Summary
أصبح ورم خبيث في الدماغ حاجة غير الملباة الطبية العاجلة نظرا لازدياد حالات الإصابة في حين الخيارات العلاجية ظلت الملطفة. إنشاء النماذج الحيوانية التجريبية من ورم خبيث في الدماغ عن طريق الحقن الشرياني intracarotid الخلايا السرطانية يسهل الدراسات الميكانيكية للبيولوجيا المرض وتقييم نظم تدخل الرواية.
Abstract
ورم خبيث، وانتشار ونمو الخلايا الخبيثة في المواقع الثانوية داخل جسم المريض، وحسابات ل> 90٪ من الوفيات الناجمة عن السرطان. في الآونة الأخيرة، والتقدم للإعجاب في علاجات جديدة قد تطول بشكل كبير البقاء على قيد الحياة وتحسين نوعية الحياة بالنسبة لكثير من مرضى السرطان. للأسف، الإصابة في الدماغ تكرار المنتشر في ازدياد مضطرد، وجميع العلاجات الحالية هي مجرد الملطفة. وبالتالي، هناك حاجة ماسة النماذج الحيوانية التجريبية جيدة لتسهيل إجراء دراسات متعمقة للبيولوجيا المرض وتقييم نظم علاجية جديدة لتقييم ما قبل السريرية. ومع ذلك، والمعيار في مقايسة الانبثاث الجسم الحي عن طريق الحقن الذيل الوريد من الخلايا السرطانية تنتج في الغالب الآفات النقيلي الرئة. عادة ما تستسلم الحيوانات إلى عبء ورم الرئة قبل أي ثمرة ذات مغزى من ورم خبيث في الدماغ. حقن داخل القلب من الخلايا السرطانية تنتج الآفات النقيلي إلى مواقع الجهاز متعددة بما في ذلك الدماغ. ومع ذلك، فإن variabiعنه lity من نمو الورم المنتجة مع هذا النموذج هو كبير مما يضعف فائدتها في تقييم فعالية العلاج. لتوليد نماذج حيوانية موثوقة ومتسقة للدراسة ورم خبيث في الدماغ، ونحن هنا وصف الإجراء لإنتاج ورم خبيث في الدماغ التجريبي في منزل الفأر (المصحف العضلة) عن طريق الحقن intracarotid من الخلايا السرطانية. هذا النهج يسمح احد لإنتاج عدد كبير من الدماغ الفئران الانبثاث الحاملة مع خصائص النمو وفيات مماثلة، وبالتالي تسهيل الجهود البحثية لدراسة الآليات البيولوجية الأساسية، وتقييم عوامل علاجية جديدة.
Introduction
من ورم خبيث من سرطان الجهاز العصبي المركزي (CNS) هو مرض مدمر، ويمكن أن تنطوي إما لحمة الدماغ أو السحايا الرقيقة ( "ورم خبيث في الدماغ" يشير إلى كل من في هذه المقالة). ومن الورم الخبيث داخل الجمجمة الغالب، يفوق عدد الاورام الدبقية الأولية التي كتبها> 10: 1 1، 2. سرطان الرئة، وسرطان الثدي، وسرطان الجلد أهم ثلاثة أمراض الأورام الرئيسية التي تنتج حوادث عالية من ورم خبيث في الدماغ 3، 4. في السنوات الأخيرة، والتقدم للإعجاب في علاجات السرطان الجديدة التي طالت بشكل كبير البقاء على قيد الحياة وتحسين نوعية الحياة بالنسبة لكثير من مرضى السرطان. ومع ذلك، عند تكرار، وحدوث ورم خبيث في الدماغ يرتفع بسرعة. على سبيل المثال، أظهرت مكافحة HER2 تراستوزوماب الأجسام المضادة (هيرسيبتين) فعالية سريرية كبيرة في المرضى الذين يعانون من HER2 + سرطان الثدي. ومع ذلك فقد ظهر اتجاه مثير للقلقفي هؤلاء المرضى: ما يصل إلى 1/3 من أولئك الذين استفادوا في البداية من العلاج تراستوزوماب في وقت لاحق تطوير ورم خبيث في الدماغ 5، 6، 7 أمراض جهازية خارج القحف. للأسف، المرضى الذين يعانون من ورم خبيث في الدماغ والحرارية للعلاجات الحالية كلها تقريبا، وعادة ما تعاني من تدهور الصدمة نوعية الحياة، والبقاء على قيد الحياة لمدة عام واحد بعد التشخيص هو فقط ~ 20٪ 8. العلاجات الحالية لورم خبيث في الدماغ (بما في ذلك المنشطات، والعلاج الإشعاعي في الجمجمة، واستئصال الجراحي في المرضى المختارين) هي مجرد الملطفة، وليس العلاجية 9. لذلك، ورم خبيث في الدماغ يبرز بوصفه التحدي فرض المقبل في هذه الحقبة من علاجات السرطان الجديدة. لمواجهة التحدي غير الملباة المرضى يواجهون كل يوم في العيادة، نحن بحاجة ماسة إلى فهم أفضل لآلية الكامنة وراء ورم خبيث في الدماغ واستخدام هذه المعرفة لتطوير علاجات جديدة.
