Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Cancer Research

Intracarotid Kanser Hücre Enjeksiyon Beyin metastaz Fare modelleri üretmek için

Published: February 8, 2017 doi: 10.3791/55085

Summary

tedavi seçenekleri palyatif kalmıştır ise görülme sıklığı artmıştır olarak beyin metastazı acil karşılanmamış tıbbi ihtiyaç haline gelmiştir. Kanser hücrelerinin intracarotid arteriyel enjeksiyon yoluyla beyin metastazı deneysel hayvan modelleri oluşturma yeni müdahale rejimlerinin hastalığın biyolojisi ve değerlendirilmesi mekanik çalışmaları kolaylaştırır.

Abstract

Metastaz, hastanın vücudu içinde ikincil sitelerde, yayılması ve habis hücrelerin büyüme, kansere bağlı ölümlerin>% 90 oluşturmaktadır. Son zamanlarda, yeni tedavilere etkileyici gelişmeler dramatik birçok kanser hastaları için hayatta kalma ve yaşam kalitesinin düzeltilmesi uzamış var. Ne yazık ki, beyin metastatik nüks sıklığı hızla artmakta ve mevcut tüm tedaviler sadece palyatif vardır. Bu nedenle, iyi bir deneysel hayvan modelleri acil hastalığı biyoloji derinlemesine çalışmalar kolaylaştırmak ve klinik öncesi değerlendirilmesi için yeni tedavi rejimleri değerlendirmek için ihtiyaç vardır. Bununla birlikte, kanser hücrelerinin kuyruk damarından enjeksiyon yoluyla in vivo metastazı tahlilinde standart ağırlıklı akciğerdeki metastatik lezyonlar; hayvanlar genellikle beyin metastazı herhangi bir anlamlı akıbet önce akciğer tümör yükü yenik. Tümör hücrelerinin intrakardiyak enjeksiyon beyin dahil çoklu organ sitelerine metastatik lezyonlar oluşturur; Bununla birlikte, variabiBu model ile üretilen tümör büyümesinin vasıflı tedavi etkinliğini değerlendiren kendi programını nemlendirme, büyüktür. Beyin metastazı çalışma için güvenilir ve tutarlı hayvan modelleri oluşturmak için, burada tümör hücrelerinin intracarotid enjeksiyon yoluyla ev faresi (Mus musculus) deneysel beyin metastazı üretmek için bir prosedür açıklanmaktadır. Bu yaklaşım, böylece temel biyolojik mekanizmaları incelemek için ve yeni terapötik ajanlar değerlendirmek için araştırma çabalarını kolaylaştırıcı bir benzeri büyüme ve ölüm özellikleri ile beyin metastazı taşıyan farelerin çok sayıda üretmesini sağlar.

Introduction

merkezi sinir sistemi (MSS) için kanser metastazı yıkıcı bir hastalıktır ve beyin dokusundan ya da ( "beyin metastazı" Bu makalede hem anlamına gelir) leptomeningial ya içerebilir. 1 1, 2: Bu> 10 birincil gliomas outnumbering, baskın intrakranial kanseridir. Akciğer kanseri, meme kanseri ve melanom beyin metastazı 3, 4 yüksek incidences üreten ilk üç büyük neoplastik hastalıklar vardır. Son yıllarda, yeni kanser tedavilerinde etkileyici gelişmeler dramatik birçok kanser hastaları için hayatta kalma ve yaşam kalitesinin düzeltilmesi uzamış var. Ancak, nüks üzerine, beyin metastazı insidansı hızla artıyor. Örneğin, anti-HER2 antikoru trastuzumab (Herceptin) HER2 + meme kanserli hastalarda önemli klinik etkinlik göstermiştir; henüz rahatsız edici bir eğilim ortaya çıkmıştırBu hastalarda: kimin Ekstrakranial sistemik bir hastalık başlangıçta daha sonra beyin metastazı 5, 6, 7 geliştirmek trastuzumab tedavisinden fayda olanların 1/3 kadar. Ne yazık ki, beyin metastazı olan hastalar genellikle yaşam kalitesi travmatik bozulma yaşandığı, hemen hemen tüm güncel tedavilere dirençli olan ve tanı sonrası onların bir yıllık sağkalım sadece ~% 20 8'dir. Akım (steroidler, kranial radyoterapi ve seçilmiş hastalarda cerrahi rezeksiyon dahil) beyin metastazı için tedaviler sadece 9 küratif değil, palyatif. Bu nedenle, beyin metastazı yeni kanser tedavilerinin bu dönemde bir sonraki heybetli bir meydan okuma olarak ortaya çıkmaktadır. Hastalar klinikte her gün yüz karşılanmamış zorluğu gidermek için, biz acilen daha iyi beyin metastazı altında yatan mekanizmayı anlamak ve yeni tedaviler geliştirmek için bu bilgiyi kullanmak gerekir.

