Summary
Nous avons standardisé une biopsie de tissu adipeux à l’aide d’une méthode non-diathermie réalisée sous anesthésie locale. Trois cas de post-opération excessive saignements hors de 115 opérations (2,61 %) s’est produite. Nous concluons qu’une biopsie chirurgicale de tissu adipeux à l’aide d’une méthode non-diathermie peut être appliquée en toute sécurité à des hommes en bonne santé.
Abstract
Des biopsies de tissu adipeux offrent des échantillons de tissus qui, après analyse, peuvent fournir un aperçu perspicace des mécanismes relatifs au métabolisme et à la maladie. Pour obtenir des biopsies de tissu adipeux sous-cutané dans la région abdominale, chercheurs et médecins utilisent soit une chirurgie ou une technique axée sur l’aiguille. Toutefois, biopsies de graisse sous-cutanée chirurgicales peuvent offrir des échantillons de tissus qui peuvent fournir un aperçu plus complet de la complexité des indices biologiques dans le tissu adipeux blanc. Habituellement, une biopsie chirurgicale du tissu adipeux comprend un traitement de diathermie pour cautérisation des vaisseaux sanguins prévenir les saignements excessifs. Néanmoins, les effets secondaires, tels que le flash se déclenche et lésions de la peau dans les tissus, ont été signalés après la diathermie. Donc, nous avons cherché à normaliser une biopsie de tissu adipeux chirurgicale réalisée sous anesthésie locale à l’aide d’une méthode non-diathermie. Nous avons effectué des biopsies de tissu adipeux sous-cutané 115 chez les hommes en bonne santé en utilisant une méthode de biopsie chirurgicale abdominale non-diathermie. Nos résultats ont montré trois cas de post-opération excessive saignements hors de 115 opérations (2,61 %). En conclusion, notre biopsie chirurgicale standardisée du tissu adipeux sous-cutané abdominal à l’aide d’une méthode non-diathermie peut être en toute sécurité appliquée à des hommes en bonne santé au chevet des patients, avec des effets secondaires minimaux.
Introduction
Des biopsies de tissu adipeux offrent des échantillons de tissus qui, après analyse, peuvent donner un aperçu perspicace des mécanismes relatifs au métabolisme et à la maladie. Par exemple, ils sont utilisés pour breast cancer tumeur identification1acide gras composition examen2et recherche sur les maladies métaboliques et hormonales importantes voies3. Pour obtenir des biopsies de tissu adipeux sous-cutané dans la région abdominale, chercheurs et médecins utilisent soit une chirurgie ou une technique axée sur l’aiguille. Toutefois, les biopsies de graisse sous-cutanée chirurgicales peuvent offrir des échantillons de tissus qui peuvent fournir un aperçu plus complet des mécanismes biologiques complexes [p. ex., les expression de l’acide ribonucléique (ARNm) Messager, l’analyse histologique, etc.]4 . Ils avaient déjà été utilisés dans les adultes en bonne santé4 et peuvent être effectuées en toute sécurité au chevet5.
La technique de l’aiguille de biopsie nécessite liposuccion intense qui peut détruire l’intégrité du tissu, et il récupère généralement une petite quantité de tissu (100-500 mg)6. Ces échantillons de tissus peuvent ne pas convenir pour les études de recherche complexes. En outre, par rapport à la technique axée sur l’aiguille, biopsies de graisse sous-cutanée chirurgicales peuvent offrir des échantillons de tissus qui peuvent dessiner un tableau plus complet de plusieurs indices inflammatoires (p. ex. signalisation de cellules B et T) ; Règlement du cytosquelette ; voies cellulaires ; voies métaboliques des lipides, des glucides et des acides aminés ; et la phosphorylation oxydative voies4. La technique axée sur l’aiguille comprend aussi un risque accru de contamination de cellules sanguines que le chirurgicale un4, tout en offrant peu d’informations sur les régions fibreuses du tissu4,7,8 .
Habituellement, une biopsie chirurgicale du tissu adipeux comprend un traitement de diathermie pour cautérisation des vaisseaux sanguins pour prévenir les saignements excessifs9. Une diathermie est également utilisé pour brûler et détruire les tissus touchés par les tumeurs et les verrues ou les tissus qui sont infectés par la maladie,9. Cette technique est particulièrement applicable à la neurochirurgie et des yeux chirurgie9.
L’utilisation excessive de diathermie peut conduire à la formation des tissus nécrosés, provoquant des infections et retarder la guérison de processus10. En effet, les effets secondaires tels que le flash se déclenche et lésions de la peau dans le tissu ont été signalés suite diathermie9. En outre, des préoccupations ont été soulevées concernant la toxicité de la fumée chirurgicale libérée par diathermie dans l’environnement de la chirurgie, qui peut-être être inhalée par le participant/patient et le fonctionnement du personnel9. En effet, diathermie peut entrainer une toxicité de l’air au bloc opératoire égale à celle produite par fumer des cigarettes six11 et, bien que les salles d’opération ont généralement des systèmes de ventilation bonne, la contamination peut durer pendant au moins 20 min12 . Cependant, chez les patients entreprendre une chirurgie de l’amygdalectomie, la méthode de diathermie a montré moins, mais non significative la douleur post-opératoire13 et saignements14 que la méthode d’hémostase ligature classique. Dans l’ensemble, il existe des preuves en ce qui concerne les différences dans la douleur postopératoire et taux des saignements après biopsies de tissus adipeux chez les individus sains à peine. Compte tenu de l’absence de preuves et les effets secondaires de diathermie, normalisation d’une méthode non-diathermie pour la biopsie de tissu adipeux est justifiée. Par conséquent, le but de cette étude était de normaliser une technique chirurgicale pour la biopsie de tissu adipeux sous-cutané, réalisée sous anesthésie locale en utilisant une méthode non-diathermie chez les hommes en bonne santé. En outre, nous exposons les modalités de prélèvement tissulaire afin de déterminer l’expression de l’ARNm et la concentration de protéines et d’effectuer des analyses histologiques.
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Protocol
l’étude soient conformes aux normes définies par la déclaration d’Helsinki et a été approuvée par l’Université de Thessalie, Département des sciences de l’exercice, Βiοethics Comité.
1. préparation du matériel de chirurgie et de consommables
- positionner un champ opératoire désinfecté sur un stand de Mayo chirurgical de 4 roues.
- Placer les consommables suivants et matériel chirurgical sur un stand de Mayo chirurgical 4 roues :
Une paire de ciseaux d’exploitation droites (15 cm)
un scalpel (n11)
poignée un bistouri
une paire de ciseaux courbes (14 cm)
forceps un moustique
une paire de pinces de Kocher
une pince chirurgicale
Povidone-iode (sur une solution stérile gaze)
une suture (4.0)
une paire de ciseaux droites (11 cm)
un porte-aiguille (15 cm)
cinq gazes stériles
une gaze stérile adhésive
une seringue de 10 mL avec une aiguille désinfectée
10 mL de xylocaïne 2 % (pas d’adrénaline)
un paire de gants chirurgicaux désinfectés - positionner les matériaux suivants sur un banc séparé :
deux tubes de microcentrifuge
un tube contenant 5 mL de formol 10 %
un petit récipient contenant 50 à 100 mL d’azote liquide à-190 ° C.
2. Préparation des Participants
- demandez aux participants de suivre un rapide 8 h 15 avant la procédure de biopsie.
- Ont les participants de s’abstenir de l’exercice physique, des facteurs de stress excessifs, l’alcool et active et tabagisme passif 72 h avant la biopsie 16 , 17.
3. Effectuer la biopsie de tissu adipeux sous-cutané
- positionner le participant sur le lit chirurgical dans une position en décubitus dorsal.
- Désinfecter la région de l’incision à l’aide de povidone-iode.
- Injecter 10 mL de xylocaïne 2 % (pas d’adrénaline) lentement et régulièrement 18 dans la région sélectionnée pour servir d’anesthésie locale.
- Placer un champ opératoire stérile sur la zone à couvrir le corps de l’adhérent, à l’exclusion de la région de l’incision.
- Au moins 3-5 min après, appliquer une pression avec une paire de pinces sur le domaine de l’anesthésie locale et demander au participant si il sent toute douleur 19 pour s’assurer que l’anesthésie locale est parvenu à.
- Fixez le bistouri n ° 11 sur le manche de bistouri Swann-Morton.
- Créer une incision de 2 à 2,5 cm de longueur, 3 à 5 cm à gauche ou à droite de l’ombilic.
- Enlever les tissus sous-cutanés avec une paire de droite 15 cm ciseaux de fonctionnement.
- Une fois que le tissu adipeux se révèle, le capturer avec une paire de pinces à épiler et une paire de ciseaux courbes 14 cm.
- Couper et enlever environ 1 g de tissu adipeux.
- Après le retrait de tissu, placez des gazes stériles sur l’incision pour atteindre l’hémostase.
- Lorsque l’hémostase est confirmée, capturer la suture 4.0 avec une aiguille de 14 cm et la peau avec une paire de pinces chirurgicales jusqu'à ce que le tissu sous-cutané est visible.
- Insérer l’aiguille à suture de la peau, se déplaçant vers le tissu sous-cutané, tandis que le cutanées et sous-cutanées sont étroitement liés.
- Avec l’aiguille à suture, suivre une technique continu zig-zag dans le tissu sous-cutané jusqu'à ce que repoussés à l’extérieur de la peau. Continuer jusqu'à la fermeture de l’incision cutanée.
- Cravate extérieurement la suture.
- Nettoyer la zone de l’incision avec du sérum physiologique et le recouvrir d’une gaze stérile adhésive.
4. Déposition du tissu
- séparer le tissus adipeux prélevés en trois morceaux : 150, 350 et 500 mg.
- Placer les morceaux de mg 150 et 350 du tissu de l’échantillon dans des tubes de microcentrifuge.
- Plonger les deux tubes de microcentrifuge dans le petit récipient avec l’azote liquide à-190 ° C jusqu’au dépôt final dans un congélateur à -80 ° C.
Remarque : À l’avance, utilisez une aiguille stérile pour percer un petit trou dans des microtubes à centrifuger pour éviter les pannes de la tasse au cours de l’immersion des tubes de microcentrifuge dans l’azote liquide à -190 ° C. - Immerger la pièce de 500 mg de tissu échantillon-à utiliser pour l’analyse histologique-dans un tube contenant 5 mL de 10 % de formol.
Remarque : Utiliser la pince de moustiques qu’en cas de saignements excessifs pendant la chirurgie. Dans ce cas, saisir le navire avec la pince de moustique pour ligaturer et fermer jusqu'à l’obtention d’hémostase.
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Representative Results
Les caractéristiques des participants sont fournis dans le tableau 1. Les points de suture dans la zone de l’incision est tombé dans les prochains jours 8-12. Nous avons réalisé un total de 115 biopsies de tissu adipeux sous-cutané, à l’aide de la méthode de biopsie chirurgicale abdominale non-diathermie chez l’homme adulte en bonne santé (âge : 35,2 ± 6,9 ans ; indice de masse corporelle : 27,3 ± 4,4 ; et le taux de graisse corporelle : 27,0 ± 9,0 %). Saignement excessif après biopsie a été observé dans les trois cas (prévalence : 2,61 %) deux jours après la chirurgie. Les trois personnes qui ont connu des saignements excessifs étaient plus âgés que leurs homologues qui ont vécu sans effets secondaires [t(113)=-2.115, p = 0,037], et aucune autre différence (c.-à-d., masse corps et indice de taux de graisse corporelle) ont été observés (p) > 0,05) entre les deux groupes. Enfin, trois mois après chaque opération, aucun de nos participants a signalé des effets secondaires (y compris les blessures superficielles).
Tableau 1 : Caractéristiques des participants.
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Discussion
Le but de cette étude était de normaliser une technique chirurgicale pour la biopsie de tissu adipeux sous-cutané, réalisée sous anesthésie locale avec une méthode non-diathermie chez les hommes en bonne santé. Diathermie est couramment utilisé dans la salle d’opération ; Cependant, les effets secondaires possibles (p. ex., flash se déclenche et toxicité environnementale)9 et les retards dans la guérison de10 peuvent se produire. Ces effets indésirables de la diathermie peuvent générer des risques de santé pour le personnel d’exploitation et les patients/participants. Par conséquent, une méthode non-diathermie chirurgicale pour la biopsie de tissu adipeux sous-cutané est justifiée.
Nous avons observé excessives saignements dans trois de nos participants, deux jours après la chirurgie. Ces trois personnes ont signalé des douleurs dans la zone de l’incision. Pour traiter ces cas, la zone de l’incision cutanée a été rouvert, tout sang excédentaire a été supprimé et la zone a été nettoyée avec saline et fermée en utilisant la même technique que décrite ci-dessus. Pas de complications ont été signalées après cela et normal de guérison a été observée dans les jours suivants. Nos résultats ont montré des effets secondaires minimes après la méthode non-diathermie : trois cas de post-opération excessive saignements hors de 115 opérations (2,61 %). Des résultats antérieurs de biopsies de l’aiguille du tissu adipeux a montré mineures saignement dans un des 10 participants 12 h après la chirurgie15, même si aucun saignement important a eu lieu chez les personnes obèses en bonne santé après une biopsie de tissu adipeux côté-coupe 6de la technique de l’aiguille. D’après nos résultats, nous prévoyons qu’une méthode de biopsie non-diathermie chirurgicale du tissu adipeux peut éliminer le risque de lésion cutanée, le flash se déclenche et la toxicité libéré dans l’environnement d’exploitation, qui sont causés par diathermie pendant chirurgicale du tissu adipeux biopsie.
Les rapports précédents ont indiqué que le vieillissement est corrélée positivement avec anomalies de l’hémostase,20. Fait intéressant, les trois personnes qui ont connu un saignement excessif dans la présente étude étaient significativement plus âgés (de huit ans en moyenne) que celles qui n’ont pas des effets secondaires. Par conséquent, on peut noter que les personnes âgées ont un risque plus élevé d’effets secondaires lorsqu’on applique la méthode de biopsie non-diathermie chirurgicale du tissu adipeux. Cependant, nous croyons que la prévalence de tels effets secondaires est trop faible (soit 2,61 %) à cause des inquiétudes importantes. Il est à noter que nos participants ont rempli au préalable un questionnaire sur les antécédents médicaux afin de déterminer leur état de santé. Aucune condition de maladie chronique précédente ont été signalées par les participants, y compris les trois participants qui ont montré un saignement excessif après l’opération. De même, aucun traitement antérieur de la chronique de médicaments a été signalé par les participants qui ont fait preuve et ceux qui n’ont pas montré tout saignement excessif. Par conséquent, la post-opération saignement excessif que nous avons observé dans cette étude ne peut être attribué aux conditions précédentes de maladies chroniques et/ou traitement antérieur de médicaments chroniques. Dans cette optique, la prévalence de cet effet secondaire peut être différente si la technique est appliquée aux populations cliniques.
Une étape essentielle lors de la biopsie chirurgicale du tissu adipeux proposé est d’assurer une anesthésie locale avant l’incision, ce qui empêche toute douleur et l’inconfort dans le participant. En outre, il faut une pré-projection histoire allergiques à l’anesthésie pour prévenir les complications allergiques pendant l’injection anesthésique. Il est également essentiel d’assurer l’hémostase avant la fermeture de l’incision pour prévenir les saignements après l’opération, alors qu’il est important de garder le contact avec les participants pendant plusieurs jours après que le procédé est exécuté jusqu'à l’obtention d’une guérison complète pour découvrir toutes les anomalies potentielles et d’empêcher l’infection et/ou cas de saignement après l’opération.
Limites de la technique de biopsie proposés comprennent l’inconfort que la zone de l’incision peut causer aux participants, en particulier concernant leur capacité à s’asseoir confortablement et prenez une douche/baignoire, jusqu'à guérison complète est obtenue. Les participants devraient être avisés d’éviter de laver la zone de l’incision pour prévenir l’infection, aussi bien quant à remplacer la gaze stérile adhésive sur la zone d’incision chaque jour jusqu'à la guérison complète est obtenue. Cette procédure quotidienne peut causer de l’inconfort. Enfin, il est important de noter que notre but était d’introduire et de standardiser une nouvelle technique. Dans cette optique, nous n’utilisaient pas un contrôle groupe entreprise axée sur l’aiguille sous-cutanée fat biopsies afin de quantifier les différences entre cette technique et la méthode de non-diathermie nouvellement introduit.
Comme suggéré précédemment4,7,8, la technique de biopsie chirurgicale proposée peut offrir des échantillons de tissus avec intégrité plus élevée que la technique axée sur l’aiguille. En effet, en utilisant cette technique, nous avons pu effectuer les ARNm et les analyses de protéines sur le tissu obtenu et, en outre, aux cubes de paraffine de formulaire pour utilisent dans les analyses histologiques. Aussi, nous suggérons évitant la diathermie dans les biopsies chirurgicales du tissu adipeux sous-cutané, étant donné que l’hémostase et la guérison normale peuvent être réalisés avec notre technique.
En conclusion, notre normalisé du tissu adipeux sous-cutané abdominal chirurgicale à l’aide d’une méthode non-diathermie peut effectuer une biopsie en toute sécurité chez les hommes en bonne santé au chevet des patients, avec des effets secondaires minimaux.
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Disclosures
Les auteurs déclarent qu’ils n’ont aucun intérêt financier concurrentes.
Acknowledgments
Ce travail a reçu des fonds de Horizon 2020 (subvention, contrat n° 645710) et la 7e programme-cadre de l’Union européenne (subvention accords no 612547 et 319010) des Programmes. Les auteurs tiennent à remercier Dr Fotini Sourli-Chasioti pour l’aide à la procédure de biopsie. Les auteurs remercient également M. Yiorgos Paterakis pour son aide précieuse dans la préparation de la vidéo.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Disinfected surgical field | Hartmann | 23516-00 | |
| Stainless Steel Instrument Stands (surgical Mayo) | Medical Device Depot Inc. | 32000 | |
| Operating Scissors straight 15 cm | Karl Storz | 791903 | |
| Scalpel No 11 | Swann-Morton | 203 | Bipolar, catalog number 429011 |
| Scarpel handle No 3 | Karl Storz | 488090 | |
| Scissors curved 14 cm | Karl Storz | 511514, 752918 | |
| Mosquito forceps | Karl Storz | 535012 | |
| Tweezers Kocher | Karl Storz | 530416 | Bipolar, catalog number 830316 |
| Surgical tweezers | Karl Storz | 793216 | Bipolar, catalog number 831016 |
| Povidone-iodine | Various | Not applicable | |
| Suture 4.0 Vicryl | Johnsons | V4970H | |
| Scissors straight 11 cm | Karl Storz | 512511 DS | |
| Needle holder 15 cm | Karl Storz | 515515 | Bipolar, catalog number 213015 |
| Sterile gauzes | Hartmann | 3021 | |
| Αdhesive sterile gauze | Digas medical equipment | 2889 | |
| 10 mL syringe with disinfected needle | Alpha medical solutions | 10310-55-0010 | |
| 2%-xylocaine (no adrenaline) | Various | Not applicable | |
| Sterile surgical gloves | Sempermed | 10001 | |
| Eppendorf tubes | Kartell | 16283 | |
| 10% formalin | Alpha medical solutions | 11016-30-2909 | |
| Tubes 120 mL | Digas medical equipment | 9025 | |
| Liquid nitrogen at -190°C | Revival | Not applicable |
References
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