نحن هنا وصف الإجراءات لإنتاج ورم خبيث في الدماغ التجريبية عن طريق حقن الخلايا السرطانية في الشريان السباتي المشترك. وقد استخدمنا هذا النهج لتشريح المساهمات الجينات الفردية "إلى سلسلة المنتشر من ورم خبيث في الدماغ، وتقييم فعالية التدخل العلاجيالصورة 12 و 13. وتشمل المزايا الرئيسية لهذا النهج هي درجة عالية من استنساخ وانخفاض درجة التباين. العيب الرئيسي هو التطور والبراعة المطلوبة لأداء المجهرية.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
بيان الأخلاق: تمت الموافقة على جميع الدراسات على الحيوانات من قبل لجنة رعاية واستخدام الحيوان المؤسسي (IACUC) من جامعة تكساس مركز اندرسون للسرطان.
1. إعداد الخلايا السرطانية للحقن
- البذور الخلايا السرطانية واحد أو يومين قبل الحقن. استخدام DMEM / وسائل الإعلام F12 تستكمل مع 10٪ FBS، ما لم تتم الإشارة إلى وسيلة تخصص في الأدب للحصول على خط خلية معينة.
- في يوم من عملية جراحية، وخلايا الحصاد عندما تصل إلى 70-80٪ التقاء قبل غسل الأولى مع وسائل الإعلام الحرة المصل مرة واحدة قبل trypsinization (0.25٪) عن 1-2 دقائق عند 37 درجة مئوية. إضافة إلى خلايا 10٪ FBS التي تحتوي على DMEM وسائل الإعلام / F12 لإرواء التربسين 0.25٪.
- الطرد المركزي الخلايا في 80 × ز لمدة 3 دقائق. غسل الخلايا في وسائل الإعلام الحرة المصل مرتين لإزالة المصل المتبقي، عد الخلايا مع عدادة الكريات وإعادة تعليق في هانك في محلول الملح المتوازن (HBSS) في 1-5 × 10 6 خلية / مل، اعتمادا على خط الخلية. الحفاظ على الجليدحتى وقت الحقن.
واستخدمت MDA-MB-231 خلايا سرطان الثدي وخلايا سرطان الجلد K1735 في هذه الدراسة، واستخدمت كل من خطوط الخلايا في 2 × 10 6 خلية / مل تركيز: ملاحظة. إبقاء مدة trypsinization قصيرة قدر الإمكان overtreatment قد تؤثر على نتائج فحوصات ورم خبيث.
2. إعداد الفئران لورم حقن الخلايا
- تخدير الفئران عن طريق داخل الصفاق (IP) حقن الكيتامين / كوكتيل زيلازين (الكيتامين 100 ملغ / كغ، زيلازين 10 ملغ / كلغ).
- تأكيد التخدير الكامل من جانب معسر القدمين الحيوانية ومراقبة عدم استجابة.
- ضع الماوس على طبق من زجاج (التي تستخدم لصب المواد الهلامية البروتين)، وآمنة مع الأربطة المطاطية.
- إذا لزم الأمر، وإزالة شعر الرقبة عن طريق حلق أو تطبيق كمية صغيرة من المنتج إزالة الشعر ومسح الشعر قبالة مع منشفة ورقية. ملاحظة: إذا كنت تستخدم الفئران عارية، تخطي هذه الخطوة لأنها لم يكن لديك شعر الجسم.
- تنظيف جلد الرقبة عن طريق تطبيقبوفيدون اليود و 70٪ كحول.
