Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Medicine
Click here for the English version

Medicine

Tubal ציטולוגיה של שפופרת Tube ככלי מבטיח עבור סרטן השחלות איתור מוקדם

Published: July 25, 2017 doi: 10.3791/55887
Automatic Translation
1, 1, 1, 2, 3,4, 5,6
1Department of Pathology, University of Arizona College of Medicine, 2Department of Obstetrics and Gynecology, Henan Provincial People's Hospital, 3Department of Obstetrics and Gynecology, University of Arizona College of Medicine, 4University of Arizona Cancer Center, 5Department of Pathology, University of Texas Southwestern Medical Center, 6Department of Obstetrics and Gynecology, University of Texas Southwestern Medical Center

Summary

בחנו שיטת ציטולוגית צינלית על ידי דגימה של צינור החצוצרה ישירות כריתה שלאחר הניתוח ככלי של סרטן השחלות איתור מוקדם. כאן, אנו מציגים פרוטוקול לאסוף תאים צינור החצוצרות מן הדגימות כירורגית קיבל.

Abstract

נכון לעכשיו, מקובל כי הרוב המכריע של השחלות גבוהה כיתה קרצינומה (HGSC) מקורם בחצוצרות. עם זאת, בשל היעדר סמנים או כלים לזיהוי סרטן השחלות, איתור מוקדם של HGSC נשאר מאתגר. הדגימה הישירה של צינור החצוצרות יכולה להגביר את הרגישות לאיתור תאים ניאופלסטיים כאשר הגידול אינו גלוי לעין. פיתחנו נוהל לאיסוף תאי צינור החצוצרה ישירות מדגימות כירורגיות שהתקבלו לאחרונה, אשר הראו מתאם מצוין עם ממצאים היסטולוגיים. גישה זו מציבה בסיס לתועלת העתידית של הקרנה לפרוסקופית מינימלית פולשנית באוכלוסיות חולים בסיכון גבוה.

Introduction

Ovarian high-grade sercinoma serius (HGSC) הוא הנפוץ ביותר וקטלני סוג של סרטן השחלות, והוא נשאר איום גדול על בריאות הציבור. בעשור האחרון, החוקרים הציעו כי הרוב המכריע של מקרים HGSC נובעים מן החצוצרות במקום השחלה עצמה 1 , 2 , 3 , 4 , 5 , 6 . קרצינומה של הסרום intraepithelial קרצינומה (STIC) הוא מקובל כמבשר של HGSC 1 , 7 , 8 , 9 , 10 , 11 . עד כה, גילוי מוקדם של סרטן השחלות נשאר קשה. פרוטוקול ההקרנה הנוכחי עם אנטיגן משולב סרטן 125 (CA-125) ו אולטרסאונד transvaginal הראוהשפעה קטנה על תמותת המטופלים 12 , 13 . דגימת רירית הרחם לאבחון סרטן השחלות הראתה רגישות נמוכה ביותר 14 . שני מחקרי חלוצים 15 , 16 בחנו את השימוש של דגימה ישירה לפרוסקופי של צינורות חצוצרות שפירים מאופיין תכונות ציטולוגיות של אפיתל שפיר שפיר. אנו מאמינים כי דגימה ישירה של צינור החצוצרות יכול להיות גם דרך מעשית ופשוטה לאיתור STIC או HGSC בשלב מוקדם כאשר הגידול אינו דמיינו על ידי הדמיה.

למרות המטרה הסופית היא התועלת של הקרנה לפרוסקופית פולשנית מינימלית בחולים עם גורמי סיכון גבוה, המטרות המיידיות של המחקר הנוכחי הם: 1) כדי לקבוע את התכונות הבסיסיות cytological של epithelia tubal שפיר; ו - 2) לבדוק את הרגישות ואת הספציפיות של ציטולוגיה צינורי באיתור סרטן השחלותErs ו מבשרי הסרטן. לכן פיתחנו את השיטה הבסיסית cytology tubal כדי לבדוק את האפקטיביות של פרוטוקול זה בזיהוי HGSC ו מבשר STIC 17 שלה . במחקר זה, ניצלנו את נפח גדול של דגימות כירורגיות קיבל באופן קבוע, וביצע דגימה ישירה של החצוצרה החצוצרה נכרת בנוסף נהלים שגרה שגרתית.

