Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

التي تقتصد في العصب منتصف الإحليلية إعاقة (نيمو) في أنثى القوارض الصغيرة

Published: April 25, 2017 doi: 10.3791/55288

Summary

النمذجة التقليدي جزئية انسداد المثانة منفذ في القوارض محفوف نفوق الحيوانات. اصابة إزالة التعصيب من تشريح جميع أنحاء القريبة مجرى البول وعنق المثانة هي أيضا مصدر قلق كبير. قمنا بتطوير وتقييم لمنتصف مجرى البول نموذج عرقلة آمنة وموثوق بها، وتجنب أوجه القصور في النموذج التقليدي.

Abstract

جزئية انسداد المثانة منفذ (pBOO) لديها انتشار عالية، يسبب عبئا كبيرا المريض، وتكاليف الرعاية الصحية الهائلة. نموذج حيواني الأكثر شيوعا للتحقيق في المثانة إعادة عرض في pBOO والقوارض الإناث تمر انسداد جزئي في مجرى البول القريبة. التغير في درجة الانسداد ونفوق الحيوانات من الشواغل الرئيسية مع انسداد القريبة. وعلاوة على ذلك، تشريح حول الداني مجرى البول وعنق المثانة يهدد المثانة تعصيب.

قمنا بتطوير نموذج منتصف الإحليلية انسداد التي تقتصد في العصب (نيمو) للpBOO تجنب عيوب النموذج التقليدي. اقتربنا من مجرى البول فقط أقل شأنا من الارتفاق العانة، الذي ينفي الحاجة إلى فتح البطن وكذلك للتشريح في هذا المجال؛ أيضا، وظلت مصرة الإحليل المخططة يمسها. أجرينا نيمو في إناث فئران سبراغ داولي (12 عوائق 6 الحيوانات الشام)، وكذلك في الإناث C57 / الفئران BL6 (20 إعاقةالصورة، 18 الحيوانات الشام). بعد أسبوعين، قمنا بتقييم وظيفة المثانة والكتلة المثانة، وكتلة الجسم.

لم يكن لدينا وفيات بين إناث الفئران obstructed- أو الشام التي تديرها. كما هو موضح في الدانية التقليدي pBOO-الأسلوب، نحن ربط الخيط حول الاحليل الداني وضعت مؤقتا 0.9 ملم قضيب معدني. نيمو الناجم عن زيادة 85٪ في كتلة المثانة بعد أسبوعين، كان متوسط ​​حجم البول المتبقية 0.4 مل في الفئران عرقلت جزئيا في حين لا تتعدى 0.03 مل في الحيوانات صورية. في الفئران، واختبرنا 3 أحجام قنية أننا وضعت على طول مجرى البول عند ربط الخيط. لقد وجدنا أن استخدام قنية 27 عيار أدى في أكثر من نفوق الحيوانات 50٪، وضع قنية عيار 25 لم تسفر عن الاستجابة المطلوبة في زيادة كتلة المثانة. استخدام قنية 26 عيار أسفرت عن نتائج إيجابية مع الوفيات الحد الأدنى من الحيوان (1/8) بعد مهمة زيادة بنسبة 2 أضعاف في كتلة المثانة.

Introduction

جزئية المثانة منفذ إعاقة (pBOO) لديها ارتفاع معدل انتشار ويمكن أن يؤدي إلى شديد المثانة اختلال وظيفي ويتراوح الطيف من التشوهات الخلقية مثل الصمامات الخلفي مجرى البول أو مبال تحتاني، على تضيق الإحليل المكتسبة لتضخم البروستاتا الحميد. هذا الأخير يؤثر على أكثر من 30٪ من الرجال ستين عاما فما فوق 2. عبء المريض كبيرة وتكاليف الرعاية الصحية الهائلة المرتبطة pBOO تبرر الجهد البحثي الكبير وضعت موضع دراسة إعادة المثانة ردا على مقاومة زيادة تدفق 3. من عام 2006 وحتى عام 2015، أكثر من 220 فهرستها مجلات نشرت مقالات بشأن تأثير pBOO على المثانة البولية.