- ضع الماوس على مرحلة من مراحل المجهر تشريح
- إجراء شق في الجلد ~ 1 سم مع مشرط جراحي.
- بصراحة تشريح العضلات مع ملقط مسنن لفضح الشريان السباتي تحتها.
- فصل الشريان السباتي من العصب المبهم المجاور مع ملقط الجراحة.
- باستخدام ملقط جراحي، فصل بعض القطن من القطن الكرة، بلل، والأزياء في كرة القطن الصغيرة. وضع هذه الكرة القطن رطب عازلة تحت الشريان السباتي الموقع المقصود من الحقن.
- وضع القاصي خياطة والأقرب إلى الكرة القطن وجعل عقدة فضفاضة. تشديد عقدة القريبة لمنع تدفق الدم في موقع الحقن.
- انتقل إلى حقن الخلايا السرطانية إذا كان الشريان السباتي على كرة من القطن ويبدو الضغط تماما مع الدم الحمراء الطازجة.
3. سرطان حقن الخلايا في الشريان السباتي
- دوامة ورسم 100 ميكرولتر سالخلايا السرطانية و في حقنة.
- تحت المجهر تشريح، تضاف ببطء إبرة G 31 (مع شطبة متابعة) في تجويف الشريان السباتي يجلس على قمة الكرة القطن.
- ببطء حقن الخلايا من الحقنة في الشريان السباتي. نجاح الحقن يمكن ملاحظتها تحت المجهر من قبل تغيير لون الأوعية الدموية القريبة والجهاز العضلي عندما يتم دفع الخلايا السرطانية مخزنة في الدورة الدموية.
- عندما حقن وحدة التخزين بالكامل كاملة، ورفع الشريان السباتي البعيدة بلطف لمنع قلس.
- تشديد بسرعة عقدة البعيدة لإتمام عملية الحقن.
- بعد الانتهاء من الحقن، وتشديد الرقابة على الأربطة وتقليم خياطة الحرير الزائدة مع مقص الصغرى تحت المجهر تشريح. نقل مرة أخرى عضلة تفصل لتغطية الجرح. إغلاق الجلد مع اثنين من الدبابيس.
4. استعادة الجراحي
- نقل الحيوانات تعمل على وسادة التدفئةلتحقيق الانتعاش. قد يستغرق 30-60 دقيقة للحيوانات لاستعادة وعيه. في هذه الأثناء، إدارة البوبرينورفين (0.05 ملغ / كلغ) عن طريق الحقن تحت الجلد كما التسكين بعد الجراحة. ملاحظة: ينبغي توفير تسكين وفقا لوافق IACUC المحلي البروتوكول.
- مرة واحدة توقظ الحيوانات واستئناف سلوكهم الطبيعي، وعودة الفئران إلى موقع سكنهم. توفير الفئران مع الغذاء هلام لعدة أيام بعد الجراحة. الاحتفاظ بسجل الجراحية والاحتفاظ بها في الغرفة.
5. عدم الغازية في فيفو التصوير
- للخلايا المسمى مع ثوابت مراسل وسيفيراز، وقياس الخلايا السرطانية كفاءة الحقن باستخدام المجراة نظام التصوير 14.
لم يتم تنفيذ التصوير في يوم من الحقن لتجنب الضغط المفرط على حيوانات التجارب: ملاحظة.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
هناك نوعان من النقاط التي نوعية الحقن يمكن تقييمها. الفرصة الأولى عن طريق الملاحظة المشغل من تغيير الألوان الأوعية الدموية أثناء الحقن. تسرب من الحقن الفقيرة يمكن ملاحظتها بسهولة تحت المجهر تشريح. وضع ثابت وآمن للجسم الفأر (الشكل 1A) والشريان السباتي في (الشكل 1B) في التعامل مع الكرة القطن دعم من العوامل الهامة للحقن سلسة وناجحة في الشريان السباتي. النقطة الثانية لتقييم نوعية الحقن هي مرحلة ما بعد الجراحة التصوير غير الغازية. لهذا الغرض، وعادة ما وصفت الخلايا السرطانية مع مراسل وسيفيراز خارج الحي قبل الحقن. لتقليل الضغط على الحيوانات، في مجال التصوير فيفو عادة ما يتم إجراء 24 ساعة بعد الحقن. والنتائج حقن ناجحة في حمل الخلايا السرطانية داخل الجمجمة قوية، ورئيس الماوس هي المنطقة الوحيدة مع الصورة الإيجابيةignals (الشكل 2A).