מחקר שנערך לאחרונה שלנו 17 הראה כי אבחנה ציטולוגית של ממאירים או חשד לממאירות בקורלציה גבוהה עם האבחנה היסטולוגית HGSC (100%). בנוסף, הערכה ציטולוגית tubal זיהו neoplasia intratubal רק בשני מקרים היסטולוגית אישר STIST מעורב במחקר זה. אנו מאמינים כי cytology tubal יש פוטנציאל גדול גילוי מוקדם יספק מידע בעל ערך עבור ניהול המטופל.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

אישור של מוסד ביקורת התקבל מאוניברסיטת אריזונה על ביצוע מחקר זה. טופלו הסכמות הסכמה בחולה.

1. בחירת החולה

הערה: אישור מועצת המנהלים של המוסד התקבל מאוניברסיטת אריזונה. סך של 38 חולים גויסו. הגילאים של החולים נעו בין 32 ל -86 שנים עם ממוצע של 55 שנים, מתוכם 26 חולים היו לאחר גיל המעבר ו -12 חולים היו לפני גיל המעבר.

  1. לקבל הסכמה מדעת מכל חולה.

2. נוהל שפופרות תאי החצוצרות

הערה: החולים שנכללו במחקר הנוכחי היו מתוכננים כולם לכריתת רחם מלאה וכריתת שתן דו-צדדית דו-צדדית עבור הפחתת סיכון מניעתי או ממאירות. הפרטים של ניתוח לא היו ידועים עבור הפתולוג שביצע את המחקר ציטולוגיה.

  1. מיד לאחר הניתוחכריתה קלית, לבחון את דגימת הרקמות הטריות כולל הרחם, השחלות הדו-צדדיות, ואת צינורות החצוצרה הדו-צדדיים בזהירות כדי לזהות את החצוצרה הדו-צדדית.
  2. איסוף ומקום תאים צינור חצץ לתוך פתרון משמר (ראה טבלה של חומרים) בקבוקון בתוך 30 דקות של clamping את אספקת הדם; המשמר המומלץ הוא פתרון מתרן המבוסס על מתנול.
    הערה: השתמש במברשת מגע עדינה לאוסף תא הגנבים (השלבים הבאים). למעט מקרים נדירים שבהם החצוצרה נשלחת מנותקת מן הרחם, החדרת ראש מברשת לאיסוף תאים מן fimbria tubal מתרחשת בדרך כלל כאשר החצוצרות מחוברת לרחם.
    1. בעזרת מלקחיים קטנים, הכנס את המברשת (ראה טבלה של חומרים ) לתוך לומן של החצוצרה דרך סוף fimbriae. לאט לאט לסובב בכיוון השעון ולהזיז את המברשת קדימה דרך החלק infundibular של הנפילהצינור אפיאני, ואז אמפולה עד שהיא מגיעה אל האצבע.
    2. לאט לאט לסובב את המברשת נגד כיוון השעון כדי למשוך את המברשת. ודא כי המהירות המקסימלית של המברשת בתוך לומן הוא איטי יותר 1 ס"מ / ש.
    3. שוטפים את המברשת בתמיסה המשמרת (בבקבוקון) על ידי סיבוב ומערבל את המברשת 10 פעמים בפתרון.
    4. הדק את מכסה הבקבוקון.
    5. רשום את המידע של המטופל ואת לרוחב של הדגימה.
    6. חנות בקבוקון במקרר 4 מעלות צלזיוס (עד) 6 חודשים.

