Summary
אנחנו סטנדרטיזציה ביופסיית רקמת שומן בבטן באמצעות שיטה שאינה diathermy לבצע בהרדמה מקומית. שלושה מקרים של פעולה-מאוחרת מופרזת דימום פעולות 115 (2.61%) אירעה. אנו מסיקים כי רקמת שומן בטן כירורגית ביופסיה באמצעות שיטה diathermy שאינו ניתן בבטחה להחיל על גברים בריאים.
Abstract
רקמת שומן ביופסיות מציעים דגימות רקמה זה, לאחר ניתוח, עשוי לספק תובנה סקירות של מנגנונים הקשורים חילוף החומרים ומחלות. כדי לקבל את רקמת השומן התת עורית ביופסיות באזור הבטן, חוקרים ורופאים להשתמש או ניתוח או טכניקה המבוססת על מחט. עם זאת, ניתוח ביופסיות שומן תת עורי יכול להציע דגימות רקמה היכולים לספק סקירה מקיפה יותר של המורכבויות של מדדי ביולוגי שומן לבן. בדרך כלל, ביופסיה כירורגית רקמת שומן כולל טיפול diathermy cauterizing כלי הדם למנוע דימום יתר. למרות זאת, תופעות לוואי, כגון פלאש שריפות ופגעי עור ברקמה, דווחו לאחר diathermy. לכן, אנחנו נועדו לתקנן ביופסיה כירורגית רקמת שומן בטן לבצע בהרדמה מקומית באמצעות שיטה בלתי-diathermy. ערכנו ביופסיות רקמת השומן התת עורית 115 גברים בריאים באמצעות שיטה ביופסיה כירורגית בטן ללא-diathermy. התוצאות שלנו הראו שלושה מקרים של פעולה-מאוחרת מופרזת דימום פעולות 115 (2.61%). לסיכום, שלנו מתוקננת רקמת השומן התת עורית בטן כירורגית ביופסיה באמצעות שיטה בלתי-diathermy ניתן להחיל בבטחה לאנשים בריאים ליד מיטת החולה, עם תופעות לוואי מינימליות.
Introduction
רקמת שומן ביופסיות מציעים דגימות רקמה זה, לאחר ניתוח, עשוי לספק סקירה נבונה של מנגנונים הקשורים חילוף החומרים ומחלות. למשל, הם משמשים עבור זיהוי גידול סרטן השד1, חומצות השומן קומפוזיציה בדיקה2ומחקר על מחלה מטבולית, הורמונלי חשוב מסלולים3. כדי לקבל את רקמת השומן התת עורית ביופסיות באזור הבטן, חוקרים ורופאים להשתמש או ניתוח או טכניקה המבוססת על מחט. עם זאת, ניתוח ביופסיות שומן תת עורי יכול להציע דגימות רקמה היכולים לספק סקירה מקיפה יותר של מנגנונים ביולוגיים מורכבים [למשל, messenger חומצה ריבונוקלאית (mRNA) ביטוי, ניתוח היסטולוגית, וכו ']4 . הם שימשו בעבר והבריאים4 , יכול להתבצע בבטחה על המיטה5.
הטכניקה מבוססת על מחט הביופסיה דורש שאיבת שומן אינטנסיבי עלול להרוס את התקינות של הרקמה, וזה שהיא מאחזרת בדרך כלל כמות קטנה של רקמות (100-500 מ ג)6. דגימות רקמה אלה לא ניתן המתאים למטרות מחקר מורכבות. יתר על כן, בהשוואה לטכניקה המבוססת על מחט, ניתוח ביופסיות שומן תת עורית יכול להציע דגימות רקמה עלול לצייר תמונה שלמה יותר של מספר מדדי דלקתיות (למשל, B - ו T-cell איתות); שלד התא תקנה; מסלולים סלולר; משעולים חילוף החומרים של שומנים, פחמימות, חומצות אמינו; זרחון חמצוני מסלולים4. בנוסף, טכניקה המבוססת על מחט כולל סיכון גבוה יותר עבור תאי הדם זיהום מאשר ניתוח אחד4, תוך מתן מידע אודות האזורים שהותירה של רקמות4,7,8 .
בדרך כלל, ביופסיה כירורגית רקמת שומן כולל טיפול diathermy cauterizing כלי הדם כדי למנוע דימום מופרז9. Diathermy משמש גם כדי לשרוף ולהרוס רקמות מושפע neoplasms, יבלות או רקמות שהודבקו על ידי המחלה9. טכניקה זו ישימה במיוחד ב- ניתוח של נוירוכירורגיה ועין -9.
שימוש מופרז של diathermy עלול להוביל להיווצרות של רקמת נמק, גרימת זיהומים, לעכב את תהליך הריפוי10. אכן, תופעות לוואי כגון פלאש שריפות ופגעי עור ברקמה שדווחו בעקבות diathermy9. בנוסף, הועלו חששות לגבי הרעילות של עשן כירורגי שפורסמו על ידי diathermy לתוך הסביבה ניתוח, אשר עשוי להיות בשאיפה על ידי המטופל/המשתתף צוות הפעלה9. אכן, השימוש diathermy עלול לגרום בהרעלת האוויר בחדר הניתוח שווה לזה המיוצר על ידי עישון סיגריות שש11 ו, למרות חדרי הניתוח יש בדרך כלל מערכות אוורור טוב, לזיהום יכולים להימשך לפחות 20 דקות12 . עם זאת, בחולים התחייבות ניתוח ניתוח שקדים, שיטת diathermy הראו פחות, אבל כאב שאינו משמעותי, לאחר הניתוח13 ו דימום14 מאשר השיטה hemostasis מצדו קלאסי. בסך הכל, ראיות בדבר הבדלים הכאב לאחר הניתוח ודימום המחירים לאחר רקמת שומן ביופסיות אצל אנשים בריאים בקושי קיימת. לאור המחסור בעדויות, תופעות הלוואי של diathermy, סטנדרטיזציה של שיטה הלא-diathermy של רקמת שומן ביופסיה היא מוצדקת. בהתאם לכך, מטרת מחקר זה הייתה לתקנן טכניקה כירורגית לביופסיה רקמת השומן התת עורית בטן, לבצע בהרדמה מקומית באמצעות שיטה בלתי-diathermy אצל גברים בריאים. יתר על כן, אנו חלוקה לרמות את ההליכים עבור אוסף רקמה כדי לקבוע ריכוז חלבון וביטוי mRNA וכדי לבצע ניתוח היסטולוגית.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
המחקר תאמו מהסטנדרטים שקבע את הצהרת הלסינקי, אושרה על-ידי Βiοethics אוניברסיטת תסליה, הפקולטה למדעי פעילות גופנית, ועדת-
1. הכנת הניתוח וציוד מעבדתי
- למקם שדה כירורגי מחוטא עמדה 4-גלגל מאיו כירורגי.
- למקם את הבאים מתכלים וציוד כירורגי על עמדה 4-גלגל מאיו כירורגי:
זוג אחד של ישר הפעלה מספריים (15 ס מ)
האזמל אחד (מס ' 11)
ידית אחת האזמל
זוג מספריים מעוקל (14 ס מ)
מלקחיים יתוש אחד
זוג אחד של פינצטה קוקר
פינצטה כירורגית אחת
Povidone יוד (על סטרילי גזה)
תפר אחד (4.0)
זוג מספריים ישר (11 ס מ)
מחזיק מחט אחת (15 ס מ)
חמישה פדים סטריליים
אחד גזה סטרילית דבק
אחד 10-mL מזרק עם מחט מחוטא
10 מ"ל של 2% כדי להרדים (אין אדרנלין)
אחד זוג כפפות כירורגי מחוטא - למקם את החומרים הבאים על ספסל נפרד:
שני צינורות microcentrifuge
שפופרת אחת המכילה 5 מיליליטר 10% פורמלין
אחד גורם קטן המכיל 50-100 מ של חנקן נוזלי ב-190 מעלות צלזיוס.
2. הכנת המשתתפים
- יש משתתפים בצע של 8 שעות מהיר 15 לפני ההליך ביופסיה.
- יש משתתפים להימנע מכל פעילות גופנית, עודף לחצים, אלכוהול, פעיל, עישון פסיבי 72 h לפני ה 16 , ביופסיה 17.
3. ביצוע ביופסיה רקמת שומן תת עורית
- למקם את המשתתף על המיטה כירורגי במצב פרקדן.
- לחטא את האזור. של החתך באמצעות povidone יוד.
- להזריק 10 מ"ל של 2% כדי להרדים (אין אדרנלין) לאט ובזהירות 18 לתוך האזור שנבחר לשמש בהרדמה מקומית-
- למקם שדה כירורגי סטרילי מעל האזור כדי לכסות את הגוף של המשתתף, למעט האזור. של החתך.
- לפחות 3-5 דקות לאחר מכן, הפעילו לחץ עם זוג מספריים לאזור של הרדמה מקומית, שואל המשתתף אם הוא חש כל כאב 19 כדי להבטיח הרדמה מקומית כי הושגה.
- לצרף את האזמל מס 11 הידית אזמל.
- ליצור חתך של 2-2.5 ס מ אורך, 3-5 ס מ משמאל או מימין לטבור.
- להסיר את הרקמה התת עורית עם זוג של 15 ס מ ישר הפעלה מספריים.
- , ברגע רקמת שומן מתגלה, ללכוד אותו עם זוג מספריים, מספריים מעוגלים 14 ס מ.
- לחתוך ולהסיר כ 1 גרם של רקמת שומן.
- בעקבות הסרת רקמות, מקם פדים סטריליים מעל החתך להשיג את hemostasis.
- כאשר hemostasis הוא אישר, ללכוד את התפר 4.0 עם מחט 14 ס מ ואת העור עם זוג מספריים כירורגיים עד הרקמה התת עורית יהיה גלוי.
- את המחט התפירות-לתוך העור, נע לכיוון הרקמה התת עורית בזמן העור ומערכת תת עורית מיושרים מקרוב.
- עם התפר-המחט, בצע טכניקה רציפה זיג-זג לתוך הרקמה התת עורית עד מונע באופן חיצוני את העור. המשך עד נסגר החתך בעור.
- מבחוץ לקשור את התפר.
- לנקות את האזור. של החתך עם תמיסת מלח ומכסים אותו עם גזה סטרילית דבק.
4. בתצהיר של הרקמה
- להפריד את רקמת שומן שנאספו לשלושה חלקים: 150, 350 ו- 500 מ ג.
- למקם את החלקים של 150 ל- 350 מ"ג של דגימת רקמה צינורות microcentrifuge.
- Immerse השני צינורות microcentrifuge אריזה קטנה עם החנקן הנוזלי ב-190 מעלות צלזיוס עד לעדות הסופי במקפיא ב-80 מעלות צלזיוס
הערה: השתמש מראש, מחט סטרילית ניקוב חור קטן בתוך הצינורות microcentrifuge כדי למנוע כשל גביע במהלך טבילת צינורות microcentrifuge החנקן הנוזלי ב-190 מעלות צלזיוס - לטבול פיסת הרקמה מדגם 500 מ ג-כדי לשמש לצורך בדיקה היסטולוגית-צינור המכיל 5 מיליליטר 10% פורמלין.
הערה: השתמש המלקחיים יתושים רק במקרים של דימום יתר בזמן הניתוח. במקרים כאלה, לכידת הספינה עם המלקחיים יתושים מאתרים ומפסיקים ולסגור עד hemostasis מושגת.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
המאפיינים של המשתתפים הינם מסופקים בכל טבלה 1. התפרים באזור החתך נפל בתוך הימים 8-12. סיימנו בסך 115 ביופסיות רקמת השומן התת עורית באמצעות השיטה הלא-diathermy בטן כירורגית ביופסיה בגברים מבוגרים בריאים (גיל: ± 35.2 6.9 שנים; אינדקס מסת הגוף: 27.3 ± 4.4; ואת אחוזי השומן של הגוף: 27.0 ± 9.0%). ביופסיה שלאחר דימום יתר נצפתה ב שלושה מקרים (השכיחות: 2.61%) יומיים לאחר הניתוח. שלושה אנשים אשר חוו דימום יתר היו מבוגרים מאשר מקביליהם אשר חוו תופעות לוואי [t(113)=-2.115, p = 0.037], ו אין הבדלים אחרים (קרי, מסת הגוף ואינדקס אחוזי השומן של הגוף) נצפו (p > 0.05) בין שתי הקבוצות. לבסוף, שלושה חודשים לאחר כל פעולה, אף אחד המשתתפים שלנו דיווחו על תופעות לוואי (כולל פצעי עור).
טבלה 1: מאפייני המשתתפים.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
מטרת מחקר זה הייתה לתקנן טכניקה כירורגית לביופסיה רקמת השומן התת עורית בטן, לבצע בהרדמה מקומית עם שיטה שאינה diathermy בגברים בריאים. Diathermy משמש בדרך כלל בחדר הניתוח; עם זאת, תופעות לוואי אפשריות (קרי, פלאש אש ורעילות סביבתי)9 ועיכובים בריפוי10 עלולה להתרחש. תופעות בלתי רצויות אלה של diathermy ניתן להפיק הסיכונים הבריאותיים של הצוות התפעולי והן לחולים/המשתתפים. לכן, שיטה בלתי-diathermy כירורגית ביופסיה רקמת השומן התת עורית היא מוצדקת.
. הבחנו מופרזת דימום בשלושה של המשתתפים שלנו יומיים לאחר הניתוח. אלה שלושה אנשים דיווחו על כאבים באזור של החתך. כדי לטפל במקרים אלה, נפתח מחדש את האזור. של החתך עור עודף דם הוסר, השטח נוקה במים מליחים סגור באותה שיטה שתוארו לעיל. דווח על שום סיבוכים לאחר מכן, ריפוי תקין נצפתה בימים הבאים. התוצאות שלנו הראו תופעות לוואי מינימליות לאחר השיטה הלא-diathermy: שלושה מקרים של פעולה-מאוחרת מופרזת דימום פעולות 115 (2.61%). ראיות קודמות של רקמת שומן המבוססת על מחט הביופסיה הראתה קטין דימום אחד מתוך 10 משתתפים 12 שעות לאחר הניתוח15, בעוד אין דימום משמעותי התרחש אצל אנשים שמנים בריאים אחרי ביופסיה רקמת שומן וגזירה בצד מחט טכניקה6. בהתבסס על התוצאות שלנו, אנו צופים כי שיטה ביופסיה רקמת שומן כירורגי diathermy שאינו עשוי לסלק את הסיכון נגע עורי, שריפות פלאש של רעילות שפורסם את סביבת ההפעלה, אשר נגרמות על ידי diathermy במהלך ניתוח רקמת שומן ביופסיה.
בדו"חות קודמים הראו כי הזדקנות קשורה באופן חיובי חריגות hemostasis20. מעניין, שלושה אנשים אשר חוו דימום יתר במחקר הנוכחי היו מבוגרים באופן משמעותי (על-ידי שמונה שנים, בממוצע) מאשר אלו אשר לא חווה תופעות לוואי. לכן, זה עשוי לציין כי אנשים בוגרים יש סיכון גבוה יותר של תופעות לוואי כאשר השיטה ביופסיה רקמת שומן כירורגי diathermy שאינו מוחל. עם זאת, אנו מאמינים כי השכיחות של תופעות לוואי כאלה הוא נמוך מדי (קרי: 2.61%) לגרום שום חששות משמעותיים. יצוין, כי המשתתפים שלנו מלא מראש שאלון היסטוריה רפואית כדי לקבוע את מצב הבריאות שלהם. ללא תנאים מחלה כרונית קודמות דווחו על ידי המשתתפים, כולל שלושה משתתפים אשר הראו דימום שלאחר מבצע יתר. באופן דומה, אין טיפול תרופתי כרוני הקודמים דווח על ידי המשתתפים אשר הראו והן אלו אשר לא הראה שום דימום יתר. לכן, הניתוח שלאחר דימום יתר שנצפו במחקר הנוכחי לא ניתן לייחס התנאים מחלה כרונית ו/או טיפול תרופתי כרוני הקודם. באור הזה, השכיחות של תופעות אלו עשוי להיות שונה אם הטכניקה מוחל על אוכלוסיות קליניות.
שלב קריטי במהלך הביופסיה רקמת שומן כירורגי המוצע נועד להבטיח הרדמה מקומית לפני החיתוך, המונע כל כאב ואי נוחות אצל המשתתף. יתר על כן, הקרנת טרום היסטוריה אלרגי להרדמה חייב להיעשות כדי למנוע סיבוכים אלרגיים במהלך ההזרקה הרדמה. גם, זה חיוני כדי להבטיח hemostasis לפני נסגר החתך כדי למנוע דימום שלאחר הניתוח, בזמן, חשוב לשמור על קשר עם המשתתפים במשך מספר ימים לאחר ההליך מבוצע עד ריפוי מלא מושגת לגלות חריגות אפשריות ולמנוע זיהום ו/או במקרים של דימום שלאחר הניתוח.
מגבלות של הטכניקה ביופסיה המוצע כוללים אי-הנוחות אזור החתך עשוי לגרום למשתתפים, במיוחד בכל הקשור יכולתם לשבת בנינוחות לעשות אמבטיה/מקלחת, עד ריפוי מלא מושגת. המשתתפים צריכים הורה להימנע לשטוף את האזור. של החתך כדי למנוע זיהום, כמו גם להחליף את גזה סטרילית דבק על פני שטח החתך כל יום עד ריפוי מלא מושגת. הליך היומי עלול לגרום אי נוחות. לבסוף, חשוב לציין כי המטרה שלנו הייתה להציג, לתקנן טכניקה חדשה. באור הזה, אנחנו לא השתמש של שליטה הקבוצה שיחתמו המבוססת על מחט תת עורית השמן ביופסיות כדי לכמת את ההבדלים בין טכניקה זו השיטה הלא-diathermy הציג לאחרונה.
כפי שהוצע בעבר4,7,8, השיטה המוצעת ביופסיה כירורגית עשוי להציע דגימות רקמה עם יושרה גבוהה יותר מאשר טכניקה המבוססת על מחט. ואכן, בעזרת טכניקה זו, היינו מסוגלים לבצע mRNA ולהשתמש ניתוחים חלבון על הרקמה שהושג ו, בנוסף, את הטופס קוביות פרפין עבור ניתוחים היסטולוגית. כמו כן, אנו מציעים הימנעות diathermy של רקמת השומן התת עורית ניתוח ביופסיות, בהתחשב בכך hemostasis וריפוי רגיל ניתן להשיג באמצעות הטכניקה שלנו.
לסיכום, שלנו מתוקננת רקמת השומן התת עורית בטן כירורגית ביופסיה באמצעות שיטה בלתי-diathermy ניתן לבצע בבטחה בגברים בריאים ליד מיטת החולה, עם תופעות לוואי מינימליות.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
המחברים מצהירים כי יש להם אינטרסים כלכליים אין מתחרים.
Acknowledgments
עבודה זו קיבל מימון אופק 2020 (גרנט הסכם מס 645710) ומסגרת ה-7 של האיחוד האירופי תוכניות (גרנט הסכמי מס ' 612547 ו- 319010). המחברים רוצים להודות ד ר Fotini Sourli-Chasioti על הסיוע עם ההליך ביופסיה. המחברים גם תודה מר Yiorgos Paterakis לעזרתו חשוב בהכנת הסרטון.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Disinfected surgical field | Hartmann | 23516-00 | |
| Stainless Steel Instrument Stands (surgical Mayo) | Medical Device Depot Inc. | 32000 | |
| Operating Scissors straight 15 cm | Karl Storz | 791903 | |
| Scalpel No 11 | Swann-Morton | 203 | Bipolar, catalog number 429011 |
| Scarpel handle No 3 | Karl Storz | 488090 | |
| Scissors curved 14 cm | Karl Storz | 511514, 752918 | |
| Mosquito forceps | Karl Storz | 535012 | |
| Tweezers Kocher | Karl Storz | 530416 | Bipolar, catalog number 830316 |
| Surgical tweezers | Karl Storz | 793216 | Bipolar, catalog number 831016 |
| Povidone-iodine | Various | Not applicable | |
| Suture 4.0 Vicryl | Johnsons | V4970H | |
| Scissors straight 11 cm | Karl Storz | 512511 DS | |
| Needle holder 15 cm | Karl Storz | 515515 | Bipolar, catalog number 213015 |
| Sterile gauzes | Hartmann | 3021 | |
| Αdhesive sterile gauze | Digas medical equipment | 2889 | |
| 10 mL syringe with disinfected needle | Alpha medical solutions | 10310-55-0010 | |
| 2%-xylocaine (no adrenaline) | Various | Not applicable | |
| Sterile surgical gloves | Sempermed | 10001 | |
| Eppendorf tubes | Kartell | 16283 | |
| 10% formalin | Alpha medical solutions | 11016-30-2909 | |
| Tubes 120 mL | Digas medical equipment | 9025 | |
| Liquid nitrogen at -190°C | Revival | Not applicable |
References
- Bruening, W., et al. Systematic review: comparative effectiveness of core-needle and open surgical biopsy to diagnose breast lesions. Ann Intern Med. 152, 238-246 (2010).
- Beynen, A. C., Katan, M. B. Rapid sampling and long-term storage of subcutaneous adipose-tissue biopsies for determination of fatty acid composition. Am J Clin Nutr. 42, 317-322 (1985).
- Wang, Y., et al. Muscle and adipose tissue biopsy in older adults with type 2 diabetes . J Diabetes Mellitus. 1, 27-35 (2011).
- Mutch, D. M., et al. Needle and surgical biopsy techniques differentially affect adipose tissue gene expression profiles. Am J Clin Nutr. 89, 51-57 (2009).
- Ikeda, S., Sekijima, Y., Tojo, K., Koyama, J. Diagnostic value of abdominal wall fat pad biopsy in senile systemic amyloidosis. Amyloid. 18, 211-215 (2011).
- Alderete, T. L., et al. A novel biopsy method to increase yield of subcutaneous abdominal adipose tissue. Int J Obes. 39, 183-186 (2015).
- Padoin, A. V., et al. A comparison of wedge and needle hepatic biopsy in open bariatric surgery. Obes Surg. 16, 178-182 (2006).
- Kral, J. G., et al. Effects of surgical treatment of the metabolic syndrome on liver fibrosis and cirrhosis. Surgery. 135, 48-58 (2004).
- Fitzgerald, J. E., Malik, M., Ahmed, I. A single-blind controlled study of electrocautery and ultrasonic scalpel smoke plumes in laparoscopic surgery. Surg Endosc. 26, 337-342 (2012).
- Memon, M. Surgical Diathermy. Br J Hosp Med. 52, (1994).
- Tomita, Y., et al. Mutagenecity of smoke condensates induced by CO-laser irradiation and electrocauterization. Mutat Res. 89, 145-149 (1989).
- Brandon, H., Young, L. Characterisation and removal of electrosurgical smoke. Surg Serv Manag. 3, 14-16 (1997).
- Attner, P., Hemlin, C., Soderman, A. C. Ligasure versus diathermy scissors tonsillectomy: A controlled randomized study. Acta Otolaryngol. 130, 1180-1184 (2010).
- Ecker, T., Carvalho, A. L., Choe, J. H., Walosek, G., Preuss, K. J. Hemostasis in thyroid surgery: harmonic scalpel versus other techniques--a meta-analysis. Otolaryngol Head Neck Surg. 143, 17-25 (2010).
- Campbell, K. L., et al. A pilot study of sampling subcutaneous adipose tissue to examine biomarkers of cancer risk. Cancer Prev Res. 2, 37-42 (2009).
- Jamurtas, A. Z., et al. The effects of a single bout of exercise on resting energy expenditure and respiratory exchange ratio. Eur J Appl Physiol. 92, 393-398 (2004).
- Adriaens, P. E. M., Schoffelen, F. M. P., Westerterp, K. R. Intra-individual variation of basal metabolic rate and the influence of daily habitual physical activity before testing. Brit J Nutri. 90, 419-423 (2003).
- Latham, J. L., Martin, S. N. Infiltrative anesthesia in office practice. Am Fam Phys. 89, 956-962 (2014).
- Jurevic, R., et al. Plasma levels of 2% lidocaine with 1:100,000 epinephrine with young children undergoing dental procedures. Anesth Prog. 45, 87-90 (1998).
- Kale, S. S., Yende, S. Effects of Aging on Inflammation and Hemostasis through the Continuum of Critical Illness. Aging Dis. 2, 501-511 (2011).