ex vivo veya in vitro sistemde değinmeyecek hiçbiri bağışıklık savunma mekanizmaları 10,. Bu nedenle, in vivo modellerde doğru ve sadık beyin metastazı çalışmaları için kritik öneme sahiptir. In vivo metastazı tahlilinde geleneksel bir akciğer tıkayabilirler hücrelerin çoğunluğu gelen, kuyruk damarından enjeksiyon yoluyla kanser hücrelerinin getirmektedir. Hayvan ölüm akciğerlerde 11 tümör yükü nedeniyle önce beyin metastatik lezyonlar nadiren bu modellerde üretilmektedir. Kanser hücrelerinin doğrudan intraserebral enjeksiyonla CNS'de tutarlı bir tümör büyümesini üretir ve yaygın olarak primer gliomların çalışmalarında kullanılmaktadır. Ancak, Such enjeksiyonu bu modelin fizyolojik alaka olarak, ilgilendiren önemli noktaları hem BBB ödün ve enjeksiyon yerinde travmatik yaralanma neden olur. Başka sık kullanılan kanser hücre giriş yolu, intrakardiyak enjeksiyon, yönetmek ve merkezi sinir sistemine deneysel metastaz üretir kolaydır. Ancak, CNS dışında diğer organ sitelerine eşzamanlı metastazları her zaman üretilir ve hayvan ölümleri 11 neden olabilir; Bu nedenle, bu modele göre yüksek değişkenlik derecesi nedeniyle, biyolojik mekanizmalar ya da hayvanların sınırlı sayıda terapötik maddelerin kantitatif bir değerlendirme için, uygun hale getirir.

Burada genel karotis arterinin içine kanser hücrelerinin enjeksiyonu ile deneysel beyin metastazı üretilmesi için işlemleri tarif eder. Biz beyin metastazı metastatik kaskad bireysel genlerin katkılarını incelemek ve terapötik müdahale etkinliğini değerlendirmek için bu yaklaşımı kullanmışs 12, 13. Bu yaklaşımın önemli avantajları tekrarlanabilirlik ve değişkenlik düşük derecesi yüksek derecede olduğu; büyük dezavantajı mikrocerrahi gerçekleştirmek için gerekli sofistike ve beceri olduğunu.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Etik deyimi: Tüm hayvan çalışmaları Texas MD Anderson Kanser Merkezinde Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) tarafından onaylanmıştır.

1. Enjeksiyon için Kanser Hücreleri hazırlayın

  1. enjeksiyondan önce kanser hücreleri bir veya iki gün Tohum. özel bir ortam, özel bir hücre hattı için literatürde belirtilmedikçe,% 10 FBS ile desteklenmiş DMEM / F12 ortamı kullanın.
  2. 37 ° C'de 2 dakika - 1 tripsinizasyonla (% 0.25) daha önce bir kez serumsuz ortam ile birinci yıkama ile% 80 izdiham - cerrahi operasyonun günde hasat hücreleri 70 ulaşır. DMEM / F12 ortamı FBS ihtiva eden,% 10,% 0.25 tripsin söndürmek için hücrelere ilave edin.
  3. 3 dakika 80 × g hücreleri santrifüj. Hücre hattına bağlı olarak, 5 x 10 6 hücre / ml -, bakiye serum kaldırma hemasitometre ile hücre sayımı, 1 Hank dengeli tuz çözeltisi (HBSS) içinde yeniden askıya almak için iki kez serumsuz ortam hücreleri yıkanır. buz üzerinde tutmakenjeksiyon zamanına kadar.
    Not: MDA-MB-231 göğüs kanseri hücreleri ve K1735 melanom hücreleri bu çalışmada kullanılmıştır ve her ikisi de hücre çizgileri / ml konsantrasyonda 2 x 10 6 hücre kullanıldı. metastaz tahlillerin sonuçlarını etkileyebilecek akibetini mümkün olduğunca kısa trypsinization süresini tutun.

