Summary
A utilidade de um método analítico para determinar arsênio inorgânico em uma ampla gama de matrizes alimentares é demonstrada. O método consiste em extração seletiva de arsênio inorgânico em clorofórmio com uma determinação final por espectrometria de absorção atómica-geração de hidreto.
Abstract
O Europeu autoridade segurança alimentar (AESA) sublinhada no seu parecer científico sobre arsênico nos alimentos que, a fim de apoiar uma avaliação da exposição sonora de arsênio inorgânico através da dieta, informações sobre distribuição de espécies de arsênico em vários tipos de alimentos devem ser gerados. Um método, previamente validado em uma experimentação colaborativa, foi aplicado para determinar arsênio inorgânico em uma grande variedade de matrizes de alimentos, abrangendo grãos, cogumelos e alimentos de origem marinha (31 amostras no total). O método é baseado na deteção por espectrometria de absorção atômica-geração de injeção-hidreto de fluxo do iAs seletivamente extraído em clorofórmio após a digestão das proteínas com HCl concentrado. O método é caracterizado por um limite de quantificação de 10 µ g/kg peso seco, que permitiu a quantificação de arsênio inorgânico em uma grande quantidade de matrizes de comida. Informação é fornecida sobre pontuações de desempenho dadas aos resultados obtidos com este método e que foram relatados por diferentes laboratórios em vários testes de proficiência. O percentual dos resultados satisfatórios obtidos com o método discutido é maior do que dos resultados obtidos com outras abordagens analíticas.
Introduction
Desde de janeiro de 2016 os níveis máximos de arsênio inorgânico (iAs) em várias commodities arroz foram incluídos no Regulamento (CE) 1881/2006 da Comissão configuração teores máximos de certos contaminantes presentes nos géneros alimentícios1 com 0,10 µ g/L de arroz destinado a produção de alimentos para lactentes e crianças jovens, 0,20 µ g/L para os não-estufado arroz branqueado (arroz polido ou branco), 0,25 µ g/L para o arroz parboilizado e arroz descascado e 0,30 µ g/L para waffles de arroz, arroz bolachas, bolachas de arroz e bolos de arroz. Esta actualização da legislação europeia para contaminantes em alimentos seguiram o parecer científico sobre arsênico em alimentar da Autoridade Europeia para a segurança dos alimentos (AESA)2 em que é estima-se que a exposição através da dieta ao iAs, para os consumidores de médias e altas em Europa é tal que pode representar um risco para alguns consumidores, mantendo em mente que a exposição crônica a iAs provoca cancro do pulmão, pele e bexiga e lesões de pele. O relatório científico da AESA na exposição alimentar ao arsênio inorgânico na população europeia3, publicado em 2014, conclui-se que os principais contribuintes para iAs na dieta para consumidores de todas as idades são produtos transformados, feitos de cereais, além de arroz e que também arroz, leite, produtos lácteos e água potável contribuem significativamente para a ingestão de iAs, com leite e produtos lácteos sendo os principais contribuintes para crianças e bebés.
Em 2010, o laboratório de referência da União Europeia para os metais pesados na alimentação animal e humana, EURL-HM, correu uma proficiência testar, IMEP-107, para a determinação do iAs no arroz, demonstrando que era possível determinar iAs no arroz com suficiente precisão, independentemente do método analítico usado4.
Vários métodos analíticos validados para a determinação da iAs nos géneros alimentícios. A China foi o primeiro país a introduzir na sua legislação um nível máximo para iAs no arroz. Para viabilizar a implementação da legislação, um método padrão foi publicado em 2003 para a determinação do que no padrão é chamado de "abio-arsênico"5. Comité Europeu de normalização (CEN), publicado em 2008 um método padronizado, EN 15517:2008, para a determinação do iAs em algas6. Os dois métodos baseiam-se na utilização de condições otimizadas para gerar arsina apenas do iAs. Em que não é necessária a separação da forma do iAs de outras espécies de arsênico que também podem gerar hidreto de arsênio. A decisão final é feita por fluorescência atômica5 ou por espectrometria de absorção atómica de geração hidreto, HG-AAS6. No entanto, é difícil definir as condições exatas para gerar hidreto de arsênio sem sofrer interferências de outros compostos de arsénio e todas as frações de massa iAs em algas relatadas no IMEP-112 (PT organizado pela EURL-HM) obtidos com esses dois métodos. , foram marcados como insatisfatório7. Orgânico de arsénio espécies, tais como o ácido monomethylarsonic (MMA), ácido dimethylarsinic (DMA) e arsenosugars presentes em amostras de algas, podem gerar hidretos voláteis também e podem interferir na determinação do iAs, levando a uma polarização positiva nos resultados da8 .
CEN publicou, recentemente, um novo método padrão, EN 16802:2016, para a determinação do iAs em alimentos de origem marinha e vegetal usando HPLC-ICP-MS9. Nem todos os laboratórios estão equipados com esse tipo de instrumentação e métodos não-caros, direta são necessários, em particular nos países com menos infra-estruturas laboratoriais desenvolvidos.
Em 2012 CEN padronizado um método para a determinação do iAs em alimentos animais para HG-AAS após a extração de microondas e off-line separação de iAs por extração de fase sólida (SPE), EN 16278:201210. Esse método que provou estar apto para analisar iAs na alimentação poderia falta a sensibilidade necessária para determinar o iAs em alimentos de origem não-marinhas, que, de acordo com a AESA, parece ser os principais contribuintes dietéticos na Europa3. No entanto, o mesmo grupo que desenvolvido e validado EN 16278:2012 testado e com sucesso aplicado e validado o método para determinar o iAs em marisco e arroz em um julgamento colaborativo11,12.
Um método alternativo para a determinação do iAs em matrizes de alimentos após a extração seletiva de iAs em clorofórmio e quantificação mais HG-AAS, recentemente foi validado pelo centro comum de investigação (CCI), em um julgamento colaborativo13. A seletividade do método melhor do que o de HG-AAS diretos e é fácil de implementar que não exijam a utilização de instrumentos sofisticados, tais como HPLC-ICP-MS. Neste manuscrito, a viabilidade de usar esse método para determinar o iAs em uma ampla gama de matrizes de alimento: legumes, grãos, cogumelos e alimentos de origem marinha, tem sido avaliada. Além disso, o desempenho de laboratórios que usou o método nos testes de proficiência organizados pela EURL-HM e o CCI cobrindo várias matrizes é descrito.
Protocol
Nota: todo o material utilizado deve ser descontaminado com 10% (m/v) HNO 3 e lavado pelo menos duas vezes com água desionizada.
1. hidrólise
- pesar rigorosamente ca. 0,5 a 1 g de amostra liofilizada (ou a quantidade equivalente de amostra homogeneizada recentemente , por exemplo, 1 a 4 g) em um tubo de centrífuga de polipropileno de 50 mL com parafuso cap
- 4,1 ml de água desionizada.
- Agitar com um agitador mecânico por cerca de 5 min, até que a amostra estiver completamente molhada.
- Adicionar 18,4 mL de ácido clorídrico concentrado (HCl), não menos do que 37% m / v.
- Agitar com um agitador mecânico durante 15 min.
- Deixe descansar por 12-15 h (por exemplo durante a noite).
2. Extração de
- Adicionar 2 mL de brometo de hidrogênio (HBr) não menos do que 48% m/v e 1 mL de sulfato de hidrazina (N 2 H 6 SO 4) (15 mg/mL) de solução de amostra hidrolisada.
- Agitar durante 30 s, com um agitador mecânico.
- Adicionar 10 mL de clorofórmio (CHCl 3).
- Agitar durante 5 min com um agitador mecânico.
- Centrifugue por 5 min em 800 g de x.
- Pipetar a fase de clorofórmio (fase inferior) para outro tubo de centrífuga de polipropileno de 50 mL.
- Adicionar 10 mL de clorofórmio de novo à fase ácida restante e repetir a extracção. No final cerca de 20 mL de clorofórmio deve foram recolhido. Tome cuidado para evitar contaminação cruzada da fase ácida.
3. Limpa-se a fase de clorofórmio
- centrífuga as fases de clorofórmio em pool por 5 min em x 800 g. O tempo de centrifugação ou a velocidade pode ser aumentada se necessário para atingir uma clara separação das duas fases.
- Remover todos os resíduos de ácido fase restante sobre o clorofórmio com uma pipeta de 1 mL. Esta etapa é crucial. Quaisquer resíduos de ácido fase permanecendo na fase de clorofórmio levará a superestimada iAs resultados porque todas as outras espécies de arsênico na amostra estão presentes na fase ácida.
- Filtro através de uma membrana hidrofóbica de PTFE (25 mm de diâmetro) para remover os resíduos de fase sólida ou ácido presentes na fase de clorofórmio e recolher a fase de clorofórmio em um tubo de centrífuga de polipropileno de 50 mL.
4. Extração de volta-
- Adicionar 10 mL de 1 M de HCl para extrair volta iAs desde a fase de clorofórmio coletado após a etapa de filtração.
- Agitar durante 5 min com um agitador mecânico.
- Centrifugue por 5 min em 800 g de x.
- Pipetar a fase ácida (fase superior) e despeje em um copo de vidro de 250 mL (por exemplo, Pyrex) para mineralização.
- Repetir a extracção de costas e combinar as fases coletadas de HCl.
5. Mineralização da amostra
Nota: este passo permite a eliminação de interferências e pré-concentração nas amostras em que a fração de massa do iAs é perto ou abaixo do limite de quantificação, e ele é frequentemente omitido pelos laboratórios que utilizam este protocolo com ICP-MS para determinação final em vez de HG-AAS.
- Suspender 20 g de hexaidrato de nitrato de magnésio [Mg (NO 3) 2 6 H 2 O] e 2 g de óxido de magnésio (MgO) em 100 mL de água desionizada. Adicione 2,5 mL da suspensão para o copo de vidro. Homogeneizar a suspensão ao adicioná-lo para evitar precipitação.
- Adicionar 10 mL de concentrado HNO 3 pelo menos 65% m/v e evaporar a seco em um banho de areia (ou uma placa térmica), evitando qualquer projeções. Para verificar que as amostras são totalmente secas, coloque um vidro de relógio em cima do copo de vidro e verificar que não há condensação é formada.
- Cobrir o béquer com vidros de relógio e coloque-os em um forno de mufla a temperatura inicial não superior a 150 ° c e aumentar progressivamente a temperatura para 425 ± 25 ° C, a uma taxa de 50 ° C/h. Maintain a 425 ° C, durante 12 h. Este passo é fundamental. Para evitar qualquer projeções para a taxa de aumento de temperatura deve ser estritamente implementada.
- Permitem que as cinzas arrefecer à temperatura ambiente.
- Adicionar 0,5 mL de água desionizada para molhar as cinzas e então adicionar 5 mL de HCL de 6 M. Tome cuidado para recuperar todos os cinzas das paredes do copo de vidro. Dissolver as cinzas completamente, tremendo, se necessário.
- Adicionar 5 mL de pre-redução agente, preparada dissolvendo-se 5 g de iodeto de potássio (KI) e 5 g de ácido ascórbico em 100 mL de água desionizada, e esperar 30 min para conseguir uma redução quantitativa do iAs para magnitude.
- Filtrar a solução através de um papel de Whatman número 1 ou equivalente e recolhê-la em um tubo de centrífuga de polipropileno de 50 mL. Enxágue o copo de vidro dobro com 6 M HCl. coletar os líquidos de lavagem em um 25 mL do tubo e torná-lo até um volume final com 6 M de HCl
Nota: quando a concentração de NIC em uma amostra é esperada para ser perto ou abaixo do limite de quantificação do método (0,010 mg/kg) , ou pelo contrário, alta, as etapas de mineralização 5.5-5.7 devem ser modificadas usando os volumes descritos na tabela 1, que iria fornecer um limite de quantificação inferior. Re-dissolvidas e pre-redução de amostras são estáveis por 24 h a 4 ° C. Pelo menos dois espaços em branco do reagente devem ser usados para o processo analítico todo.
6. Calibração de
Nota: para fins de quantificação usam uma curva de calibração externa de magnitude na faixa de 0,5 - 10 µ g/L. usar um 1000 mg/L As(V) solução-padrão certificada comercialmente disponível para construir a calibração curva de aplicar diluições subsequentes.
- Preparar um 10 mg/L solução padrão As(V) Pipetar 1 mL da solução padrão de 1.000 mg/L em um balão volumétrico de 100 mL e preenchendo-se o volume com 6 M de HCl.
- Preparar um 0,1 mg/L de solução-padrão de As(V) Pipetar 1 mL da solução-padrão de As(V) em um balão volumétrico de 100 mL 10 mg/L e preenchendo-se o volume com 6 M de HCl.
- Preparar um 25 µ g/L As(V) solução padrão Pipetar 25 mL da solução-padrão de As(V) em um balão volumétrico de 100 mL 0,1 mg/L e encher até a marca com 6 M de HCl.
- Preparar a curva de calibração da magnitude da seguinte forma: Pipetar da 25 µ g/L solução-padrão de As(V) os volumes dados na tabela 2 para balão volumétrico de 50 mL, adicionar 10 mL da solução de pre-reduzindo cada balão volumétrico, esperar 30 min, em seguida, preencha o volume com 6 M de HCl. Outros volumes são adequados, desde que estes mantenham as proporções descritas acima.
- Preparar uma calibração em branco da seguinte forma: pipetar 10 mL 6 M de HCl e 10 mL pre-reduzindo a solução num balão volumétrico de 50 mL. Espere 30 min e encha-o em seguida para a marca com 6 M.
- Usar os padrões marcados como QC1 e QC2 na tabela 2, como controle de qualidade: QC1 garante que a quantificação a nível de baixa concentração é correta e QC2, garante que a resposta é estável em altas concentrações, com nenhum desvio significativo tempo.
7. Determinação
espectrómetro de absorção- uso uma atômica equipado com um auto-sampler, um sistema de geração de injeção-hidreto de fluxo e uma célula de quartzo electro-termicamente aquecida para fins de deteção e quantificação, seguindo o instrumental condições para quantificação de iAs FI-HG-AAS, conforme listado na tabela 3.
8. Quantificação
- calcular o iAfração em massa s nas amostras analisadas (expressa em mg/kg), usando a seguinte equação:
onde:
C x: concentração no extrato (µ g/L), calculado a partir da curva de calibração
C BI: concentração da amostra em branco do reagente (µ g/L), extrapolada a partir da curva de calibração
v: volume Final da etapa mineralização amostra (5.7), geralmente V = 25 mL
w: peso de amostra ( em gramas)
Representative Results
O método foi aplicado para determinar a fração de massa do iAs em vários produtos alimentares, comprados em vários mercados espanhóis. Os resultados obtidos com este método para uma série de diferentes matrizes classificam-se na tabela 4 , seguindo as categorias usadas pela AESA3 em um relatório no qual exposição alimentar ao arsênio inorgânico na população europeia é avaliada o base de dados relatados pelos laboratórios oficiais de controle (OCL). Os resultados na tabela 4 representam a média de três repetições ± o desvio padrão da reprodutibilidade (S.R) para as categorias de alimentos diferentes, calculadas durante o ensaio colectivo em que o presente método foi validado13. Os resultados mostrados na tabela 4 estão em boa concordância com outros anteriormente publicados em semelhante matrizes11,12,14.
De particular relevância são os resultados obtidos para iAs em diferentes tipos de arroz, porque os limites máximos são incluídos para eles na legislação europeia de contaminantes em alimentos1. Os valores mais altos, sendo obtidos por arroz integral e a mais baixa para o arroz branco, de acordo com as conclusões do OCLs3. Os mais altos níveis foram encontrados para as algas marinhas Hizikia fusiforme, cujo consumo tem sido desencorajado por várias autoridades, como indicado no relatório pela AESA.
O desempenho dos laboratórios que participaram em PTs organizado pela EURL-HM e o CCI e que usou este método para a determinação da iAs, tem sido comparado com o desempenho dos laboratórios usando outros métodos. A maioria dos outros métodos é baseada em HPLC-ICP-MS (cerca de 50% dos resultados avaliados) e na HG-AAS sem separação anterior do iAs de outras espécies de arsênio (25% do total), Figura 1. Outras abordagens usadas (cerca de 15% dos resultados avaliados), basearam-se na atomização Eletrotérmica (ETAAS), detecção de fluorescência e ICP acoplada a espectroscopia de emissão atômica (ICP-AES), com e sem geração de hidreto e são avaliadas juntos sob o nome "Outros métodos" porque os números individuais seria muito pouco para ser de qualquer significado estatístico.
Alguns dos laboratórios que têm usado o método avaliado apresentou algumas variações do protocolo original e usado ICP-MS em vez de FI-HG-AAS. Frequentemente, esses laboratórios não se aplicava a etapa de incineração seco (etapa 5 no protocolo) e introduziram apenas a fase de HCl 1 M a ICP-MS. Os PTs avaliados coberto várias matrizes: arroz15,16, trigo, espinafre, algas17 e18de chocolate.
O desempenho dos laboratórios foi expressa como z-score:
Onde:
xlaboratório é o resultado da medição relatado por um participante em um PT
X-ref é o valor atribuído (usado para laboratórios de referência). Em todos os PTs tratados dentro deste papel, estabeleceu-se o valor atribuído por um grupo de laboratórios especializados no campo da análise de iAs usando diferentes métodos analíticos.
Σ é o desvio-padrão para avaliação de proficiência, corrigido pelo provedor do PT, levando em consideração o estado da arte em uma determinada área de análise. Nos PTs consideradas-se neste trabalho σ foi de 15% do valor atribuído para arroz e trigo, 22% em algas e 25% de chocolate e espinafre.
A interpretação do escore z é feita de acordo com ISO 17043:201019:
| partitura | ≤ 2 satisfatório (S) desempenho
2 < | placar | < 3 desempenho questionável do (Q)
| partitura | ≥ 3 Desempenho insatisfatório (U)
Setenta e cinco por cento dos resultados obtidos com o método descrito acima, tem um z-score satisfatória. A determinação da fração de massa iAs nas algas acabou por ser um desafio como o esperado, tendo em consideração a distribuição complexa de espécies de arsênico em matrizes de origem marinha. Dois dos três valores relatados no IMEP-112 para iAs em algas, usando este método, tem um z-escore insatisfatório. A mesma dificuldade foi observada entre os resultados obtidos com outros métodos. Excluindo os resultados relatados por iAs em algas, 85% dos resultados obtidos com o método avaliado foram satisfatórios.
Figura 1: Comparação de desempenhos (expresso como z-scores) de laboratórios tomando parte em PTs (IMEP-107, IMEP-112, EURL-HM-20 e IRMM-PT-43) com o método descrito neste artigo e outros comumente aplicados métodos. S: satisfatória, p: questionável e u: insatisfatório. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
| Fração de massa esperado iAs inferiores 0,010 mg/kg |
Fração de massa esperado iAs maior do que o que está coberto pela curva de calibração |
|
| volume HCL 6 mol L-1 usados para re-dissolver as cinzas (mL) | 2 | 10 |
| Pre-reduzindo o agente volume (mL) | 2 | 10 |
| Volume final (mL) | 10 | 50 |
Tabela 1: modificações do protocolo quando analisando amostras em que muito baixa ou muito alta iAs concentrações são esperadas.
| Concentração na curva de calibração (µ g/L) |
Alíquota (mL) |
| 0,5 | 1 |
| 1 | 2 (QC1) |
| 2.5 | 5 |
| 5 | 10 (QC2) |
| 7.5 | 15 |
| 10 | 20 |
| Todas as soluções padrão de calibração de magnitude deverão ser preparadas na hora, antes de cada calibração. | |
Tabela 2: Alíquotas retirado a 25 µ g/L solução-padrão de As(V) para construir a curva de calibração de magnitude em um volume final de 50 mL.
Geração de hidreto
espectrômetro
Tabela 3: Condições instrumentais utilizados para iAs quantificação HG-AAS.
| Comida | Eu-como (µ g/kg de peso fresco) | |
| Grãos e produtos à base de grãos | ||
| Arroz | Branco | 113 ± 18 |
| 73 ± 12 | ||
| 56 ± 9 | ||
| Brown | 197 ± 32 | |
| 125 ± 20 | ||
| 275 ± 44 | ||
| Parboilizado | 134 ± 21 | |
| 159 ± 25 | ||
| Discos (wafers) | 162 ± 26 | |
| 127 ± 20 | ||
| Produtos vegetais e legumes | ||
| Cogumelo desidratado | Boletus edulis | 174 ± 10 |
| Galocybe gambosa | 74 ± 4 | |
| Marasmius oreades | 104 ± 6 | |
| Cantharellus lutescens | 16 ± 1 | |
| Lentinula edodes | 96 ± 6 | |
| Algas marinhas | Hizikia fusiforme | 97000 ± 14550 |
| 44943 ± 6742 | ||
| Fucus vesiculosus | 288 ± 43 | |
| 433 ± 65 | ||
| Peixes e outros frutos do mar | ||
| Carne de peixe | Tainha Flathead cinza | 53 ± 12 |
| 21 ± 5 | ||
| Enguia europeia | 72 ± 16 | |
| 42 ± 9 | ||
| Lagostim | 33 ± 7 | |
| 20 ± 4 | ||
| Atum | 11 ± 2 | |
| 5 ± 1 | ||
| Moluscos | Molusco | 243 ± 54 |
| 133 ± 29 | ||
| Mexilhão | ± 32 32 | |
| 139 ± 31 | ||
Tabela 4: Resultados obtidos para uma gama de diferentes matrizes aplicando o método descrito.
Discussion
Um passo crítico no protocolo descrito é a limpar da fase de clorofórmio (passo 3.2) porque qualquer fase ácido resíduos restantes na fase de clorofórmio conduzirá aos resultados superestimada do iAs desde que todas as outras espécies de arsênico na amostra estão presentes no ácido fase. Isto é de particular relevância ao analisar amostras marinhas devido à presença de uma infinidade de espécies orgânicas, que poderiam ser responsáveis pela maior parte a fração em massa de arsênico presente na amostra. O uso de uma membrana hidrofóbica de PTFE (3.3) é de suma importância. Se uma emulsão é formada durante a extração do iAs em clorofórmio, pode aumentar a velocidade de centrifugação (3.1). Outras abordagens tradicionais para eliminar as emulsões também podem ser aplicadas. Outro passo crítico é a mineralização (etapa 5.3). A taxa de aumento de temperatura deve ser estritamente implementada para evitar saliências que reduziriam a recuperação de iAs, levando a um viés negativo não controlado e podem ser perigoso para o analista.
Como mencionado acima de alguns laboratórios têm usado o método avaliado usando ICP-MS em vez de FI-HG-AAS. Nesse caso, a etapa de incineração seco (etapa 5 no protocolo) não é necessária e a fase de HCl 1 M pode ser introduzida o ICP-MS. No caso de HG-AAS, devido ao seu maior limite de deteção, um passo de pré-concentração que também elimina possíveis interferências, é necessário.
O percentual dos resultados satisfatórios obtidos com o método descrito neste trabalho, ambos com e sem os resultados relataram para as algas, é comparável de HPLC-ICP-MS e maior que o do HG-AAS. A última técnica (HG-AAS) é amplamente disponível, mas propenso a interferências de espécie de arsênico orgânico, especialmente em bens alimentares com um padrão de distribuição de espécies do complexo arsênico. O menor percentual de resultados satisfatórios caracteriza os obtidos com "Outros métodos", mas deve ser mantido em mente que abrange várias abordagens analíticas, cada um deles representado por uma pequena quantidade de resultados, Figura 1. O método apresentado neste trabalho é uma alternativa ao mais sofisticado/caro HPLC-ICP-MS, ainda caracterizado por um desempenho semelhante mesmo em matrizes complexas. Frequentemente, o uso de técnicas hifenizadas, tais como HPLC-ICP-MS, requer operadores altamente qualificados e caros infraestruturas. O método apresentado neste artigo pode ser implementado por qualquer analista formada em química analítica básica.
Existem alguns inconvenientes principais associados ao método. Já que várias etapas devem ser seguidas para separar iAs de outras espécies de arsênico e de pre-concentrado de iAs para baixo aos níveis mesmo sub-ppm é demorada. Isso implica o uso de clorofórmio. Há uma tendência para evitar o uso de compostos clorados em laboratórios, devido aos efeitos de saúde negativos que poderiam ter. No entanto, se as boas práticas laboratoriais são mantidas e as amostras são tratadas em exaustores de fumos, esses efeitos negativos poderiam ser evitados. MMA vai interferir na determinação do iAs. Isto deve ser mantido em mente ao analisar as amostras em que MMA poderia estar presente, tais como algas, peixes e outros frutos do mar. No entanto, o MMA é normalmente presente em pequenas quantidades que seriam abrangidas pela incerteza associada aos resultados obtidos para o iAs.
Disclosures
Os autores não têm nada para divulgar.
Acknowledgments
Os autores agradecer Dr. F. Cordeiro do CCI as discussões úteis sobre tratamento estatístico dos dados. Laboratórios especializados na análise do iAs em matrizes biológicas que forneceu resultados para ser usado como atribuído valor no PTs e laboratórios que participaram os PTs estudados são reconhecidos.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Deionised water | Any available | 18.2 MΩ cm | |
| Concentrated hydrochloric acid (HCl). | Any available | Not less than 37 % m/v, c(HCl) = 12 mol/L, with a density of approx. ρ (HCl) 1.15 g/L |
|
| Concentrated nitric acid (HNO3) | Any available | Not less that 65 % m/v, c(HNO3) = 14 mol/L, with a densitiy of approx. ρ 1.38 g/L |
|
| Chloroform | Any available | Harmful by inhalation and if swallowed. Irritating to skin. Wear suitable protective clothing and gloves. |
|
| Hydrogen bromide (HBr) | Any available | Not less than 48 % m/v | |
| Hydrazine sulphate (N2H6SO4) | Any available | Harmful if swallowed. Causes burns. May cause cancer. |
|
| Magnesium nitrate hexahydrate [Mg(NO3)6H2O] | Any available | ||
| Magnesium oxide (MgO) | Any available | ||
| Potassium iodide (KI) | Any available | ||
| Ascorbic acid (C6H8O6) | Any available | ||
| Sodium hydroxide (NaOH) | Any available | ||
| Sodium borohydride (NaBH4) | Any available | ||
| Arsenic (V) standard solution | Any available | 1,000 mg/L Use certified standard solutions commercially available |
|
| Centrifuge | Any available | ||
| Mechanical shaker | Any available | ||
| Sand bath | Any available | ||
| Muffle furnace | Any available | ||
| Polypropylene centrifuge (PC) tubes | Any available | 50 mL with screw cap | |
| Syringe filters with hydrophobic PTFE membrane | Any available | 25 mm diameter | |
| Pyrex glass beaker | Any available | Tall form 250 mL, capable of withstanding 500 °C |
|
| Watch glasses | Any available | ||
| Volumetric flasks | Any available | 10, 25, 100 or 200, Class A. |
|
| Plastic funnels | Any available | ||
| Whatman n° 1 paper or equivalent | Any available | ||
| Atomic absorption spectrometer equipped with a flow injection system (FI-AAS) | Any available |
References
- European Commission. Commission Regulation (EC) 1881/2006 setting maximum levels for certain contaminants in foodstuffs. , OJ, L364/5 (2006).
- EFSA Panel on Contaminants in the Food Chain (CONTAM). Scientific Opinion on Arsenic in Food. EFSA J. 7 (10), 1351 (2009).
- European Food Safety Authority. Dietary exposure to inorganic arsenic in the European population. EFSA J. 12 (3), 3597 (2014).
- de la Calle, M. B., et al. Does the determination of inorganic arsenic in rice depend on the method? TrAC. 30 (4), 641-651 (2011).
- GB/T5009.11-2003. Determination of total arsenic and abio-arsenic in foods. , (2003).
- European Committee for Standardisation. EN 15517:2008 "Determination of trace elements-Determination of inorganic As in seaweed by hydride generation atomic absorption spectrometry (HG-AAS) after digestion". , (2008).
- de la Calle, M. B., et al. Is it possible to agree on a value for inorganic arsenic in food? The outcome of IMEP-112. Anal Bioanal Chem. 404 (8), 2475-2488 (2012).
- Schmeisser, E., Goessler, W., Kienzl, N., Francesconi, K. Volatile analytes formed from arsenosugars: determination by HPLC-HG-ICPMS and implications for arsenic speciation analyses. Anal. Chem. 76 (2), 418-423 (2004).
- EN 16802:2016. Foodstuffs. Determination elements and their chemical species. Determination of inorganic arsenic in foodstuffs of marine and plant origin by anion-exchange HPLC-ICP-MS. , BSI Standards Publication. (2016).
- European Committee for Standardisation. Animal feeding stuffs – Determination of inorganic arsenic by hydride generation atomic absorption spectrometry (HG-AAS) after microwave extraction and separation by solid phase extraction (SPE). , (2012).
- Rasmussen, R. R., Qian, Y., Sloth, J. J. SPE HG-AAS method for the determination of inorganic arsenic in rice. Results from method validation studies an a survey on rice products. Anal Bioanal Chem. 405 (24), 7851-7857 (2013).
- Rasmussen, R. R., Hedegaard, R. V., Larsen, E. H., Sloth, J. J. Development and validation of a method for the determination of inorganic arsenic in rice. Results from method validation studies and a survey on rice products. Anal Bioanal Chem. 403, 2825-2834 (2012).
- Fiamegkos, I. Accuracy of a method based on atomic absorption spectrometry to determine inorganic arsenic in food: Outcome of the collaborative trial IMEP-41. Food Chem. 213, 169-179 (2016).
- Llorente-Mirandes, T., Barbero, M., Rubio, R., López-Sánchez, J. F. Occurrence of inorganic arsenic in edible Shiitake (Lentinula edodes) Products. Food Chem. 158, 207-215 (2014).
- de la Calle, M. B., Linsinger, T., Emteborg, H., Charoud-Got, J., Verbist, I. Report of the seventh interlaboratory comparison organised by the European Union-Reference Laboratory for Heavy Metals in Feed and Food. IMEP-107: Total and inorganic As in rice. , EUR 24314 EN (2010).
- Cordeiro, F., Cizek-Stroh, A., de la Calle, B. Determination of total and inorganic arsenic in rice. IRMM-PT-43 Proficiency Test Report. , EUR 28100 EN (2016).
- de la Calle, M. B., et al. IMEP-112: Total and inorganic arsenic in wheat, vegetable food and algae. , EUR 24937 EN (2011).
- Fiamegkos, I. Determination of total As, Cd, Pb, Hg and inorganic arsenic in chocolate. EURL-HM-20 Proficiency test Report. , JRC 98502 (2015).
- ISO-Geneva (CH), International Organization for Standardization. ISO 17043: Conformity assessment - General requirements for proficiency testing. , (2010).
