תיקון אנגיופלסטיקה בחולדת אב העורקים או נחות Vena Cava

Abstract

טלאי קרום לב משמשים בכירורגיה של כלי דם כדי לסגור כלי. כדי להקל על מחקרים של היפרפלזיה neointimal הנוצרת על התיקון, פיתחנו מודל עכברוש של אנגיופלסטיקה תיקון שיכול לשמש גם וריד או עורק, וייצור טלאי venoplasty או תיקון arterioplasty, בהתאמה. היבטים טכניים של מודל זה הם דנו. IVC אינפרא כליות או אבי העורקים הם גזור ואז הידק proximally ו distally. Venotomy או arteriotomy 3 מ"מ מתבצע הווריד או אב העורקים הנבובים הנחים infrarenal של 6 עד 8 חולדות Wistar שבועות בן. כתם קרום לב שור (3 מ"מ x 1.5 מ"מ x 0.6 מ"מ) לאחר מכן נעשה שימוש כדי לסגור את האתר באמצעות תפר ניילון 10-0. לעומת תיקוני עורקים, תיקוני ורידי להראות גדל עובי neointimal על יום לאחר הניתוח 7. זה מודל הרומן של אנגיופלסטיקה תיקון קרום הלב יכול לשמש כדי לבחון היפרפלזיה neointimal על biomaterials וסקולרית, כמו גם להשוות את ההבדלים בין עורקים ורידיסביבות.

Introduction

מנתחי דם כלי דם קרוב כלל עם טלאי קרום לב, או שור או חזירי, כדי להפחית את הסיכון של restenosis ^{1, 2.} בניתוח עורק, אנגיופלסטיקה תיקון קרום לב מפחיתה את שיעור restenosis לעומת סגר עיקרי ^{3, 4.} תיקון venoplasty גם מבוצע באופן דומה לסגור ורידים, למרות בתדירות נמוכה יותר בהשוואה להליכים עורקי ^{5, 6.} תיקונים בדרך כלל לפתח היפרפלזיה neointimal על משטחים לומינל שלהם; עם זאת, המנגנון של היווצרות neointimal עדיין לא ברור, במיוחד בהשוואה של הבדלים במבנה neointimal בין העורקים וסביבות ורידים. הראינו בעבר כי טלאי קרום לב למשוך ובתאים הם בעורקי סביבות הוורידים וכי אנגיופלסטיקה תיקון ורידי תערוכות יותרהיווצרות neointimal ggressive לעומת מדבקות העורקים ^{7, 8.}

במחקר זה, אנו מתארים את מודל העכברים של אנגיופלסטיקה תיקון קרום לב משותפת סגירת שני ורידים ועורקים וכי ניתן להשתמש כדי ללמוד היווצרות neointimal; שיטה זו היא דגם בזעיר חיה של טכניקה פעילה הנפוצה בחולים אנושיים. מודל העכברוש בעל קוטר גדול יותר מאשר דגם העכבר, דבר המקל על היבטים טכניים של הניתוח ושיפור עקומת הלמידה עבור הדגם.

Protocol

אישור ועדת האשפוז במוסד סיעודי בעלי החיים והשימוש המתאים יש לקבל, המציין כי הפרוטוקול שלך ערוך בהתאם להנחיות של ועדת האתיקה במחקר בבעלי החיים של המוסד שלך.

1. הרדמה ונהלים טרום ניתוחיים

1. להרדים זכר חולדות Wistar, במשקל של כ -200 גרם, עם 3% isoflurane מתאדה 1 חמצן L / min מנוהל לתוך תא אינדוקציה אקריליק.
2. אשר הרדמה נאותה דרך חוסר תגובת קמצוץ בוהן וזנב. מניח משחה על העיניים כדי למנוע יובש בעוד החיות נמצאות תחת הרדמה. מקם את כל עכברוש פרקדן על צלחת ניתוח פלאסטי ולמקם מסכה סיליקון לספק מתאדה 2 - 3% isoflurane משאיפת רציפה. אל תשאירו חיה ללא השגחה עד שהוא שב להכרתו מספיק כדי לשמור שכיבה sternal.
3. בזמן חבישת כפפות סטריליות, להסיר את שיער בטן הגחון באמצעות מסיר שיער. Buprenorphine, או תת-עורית או intraperitoneally, ניתן לעתים קרובות בשלב זה.

2. נוהלי Operative

1. תיקון venoplasty
   1. לפני הניתוח, חתוך את תיקון קרום הלב שור באמצעות microscissor לגודל 3 מ"מ x 1.5 מ"מ x 0.6 מ"מ. משרים את התיקון ב 10 מ"ל של תמיסת מלח מעוקרות במשך 5 דקות בצלחת תרבית תאים.
   2. הכן את אתר החתך עם חיטוי אקטואלי פי הפרוטוקול המוסדי שלך ולהחיל לעטוף כירורגית. יש להשתמש בכפפות ומכשירים סטרילי לשמור טכניקה אספטי לאורך כל הניתוח. הרדמה מקומית ניתן להזריק לתוך האתר של החתך בעור המתוכנן.
   3. באמצעות אזמל, לעשות חתך בבטן קו אמצע המשתרע ברמת xiphoid רק מעל החיק.
   4. הכנס מפשק ו לעקור מעיים כל מעי מחלל הבטן כלפי הצד הימני. עוטף את המעיים בגזה ספוגה מלוח.
   5. לחשוף את iוריד נבוב nfrarenal (IVC). האתר של השתלת תיקון הוא כ 2 מ"מ מתחת לרמה של מוצא ורידי הכליות; לנתח את IVC חינם באתר זה. ולקשור ולחלק את כל הוורידים המותני ו יובל ברמה זו באמצעות 6-0 תפרים ניילון.
   6. מניחים שני קליפים המיקרו-כירורגיה ברחבי הן הפרוקסימלית ומ infarenal דיסטלי IVC. בצע venotomy עם מחט 25 G על ידי ניקוב הקיר הקדמי של IVC, ולאחר מכן להרחיב אותו סביב 3 מ"מ באמצעות מספריים (איור 1 א).
   7. סגור את venotomy עם המדבקה באמצעות ריצה או מופרע 10-0 תפרי ניילון (איור 1B).
   8. השלם את הסגר venoplasty. הסר את מהדק דיסטלי הראשון לפרוק את התיקון ולאחר מכן הסר את מהדק הפרוקסימלית לשחזר את זרימת הדם אל IVC.
   9. אשר המוסטאסיס ידי התבוננות למשך 30 שניות ללא דחיסה. החזר את המעיים למצב הטבעי שלהם. סגור את הבטן עם תפר פועל על פי פרוטוקולי חיה אושרה.
2. תיקון arterioplasty
   1. לפני הניתוח, חתוך את תיקון קרום הלב שור באמצעות microscissor לגודל 3 מ"מ x 1.5 מ"מ x 0.6 מ"מ. משרים אותו מלוחים מעוקרים.
   2. הכן את אתר החתך עם חיטוי אקטואלי ולהחיל לעטוף כירורגית. יש להשתמש בכפפות ומכשירים סטרילי לשמור טכניקה אספטי לאורך כל הניתוח.
   3. באמצעות אזמל, לעשות חתך בבטן קו אמצע המשתרע ברמת xiphoid רק מעל החיק.
   4. הכנס מפשק ו לעקור מעיים כל מעי מחלל הבטן כלפי הצד הימני. עוטף את המעיים בגזה ספוגה מלוח.
   5. לחשוף את אבי העורקים. האתר של השתלת תיקון הוא כ 2 מ"מ מתחת לרמה של מוצא העורקים הכליות; לנתח את אבי העורקים חינם באתר זה. ולקשור ולחלק את כל העורקים המותני ברמה זו באמצעות 6-0 תפרים ניילון.
   6. הצמד את אבי העורקים infrarenal. שימוש במחט 25 G לבצע arteriotomy ידי puncturing הקיר הקדמי של אבי העורקים, ולאחר מכן להרחיב אותו סביב 3 מ"מ באמצעות מספריים (איור 1 ג).
   7. סגור את arteriotomy עם המדבקה באמצעות ריצת 10-0 תפרי ניילון (1D איור). השלם את הסגר arterioplasty. הסר את מהדק דיסטלי הראשון לפרוק את התיקון ולאחר מכן הסר את מהדק הפרוקסימלית לשחזר את זרימת הדם אל אבי העורקים.
   8. אשר המוסטאסיס ידי התבוננות למשך 30 שניות ללא דחיסה. החזר את המעיים למצב הטבעי שלהם. סגור את הבטן עם תפר פועל על פי פרוטוקולי חיה אושרה.

נהלים 3. לאחר ניתוח

1. לאחר סגירת הבטן, להפסיק את ההרדמה. החל טיפול שלאחר הניתוח, כולל שיכוך כאבים וטיפול הפצע, בהתאם להוראות שהומלצו על ידי ועדת טיפול בבעלי חיים מוסדיים השתמש.
2. על שיכוך כאבים, השתמש עצירות ברמה של 0.1 מ"ג / ק"ג לשריר ולא פחות מאחת 12 שעות במשך 24 שעות אחריing הליכים כירורגיים. בדוק את מצב החיה כל יום בחדר החיה, הבטחת שחזור מתאים מתקופת פרי הניתוח וכן טיפול הולם של כאב לאחר ניתוח. אל תחזרו בעל חיים אשר עבר ניתוח לחברה של בעלי חיים אחרים עד שהוא התאושש לחלוטין.

Representative Results

לאחר אנגיופלסטיקה תיקון, אין פקקת או ורידי (N = 42) או עורקים (n = 24) קבוצות התיקון. הישרדות ביום 7 היה 100% בשני הקבוצות גם עם ורידים או תיקון עורק.

המדבקות נבצרו ביום 7 ומוכתמים hematoxylin ו eosin, ואת עובי neointimal הושווה כפי שתואר לעיל ^7. בגלל ההבדל המורפולוגי המובהק בין התיקון ואת neointima, זה קל מאוד להבדיל בין neointima. בחלקת הוורידים, הייתה שכבה ברורה של neointima העבה בצד luminal של התיקון, עם תאים נוספים שהצטברו neointima (איור 2 א, 2 ג); בחלקת העורקת, הייתה שכבה neointimal הרבה יותר רזה, עם כמה תאים בלבד מחוברים לצד luminal של התיקון (התרשים 2B, 2D). Wa neointima זה משמעותי עבה בחלקת ורידי בהשוואה תיקון העורק (איור 2E). תוצאות דומות התקבלו ביום 14 (מידע לא מוצג). תוצאות אלו מראות כי מודל תיקון venoplasty עדיף על פני מודלים אחרים לרכוש neointima עבה בתוך פרק הזמן קצר.

איור 1: עכברוש קרום לב תיקון אנגיופלסטיקה. (א) תצלום נציג מראה את venotomy IVC. (ב) תצלום נציג מראה את IVC לאחר מיקום המדבקה. (ג) תצלום נציג מראה את arteriotomy אבי העורקים. (ד) תצלום נציג מראה האאורטה לאחר מיקום המדבקה. A, אבי העורקים; IVC, וריד נבוב נח; P, תיקון קרום הלב; *, אינטימה האחורי של IVC או אבי העורקים; סימונים שליטים הם 1 מ"מ.3fig1large.jpg "target =" _ blank "> לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.

איור 2: היפרפלזיה Neointimal אגרסיבי ב Patch Venoplasty לעומת תיקון Arterioplasty ב יום 7.
(א) תצלום כוח תחתון נציג מראה את התיקון venoplasty ביום 7, אשר היה מוכתם H & E. (ב) תצלום כוח תחתון נציג מראה את אנגיופלסטיקה התיקון ביום 7, אשר היה מוכתמת H & E. (ג) תצלום הספק גבוה נציג מראה היווצרות neointimal על venoplasty תיקון. (ד) תצלום הספק גבוה נציג מראה היווצרות neointimal על arterioplasty תיקון. סרגל קנה מידה = 0.5 מ"מ; מתח גבוה = 100 מיקרומטר. P, תיקון; L, לומן IVC או אבי העורקים; N, neointima. (E) showi גרף ברng גדל עובי neointimal ב venoplasty לעומת arterioplasty. בר השגיאה מציין את SEM; * P = 0.0015, t-test; n = 4. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.

Discussion

אנו מתארים מודל אנגיופלסטיקה תיקון בחולדה שיכול לשמש גם בוורידים או בעורקים, יצירת venoplasty תיקון או תיקון arterioplasty, בהתאמה. באמצעות מודל תיקון קרום הלב הזה, הראינו היפרפלזיה neointimal אגרסיבי ויציב בחולדה IVC venoplasty לעומת arterioplasty אבי העורקים (איור 2) ^{7, 8.}

היבטים טכניים כמה הם בולטים. בשנתי ה arterioplasty אב העורקים, חשוב כי התפרים הם צמודים נאותים מספר ו / או ריווח כדי למנוע דליפה של דם בלחץ הגבוה של הסביבה העורקת. בשנות ה venoplasty IVC, חשוב לבצע את כל התמרונים פעולה עם תשומת לב מיוחדת ועדינות, כמו הקיר IVC הוא דק מאוד ושביר. בנוסף, המותני וקטן יובל ורידים סביב אתר ההשתלה חייבים להיות גזורים בקפידה ligated כדי למנוע דימום. בשני arteריאל ונהלים ורידי, מהדק דיסטלי המוסר ראשון לפרוק כל אוויר לומינל וכדי למנוע תסחיף אוויר ריאתי. מהדק הפרוקסימלית מוסר מכן להחזיר את זרימת הדם דיסטלי. לבסוף, כאשר ניקוב האאורטה או קיר IVC, לא לנקב את הקיר האחורי; אם הקיר האחורי הוא נקב, תפר 10-0 אמור לשמש כדי לסגור את החור.

החיסרון של אנגיופלסטיקה תיקון באבי העורקים הוא פיתוח של pseudoaneurysms בזמנים מאוחר יותר (למשל, שלאחר הניתוח יום 30). עם זאת, היו לעתים רחוקות כל pseudoaneurysms נצפתה בימים שלאחר ניתוח 7 או 14, דבר המצביע על השירות של מודל זה במהלך 2 השבועות הראשונים לאחר ההליך ללמוד היווצרות neointimal באחת הוורידים או לסביבת עורקי ^{7, 9.}

יש תיקון קטן-חיה אנגיופלסטיקה מספר יתרונות בהשוואה לדגמים שתל חציצה. ראשית, איילת כלי המארחשעות לא צריך להיות transected, כמו חתך קיר קדמי רק נעשה; זה מקטין את זמן כירורגית ממזער את הסיכון לדימום. שנית, השתל ביון דורש שני anastomoses, הגדלת זמן וסיכון תפעולי לסיבוכים, כמו גם הארכת עקומת למידה. אנגיופלסטיקה תיקון דורשת השקה אחת בלבד, צמצום זמן הניתוח ואת הסיכון לסיבוכים. שלישית, אנגיופלסטיקה תיקון מהותי מפחיתה את הסיכון להיצרות באתר anastomotic, פוטנציאל המאפשר זמן מוגבר תצפית לאחר הניתוח ^10.

לסיכום, אנו מתארים שיטה לביצוע אנגיופלסטיקה תיקון המשתמשת טלאים קרום הלב לסגור כלי בקוטר קטן; ההליך הוא החלים באופן שווה לבני שני ורידים ועורקים. venoplasty תיקון קרום הלב לראות היווצרות neointimal אגרסיבית יותר בהשוואה לדגם arterioplasty בזמנים לאחר הניתוח מוקדם. תוצאה זו מרמזת על השירות של i מודל זהn בקביעת הבדלי אינטראקציות בין הוורידים ואת סביבות עורקים עם biomaterials המושתלת. בנוסף, סוגים שונים של יצירות התיקון יכול להיבדק כדי לבדוק את התגובה לחומרים שונים אלה.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Bovine pericardial patch	LeMaitre Vascular
Vascular clamp	Roboz Surgical Instrument Co.	RS-5424
Clamp applying forceps	Roboz Surgical Instrument Co	RS-5410
10-0 Prolene suture	Arosurgical Co.	T05A10N10-13