2. tümör hücre enjeksiyonu için fareler hazırlamak

  1. intraperitonal (İP) fareler ketamin enjekte / ksilazin kokteyli (ketamin 100 mg / kg, ksilazin 10 mg / kg) anestezi.
  2. hayvan ayak kısma tam anestezi onaylayın ve tepki eksikliği gözlemlemek.
  3. (Protein jeller dökümü için kullanılan) bir cam levha üzerinde fare yerleştirin ve lastik bantlar ile sabitleyin.
  4. Gerekirse, tıraş veya tüy dökücü ürünü küçük bir miktar uygulayarak ve kağıt havlu ile saçlarını kapalı silerek boyun tüylerden. NOT: çıplak fareler kullanılarak onlar vücut saç yok gibi, bu adımı atlayın.
  5. uygulayarak boyun cildi temizleyinpovidon-iyot ve% 70 alkol.
  6. Diseksiyon mikroskobu sahnede fare yerleştirin
  7. Uzun bir cerrahi neşter ile cilt ~ 1 cm bir kesi yapmak.
  8. Açık açık altında karotis arter ortaya çıkarmak için dişli forseps ile kas teşrih.
  9. cerrahi forseps ile bitişik vagus sinirinden karotis arter ayırın.
  10. Cerrahi forseps kullanarak, küçük bir pamuk içine bir pamuk bazı pamuk ayırmak nemlendirin ve moda. enjeksiyon amaçlanan sitenin karotis arter altında bu tampon-nemli pamuk yerleştirin.
  11. pamuk bir dikiş uzak ve yakın yerleştirin ve gevşek knot yapmak. enjeksiyon yerinde kan akışını engellemek için proksimal düğüm sıkın.
  12. pamuk karotid arter taze kırmızı kan ile tam basınçlı görünürse kanser hücre enjeksiyonu geçin.

Karotis Arter içine 3. Kanser Hücre Enjeksiyon

  1. Vortex ve 100 ul o çizmekşırıngaya F kanser hücreleri.
  2. Diseksiyon mikroskobu altında, yavaş yavaş pamuk üstünde oturan karotid arter lümenine (konik kadar) 31 G iğne takın.
  3. Yavaşça karotis arter içine şırınga hücreleri enjekte edilir. tamponlu kanser hücreleri dolaşıma itilir zaman başarılı enjeksiyon yakın kan damarlarının ve kasların değişen renk ile mikroskop altında görülebilir.
  4. Tüm birimin enjeksiyonu tamamlandıktan sonra, yetmezliği önlemek için hafifçe uzak karotid arter kaldırın.
  5. Hızla enjeksiyon işlemini tamamlamak için uzak düğüm sıkın.
  6. enjeksiyon tamamladıktan sonra, bitişik harfler sıkın ve mikroskop altında mikro-makas ile aşırı ipek sütür kırpın. yara kapatılmaması ayrılmış kas geri hareket ettirin. İki zımba ile cilt kapatın.

4. Cerrahi Kurtarma

  1. Bir ısıtma pedi üzerine çalışan hayvan taşımakkurtarma için. hayvanlar bilincini kazanmak için 60 dakika - 30 sürebilir. Bu süre içinde, ameliyat sonrası analjezi gibi deri altına enjeksiyon yoluyla buprenorfin (0.05 mg / kg) tatbik. Not: Analjezi yerel IACUC protokolü onayladı göre sağlanmalıdır.
  2. hayvanlar uyandırmak ve onların normal davranış devam sonra, onların konut konumuna fareler dönün. birkaç gün sonrası ameliyat için jel gıda ile fareler sağlamak. Cerrahi kaydını tutmak ve odaya tutun.

Vivo Görüntüleme 5. Non-invaziv

  1. Lusiferaz raportör yapıları ile etiketlenmiş hücreler için, in vivo görüntüleme sistemi 14 kullanılarak kanser hücre enjeksiyonu verimini ölçmek.
    NOT: Görüntüleme araştırma hayvanlara aşırı stresten kaçınmak enjeksiyon gününde yapılmaz.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Enjeksiyon kalitesi değerlendirilebilir hangi iki nokta vardır. ilk şans enjeksiyon sırasında kan damarı renklerini değiştirme operatörün gözlem gereğidir. fakir enjeksiyonları Kaçak kolayca mikroskop altında görülebilir. Istikrarlı ve güvenli bir fare gövdesinin yerleştirilmesi (Şekil 1A) ve destekleyici pamuk üzerindeki karotid arter (Şekil 1B) karotid arter içine düzgün ve başarılı bir enjeksiyon için kritik faktörlerdir. enjeksiyon kalitesini değerlendirmek için ikinci nokta non-invaziv bir görüntüleme sonrası cerrahidir. Bu amaç için, kanser hücreleri, tipik olarak enjeksiyondan önce bir lusiferaz raportör ile ex vivo olarak etiketlenir. Genellikle 24 saat sonra enjeksiyondan gerçekleştirilir in vivo görüntüleme hayvanlarda stres en aza indirmek. Güçlü intrakranial kanser hücre yükü ve fare kafasına Başarılı bir enjeksiyon sonuçları pozitif s ile tek bölgesinyali veren (Şekil 2A).

Lusiferaz etiketli kanser hücreleri izlemek için vivo görüntüleme sisteminde kullanarak, gün sonrası enjeksiyon içinde sinyal yoğunluğunda bir başlangıç düşüş gözlemlemek; Bununla birlikte, merkezi sinir sistemi içinde büyümesinin sahip kanser hücreleri en sonunda bölmek ve beyin metastazı (Şekil 2B) geliştirmek gibi in vivo görüntüleme sistemi sinyalleri artmaktadır üretilmesi için yönetir. Intracarotid enjeksiyonu genellikle deneysel beyin metastazı üretmek için bu yaklaşım kullanılarak önemli bir avantajı, nispeten düşük değişkenlik, in vivo görüntüleme sistemi sinyalleri tutarlı üretir. büyüyen tümör lezyonları beyin dokuları yerinden olarak, hızlı ilerleyen beyin metastazı olan hayvanlar için sağlık kalitesi, insan beyin metastazı hastaların klinik tezahürü yansıtma, hızla bozulabilir. beyin metastazı önemli varlığının göstergesidir tipik semptomatik davranışlar kaybıdırağırlık, kambur duruş ve aralıksız çevreleme. Deneysel uç noktada, hayvan beyinleri biyokimyasal parametrelerin incelenmesi için ya da histolojik muayene için elde edilebilir. Melanotik metastaz lezyonlar (Şekil 3A) hariç, histolojik değerlendirme (Şekil 3B) öncesinde beyin dokuları çevreleyen tümör lezyonu ayırt etmek genellikle zordur. Bu gibi durumlarda, bunun metastatik hücrelerinin (Şekil 3C) izole edilmesi kolaylık sağlamak için bir floresan haberci (örneğin GFP) tümör hücreleri etiketlemek için tavsiye edilir. Seçenek olarak ise, tüm beyin manyetik boncuk-konjuge antikor ile ayrılmış, tek hücre ve tümör hücrelerine ayrışmış edilebilir.

Şekil 1
Şekil 1: karotid arter enjeksiyon için hazırlanması. A) anestezi fare, bir cam plaka üzerine yerleştirilir ve RU ile sabitlenirgrafik çubuklarıyla bBER bantları. Site ve kesi uzunluğu boyun siyah bir çizgi ile işaretlenir. Tüm hazırlık cerrahi adımlar tamamlandıktan sonra B) maruz karotis arter kanseri hücre enjeksiyona hazır, sağlam bir pamuk üzerine destek için yerleştirilir. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

şekil 2
Şekil 2: beyin metastazı akıbet için non-invaziv izleme. A) Modifiye MDA-MB-231 göğüs kanseri hücreleri, lusiferaz raportör geni ile ex vivo olarak etiketlenmiştir. In vivo görüntüleme sistemi görüntüleme (Ölçek çubuğu = 50 mm) tekrarlanan tarafından 24 saat sonrası karotid arter enjeksiyonu başlayarak, beyin metastazı gelişme non-invazif izlendi. In vivo görüntüleme sistemi ima B) Nicelemeveri ging hayvan can çekişme kadar beyin metastazı üstel akıbet ardından tümör yükü sonrası karotid arter enjeksiyonu bir başlangıç ​​düşüş gösterir. Hata çubukları, toplam lüminesan sinyal ortalama (SEM) standart hata yansıtmaktadır. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Şekil 3,
Şekil 3: Hasat Beyin Metastazı Lezyonları. A) K1735 melanom hücrelerinin büyük ölçüde çevre stroma beyin metastatik lezyonların ayrılmasını kolaylaştırır ancak bazı melanom modelleri ile sınırlıdır Singeneik C3H fare beyindeki melanotik beyin metastazı lezyonlar üretir. B) transgenik MMTV- Neu / PTEN -null fare meme tümör hücrelerini Disosiye açık beyin metastazı af üretirkarotis enjeksiyon yoluyla ter implantasyonu. Tümör / stroma marjı anjiyogenik metastatik lezyonların belirgin varlığına rağmen ayırt etmek zordur. C), MDA-MB-231 göğüs kanseri hücreleri, cerrahi rezeksiyon veya hücre sıralama ile beyin metastazı lezyonların çıkarılmasını kolaylaştırmak için ex vivo olarak, yeşil flüoresan proteini (GFP) raportör ile önceden etiketlenir. Metastatik lezyonların büyük bir kısmı karotid arter enjeksiyon yer alır beynin aynı tarafında konsantre edildi unutmayın. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

kanser hücrelerinin başarılı karotis arter enjeksiyonu için en kritik adımlar şunlardır: cerrahi operasyon için hazırlık fare 1) derin anestezi; 2) Pamuk desteğinin üstünde karotis arter sürekli yerleştirme; Başarılı enjeksiyondan sonra karotid arter 3) sıkı ligasyon.

30 dakika ~ Derin anestezi mikroskop altında istikrarlı cerrahi performans için genellikle gereklidir. Biz fare anestezi için ticari hazır kullanımlı ketamin / ksilizin kokteyl kullanın. Anestezi için kullanılan ses ayarlama daha fazla esneklik sağlamak için fizyolojik tuzlu su içinde 2: 1 veya 1: potansiyel aşırı doz önlemek için, ketamin / ksilazin kokteyli 1 seyreltilebilir. Seçenek olarak ise, kontrollü olmayan bir ilaç tribromoethanol anestetik olarak kullanılabilir; ancak, indirgeme tribromoethanol eğilimi maddesi daha az güvenilir ketamin / ksilazin kokteyl daha etkili bir anestezik olarak yaptığını bulduk.

birsürekli yerleştirilir ve tam basınçlı karotid arter ölçüde kanser hücrelerinin enjeksiyonu kolaylaştırır; Bu nedenle, biz çok dikkatli bir şekilde yerine optimal koşullar altında enjeksiyon ile devam daha mikroskop altında arterin pozisyonunu hazırlamak için vakit öneriyoruz.

Daha kanser hücreleri karotis arter enjeksiyon tarafında damarsal içinde Köşkü olacak. Her iki hemisferde can çekişme hayvanlarda metastatik lezyonların önemli miktarda yenerler için bazen metastatik hücrelerinin önemli bir bölümü, beyin diğer tarafına göç edebilirler.

Metastatik lezyonlar parankimi veya MSS leptomeninks, her iki konumda ya görünebilir. Bu biyolojik fenotipleri 15 altında yatan benzersiz tümör mikroçevresinin etkileşimler ortaya çıkmaktadır. Yeni bir hücre çizgisi, deneysel beyin metastazı üretme yeteneği için test edilecek olan, bu nedenle, bu necess olduğuBu tür fenotipleri özel dikkat lanarak.

İç ve dış karotis arterler sırasıyla beyin parankimi ve leptomeninkslerde içine kan kaynağı. Bu duruma göre, dokusu ya leptomeninks halinde tümör hücre birikimi bu protokol küçük bir değişiklikle elde edilebilir. Sadece leptomeninks içine hücreleri izin vermek için, iç karotid arter, tümör hücrelerinin enjeksiyonundan önce, bir ameliyat dikiş ipliği ile bağlanabilir, bu şekilde dış karotit arterine hücreleri yönlendirmek; Diğer taraftan, enjeksiyondan önce dış karotis ligasyonu sadece dahili karotid arter ve beyin parankiması hücrelerin içine girişini sağlar.

Genel olarak, intracarotid enjeksiyon yaklaşımı kuyruk ven veya intrakardiyak enjeksiyonlar göre daha yüksek tekrarlanabilirlik ve düşük değişkenlik veri üretir; Ayrıca, doğrudan intraserebral enjeksiyonla yöntemine göre enjeksiyonla kaynaklı CNS iltihap önler. Dolayısıyla, bu yaklaşım, şu anda en çokhayvanların sınırlı sayıda kullanarak istatistiksel olarak anlamlı sonuçlar üretmek amacı beyin metastazı kantitatif çalışmalarda değerli. Aynı zamanda, her deneme modelleri sınırlamaları vardır. kan yoluyla tümör hücre giriş diğer yöntemlere benzer şekilde, intracarotid enjeksiyon, dolaşıma kanser hücresi yayılması sonra metastaz kademeli olarak daha sonraki adımlar tekrarıdır. Böylece bu çalışma için uygun bir model değildir, örneğin, kan dolaşımına primer kanser hücrelerinin yayılmasını tespit biyolojik faktörler.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Ketamine hydrochloride/xylazine hydrochloride solution Sigma-Aldrich K113
Routine Stereomicroscope Leica M50 Leica M50 The microscope is modular and highly configurable to fit particular space requirements.
Surgical disposable scapel Integra Miltex 4-410 to make skin incisions
Tissue Forceps - 1 x 2 Teeth Fine Science Tools 11021-12 to bluntly dissect mucles
Dumont #5 - Mirror Finish Forceps Fine Science Tools 11252-23 to separate and prepare the carotid artery for injection
Spring Scissors Fine Science Tools 15025-10 to cut sutures
EZ Clip Kit Stoelting 59020 for wound cloure
BD Insulin Syringe Becton Dickinson 328438 for cell injection
IVIS Spectrum In Vivo Imaging System PerkinElmer 124262

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Gavrilovic, I. T., Posner, J. B. Brain metastases: epidemiology and pathophysiology. J Neurooncol. 75 (1), 5-14 (2005).
  2. Patchell, R. A. The management of brain metastases. Cancer Treat Rev. 29 (6), 533-540 (2003).
  3. Barnholtz-Sloan, J. S., et al. Incidence proportions of brain metastases in patients diagnosed (1973 to 2001) in the Metropolitan Detroit Cancer Surveillance System. J Clin Oncol. 22 (14), 2865-2872 (2004).
  4. Schouten, L. J., Rutten, J., Huveneers, H. A., Twijnstra, A. Incidence of brain metastases in a cohort of patients with carcinoma of the breast, colon, kidney, and lung and melanoma. Cancer. 94 (10), 2698-2705 (2002).
  5. Bendell, J. C., et al. Central nervous system metastases in women who receive trastuzumab-based therapy for metastatic breast carcinoma. Cancer. 97 (12), 2972-2977 (2003).
  6. Clayton, A. J., et al. Incidence of cerebral metastases in patients treated with trastuzumab for metastatic breast cancer. Br J Cancer. 91 (4), 639-643 (2004).
  7. Romond, E. H., et al. Trastuzumab plus adjuvant chemotherapy for operable HER2-positive breast cancer. N Engl J Med. 353 (16), 1673-1684 (2005).
  8. Mayer, M. A patient perspective on brain metastases in breast cancer. Clin Cancer Res. 13 (6), 1623-1624 (2007).
  9. Lin, N. U., Bellon, J. R., Winer, E. P. CNS metastases in breast cancer. J Clin Oncol. 22 (17), 3608-3617 (2004).
  10. Zhang, C., Yu, D. Microenvironment determinants of brain metastasis of brain metastasis. Cell Biosci. 1 (1), 8 (2011).
  11. Fidler, I. J., Nicolson, G. L. Organ selectivity for implantation survival and growth of B16 melanoma variant tumor lines. J Natl Cancer Inst. 57 (5), 1199-1202 (1976).
  12. Zhang, L., et al. Microenvironment-induced PTEN loss by exosomal microRNA primes brain metastasis outgrowth. Nature. 527 (7576), 100-104 (2015).
  13. Zhang, S., et al. SRC family kinases as novel therapeutic targets to treat breast cancer brain metastases. Cancer Res. 73 (18), 5764-5774 (2013).
  14. Lim, E., Modi, K. D., Kim, J. In vivo bioluminescent imaging of mammary tumors using IVIS spectrum. J Vis Exp. (26), (2009).
  15. Zhang, C., Zhang, F., Tsan, R., Fidler, I. J. Transforming growth factor-beta2 is a molecular determinant for site-specific melanoma metastasis in the brain. Cancer Res. 69 (3), 828-835 (2009).

Tags

Cancer Research Sayı 120 kanser metastazı beyin metastazı preklinik hayvan modeli deneysel model intracarotid enjeksiyon
Intracarotid Kanser Hücre Enjeksiyon Beyin metastaz Fare modelleri üretmek için
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Zhang, C., Lowery, F. J., Yu, D.More

Zhang, C., Lowery, F. J., Yu, D. Intracarotid Cancer Cell Injection to Produce Mouse Models of Brain Metastasis. J. Vis. Exp. (120), e55085, doi:10.3791/55085 (2017).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter