., Cao, Y., Kang, M. K., Kim, R. H. Osteoclasts are absent in pulpal and periapical inflammatory lesions. J Dent Res. 95, 1503 (2016).
- Williams, D. W., et al. Impaired bone resorption and woven bone formation are associated with development of osteonecrosis of the jaw-like lesions by bisphosphonate and anti-receptor activator of NF-kappaB ligand antibody in mice). Am J Pathol. 184 (11), 3084-3093 (2014).
- McPherson, J. D., et al. A physical map of the human genome. Nature. 409 (6822), 934-941 (2001).
- Gregory, S. G., et al. A physical map of the mouse genome. Nature. 418 (6899), 743-750 (2002).
- Hilton, T. J. Keys to clinical success with pulp capping: a review of the literature. Oper Dent. 34 (5), 615-625 (2009).
- Holmdahl, R., Bockermann, R., Backlund, J., Yamada, H. The molecular pathogenesis of collagen-induced arthritis in mice--a model for rheumatoid arthritis. Ageing Res Rev. 1 (1), 135-147 (2002).
- Kalu, D. N., Chen, C. Ovariectomized murine model of postmenopausal calcium malabsorption. J Bone Miner Res. 14 (4), 593-601 (1999).
- Yokochi, T. A new experimental murine model for lipopolysaccharide-mediated lethal shock with lung injury. Innate Immun. 18 (2), 364-370 (2012).
- Abe, T., Hajishengallis, G. Optimization of the ligature-induced periodontitis model in mice. J Immunol Methods. 394 (1-2), 49-54 (2013).