استخدام في نظام التصوير فيفو لتعقب خلايا السرطان المسمى وسيفيراز، نلاحظ انخفاض أولي من شدة إشارة خلال أيام بعد الحقن. بعد الخلايا السرطانية قادرة على ثمرة في الجهاز العصبي المركزي إدارة في نهاية المطاف إلى تقسيم وتنتج زيادة في الجسم الحي إشارات نظام التصوير كما الانبثاث الدماغ تطوير (الشكل 2B). حقن Intracarotid تنتج عادة ثابتة في إشارات نظام التصوير فيفو مع تقلب منخفض نسبيا، وهو الميزة الرئيسية لاستخدام هذا النهج لإنتاج ورم خبيث في الدماغ التجريبية. كما تنمو الآفات السرطانية تهجير أنسجة المخ، ونوعية من الصحة للحيوانات مع بسرعة تتقدم ورم خبيث في الدماغ يمكن أن تتدهور بسرعة، ما يعكس المظاهر السريرية للمرضى ورم خبيث في الدماغ البشري. وتشمل السلوكيات أعراض نموذجية تدل على وجود كبير من ورم خبيث في الدماغ فقدانالوزن، والتقوس في الجلوس، وتحلق المتواصل. في نقطة النهاية التجريبية، أدمغة الحيوانات يمكن استخلاصها لفحص القياسات البيوكيميائية أو لإجراء الفحوصات النسيجية. باستثناء الآفات الانبثاث الميلانية (الشكل 3A)، فإنه عادة ما يكون من الصعب التمييز الآفة الورم من الأنسجة المحيطة بها الدماغ قبل التقييم النسيجي (الشكل 3B). في مثل هذه الحالات، ينصح لتسمية الخلايا السرطانية مع مراسل فلوري (على سبيل المثال GFP) لتوفير الراحة لعزل الخلايا المتنقل (الشكل 3C). بدلا من ذلك، الدماغ بأكمله يمكن فصلها إلى الخلايا وحيدة والخلايا السرطانية مفصولة الأجسام المضادة حبة مترافق المغناطيسي.
الشكل 1: التحضير للحقن الشريان السباتي. أ) يتم وضع الماوس تخدير على طبق من زجاج والمضمون مع روالعصابات BBER. وصفت الموقع وطول شق مع خط أسود على الرقبة. ب) بعد كل الخطوات الجراحية التحضيرية كاملة، ويتم وضعها في الشريان السباتي تتعرض للدعم على كرة من القطن ثابتة، جاهزة للحقن الخلايا السرطانية. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 2: مراقبة غير الغازية لنمو ورم خبيث في الدماغ. أ) وصفت التعديل MDA-MB-231 خلايا سرطان الثدي مع مراسل وسيفيراز الجيني خارج الجسم الحي. بدءا من حقن الشريان 24 ساعة بعد السباتي، تم رصد الدماغ تطوير ورم خبيث غير جراحية بواسطة المتكررة في التصوير نظام التصوير فيفو (مقياس بار = 50 مم). B) الكمي في الجسم الحي نظام التصوير معهد العالم العربيجينج البيانات تشير إلى انخفاض أولي من عبء الورم حقن الشريان السباتي بعد، تليها ثمرة هائلة من ورم خبيث في الدماغ حتى الاحتضار الحيوان. وتعكس أشرطة الخطأ والخطأ المعياري للمتوسط (SEM) من إجمالي إشارة التلألؤ. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الرقم 3: حصاد الدماغ الانبثاث الآفات. أ) الخلايا K1735 سرطان الجلد تنتج الميلانية الآفات ورم خبيث في الدماغ في مسانج الدماغ C3H الماوس، مما يسهل كثيرا من الفصل بين الدماغ الآفات النقيلي من سدى المحيطة بها ولكن يقتصر على بعض نماذج سرطان الجلد. ب) فصل الخلايا السرطانية الثديية من المعدلة وراثيا MMTV- نوي / PTEN الماوس -null تنتج العلني الدماغ ورم خبيث بالعربيةثالثا زرع عن طريق الحقن الشريان السباتي. الهامش الورم / سدى من الصعب التمييز الرغم من وجود واضح من الآفات النقيلي عائية. C) MDA-MB-231 خلايا سرطان الثدي وقبل المسمى مع بروتين فلوري مراسل الأخضر (GFP) خارج الجسم الحي لتسهيل استخراج الآفات ورم خبيث في الدماغ عن طريق الاستئصال الجراحي أو فرز الخلايا. لاحظ أن الغالبية العظمى من الآفات النقيلي تتركز على نفس الجانب من الدماغ حيث يتم حقن الشريان السباتي الشرايين مكان. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
الخطوات الأكثر أهمية لنجاح حقن الشريان السباتي الشرايين من الخلايا السرطانية هي: 1) التخدير العميق من الماوس في التحضير لعملية جراحية. 2) وضع ثابت من الشريان السباتي على رأس دعم القطن. 3) ربط ضيق الشريان السباتي بعد نجاح الحقن.
التخدير العميق ~ 30 دقيقة عادة ما يكون ضروريا لأداء العمليات الجراحية ثابت تحت المجهر تشريح. نحن نستخدم جاهزة للاستخدام تجاريا كوكتيل الكيتامين / زيلازين للتخدير الماوس. لتجنب الجرعات الزائدة المحتملة، وكوكتيل الكيتامين / زيلازين يمكن المخفف 1: 1 أو 1: 2 في المياه المالحة الفسيولوجية لتوفير المزيد من المرونة في تعديل الحجم المستخدم للتخدير. بدلا من ذلك، يمكن أيضا استخدام غير الخاضعة لسيطرة ثلاثي بروم إيثانول المخدرات كما مخدر. ومع ذلك، فقد وجدنا أن الميل للثلاثي بروم إيثانول أن تتحلل يجعل مادة أقل موثوقية كمخدر فعال من كوكتيل الكيتامين / زيلازين.
اوضعت بثبات وبشكل كامل ضغط الشريان السباتي يسهل إلى حد كبير على حقن الخلايا السرطانية. وبالتالي، فإننا نوصي بشدة قضاء الوقت لإعداد بعناية الموقف من الشريان تحت المجهر بدلا من الشروع في حقن في ظل ظروف دون المستوى الأمثل.
وعن الخلايا السرطانية ودج داخل الأوعية الدموية على جانب حقن الشريان السباتي الشرايين. في بعض الأحيان جزءا كبيرا من الخلايا المتنقل قد تهاجر إلى الجانب الآخر من الدماغ بحيث أن كلا من نصفي الكرة الأرضية ويبدو أن تحمل كمية كبيرة من الآفات المنتشر في الحيوانات المحتضرة.
قد تظهر الآفات النقيلي في أي لحمة أو السحايا الرقيقة للجهاز العصبي المركزي، أو في كلا الموقعين. ويبدو أن هناك فريدة التفاعلات الورم المكروية التي تكمن وراء هذه الظواهر البيولوجية (15). لذلك، عندما يكون خط الخلية الجديدة التي سيتم اختبارها لقدرتها على إنتاج ورم خبيث في الدماغ التجريبية، فمن necessآرى أن تولي اهتماما خاصا لهذه الظواهر.
الشرايين السباتية الداخلية والخارجية امدادات الدم الى لحمة الدماغ والسحايا الرقيقة، على التوالي. وفقا لذلك، الخلايا السرطانية الترسيب في لحمة أو السحايا الرقيقة يمكن أن يتحقق عن طريق تعديل طفيف لهذا البروتوكول. للسماح للخلايا فقط إلى السحايا الرقيقة، الشريان السباتي الداخلي يمكن ligated عن طريق خياطة قبل حقن الخلايا السرطانية، وبالتالي توجيه الخلايا في الشريان السباتي الخارجي. من ناحية أخرى، وربط من الشريان السباتي الخارجي قبل الحقن السماح بدخول خلايا فقط في الشريان السباتي الداخلي وحمة الدماغ.
عموما، ينتج نهج حقن intracarotid البيانات من أعلى استنساخ وانخفاض التقلبات مقارنة مع الذيل الوريد أو داخل القلب الحقن. فإنه يتجنب أيضا الحقن التي يسببها الجهاز العصبي المركزي التهاب مقارنة مع طريقة الحقن داخل المخ مباشرة. وبالتالي، فإن هذا النهج هو حاليا الأكثرقيمة في الدراسات الكمية من ورم خبيث في الدماغ التي تهدف إلى توليد نتائج ذات دلالة إحصائية باستخدام عدد محدود من الحيوانات. في نفس الوقت، وجميع النماذج التجريبية لها حدود. مماثلة لغيرها من أساليب الدموي الخلايا السرطانية مقدمة، وحقن intracarotid يلخص فقط خطوات لاحقة في سلسلة الانبثاث بعد نشر الخلايا السرطانية في الدورة الدموية. وبالتالي فإنه ليس نموذجا مناسبا للدراسة، على سبيل المثال، العوامل البيولوجية التي تحدد نشر الخلايا السرطانية الأولية إلى مجرى الدم.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Ketamine hydrochloride/xylazine hydrochloride solution | Sigma-Aldrich | K113 | |
| Routine Stereomicroscope Leica M50 | Leica | M50 | The microscope is modular and highly configurable to fit particular space requirements. |
| Surgical disposable scapel | Integra Miltex | 4-410 | to make skin incisions |
| Tissue Forceps - 1 x 2 Teeth | Fine Science Tools | 11021-12 | to bluntly dissect mucles |
| Dumont #5 - Mirror Finish Forceps | Fine Science Tools | 11252-23 | to separate and prepare the carotid artery for injection |
| Spring Scissors | Fine Science Tools | 15025-10 | to cut sutures |
| EZ Clip Kit | Stoelting | 59020 | for wound cloure |
| BD Insulin Syringe | Becton Dickinson | 328438 | for cell injection |
| IVIS Spectrum In Vivo Imaging System | PerkinElmer | 124262 |
References
- Gavrilovic, I. T., Posner, J. B. Brain metastases: epidemiology and pathophysiology. J Neurooncol. 75 (1), 5-14 (2005).
- Patchell, R. A. The management of brain metastases. Cancer Treat Rev. 29 (6), 533-540 (2003).
- Barnholtz-Sloan, J. S., et al. Incidence proportions of brain metastases in patients diagnosed (1973 to 2001) in the Metropolitan Detroit Cancer Surveillance System. J Clin Oncol. 22 (14), 2865-2872 (2004).
- Schouten, L. J., Rutten, J., Huveneers, H. A., Twijnstra, A. Incidence of brain metastases in a cohort of patients with carcinoma of the breast, colon, kidney, and lung and melanoma. Cancer. 94 (10), 2698-2705 (2002).
- Bendell, J. C., et al. Central nervous system metastases in women who receive trastuzumab-based therapy for metastatic breast carcinoma. Cancer. 97 (12), 2972-2977 (2003).
- Clayton, A. J., et al. Incidence of cerebral metastases in patients treated with trastuzumab for metastatic breast cancer. Br J Cancer. 91 (4), 639-643 (2004).
- Romond, E. H., et al. Trastuzumab plus adjuvant chemotherapy for operable HER2-positive breast cancer. N Engl J Med. 353 (16), 1673-1684 (2005).
- Mayer, M. A patient perspective on brain metastases in breast cancer. Clin Cancer Res. 13 (6), 1623-1624 (2007).
- Lin, N. U., Bellon, J. R., Winer, E. P. CNS metastases in breast cancer. J Clin Oncol. 22 (17), 3608-3617 (2004).
- Zhang, C., Yu, D. Microenvironment determinants of brain metastasis of brain metastasis. Cell Biosci. 1 (1), 8 (2011).
- Fidler, I. J., Nicolson, G. L. Organ selectivity for implantation survival and growth of B16 melanoma variant tumor lines. J Natl Cancer Inst. 57 (5), 1199-1202 (1976).
- Zhang, L., et al. Microenvironment-induced PTEN loss by exosomal microRNA primes brain metastasis outgrowth. Nature. 527 (7576), 100-104 (2015).
- Zhang, S., et al. SRC family kinases as novel therapeutic targets to treat breast cancer brain metastases. Cancer Res. 73 (18), 5764-5774 (2013).
- Lim, E., Modi, K. D., Kim, J. In vivo bioluminescent imaging of mammary tumors using IVIS spectrum. J Vis Exp. (26), (2009).
- Zhang, C., Zhang, F., Tsan, R., Fidler, I. J. Transforming growth factor-beta2 is a molecular determinant for site-specific melanoma metastasis in the brain. Cancer Res. 69 (3), 828-835 (2009).