3. Tubal ציטולוגיה הכנת שקופיות

  1. טען את הבקבוקון מדגם לתוך המעבד האוטומטי להכנת שקף.
    הערה: אנו משתמשים במעבד האוטומטי להכנת הכנת שקפים. השלבים הבאים מבוצעים באופן אוטומטי לאחר הבקבוקון מדגם ממוקם לתוך המעבד: (1) התאים ופסולת מופרדים ו מפוזרים באמצעות סיבוב של מסנן הבדיקה בתוך המדגםצְלוֹחִית. (2) תאים Tubal נאספים מן המשטח החיצוני של המסנן על ידי ריק עדין. (Iii) המסנן הוא הפוך ולחץ על השקופית כדי לאפשר לתאים לדבוק באזור עגול בתוך השקופית. (Iv) השקופית היא קבועה נוספת באמבטיה מקבע התא ומוכן מכתים וניתוח cytology. למרבה הצער, אין שיטה ידנית חלופית, אשר יכול להניב תוצאות עם איכות דומה.

4. השתנה Papanicolaou פרוטוקול מכתים

  1. הכתם את השקופיות שנעשו משלב 3.1 על ידי הפעלת הליך אוטומטי non-gyn automatized, כפי שמוצג בטבלה 1 .
    הערה: שיטת מכתים מייצג שינוי של טכניקת מכתים Papanicolaou שאנחנו משתמשים באופן שגרתי עבור דגימות שאינם גינקולוגים. אנו משתמשים במעבד רקמות אוטומטי כדי להכתים כמה שקופיות. בחרנו את הליך Non-Gyn מכתים על ההליך מכתים גין במחקר זה. Eosin בשימוש הוא EA-65, במקום EA-50 המשמשדגימות גינקולוגיות. בנוסף, OG-6 בהליך מכתים גין, אשר בעיקר עבור מכתים תא קשקשי, אינו נכלל בהליך מכתים מאז תאים קשקשיים צפויים להיראות במחקר זה. EA65 (Eosin Azure) הוא פתרון הכתם הנגדי המורכב של 3 צבעים: Eosin Y, ירוק FCF ירוק, חום ביסמרק Y. ההליך מתואר בטבלה 1 .
  2. בצע הליך הידוק מהיר של פאפ באופן הבא.
    1. טובלים את השקופית עשה בשלב 3.1 לתוך אתנול 95%, 10 פעמים, עם כל מטבל לוקח בערך 1 s.
    2. טובלים את השקופית לתוך H 2 O, 10 פעמים, עם כל מטבל לוקח בערך 1 s.
    3. יוצאים את השקופית hematoxylin עבור 10 - 60 s.
    4. טובלים את השקופית לתוך H 2 O, 10 פעמים, עם כל מטבל לוקח בערך 1 s.
    5. טובלים את השקופית לתוך אתנול 95%, 10 פעמים, עם כל מטבל לוקח בערך 1 s.
    6. יוצאים שקופית EA65 עבור 1 - 3 דקות.
    7. טובלים את שקופית intO H 2 O, 10 פעמים, עם כל מטבל לוקח בערך 1 s.
    8. טובלים את השקופית לתוך אתנול 95%, 10 פעמים, עם כל מטבל לוקח בערך 1 s.
    9. טובלים את השקופית בקסילן עד שהשקופית תתבהר.
      הערה: זהו שינוי Papanicolaou הליך מכתים. שיטה זו משמשת שיטת כתם מהירה יותר במקרים עם זמן מוגבל או שטח כמו השאיפה באתר המחט בסדר דגימות STAT. הליך זה מספק מכתים איכות דומה כמו הליך non-Gyn automatized stain. הנוהל מתואר בטבלה 2 .

5. ספין תאים על שקופיות

הערה: שלושה שקופיות cytospin מיוצרים עבור כל הדגימה. שקופית אחת היא H & E מוכתמים להשוואה מורפולוגית עם שקופית ציטולוגיה. שני שקפים לא מוכתמים נעשו עבור המחקר בעתיד IHC מכתים. השלבים המפורטים של סעיף זה אינם מוקד מאמר זה; לכן, לא נדון בהם בהרחבהetails.

  1. הכן cytocentrifuge עם שקופית שכותרתו, משפך הדגימה מסנן עבור כל דגימה להיבדק.
  2. לרכז את התאים על ידי centrifuging במשך 5 דקות ב 200 x גרם.
  3. הסר כמחצית supernatant ולאחר מכן מחדש להשעות את התאים על ידי pipetting עדין.
  4. הוסף 200 μL של ההשעיה כל תא למשפך הדגימה.
  5. ספין ב 250 xg במשך 5 דקות. בזהירות להסיר את השקופיות (ים) מן cytocentrifuge ולהעביר אותם אתנול 95% עבור קיבעון.
  6. יבש יבש לפני מכתים ולאחסון לטווח ארוך.
    הערה: בהתאם לצפיפות התאים בשקופיות הסופיות, ניתן לדלג או להתאים את שלב 5.2 ואת שלב 5.3. במחקר זה, אנו דורשים לפחות 2 אשכולות התא הנוכחי לכל להציג כוח גבוה לצפיפות הסלולר נאותה.

6. חתך ובוחן בהרחבה את פרוטוקול הסיום (SEE-FIM)

  1. תקן את הדגימה כולה (כולל הרחם, צינורות החצוצרה הדו-צדדית והשחלות)ב 10% פורמלין לפני גרוס כדי למזער פילינג.
  2. בעדינות ובזהירות לנתק את החצוצרות צינורות מן הרחם בבית היתוך באמצעות מלקחיים קטנים מספריים. אם הידבקות קיים, בזהירות לנתח את סוף fimbriated ממשטח השחלה באמצעות מלקחיים קטנים מספריים; צעדים אלה הם חיוניים כדי למזער זיהום לחצות את הגידול בין השחלה ואת החצוצרות בגלל הקירבה האינטימית שלהם.
  3. לקטוע את infundibulum ו fimbriae קטע (דיסטלי 1.0 - 2.0 ס"מ של החצוצרות צינור) משאר הדגימה.
  4. סעיף infundibulum ו fimbriae longitudinally במרווחי 2 מ"מ. שלח את כל הסעיפים בטוטו לבחינה היסטולוגית.
  5. סעיף ismmus ו ampulla במרווחים 2-3 מ"מ להגיש לחלוטין.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

המחקר הקודם שלנו הראה כי דגימה ישירות מן החצוצרות החצוצרות נכרת באמצעות מברשת מגע עדין יכול להניב כמותית ואיכותית נאותה הדגימה להערכה ציטולוגית נוספת. בנוסף, השילוב של הכנת שקופיות אוטומטית שינוי Papanicolaou מכתים לאפשר הפתולוג כדי לדמיין טוב יותר את הפרטים ציטולוגיים לעשות אבחנה מדויקת. דוגמה של כתם ידני מהיר pap של דגימה מחצוצרה חצוצרות שפיר הוא באיור 1 . כפי שמוצג בתרשים 1 , תמרון המברשת גורם לדגימה נאותה של הדגימה. יתר על כן, מהיר ידני כתם פופ מספק רזולוציה טובה של פרטים גרעיניים שקיפות cytoplasmic, אשר חיוניים להערכה מדויקת של תאים tubal.

ההשוואה בין ה- Fast pap המהירAin של שקופית cytology ואת מכתים H & E של שקופית cytospin מוצג באיור 2 . אחד היתרונות של ההכנה שקופיות הנ"ל לעומת כתם קונבנציונאלי היא כי יש לה רקע הרבה יותר נקי ופתרון טוב יותר של פרטים גרעיניים שקיפות cytoplasmic. דוגמה אחת של SEE-FIM של פרוטוקול שפופרת Tube באה לידי ביטוי באיור 3 . כפי שמוצג בתרשים 1 , נוכחות של שתי אוכלוסיות תאים (תאים מסולסלים ותאי הפרשה) היא תכונה של אפיתל שפיר שפיר. היסטולוגיה של חלקים מייצגים של fimbria ו ampulla מוצג באיור 4 . תמרון המברשת מראה הפרעה קלה של מבנה vei בכשליש הדגימה.

במחקר הקודם שלנו 17 , האבחנה ציטולוגית tubal בקורלציה עם dia היסטולוגיתGnosis של HGSC טוב מאוד (100%). המראה הציטולוגי של ממאירות מראה אשכולות תלת מימדיים המורכבת תאים עם נוקלאולי בולט anisonucleosis ( איור 5 א ). לעומת זאת, הציטולוגיה תגובתי טיפוסית הציג כמו גיליונות זוויתי מורכב של תאים לא טיפוסיים עם נוקלאולי קטן ו anisonucleosis מתון ללא אשכולות תלת מימדי ( איור 5 ב ). HGSC דמויי קבוצות תאים נרשמו בהקשר של גיליונות מזווית של תאים אפיתל נורמלי ( איור 6 ).

איור 1
איור 1: דוגמה של ידני מהיר כתם פאפ של אפיתל שפיר שפיר. ( א ) תאי רקע. תאים ברקע כוללים אשכולות תאים קטנים המורכבת של תאים מפרידים גדולים תאים קטנים ciliated, יחיד גדול (כנראה שניותתאים רטוריים) ותאים קטנים (כביכול תאים מסולסלים), מפוזרים גרעינים עירומים גדולים וקטנים. ( ב ) אשכול תא קטן המורכב תאים קטנים ciliated ותאי הפרשה גדולים (חץ). ( ג ) רצועת אפיתל מסולקת (חץ). ( ד ) אפיתל תובל עם סדינים כמו מזותל. הבחין בתאים המצונפים בפריפריה (חץ). אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.

איור 2
איור 2: השוואה בין כתם מהיר פאפ ידני של שקף ציטולוגיה ( A ) ו- H & E מכתים של שקופית cytospin ( B ). אשכול תא זוויתי שפיר נמצא במרכז כתם ה- Pap ו- H & E. שתי השיטות לספק טוברזולוציה עבור הערכה ציטולוגית של הדגימה. עם זאת, כתם פאפ של השקופית ציטולוגיה הניב רקע נקי. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.

איור 3
איור 3: איור של SEE-FIM של צינור פאלופיאני. שים לב חתך האורך של קטע infundibulum ו fimbriae ואת חתך רוחב של איזמוס ואמפולאה. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.

איור 4
איור 4: היסטולוגיה של אפיתל שפיר שפיר.( א ) Fimbriae קטע. אפיתל צינורי מורכב משתי אוכלוסיות תאים שונים: תאים קטנים ciliated (חיצים) ותאים גדולים שאינם מסוננים הפרשה (מעגלים). הפרעה וילה קלה הוא ציין. ( ב ) אמפולה סעיף. הערה אצבע דמוי fimbria. ( ג ) הפרעה קלה של מבנה vei (חץ). אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.

איור 5
תרשים 5: השוואה בין אשכול לא טיפוסי ( א ) לבין אשכול ממאיר תלת ממדי ( b ) . ציטולוגיה ממאירה מראה אשכולות תלת מימדיים המורכבים תאים עם נוקלאולי בולט anisonucleosis ( ב ). ציטולוגיה לא טיפוסית מראה גיליון זוויתיS מורכב מתאים לא טיפוסיים עם נוקלאולי קטן מתון anisonucleosis. הערה: אין קיבוץ תלת-מימדי ( א ). נתון זה אומץ מתוך התייחסות 17 .

איור 6
איור 6: קורלציה בין מראה ציטולוגי והיסטולוגי של ניאופלזיה תוך-רחמית. ( א ) neoplasia inttubal cytological. Neoplasia cytological intratubia מראה רכישת קו ממדי תלת מימדי anisonucleosis משמעותי דובדבן אדום גדול nucleoli (מעגל) בהקשר של גיליונות מזווית של תאים אפיתל רגיל (חץ). ( ב ) מקביל סעיף פתולוגיה כירורגית עם קרצינומה intraepithelial tubal. שים לב תאים dysplastic מאוד (מעגל) סמוך לתאים אפיתל מראה נורמלי יחסית (חץ). נתון זה כברשאומצה מתוך התייחסות 17 . אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.

</ Table>

טבלה 1: Non-Gyn מכתים שלבים.

95% אתנול 5 דקות
H2O 10 שניות
Hematoxylin 15 שניות - 3 דקות
מזוקקים H2O 5 דקות
95% אתנול 30 שניות
EA65 2 - 5 דקות
95% אתנול 30 שניות
95% אתנול 30 שניות
100% אתנול 30 שניות
100% אתנול 30 שניות
קסילן 30 שניות
קסילן 5 דקות
95% אתנול 10 מטבלים
H2O 10 מטבלים
Hematoxylin 10 שניות 1 דקות
מזוקקים H2O 10 מטבלים
95% אתנול 10 מטבלים
EA65 1 - 3 דקות
95% אתנול 10 מטבלים
100% אתנול 10 מטבלים
קסילן טובלים עד צלול

טבלה 2: ידני מהיר stap צעדים.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

ניתוחי מלחה דו-צדדיים מניעתית או סלפינגו-אופורקטומומיה הראו ירידה בסיכון לפתח HGSC באוכלוסיות בסיכון גבוה, כמו נשים עם מוטציות גנטיות של BRCA ותולדות סרטן משפחתיות חזקות. עם זאת, סטריליות ואת גיל המעבר כירורגית שנגרמו על ידי ניתוח הן השלכות חמורות ולעשות החלטה קשה, במיוחד עבור נשים בגיל הפוריות. המחקר הקודם הראה קורלציה מצוינת בין ציטולוגיה צינולוגית והיסטולוגיה 17 . אנו מאמינים כי cytology tubal על תאים צינורית לחצוצרה שנאספו לפרוסקופי יש פוטנציאל גדול להיות כלי מעשי, מיני פולשנית לגילוי מוקדם של סרטן.

השלבים הקריטיים ביותר עבור אוסף מוצלח של תאים צינור החצוצרות הם: 1) הזמן בין הידוק אספקת הדם אוסף של תאים; ו 2) תמנון עדין ונכון של מברשת מגע עדין.

הזמן (בתוך 30 דקותEs) בין clamping ואיסוף של תאים הוא חיוני לשימור טוב של המורפולוגיה ופרטים גרעיניים של תאים שנאספו. תקשורת יעילה בין הפתולוגים לבין המנתחים להבטיח כי הדגימה מועבר לאתר איסוף בתוך תקופה זו. רובם המכריע של המקרים שנכללו במחקר בוצעו בחדר הסדוק. כדי לאסוף בהצלחה תאים tubal, אדם מבצע את האוסף צריך לנסות כמיטב יכולתו כדי למנוע את המברשת לגעת משטח השחלות השחלות בשל ההשלכות הזמני אם המקרה הוא ממאיר. לפעמים, זה עלול להיות קשה בשל הקרבה של שני האיברים המעורבים ואת המורכבות של האנטומיה הדגימה. ההפרדה של צינורות החצוצרות מן הדגימה כולה לפני האוסף עשוי להיות מוצדק.

מברשת מגע עדינה בשימוש במחקר זה יכול לאסוף מספר רב של תאים, כי אז ניתן להעביר בקלות שקופיות או בקבוקון משמר פתרון,ויש לו קצה עדין המגע שנועד למזער טראומה לתעלה. יתר על כן, את כל התמרון צריך להיות איטי ועדין, כדי למנוע קשות מטריד את המבנים veos של רירית tubal. במקרים מסוימים, זה עלול להיות קשה לקבל את המברשת לעבור את החצוצרות כולו בשל חסימה. עם זאת, חשוב לנסות כמיטב יכולתו כדי לאסוף תאים מן חלק fimbriae ו infundibular, שכן הוא האמין כי הרוב של HGSC שמקורה בקצה הדיסטלי של החצוצרות. עם זאת, האוסף לא צריך להמשיך אם שלמות הדגימה יכול להיות בסכנה.

בהתבסס על הניסיון שלנו, הדגימה ניתן לאחסן פתרון משמר במשך מספר חודשים מבלי להתפשר על המורפולוגיה של תאים שנאספו. הכתם Papanicolaou היא טכניקה ציטולוגית נפוץ cytopathology. היתרונות העיקריים של הליך זה מכתים כוללים: 1) הגדרה טובה של פרטים גרעיניים;ו 2) שקיפות cytoplasmic. במחקר זה, שני פרוצדורות כתם Papanicolaou שונה משמשים מכתים ציטולוגיה cytology, כולל הליך אוטומטי non-Gyn automatized ואת הליך מהיר מכתים פאפ. שני הליכים לתת מכתים שקופית מעולה ואמין, אשר מראה שימור טוב של פרטים גרעיניים cytoplasmic, ורקע נקי. למרות שקופיות cytospin בדרך כלל יש רקע גדול יותר בהשוואה שקופיות ציטולוגיה, כתם H & E שלהם הוכיח איכות דומה של מכתים התא. מכתים H & E של שקופיות אלה יכולים להיות שיטה חלופית מתאים ניתוח cytology tubal אם מעבד אוטומטי אינו זמין.

פרוטוקול SEE-FIM משמש לגילוי של כל החצוצרות הנכללות במחקר זה, כולל מקרים שפירים וממאירים. פרוטוקול SEE-FIM פותח בתחילה עבור דגימות salpeo-oophorectomy חיוביות של BRCA, שהן אופציה סטנדרטית להפחתת הסיכון Fאו מוטציות BRCA. פרוטוקול זה מאפשר חשיפה מקסימלית של plicae tubal, שממנו STIC הוא האמין שמקורם. זה נלקח כיום כסטנדרט הזהב לאיתור HUBSC הארכת סיבוב ו STIC. המתאם בין מציאת ציטולוגית הצינורית עם הממצא ההיסטורי SEE-FIM הוא חיוני עבור מחקר זה כדי לאמת את היעילות של הפרוטוקול הנוכחי.

דאגה אחת של אוסף תאים צינורי באמצעות מברשת מגע עדין היא כי התמרון עלול להפריע לשלמות של אפיתל הצינור ולהפריע פרשנות היסטולוגית מדויקת מאוחר יותר של דגימות כירורגיות, במיוחד את הזמני של הגידול, אם ממאירות מזוהה. עם זאת, בהתבסס על הניסיון שלנו, כשליש מהמקרים להראות הפרעה קלה של הוילי על ניתוח היסטולוגיה, אשר בדרך כלל לא מפריע הפרשנות הסופית של היסטולוגיה צינורי.

המחקר הקודם שלנו הוכיח כי ציטולוגיה צינורי הוא רגיש specifIC ב גילוי HGSC ו STIC. זה יהיה עניין רב כדי לבדוק אם השילוב של ציטולוגיה צינורי עם ביומרקרים מכתים כגון P53 ו IMP3 עשוי להגביר את הרגישות ואת הספציפיות של גילוי סרטן seros ממוצא tubal. מחקר עתידי יתמקד בפיתוח הליך לפרוסקופי עבור דגימת אפיתל החצוצרות in vivo .

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

המחברים מצהירים כי אין להם אינטרסים פיננסיים מתחרים.

Acknowledgments

המחברים מבקשים להודות במחלקה לפתולוגיה, אוניברסיטת אריזונה, על התמיכה הכספית. הפרויקט נתמך חלקית על ידי קרן מארק וג 'יין גיבסון קרן כדי WZ.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Cytobrush plus GT gentle touch of Medscand sample collection kit CooperSurgical C0112
ThinPrep preservCyt solution HOLOGIC 234005
ThinPrep 2000 Processor HOLOGIC 70031-001
Papanicolaou Stain, EA 65 sigma aldrich HT40432
95% Ethanol sigma aldrich 652261
100% Ethanol sigma aldrich 493538
Xylene sigma aldrich 214736
Hematoxylin sigma aldrich H9627
Sakura Tissue Tek 2000 tissue processor SAKURA TISSUE-TEK VIP 2000
Mayo Dissecting Scissors,5.5 straight Pilgrim medical equiment FA710-45
Chemware Forceps United state plastic corp 76122
Tissue-Tek Accu-Edge Trimming blades,short SAKURA 4785
Tissue-Tek Accu-Edge Trimming blades handle,short SAKURA 4786

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Carlson, J. W., et al. Serous tubal intraepithelial carcinoma: its potential role in primary peritoneal serous carcinoma and serous cancer prevention. J Clin Oncol. 26 (25), 4160-4165 (2008).
  2. Kurman, R. J., Shih Ie, M. The origin and pathogenesis of epithelial ovarian cancer: a proposed unifying theory. Am J Surg Pathol. 34 (3), 433-443 (2010).
  3. Lee, Y., et al. A candidate precursor to serous carcinoma that originates in the distal fallopian tube. J Pathol. 211 (1), 26-35 (2007).
  4. Li, J., Fadare, O., Xiang, L., Kong, B., Zheng, W. Ovarian serous carcinoma: recent concepts on its origin and carcinogenesis. J Hematol Oncol. 5, 8 (2012).
  5. Przybycin, C. G., Kurman, R. J., Ronnett, B. M., Shih Ie, M., Vang, R. Are all pelvic (nonuterine) serous carcinomas of tubal origin? Am J Surg Pathol. 34 (10), 1407-1416 (2010).
  6. Zheng, W., Fadare, O. Fallopian tube as main source for ovarian and pelvic (non-endometrial) serous carcinomas. Int J Clin Exp Pathol. 5 (3), 182-186 (2012).
  7. Carcangiu, M. L., et al. Atypical epithelial proliferation in fallopian tubes in prophylactic salpingo-oophorectomy specimens from BRCA1 and BRCA2 germline mutation carriers. Int J Gynecol Pathol. 23 (1), 35-40 (2004).
  8. Leunen, K., et al. Prophylactic salpingo-oophorectomy in 51 women with familial breast-ovarian cancer: importance of fallopian tube dysplasia. Int J Gynecol Cancer. 16 (1), 183-188 (2006).
  9. Piek, J. M., et al. Dysplastic changes in prophylactically removed Fallopian tubes of women predisposed to developing ovarian cancer. J Pathol. 195 (4), 451-456 (2001).
  10. Crum, C. P., et al. The distal fallopian tube: a new model for pelvic serous carcinogenesis. Curr Opin Obstet Gynecol. 19 (1), 3-9 (2007).
  11. Jarboe, E. A., et al. Tubal and ovarian pathways to pelvic epithelial cancer: a pathological perspective. Histopathology. 53 (2), 127-138 (2008).
  12. Menon, U. Ovarian cancer screening has no effect on disease-specific mortality. Evid Based Med. 17 (2), 47-48 (2012).
  13. Buys, S. S., et al. Effect of screening on ovarian cancer mortality: the Prostate, Lung, Colorectal and Ovarian (PLCO) Cancer Screening Randomized Controlled Trial. JAMA. 305 (22), 2295-2303 (2011).
  14. Otsuka, I., Kameda, S., Hoshi, K. Early detection of ovarian and fallopian tube cancer by examination of cytological samples from the endometrial cavity. Br J Cancer. 109 (3), 603-609 (2013).
  15. Dhanani, M., Nassar, A., Dinh, T. Classification of Fallopian Tube Cytology Sampling to Develop a Model for Future Peritoneal and Ovarian Cancer Screening. J Am Soc Cytopathol. 3 (5), S35-S36 (2014).
  16. Rodriguez, E. F., Lum, D., Guido, R., Austin, R. M. Cytologic findings in experimental in vivo fallopian tube brush specimens. Acta Cytol. 57 (6), 611-618 (2013).
  17. Chen, H., Klein, R., Arnold, S., Chambers, S., Zheng, W. Cytologic studies of the fallopian tube in patients undergoing salpingo-oophorectomy. Cancer Cell Int. 16, 78 (2016).

Tags

רפואה גליון 125 cytology Tubal קרצינומה seros בדרגה גבוהה קרצינומה intraepithelial צינורית גילוי מוקדם קרצינומה צינור החצוצרות
Tubal ציטולוגיה של שפופרת Tube ככלי מבטיח עבור סרטן השחלות איתור מוקדם
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Chen, H., Klein, R., Arnold, S.,… More

Chen, H., Klein, R., Arnold, S., Wang, Y., Chambers, S., Zheng, W. Tubal Cytology of the Fallopian Tube as a Promising Tool for Ovarian Cancer Early Detection. J. Vis. Exp. (125), e55887, doi:10.3791/55887 (2017).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter