Summary
हम टर्म में विवो में मानव प्लेगल फिजियोलॉजी का अध्ययन करने के लिए एक विस्तृत विधि प्रस्तुत करते हैं। विधि मात्रा रक्त के प्रवाह के अल्ट्रासाउंड माप और नाल के ऊतक नमूने के साथ नाल के मातृ और भ्रूण के पक्षों पर आवक और जावक वाहिकाओं से रक्त का नमूना जोड़ती है।
Abstract
जब भी गर्भाशय में रहता है, मानव पालेशांता अनुसंधान के लिए बेहद दुर्गम है । इसलिए विवो में मानव प्लैक्टिअल फिजियोलॉजी की वर्तमान समझ पशु चिकित्सा अध्ययनों पर आधारित है, भद्दा शरीर रचना विज्ञान, हेमोडायमिक्स और गर्भावस्था की अवधि में प्रजातियों के बीच उच्च विविधता के बावजूद। मानव प्लेसेन्टा अध्ययन के विशाल बहुमत पूर्व विवो छिड़काव के अध्ययन या इन विट्रो ट्रॉफ़ोबलास्ट अध्ययन में हैं। हालांकि इन विट्रो अध्ययन और जानवरों के मॉडल में आवश्यक हैं, ऐसे अध्ययनों से विवो में मानव प्लेसेन्टा के परिणामों का एक्सट्रपलेशन अनिश्चित है। हम शब्दावली में विवो में मानव प्लेसेंटा फिजियोलॉजी का अध्ययन करना चाहते थे, और विधि का विस्तृत प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते थे। योजनाबद्ध सिजेरियन सेक्शन के दौरान गर्भाशय की चीरा से पहले गर्भाशय नस को अंतराल पहुंचने का शोषण, हम नाल के मातृ एवं भ्रूण के पक्ष में आवक और जावक वाहिकाओं से रक्त के नमूने एकत्र करते हैं। जब संयोजन संयोजनमात्रा के रक्त के प्रवाह माप के साथ रक्त के नमूनों से सेंटीमीटर माप, हम बेदाग और भ्रूण की तेज मात्रा का आकलन करने में सक्षम हैं और किसी भी यौगिक को छोड़ने में सक्षम हैं। इसके अलावा, एक ही माता-गर्भ के जोड़े से नाक के ऊतक के नमूनों में ट्रांसपोर्टर घनत्व और गतिविधि और वीओओ में नाल के कार्यों के अन्य पहलुओं का मापन प्रदान किया जा सकता है । 4-पोत नमूना पद्धति के इस एकीकृत उपयोग के माध्यम से हम सामान्य और रोगजनक गर्भधारण दोनों में, विवो में नाल पोषक तत्व हस्तांतरण और चयापचय के कुछ मौजूदा अवधारणाओं को परीक्षण करने में सक्षम हैं। इसके अलावा, इस पद्धति ने मॅट्रिक संचलन को नाल द्वारा स्रावित पदार्थों की पहचान को सक्षम किया है, जो कि नासिकाय दोष के बायोमार्कर की तलाश में महत्वपूर्ण योगदान हो सकता है।
Introduction
नेशनल इंस्टीट्यूट ऑफ़ हेल्थ, यूएसए के अनुसार, प्लेसेंटा मानव शरीर 1 , 2 , 3 में सबसे कम समझ वाला अंग है। चल रहे गर्भावस्था पर अनैतिक जोखिमों को लागू किए बिना विवो में मानव प्लेसेन्टा का उपयोग करना और अध्ययन करना मुश्किल है। इसलिए मानव में नाज़ुक फ़ंक्शन का अध्ययन काफी हद तक इन विट्रो और पूर्व विवो मॉडल पर आधारित है। पिछला परिवहन और चयापचय के विवो के अध्ययन में पिछले 4 , 5 , 6 में जानवरों का प्रदर्शन किया गया है। हालांकि, जैसा कि मृदा संरचना और कार्य प्रजातियों के बीच काफी भिन्न होते हैं, जानवरों से मनुष्यों के परिणामों के एक्सट्रपलेशन को सावधानी के साथ किया जाना चाहिए। विवो अध्ययन में केवल कुछ छोटे इंसानों ने सामान्य शारीरिक विज्ञान के तहत प्लेकेन्ट और भ्रूण को तेज करने और परिवहन की जांच की हैअल परिस्थितियों, और कोई भी कई यौगिकों 7 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12 , 13 के एकीकृत हस्तांतरण का पता लगाया है। ये मौलिक अध्ययन यह दर्शाते हैं कि मानव प्लेसेन्टा के विवो अध्ययन में संभव है और वे कई प्रयोजनों की सेवा कर सकते हैं। सबसे पहले, इन विट्रो , पूर्व विवो और पशु अध्ययनों से प्राप्त निर्विवाद कार्यों की वर्तमान अवधारणाओं को मानव सेटिंग में परीक्षण किया जा सकता है और इस प्रकार मानव प्लेसेंटा में उपन्यास और अधिक विशिष्ट अंतर्दृष्टि प्रदान की जा सकती है। दूसरा, भ्रष्ट भ्रूण विकास, प्रीक्लंपियासिया, मातृ मधुमेह, मेटाबोलिक सिंड्रोम और अन्य मातृ-विकार विकृतियों के साथ जुड़े बेकार के प्लेसेंटा के गुणों की विशेषता बेहतर हो सकती है। तीसरा, विवो अध्ययन में मानव नैदान विकसित करने का अवसर प्रदान करता हैपेट और फलनात्मक उपकरण के भविष्य के उपकरण।
इस पृष्ठभूमि पर हम का उद्देश्य विवो में मानव प्लैन्टैंटल फ़ंक्शन की जांच के लिए शारीरिक डेटा का एक व्यापक संग्रह स्थापित करना है । एक योजनाबद्ध सिजेरियन अनुभाग के दौरान, हम गर्भनाशक नसों के अंतराल तक पहुंच का फायदा उठाने के लिए नाल के मातृ और भ्रूण के पक्षों (4-पोत नमूना विधि) पर आने वाले और बाहर जाने वाले जहाजों से रक्त के नमूनों को एकत्रित करने के लिए उपयोग करते हैं। इन नमूनों पोषक तत्वों और अन्य पदार्थों 14 की बनती धमनीशिरापरक एकाग्रता अंतर की गणना करने के लिए उपयोग किया जाता है। इसके अलावा, हम अल्ट्रासाउंड द्वारा प्लेसेंटा के दोनों तरफ मात्रा के प्रवाह को मापते हैं। नतीजतन, किसी भी यौगिक के नाक और भ्रूण ग्रहण किया जा सकता है। इसके अलावा, मृदा और भ्रूण परिसंचरणों के लिए नाल द्वारा जारी किए गए पदार्थ 15 , 16 , 17 को निर्धारित करना संभव है। जब गठबंधन करेंमां और बच्चे के नैदानिक मापदंडों के साथ घ, और नाल और अन्य प्रासंगिक ऊतकों का विश्लेषण करती है, इस पद्धति में एक ही मां-भ्रूण जोड़े में विवो में नाक के कार्यों के कई पहलुओं को एकीकृत करने की रोमांचक संभावनाएं हैं।
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Protocol
अध्ययन ओस्लो यूनिवर्सिटी अस्पताल में डेटा संरक्षण अधिकारियों और चिकित्सा और स्वास्थ्य अनुसंधान नीति के लिए क्षेत्रीय समिति, दक्षिणी नॉर्वे 2419/2011 द्वारा अनुमोदित किया गया था सभी प्रतिभागियों ने शामिल किए जाने पर एक लिखित सूचित सहमति पर हस्ताक्षर किए।
1. तैयारी
नोट: प्रक्रियाओं के लिए एक समय रेखा चित्र 1 में उल्लिखित है।
चित्रा 1 : फ्लोचार्ट 4-नौका नमूनाकरण प्रक्रिया में शामिल समय और कार्मिक का वर्णन करना।
एक रंग एक व्यक्ति को दर्शाता है विधि का विस्तृत वर्णन प्रोटोकॉल में दिया गया है। इस आंकड़े के एक बड़े संस्करण को देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें
- स्टाफ़
- उपकरण तैयार करें, 50 मिलीलीटर बर्फ ठंडा 1 एम फॉस्फेट बफ़ेड खारा (पीबीएस), ठंडा आरएनए स्थिर समाधान के 25 एमएल और इष्टतम काटने के तापमान परिसर (ओसीटी) के 5 एक्स 0.5 एमएल। Vacutainers और ट्यूबों लेबल उपकरणों की अस्थायी सूची देखें
2. मातृ के लक्षण
- मातृ नैदानिक और गैर-नैदानिक विशेषताओं को शामिल करने और प्रासंगिक प्रश्नों को दोहराएं और मुझे दोहराएंडिलीवरी के समय, वजन सहित असुरमेंट। सर्जरी के दौरान उपवास की अवधि की अवधि रिकॉर्ड करें, और शल्य चिकित्सा के दौरान होने वाली कोई भी धमाकेदार एपिसोड।
नोट: ग्लोबल गर्भधारण सहयोग (कोलैब) से एक हालिया प्रकाशन में रिपोर्ट की गई न्यूनतम मातृ नैदानिक डेटासेट शामिल करें। इस लेख में अध्ययन जनसंख्या को चुनने में कुछ महत्वपूर्ण पहलुओं को भी शामिल किया गया है और अध्ययन 18 की योजना बनाते समय इसे संबोधित किया जाना चाहिए। - जातीय, आयु और बॉडी मास इंडेक्स (बीएमआई) सहित पैतृक विशेषताओं को रिकॉर्ड करने पर विचार करें।
3. अल्ट्रासाउंड
- डॉपलर अल्ट्रासाउंड परीक्षा डिलीवरी के दिन, एक उपवास राज्य में महिलाओं के साथ करें। भ्रूण विसर्जन की अवधि के दौरान परीक्षा, अर्ध-दमक स्थिति में महिला के साथ, महाधमनी और वेना कावा के संपीड़न से बचने के लिए हल्के क्षेत्र के विपरीत कुछ विपरीत झुकाया। आउटपुट में मॉनिटर करेंप्रदर्शन पर यांत्रिक और थर्मल सूचकांक द्वारा घनत्व
- नाभिकीय नस
- भ्रूण के पेट के बाण के समान या तिरछा ट्रॅनसेक्शन में नाभि नसों को कल्पना करो। किसी भी दृश्य शाखाओं से पहले अंतर-पेट नाभि के सीधे हिस्से में आंतरिक पोत व्यास को मापें। नियमित बी-मोड का प्रयोग करें और व्यास माप के लिए एक लंबित विस्थापन कोण में पोत की कल्पना करें और बाद में माप के लिए कई इष्टतम फ्रेम रखें ताकि पल्सेटलेट व्यास परिवर्तनों के प्रभाव को कम किया जा सके।
- माप को पांच से दस गुना 1 9 दोहराएं।
- एक ही साइट पर, डॉपलर अल्ट्रासाउंड का उपयोग करें और समय-औसत अधिकतम वेग (टीएएमएक्स) को मापने के लिए संभव के रूप में कम से कम एक insonation कोण (हमेशा <30 डिग्री) प्राप्त करने के लिए जांच को समायोजित करें। 3 - 5 एस (गैर स्पेशेटिंग प्रवाह) की अवधि के दौरान वेग प्राप्त करें
- भ्रूण के पेट के बाण के समान या तिरछा ट्रॅनसेक्शन में नाभि नसों को कल्पना करो। किसी भी दृश्य शाखाओं से पहले अंतर-पेट नाभि के सीधे हिस्से में आंतरिक पोत व्यास को मापें। नियमित बी-मोड का प्रयोग करें और व्यास माप के लिए एक लंबित विस्थापन कोण में पोत की कल्पना करें और बाद में माप के लिए कई इष्टतम फ्रेम रखें ताकि पल्सेटलेट व्यास परिवर्तनों के प्रभाव को कम किया जा सके।
- गर्भाशय की धमनी
- डॉपलर का उपयोग करेंअल्ट्रासाउंड गर्भाशय धमनी को देखने के लिए क्योंकि यह बाह्य इलियाक धमनी को पार कर जाता है, इसके तुरंत बाद आंतरिक इलियाक धमनी से शाखाएं कम विचलन कोण (हमेशा <30 डिग्री) प्राप्त करने और TAMX को मापने के लिए इस साइट पर जांच को समायोजित करें तीन हृदय चक्रों की औसत वेग के रूप में गति प्राप्त करें
- चूंकि टीएएमएक्स मापा जाता है उसी साइट पर एक सीधा कोण प्राप्त करने की संभावना नहीं है, व्यास माप के लिए एक सही कोण प्राप्त करने के लिए पोत का पालन करें, जैसा कि प्राप्त करने योग्य व्यास माप की साइट के करीब है। व्यास की माप को छोड़ दें, अगर किसी भी दृश्य वाहक को इस साइट से पहले रंग डाॉपलर अल्ट्रासाउंड का मूल्यांकन किया जाता है।
- नियमित बी-मोड का प्रयोग करें और व्यास माप के लिए एक लंबित विस्थापन कोण में पोत की कल्पना करें और बाद में माप के लिए कई इष्टतम फ्रेम रखें ताकि पल्सेटलेट व्यास परिवर्तनों के प्रभाव को कम किया जा सके।
- माप को पांच से दस गुना 1 9 दोहराएं।
- प्लेसेंटा की स्थिति को ध्यान में रखें
4. 4-पोत रक्त नमूनाकरण
नोट: प्रक्रियाओं के लिए समयरेखा चित्रा 1 में दी गई है और नमूने की एक संक्षिप्त समीक्षा चित्रा 2 में दी गई है ।
चित्रा 2 : प्लैक्टिकल वसूली और नमूनाकरण साइट्स के योजनाबद्ध चित्रण।
4-पोत नमूना पद्धति में रक्त के नमूनों को गर्भाशय नस से खींचा जाता है, रेडियल धमनी (गर्भाशय धमनी के लिए एक प्रॉक्सी के रूप में) और नाभि धमनियों और शिरा। गर्भाशय की धमनी में रक्त का प्रवाह और नाभि नसों को अल्ट्रासाउंड द्वारा मापा जाता है। नाल के ऊतक के नमूने एकत्र किए जाते हैं। चित्रण: ओस्टाइन एच। हॉर्गमो, ओस्लो विश्वविद्यालय5847fig2large.jpg "target =" _ blank "> कृपया इस आंकड़े के एक बड़े संस्करण को देखने के लिए यहां क्लिक करें।
- सुरक्षा प्रक्रियायें
- ऑपरेशन थिएटर में सभी कर्मियों को दस्ताने, सर्जिकल स्क्रब सूट, मास्क और हेडवियर प्रदान करें।
- ऑपरेशन फील्ड के संपर्क में सर्जन और शोध कर्मियों को सर्जिकल स्क्रब सूट, मास्क, हेडवियर, गाउन और डबल दस्तों के साथ प्रदान करें। चश्मा वैकल्पिक हैं
- दस्ताने के साथ रक्त के नमूनों को संभालने वाले कर्मियों को प्रदान करें।
- दस्ताने और सर्जिकल मुखौटा के साथ नाल के नमूनों को संभालने वाले कर्मियों को प्रदान करें होमोजीनाइजेशन को डाकू के उपयोग की आवश्यकता है
- ऑपरेशन थिएटर में तैयारी
- एक ब्रीफिंग दें और सभी कर्मियों को उपकरण दें, जो सर्जरी की शुरुआत से पहले नमूने की सहायता करेगा।
- एनेस्थिसियोलॉजिस्ट और एनेस्थिसियोलॉजी नर्स को पता लगाएं जो आवश्यक परिधीय धमनी और शिरापरक पहुंच में सहायता करेगा, और सुनिश्चित करें किनमूना लेने से पहले कोई तरल पदार्थ नसों में नहीं दिया जाता है।
- रेडियल धमनी के साथ सहायता करने वाले व्यक्ति को एंटेक्यूबटल नस नमूना और दो सिरिंज (एक 20 एमएल और एक 10 एमएल) और एक रक्त गैस सिरिंज (हेपरिन के साथ) की सहायता करने वाले व्यक्ति को सुई के बिना तीन सिरिंजों (10 एमएल) दें।
- ऑपरेशन फील्ड के लिए दो बाँझ सिरिंज (20 एमएल), पांच बाँझ सिरिंज (10 एमएल), तीन "तितली सुई" और दो रक्त गैस सीरिंज तैयार करें।
- रक्त वाहिकाओं तक पहुंच
- परिधीय अंतःशिरा (iv) पहुंच को आश्वस्त करने के लिए सिजेरियन से पहले मानक प्रक्रिया का पालन करें।
नोट: एंटेक्यूबिटल नस बेहतर है क्योंकि इस साइट से नमूनों को आकर्षित करना आसान है। - कलाई में रेडियल धमनी को अल्ट्रासाउंड या पैल्पाशन द्वारा स्थानीयकृत करें चमड़े के नीचे की लिडोकिन एनलसेशिया के 0.5 एमएल के बाद, रेडियल धमनी में एक धमनी रेखा को रखें। तीन असफल प्रविष्टियों के मामले में इस साइट से नमूना छोड़ दें, यायदि सम्मिलन के दौरान महिला को दर्द होता है
नोट: मानक प्रक्रिया के अनुसार सिजेरियन अनुभाग की सर्जिकल प्रक्रिया करना। केवल नमूनाकरण प्रक्रिया के लिए आवश्यक समायोजन नीचे दी गई हैं।
- परिधीय अंतःशिरा (iv) पहुंच को आश्वस्त करने के लिए सिजेरियन से पहले मानक प्रक्रिया का पालन करें।
- मातृ रक्त के नमूने
नोट: सभी तीन मातृ रक्त के नमूने प्राप्त करें (गर्भाशय नस, रेडियल धमनी और एटेक्यूबिटल नस) एक साथ गर्भाशय चीरा से पहले।- गर्भाशय नस के लिए, पेट की गुहा खोलने के बाद, पेट की दीवार को उठाने और गर्भाशय के पूर्ववर्ती पक्षों पर गर्भाशय नसों की मुख्य शाखाओं को बेनकाब करने के लिए एक बैकग्राउंड का उपयोग करें। जब भी संभव हो तो नाल के समान रूप से गर्भाशय की शिरा की शाखाओं से रक्त प्राप्त करें या सबसे प्रमुख नस नसों का उपयोग करें, यदि प्लेसेंटा गर्भाशय की मिडलाइन में स्थित है।
- लगभग 30 डिग्री के कोण पर गर्भाशय नस में रक्त गैस सिरिंज पर एक तितली सुई डालें और खून से बचने के लिए सौम्य आकांक्षा के माध्यम से रक्त जमा करेंरक्त-अपघटन। बटरफली सुई की iv स्थिति को ध्यानपूर्वक सुरक्षित करते हुए, भरे हुए रक्त गैस सिरिंज को 20 एमएल और एक 10 एमएल सिरिंज लगातार से बदलें।
नोट: चुना गर्भाशय नस के contralateral पक्ष पर खड़े जब इष्टतम पहुंच सबसे अच्छा सुनिश्चित किया जाता है।
- लगभग 30 डिग्री के कोण पर गर्भाशय नस में रक्त गैस सिरिंज पर एक तितली सुई डालें और खून से बचने के लिए सौम्य आकांक्षा के माध्यम से रक्त जमा करेंरक्त-अपघटन। बटरफली सुई की iv स्थिति को ध्यानपूर्वक सुरक्षित करते हुए, भरे हुए रक्त गैस सिरिंज को 20 एमएल और एक 10 एमएल सिरिंज लगातार से बदलें।
- रेडियल धमनी के लिए, इंट्रा-धमनी लाइन से महाप्राण। पहले 5 एमएल छोड़ दें, और फिर रक्त गैस के विश्लेषण के लिए हेपरिन सिरिंज में 3 एमएल की महाप्राणण करें, इसके बाद दो सीरिंजों में 3 एमएल (20 + 10 एमएल) डालें।
- एंटेक्यूबिटल नस के लिए, अंतःशिरा कैथेटर से धीरे-धीरे महाप्राणु रूप से महाप्राणण करें। पहले 5 एमएल छोड़ दें, और फिर तीन सीरिंज (10 एमएल) में 30 एमएल की शुभकामनाएं।
- पेट को बंद करने से पहले गर्भाशय नस पर सैंपलिंग साइट का अंतिम निरीक्षण करें।
- गर्भाशय नस के लिए, पेट की गुहा खोलने के बाद, पेट की दीवार को उठाने और गर्भाशय के पूर्ववर्ती पक्षों पर गर्भाशय नसों की मुख्य शाखाओं को बेनकाब करने के लिए एक बैकग्राउंड का उपयोग करें। जब भी संभव हो तो नाल के समान रूप से गर्भाशय की शिरा की शाखाओं से रक्त प्राप्त करें या सबसे प्रमुख नस नसों का उपयोग करें, यदि प्लेसेंटा गर्भाशय की मिडलाइन में स्थित है।
- भ्रूण के रक्त के नमूने
- जब बच्चे का जन्म होता है, तो नाल की धमनी को दबाने या नाल का वितरण करने के बिना, नाल की धमनी से रक्त को तुरंत खारिज करते हैं। बुद्धि को प्रारंभ करेंएच रक्त गैस विश्लेषण के लिए सिरिंज, और यदि संभव हो तो तीन 10 एमएल सीरिंज का पालन करें।
- जब धमनी के नमूनों को सुरक्षित किया जाता है, तो कॉर्ड को दबाना और नाभि नाल (रक्त गैस और 20 + 10 एमएल सिरिंज) से नमूना लेने से पहले मिडवाइफ़ को बच्चे को हाथ में लेना।
नोट: प्रसव के सेकंड के भीतर और नाल के साथ सभी नाम्बकीय नमूनों को स्वस्थानी प्राप्त करें, जब तक कि यह स्वैच्छिक रूप से अलग नहीं हो। - देर से गर्भनाल clamping पर नार्वे की सिफारिशों का पालन करें। एक व्यथित बच्चे के मामले में, दबाना बंद करो और तुरंत गर्भनाल को काट लें और बच्चे को दाई और नवजात विज्ञानी को हाथ दें।
- रक्त के नमूनों को संभालना
- शेष रक्त के नमूनों की तैयारी करते हुए, बर्फ पर रक्त गैस की सिरिंजें रखो और 5 मिनट के भीतर रक्त गैस विश्लेषक में उनका विश्लेषण करें।
- खून के नमूनों को तुरंत रिक्त स्थान पर स्थानांतरित करें और उन्हें 1-3 मिनट के लिए एक घुमाव पर प्लाज्मा ट्यूबों को बर्फ पर डाल दें। श्रम पर सीरम ट्यूब छोड़ देंनाटकीय पीठ 30 मिनट के लिए व्यवस्थित करने के लिए
नोट: यह प्रक्रिया में एक महत्वपूर्ण कदम है जिसे अतिरिक्त ध्यान देने की आवश्यकता है क्योंकि अच्छी गुणवत्ता सुनिश्चित करने के लिए सभी पांच साइटों के नमूनों को एक साथ तैयार किया जाना है। - प्लाज्मा नमूने जितनी जल्दी हो सके अपकेंद्रित्र, और 30 मिनट के भीतर, 6 डिग्री सेल्सियस पर, 20 मिनट के लिए 2,500 xg
- 30 मिनट के बाद, कमरे के तापमान पर 10 मिनट के लिए 2,500 x ग्रा में सीरम के नमूनों को अपकेंद्रित करें
- सतह पर तैरने वालों को सावधानी से 2 एमएल क्रायो ट्यूबों को विभाजित करने के लिए प्लेटलेट मुक्त प्लाज्मा को सुनिश्चित करने के लिए गोली के ऊपर सतह पर तैरने वाले की 0.5 एमएल छोड़कर।
- नमूने -80 डिग्री सेल्सियस पर स्टोर करें
5. प्लैक्टिकल टिशू का संग्रह
- बर्फ के ठंडा विच्छेदन ट्रे पर प्लेसेंटा को फ्लैट के नीचे रख दें, जितनी जल्दी हो सके इसे वितरित करने के बाद। तस्वीर और 90 डिग्री पर सबसे लंबे व्यास और व्यास को मापें।
- नाल का वजन।
- वजन, दो व्यास, किसी भी जी रिकॉर्ड करेंरस्सी रोग विज्ञान, गर्भनाल में जहाजों की संख्या और प्रसव से समय अंतराल जब बर्फ पर रखा गया था।
नोट: नैदानिक रूप से संकेत दिए जाने पर रोग परीक्षण के लिए नाल भेजें। - मातृ सतह का सामना करना पड़ के साथ प्लेसेंटा प्लेस करें और 4-5 नमूनाकरण स्थलों को यादृच्छिक रूप से प्लेसेंटा के प्रत्येक चतुर्थांश में स्थित, फ्रैंक पैथोलॉजी के क्षेत्रों से परहेज करें। मादक सतह से 3 - 5 मिमी काट करने के लिए कैंची का उपयोग करके डीसीडीआई निकालें। प्रत्येक साइट से विलस ऊतक के 2 सेमी 3 टुकड़ा - एक 1 इकट्ठा।
- एकत्रित ऊतक को धीरे-धीरे 50 एमएल शीत 1 एम पीबीएस में धो लें। प्रत्येक नमूना साइट और विभाज्य से कई टुकड़ों में विभाजित करें
नोट: प्लेसेंटा टुकड़ों का आकार नियोजित विश्लेषण पर निर्भर करेगा। - तरल नाइट्रोजन में 0.1 - 0.5 सेमी 3 ऊतक के नमूने 5 क्रायो ट्यूब्स और स्नैप फ्रीज के अलिक्ट्यूट्स जोड़ें।
- 0.1 के छोटे टुकड़े जोड़ें - 0.2 सेमी 3 आरएनए स्थिरीकरण समाधान के 25 एमएल के साथ ट्यूब। 4 पर स्टोर करें6; सी 24 घंटे के लिए, आरएनए स्थिरीकरण समाधान त्यागें और इसे बदल दें। फ्रीज।
- ओसीटी के 0.5 एमएल के साथ 0.5 सेमी 3 से 5 क्रायो ट्यूबों के टुकड़े, ओसीटी के साथ ऊपर, मिश्रण और फ्रीज जोड़ें।
- विश्लेषण तक -80 डिग्री सेल्सियस पर नमूने स्टोर करें।
नोट: बर्टन एट अल प्लैनेटिकल नमूने के व्यावहारिक पहलुओं का एक उत्कृष्ट अवलोकन प्रदान करता है जो योजनाबद्ध विश्लेषण के आधार पर उपलब्ध होता है। 20 सूक्ष्मदर्शी और बेसल झिल्ली के अलगाव के लिए शेष ऊतकों को तैयार करने के लिए, और वैक्यूम सक्शन तकनीक द्वारा निस्संदेह ऊतक एकत्र करने पर विचार करें। 21 , 22
6. नवजात लक्षण
- अपूर्व-स्कोर (1, 5 और 10 मिनट), सेक्स, वजन, लंबाई, गर्भकालीन उम्र और नवजात गहन देखभाल इकाई (रहने की अवधि और परिणाम) में प्रवेश सहित नवजात विशेषताओं को रिकॉर्ड करें।
- एन्थ्रोपोमेट्रिक माप द्वारा नवजात शिशु संरचना को मापने पर विचार करें, वायु-विस्थापित करेंमस्तिष्क के मृदुलेख या दोहरी एक्स-रे अवशोषणशीलता 23 , 24
7. गणना
- रेडियल और गर्भाशय की धमनी में समान रक्त रचना ग्रहण करें और यूटरोप्लैक्टलैन्टेन्टिक एररेयोएनेस एकाग्रता अंतर की गणना करें।
यूटेरप्लाएंटैन्टेंट आर्टेरियओएन्सेनस एकाग्रता अंतर = सी ए - सी वी
अभेद्य शिरापरक - धमनी एकाग्रता अंतर = सी वी - सी ए
जहां सी सबस्क्रिप्ट के साथ एकाग्रता है: ए, रेडियल धमनी; वी, गर्भाशय नस; ना ही नस और एक, नाभि धमनी - मात्रा के रक्त प्रवाह की गणना, एमएल / मिनट (क्यू):
जहां डी व्यास व्यास (सेमी) है, टीएएमएक्स समय अधिकतम औसतन वेग है और एच स्थानिक रक्त वेग प्रोफाइल के लिए गुणांक है। नाभिकीय नस के लिए गुणांक के रूप में 0.5 का प्रयोग करें औरगर्भाशय की धमनी 25 , 26 के लिए 0.6 - फ्लेक के सिद्धांत के मुताबिक मृदु उत्तेजना की गणना करें और जारी करें:
Uteroplacental uptake = ( सी ए - सी वी ) एक्स Qm
भ्रूण उठाना = ( सी वी - सी ए ) एक्स क्यू एफ
सबस्क्रिप्ट: एम, मातृ और एफ, भ्रूण
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Representative Results
4-पोत नमूना पद्धति नैदानिक अभ्यास में लागू होती है और हमने 20 9 मां / शिशु-जोड़े से सफलतापूर्वक रक्त के नमूने प्राप्त किए हैं। इनमें से 128 में हमने मात्रा रक्त प्रवाह को मापने के लिए भी हासिल किया है। मातृ एवं भ्रूण के दोनों पोतों के पूरे 4-पोत नमूनाकरण और अच्छी गुणवत्ता प्रवाह माप 70 मां-भ्रूण जोड़े ( चित्रा 3 ) में प्राप्त किए गए थे। इसके अलावा, हमने अब तक 30 प्रीक्लामाप्टीक रोगियों से रक्त और प्लेसेंटा नमूनों को एकत्र किया है। हमने पहले पोषक तत्वों के मानव प्लैंटल ट्रांसफर पर लेख प्रकाशित किए हैं, साथ ही वैसोओएक्टिव कारकों के निर्वस्त्र रिहाई, विधि 14 , 15 , 16 के दो अनुप्रयोगों का प्रदर्शन करते हुए।
उदाहरण के तौर पर कैसे 4-पोत पद्धति का उपयोग प्लेसीनल ट्रांसफर के लिए किया जाता है
वहाँ महत्वपूर्ण arteri हैंनाल एक इन विवो uteroplacental और ग्लूकोज की भ्रूण तेज (तालिका 1) का प्रदर्शन के दोनों किनारों पर ovenous ग्लूकोज मतभेद। ग्लूकोज का ग्लुकोसिल स्थानांतरण, मातृ-भ्रूण ग्लूकोज ढाल पर निर्भर है, और इस प्रकार मातृ ग्लूकोज के स्तर पर। हालांकि, हमने पहले यह दिखाया है कि इस ढाल, और इस प्रकार ग्लूकोज स्थानांतरण, भ्रूण इंसुलिन के स्तर और ग्लूकोज की खपत से भी काफी प्रभावित है। यह एक उदाहरण है कि यह विधि महत्वपूर्ण मातृ-भ्रूण के परस्पर क्रिया 14 को दर्शाती है।
| पतीला | ग्लूकोज mmol / एल | पी-मूल्य * |
| रेडियल धमनी | 4.4 9 [4.22, 4.84] | |
| गर्भाशय नस | 4.23 [3. 9 4, 4.53] | |
| नाभिकीय नस | 3.78 [3.52, 4.06] | |
| अम्बीलिकल धमनी | 3.24 [2. 9 5, 3.56] | |
| जोड़े अंतर | ||
| रेडियल धमनी - गर्भाशय नस | 0.2 9 [0.13, 0.41] | <0.001 |
| नाभिकीय धमनी - नाभिक नस | 0.54 [0.2 9, 0.76] | <0.001 |
| रेडियल धमनी - नाभि धमनी | 1.25 [1.03, 1.51] | <0.001 |
तालिका 1: माध्यिका [क्यू 1, क्यू 3] सांद्रता और ग्लूकोज के एररेयोएनेस अंतर
* विलकॉक्सन साइन-रैंक परीक्षा
भ्रूण के ग्लूकोज तेज (नाभिक रिलीज) से नाभि परिसंचरण को केवल न केवल निर्भर माना जाता हैN मातृ-भ्रूण ढाल, लेकिन रक्तहीन प्रवाह पर 5 इसी तरह, भ्रूण के ग्लूकोज तेज करने के लिए प्लेसेंटा वजन या जन्म के वजन के एक समारोह के रूप में यह अध्ययन करने के लिए प्रासंगिक हो सकता है। एन = 128 में हमने 1 9 6.2 [158.3, 232.2] एमएल / मिन का एक नाभिकीय [क्यू 1, क्यू 3] कुल नाभि शिरापरक प्रवाह पाया, और एक औसत [क्यू 1, क्यू 3] की गणना की, भ्रूण के ग्लूकोज तेज (नाभिक रिलीज) से नाभिक संचलन 0.10 [0.05, 0.15] मिमीोल / मिनट जन्म के लिए सामान्यीकृत यह 0.03 [0.02, 0.04] (मिमीोल / मिनट) / किग्रा के बराबर है प्लेसेन्टा 0.16 [0.10, 0.26] (मिमीोल / मिन) प्रति किला प्लैसेन्टा रिलीज़ करता है।
उदाहरण के तौर पर कैसे 4-पोत पद्धति का उपयोग करने के लिए प्लैंक्टेन्ट तेज का अध्ययन किया जाता है
पशु अध्ययनों से पता चलता है कि ग्लूटामिक एसिड प्लेसेंटा और भ्रूण यकृत में एमिनो एसिड के इंटरकन्वयन और अन्य मेटाबोलिक मार्ग 27 में ऑक्सीडेटिव ईंधन के रूप में महत्वपूर्ण है। नाल 4-पोत नमूना पद्धति का प्रयोग करके हमने यू का अध्ययन कियामनुष्यों में ग्लूटामिक एसिड के टेरोप्लाक्नेटल और नाम्बकीय धमनीय अंतर ( तालिका 2 )। हम नाभिक परिसंचरण से ग्लूटामिक एसिड के एक नाज़ुक तेज (इस प्रकार एक भ्रूण जारी) पाया। इसके अलावा हम मातृ संचलन से ग्लुतैमिक एसिड का एक नाज़ुक तेज पाया। दोनों परिसंचरणों से यह भद्दा ग्रहण एक उदाहरण है कि कैसे 4-पोत पद्धति का उपयोग मानव में विवो में प्रदर्शित करने के लिए किया जा सकता है जो पोषक तत्वों की नाकदार चयापचय प्रत्यारोपण हस्तांतरण के नियमन का एक हिस्सा है।
| पतीला | ग्लूटामिक एसिड μmol / एल | पी-मूल्य * |
| रेडियल धमनी | 61.5 [51.0, 77.7] | |
| गर्भाशय नस | 51.0 [36.3, 65.0] | |
| नाभिकीय नस | 39.3 [24.7, 52.8] | |
| अम्बीलिकल धमनी | 44.7 [33.1, 59.3] | |
| जोड़े अंतर | ||
| रेडियल धमनी- गर्भाशय नस | 10.4 [1.6, 21.2] | <0.001 |
| नाभिक धमनी-नसों की नस | -8.7 [-16.0, 0.2] | <0.001 |
सारणी 2: मध्यक [Q1, Q3] सांद्रता और ग्लेटामिक एसिड के एररेयोएनेस अंतर
* विलकॉक्सन साइन-रैंक परीक्षा
उदाहरण के तौर पर कैसे 4-पोत पद्धति का उपयोग करने के लिए नालिका रिलीज का अध्ययन किया जाता है
यह स्थापित किया गया है कि प्लेसेन्टा प्रोजेस्टेरोन को गुप्त करता है और प्लेसेंटा के मातृ-पक्ष पर हमारे 4-पोत पद्धति को मान्य करने के लिए हमने प्रोजेस्टेरोन के विवो रिलीज में मापाआरएम 28 हमें मादक संचलन ( तालिका 3 ) के लिए प्रोजेस्टेरोन का एक महत्वपूर्ण निर्बाध रिलीज मिला। मनाया गया खगोलीय अंतर दर्शाता है कि नाल 4-पोत नमूना पद्धति का उपयोग प्लेसेंटा द्वारा जारी पदार्थों का पता लगाने के लिए किया जा सकता है, और यह रोग संबंधी गर्भधारण का अध्ययन करते समय अत्यधिक प्रासंगिक होता है।
| पतीला | प्रोजेस्टेरोन एनएमओएल / एल | पी-मूल्य * |
| रेडियल धमनी | 678 [514, 9 71] | |
| गर्भाशय नस | 1852 [10 9 5, 2786] | |
| जोड़े अंतर | ||
| रेडियल धमनी- गर्भाशय नस | -1187 [-1855, -404] | पी <0.001 |
तालिका 3: औसत [क्यू 1, क्यू 3] सांद्रता और प्रोजेस्टेरोन के गर्भाशय-पुंजक धमनीय अंतर
* विलकॉक्सन साइन-रैंक परीक्षा
चित्रा 3 : शामिल किए गए और खोए गए प्रतिभागियों के फ़्लोचार्ट और चित्रण
ए। प्रतिभागियों को शामिल करते हुए दिखाता है, यह दिखाते हुए कि मुख्य रूप से सीजेरियन सेक्शन से पहले श्रम शुरू होने या अध्ययन करने के लिए पर्याप्त कर्मियों की कमी के कारण भाग गए थे। बी । सामान्य गर्भधारण (नीले) वाले 17 9 महिलाओं में से 162 (91%) (अपूर्ण गर्भ रक्त के नमूने: काले, अधूरे मातृ रक्त के नमूनों: भूरे रंग) में 4-पोत के रक्त के नमूने प्राप्त किए गए थे। सैन्य सीमाओं के कारण पचास-एक (28%) प्रतिभागियों को अल्ट्रासाउंड माप के लिए शामिल नहीं किया गया था 12 में से8 प्रतिभागियों (72%) अल्ट्रासाउंड के अधीन, प्लेसेंटा के भ्रूण की ओर रक्त प्रवाह माप सभी प्रतिभागियों (हल्का हरा) में प्राप्त किया गया था, जबकि मातृ एवं भ्रूण दोनों पक्षों में पूर्ण रक्त प्रवाह माप 77 (60%) में प्राप्त किया गया था। (गहरा हरा)। चित्रण: ओस्टाइन एच। हॉर्गमो, ओस्लो विश्वविद्यालय इस आंकड़े के एक बड़े संस्करण को देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें
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Discussion
प्लेसेंटा 4-पोत नमूना पद्धति तीन मुख्य प्रयोजनों के लिए प्रासंगिक है। सबसे पहले, यह अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है कि मादक पक्ष पर नाल द्वारा विशिष्ट पदार्थ कैसे उठाए जाते हैं और संभवतया नाभि परिसंचरण और भ्रूण को हस्तांतरित किया जाता है, जैसा कि हमारे ग्लूकोज और एमिनो एसिड अध्ययनों द्वारा दिखाया गया है। दूसरा, विधि नाल द्वारा उत्पादित पदार्थों का अध्ययन करने के लिए अत्यधिक प्रासंगिक है और मातृ या भ्रूण परिसंचरणों को जारी किया जाता है, जैसा कि प्रोजेस्टेरोन परिणामों के द्वारा दिखाया गया है। तीसरा, यह अध्ययन करने के लिए उपयोगी हो सकता है कि विवो में भ्रूण तेजी से विकास और ऊतक रीमॉडेलिंग के दौरान अपशिष्ट उत्पादों को कैसे समाप्त कर देता है।
4-पोत पद्धति के महत्वपूर्ण कदम और सैन्य मुद्दों
प्लेसीन्टा 4-पोत नमूनाकरण का उपयोग पहले से सामान्य फिजियोलॉजिक गर्भधारण 8 , 10 , में जीवाणुओं के पोषक तत्वों के हस्तांतरण को निर्धारित करने के लिए किया गया है।Ss = "xref"> 12, लेकिन सीमित अध्ययन विषयों के साथ। 4-पोत नमूने का सीमित उपयोग शायद प्रक्रिया की मांग रसद के कारण होता है। इस पद्धति को नियोजित करने के लिए रोगी, शोधकर्ताओं और भ्रूण-चिकित्सा, प्रसूति और संज्ञाहरण विभाग के विभागों के बीच एक सफल समन्वय आवश्यक है। हमारा मानना है कि यह एक महान लाभ रहा है कि मुख्य जांचकर्ताओं में से कई ऑस्टेट्रिशियन हैं, जो नैदानिक दिनचर्या और प्रमुख कर्मियों को जानते हैं। इस प्रकार दैनिक प्रक्रियाओं के साथ दैनिक क्रियान्वयन लागू किया गया है। प्रक्रिया के प्रत्येक चरण को समन्वय और हासिल करके, हमने 200 से अधिक माताओं / नवजात-जोड़े से नमूने प्राप्त किए हैं। इसके अलावा, हमारी रणनीति कुछ हाथों पर नमूनाकरण प्रक्रिया रखने के लिए है क्योंकि नमूना लेने के सफल नतीजे के लिए निर्णायक प्रक्रिया में तकनीकी चुनौतियां हैं, और कई नमूने डेटा के विविधता के अनावश्यक स्रोतों को पेश कर सकते हैं। Consequएकांत में, हम अनुशंसा करते हैं कि एक ही अल्ट्रासाउंड मशीन का प्रयोग करके सभी परीक्षकों द्वारा सभी सोनोग्राफिक परीक्षाएं की जानी चाहिए। उपकरणों की देखभाल के साथ चुना जाना चाहिए, क्योंकि जहाज की दीवार के समाधान महत्वपूर्ण है। तीसरे तिमाही में गर्भाशय की धमनियां विशेषकर तकनीकी रूप से मापने के लिए चुनौती होती हैं क्योंकि गर्भाशय के आकार और सामग्री के कारण व्यास माप के लिए इस्तेमाल किए जाने वाले दोनों लंबवत विनोद कोण और सटीक एक ही साइट पर प्रवाह वेग माप के लिए कम विचलन कोण प्राप्त करना मुश्किल हो जाता है। इसके अलावा, सफल रक्त नमूने गर्भाशय शिरा और कोमल आकांक्षा के उचित नमूना साइट की पहचान की मांग करते हैं। नाभि के पक्ष में भ्रूण एरिथ्रोसाइट्स की नाजुकता को आकांक्षा बल के लिए विशेष ध्यान देने की आवश्यकता होती है। यह हमारा अनुभव है कि शिशु में देरी से डिलीवरी या मामूली तनाव नाड़ी की धमनी के शुरुआती कसना से जुड़ा था जिससे कम धमनी नमूना मात्रा बढ़ गई थी।
4-पोत पद्धति के कार्यविधि / विश्लेषणात्मक मुद्दे
प्लेसेंटा 4-पोत अध्ययन से परिणामों की व्याख्या में कई तरीकों के मुद्दों को संबोधित करना महत्वपूर्ण है। सबसे पहले, यदि लक्ष्य एक पदार्थ के द्रव्यमान की गणना करने के लिए है, या छोड़ दिया, नाल के द्वारा, यह महत्वपूर्ण है कि रक्त उत्कर्ष की मात्रा पर विचार करें। यह ध्यान में रखा जाना चाहिए कि गर्भाशय नस न केवल नाल को नालता है, बल्कि गर्भाशय की मांसपेशियों को भी नालता है, और यह कि डिम्बग्रंथि और योनि वेसक्लेचर के साथ विभिन्न स्तरों में गर्भाशय के व्युत्पन्न होता है। इसके बाद, यह विचार करना महत्वपूर्ण है कि प्लेसेंटा भर में पानी के आदान-प्रदान का ध्यान केंद्रित किया जा सकता हैराशन मापा जाता है, और इस तरह से धमनीय एकाग्रता अंतर को प्रभावित करता है। आदर्श रूप से यह प्रत्येक मां-भ्रूण जोड़ी में खोए गए या प्राप्त पानी के लिए एकाग्रता अंतर को समायोजित करके सबसे अच्छा संबोधित होता है। यह एक पदार्थ को मापने के द्वारा प्राप्त किया जा सकता है जिसे नाल या गर्भाशय से नहीं लिया जाता है या जारी नहीं किया जाता है। हीमोग्लोबिन सांद्रता या एरिथ्रोसाइट्स (हेमटोक्रिट) के परिकलित प्रतिशत जल विनिमय के लिए सुधार कारक के रूप में काम कर सकते हैं। इसके अलावा, प्लेसेंटा के मातृभाव पर यौगिकों की तेजता या रिहाई की व्याख्या करते समय यह तुलना के लिए अन्य ऊतकों में धमनीय अंतर को प्राप्त करने में रुचि हो सकती है। इसलिए हमने एनाटेक्यूबिटल नस से एक रक्त का नमूना शामिल किया है जो दांतों के केशिका बिस्तर के साथ नाल पर धमनीय अंतरों की तुलना करके नाल की विशिष्ट विशेषताओं को चिह्नित करता है। हमने यह तुलना विशेष रूप से दिलचस्प पाया जब हमने एसएफ़एलटी -1 और प्लैंटल विकास एफए के निर्णायक रिलीज की जांच कीCtor क्योंकि सिस्टमिक एंडोथेलियल कोशिका इन यौगिकों के संभावित स्रोत 14 हो सकती हैं अनुसंधान प्रश्न के आधार पर, प्लैंटाटा के वजन के लिए धमनीय अंतर को संबंधित प्लैंटाइन दक्षता की गणना करने के लिए महत्व दिया जा सकता है, अर्थात् (mmol / L) / किग्रा या (mmol / min) / किलोग्राम प्लेसेंटा
4-पोत विधि की सीमाएं और ताकत
हालांकि योनि वितरण के तनाव के मुकाबले सिजेरियन से कम संतृप्त फिजियोलॉजी प्रभावित होती है, इस पद्धति में कई सीमाएँ हैं। सामान्य गर्भावस्था संबंधी जटिलताओं (जैसे प्रीक्लम्पसिया, मधुमेह, मोटापे और मध्यम भ्रूण मैक्रोसोमिया) के अधिकांश मामलों में योनि डिलीवरी की सिफारिश की जाती है, जो कि भर्ती को सीमित और पूर्वाग्रह कर सकती है। यहां तक कि जब विधि के हर कदम को अनुकूलित करते हैं, तो प्रत्येक रोगी में पूर्ण माप और नमूने प्राप्त करना कठिन होता है क्योंकि रक्त नमूनाकरण प्रक्रिया और अल्ट्रासाउंड वॉल्यूम में तकनीकी कठिनाइयोंUme प्रवाह माप ( चित्रा 3 )। इसके अलावा, यद्यपि अल्ट्रासाउंड मापन जितनी संभव हो सर्जरी के लिए समय के रूप में आयोजित किया जाता है, वे स्वाभाविक रूप से रीढ़ की हड्डी में संज्ञाहरण और रक्त के नमूने से पहले आयोजित किए जाते हैं। इस प्रकार से मातृ कार्डियक आउटपुट (सीओ) बदल सकता है और संभावित रूप से यूटरोप्लैंक्टल (और फेगो-प्लेकैन्टल) रक्त प्रवाह को भी प्रभावित कर सकता है। रीढ़ की हड्डी में संज्ञाहरण की वजह से सीओ में होने वाले संभावित परिवर्तन को फिनलेल्फ़्रिन द्वारा मुआवजा दिया जायेगा जिसका उपयोग वर्तमान अध्ययन में किया गया था। हमारे प्रतिभागियों (n = 23) के सबसेट से प्रारंभिक डेटा स्पाइनल एनेस्थेसिया से पहले और नमूनाकरण (अप्रकाशित डेटा) के समय CO में कोई महत्वपूर्ण परिवर्तन नहीं दिखाते हैं। जानवरों के विरोध में मनुष्यों में 4-पोत नमूना पद्धति का उपयोग करना, एक समय चर को लागू करने की संभावना दोनों को सीमित करता है और रक्त की सामग्री 5 , 2 9 , 30 में हेरफेर करता है। इन विचारों से, यह इस प्रकार है कि 4-पोत नमूना पद्धति क्रॉस-अनुभागीय है और प्रकृति द्वारा काफी हद तक अवलोकन, और प्राप्त आंकड़ों के अनुसार तदनुसार विश्लेषण किया जाना चाहिए। दूसरी तरफ, 4-पोत नमूना पद्धति, खेल पर सभी इंटरैक्टिंग कारकों के साथ-साथ विवो में मानव प्लैस्टिक फिजियोलॉजी और पैथोफिज़ियोलॉजी का अध्ययन करने की एक अनूठी संभावना प्रदान करती है, ऐसी स्थिति जिसे इन विट्रो में कभी भी पुन: प्रस्तुत नहीं किया जा सकता है। यह जानवरों या अन्य प्रायोगिक अध्ययनों से उभरा है कि अवधारणाओं का परीक्षण करने के लिए एक उत्कृष्ट अवसर प्रदान करता है। इसी तरह, यह नए अनुमानों को उत्पन्न कर सकता है, जिन्हें इन विट्रो और पशु अध्ययनों में तंत्रिकी रूप से परीक्षण करने की आवश्यकता होती है।
4-पोत विधि के संभावित अनुप्रयोग
रोग संबंधी गर्भधारण में, मातृ एवं भ्रूण खगोलीय एकाग्रता अंतर, अब तक, अलग से अध्ययन किया गया है, और vivo 15 , 16 में मौजूद कुछ अनुमानों के परीक्षण के लिए अनुमति दी गई है ,Ass = "xref"> 31 4-पोत नमूना पद्धति पैथोलॉजिक गर्भधारण में अलग-अलग संस्थाओं के बजाय मातृ, नाक और भ्रूण इकाई का अध्ययन करने के लिए अपील करने का अवसर प्रदान करती है और मातृ-भ्रूण के संपर्क के दायरे के भीतर दोनों पुराने और नए सवालों पर नए प्रकाश डाल सकती है। नमूनों के आगे के विश्लेषण के आधार पर 4-पोत नमूना पद्धति सामान्य और रोगी दोनों गर्भधारण में एक विस्तृत श्रेणी के अनुसंधान प्रश्नों पर लागू हो सकती है। रिकोटाइनर्स की पसंद, रक्त की मात्रा, प्लेसेंटा और अन्य ऊतक नमूनों की श्रेणी का निर्णय अनुसंधान प्रश्न के अनुसार लिया जाना चाहिए। बर्टन एट अल ने हाल ही में एक उत्कृष्ट कागज प्रकाशित किया है जिसमें प्रक्रियाओं का वर्णन किया गया है जो कि पीठ के ऊतकों के अच्छे गुणवत्ता के नमूनों को सुनिश्चित करने के लिए, और कुछ पहेली को हल करने के लिए विभिन्न जैव-ऑब्जेक्ट्स को मर्ज करने की इजाजत देता है, जिसके लिए बड़े पैमाने पर नमूनों की ज़रूरत होती है 20 4-पोत के नमूने का विश्लेषण किया जा सकता है, जो कि मेटरन के एक्सोसोम के विशिष्ट रिलीज का अध्ययन करने के लिए हैअल परिसंचरण, दवा के हस्तांतरण, चयापचयों और विषाक्त पदार्थों। बड़े पैमाने पर omics (मेटाबोलामीक्स, प्रोटिओमिक्स और लिपिडोमिक्स) विश्लेषण में मस्तिष्क प्लाज्मा में पदार्थों और चयापचयों की पहचान करने की क्षमता होती है जो नाल द्वारा स्रावित होती हैं। इस प्रकार 4-पोत नमूना पद्धति की स्थापना ने मातृ संचलन में प्लेसेंटा व्युत्पन्न कारकों की पहचान की है और प्लैनेटिक फ़ंक्शन के बायोमार्कर को संभवतः तंग कर दिया है। संकेतनोट्रोबोब्लास्ट के बेसल प्लाज्मा मेम्ब्रेन का सामना करने वाली माईक्रोलाइल्स और भ्रूण को अलग करने के लिए तकनीकों के साथ संयोजन, एक पदार्थ के स्थानांतरण का अध्ययन और संबंधित ट्रांसपोर्टर प्रोटीन 21 की गतिविधि के साथ मिलकर किया जा सकता है। इसके अलावा, विवो में पोषक तत्व हस्तांतरण को विनियमित तंत्र नाल 32 में चार जहाजों में पोषक तत्वों और सूक्ष्म पोषक के स्तर का विश्लेषण करने और पोषक तत्व और ऊर्जा संवेदन प्रणाली के मापन के लिए पोषक तत्वों के हस्तांतरण से संबंधित द्वारा स्पष्ट किया जा सकता है 33 के लिए दिखाया गया है। प्रसव से पहले ग्लूकोज जलसेक एक और संभव दृष्टिकोण है प्लैंटल ट्रांसफर, बीएमआई, ग्लूकोज और प्लाज्मा लिपिड प्रोफाइल जैसे मातृ चयापचय चर से संबंधित हो सकते हैं और गर्भवती परिणाम जैसे जन्म के समय और शरीर की संरचना 18 से संबंधित हो सकते हैं । साथ में, इन तरीकों से प्लेसेंटा की एकीकृत भूमिका को रोशन किया जा सकता है, जो मातृ एवं भ्रूण स्थितियों और जरूरतों के बीच परस्पर क्रिया के केंद्र में स्थित है।
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Disclosures
लेखकों के पास खुलासे के लिए कुछ भी नहीं है।
Acknowledgments
सबसे पहले, हम इस परियोजना में भाग लेने वाली माताओं का ईमानदारी से धन्यवाद करते हैं। इसके बाद, हम सभी कर्मियों को स्वीकार करते हैं जो नमूनाकरण प्रक्रिया को सहायता और सहायता प्रदान करते हैं, एनेस्थिसियोलॉजिस्ट, नर्स एनेस्थिसियोलॉजिस्ट और सर्जिकल नर्सों। परियोजना दक्षिण-पूर्वी नॉर्वे क्षेत्रीय स्वास्थ्य प्राधिकरण और महिला स्वास्थ्य, ओस्लो विश्वविद्यालय पर नॉर्वेजियन सलाहकार इकाई और ओस्लो विश्वविद्यालय अस्पताल द्वारा प्रदान किए गए स्थानीय वित्त पोषण से धन के बिना संभव नहीं होगा।
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Maternal body composition | |||
| Impedance scale | Tanita | or similar | |
| Ultrasound measurements | |||
| Sequoia 512 ultrasound machine | Acuson | equipped with a curved transducer with colour and pulsewave Doppler (frequency bandwidth 2 - 6 MHz) | |
| Blood samples | |||
| Arerial cannula | BD Medical | 682245 | or similar |
| 20 cc Eccentric Luer Tip Syringe without Needle | Termo | SS-20ES | or similar. 3 needed. |
| 10 cc Eccentric Luer Tip Syringe without Needle | Termo | SS-10ES | or similar. 9 needed. |
| 5 cc 6% Luer Syringe without Needle | Termo | SS-05S1 | or similar. 2 needed. |
| Arterial blood gas syringe | Radiometer Medical | or similar. 4 needed. | |
| Sterile winged needle connected to flexible tubing, 21 gauge | Greiner Bio-One | 450081 | (intended for single use).3 needed. |
| Vacutainer tube 6 mL EDTA | Greiner Bio-One | 456043 | or similar. Label with sample site. 10 needed. |
| Vacutainer tube 5 mL LH Lithium Heparin Separator | Greiner Bio-One | 456305 | or similar. Label with sample site. 5 needed. |
| Vacutainer tube 6 mL Serum Clot Activator | Greiner Bio-One | 456089 | or similar. Label with sample site. 5 needed. |
| Vacutainer tube 3 mL 9NC Coagulation sodium citrate 3.2% | Greiner Bio-One | 454334 | or similar. Label with sample site. 5 needed. |
| Cryogenic vials, 2.0 mL | Corning | 430488 | or similar. Label with sample site, serum/type of plasma and ID. 90 needed. |
| Marked trays to transport the syringes | to transport the blood samples in the operation theatre | ||
| Rocker | for gentle mixing of the samples | ||
| Ice | in styrofoam box | ||
| Liquid nitrogen | in appropriate container | ||
| Placenta samples | |||
| Metal tray | |||
| Ice | in styrofoam box | ||
| Calibrated scale | |||
| Metal ruler | |||
| 1 M Phosphate buffered saline | Sigma | D1408 | or similar. Dilute 10 M to 1 M before use |
| RNA stabilization solution | Sigma | R0901-500ML | or similar |
| Optimal Cutting Temperature (O.C.T.) compound | vwr | 361603E | or similar |
| Cryogenic vials, 2.0 mL | Corning | 430488 | or similar. Label with sample site. content and ID. 10 needed. |
| Centrifuge tubes, conical bottom 50 mL | Greiner Bio-One | 227,285 | or similar. Label with "RNA later", sample site and ID. 2 needed. |
| Liquid nitrogen | in appropriate container | ||
| Fetal body composition | |||
| Calibrated scale | |||
| Measuring tape |
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