على الرغم من أن النماذج الحيوانية للpBOO وقد وضعت في العديد من الأنواع مثل الفئران الأرنب 7 خنزير، ومذكرات التفاهمه ومع ذلك يمكن القول إن النموذج الحيواني الأكثر استخداما هي إناث الفئران التي تمر انسداد جزئي في مجرى البول القريب. الحصول على بطن الحيوانات، exteriorizing المثانة، وتشريح حول عنق المثانة لا مفر منها مع هذه التقنية مجرى البول عرقلة التقليدية القريبة. التغير في درجة الانسداد ونفوق الحيوانات ليست سوى بعض من المخاوف المرتبطة بهذا الإجراء 10، 11؛ أظهرنا أنه في الشام تشغيلها الحيوانات، تشريح حول الاحليل الداني يؤدي إلى التغيرات الفسيولوجية التي ترتبط مع فقدان الألياف العصبية في عنق المثانة 12. وتشير هذه النتيجة إلى أن الأكثر شيوعا نموذج حيواني pBOO، الذي ينطوي على الوصول إلى مجرى البول الداني في القوارض الإناث، يؤدي إلى إصابة إزالة التعصيب مع التغييرات الهيكلية والوظيفية المرتبطة المثانة، مما يؤثرصورية والحيوانات المتعسرة. لذلك، هناك حاجة إلى نهج تجنب الإصابة إزالة التعصيب بديلة. مختبرنا تطوير وتقييم نهج إعاقة منتصف الإحليلية التي تقتصد في العصب (نيمو) وفعال في إحداث تغييرات المصاحب عرقلة المتوقع في المثانة مثل زيادة في كتلة الجهاز والبول المتبقية، بينما كانت الحيوانات الشام التي تديرها تمييزه عن الحيوانات السيطرة unoperated . أيضا، وظلت مصرة الإحليل المخططة يمسها لأنها تقع الأقرب إلى مستوى تشريح. وعلاوة على ذلك، كان التباين في الزيادة الناجمة عن انسداد في كتلة المثانة أقل بكثير مما كانت عليه في التقليدية انسداد مجرى البول الداني وكان نفوق الحيوانات صفر.

نحن أيضا تطبيقها بنجاح على نيمو في إناث الفئران مع معدل وفيات أقل من 10٪ في الحيوانات إعاقة، في حين ارتبطت كل النماذج pBOO للفئران صفها حتى الآن مع الوفيات حوالي 50٪. سوف دراسة المثانة إعادة عرض في سياق pBOO في الفئران الاستفادة من applicabilإيتي من مجموعة كاملة من التعديلات المعدلة وراثيا.

تشريح حول منتصف مجرى البول في الإناث القوارض لا يسبب التغييرات الهيكلية أو الوظيفية غير المرغوب فيها والتباس في المثانة البولية لوحظت في نموذج عرقلة القريبة التقليدي. ومع ذلك، الأمر الذي أدى إلى إعاقة جزئية على مستوى منتصف مجرى البول لا يزال يدفع المثانة تضخم وزيادة البول المتبقية، كما هو متوقع من نموذج حيواني لpBOO. الأهم من ذلك، أداء نيمو في الفئران يفتح التحقيق في إعادة المثانة في pBOO إلى أساليب المعدلة وراثيا، والتي هي غير متوفرة تقريبا في القوارض أكبر.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

وتمت الموافقة على بروتوكول التجريبية التالية من قبل لجنة رعاية الحيوان المؤسسة.

1. نيمو في إناث الفئران

  1. تجهيز
    1. وضع الإناث الفئران سبراغ داولي يزن حوالي 200 غرام أقل من 3٪ الأيزوفلورين التخدير، وتزن الحيوان، ويحلق وتطهير المنطقة prepubic 3 مرات باستخدام فرك الجراحية اليود.
    2. على وسادة التدفئة، والشريط أطرافه الخلفية والذيل إلى أسفل ويقثطر المثانة مع angiocatheter 20 عيار، والذي هو أيضا مسجلة بلطف إلى أسفل لمنع انزلاق.
  2. تشريح
    1. استخدام مشرط لإجراء 8 ملم الطولي شق الجلد من الارتفاق العانة واضح نحو الصماخ الإحليل. رفع قبالة الجلد على جانبي لتسهيل احق إغلاق الجرح.
    2. تشريح بصراحة لتحديد مجرى البول stented عن طريق نشر طولية مع مقص غرامة. وضع غرامة الذاتي الاحتفاظ السنانير الجلد لتعزيز التعرضمن مجرى البول.
    3. أداء بعض لطيف طولية نشر باستخدام مقص منحني ظهري إلى مجرى البول لتطوير الطائرة بين مجرى البول والمهبل. ثم، لتمرير بصراحة خياطة 4-0 الحرير وراء مجرى البول وإعداد رمي مزدوج من عقدة الجراح.
  3. جزئية انسداد مجرى البول
    1. إزالة angiocatheter، ضع 0.9 ملم قضيب معدني موازية لمجرى البول، ومن ثم تشديد عقدة حول مجرى البول وقضيب معدني، وذلك أن هذا الأخير لا يزال تنزلق بسهولة بعد ذلك.
    2. تأمين عقدة مع 3 المزيد من رميات باستخدام التوتر لطيف قبل إزالة قضيب. قطع خياطة تنتهي حوالي 3 مم لونغ، أو 4 مم إذا إصدار أحدث من انسداد هو جزء من التجربة.
  4. إغلاق الجرح
    1. تقريب الغدد المجاورة للإحليل باستخدام غرزة واحدة دفن من امتصاص مضفر خياطة 4-0.
    2. إغلاق الجلد مع غرزة فراش الأفقي دفن باستخدام نفس سوت امتصاصلدى عودتهم. ملاحظة: على الرغم من أنه قد يبدو غير تقليدية لاستخدام الخيط للامتصاص لغرزة اختراق الجلد، ونحن لم تواجه مضاعفات مثل الالتهابات الجروح، ويمكن تجنب ذلك إزالة خياطة.
  5. بعد الرعاية
    1. حقن البوبرينورفين 0.1 ملغ / كغ تحت الجلد قبل وضع الفئران في قفص الانتعاش.
    2. تقدم بعض اتباع نظام غذائي استرداد النظام لمدة 24 ساعة الأولى للفأر يقع واحد. بعد هذه الفترة، حيوانات المنزل مرة أخرى في نفس أزواج كما كان من قبل الإجراء شريطة أن تبلي بلاء حسنا وتنتمي إلى مجموعة العلاج نفسها.
    3. تحقق من الفئران يوميا لحجم المثانة والرفاه العام. تسجيل وزنهم على الأقل أسبوعيا.

2. نيمو في الفئران الإناث

  1. تجهيز
    1. وضع الإناث C57BL / 6 الماوس يزن حوالي 18 جرام والمضي قدما كما هو مفصل في الخطوة 1.1.1.
    2. المضي قدما كما هو مفصل في خطوة 1.1.2، باستثناء استخدام آنج 24 عيارiocatheter.
  2. تشريح
    1. استخدام مشرط لإجراء 6 مم الطولي شق الجلد من الارتفاق العانة واضح نحو الصماخ الإحليل.
    2. تشريح بصراحة لتحديد مجرى البول stented عن طريق نشر طولية مع مقص غرامة. رفع من حزمة من الأعصاب الأوعية الدموية تشغيل البطني على مجرى البول عن طريق تشريح حادة مماثلة.
    3. أداء بعض لطيف طولية نشر باستخدام مقص منحني ظهري إلى مجرى البول لتطوير الطائرة بين مجرى البول والمهبل. ثم، لتمرير بصراحة خياطة 5-0 غير قابل للامتصاص مضفر وراء مجرى البول وإعداد رمي مزدوج من عقدة الجراح.
  3. جزئية انسداد مجرى البول
    1. ربط angiocatheter مع حقنة 1 مل وحقن 0.1 مل من محلول ملحي في المثانة.
    2. وضع قنية بالتوازي عيار 26 إلى مجرى البول. تشديد بلطف عقدة حول مجرى البول وقنية في حين يتراجع في angiocaعشر.
    3. تأمين عقدة مع 3 المزيد من رميات باستخدام التوتر لطيف قبل إزالة قنية.
    4. اختبار البول التي تظهر في الصماخ على ضغط لطيف على المثانة الحيوان. تخفيف التعادل إذا كان غير قادر على التعبير عن البول. خلاف ذلك، وقطع الخيط تنتهي حوالي 3 مم.
  4. إغلاق الجرح
    1. إغلاق الجلد مع غرزة فراش الأفقي دفن باستخدام 5-0 مضفر خياطة للامتصاص.
  5. بعد الرعاية
    1. ضخ 0.1 ملغم / كغم البوبرينورفين تحت الجلد قبل وضع الماوس في قفص الانتعاش.
    2. تقدم بعض اتباع نظام غذائي استرداد النظام ل48 ساعة الأولى للماوس يقع واحد. بعد هذه الفترة، حيوانات المنزل مرة أخرى في نفس المجموعات كما كان من قبل الإجراء شريطة أن تبلي بلاء حسنا وتنتمي إلى مجموعة العلاج نفسها.
      ملاحظة: الفئران مع اضح منتفخة المثانة 24 ساعة بعد العملية التي لا باطل عند التعامل معها والإفراط في عرقلة وسوف يموت في غضون نتحويلة 1-2 أيام ما لم تؤخذ مرة أخرى تحت التخدير لإزالة ربطة المعطل.
    3. تحقق من الفئران يوميا لحجم المثانة والرفاه العام. تسجيل وزنهم على الأقل أسبوعيا.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

التي تقتصد في العصب منتصف الإحليلية إعاقة (نيمو) في إناث الفئران

معدل الوفيات

أجرينا عرقلة منتصف مجرى البول على أكثر من 40 إناث الفئران حتى الآن وليس لديه وفيات.

كتلة المثانة

متوسط ​​النسبية المثانة كتلة (المثانة إلى هيئة جماعية بين نسبة) في الشام تشغيلها الحيوانات كان 0.33٪ بعد أسبوعين من إجراء، في حين أن الفئران تعرقل الطريق الى متوسط ​​كتلة المثانة النسبية 0.60٪ وهو ما يترجم إلى زيادة 85٪ (ع = 0.004 ، الشكل 1).

البول المتبقية

كانت الشام الفئران تعمل عمليا أي البول المتبقي نتمكن من نضحعن طريق البزل المثانة مباشرة في وقت الحصاد الجهاز، كان في منتصف مجرى البول الحيوانات انسداد في المقابل على أكبر بكثير متوسط كمية البول المتبقية من 0.42 مل (ع = 0.01، الشكل 2).

التي تقتصد في العصب منتصف الإحليلية إعاقة (نيمو) في الفئران الإناث

معدل الوفيات

وعموما، خضع 18 إناث الفئران إجراء نيمو الشام، وتوفي واحد منهم. من أجل معايرة الدرجة اللازمة من إعاقة، قمنا بتقييم 3 بأقطار مختلفة من قنية (عيار 25، عيار 26، و 27 عيار) وضعت على طول مجرى البول عند ربط الخيط. توفي أيا من 5 الفئران عندما كنا قنية عيار 25 كعنصر نائب طول الإحليل (الشكل 3). من ناحية أخرى، والوفيات بشكل ملحوظ مع النائبة أصغر حجم. توفي 1/8 أو 5/8 الفئران عند استخدام عيار 26 أو 27قنية -gauge، على التوالي (ع = 0.039، اختبار فيشر الدقيق).

كتلة المثانة

نيمو في إناث الفئران باستخدام قنية عيار 25 لا تزيد المثانة إلى نسبة كتلة الجسم بشكل فعال (الشكل 4). أدى استخدام قنية عيار 26 في أكثر من 2 أضعاف الزيادة في كتلة المثانة النسبية (ع = 0.04). عندما طبقنا نائبا 27 عيار حدثت زيادة أكثر من 60٪ في كتلة المثانة النسبية بعد 2 أسابيع (ع = 0.004).

البول المتبقية

على غرار الجرذان والفئران الإناث تميل إلى باطل في التخدير. عندما حصاد قربة، ونحن المغطي لعنق المثانة مع ملقط وزنه المثانة بالبول وبعد استنزاف البول، وهذا يسمح لحساب دقيق المتبقية البول حاضرا في حصاد المثانة. PBOO وضع عيار 25 أو عيار 26 قنية على طول مجرى البول لم تسفر عن تغيير في البول المتبقي في حدود 2 أسابيع (الشكل 5). والجدير بالذكر أن يفرغ سوى عدد قليل جدا من الحيوانات أثناء التخدير، والذي هو على النقيض من الفئران أن جميع الفراغ عندما يسببها. في 3 الفئران على قيد الحياة نيمو باستخدام قنية 27 عيار، يعني تم زيادة حجم البول المتبقي بنسبة 3 أضعاف مقارنة مع شمس منهما. ومع ذلك، فإن الفرق لم يحقق الدلالة الإحصائية، وعلى الأرجح بسبب ن منخفضة.

شكل 1
الشكل 1. نيمو الحث على نحو فعال الزيادة في المثانة قداس بعد 2 أسابيع. أدى نيمو إلى زيادة 85٪ في المثانة إلى هيئة جماعية بين نسبة في حدود 2 أسابيع (ع = 0.004؛ §).

/55288/55288fig2.jpg "/>
الشكل 2. زيادة ملحوظة في البول المتبقي بعد 2 أسابيع نيمو. بينما كان صورية تعمل الفئران عمليا أي البول المتبقية والتي قد تكون إبرة يستنشق في وقت الحصاد المثانة، وكان في منتصف مجرى البول الحيوانات عرقلة تقريبا 0.4 مل من البول المتبقي في متوسط (ع = 0.013؛ §).

الشكل (3)
الشكل 3. زيادة معدل الوفيات مع درجة من إعاقة جزئية. توفي واحد من أصل 18 الفئران بعد عملية صورية نيمو. عند استخدام قنية عيار 25 كعنصر نائب طول مجرى البول، كل 5 تشغيلها نجا الفئران، في حين توفي 1/8 أو 5/8 الفئران عند استخدام عيار 26 أو عيار 27 قنية، على التوالي (ع = 0.039، وفيشر بالضبط اختبار).

الشكل (4)
<قوي> الشكل 4. عيار 26 و 27 عنصر نائب عيار خلال النتيجة نيمو في زيادة الفعالة في النسبي المثانة قداس بعد 2 أسابيع. لم نيمو في إناث الفئران باستخدام قنية عيار 25 لا يؤدي إلى زيادة كبيرة في كتلة المثانة النسبية (§)؛ عندما تم استخدام قنية عيار 26 فقط، أي بزيادة أكثر من 2 أضعاف في كتلة المثانة النسبية وقعت (ع = 0.04؛ †)؛ أسفرت عوائق مع نائب 27 عيار في زيادة أكثر من 60٪ في كتلة المثانة النسبية (ع = 0.004؛ ‡).

الرقم 5
الشكل 5. مسكها المثانة تفريغ 2 أسابيع بعد نيمو. باستخدام عيار 25 أو عيار 26 قنية على طول مجرى البول أثناء إجراء نيمو لم تسفر عن تغيير في البول المتبقي بعد 2 أسابيع (§). الزيادة 3 أضعاف في اور المتبقية متوسطحجم المعهد الوطني للإحصاء في المجموعة 27 عيار مقارنة مع شمس لم تصل دلالة إحصائية (عرقلة ن = 3؛ †).

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

نفوق الحيوانات هي واحدة من الاهتمامات الرئيسية للنموذج التقليدي للpBOO في مجرى البول القريبة، بنسبة 15٪ أو أكثر في العديد من التقارير 10 و 11 و 13. يبدو نيمو أن يكون الحد الأدنى من الوفيات عند تطبيقها في إناث الفئران. القريبة انسداد مجرى البول لدى الفئران هي تقنيا أكثر صعوبة مما كان عليه في الفئران، وبالتالي حتى أكثر عرضة للمضاعفات. باستخدام قنية عيار 26 كعنصر نائب لنهجنا منتصف مجرى البول، كان لدينا نفوق الحيوانات الحد الأدنى فقط. في دراسة مستمرة حيث طبقنا نيمو في إناث الفئران باستخدام قنية عيار 26 وفقط 2 من 18 الفئران الإفراط في عرقلة (لا تظهر البيانات). باستخدام عنصر نائب أصغر مثل قنية 27 عيار أكثر من نصف الفئران عرقلة توفي بسبب الإفراط في إعاقة مع احتباس البول أو تمزق المثانة. ولذلك، فإننا نعتبر عنصر نائب عيار 26 لتكون عيار معقول لإناث الفئران حوالي 18 غراما.

الحمار = "jove_content"> زيادة في كتلة المثانة هي واحدة من السمات المميزة لpBOO في الأمراض التي تصيب البشر. حددنا نيمو للحث على نحو فعال زيادة كبيرة في كتلة المثانة بعد أسابيع فقط 2 في الفئران وكذلك في الفئران. متوسط الزيادة في كتلة المثانة بعد pBOO في مجرى البول القريبة هي أكثر من 2.5 أضعاف بعد 2 أسابيع، وبالتالي أعلى بكثير من ما شاهدناه بعد نيمو 12. هذه الزيادة المفرطة في كتلة الجهاز ولكن لا يعكس أغلبية uropathies معرقلة تحت المثانة الذي يهدف الباحثون إلى نموذج عند تطبيق pBOO. في هذا الصدد، نيمو يقدم نموذجا pBOO أقل الغازية وجيد التحمل مع إعادة الاستجابة الأكثر اعتدالا التي هي أقرب إلى علم الأمراض البشرية من pBOO القريبة التقليدية. وعلى الأرجح تتصل الزيادة أكثر وضوحا في كتلة المثانة في pBOO الأقرب لإصابة في إزالة التعصيب الناتجة عن تشريح حول عنق المثانة. إزالة التعصيب ثم قد يعرض للخطر النافصة-العضلة العاصرة الحديث المتبادل لالثاني تتسبب في انسداد مخرج وظيفية حتى في الشام الحيوانات تعمل 12.

كما تم زيادة البول المتبقية بشكل كبير في إناث الفئران التي تمر نيمو بعد أسابيع فقط 2. في الفئران من ناحية أخرى، فقط باستخدام قنية 27 عيار كما تميل عنصر نائب لزيادة كمية البول المتبقية في الفئران. ومع ذلك، في حين أن الفئران تقريبا كل الفراغ عند وضعها تحت التخدير الغازي، ونحن لا نلاحظ هذا في الفئران حيث لا يوجد سوى عدد قليل جدا باطلة عندما يسببها. هذا السلوك غير يفرغ من الفئران ربما يخفي كمية صحيح البول المتبقي ويتطلب تحفيز أخرى للحث على التبول في الدراسات المستقبلية.

في حين يبدو أن درجة الانسداد باستخدام قضيب 0.9 ملم على طول مجرى البول في إناث الفئران ليكون مناسبا، والجمع بين نفوق الحيوانات الحد الأدنى مع زيادة واضحة في كتلة المثانة والبول المتبقية، ومعايرة درجة إعاقة لنيمو في إناث الفئران أكثرالتحدي. من جهة، وذلك باستخدام قنية عيار 25 لم يؤد إلى زيادة كشف في كتلة المثانة، وذلك باستخدام قنية 27 عيار من ناحية أخرى أدى إلى الإفراط في إعاقة في أكثر من نصف الفئران تمر pBOO. فقط كان للقنية عيار 26 ردا معقولا من حيث نمو الجهاز جنبا إلى جنب مع نفوق الحيوانات منخفضة.

منذ pBOO هو واضح أكثر انتشارا في الرجال عنه في النساء، وذلك باستخدام ذكور الحيوانات سيكون من الأفضل عندما النمذجة pBOO الإنسان. لدينا العصبية تجنيب منتصف الإحليلية تقنية إعاقة (نيمو) من الواضح أنها لا تعالج هذا القصور قبول الوضع هرمون الحيوانات التي تؤثر على الاستجابة الالتهابية الذي يبدأ إعادة تشكيل الأنسجة. تباين منخفضة وانخفاض معدل وفيات الحيوان من نيمو في الفئران، ومع ذلك، ستجعل التحقيق في المثانة إعادة عرض قابلة للمجموعة كاملة من وسائل المعدلة وراثيا والتي تقتصر جدا في القوارض أكبر.

وباختصار، نيمو للإناث الفئران والجرذان الإناث هومن السهل القيام به، لديه نفوق الحيوانات منخفضة، والابتعاد عن إصابة إزالة التعصيب إلى المثانة الناتج عن تشريح حول عنق المثانة.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Female rat  Charles-River Canada Sprague Dawley Rat (Crl:SD); Strain Code: 400 about 200 g
Isoflorane vaporizer Benson medical industries inc. TEC III Isoflurane; product code: 53-T3ISO 
Isoflorane Fresenius Kabi Animal Health Isoflorane; product code CP0406V2  250 mL bottle
Disposable scalpel Ted Pella, Inc. #15 Sterile, Stainless Steel Scalpels; catalogue number 549-9-15S
Microscopy forceps Ted Pella, Inc. Aesculap Microscopy Forceps, Finepoint, 115mm; product number 5443
Adson forceps Ted Pella, Inc. Aesculap Adson Dissection Forceps, Curved, 120mm; product number 5002-9
Curved surgical scissors Ted Pella, Inc. Surgical Scissors, Curved, S/S, 105mm; catalogue number 1376
0.9 mm inox metal rod goodfellow.com Stainless Steel - AISI 316L Wire Diameter:0.9mm; order code 911-684-65
Skin hooks - self made from inox steel goodfellow.com Stainless Steel - AISI 316L Wire Diameter:0.9mm; order code 911-684-65
4-0 Silk suture esutures.com 4-0 Sofsilk black 98" strand; product number LS640
5-0 Vicry suture esutures.com 5-0 Vicryl undyed 27" RB-1 taper; product number J213H
Needle holder Medsupplier.com Integra Miltex Carb-N-Sert Baumgartner Needle Holder - 5 1/2"; product code SKU NEE4484-8-40TC
SKU NEE4484-8-40TC
SKU NEE4484-8-40TC 
Temgesic (Buprenorphine) first veterinary supply Buprenex 0.3MG/ml inj amps; item #075701
1 mL syringe with 27 G needle Fisher Scientific BD Tuberculin Syringe, BD 309623
20 G Angiocath Fisher Scientific Andwin Scientific ANGIOCATH 20 GA; Catalog No. NC9561906
Recovery diet clearh2o DietGel 31M; 72-08-5022
C57Bl/6 female mice Charles-River Canada C57BL/6 Mouse (C57BL/6NCrI); Strain Code: 027 about 18 g
24 G angiocath Fisher Scientific Hanna Pharmaceutical Supply Co., Inc. IV CATH ANGIOCATH 24GX3/4IN; Catalog No. NC9814340
5-0 Ethibond esutures.com 5-0 Ethibond green 30" RB-1 taper; product number X550H
26 G syringe needle Sigma-Aldrich BD Precisionglide syringe needle, Gauge 26; z192392
Normal Saline Baxter 0.9% Sodium Chloride Injection, USP, 100 mL MINI-BAG; product code 2B0043

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Andersson, K. E. Storage and voiding symptoms: pathophysiologic aspects. Urology. 62 (5), 3-10 (2003).
  2. Boyle, P., et al. The prevalence of lower urinary tract symptoms in men and women in four centres. The UrEpik study. BJU Int. 92 (4), 409-414 (2003).
  3. Coyne, K. S., Wein, A., Nicholson, S., Kvasz, M., Chen, C. I., Milsom, I. Economic burden of urgency urinary incontinence in the United States: a systematic review. J Manag Care Pharm. 20 (2), 130-140 (2014).
  4. Buttyan, R., Chen, M. W., Levin, R. M. Animal models of bladder outlet obstruction and molecular insights into the basis for the development of bladder dysfunction. Eur. Urol. 32 (Suppl 1), 32-39 (1997).
  5. Mattiasson, A., Uvelius, B. Changes in contractile properties in hypertrophic rat urinary bladder. J Urol. 128 (6), 1340-1342 (1982).
  6. Chang, S., et al. Alteration of the PKC-mediated signaling pathway for smooth muscle contraction in obstruction-induced hypertrophy of the urinary bladder. Lab Invest. 89 (7), 823-832 (2009).
  7. Moore, J. A., Brading, A. F. A porcine model of bladder outlet obstruction incorporating radio-telemetered cystometry. BJU Int. 100 (5), 1192-1193 (2007).
  8. Beamon, C. R., Mazar, C., Salkini, M. W., Phull, H. S., Comiter, C. V. The effect of sildenafil citrate on bladder outlet obstruction: a mouse model. BJU Inte. 104 (2), 252-256 (2009).
  9. Pandita, R. K., Fujiwara, M., Alm, P., Andersson, K. E. Cystometric evaluation of bladder function in non-anesthetized mice with and without bladder outlet obstruction. J Urol. 164 (4), 1385-1389 (2000).
  10. Kang, Y. J., et al. Early Sequential Changes in Bladder Function after Partial Bladder Outlet Obstruction in Awake Sprague-Dawley Rats: Focus on the Decompensated Bladder. Korean J Urol. 52 (12), 835-837 (2011).
  11. Schroeder, A., et al. Protective effect of an oral endothelin converting enzyme inhibitor on rat detrusor function after outlet obstruction. J Urol. 172 (3), 1171-1174 (2004).
  12. Sidler, M., Aitken, K., Jiang, J., Bijos, D., Bägli, D. "sometimes a sham is just a sham" - why the rodent model of partial bladder outlet obstruction needs adjustment. J Urol. 195 (4), e379 (2016).
  13. Jin, L. H., et al. Persistent detrusor overactivity in rats after relief of partial urethral obstruction. Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 301 (4), R896-R904 (2011).

Tags

الطب، العدد 122، جزئية المثانة منفذ إعاقة، في منتصف مجرى البول عرقلة والمثانة تضخم والمثانة إعادة عرض، والمثانة العصبية، نموذج حيواني
التي تقتصد في العصب منتصف الإحليلية إعاقة (نيمو) في أنثى القوارض الصغيرة
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Sidler, M., Aitken, K. J., Jiang, J. More

Sidler, M., Aitken, K. J., Jiang, J. X., Bägli, D. J. Nerve-sparing Mid-urethral Obstruction (NeMO) in Female Small Rodents. J. Vis. Exp. (122), e55288, doi:10.3791/55288 (2017).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter