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JoVE Journal Immunology and Infection
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Immunology and Infection

उभरते संक्रमित रोगजनकों को हटाने के लिए हाथ धोने की प्रभावकारीता का परीक्षण करने के लिए एक विधि

Published: June 7, 2017 doi: 10.3791/55604
Automatic Translation
1, 1
1Department of Civil and Environmental Engineering, Tufts University

Summary

संक्रामक रोग ट्रांसमिशन को रोकने के लिए हाथ धोने की व्यापक रूप से सिफारिश की जाती है। हालांकि, बहुत कम सबूत हैं जिनमें संक्रामक रोग रोगजनकों को हटाने में हाथ धोने के तरीकों सबसे अधिक प्रभावशाली हैं। सूक्ष्मजीवों को निकालने में हाथ धोने के तरीकों की प्रभावकारिता का आकलन करने के लिए हमने एक विधि विकसित की है।

Abstract

संक्रामक रोग ट्रांसमिशन को रोकने के लिए हाथ धोने की व्यापक रूप से सिफारिश की जाती है। हालांकि, सामान्य रूप से हाथ धोने के तरीकों की प्रभावकारिता पर बहुत कम तुलनीय साक्ष्य मौजूद हैं। इसके अतिरिक्त, छोटे प्रमाण संकुचित रोगजनकों को हटाने में सबसे अधिक प्रभावी हैं, यह निर्धारित करने के लिए हाथ धोने के तरीकों की तुलना करते हैं। संक्रामक रोग के प्रकोपों ​​के दौरान नियोजित किया जा सकता है कि हाथ धोने के लिए विभिन्न तरीकों के लिए प्रमाण प्रदान करने के लिए अनुसंधान की आवश्यकता है। यहां हाथों से सूक्ष्मजीवों को निकालने में हाथ धोने के तरीके की प्रभावकारिता का आकलन करने के लिए प्रयोगशाला पद्धति और कुल्ला पानी में उनकी दृढ़ता का वर्णन किया गया है। स्वयंसेवकों के हाथ पहले परीक्षण जीव के साथ बाली लगते हैं और फिर ब्याज की प्रत्येक हाथ धोने की विधि से धोया जाता है। आम तौर पर, सूक्ष्मजीवों को मानव रोगों की बीमारी से बचाने के लिए उपयोग किया जाता है। धोने के बाद स्वयंसेवकों के हाथों पर रहने वाले जीवों की संख्या को संशोधित "दस्ताना रस" पद्धति का उपयोग करके परीक्षण किया जाता है: हाथों को एल्यू के साथ दस्ताने में रखा जाता हैएंटी और सूक्ष्मजीवों को निलंबित करने के लिए और उन्हें झिल्ली निस्पंदन (बैक्टीरिया) या पट्टिका परख (वायरस / बैक्टीरियॉफ़ेज) द्वारा विश्लेषण के लिए उपलब्ध कराया जाता है। हाथ धोने से उत्पादित पानी को कुल्ला, सीधे विश्लेषण के लिए एकत्र किया जाता है। हाथ धोने की प्रभावकारिता को बिना हाथ धोने वाले नमूनों को हाथ धोने के बाद लिया गया नमूनों के बीच लॉग कमी मूल्य की तुलना करके मात्रा निर्धारित की गई है। पानी की हड़ताल को कुल्ला, पानी के नमूनों की विभिन्न हाथ धोने के तरीकों से सिर्फ पानी के साथ हाथ धोने के बाद एकत्र किए गए नमूने के साथ तुलना करके मात्रा निर्धारित की जाती है। यद्यपि यह विधि मानव स्वयंसेवकों की सुरक्षा को सुरक्षित रखने के लिए सरोगेट जीवों का उपयोग करने की आवश्यकता से सीमित है, लेकिन इन विट्रो अध्ययन में दोहराए जाने के लिए मुश्किल तरीके से हाथ धोने के पहलुओं को पकड़ लिया जाता है और हाथ धोने की क्षमता को धोखा देने और कुल्ला में संक्रामक जीवों की दृढ़ता पर अनुसंधान के अंतराल को भरना पड़ता है। पानी।

Introduction

हाथ धोने की बीमारी फैलाने से रोकने के लिए व्यापक रूप से सिफारिश की जाती है, विशेषकर उन फैल-मौखिक या हवाई मार्ग से संक्रमित होते हैं, जिनमें अतिसार और श्वसन रोग शामिल होते हैं I हैरानी की बात है, हाथों से जीवों को हटाने पर साबुन और पानी (एचडब्ल्यूडब्ल्यूएस) के साथ हाथ धोने और अल्कोहल-आधारित हाथ सेनेटिवेटर (एबीएचएस) के साथ हाथ धोने के तरीकों की प्रभावकारिता पर थोड़ा तुलनीय प्रमाण है। प्रारंभिक शोध में यह पाया गया है कि हाथ धोने की विधि के विपरीत, हाथ धोने की यांत्रिक क्रिया, ज्यादातर जीव निकालना 2 , 3 के लिए खाता हो सकता है। इसके अतिरिक्त, बहुत कम तुलनात्मक सबूत हैं जिन पर हाथ धोने की विधि सबसे प्रभावशाली है। एक अनौपचारिक साहित्य की समीक्षा में, 14 अध्ययनों ने साबुन और हाथों से निकलने वाले जीवों की निकाय के प्रभावों की तुलना की पहचान की थी। इन अध्ययनों में से, पाँच पाया गया एबीएचएस अधिक प्रभावी 4 , 5 , 6 , 7 , 8 , सात, एचडब्ल्यूडब्ल्यूएस को 9 , 10 , 11 , 12 , 13 , 14 , 15 , और दो तरीकों के लिए एचडब्ल्यूडब्ल्यूएस को 16 , 17 के बीच कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं मिला। इन निष्कर्ष असंगत हैं और हाथ धोने के बाद पानी कुल्ला में जीवों के हठ से बीमारी के चलते जोखिम को दूर नहीं करते हैं। कुल मिलाकर, संक्रामक बीमारी के कारण रोगजनकों को हटाने के तरीके को हाथ धोने के तुलनात्मक प्रभावकारिता पर सबूत सीमित हैं।

इस सीमित प्रमाण ने अनिश्चितता पैदा की है कि किस तरह की प्रकोप सेटिंग्स में सबसे उपयुक्त हैं उदाहरण के लिए, 2013 से 2016 तक पश्चिम अफ्रीका में ईबोला वायरस डिजीज (ईवीडी) फैलने के दौरान, कई बड़े अंतरराष्ट्रीय प्रतिद्वंद्वियों ने एचडब्ल्यूडब्ल्यूएस, एबीएचएस, या 0.05% क्लोरीन समाधान के लिए विरोधाभासी सिफारिशें दीं। मेडेसिन्स सैन्स फ्रंटियरेस (एमएसएफ) ने हाथ धोने के लिए 0.05% क्लोरीन समाधान का उपयोग करने की सिफारिश की है, जबकि विश्व स्वास्थ्य संगठन (डब्ल्यूएचओ) ने एचडब्ल्यूडब्ल्यूएस या एबीएचएस (यदि हाथ स्पष्ट रूप से गंदे नहीं हैं) की सिफारिश की है। डब्लूएचओ कहता है कि क्लोरीन का उपयोग नहीं किया जाना चाहिए जब तक कि कोई अन्य विकल्प उपलब्ध न हो, क्योंकि यह त्वचा 18 , 1 9 , 20 , 21 , 22 द्वारा क्लोरीन की मांग के कारण अन्य तरीकों से कम प्रभावी है। इसके अतिरिक्त, क्लोरीन समाधान आमतौर पर चार अलग-अलग क्लोरीन यौगिकों से निर्मित होते हैं, जिसमें उच्च-परीक्षण हाइपोक्लोराइट (एचएचएच), स्थानीय रूप से उत्पन्न और स्थिर सोडियम हाइपोक्लोराइट (नाओक) और सोडाआईयूएम डाइक्लोरोइस्कोन्यूरेट (एनएडीसीसी) पश्चिम अफ्रीका में ईवीडी फैलने के जवाब में डब्लूएचओ ने एक व्यवस्थित समीक्षा में हाल ही में क्लोरीन 23 के साथ हाथ धोने की तुलनात्मक प्रभावकारिता की जांच के चार अध्ययन पाया। इन अध्ययनों ने भी परस्पर विरोधी परिणाम उत्पन्न किए, और इन अध्ययनों में से कोई भी ईबोला वायरस 10 , 24 , 25 , 26 , 27 के समान हाथ धोने या जांच की गई सूक्ष्मजीवों के लिए 0.05% की अनुशंसित क्लोरीन एकाग्रता का इस्तेमाल करता था। इस प्रकार, सिफारिशों को साक्ष्य-आधारित नहीं पाया गया, और यह स्पष्ट नहीं था कि कौन सी सिफारिशें सबसे प्रभावशाली थीं

संक्रामक रोगजनकों के प्रसार को रोकने के लिए हाथ धोने के तरीकों की तुलना करने के लिए अतिरिक्त शोध की आवश्यकता है, क्योंकि हाथ धोने की हादसे महामारी रोग प्रसार को रोकने के लिए एक महत्वपूर्ण उपकरण है। ये जऔर धोखा देने की सिफारिशों को साक्ष्य के आधार पर होना चाहिए। इस प्रकार, प्रतिरक्षा या गैर-संक्रामक रोगज़नक़ों के साथ प्रदर्शन किए जाने वाले पानी की दृढ़ता को हाथ धोने और कुल्ला करने के परीक्षण के लिए एक विधि 2 , 28 , 2 9 को विकसित की गई। नमूना परिणाम, ईबोला वायरस के लिए एक सरोगेट के रूप में Phi6 का उपयोग करते हुए और Escherichia कोलाई का उपयोग एक सामान्य सूचक जीव के रूप में, यहां प्रस्तुत किए गए हैं इस प्रोटोकॉल में, प्रभावकारिता को धोने के लिए और पानी की दृढ़ता परीक्षण कुल्ला दिखाए जाते हैं।

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Protocol

आचार विवरण: यहां वर्णित अध्ययन (फिबिल और ई। कोलाई के रूप में ईबोला के लिए surrogates पर) को टफट्स मेडिकल सेंटर और टुफ़्स यूनिवर्सिटी हेल्थ साइंसेज कैम्पस (# 12018) में संस्थागत समीक्षा बोर्ड द्वारा अनुमोदित किया गया था; हार्वर्ड यूनिवर्सिटी ने टफट्स इंस्टीट्यूशनल रिव्यू बोर्ड की समीक्षा की।

नोट: इस प्रोटोकॉल को प्रारंभ करने से पहले, दो चरणों का पूरा होना चाहिए। सबसे पहले, बायोसाइफेटी लेवल 1 (बीएसएल -1) किराए या गैर-संक्रामक संस्करण का अध्ययन किया जाना चाहिए जो कि मानव विषयों पर उपयोग करने के लिए सुरक्षित है, को पहचाना जाना चाहिए और 30 को चुना जाना चाहिए। इस प्रोटोकॉल के लिए एक बीएसएल-1 सरोगेट या गैर-संक्रामक रोगज़नक आवश्यक है, क्योंकि जीव मानव स्वयंसेवकों के नंगे हाथों को टीका करने के लिए इस्तेमाल किया जाएगा। दूसरा, स्वयंसेवकों की भर्ती से पहले या प्रयोग शुरू करने से पहले, मानव विषयों के साथ अनुसंधान करने के लिए स्थानीय संस्थागत समीक्षा बोर्ड से अनुमोदन प्राप्त करना चाहिए। इस प्रोटोकॉल के कई पहलुओं को पूरा करने के लिए समायोजित किया जा सकता हैरुचि के अनुसंधान प्रश्नों की ई विशिष्ट आवश्यकताओं

1. भर्ती पात्र मानव विषय

  1. सार्वजनिक नोटिस बोर्डों पर पेपर फ़्लायर्स पोस्ट करके और उन सदस्यों के साथ समूह को ईमेल भेजकर भाग लेते हैं जो भाग लेने में दिलचस्पी रख सकते हैं। इन घोषणाओं में अध्ययन उद्देश्य, संपर्क जानकारी, और पात्रता मानदंड शामिल होना चाहिए।
  2. योग्यता का मूल्यांकन करने के लिए स्वयंसेवकों से मिलें पुष्टि करें कि स्वयंसेवक 18 से 65 वर्ष की उम्र के बीच स्वस्थ हैं, और वर्तमान में गर्भवती नहीं हैं या एंटीबायोटिक दवाइयां नहीं लेते हैं और यह कि उनके पास त्वचा की कोई क्षति / विकार नहीं है, हाथ धोने वाले एजेंटों को जाने वाली एलर्जी, या स्वच्छता से संबंधित मानसिक स्वास्थ्य के इतिहास का इतिहास है।
  3. योग्य स्वयंसेवकों से सहमति फॉर्म पढ़ें। किसी भी सवाल का जवाब दें, जिसमें वे स्वयंसेवक और अन्वेषक के रूप में दो प्रतियां हस्ताक्षर करते हैं। एक रूप बनाए रखें और स्वयंसेवक को एक प्रदान करें।
  4. जनसांख्यिकीय जानकारी, व्यक्ति पर सवाल सहित आधारभूत सर्वेक्षण का प्रबंध करनात्वचा की स्थिति का अल इतिहास, और हाल के हाथ धोने के व्यवहार पर जानकारी। जिल्द की सूजन, त्वचा की चोटों, या आधारभूत त्वचा असामान्यताओं के लक्षणों के लिए हाथों की जांच 31
  5. स्वयं के स्वयंसेवकों को ब्याज के प्रत्येक जीव के लिए दो परीक्षण सत्रों के लिए अनुसूची करें (बिना मिट्टी के लोड के परीक्षण के लिए और एक परीक्षण के लिए) व्यक्तिगत उत्पाद उपयोग से confounding से बचने के लिए परीक्षण करने से पहले सात दिवसीय धोने की अवधि के लिए antimicrobial उत्पादों से बचने के लिए स्वयंसेवकों को निर्देश।
    1. अपने सामान्य उत्पादों की जगह उपयोग करने के लिए एंटीमिक्रोबियल उत्पादों (शैम्पू, कंडीशनर और साबुन) वाले स्वयंसेवकों को प्रदान करें। भारी शुल्क वाले vinyl दस्ताने प्रदान करें और घर की सफाई उत्पादों जैसे उत्पादों का उपयोग करते समय पहनने के लिए विषयों को निर्देश दें।

2. स्वचालित रूप से इमरजेंसी रिस्पांस (साबुन, एबीएचएस, 0.05% एचएचटी, एनएडीसीसी, और नाओक सॉल्यूशंस) में इस्तेमाल किए जाने वाले हाथ धोने वाले समाधान तैयार करें

नोट: क्लोरीन समाधान प्रस्तुत किया जा सकता है प्रयोग के पहले 12 घंटे तक रहे लेकिन यदि संग्रहीत हो तो> नीलामी होगी> 12 घंटे

  1. संदर्भ के लिए प्रासंगिक साबुन को चुनें और खरीद लें, जिसके लिए परीक्षण किया जा रहा है।
    नोट: ज्यादातर मामलों में, विकासशील देशों में संक्रामक रोग आपातकाल के लिए, यह साबुन का एक बार होगा।
  2. संदर्भ के लिए प्रासंगिक एबीएचएस समाधान चुनें और खरीद लें, जिसके लिए परीक्षण किया जा रहा है।
    नोट: प्रभावशालीता सुनिश्चित करने के लिए चुने हुए एबीएचएस में एथिल शराब का संदर्भ 70% से अधिक या उसके बराबर होना चाहिए।
  3. नारियल सीए (सीएलओ) 2 पाउडर को अल्ट्रापायर पानी में जोड़कर 0.05% कैल्शियम हाइपोक्लोराइट (सीए (सीएलओ) 2 ) समाधान तैयार करें। निर्धारित किए जाने वाले विषयों की संख्या के आधार पर समाधान की मात्रा निर्धारित करें
    1. निम्नलिखित समीकरण का उपयोग, उपलब्ध क्लोरीन के दिए गए प्रतिशत का उपयोग करके दिए गए मात्रा में पानी की मात्रा में आवश्यक मात्रा तैयार करने के लिए आवश्यक पाउडर की मात्रा निर्धारित करें:
      /files/ftp_upload/55604/55604eq1.jpg "/>
      नोट: सीए (सीएलए) 2 पाउडर में आमतौर पर 60-80% क्लोरीन उपलब्ध है।
  4. अल्ट्राप्रेर पानी के लिए दानेदार नाडीसीसी पाउडर को जोड़कर 0.05% सोडियम डाइक्लोरोइसोकायण्यूरेट (एनएडीसीसी) समाधान तैयार करें।
    1. निम्नलिखित समीकरण का उपयोग, उपलब्ध क्लोरीन के दिए गए प्रतिशत का उपयोग करके दिए गए मात्रा में पानी की मात्रा में आवश्यक मात्रा तैयार करने के लिए आवश्यक पाउडर की मात्रा निर्धारित करें:
      समीकरण
      नोट: NaDCC पाउडर में आम तौर पर लगभग 50% क्लोरीन उपलब्ध है।
  5. अल्ट्रापरे पानी के लिए स्टॉक सोडियम हाइपोक्लोराइट समाधान जोड़कर 0.05% NaOCl समाधान को स्थिर करें।
    1. निर्माता के निर्देशों ( उदाहरण के लिए, आयोडैमेट्रिक टिटेशेशन) के अनुसार सामग्री सूची देखने के लिए , एनओसीएल स्टॉक समाधान (5-8% होने की संभावना) की एकाग्रता की पुष्टि करें।ग्रेटेड किट)।
    2. परीक्षण विधि के परिणामों का उपयोग करके, निम्न समीकरण का उपयोग करके पानी में जोड़ने के लिए समाधान की मात्रा की गणना करें:
      समीकरण
  6. सोडियम हाइपोक्लोराइट समाधान को इलेक्ट्रोक्लोरीनरेटर, अल्ट्रापॉवर वॉटर और प्रयोगशाला-ग्रेड सोडियम क्लोराइड (नाओकल) का उपयोग करके अतिपरवरूप पानी के लिए तैयार करके 0.05% NaOCl समाधान को स्थिर करें।
    1. निर्माता के निर्देशों के अनुसार एक इलेक्ट्रोक्लोरीनरेटर का उपयोग करते हुए, अल्ट्रापरेचर पानी और NaCl के साथ 1% क्लोरीन समाधान तैयार करें।
    2. NaOCl स्टॉक समाधान 32 की एकाग्रता की पुष्टि करने के लिए एक टिटस्ट्रेशन टेस्ट विधि ( उदाहरण के लिए, आयोडैमेट्रिक टिटशन) का उपयोग करें
    3. परीक्षण के परिणामों का उपयोग, निम्नलिखित समीकरण का उपयोग कर पानी में जोड़ने के लिए समाधान की मात्रा की गणना करें:
      समीकरण
  7. सी की पुष्टि करेंप्रत्येक क्लोरीन के हाथ धोने के समाधान का एकाग्रता ( उदाहरण के लिए, आयोडैमेट्रिक टिटशन) का प्रयोग करके और पानी या क्लोरीन स्रोत पाउडर / समाधान जोड़कर समाधान समायोजित करें जब तक वे लक्ष्य एकाग्रता (0.045-0.055%) की 10% त्रुटि के भीतर नहीं होते।

3. जीनोम और मृदा लोड तैयार करें और इनोक्यूलेट बनाने के लिए गठबंधन करें

नोट: निम्नलिखित उप-वर्गों में, ई। कोलाई और Phi का उपयोग तरीके के विवरण के लिए नमूना जीवाणु और वायरल जीवों के रूप में किया जाता है।

  1. जीवाणु के लिए 10 x 10 8 CFU / एमएल से अधिक एकाग्रता पर परीक्षण के लिए इस्तेमाल होने वाले जीव को तैयार करें और वायरस के लिए 10 x 10 7 PFU / mL से अधिक
    1. ई। कोलाई तैयार करने के लिए, ई। कोलाई के एक गैर-पाथोजेनिक तनाव को लुरी-बर्टानी (एलबी) अगर प्लेटों पर लेटाते हैं और एक घंटे में 37 डिग्री सेल्सियस पर 24 घंटे के लिए एकल कॉलोनिज प्राप्त करते हैं। 4 डिग्री सेल्सियस पर स्टोर करें
      नोट: यह तोड़ सकता हैप्रयोग से अल दिनों पहले
      1. प्रयोग की शुरुआत के एक दिन पहले, प्लेट से एक कॉलोनी उठाएं और 10 एमएल एलबी शोरबा को एक बाँझ लूप का उपयोग करके टीका लगाना। मिलाते हुए 37 डिग्री सेल्सियस पर रातोंरात सेते हैं।
      2. प्रयोग की सुबह, रातोंरात संस्कृति के 1 एमएल को ताजा एलबी शोरबा के 20 एमएल तक जोड़कर एक ताजा संस्कृति शुरू करें। 10 से अधिक सेल घनत्व 8 8 CFU / एमएल हासिल करने के लिए लगभग 2.5 एच सेते हैं।
      3. संस्कृति की एकाग्रता का अनुमान लगाने के लिए एक स्पेक्ट्रोफोटोमीटर का उपयोग करें।
        नोट: पहले से स्थापित रूपांतरण कारक का उपयोग ई। कोलाई तनाव के लिए मानक वक्र से करें, यह सुनिश्चित करें कि 10 8 CFU / mL 33 से अधिक एकाग्रता सुनिश्चित करें। यदि सेल घनत्व पर्याप्त नहीं है, तो इनक्यूबेटर को संस्कृति लौटाएं और तैयार होने तक फिर से परीक्षण करें।
    2. झिल्ली निस्पंदन 34 का उपयोग कर एकाग्रता की पुष्टि करें।
      नोट: धारावाहिक dilutions प्रदर्शनफ फॉस्फेट-बफर्ड खारा (पीबीएस) में संस्कृति है ताकि फ़िल्टर किया जाने वाला समाधान प्लेट पर एक बहुत अधिक संख्या में उपनिवेशों का उत्पादन करे (सटीक संख्या इस्तेमाल किए गए माध्यम पर निर्भर करेगी)।
      1. बाँझ निस्पंदन फ़नल और एक वैक्यूम कनेक्शन के साथ एक लौ और एक निस्पंदन कई गुना सेट करें। उन्हें एथेनॉल के साथ ज्वलंत करके संदंश जड़ें ग्रिड का सामना करते हुए, निस्पंदन मैनिफ़ोल्ड पर 0.45-माइक्रोन फिल्टर लगाने के लिए उनका उपयोग करें। बाँझ पीबीएस की एक छोटी राशि के साथ फिल्टर गीला
      2. फ़नल को आधार पर रखें और नमूना समाधान को पिपेट करने या फ़िल्टर पर सीधे डालने से संसाधित करने के लिए जोड़ें। पूरे नमूना झिल्ली के माध्यम से पारित होने तक वैक्यूम को व्यस्त रखें। बाँझ पीबीएस के साथ कीप के किनारे को कुल्ला और फिर से वैक्यूम संलग्न करें।
        नोट: नमूने कम से कम 100 μL और 100 एमएल तक होनी चाहिए। यदि एक नमूना 10 एमएल से कम है, तो नमक की समान निस्पंदन सुनिश्चित करने के लिए फ़िल्टरिंग के पहले लगभग 20 एमएल पीबीएस को निस्पंदन फ़नल में जोड़ेंle।
      3. फ़नल को निकालें, लौ-संदंश को बाधित करें, और बेस से फिल्टर को उठाएं। पेट्री डिश में एलबी एगर पर धीरे से फिल्टर रखें, ग्रिड के ऊपर का सामना करें, यह सुनिश्चित करें कि फिल्टर सतह के ऊपर फ्लश है। प्लेटें उलटा और 37 डिग्री सेल्सियस पर 24 घंटे के लिए सेते हैं।
      4. 24 घंटे के बाद, इनक्यूबेटर से प्लेटें निकाल दें और ई। कोली कॉलोनियों को गिनाएं। सीएफयू / एमएल में फ़िल्टर्ड समाधान की एकाग्रता की गणना करने के लिए इस डेटा और ज्ञात कमजोर पड़ने वाले कारक और समाधान की मात्रा का उपयोग करें।
    3. दोगुआ एज ओवरले मेथ 35 का इस्तेमाल करते हुए स्यूडोमोनस सिरिंज होस्ट में फि 6 का प्रचार करें।
      1. पीओआई स्टॉक निलंबन के 100 μL और पी। सिरिंज के 100 μL रात भर की संस्कृति सीधे 6 एमएल पोषक तत्व ब्रोथ खमीर (एनबीवाय) नरम अदर (0.3%) में जोड़ें। इसे NBY हार्ड अगर (1.5%) के साथ प्लेटों पर डालें और 26 डिग्री सेल्सियस पर रातोंरात सेते रहें अनुभव के लिए पर्याप्त इनोकुल्कम बनाने के लिए पर्याप्त प्लेट तैयार करेंप्रति प्लेट प्रति लगभग 4 एमएल वायरल निलंबन की उपज का अनुमान है।
      2. अगले दिन, नरम अग्र स्तर के ऊपर 5 एमएल पीबीएस जोड़ें। इसे 4 घंटे के लिए कमरे के तापमान पर छोड़ दें, इसे एक विंदुक के साथ पुनः प्राप्त करें और इसे 0.45-माइक्रमी फिल्टर का उपयोग करके फ़िल्टर करें। 4 डिग्री सेल्सियस पर स्टोर करें
        नोट: यह समाधान वायरल टीका लगाने के रूप में काम करेगा
    4. यह सुनिश्चित करने के लिए एक पट्टिका परख का प्रयोग करें कि एकाग्रता 10 से अधिक 7 पीएफयू / एमएल 35 है । पीबीएस में वायरल निलंबन के धारावाहिक काम करना, जिससे कि 100 μL प्लेट पर एक बड़ी मात्रा में सजीले टुकड़े पैदा करता है।
      1. एक उचित पतला नमूना के 100 μL पिपेट करें और रात भर की मेजबान संस्कृति के 100 μL सीधे ट्यूब में 6 एमएल की एनबीवाई सॉफ्ट एगर युक्त हो। 24 घंटे के लिए 26 डिग्री सेल्सियस पर एनबीवाई हार्ड अगर से मुलायम काढ़ा डालो और सेते।
      2. अगले दिन, इनक्यूबेटर से प्लेटों को हटा दें और प्रत्येक प्लेट पर सजीले टुकड़े की गणना करें। इस डेटा का उपयोग करें और ज्ञात कमजोर पड़ने वाले पितापीटीयू / एमएल में फ़िल्टर्ड समाधान की एकाग्रता की गणना करने के लिए समाधान का सीटीओआर और मात्रा।
  2. मानवीय सीरम की नकल करने के लिए त्रिपक्षीय मृदा लोड तैयार करें।
    1. मिट्टी के लोड की आवश्यक मात्रा का उत्पादन करने के लिए 7.80 मिलीग्राम / एमएल बोवाइन सीरम एल्बूमिन, 10.92 मिलीग्राम / एमएल ट्रिप्टन, और 2.52 मिलीग्राम / एमएल बोवाइन म्यूसिन का मिश्रण करें। मिट्टी के भार को मिलाकर करने के बाद, इसे 0.22-माइक्रमी फिल्टर के माध्यम से बाँझ डालें। इसका इस्तेमाल 4 डिग्री सेल्सियस तक करें। गर्मी को गर्मी न दें, क्योंकि प्रोटीन इनकार करेंगे।
  3. मिट्टी के लोड के बिना शर्तों के लिए टीका लगाने के लिए 0.9% NaCl समाधान तैयार करें।
  4. परीक्षण के तुरंत बाद, 68% बैक्टीरिया या वायरल निलंबन और 32% मृदा लोड से बना एक inoculum तैयार करें। उदाहरण के लिए, 3.1.2.2 या 3.1.3.2 और 0.48 मिलीलीटर या तो मिट्टी के लोड (3.2.1 कदम) या 0.9% NaCl समाधान (चरण 3.3) से 1.02 एमएल बैक्टीरिया या वायरल निलंबन का उपयोग करें। भंवर या भंवर धीरे मिश्रण करने के लिए
    नोट: इस के 1.5 एमएलइनोकुल्कम प्रत्येक स्वैच्छिक के लिए प्रत्येक शर्त के तहत इस्तेमाल किया जाएगा, इसलिए सुनिश्चित करें कि तैयार की गई खुराक की कुल मात्रा परीक्षणों की इच्छित संख्या के लिए पर्याप्त है।

4. प्रयोग के लिए स्वयंसेवक तैयार करना

नोट: उस दिन परीक्षण करने के लिए जीव और मिट्टी के लोड की स्थिति निर्धारित करें। एक ही स्वयंसेवकों का इस्तेमाल कई शर्तों का परीक्षण करने के लिए किया जा सकता है, लेकिन प्रत्येक स्वयंसेवक को केवल 48 घंटे के भीतर परीक्षण के एक दौर के अधीन होना चाहिए।

  1. परीक्षण शुरू करने से पहले, पुष्टि करें कि स्वयंसेवक मौखिक रूप से पुष्टि करते हैं कि वे 7 दिन की antimicrobial washout अवधि का पालन करके और नेत्रहीन पुष्टि कर रहे हैं कि वे अपनी त्वचा पर कोई भी टूट या असामान्यताएं विकसित नहीं कर पा रहे हैं।
  2. एक यादृच्छिक संख्या जनरेटर का उपयोग करके प्रत्येक स्वयंसेवक को परीक्षण के इस दिन पर नमूना लेने के लिए या तो उनके दाएं या बायां हाथ का उपयोग करने के लिए असाइन करें। एक आदेश निर्दिष्ट करें जिसमें हाथ धोने की स्थिति की जाएगी।
    नोट: के लिएउदाहरण के लिए, एबीएचएस को # 3 सौंपा जा सकता है और तीसरा प्रदर्शन किया जाएगा।
  3. गंदगी और तेलों की त्वचा को छीनने के लिए परीक्षण की शुरुआत में एक बार "सफाई धोना" करें ताकि प्रत्येक बाद के परीक्षण समकक्ष शर्तों के तहत आयोजित किया जा सके।
    1. सफाई धोने के लिए, एक खाली टीका लगाने (एलबी ब्रोथ या पीबीएस) का उपयोग करते हुए प्रयोग के प्रत्येक चरण (नीचे अनुभाग 5, नीचे) के माध्यम से चलाएं और हाथ धोने के बिना नमूना लेना।

5. प्रायोगिक प्रक्रिया

  1. प्रत्येक स्वयंसेवक (विविधता के नियंत्रण के लिए) की त्वचा की पीएच जांचने के लिए, पाल्मर की सतह की त्वचा पर एक फ्लैट चिपकने वाली त्वचा पीएच जांच और पॉइंटर और मध्य उंगलियों के बीच की वेब स्पेस रखें। सुनिश्चित करें कि इलेक्ट्रोड त्वचा के खिलाफ फ्लैट है। पीएच पढ़ना रिकॉर्ड करें
  2. हाथों की कसौटी
    1. स्वयंसेवकों को एक साथ दोनों हाथों का प्याला लें। प्रत्येक हाथ में धीरे-धीरे 750 μL को पिपेट करके टीका लगाने के 1.5 एमएल के साथ हाथों से स्पाइक करें।
    2. स्वयंसेवकों ने धीरे-धीरे अपने हाथों को एक साथ हाथ से रगड़ कर रख दिया है जब तक कि हाथ की सभी सतहों को संभव के रूप में छोटे घर्षण के रूप में हाथों के अधीन टीका लगाने के साथ लेपित किया जाता है।
    3. स्वयं के स्वयंसेवकों को अपने शरीर से एक अतिरिक्त 30 एस के लिए अपने शरीर से दूर रहें और टीका लगाना सूखने की अनुमति दें। टीका लगाना पूरी तरह से सूखा नहीं हो सकता।
  3. हाथों को धो लें
    1. निम्नलिखित सभी धोने के चरणों के लिए, बड़े नमूना संग्रह बैग में हाथ से पानी को कुल्ला करना। 2 घंटे के अंदर संपर्क और प्रक्रिया पर क्लोरीन को बेअसर करने के लिए बैग में 12% सोडियम थिओसल्फेट समाधान के 4.5 एमएल जोड़ें।
      नोट: सभी नमूनों (यहां तक ​​कि क्लोरीन के बिना भी) में सोडियम थिओसाल्फेट को जोड़ा जाना चाहिए ताकि किसी भी प्रभाव के लिए नियंत्रण हो सके कि यह जीव पर हो सकता है।
    2. टीकाकरण (अनुभाग 5.2) के बाद, हाथों को नामित क्रम में अगले विधि से धो लें।
      1. कंट्रोल ए के लिए, एक हाथ धोने वाला कदम न करें और सीधे कदम पर जाएं5.5।
      2. कंट्रोल बी के लिए, कमरे के तापमान पर (लगभग 21 डिग्री सेल्सियस) नलिका के माध्यम से केवल एक फ्लिप रेट के साथ फ़नल के माध्यम से हाथ धो लें।
        नोट: यहां, 1.5 एल / मी और 500 एमएल पानी का प्रवाह दर का इस्तेमाल किया गया था।
      3. साबुन से हाथ धोने के लिए, 10 मिलीलीटर की अतिरक्त पानी के साथ हाथों को गीला करें। स्वयंसेवकों को अपने हाथ साबुन से ढक लेना और उसके बाद एक अतिरिक्त 20 एस के लिए अपने हाथों को एक साथ रगड़ें 1.5 एल / मी के प्रवाह दर पर फ़नल के माध्यम से कमरे के तापमान पर 500 मिलीलीटर की अल्ट्रापरेर पानी डालकर अपने हाथों को कुल्ला।
      4. सभी क्लोरीन समाधानों ( जैसे, एबीएचएस , एचएचएच, एनएडीसीसी, और नाओसीएल) के लिए, 1.5 एल / मी के प्रवाह दर पर फ़नल के माध्यम से 200 एमएल क्लोरीन समाधान डालें और स्वयंसेवक अपने हाथों को अच्छी तरह से रगड़ें।
  4. एक संशोधित दस्ताने रस की प्रक्रिया का उपयोग कर हाथ कुल्ला।
    1. हाथ धोने के बाद, तुरंत प्रत्येक स्वयंसेवक के हाथ रखो ( यानी, हाथी (दाएं या बाएं) टेस्टी के लिए चुना जाता हैचरण 4.2 में एनजी) एक नमूना बैग में होता है जिसमें कलाई तक 75 मिलीलीटर एवल्यूंट ( जैसे, पीबीएस) होता है। बैग के ऊपर कलाई के आसपास कसकर पकड़ो।
      नोट: हाथ धोने के लिए उपयोग किए जाने वाले किसी भी क्लोरीन को बेअसर करने के लिए पर्याप्त सोडियम थिओसाल्फेट युक्त नमूनाकरण के लिए एयूयुन्ट का उपयोग करें। पीबीएस सामान्यतः प्रयोग किया जाता है जो कई जीवों के लिए उपयुक्त है।
    2. स्वयंसेवकों ने धीरे-धीरे 30 एस के समाधान में अपना हाथ चूसना, उंगलियों और नाखूनों के नीचे तक पहुंचने के लिए ख्याल रखना। बैग के बाहर 30 से पतले हाथ से हाथ की मालिश करें ताकि यह सुनिश्चित हो सके कि पूरे हाथ को पूरी तरह से मढ़ा हुआ है, कलाई तक के सभी तरीके।
    3. बैग को सील करें और इसे उचित परख के अनुसार संसाधित करें, अनुभाग 6 में वर्णित, 2 घंटे के भीतर।
  5. परिशोधन।
    1. प्रत्येक हाथ धोने की विधि के साथ प्रक्रिया को दोहराए जाने से पहले, स्वयंसेवक साबुन और गर्म पानी के साथ एक सिंक में अपने हाथों को अच्छी तरह धोते हैं। स्वयंसेवा स्प्रे करेंरुपये का हाथ 70% इथेनॉल के साथ, जब तक कि वे दोनों तरफ लेपित नहीं होते हैं। उन्हें सूखा करने की अनुमति दें
    2. हर हाथ धोने की स्थिति के लिए अनुभाग 5 में सभी चरणों को दोहराएं, केवल चरण 4.2 ( चित्रा 1 ) में बेतरतीब ढंग से चयनित हाथ का उपयोग करके।

6. मात्रात्मकता

  1. पसंद के जीव के लिए उपयुक्त एनावेस करना ( जैसे, बैक्टीरिया के लिए झिल्ली निस्पंदन या वायरस के लिए प्लेक परख, क्रमशः 3.1.2 और 3.1.4 में वर्णित)।
  2. प्लेटों की गिनती के बाद, विश्लेषण के लिए प्रत्येक परीक्षण के लिए अनुमानित सीएफयू / एमएल या पीएफयू / एमएल रिकॉर्ड करें (खंड 3.1.2 और 3.1.4)।

7. विश्लेषण

  1. चरण 6.2 से परिणामों का उपयोग करते हुए, प्रत्येक जीव और मिट्टी के लोड की स्थिति के लिए, हाथों पर जीवों के लॉग कम करने के मूल्य की गणना करें, और प्रत्येक विषय और हाथ धोने की विधि के लिए।
    1. प्रभावकारिता को धोने के लिए प्रत्येक में बैक्टीरिया / वायरस की एकाग्रता की तुलना करें ए (कोई हाथ धोने) को नियंत्रित करने के लिए हाथ धोने वाला नमूना पानी की दृढ़ता से कुल्ला करने के लिए, प्रत्येक को कुल्ला करने के लिए पानी के नमूने की तुलना करें (केवल पानी से धोकर) नियंत्रित करें। निम्न मानक फार्मूला का प्रयोग करें:
      प्रवेश न्यूनीकरण (हाथ धोने ) = समीकरणसमीकरण
      प्रवेश कमी (पानी कुल्ला ) = समीकरणसमीकरण
      नोट: लॉग में कमी भी लॉग 10 (हाथ धोने के बिना) के रूप में व्यक्त की जा सकती है - लॉग 10 (हाथ धोने के साथ)
  2. महत्वपूर्ण विधियों (पी <0.05) का आकलन करने के लिए महत्वपूर्ण मॉडलों के लिए हाथ धोने के तरीकों के बीच गणना लॉग कम करने के मूल्यों में महत्वपूर्ण मतभेदों का मूल्यांकन करने के लिए एक तरह से दोहराया उपायों के विश्लेषण का प्रयोग करें और टॉक के एचएसडी परीक्षण> 36
    1. एनोवा चलाने से पहले, गोलाकारता के लिए प्रत्येक डेटासेट का आकलन करें ( जैसे, बार्टलेट परीक्षण का उपयोग करना)। एक सुधार लागू करें ( जैसे, ग्रीनहाउस-गीइसर सुधार) जब परीक्षण इंगित करता है कि sphericity का उल्लंघन 37 था।

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Representative Results

यहां, प्रोटोकॉल ( चित्रा 1 ) 18 स्वयंसेवकों के साथ पूरा किया गया था, जिन्हें प्रत्येक ई। कोलाई और Phi का उपयोग करते हुए परीक्षण किया गया था। ई। कोलाई दोनों के साथ और मिट्टी के भार के बिना और मिट्टी के लोड ( चित्रा 2 और चित्रा 3 ) के साथ Phi6 के साथ हाथ धोने के परिणाम के बीच महत्वपूर्ण अंतर पाए गए। ई। कोली के बिना मिट्टी के लोड के लिए, एचएफ़, एनएडीसीसी, और स्थिर NaOCl के साथ हाथ धोने के परिणामस्वरूप पानी के साथ हाथ धोने की तुलना में काफी अधिक लॉग कटौती (एफ (6,102) = 2.72, पी = 0.034) में हुई। मिट्टी के भार के साथ, एचएफ़ ने ई। कोलाई में पानी की तुलना में, एचडब्ल्यूडब्ल्यूएस, और एबीएचएस (एफ (6,102) = 3.94, पी <0.001) के काफी अधिक लॉग कम करने में परिणाम दिया। माइल लोड के बिना Phi6 के तरीकों के बीच कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं था (एफ (666) = 2.04, p = 0.073)। हालांकि, फिली के लिए मिट्टी के भार के साथ (एफ (6,102) = 7.01, पी <0.001), अकेले पानी में एक ग्रीकएबीएचएस या स्थिर NaOCl, और एचडब्ल्यूडब्ल्यूएस से एबीएचएस की तुलना में अधिक कमी, NaOCl को स्थिर करने और एनओसीएल उत्पन्न करने से एटर लॉग में कमी एचटीएच में एबीएचएस की तुलना में अधिक से अधिक लॉग कटौती और NaOCl को स्थिर किया गया था, और NaDCC ने नाओकल और एबीएचएस को स्थिर करने की तुलना में अधिक से अधिक लॉग में कमी की थी। हालाँकि एचएटी ने सबसे अच्छी स्थिति में अच्छी तरह से प्रदर्शन किया, हम महत्वपूर्ण परिणामों के अति-व्याख्या के विरुद्ध सावधानी बरतें, क्योंकि कई विश्वास अंतराल बड़े थे, जो 0.5 से कम लॉग से लेकर कई मामलों में 1.5 से अधिक लॉग कम करने से लेकर है।

पानी कुल्ला में, क्लोरीन का परिणाम ई। कोली के काफी अधिक से अधिक लॉग में कमी के कारण एचडब्ल्यूडब्लूएस (HWWS) के बिना कुल्ला पानी में (मिट्टी के लोड के बिना, एफ (4,68) = 331.7, पी <0.001; मिट्टी लोड, एफ (4,68 ) = 162.44, पी <0.001) ( चित्रा 4 )। यह समान पैटर्न फिली में मिट्टी के भार के बिना पाया गया ((एफ (4, 43) = 8.95, पी <0.001), जिसके परिणामस्वरूप सभी क्लोरीन समाधान होते हैंएचडब्ल्यूडब्ल्यूएस से पानी कुल्ला में फीस की भयावह रूप से बड़ी कमी फिलिप्स और मिट्टी के भार के साथ पानी कुल्ला में (दृढ़ता से (4,67) = 3.35, पी = 0.071) ( चित्रा 5 ) में दृढ़ता में कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं थे।

आकृति 1
चित्रा 1: प्रयोग अवलोकन हाथ धोने के प्रत्येक दौर के लिए किए गए पांच चरणों में शामिल हैं: 1) पीएच परीक्षण, 2) हाथों को निशाना बनाना, हाथ धोने, 4) हाथ धोने, और 5) परीक्षणों में से प्रत्येक के लिए हाथों को निरस्त करना। इस आंकड़े के एक बड़े संस्करण को देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें

चित्र 2
चित्रा 2: ई। कोलाई हैंडवैशिंग रेज़ ults। कोई हाथ धोने की तुलना में, हाथ धोने की विधियों के परिणामस्वरूप मिट्टी के लोड के बिना 1.94-3.01 ई। के कोलाई में मिट्टी के लोड के साथ 2.18-3.34 औसत लोड में कमी हुई। पानी के साथ हाथ धोना ई। कोलाई में कम से कम दोनों शर्तों (1.94 और 2.18 लॉग) में दिखाया गया था। NaDCC के साथ हाथ धोने के परिणामस्वरूप मिट्टी के भार (3.01) के बिना सबसे बड़ी कमी हुई, और एचएटी ने मिट्टी के भार (3.34) के साथ सबसे बड़ी कमी के परिणामस्वरूप चार्ट में, रेखा जीवों में प्रतिशत में कमी का प्रतिनिधित्व करती है, और त्रुटि सलाखों लॉग कम करने की मानक त्रुटि का प्रतिनिधित्व करती है। Ctrl बी, नियंत्रण बी; एचडब्ल्यूडब्ल्यूएस, साबुन से हाथ धोना; एबीएचएस, शराब आधारित हाथ सेनेटिवेटर; एचएफ़, हाई-टेस्ट हाइपोक्रोराइट; NaDCC, सोडियम डाइक्लोरोइसोक्युनूरेट; सेंट नाओकल, स्थिर सोडियम हाइपोक्लोराइट; जीन नाओक, सोडियम हाइपोक्लोराइट उत्पन्न किया। इस आंकड़े के एक बड़े संस्करण को देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें

Ve_content "fo: keep-together.within-page =" 1 "> चित्र तीन
चित्रा 3: Phi6 हाथ धोने के परिणाम कोई हाथ धोने की तुलना में, हाथ धोने की विधियों के परिणामस्वरूप मिट्टी के लोड के बिना 2.44-3.06 के Phi6 और मिट्टी के लोड के साथ 2.71-3.6 9 के औसत लॉग में कमी हुई। साबुन के साथ हाथ धोने से पीएचआई में मिट्टी के लोड (2.44) के बिना कम से कम कमी का पता चला और स्थिर नाओकेल के साथ हाथ धोने से मिट्टी के भार (2.71) के साथ सबसे कम कमी हुई। उत्पन्न NaOCl के साथ हाथ धोने से मिट्टी के लोड (3.06) के बिना सबसे बड़ी कमी हुई और साबुन से हाथ धोने से मिट्टी के भार (3.6 9) के साथ सबसे बड़ी कमी हुई। चार्ट में, रेखा जीवों में प्रतिशत में कमी का प्रतिनिधित्व करती है, और त्रुटि सलाखों लॉग कम करने की मानक त्रुटि का प्रतिनिधित्व करती है। Ctrl बी, नियंत्रण बी; एचडब्ल्यूडब्ल्यूएस, साबुन से हाथ धोना; एबीएचएस, शराब आधारित हाथ सेनेटिवेटर; एचएफ़, हाई-टेस्ट हाइपोक्रोराइट; NaDCC, सोडियम डाइक्लोरोइसोक्युनूरेट;सेंट नाओकल, स्थिर सोडियम हाइपोक्लोराइट; जीन नाओक, सोडियम हाइपोक्लोराइट उत्पन्न किया। इस आंकड़े के एक बड़े संस्करण को देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें

चित्रा 4
चित्रा 4: ई। कोलाई हाथ कुल्ला परिणाम केवल पानी से हाथ धोने की तुलना में, कुंडली के पानी में शेष ई। कोलाई के औसत लॉग में कमी 0.28-4.77 थी और मिट्टी के लोड के बिना 0.21-4.4 9 0। मिट्टी के भार के साथ और बिना दोनों, साबुन (0.28 और 0.21) के साथ हाथ धोने में सबसे छोटी कमी हुई थी। सबसे बड़ी कटौती स्थिर और उत्पन्न माओल लोड (दोनों 4.77) के बिना और उत्पन्न एचओटी के साथ NaOCl और मिट्टी लोड के साथ NaOCl उत्पन्न के साथ मनाया गया। चार्ट में, रेखा जीवों में प्रतिशत में कमी का प्रतिनिधित्व करती है, और त्रुटि बार एस का प्रतिनिधित्व करते हैंलॉग कम करने के लिए tandard त्रुटि एचडब्ल्यूडब्ल्यूएस, साबुन से हाथ धोना; एबीएचएस, शराब आधारित हाथ सेनेटिवेटर; एचएफ़, हाई-टेस्ट हाइपोक्रोराइट; NaDCC, सोडियम डाइक्लोरोइसोक्युनूरेट; सेंट नाओकल, स्थिर सोडियम हाइपोक्लोराइट; जीन नाओक, सोडियम हाइपोक्लोराइट उत्पन्न किया। इस आंकड़े के एक बड़े संस्करण को देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें

चित्रा 5
चित्रा 5: Phi6 हाथ कुल्ला परिणाम। पानी से हाथ धोने की तुलना में, कुंडली में शेष फिआ 6 की औसत लॉग में 1.26-2.02 की मात्रा मिट्टी के भार के बिना और मिट्टी के भार के साथ 1.30-2.20 थी। मिट्टी के भार के साथ, साबुन (1.26) के साथ हाथ धोने में सबसे छोटी कमी हुई। मिट्टी के भार के बिना, एचएफ़ के परिणामस्वरूप सबसे छोटा कमी (2.02) सबसे बड़ी कटौती को नाडीसीसी के साथ मिट्टी के लोड के साथ और बिना दोनों को देखा गया(2.02 और 2.20) चार्ट में, रेखा जीवों में प्रतिशत में कमी का प्रतिनिधित्व करती है, और त्रुटि सलाखों लॉग कम करने की मानक त्रुटि का प्रतिनिधित्व करती है। एचडब्ल्यूडब्ल्यूएस, साबुन से हाथ धोना; एबीएचएस, शराब आधारित हाथ सेनेटिवेटर; एचएफ़, हाई-टेस्ट हाइपोक्रोराइट; NaDCC, सोडियम डाइक्लोरोइसोक्युनूरेट; सेंट नाओकल, स्थिर सोडियम हाइपोक्लोराइट; जीन नाओक, सोडियम हाइपोक्लोराइट उत्पन्न किया। इस आंकड़े के एक बड़े संस्करण को देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें

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Disclosures

लेखकों ने घोषणा की कि उनके पास कोई प्रतिस्पर्धात्मक वित्तीय हित नहीं है

Acknowledgments

यह काम संयुक्त राज्य अमेरिका की अंतर्राष्ट्रीय विकास एजेंसी, विदेशी आपदा सहायता कार्यालय (एआईडी-ओडीएए-ए -15-टारिस 26) द्वारा समर्थित था। मार्लीन वूल्फ को राष्ट्रीय विज्ञान फाउंडेशन (अनुदान 09660 9 3) द्वारा समर्थित किया गया था।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Soap bar Dove White Beauty Bar soap
Alcohol-based hand sanitizer Purell Advanced Instant Hand Sanitizer with 70% Ethyl Alcohol
HTH Powder Acros Organics 300340010
NaDCC Powder Medentech Klorsept granules
NaOCl Solution Acros Organics 419550010
Electrochlorinator AquaChlor
Iodometric titrator Hach 1690001
Bovine serum albumin MP Biomedicals NC0117242
Tryptone Fisher BP1421-100
Bovine Mucin EMD Milipore 49-964-3500MG
0.22 µm Filter EMD Milipore GVWP04700
NaCl Fisher BP358-1
Skin pH probe Hanna Instruments H199181
Large Whirlpak Sample Bag Nasco B01447WA
Small Whirlpak Sample Bag Nasco B01323WA
Funnel bottle Thermo Scientific 3120850001 You may drill an appropriately sized hole in the lid of a bottle to form a funnel that will dispense water at the appropriate flow rate
Ethanol ThermoScientific 615090010 Mix with water to produce 70% ethanol
Spray bottle Qorpak PLC06934
E. coli ATCC 25922
LB Broth Fisher BioReagents BP1426-2
LB Agar Fisher BioReagents BP1425-500
Sterile loop Globe Scientific 22-170-204
Phi6 HER 102
Nutrient broth BD Difco BD 247110
GeneQuant 100 Spectrophotometer General Electric 28-9182-04
Sodium thiosulfate Fisher Chemical S445-3
Membrane filter (47 mm, 0.45 µm) EMD Millipore HAWP04700
m-ColiBlue24 broth media EMD Millipore M00PMCB24
Petri dish with pad (47 mm) Fisherbrand 09-720-500
Vacuum Manifold Thermo Scientific/Nalgene 09-752-5
Filter funnels Thermo Scientific/Nalgene 09-747
Pseudomonas syringae HER 1102
Phosphate Buffered Saline Thermo Scientific 10010031 Solution may also be mixed from source compounds according to any basic recipe

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Wolfe, M. K., Lantagne, D. S. A Method to Test the Efficacy of Handwashing for the Removal of Emerging Infectious Pathogens. J. Vis. Exp. (124), e55604, doi:10.3791/55604 (2017).

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