Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Cancer Research

Cell הזרקת הסרטן Intracarotid לייצר מודלי עכבר של המוח גרור

Published: February 8, 2017 doi: 10.3791/55085

Summary

גרורה במוח הפך צורך רפואי דחוף כמו השכיחות שלה גדלה תוך אופציות טיפוליות נותרו פליאטיבי. יצירת מודלים של בעלי חיים הניסיונות של גרורות במוח באמצעות זריקת intracarotid העורקת של תאי סרטן מקל מחקרים מכניסטית של ביולוגית המחלה והערכת משטרי התערבות רומן.

Abstract

גרורות, התפשטות וצמיחה של תאים ממאירים באתרים משניים בתוך הגוף של המטופל, מהווה> 90% לתמותה מסרטן. לאחרונה, התקדמות מרשימה טיפולים חדשניים כבר האריכה דראמטי הישרדות ואיכות חיים משופרת עבור חולי סרטן רבים. למרבה הצער, שכיחות ישנת גרורתית המוח היא מהירה עולה, וכל הטיפולים הקיימים כיום הם פליאטיבי בלבד. לפיכך, במודלים של בעלי חיים ניסיוניים טובים יש צורך דחוף כדי להקל מעמיק מחקרים של ביולוגית המחלה ועל מנת להעריך את משטר טיפולי חדשני להערכה פרה-קלינית. עם זאת, סטנדרט assay גרור vivo באמצעות הזרקת זנב וריד של תאים סרטניים מייצר בעיקר גרור ריאות; חיות בדרך כלל נכנעים ניטלים גידול ריאות לפני כל תולדה משמעותית של גרורות במוח. הזרקת intracardiac של תאים סרטניים מייצרת גרורות לאתרי איברים מרובים כולל המוח; עם זאת, variability של הגידול מיוצר עם המודל הזה הוא גדול, ריסון השירות שלה בהערכת יעילות טיפולית. כדי ליצור מודלים של בעלי חיים אמינים ועקביים ללימוד גרור במוח, כאן אנו מתארים תהליך הייצור גרור במוח ניסיוני עכבר הבית (musculus Mus) באמצעות זריקת intracarotid של תאים סרטניים. גישה זו מאפשרת אחד כדי לייצר מספר רב של עכברי מוח גרורי נושאות עם מאפייני צמיחה ותמותה דומים, ובכך להקל על מאמצי מחקר לחקור מנגנונים ביולוגיים בסיסיים ועל מנת להעריך את הסוכנים טיפוליים חדשניים.

Introduction

גרורות של סרטן במערכת העצבים המרכזית (CNS) היא מחלה הרסנית, והוא יכול לכלול גם את המוח parenchyma או leptomeninges ( "גרורות במוח" מתייחס הן במאמר זה). זהו גידול ממאיר תוך גולגולתי השולט, עולים במספרם גליומות הראשוני על ידי> 10: 1 1, 2. סרטן הריאות, סרטן השד ומלנומה שלוש מחל נאופלסטיות הגדולות העליונות מייצר מקרים גבוהים של המוח גרור 3, 4. בשנים האחרונות, התקדמות מרשימה טיפולים בסרטן רומן כבר האריכה דראמטי הישרדות ואיכות חיים משופרת עבור חולי סרטן רבים. עם זאת, על הישנות, השכיחות של גרורות במוח עולה בקצב מהיר. לדוגמא, trastuzumab הנוגדן אנטי HER2 (הרצפטין) הוכיח יעילות קלינית משמעותית בחולים עם HER2 + סרטן השד; עדיין מגמה מטרידה התפתחהבחולים אלה: עד 1/3 אלה שמחלתם המערכתית extracranial נהנה בתחילה מטיפול trastuzumab מאוחר יותר לפתח מוח גרור 5, 6, 7. למרבה הצער, חולים עם גרורות במוח הם מגיבים כמעט כל טיפולים הקיימים כיום, בדרך כלל חווים הידרדרות טראומטית של איכות החיים, ואת ההישרדות לשנה אחת שלהם לאחר האבחון היא רק ~ 20% 8. הטיפולים הקיימים נגד גרורות במוח (כולל סטרואידים, רדיותרפיה גולגולתי, כריתה כירורגית בחולים נבחרים) הם רק פליאטיבי, אין בהן כדי לרפאה 9. לכן, גרורות במוח מתגלה האתגר הבא המרשים בעידן זה של טיפולים בסרטן הרומן. כדי להתמודד עם האתגר לא מסופק חולות פניו מדי יום במרפאת, אנו זקוקים בדחיפות כדי להבין טוב יותר את המנגנון הבסיסי של גרורות במוח ולהשתמש בידע הזה כדי לפתח טיפולים חדשניים.

10, שאף אחד מהם הוא לחזור בדיוק לשעבר vivo או במערכת במבחנה. לפיכך, ראוי ונאמן במודלים vivo הם קריטיים עבור מחקרים של גרורות במוח. קונבנציונלי ב assay גרורה vivo מציג תאים סרטניים באמצעות הזרקה לוריד זנב, מוביל את רוב התאים שהשתכנו הריאה. נגעי המוח גרורתי לעתים רחוקות מיוצרים דגמים אלה לפני מותו חיה הנגרמת על ידי ניטל גידול בתוך הריאות 11. הזרקה תוך-מוחית ישירה של תאים סרטניים מייצרת תולדת גידול עקבית של מערכת העצבים המרכזי, והוא בשימוש נרחב במחקרים של גליומות עיקרי. עם זאת, sהזרקת uch פוגעת BBB וגורמת פציעה טראומטית באתר הזרקה, הוא נקודות עיקריות של דאגה באשר הרלוונטי הפיזיולוגית של מודל זה. תוואי אחר הקדמה סרטן תאים בשימוש תכוף, הזרקת intracardiac, הוא קל לניהול אין לייצר גרורות ניסיוני אל מערכת העצבים המרכזית. עם זאת, גרורה במקביל לאתרי איבר אחרים מאשר CNS מיוצרים תמיד ועלול לגרום לתמותה חיה 11; לפיכך, הרמה הגבוהה של השתנות של מודל זה עושה את זה מתאים הערכה כמותית של מנגנונים ביולוגיים או סוכנים טיפוליים עם מספר מצומצם של בעלי חיים.

כאן אנו מתארים את ההליכים לייצר גרורות במוח ניסיון באמצעות ההזרקה של תאים סרטניים לתוך עורק התרדמה המשותף. השתמשנו בגישה זו כדי לנתח תרומות 'גנים בודדים אל מפל גרורתי של גרורות במוח להעריך יעילות של התערבות טיפוליתים 12, 13. יתרונותיו העיקריים של גישה זו הם הרמה הגבוהה של שחזור מידה נמוכה של השתנות; החיסרון העיקרי הוא התחכום והמיומנות הדרושים לביצוע המיקרו-כירורגיה.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

הצהרת אתיקה: כל במחקרים בבעלי החיים אושרו על ידי ועדת הטיפול בבעלי החיים המוסדיים השתמש (IACUC) של האוניברסיטה של ​​מרכז טקסס MD Anderson Cancer.

1. כן תאים סרטניים עבור הזרקה

  1. זרעי התאים הסרטניים אחד או ימים לפני הזריקה. השתמש בחומרי הדפסה DMEM / F12 בתוספת 10% FBS, אלא מדיום המומחיות מותווה בספרות עבור קו תא מסוים.
  2. ביום פעולה כירורגית, תאי קציר כאשר הם מגיעים 70 - 80% מפגש ידי השטיפה ראשונה עם סרום ללא מדיה פעם לפני trypsinization (0.25%) עבור 1 - 2 דקות ב 37 מעלות צלזיוס. להוסיף לתאים 10% FBS המכילים תקשורת DMEM / F12 כדי להרוות את טריפסין 0.25%.
  3. צנטריפוגה התאים ב g 80 × 3 דקות. שטפו תאים ב סרום ללא מדיה פעמיים כדי להסיר בסרום שיורית, לספור את התאים עם hemocytometer מחדש להשעות ב תמיסת מלח מאוזן של האנק (HBSS) ל 1 - 5 × 10 6 תאים / מ"ל, בהתאם לקו הסלולרי. שמור על הקרחעד בזמן ההזרקה.
    הערה: מד"א- MB-231 תאים סרטן השד תאי מלנומה K1735 שימשו במחקר זה, ושניהם שורות תאים שימשו ב 2 × 10 6 תאים / ריכוז מ"ל. שמור את משך trypsinization קצר ככל האפשר טיפול יתר עלול להשפיע על התוצאות של מבחני גרורות.

2. כן עכברים עבור הזרקת תאים סרטנית

  1. להרדים עכברים על ידי הזרקה (IP) הזרקה של קטמין / קוקטייל xylazine (קטמין 100 מ"ג / ק"ג, xylazine 10 מ"ג / ק"ג).
  2. אשר הרדמה מלאה על ידי צובט את הרגליים חי ולבחון חוסר התגובה.
  3. מניחים את העכבר על צלחת זכוכית (ששימשו ליציקת ג'לים חלבון), ובטוחה עם גומיות.
  4. במידת הצורך, להסיר את השיער של הצוואר על ידי גילוח או מריחת כמות קטנה של המוצר הסרת שיער ומוחה את השיער מעל עם מגבת נייר. הערה: אם באמצעות עכברים בעירום, לדלג על שלב זה כמו אין להם שיער גוף.
  5. נקו את עור הצוואר על ידי יישוםpovidone יוד ואלכוהול 70%.
  6. העבר את העכבר על הבמה של מיקרוסקופ לנתח
  7. עושים חתך בעור ~ 1 ס"מ בעזרת איזמל ניתוחים.
  8. בבוטות לנתח את השריר עם מלקחי שיניים לחשוף את העורק הראשי מתחת.
  9. הפרד את עורק התרדמה מן העצב התועה סמוך עם מלקחיים כירורגיים.
  10. בעזרת מלקחיים כירורגיים, להפריד קצת צמר גפן מן כדור צמר גפן, ללחלח, ואופנה לתוך כדור צמר גפן קטן. מניחים כדור צמר גפן לחות-חיץ זה מתחת העורק הראשי של האתר המיועד של ההזרקה.
  11. מניחים דיסטלי תפר הפרוקסימלי כדור צמר גפן ולעשות קשרים רופפים. להדק את הקשר הפרוקסימלי לחסום את זרימת הדם לתוך הזריקה.
  12. המשך הזרקת תאים סרטניים אם עורק התרדמה על כדור צמר גפן מופיע בלחץ מלא בדם אדום טרי.

3. הזרקת תאים סרטניים לתוך העורק הראשי

  1. וורטקס ולצייר 100 μl of תאים סרטניים לתוך המזרק.
  2. תחת המיקרוסקופ לנתח, והכנס באיטיות 31 המחט G (עם שיפוע כלפי מעלה) לתוך לומן של עורק התרדמה יושב על גבי כדור צמר גפן.
  3. לאט לאט להזריק את התאים מן המזרק לתוך העורק הראשי. זריקה מוצלחת ניתן לצפות במיקרוסקופ על ידי שינוי הצבע של כלי דם סמוכים שרירים כאשר תאים סרטניים שנאגרו נדחפים לתוך המחזור.
  4. כאשר הזריקה של כל נפח תושלם, להרים את העורק הראשי דיסטלי בעדינות כדי למנוע regurgitation.
  5. במהירות להדק את הקשר דיסטלי כדי להשלים את תהליך ההזרקה.
  6. לאחר השלמת הזריקה, להדק את ליגטורה וקוצצים את תפר משי עודף עם מספריים מיקרו תחת מיקרוסקופ לנתח. מעבר אחורה השריר המופרד כדי לכסות את אתר הפצע. סגור את העור עם שתי סיכות.

4. שחזור כירורגי

  1. הזז את החיה המופעל על כרית חימוםעבור התאוששות. זה עלול לקחת 30 - 60 דקות על חיות המחמד כדי להכרתו. בינתיים, לנהל עצירות (0.05 מ"ג / ק"ג) באמצעות זריקה תת עורית כמו שיכוך כאבים לאחר ניתוח. הערה: שיכוך כאבים צריך להינתן על פי IACUC המקומי פרוטוקול שאושר.
  2. לאחר החיות להתעורר ולחדש ההתנהגות הנורמלית שלהם, להחזיר את העכברים למיקום הדיור שלהם. ספק עכברים עם מזון ג'ל שלאחר ניתוח כמה ימים. לשמור על תיק רפואי ולשמור אותו בחדר.

5. לא פולשני in vivo הדמיה

  1. עבור תאים שכותרתו עם בונה כתב בלוציפראז, למדוד יעילות הזרקת תאים סרטניים באמצעות במערכת הדמיה vivo 14.
    הערה: הדמיה לא מבוצעת ביום הזרקה כדי למנוע לחץ מופרז לבעלי חיים במחקר.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

ישנן שתי נקודות שבן איכות ההזרקה ניתן להעריך. ההזדמנות הראשונה היא על ידי ההתבוננות של המפעיל של שינוי צבעי כלי דם במהלך הזרקה. דליפת זריקות גרועות ניתן להבחין בקלות תחת מיקרוסקופ לנתח. המיקום יציב ובטוח של הגוף העכבר (איור 1 א) ו העורק הראשי שלה (איור 1B) על כדור צמר גפן התומכים הם גורמים קריטיים להזרקה חלקה ומוצלחת לעורק התרדמה. הנקודה השנייה כדי להעריך את איכות הזריקה היא לאחר ניתוח הדמיה לא פולשנית. לעניין זה, התאים הסרטניים מסומנים באופן טיפוסי עם כתב בלוציפראז vivo לשעבר לפני הזריקה. כדי להקטין את הלחץ על בעלי חיים, in vivo הדמיה מתבצעת לרוב 24 שעות לאחר ההזרקה. תוצאות זריקה מוצלחות בעומס תאים סרטניים חזק תוך גולגולתי, וראש העכבר היא האזור היחיד עם ים חיוביignals (איור 2 א).

שימוש במערכת ההדמיה vivo כדי לעקוב אחר התאים הסרטניים שכותרתו בלוציפראז, אנו צופים ירידה ההתחלתית של עוצמת אות בתוך ימים לאחר הזרקה; ובכל זאת, תאים סרטניים מסוגל תולדה של מערכת העצבים המרכזית בסופו של דבר מצליחים לחלק ולייצר הגדלת אותות מערכת הדמיה vivo כמו גרורות במוח לפתח (איור 2 ב). הזרקת Intracarotid בדרך כלל מייצרת עקבית אותות מערכת הדמית vivo עם השתנות נמוכה יחסית, שהנה יתרון עיקרי של שימוש בגישה זו כדי לייצר גרורות במוח ניסיון. כשהפצעים גידול גוברים לעקור רקמות מוח, איכות בריאות לבעלי חיים עם גרורות במוח מתקדמות מהר עלולה להידרדר במהירות, המשקף את הביטוי הקליני של מטופלים גרורים במוח אנושי. התנהגויות סימפטומטיות אופייניות מעידות על הנוכחות המשמעותית של גרורות במוח כוללות אובדןמשקל, יציבה כפופה, להקיף את הבלתי פוסק. בנקודת הסיום הניסיונית, במוחם של בעלי החיים ניתן לחלץ עבור בחינת פרמטרים ביוכימיים או לבדיקות היסטולוגית. למעט נגעים הגרורים melanotic (איור 3 א), הוא בדרך כלל קשה להבחין נגע הגידול מן הרקמות סובבות מוח קודם להערכה היסטולוגית (איור 3 ב). במקרים כאלה, מומלץ לתייג תאים סרטניים עם כתב ניאון (למשל GFP) לנוחיות לבודד תאים גרורתי (איור 3 ג). לחלופין, המוח כולו ניתן ניתק לתוך תאים בודדים תאים סרטניים מופרדים נוגדנים מגנטיים חרוז מצומדות.

איור 1
איור 1: הכנה להזרקת עורק ראשי. א) עכבר הרדים מושם על צלחת זכוכית ומאובטחת עם ruלהקות bber. האתר ואורך החתך מסומן עם קו שחור על הצוואר. ב) לאחר כל הצעדים כירורגי ההכנה הושלמו, העורק הראשי החשוף מושם על תמיכה על כדור צמר גפן משרד, מוכן להזרקת תאים סרטניים. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.

איור 2
איור 2: לא פולשני ניטור תולדה גרורות במוח. א) השתנה תאי סרטן השד מד"א- MB-231 תויגו עם גן הכתב בלוציפראז vivo לשעבר. החל מ hr 24 הזרקה עורקת שלאחר תרדמה, פיתוח גרור במוח היה פיקוח הלא פולשני ידי חוזר הדמית מערכת הדמית vivo (בסולם בר = 50 מ"מימ). ב) כימות של in vivo הדמיה המערכת IMAגינג נתונים מצביע על ירידה ההתחלתית של הזרקת עורק תרדמה שלאחר נטל גידול, ואחריו תולדת מעריכים של גרורות במוח עד moribundity חיה. ברים שגיאה לשקף את סטיית התקן של הממוצע (SEM) של האות הארה מוחלטת. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.

איור 3
איור 3: קציר המוח גרור פצעים. א) תאים מלנומה K1735 לייצר נגעים melanotic גרורות במוח במוח העכבר C3H syngeneic, אשר מאוד מקל על הפרדת גרורות במוח מן stroma שמסביב אך מוגבל מודלים מלנומה מסוימים. B) ניתק תאים סרטניים חלב מן המהונדס MMTV- Neu / PTEN -null העכבר מייצר af גרור במוח הגלויהשתלת ter באמצעות הזרקת עורק תרדמה. מרווח הגידול / stroma קשה להבחין למרות נוכחותם הברורה של גרורות angiogenic. C) מד"א- MB-231 תאים סרטניים בשד היו מראש שכותרתו עם חלבון פלואורסצנטי ירוק (GFP) כתב לשעבר vivo כדי להקל חילוץ של נגעים גרורים במוח באמצעות כריתה כירורגית או מיון תא. שימו לב שרוב של הגרורות מרוכזות באותו הצד של המוח שבו הזרקת עורקי תרדמה מתרחשת. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

השלבים הקריטיים ביותר להזרקת עורקי תרדמה מוצלחת של תאים סרטניים הם: 1) הרדמה עמוקה של עכבר כהכנת פעולה כירורגית; 2) מיקום קבוע של עורק תרדמה על גבי תמיכת הכותנה; 3) קשירה הדוקה של עורק תרדמה לאחר זריקה מוצלחת.

הרדמה עמוקה של ~ 30 דקות בדרך כלל יש צורך עבור ביצועים כירורגית יציבים תחת מיקרוסקופ לנתח. אנו משתמשים קוקטייל קטמין / xylazine מוכן לשימוש מסחרי עבור הרדמה העכבר. כדי למנוע מינון יתר פוטנציאל, קוקטייל קטמין / xylazine עשוי להיות מדולל 1: 1 או 1: 2 מלח פיסיולוגי לספק גמישות רבה יותר בהתאמת הנפח משמש הרדמה. לחלופין, tribromoethanol התרופה הלא מבוקר עשוי לשמש גם הרדמה; עם זאת, מצאנו כי הנטייה של tribromoethanol להשפיל הופכת את החומר פחות אמין כחומר הרדמה יעילה מאשר קוקטייל קטמין / xylazine.

אבהתמדה להציב עורק התרדמה בלחץ מלא מאוד מקל על הזרקה של תאים סרטניים; ולכן, אנו ממליצים לבלות להכין את עמדת בקפידה של העורק מתחת למיקרוסקופ במקום התקדמות הזרקה בתנאים לא טובים.

עוד תאים סרטניים יהיה להגיש בתוך כלי הדם בצד של הזרקת עורקי התרדמה. לפעמים חלק ניכר של התאים גרורתי עשוי לנדוד לצד השני של המוח, כך הוא ההמיספרות מופיעות לשאת כמות משמעותית של גרורות בחיות גוססות.

גרורות עשויים להופיע גם את parenchyma או leptomeninges של מערכת העצבים המרכזית, או בשני המקומות. נראה שיש אינטראקציות גידולי microenvironment ייחודיות העומדים בבסיס פנוטיפים הביולוגיים אלה 15. לכן, כאשר קו סלולרי חדש הוא להיבדק עבור יכולתה לייצר גרורות במוח נסיוני אפשר necessארי כדי להקדיש תשומת לב מיוחדת פנוטיפים כזה.

עורקי הראש הפנימיים והחיצוניים אספקת הדם אל המוח parenchyma ו leptomeninges, בהתאמה. בהתאם לכך, בתצהיר תאים סרטניים לתוך parenchyma או leptomeninges יכולה להיות מושגת על ידי שינוי קל של פרוטוקול זה. כדי לאפשר לתאים רק לתוך leptomeninges, עורק התרדמה הפנימי ניתן ligated על ידי תפר לפני הזרקה של תאים סרטניים, ובכך הכוונת תאים לתוך העורק הראשי חיצוני; מצד השני, הקשירה הראשית החיצונית לפני הזריקה תאפשר כניסת תאים רק לעורק התרדמה הפנימי ואת parenchyma המוח.

בסך הכל, גישת הזרקת intracarotid מייצרת נתונים של שחזור גבוה השתנות נמוכה לעומת זריקות וריד או intracardiac זנב; זה גם ימנע דלקת CNS-induced הזריק לעומת שיטת ההזרקה תוך-המוחית הישירה. לפיכך, גישה זו היא כיום ביותרערך במחקרים כמותיים של גרורות במוח שואף ליצור מסקנות סטטיסטיות משמעותיות באמצעות מספר מצומצם של בעלי חיים. במקביל, כל הדגמים הניסיוניים יש מגבלות. בדומה לשיטות אחרות של מבוא hematogenous תאים סרטניים, זריקת intracarotid רק משחזרת פעולות בהמשך המפל הגרור לאחר הפצת תאים סרטניים אל מחזור הדם. לפיכך אין זה מודל מתאים ללמוד, למשל, גורמים ביולוגיים הקובעים את הפצת תאי סרטן ראשוני למחזור הדם.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Ketamine hydrochloride/xylazine hydrochloride solution Sigma-Aldrich K113
Routine Stereomicroscope Leica M50 Leica M50 The microscope is modular and highly configurable to fit particular space requirements.
Surgical disposable scapel Integra Miltex 4-410 to make skin incisions
Tissue Forceps - 1 x 2 Teeth Fine Science Tools 11021-12 to bluntly dissect mucles
Dumont #5 - Mirror Finish Forceps Fine Science Tools 11252-23 to separate and prepare the carotid artery for injection
Spring Scissors Fine Science Tools 15025-10 to cut sutures
EZ Clip Kit Stoelting 59020 for wound cloure
BD Insulin Syringe Becton Dickinson 328438 for cell injection
IVIS Spectrum In Vivo Imaging System PerkinElmer 124262

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Gavrilovic, I. T., Posner, J. B. Brain metastases: epidemiology and pathophysiology. J Neurooncol. 75 (1), 5-14 (2005).
  2. Patchell, R. A. The management of brain metastases. Cancer Treat Rev. 29 (6), 533-540 (2003).
  3. Barnholtz-Sloan, J. S., et al. Incidence proportions of brain metastases in patients diagnosed (1973 to 2001) in the Metropolitan Detroit Cancer Surveillance System. J Clin Oncol. 22 (14), 2865-2872 (2004).
  4. Schouten, L. J., Rutten, J., Huveneers, H. A., Twijnstra, A. Incidence of brain metastases in a cohort of patients with carcinoma of the breast, colon, kidney, and lung and melanoma. Cancer. 94 (10), 2698-2705 (2002).
  5. Bendell, J. C., et al. Central nervous system metastases in women who receive trastuzumab-based therapy for metastatic breast carcinoma. Cancer. 97 (12), 2972-2977 (2003).
  6. Clayton, A. J., et al. Incidence of cerebral metastases in patients treated with trastuzumab for metastatic breast cancer. Br J Cancer. 91 (4), 639-643 (2004).
  7. Romond, E. H., et al. Trastuzumab plus adjuvant chemotherapy for operable HER2-positive breast cancer. N Engl J Med. 353 (16), 1673-1684 (2005).
  8. Mayer, M. A patient perspective on brain metastases in breast cancer. Clin Cancer Res. 13 (6), 1623-1624 (2007).
  9. Lin, N. U., Bellon, J. R., Winer, E. P. CNS metastases in breast cancer. J Clin Oncol. 22 (17), 3608-3617 (2004).
  10. Zhang, C., Yu, D. Microenvironment determinants of brain metastasis of brain metastasis. Cell Biosci. 1 (1), 8 (2011).
  11. Fidler, I. J., Nicolson, G. L. Organ selectivity for implantation survival and growth of B16 melanoma variant tumor lines. J Natl Cancer Inst. 57 (5), 1199-1202 (1976).
  12. Zhang, L., et al. Microenvironment-induced PTEN loss by exosomal microRNA primes brain metastasis outgrowth. Nature. 527 (7576), 100-104 (2015).
  13. Zhang, S., et al. SRC family kinases as novel therapeutic targets to treat breast cancer brain metastases. Cancer Res. 73 (18), 5764-5774 (2013).
  14. Lim, E., Modi, K. D., Kim, J. In vivo bioluminescent imaging of mammary tumors using IVIS spectrum. J Vis Exp. (26), (2009).
  15. Zhang, C., Zhang, F., Tsan, R., Fidler, I. J. Transforming growth factor-beta2 is a molecular determinant for site-specific melanoma metastasis in the brain. Cancer Res. 69 (3), 828-835 (2009).

Tags

Cancer Research גיליון 120 גרורות סרטן גרורות במוח פרה-קליניים במודל חיה מודל ניסיוני הזרקת intracarotid
Cell הזרקת הסרטן Intracarotid לייצר מודלי עכבר של המוח גרור
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Zhang, C., Lowery, F. J., Yu, D.More

Zhang, C., Lowery, F. J., Yu, D. Intracarotid Cancer Cell Injection to Produce Mouse Models of Brain Metastasis. J. Vis. Exp. (120), e55085, doi:10.3791/55085 (2017).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter