Summary
نقدم طريقة مفصلة لدراسة علم وظائف الأعضاء المشيمة الإنسان في الجسم الحي على المدى. الأسلوب يجمع بين أخذ عينات الدم من السفن الواردة والصادرة على الجانبين الأم والجنين من المشيمة مع قياسات الموجات فوق الصوتية من حجم تدفق الدم والأوعية الأنسجة المشيمة.
Abstract
المشيمة البشرية غير قابلة للوصول للغاية للبحث في حين لا يزال في الرحم . وبالتالي فإن الفهم الحالي لعلم وظائف الأعضاء المشيمة الإنسان في الجسم الحي يعتمد إلى حد كبير على الدراسات الحيوانية، على الرغم من التنوع الكبير بين الأنواع في التشريح المشيمة، ديناميكا الدم ومدة الحمل. الغالبية العظمى من الدراسات المشيمة البشرية هي دراسات نضح خارج الجسم الحي أو في المختبر دراسات الأرومة الغاذية. على الرغم من الدراسات في المختبر والنماذج الحيوانية ضرورية، استقراء النتائج من هذه الدراسات إلى المشيمة البشرية في الجسم الحي غير مؤكد. ونحن نهدف إلى دراسة علم وظائف الأعضاء المشيمة البشرية في الجسم الحي على المدى، وتقديم بروتوكول مفصل من هذه الطريقة. استغلال الدخول داخل البطن إلى الوريد الرحمي فقط قبل شق الرحم خلال العملية القيصرية المخطط لها، نقوم بجمع عينات الدم من السفن الواردة والصادرة على الجانبين الأم والجنين من المشيمة. عند الجمع بين كونقياسات الترشيح من عينات الدم مع قياسات تدفق الدم حجم، ونحن قادرون على تحديد المشيمة وامتصاص الجنين والافراج عن أي مركب. وعلاوة على ذلك، عينات الأنسجة المشيمة من نفس أزواج الأم والجنين يمكن أن توفر قياسات كثافة الناقل والنشاط والجوانب الأخرى من وظائف المشيمة في الجسم الحي . من خلال هذا الاستخدام التكاملي لطريقة أخذ العينات من 4 سفن ونحن قادرون على اختبار بعض المفاهيم الحالية لنقل المغذيات المشيمة والتمثيل الغذائي في الجسم الحي ، سواء في حالات الحمل العادية والمرضية. وعلاوة على ذلك، فإن هذه الطريقة تمكن من تحديد المواد التي يفرزها المشيمة لدورة الأمهات، والتي يمكن أن تكون مساهمة هامة في البحث عن المؤشرات الحيوية للخلل المشيمة.
Introduction
وفقا للمعاهد الوطنية للصحة، الولايات المتحدة الأمريكية، المشيمة هو الجهاز الأقل تفهما في جسم الإنسان 1 ، 2 ، 3 . فمن الصعب الوصول إلى ودراسة المشيمة البشرية في الجسم الحي دون فرض مخاطر غير أخلاقية على الحمل المستمر. ولذلك، فإن دراسات وظيفة المشيمة في الإنسان تستند إلى حد كبير على نماذج في المختبر و فيفو السابقين . وقد أجريت غالبية الدراسات السابقة في الجسم الحي من نقل المشيمة والتمثيل الغذائي في الحيوانات 4 ، 5 ، 6 . ومع ذلك، كما هيكل المشيمة وظائف تختلف اختلافا كبيرا بين الأنواع، يجب أن يتم استقراء النتائج من الحيوانات للإنسان بحذر. فقط عدد قليل من الإنسان أصغر في الدراسات المجراة وقد حققت المشيمة وامتصاص الجنين والنقل في ظل الطبيعي الفسيولوجيةولم يستكشف أي منها النقل المتكامل للعديد من المركبات 7 و 8 و 9 و 10 و 11 و 12 و 13 . وتوضح هذه الدراسات الأساسية أنه في الدراسات المجراة من المشيمة البشرية هي ممكنة، وأنها قد تخدم عدة أغراض. أولا، المفاهيم الحالية لوظائف المشيمة المستمدة أساسا من في المختبر ، خارج الجسم الحي والحيوان دراسات يمكن اختبارها في بيئة الإنسان، وبالتالي توفير رؤية جديدة وأكثر تحديدا في المشيمة البشرية. ثانيا، خصائص المشيمة مختلة المرتبطة نمو الجنين الشاذة، تسمم الحمل، وسكري الأم، ومتلازمة التمثيل الغذائي وغيرها من الاضطرابات الأيضية الأمهات يمكن وصفها بشكل أفضل. ثالثا، الإنسان في الدراسات المجراة توفر فرصة لتطوير التشخيصتيك والأدوات التنبؤية من وظيفة المشيمة.
على هذه الخلفية كنا تهدف إلى إنشاء مجموعة شاملة من البيانات الفسيولوجية للتحقيق وظيفة المشيمة الإنسان في الجسم الحي. خلال عملية قيصرية المخطط لها، نستغل الوصول داخل البطن إلى الوريد الرحمي لجمع عينات الدم من السفن الواردة والصادرة على الجانبين الأم والجنين من المشيمة (طريقة أخذ العينات 4-السفينة). وتستخدم هذه العينات لحساب الاختلافات تركيز الشرايين المقترنة من المواد الغذائية وغيرها من المواد 14 . بالإضافة إلى ذلك، نقيس حجم تدفق الدم على جانبي المشيمة عن طريق الموجات فوق الصوتية. وبالتالي، امتصاص المشيمة والجنين من أي مركب قد يكون كميا. وعلاوة على ذلك، فمن الممكن لتحديد المواد الصادرة عن المشيمة إلى الأمهات والجنين التعاميم 15 ، 16 ، 17 . عند الجمعد مع المعلمات السريرية للأم والطفل، وتحليلات المشيمة والأنسجة الأخرى ذات الصلة، وهذا الأسلوب لديه القدرة المثيرة لدمج العديد من جوانب وظائف المشيمة في الجسم الحي في نفس أزواج الأم والجنين.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
تمت الموافقة على الدراسة من قبل مسؤولي حماية البيانات في مستشفى جامعة أوسلو واللجنة الإقليمية لأخلاقيات البحوث الطبية والصحية، جنوب النرويج 2419/2011. ووقع جميع المشاركين موافقة خطية مستنيرة عند الإدراج.
1 - الأعمال التحضيرية
ملاحظة: ويرد الجدول الزمني للإجراءات في الشكل 1 .
الشكل 1 : مخطط انسيابي يوضح التوقيت والموظفين المشاركين في إجراءات أخذ العينات المكونة من 4 سفن.
لون واحد يمثل شخص واحد. ويرد وصف تفصيلي لهذه الطريقة في البروتوكول. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
- العاملين
- إعداد المعدات، 50 مل من الجليد الباردة 1 M الفوسفات مخزنة المالحة (بس)، 25 مل من الحمض النووي الريبي الباردة استقرار الحل و 5 × 0.5 مل من الأمثل مجمع درجة الحرارة القطع (أكتوبر). تسمية فاكوتينرز والأنابيب. انظر قائمة مؤقتة من المعدات.
2. الخصائص الأمومية
- تسجيل الخصائص السريرية وغير السريرية الأمهات في إدراج وتكرار الأسئلة ذات الصلة وليبما في ذلك الوزن، في وقت التسليم. تسجيل مدة فترة الصيام قبل العملية القيصرية، وأي حلقات خافضة للضغط تحدث أثناء الجراحة.
ملاحظة: تضمين الحد الأدنى من البيانات السريرية الأمهات ذكرت في منشور صدر مؤخرا من الحمل العالمي كولابوراتوري (كولاب). تتضمن هذه المقالة أيضا بعض الجوانب الهامة جدا في اختيار مجتمع الدراسة وينبغي معالجتها أثناء التخطيط للدراسة 18 . - النظر في تسجيل الخصائص الأبوية، بما في ذلك الإثنية والعمر ومؤشر كتلة الجسم (بمي).
3. الموجات فوق الصوتية
- إجراء فحص الموجات فوق الصوتية دوبلر في يوم التسليم، مع النساء في حالة الصيام. إجراء الفحص خلال فترة من الاجهاد الجنين، مع امرأة في موقف شبه ضعيف، يميل قليلا عكسيا عكسيا إلى المنطقة ذات الاهتمام من أجل تجنب ضغط الشريان الأبهر والوريد الأجوف. مراقبة الإخراج فيمن خلال المؤشرات الميكانيكية والحرارية على الشاشة.
- الوريد السري
- تصور الوريد السري في ترانزكتيون سهمي أو منحرف من بطن الجنين. قياس القطر الداخلي للسفينة في الجزء المستقيم من الوريد السري داخل البطن، قبل أي فروع مرئية. استخدام العادية B- وضع وتصور السفينة في زاوية عمودي عمودي لقياسات القطر والحفاظ على العديد من الإطارات المثلى للقياسات في وقت لاحق لتقليل تأثير التغيرات قطرها نابض.
- كرر القياسات خمس إلى عشر مرات 19 .
- في نفس الموقع، استخدم الموجات فوق الصوتية دوبلر وضبط المسبار للحصول على زاوية التجفير منخفضة قدر الإمكان (دائما <30 درجة) من أجل قياس متوسط السرعة القصوى (تامكس). الحصول على سرعة على مدى 3-5 سنوات (تدفق غير نابض).
- تصور الوريد السري في ترانزكتيون سهمي أو منحرف من بطن الجنين. قياس القطر الداخلي للسفينة في الجزء المستقيم من الوريد السري داخل البطن، قبل أي فروع مرئية. استخدام العادية B- وضع وتصور السفينة في زاوية عمودي عمودي لقياسات القطر والحفاظ على العديد من الإطارات المثلى للقياسات في وقت لاحق لتقليل تأثير التغيرات قطرها نابض.
- الشريان الرحمي
- استخدام دوبلرالموجات فوق الصوتية لتصور الشريان الرحمي كما يعبر الشريان الحرقفي الخارجي، مباشرة بعد فروعه من الشريان الحرقفي الداخلي. اضبط المسبار في هذا الموقع للحصول على زاوية انحناء منخفضة (دائما <30 °) وقياس تامكس. الحصول على سرعة وسرعة متوسطة من ثلاث دورات القلب.
- وبما أنه من غير المحتمل أن تحصل على زاوية عمودي في نفس الموقع الذي تقاس فيه تامكس، اتبع السفينة بشكل منفصل للحصول على زاوية صحيحة لقياسات القطر أقرب إلى مواقع قياسات القطر كما يمكن تحقيقه. استبعاد القياسات القطر إذا أي فروع مرئية قبالة قبالة هذا الموقع كما تم تقييمها من قبل الموجات فوق الصوتية دوبلر اللون.
- استخدام العادية B- وضع وتصور السفينة في زاوية عمودي عمودي لقياسات القطر والحفاظ على العديد من الإطارات المثلى للقياسات في وقت لاحق لتقليل تأثير التغيرات قطرها نابض.
- كرر القياسات خمس إلى عشر مرات 19 .
- لاحظ موقف المشيمة.
4. 4-سفينة الدم أخذ العينات
ملاحظة: يتم توضيح الجدول الزمني للإجراءات في الشكل 1 ويوضح لمحة عامة عن العينات في الشكل 2 .
الشكل 2 : رسم تخطيطي من الأوعية الدموية المشيمة ومواقع أخذ العينات.
في طريقة أخذ العينات من 4 سفن يتم سحب عينات الدم من الوريد الرحمي، والشريان الكعبري (كبديل لشريان الرحم) والشرايين والوريد السري. يتم قياس تدفق الدم في الشريان الرحمي والوريد السري بالموجات فوق الصوتية. يتم جمع عينات الأنسجة من المشيمة. التوضيح: Øystein H. هورغمو، جامعة أوسلو.5847fig2large.jpg "تارجيت =" _ بلانك "> الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
- إجراءات السلامة
- توفير جميع الموظفين في مسرح العمليات مع قفازات، الدعاوى فرك الجراحية، أقنعة وأغطية الرأس.
- توفير الجراحين وموظفي البحوث في اتصال مع حقل العملية مع الدعاوى فرك الجراحية، والأقنعة، وأغطية الرأس والعباءات والقفازات المزدوجة. النظارات اختيارية.
- توفير الموظفين التعامل مع عينات الدم مع القفازات.
- توفير الموظفين التعامل مع عينات المشيمة مع القفازات والقناع الجراحي. التجانس يتطلب استخدام اغطية.
- إعداد في مسرح العمليات
- إعطاء إحاطة وتسليم المعدات لجميع الموظفين الذين سيساعدون أخذ العينات قبل بدء الجراحة.
- معالجة طبيب التخدير وممرضة التخدير الذين سيساعدون على الوصول الطرفية والشرياني الطرفية اللازمة، وضمان أنلا يتم إعطاء السوائل عن طريق الوريد قبل أخذ العينات.
- إعطاء ثلاثة محاقن (10 مل) دون إبر إلى الشخص الذي يساعد في عينة الوريد أنتيكوبيتال واثنين من المحاقن (واحد 20 مل واحد 10 مل) وحقنة غازات الدم واحدة (مع الهيبارين) إلى الشخص الذي يساعد في الشريان الكعبري.
- إعداد محاقن معقمة (20 مل)، وخمسة محاقن معقمة (10 مل)، وثلاثة "إبرة فراشة" واثنين من محاقن غازات الدم لحقل العملية.
- الوصول إلى الأوعية الدموية.
- اتبع الإجراء القياسي قبل العملية القيصرية لضمان الطرفية عن طريق الوريد (الرابع) الوصول.
ملاحظة: الوريد أنتيكوبيتال هو الأفضل لأنه من الأسهل لرسم عينات من هذا الموقع. - توطين الشريان الكعبري في المعصم عن طريق الموجات فوق الصوتية أو عن طريق ملامسة. بعد 0.5 مل من تحت الجلد يدوكائين تسكين، وضع خط الشرايين في الشريان الكعبري. التخلي عن أخذ العينات من هذا الموقع في حالة ثلاثة إدراج فاشلة، أوإذا كانت المرأة تعاني من الألم أثناء الإدراج.
ملاحظة: إجراء الإجراء الجراحي من العملية القيصرية وفقا للإجراءات القياسية. ولا یبین أدناه سوى التعدیلات اللازمة لإجراء المعاینة.
- اتبع الإجراء القياسي قبل العملية القيصرية لضمان الطرفية عن طريق الوريد (الرابع) الوصول.
- عينات الدم الأم
ملاحظة: الحصول على جميع عينات الدم الأم ثلاثة (الوريد الرحمي، والشريان الكعبري والوريد أنتيكوبيتال) في وقت واحد قبل شق الرحم.- لورم الرحم، بعد فتح تجويف البطن، واستخدام ضام لرفع جدار البطن وفضح الفروع الرئيسية من الأوردة الرحمية على الجانبين الأمامي الوحشي للرحم. الحصول على الدم من فروع الوريد الرحمي في نفس الجانب كما المشيمة كلما كان ذلك ممكنا أو استخدام أبرز الضفيرة الوريد إذا كان المشيمة يقع في خط الوسط الرحم.
- إدراج إبرة فراشة على حقنة غازات الدم في الوريد الرحمي في زاوية من حوالي 30 درجة وجمع الدم من خلال طموح لطيف لتجنبانحلال الدم. في حين أن بعناية تأمين الموقف الرابع من إبرة الفراشة، استبدال محقنة غازات الدم مملوءة من قبل 20 مل و 10 مل حقنة على التوالي.
ملاحظة: أفضل ضمان الوصول الأمثل عند الوقوف على الجانب المقابل من الوريد الرحم المختار.
- إدراج إبرة فراشة على حقنة غازات الدم في الوريد الرحمي في زاوية من حوالي 30 درجة وجمع الدم من خلال طموح لطيف لتجنبانحلال الدم. في حين أن بعناية تأمين الموقف الرابع من إبرة الفراشة، استبدال محقنة غازات الدم مملوءة من قبل 20 مل و 10 مل حقنة على التوالي.
- للشريان الكعبري، نضح من خط داخل الشرايين. تجاهل أول 5 مل، ثم نضح 3 مل في حقنة الهيبارين لتحليل غازات الدم، تليها 3 مل في اثنين من المحاقن (20 + 10 مل).
- لالوريد أنتيكوبيتال، نضح بلطف من القسطرة في الوريد. تجاهل أول 5 مل، ثم نضح 30 مل في ثلاثة محاقن (10 مل).
- إجراء فحص نهائي لموقع أخذ العينات على الوريد الرحمي قبل البدء في إغلاق البطن.
- لورم الرحم، بعد فتح تجويف البطن، واستخدام ضام لرفع جدار البطن وفضح الفروع الرئيسية من الأوردة الرحمية على الجانبين الأمامي الوحشي للرحم. الحصول على الدم من فروع الوريد الرحمي في نفس الجانب كما المشيمة كلما كان ذلك ممكنا أو استخدام أبرز الضفيرة الوريد إذا كان المشيمة يقع في خط الوسط الرحم.
- عينات دم الجنين
- عندما يولد الطفل، على الفور نضح الدم من الشريان السري، دون لقط الحبل السري أو تسليم المشيمة. بدء الطرافةساعة المحقنة لتحليل غازات الدم، واتبع مع ثلاثة محاقن 10 مل إذا كان ذلك ممكنا.
- عندما يتم تأمين عينات الشرايين، المشبك الحبل وتسليم الطفل إلى القابلة قبل أخذ العينات من الوريد السري (غازات الدم و 20 + 10 مل المحاقن).
ملاحظة: الحصول على جميع العينات السري في غضون ثوان من الولادة ومع المشيمة في الموقع إلا إذا كان قد فصل تلقائيا. - اتبع التوصيات النرويجية على لقط الحبل في وقت متأخر. في حالة الطفل المضطرب، المشبك و قطع الحبل فورا و يد الطفل إلى القابلة و حديثي الولادة.
- معالجة عينات الدم
- وضع محاقن غازات الدم على الجليد أثناء إعداد بقية عينات الدم، وتحليلها في محلل غازات الدم في غضون 5 دقائق.
- نقل عينات الدم فورا إلى فاكوتينرز ووضع أنابيب البلازما على الروك لمدة 1-2 دقائق قبل وضعها على الجليد. ترك أنابيب المصل على العملأتوري مقاعد البدلاء لتسوية لمدة 30 دقيقة.
ملاحظة: هذه خطوة حاسمة في الإجراء الذي يحتاج إلى مزيد من الاهتمام لأن العينات من جميع المواقع الخمسة يجب أن تكون مستعدة في وقت واحد لضمان نوعية جيدة. - الطرد المركزي عينات البلازما في أقرب وقت ممكن، وضمن 30 دقيقة، في 6 درجات مئوية، 2500 x ج لمدة 20 دقيقة.
- بعد 30 دقيقة، الطرد المركزي عينات المصل في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقيقة في 2500 × ز.
- قسامة سوبيرناتانتس بعناية إلى 2 مل أنابيب كريو، وترك 0.5 مل من طاف فوق بيليه لضمان البلازما الصفائح الدموية الحرة.
- تخزين العينات في -80 درجة مئوية.
5. مجموعة من الأنسجة المشيمة
- وضع شقة المشيمة أسفل على الجليد الجليد تشريح صينية في أقرب وقت ممكن بعد أن تم تسليمها. تصوير وقياس أطول قطر وقطرها في 90 درجة.
- تزن المشيمة.
- سجل الوزن، وهما أقطار، أي زروس علم الأمراض، وعدد من السفن في الحبل والفاصل الزمني من التسليم إلى متى وضعت المشيمة على الجليد.
ملاحظة: إرسال المشيمة إلى الفحص المرضي إذا أشار سريريا. - وضع المشيمة مع سطح الأم تواجه ما يصل وتحديد 4-5 مواقع أخذ العينات تقع عشوائيا في كل رباعي من المشيمة، وتجنب مجالات علم الأمراض الصريح. إزالة الساقط باستخدام مقص لخفض بعيدا 3-5 ملم من سطح الأمهات. جمع 1-2 سم 3 قطعة من الأنسجة الزغابة من كل موقع.
- غسل الأنسجة التي تم جمعها بلطف في 50 مل من 1M الباردة بس. تقسيم إلى عدة قطع من كل موقع أخذ العينات وقسامة.
ملاحظة: حجم قطع المشيمة يعتمد على التحليلات المخطط لها. - إضافة أليكوتس من 0.1 - 0.5 سم 3 عينات الأنسجة إلى 5 أنابيب كريو والتجميد المفاجئة في النيتروجين السائل.
- إضافة قطع صغيرة من 0.1 - 0.2 سم 3 إلى أنبوب مع 25 مل من الحمض النووي الريبي حل الاستقرار. تخزين في 46؛ C لمدة 24 ساعة، وتجاهل الحل استقرار الحمض النووي الريبي واستبدالها. تجميد.
- إضافة قطعة من 0.5 سم 3 إلى 5 أنابيب كريو مع 0.5 مل من أكتوبر، أعلى مع أكتوبر، مزيج وتجميد.
- تخزين العينات في -80 درجة مئوية حتى التحليل.
ملاحظة: بيرتون وآخرون. يوفر نظرة عامة ممتازة من الجوانب العملية لأخذ العينات المشيمة اعتمادا على التحليلات المخطط لها. 20 النظر في إعداد الأنسجة المتبقية لعزل الأغشية الصغيرة والأغشية القاعدية، وجمع الأنسجة الساقط عن طريق تقنية شفط فراغ. 21 ، 22
6. خصائص حديثي الولادة
- تسجيل خصائص حديثي الولادة، بما في ذلك أبغار النتيجة (1 و 5 و 10 دقيقة) والجنس والوزن والطول وعمر الحمل والقبول في وحدة العناية المركزة للمواليد (طول ونتائج الإقامة).
- النظر في قياس تكوين الجسم حديثي الولادة عن طريق قياسات أنثروبوميتريك، تهجير الهواءأو منحنى قياس الأشعة السينية المزدوجة. 23 ، 24
7 - الحسابات
- نفترض تكوين الدم مماثلة في الشريان الكعبري والرحمي وحساب ورتي بلاسنتال شرياني الفرق الفرق.
أوتيروبلاسنتال الشرياني تركيز الفرق = C A - C V
الوريدي السري - الفرق تركيز الشرايين = C الخامس - C أ
حيث C هو التركيز مع سوبسكريبتس: A، والشريان الكعبري. الخامس، الوريد الرحمي. v الوريد السري و، الشريان السري. - حساب حجم تدفق الدم، مل / دقيقة (س):
حيث D هو قطر السفينة (سم)، تامكس هو الوقت المتوسط السرعة القصوى و h هو معامل لملامح سرعة الدم المكانية. استخدام 0.5 كمعامل الوريد السري و0.6 للشريان الرحمي 25 ، 26 . - حساب امتصاص المشيمة والافراج وفقا لمبدأ فيك:
امتصاص أوتيروبلاسنتال = ( C A - C V ) x قم
امتصاص الجنين = ( C v - C a ) x Q f
سوبسكريبتس: m، الأم و f، الجنين.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
طريقة أخذ العينات من 4 سفن قابلة للتطبيق في الممارسة السريرية، وحصلنا بنجاح على عينات دم من 209 أم / رضيع. في 128 من هذه حققنا أيضا لقياس حجم تدفق الدم. تم الحصول على عينات كاملة 4-السفينة وقياسات تدفق نوعية جيدة من كل من الأم والجنين الأوعية في 70 أزواج الأم والجنين ( الشكل 3 ). وبالإضافة إلى ذلك، قمنا حتى الآن بجمع عينات الدم والمشيمة من 30 مريضا قبل التسمم. لقد نشرت سابقا مقالات عن نقل المشيمة البشرية من المواد المغذية، وكذلك الافراج المشيمة من العوامل فعال في الأوعية، مما يدل على تطبيقين من طريقة 14 ، 15 ، 16 .
مثال على كيفية استخدام طريقة 4-أوسيل لدراسة نقل المشيمة
هناك شريان كبيرفروق الغلوكوز الفرن على كلا الجانبين من المشيمة مما يدل على في الجسم الحي الرحم والجنين امتصاص الجلوكوز ( الجدول 1 ). نقل المشيمة من الجلوكوز يعتمد على الجنين الأمهات الجنين التدرج، وبالتالي على مستويات الجلوكوز الأمهات. ومع ذلك، فقد أثبتنا سابقا أن هذا التدرج، وبالتالي نقل الجلوكوز، ويتأثر بشكل كبير أيضا من قبل مستويات الأنسولين الجنين واستهلاك الجلوكوز. هذا هو مثال على كيفية هذا الأسلوب يوضح التفاعل بين الأم والجنين المهم 14 .
| وعاء | الجلوكوز مليمول / لتر | ف قيمة * |
| الشريان الكعبري | 4.49 [4.22، 4.84] | |
| الوريد الرحمي | 4.23 [3.94، 4.53] | |
| الوريد السري | 3.78 [3.52، 4.06] | |
| الشريان السري | 3.24 [2.95، 3.56] | |
| الاختلافات المقترنة | ||
| الشريان الشعاعي - الوريد الرحمي | 0.29 [0.13، 0.41] | <0.001 |
| الشريان السري - الوريد السري | 0.54 [0.29، 0.76] | <0.001 |
| شعاعي، الشريان، -، أومبيليكال، أرتيري | 1.25 [1.03، 1.51] | <0.001 |
الجدول 1: متوسط [Q1، Q3] التركزات والاختلافات أرتيريوفينوس الجلوكوز
* ويلكوكسون توقيع اختبار الرتبة
ويعتقد أن امتصاص الجلوكوز الجنين من (الافراج المشيمي إلى) الدورة الدموية السري أن تعتمد ليس فقط سن التدرج الأم الجنين، ولكن على تدفق الدم المشيمة 5 . وبالمثل، قد يكون من المناسب لدراسة امتصاص الجلوكوز الجنين كدالة من وزن المشيمة أو وزن الولادة. في عدد = 128 وجدنا متوسط [و 1، Q3] مجموع تدفق الوري السري من 196.2 [158.3، 232.2] مل / دقيقة، وحساب متوسط [Q1، Q3] الجنين امتصاص الجنين من (الافراج المشيمة إلى) الدورة الدموية السري 0.10 [0.05، 0.15] مليمول / دقيقة. تطبيع لوزن الولادة هذا يساوي 0.03 [0.02، 0.04] (مليمول / دقيقة) / كغ. المشيمة تطلق 0.16 [0.10، 0.26] (مليمول / دقيقة) لكل كغ المشيمة.
مثال على كيفية استخدام طريقة 4-السفينة لدراسة امتصاص المشيمة
وتشير الدراسات الحيوانية إلى أن حمض الجلوتاميك مهم في كل من التحول بين الأحماض الأمينية في المشيمة والكبد الجنين، وكوقود مؤكسد في مسارات الأيض الأخرى 27 . باستخدام طريقة أخذ العينات المشيمة 4-السفينة قمنا بدراسة شتيروبلاسنتال والسري شرياني الخلافات من حمض الجلوتاميك في البشر ( الجدول 2 ). وجدنا امتصاص المشيمة (وبالتالي الافراج الجنين) من حمض الجلوتاميك من الدورة الدموية السري. وعلاوة على ذلك وجدنا امتصاص المشيمة من حمض الجلوتاميك من الدورة الدموية الأمهات. هذا امتصاص المشيمة من كل من التعاميم هو مثال على كيفية طريقة 4-سفينة يمكن استخدامها لإثبات في الجسم الحي في الإنسان أن استقلاب المشيمة من العناصر الغذائية هي جزء من تنظيم نقل ترانسبلاسنتال.
| وعاء | حمض الجلوتاميك μmol / L | ف قيمة * |
| الشريان الكعبري | 61.5 [51.0، 77.7] | |
| الوريد الرحمي | 51.0 [36.3، 65.0] | |
| الوريد السري | 39.3 [24.7، 52.8] | |
| الشريان السري | 44.7 [33.1، 59.3] | |
| الاختلافات المقترنة | ||
| شعاعي الشريان الرحمي الوريد | 10.4 [1.6، 21.2] | <0.001 |
| الشريان السري-الوريد البوقي | -8.7 [-16.0، 0.2] | <0.001 |
الجدول 2: متوسط [Q1، Q3] تركيزات و أرتيريوفينوس الاختلافات من حمض الجلوتاميك
* ويلكوكسون توقيع اختبار الرتبة
مثال على كيفية استخدام طريقة 4-السفينة لدراسة الافراج المشيمة
وقد ثبت أن المشيمة يفرز البروجسترون ومن أجل التحقق من صحة لدينا طريقة 4-السفينة على الجانب الأمهات من المشيمة، وقياسنا في الجسم الحي الافراج عن هرمون البروجسترون في تي آرإم 28 . لقد وجدنا الافراج المشيمة كبيرة من هرمون البروجسترون إلى الدورة الدموية الأم ( الجدول 3 ). ويوضح الفرق الشرايين الوريدية كيف يمكن استخدام طريقة أخذ العينات 4 الأوعية المشيمة للكشف عن المواد الصادرة عن المشيمة، وذات الصلة للغاية عند دراسة حالات الحمل المرضية.
| وعاء | البروجسترون نمول / L | ف قيمة * |
| الشريان الكعبري | 678 [514، 971] | |
| الوريد الرحمي | 1852 [1059، 2786] | |
| الاختلافات المقترنة | ||
| شعاعي الشريان الرحمي الوريد | -1187 [-1855، -404] | ف <0.001 |
ضمن الصفحة = "1"> الجدول 3: متوسطات [Q1، Q3] تركيزات و [إتروبلسنتل] [أرتيريوفنوس] فرق من [بروجسترون]
* ويلكوكسون توقيع اختبار الرتبة
الشكل 3 : الرسوم البيانية والتوضيح للمشاركين المتضمنين والمفقودين.
أ. يظهر إدراج المشاركين، مما يدل على أن المشاركين فقدوا أساسا بسبب بدء العمل قبل العملية القيصرية أو عدم وجود عدد كاف من الموظفين لإجراء الدراسة. B. من أصل 179 امرأة مع الحمل الطبيعي (الأزرق) تم الحصول على عينات كاملة من 4 أوعية الدم في 162 (91٪) (عينات الدم الجنينية غير مكتملة: أسود، عينات الدم الأم غير كاملة: رمادي). لم يتم تضمين واحد وخمسين (28٪) من المشاركين لقياسات الموجات فوق الصوتية بسبب القيود اللوجستية. من 12تم الحصول على 8 مشاركين (72٪) للموجات فوق الصوتية، قياسات تدفق الدم في الجانب الجنيني للمشيمة في جميع المشاركين (الضوء الأخضر)، في حين تم الحصول على قياسات تدفق الدم الكامل في كل من الجانب الأم والجنين في 77 (60٪)، (أخضر غامق). التوضيح: Øystein H. هورغمو، جامعة أوسلو. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
طريقة أخذ العينات من 4 أوعية للمشيمة ذات صلة بثلاثة أغراض رئيسية. أولا، يمكن استخدامه لدراسة كيفية تناول المواد المحددة من قبل المشيمة على الجانب الأمهات وربما نقلها إلى الدورة الدموية السري والجنين، كما يتضح من الجلوكوز والدراسات الأحماض الأمينية لدينا. ثانيا، طريقة ذات صلة كبيرة لدراسة المواد التي تنتجها المشيمة وأفرج عنه إلى الأمهات أو الجنين التعميمات، كما يتضح من نتائج هرمون البروجسترون. ثالثا، قد يكون من المفيد لدراسة كيفية الجنين في الجسم الحي يلغي النفايات خلال النمو السريع وإعادة عرض الأنسجة.
الخطوات الحاسمة والمسائل اللوجستية لطريقة 4-السفينة
وقد استخدمت سابقا المشيمة 4 أخذ العينات سفينة لتحديد نقل المشيمة من المغذيات الكبيرة في الجسم الحي في حالات الحمل الفسيولوجية العادية 8 ، 10 ،سس = "كريف"> 12، ولكن مع عدد محدود من الموضوعات الدراسية. الاستخدام المحدود لأخذ العينات 4-السفينة هو على الأرجح بسبب الخدمات اللوجستية تطلبا من هذا الإجراء. التنسيق الناجح بين المريض والباحثين والموظفين في أقسام الجنين الطب والتوليد والتخدير أمر ضروري من أجل توظيف هذه الطريقة. ونحن نعتقد أنه كان من المزايا الكبيرة أن العديد من المحققين الرئيسيين هم أطباء التوليد، ومعرفة الروتين السريري والموظفين الرئيسيين. وبالتالي تم تنفيذ إجراءات الدراسة جنبا إلى جنب مع الممارسة السريرية اليومية. من خلال تنسيق وتأمين كل خطوة من الإجراءات، لقد حصلنا على عينات من أكثر من 200 الأم / حديثي الولادة-أزواج. وعلاوة على ذلك، كانت استراتيجيتنا هي الإبقاء على إجراءات أخذ العينات على أيدي قليلة لأن هناك تحديات تقنية في الإجراءات التي تعتبر حاسمة بالنسبة للنتيجة الناجحة لأخذ العينات، والكثير من العينات يمكن أن تقدم مصادر لا لزوم لها من التغيرات في البيانات. Consequإنتلي، نوصي بأن جميع الفحوص السونوغرافية ينبغي أن يؤديها نفس الفاحص باستخدام نفس آلة الموجات فوق الصوتية. وينبغي اختيار المعدات بعناية، حيث أن حل جدار الوعاء أمر بالغ الأهمية. أما الشرايين الرحمية في الثلث الثالث من الحمل فهي تحديا تقنيا بشكل خاص لقياسها لأن حجم الرحم ومحتواه يجعل من الصعب الحصول على كل من زاوية التعامد العمودي المستخدمة لقياسات القطر، وزاوية الانحراف المنخفضة لقياس سرعة التدفق في نفس الموقع بالضبط. وعلاوة على ذلك، يتطلب أخذ عينات الدم الناجحة تحديد موقع أخذ العينات المناسب من الوريد الرحم وطموح لطيف. على الجانب السري الهشاشة من كريات الدم الحمراء الجنين يتطلب اهتماما خاصا لقوة الطموح. ومن تجربتنا أن تأخر التسليم أو الإجهاد الطفيف للرضيع كان مرتبطا مع انقباض في وقت مبكر من الشريان السري مما أدى إلى انخفاض حجم العينة الشرياني.
المسائل المنهجية / التحليلية لطريقة 4-السفينة
من المهم معالجة العديد من القضايا المنهجية في تفسير النتائج من دراسة المشيمة 4 الأوعية. أولا، إذا كان الهدف هو حساب كتلة المادة التي تناولها، أو الإفراج عنهم، من قبل المشيمة من المهم النظر في حجم تمرير الدم. وينبغي أن يوضع في الاعتبار أن الوريد الرحمي ليس فقط يستنزف المشيمة، ولكن أيضا يستنزف عضلة الرحم، وأن الأوعية الدموية الرحم بدرجات مختلفة أناستوموسس مع المبيض والأوعية الدموية المهبلية. بعد ذلك، من المهم أن نعتبر أن تبادل المياه عبر المشيمة قد تؤثر على التركيزحصص الإعاشة قياس، وبالتالي تؤثر على فروق تركيز شرياني محسوب. من الناحية المثالية من الأفضل معالجة هذا عن طريق ضبط الاختلافات تركيز للمياه المفقودة أو المكتسبة في كل زوج الأم والجنين. ويمكن تحقيق ذلك عن طريق قياس مادة لا يتم تناولها أو الإفراج عنها من قبل المشيمة أو الرحم. قد تكون تركيزات الهيموجلوبين أو النسب المئوية المحسوبة من كرات الدم الحمراء (الهيماتوكريت) بمثابة عوامل تصحيح لتبادل المياه. وعلاوة على ذلك، عند تفسير امتصاص أو إطلاق المركبات على الجانب الأم من المشيمة قد يكون من مصلحة الحصول على الاختلافات الشرايين في الأنسجة الأخرى للمقارنة. لذلك قمنا بإدراج عينة الدم من الوريد أنتيكوبيتال لتحديد خصائص محددة من المشيمة عن طريق مقارنة الاختلافات الشرايين على المشيمة مع تلك من السرير الشعري للساعد. وجدنا هذه المقارنة مثيرة للاهتمام بشكل خاص عندما اختبرنا الافراج المشيمة من سفلت-1 والنمو المشيمي فاكتور لأن الخلايا البطانية الجهازية يمكن أن يكون مصدرا محتملا لهذه المركبات 14 . اعتمادا على سؤال البحث قد يكون من المهم أن تتصل الاختلافات الشرايين إلى وزن المشيمة لحساب كفاءة المشيمة، أي من حيث (مليمول / لتر) / كغ أو (مليمول / دقيقة) / كجم المشيمة.
القيود ونقاط القوة في طريقة 4-السفينة
على الرغم من أن علم وظائف الأعضاء المشيمة أقل تأثرا من الولادة القيصرية من الإجهاد من الولادة المهبلية، وهناك العديد من القيود على هذا الأسلوب. ويوصى التسليم المهبلي في معظم الحالات من مضاعفات الحمل الشائعة (مثل تسمم الحمل، والسكري، والسمنة ومعتدل الجنين ماكروسوميا)، والتي قد تحد والتحيز التجنيد. حتى عند تحسين كل خطوة من الطريقة فإنه من الصعب الحصول على القياسات الكاملة والعينات في كل مريض بسبب الصعوبات التقنية في إجراء أخذ عينات الدم والموجات فوق الصوتية المجلدقياسات تدفق ومي ( الشكل 3 ). وبالإضافة إلى ذلك، على الرغم من أن قياسات الموجات فوق الصوتية تجري في أقرب وقت ممكن لعملية جراحية ممكن، يتم إجراؤها بطبيعتها قبل التخدير الشوكي وأخذ عينات الدم. من هذا يلي أن الناتج القلبي الأم (كو) قد تتغير وربما تؤثر على تدفق الرحم (وحتى فيتو المشيمة) تدفق الدم. يمكن تعويض التغيير المحتمل في كو الناجمة عن تخدير العمود الفقري عن طريق فينيليفرين الذي تم استخدامه في الدراسة الحالية. لا تظهر البيانات الأولية من مجموعة فرعية من المشاركين (n = 23) أي تغيير كبير في كو قبل التخدير الشوكي وفي وقت أخذ العينات (بيانات غير منشورة). استخدام طريقة أخذ العينات 4-السفينة في البشر، بدلا من الحيوانات، ويحد من إمكانية إدخال متغير الوقت والتلاعب في محتوى الدم 5 ، 29 ، 30 . من هذه الاعتبارات، فإنه يتبع أن 4-السفينة وطريقة أخذ العينات هي مقطعية مستعرضة ومراقبتها إلى حد كبير بطبيعتها، ويجب تحليل البيانات التي تم الحصول عليها وفقا لذلك. من ناحية أخرى، فإن طريقة أخذ العينات 4-سفينة توفر إمكانية فريدة لدراسة علم وظائف الأعضاء المشيمة البشري والفيزيولوجيا المرضية في الجسم الحي ، مع كل العوامل المتفاعلة في اللعب، وهو الوضع الذي لا يمكن أبدا أن تتكرر في المختبر . وهو يوفر فرصة ممتازة لاختبار الفرضيات التي ظهرت من الحيوانات أو الدراسات التجريبية الأخرى. وبالمثل، يمكن أن تولد فرضيات جديدة تحتاج إلى اختبار ميكانيكي في المختبر وفي الدراسات الحيوانية.
التطبيقات المحتملة لطريقة 4-السفينة
في حالات الحمل المرضية، وقد تم دراسة الاختلافات تركيز شرياني الأمهات والجنين، حتى الآن، ودرس على حدة، والسماح لاختبار بعض الفرضيات الموجودة في الجسم الحي 15 ، 16 ،أس = "كريف"> 31. طريقة أخذ العينات 4-السفينة توفر فرصة جذابة لدراسة وحدة الأم، المشيمة والجنين معا بدلا من كيانات منفصلة في حالات الحمل المرضية ويمكن تسليط الضوء الجديد على كل من الأسئلة القديمة والجديدة في نطاق التفاعل الأم والجنين. ويمكن تطبيق طريقة أخذ العينات من 4 سفن على مجموعة واسعة من الأسئلة البحثية في كل من حالات الحمل العادية والمرضية اعتمادا على مزيد من التحليلات للعينات. اختيار فاكوتينرز، وحجم الدم، ومجموعة من المشيمة وعينات الأنسجة الأخرى ينبغي أن تقرر وفقا لمسألة البحث. بيرتون إت آل. قد نشرت مؤخرا ورقة ممتازة تصف الإجراءات لضمان عينات ذات نوعية جيدة من الأنسجة المشيمة، والسماح لدمج بيوبانكس مختلفة من أجل معالجة بعض الألغاز التي تحتاج إلى كمية كبيرة من العينات التي يتعين حلها 20 . ويمكن تحليل عينات 4-السفينة لدراسة إطلاق محددة من إكسوسوميس إلى الأموالتداول، ونقل الدواء، الأيض والسموم. أوميكس واسعة النطاق (الأيض، بروتيوميكس و ليبيدوميكس) تحليلات لديه القدرة على تحديد المواد والمستقلبات في بلازما الأمهات التي تفرزها المشيمة. وبالتالي فإن إنشاء طريقة أخذ العينات 4-سفينة يمكن تحديد المشيمة العوامل المستمدة في الدورة الدموية الأمهات وممكن ندف من المؤشرات الحيوية لوظيفة المشيمة. جنبا إلى جنب مع تقنيات لفصل الأمهات تواجه الأمعاء الدقيقة والجنين التي تواجه الأغشية البلازما القاعدية من الأرومة المخلوية سينسيتيروفوبلاست، ويمكن دراسة نقل المادة جنبا إلى جنب مع نشاط وموقع بروتينات النقل ذات الصلة 21 . وعلاوة على ذلك، يمكن توضيح الآليات التي تنظم نقل المغذيات في الجسم الحي من خلال تحليل مستويات المغذيات والمغذيات الدقيقة في الأوعية الأربعة وربط نقل المغذيات إلى قياسات نظام المغذيات والطاقة الاستشعار في المشيمة 32 33 . ضخ الجلوكوز قبل التسليم هو نهج آخر ممكن. نقل المشيمة يمكن أن تكون ذات صلة المتغيرات الأيضية الأم مثل مؤشر كتلة الجسم، الجلوكوز والبلازما التشكيلات الدهون والنتائج الجنين مثل وزن الولادة وتكوين الجسم 18 . معا، هذه النهج سوف تضيء الدور التكاملي للمشيمة، كونها تقع في مركز التفاعل بين الأم والظروف والاحتياجات الجنين.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
الكتاب ليس لديهم ما يكشف.
Acknowledgments
أولا وقبل كل شيء، نشكر بصدق الأمهات اللاتي شاركن في هذا المشروع. بعد ذلك، نعترف بجميع الموظفين الذين ساعدوا ويسهلوا إجراءات أخذ العينات، طبيب التخدير، طبيب التخدير ممرضة والممرضات الجراحية. ولم يكن ممكنا تحقيق هذا المشروع دون تمويل من هيئة الصحة الإقليمية في جنوب شرق النرويج والوحدة الاستشارية النرويجية المعنية بصحة المرأة، وجامعة أوسلو، والتمويل المحلي المقدم من مستشفى جامعة أوسلو.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Maternal body composition | |||
| Impedance scale | Tanita | or similar | |
| Ultrasound measurements | |||
| Sequoia 512 ultrasound machine | Acuson | equipped with a curved transducer with colour and pulsewave Doppler (frequency bandwidth 2 - 6 MHz) | |
| Blood samples | |||
| Arerial cannula | BD Medical | 682245 | or similar |
| 20 cc Eccentric Luer Tip Syringe without Needle | Termo | SS-20ES | or similar. 3 needed. |
| 10 cc Eccentric Luer Tip Syringe without Needle | Termo | SS-10ES | or similar. 9 needed. |
| 5 cc 6% Luer Syringe without Needle | Termo | SS-05S1 | or similar. 2 needed. |
| Arterial blood gas syringe | Radiometer Medical | or similar. 4 needed. | |
| Sterile winged needle connected to flexible tubing, 21 gauge | Greiner Bio-One | 450081 | (intended for single use).3 needed. |
| Vacutainer tube 6 mL EDTA | Greiner Bio-One | 456043 | or similar. Label with sample site. 10 needed. |
| Vacutainer tube 5 mL LH Lithium Heparin Separator | Greiner Bio-One | 456305 | or similar. Label with sample site. 5 needed. |
| Vacutainer tube 6 mL Serum Clot Activator | Greiner Bio-One | 456089 | or similar. Label with sample site. 5 needed. |
| Vacutainer tube 3 mL 9NC Coagulation sodium citrate 3.2% | Greiner Bio-One | 454334 | or similar. Label with sample site. 5 needed. |
| Cryogenic vials, 2.0 mL | Corning | 430488 | or similar. Label with sample site, serum/type of plasma and ID. 90 needed. |
| Marked trays to transport the syringes | to transport the blood samples in the operation theatre | ||
| Rocker | for gentle mixing of the samples | ||
| Ice | in styrofoam box | ||
| Liquid nitrogen | in appropriate container | ||
| Placenta samples | |||
| Metal tray | |||
| Ice | in styrofoam box | ||
| Calibrated scale | |||
| Metal ruler | |||
| 1 M Phosphate buffered saline | Sigma | D1408 | or similar. Dilute 10 M to 1 M before use |
| RNA stabilization solution | Sigma | R0901-500ML | or similar |
| Optimal Cutting Temperature (O.C.T.) compound | vwr | 361603E | or similar |
| Cryogenic vials, 2.0 mL | Corning | 430488 | or similar. Label with sample site. content and ID. 10 needed. |
| Centrifuge tubes, conical bottom 50 mL | Greiner Bio-One | 227,285 | or similar. Label with "RNA later", sample site and ID. 2 needed. |
| Liquid nitrogen | in appropriate container | ||
| Fetal body composition | |||
| Calibrated scale | |||
| Measuring tape |
References
- Jansson, T., Powell, T. L. Role of the placenta in fetal programming: underlying mechanisms and potential interventional approaches. Clin Sci (Lond). 113 (1), 1-13 (2007).
- Hanson, M. A., Gluckman, P. D. Early developmental conditioning of later health and disease: physiology or pathophysiology. Physiol Rev. 94 (4), 1027-1076 (2014).
- Guttmacher, A. E., Spong, C. Y. The human placenta project: it's time for real time. Am J Obstet Gynecol. 213, 4 Suppl 3-5 (2015).
- Battaglia, F. C., Regnault, T. R. Placental transport and metabolism of amino acids. Placenta. 22 (2-3), 145-161 (2001).
- Hay, W. W. Placental-fetal glucose exchange and fetal glucose metabolism. Trans Am Clin Climatol Assoc. 117, 321-339 (2006).
- Woollett, L. A. Review: Transport of maternal cholesterol to the fetal circulation. Placenta. 32, Suppl 2 218-221 (2011).
- Prenton, M. A., Young, M. Umbilical vein-artery and uterine arterio-venous plasma amino acid differences (in the human subject). J Obstet Gynaecol Br Commonw. 76 (5), 404-411 (1969).
- Cetin, I., et al. Plasma and erythrocyte amino acids in mother and fetus. Biol Neonate. 60 (2), 83-91 (1991).
- Filshie, G. M., Anstey, M. D. The distribution of arachidonic acid in plasma and tissues of patients near term undergoing elective or emergency Caesarean section. Br J Obstet Gynaecol. 85 (2), 119-123 (1978).
- Haberey, P. P., Schaefer, A., Nisand, I., Dellenbach, P. The fate and importance of fetal lactate in the human placenta -a new hypothesis. J Perinat Med. 10 (2), 127-129 (1982).
- Prendergast, C. H., et al. Glucose production by the human placenta in vivo. Placenta. 20 (7), 591-598 (1999).
- Metzger, B. E., Rodeck, C., Freinkel, N., Price, J., Young, M. Transplacental arteriovenous gradients for glucose, insulin, glucagon and placental lactogen during normoglycaemia in human pregnancy at term. Placenta. 6 (4), 347-354 (1985).
- Zamudio, S., et al. Hypoglycemia and the origin of hypoxia-induced reduction in human fetal growth. PLoS One. 5 (1), 8551 (2010).
- Holme, A. M., Roland, M. C., Lorentzen, B., Michelsen, T. M., Henriksen, T. Placental glucose transfer: a human in vivo study. PLoS One. 10 (2), 0117084 (2015).
- Holme, A. M., Roland, M. C., Henriksen, T., Michelsen, T. M. In vivo uteroplacental release of placental growth factor and soluble Fms-like tyrosine kinase-1 in normal and preeclamptic pregnancies. Am J Obstet Gynecol. 215 (6), 781-782 (2016).
- Paasche Roland, M. C., Lorentzen, B., Godang, K., Henriksen, T. Uteroplacental arterio-venous difference in soluble VEGFR-1 (sFlt-1), but not in soluble endoglin concentrations in preeclampsia. Placenta. 33 (3), 224-226 (2012).
- Brar, H. S., et al. Uteroplacental unit as a source of elevated circulating prorenin levels in normal pregnancy. Am J Obstet Gynecol. 155 (6), 1223-1226 (1986).
- Myatt, L., et al. Strategy for standardization of preeclampsia research study design. Hypertension. 63 (6), 1293-1301 (2014).
- Kiserud, T., Rasmussen, S. How repeat measurements affect the mean diameter of the umbilical vein and the ductus venosus. Ultrasound Obstet Gynecol. 11 (6), 419-425 (1998).
- Burton, G. J., et al. Optimising sample collection for placental research. Placenta. 35 (1), 9-22 (2014).
- Illsley, N. P., Wang, Z. Q., Gray, A., Sellers, M. C., Jacobs, M. M. Simultaneous preparation of paired, syncytial, microvillous and basal membranes from human placenta. Biochim Biophys Acta. 1029 (2), 218-226 (1990).
- Staff, A. C., Ranheim, T., Khoury, J., Henriksen, T. Increased contents of phospholipids, cholesterol, and lipid peroxides in decidua basalis in women with preeclampsia. Am J Obstet Gynecol. 180 (3), Pt 1 587-592 (1999).
- Catalano, P. M., Thomas, A. J., Avallone, D. A., Amini, S. B. Anthropometric estimation of neonatal body composition. Am J Obstet Gynecol. 173 (4), 1176-1181 (1995).
- Ellis, K. J., et al. Body-composition assessment in infancy: air-displacement plethysmography compared with a reference 4-compartment model. Am J Clin Nutr. 85 (1), 90-95 (2007).
- Haugen, G., Kiserud, T., Godfrey, K., Crozier, S., Hanson, M. Portal and umbilical venous blood supply to the liver in the human fetus near term. Ultrasound Obstet Gynecol. 24 (6), 599-605 (2004).
- Acharya, G., et al. Experimental validation of uterine artery volume blood flow measurement by Doppler ultrasonography in pregnant sheep. Ultrasound Obstet Gynecol. 29 (4), 401-406 (2007).
- Wu, X., et al. Glutamate-glutamine cycle and exchange in the placenta-fetus unit during late pregnancy. Amino Acids. 47 (1), 45-53 (2015).
- Tuckey, R. C. Progesterone synthesis by the human placenta. Placenta. 26 (4), 273-281 (2005).
- Simmons, M. A., Meschia, G., Makowski, E. L., Battaglia, F. C. Fetal metabolic response to maternal starvation. Pediatr Res. 8 (10), 830-836 (1974).
- Simmons, M. A., Jones, M. D., Battaglia, F. C., Meschia, G. Insulin effect on fetal glucose utilization. Pediatr Res. 12 (2), 90-92 (1978).
- Bujold, E., et al. Evidence supporting that the excess of the sVEGFR-1 concentration in maternal plasma in preeclampsia has a uterine origin. J Matern Fetal Neonatal Med. 18 (1), 9-16 (2005).
- Jansson, T., Aye, I. L., Goberdhan, D. C. The emerging role of mTORC1 signaling in placental nutrient-sensing. Placenta. 33, Suppl 2 23-29 (2012).
- Cetin, I. Placental transport of amino acids in normal and growth-restricted pregnancies. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 110, Suppl 1 50-54 (2003).
