Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

تجاوز القلبي في طراز ماوس: نهج جديد

Published: September 22, 2017 doi: 10.3791/56017
* These authors contributed equally

Summary

وتصف هذه الورقة كيفية تجاوز القلبي الرئوي في الفئران. وسيسهل هذا النموذج رواية التحري عن الآليات الجزيئية التي تشارك في تلف الجهاز.

Abstract

كما المطول القلبي الرئوي تجاوز يصبح من الضروري أكثر أثناء التدخلات القلب، ينشأ يتزايد طلب السريري للتحسين الداخلي والتقليل إلى أدنى حد من تلف الجهاز الناتجة عن دوران اكستراكوربورال طويلة. وكان الهدف من هذه الورقة لإظهار نموذج تعمل بكامل طاقتها وذات الصلة سريرياً لتجاوز القلبي في ماوس. نحن تقريرا عن تصميم الجهاز ونضح الدائرة الأمثل، وتقنيات ميكروسورجيكال. هذا النموذج هو نموذج حادة، التي ليست متوافقة مع البقاء على قيد الحياة بسبب الحاجة إلى رسومات الدم متعددة. بسبب مجموعة الأدوات المتاحة للفئران (مثلاً، علامات، الضربة القاضية، إلخ)، هذا النموذج سيتم تسهيل التحقيق في الآليات الجزيئية التي تلف الجهاز وأثر تجاوز القلبي بالنسبة إلى البعض كانوا.

Introduction

ومنذ إدخال تجاوز القلبي الرئوي (CPB) في العيادة، لعبت دوراً أساسيا في جراحة القلب1. في جراحة القلب الحديثة، طويلة CPB الوقت ضروري لتنفيذ عمليات إعادة البناء الابهري واسعة النطاق والإجراءات المشتركة. ورغم التقدم التكنولوجي الهائل، استخدام التداول اكستراكوربورال يرتبط بداخلها وبعد العملية الجراحية النظامية وتلف الجهاز المحلي2،3.

-تم تطوير نماذج حيوانية كبيرة التحقيق في دور CPB في العمليات الفيزيولوجية4،5. على الرغم من أن هذه النماذج قدمت ثاقبة بعض CPB المرتبطة المضاعفات، فمكلفة للغاية والأدوات الجزيئية (مثل الأجسام المضادة) محدودة جداً. وقد وضعت بديلاً أكثر فعالية من حيث تكلفة في الحيوانات الصغيرة. منذ تنميتها، أجريت دراسات متعددة لتحسين نموذج CPB في الفئران والأرانب5،،من67،،من89. هذه النماذج توفر أساسا جيدا لإجراء قياسات للعمليات الفيزيولوجية المرضية المرض؛ ومع ذلك، فلا تزال غير كافية للتحقيق في علم المناعة الخلوية وخلطيه بسبب عدم وجود الأجسام المضادة ذات الصلة والمواد الكاشفة. وهذا يضعف دورها في هذا المجال من البحث.

مؤخرا قمنا بتطوير نموذج ماوس للبروتوكول. بسبب طائفة واسعة من الكواشف الخاصة بالماوس والفئران المعدلة وراثيا، هي نماذج الماوس بشكل عام النموذج المفضل للأبحاث الفسيولوجية والجزيئية والمناعية10،11. ولذلك، سيسهل نموذجنا دراسة البروتوكول فيما يتعلق بمختلف comorbidities كما أن هناك العديد من سلالات الفئران المتاحة مع الأمراض ذات الصلة سريرياً12،13. وبناء على ذلك، تصف هذه الورقة، بالتفصيل، كيفية تنفيذ CPB في الفئران. الأوكسجين والمعلمات الفسيولوجية تراقب عن كثب بعد اعتقال الجهاز التنفسي والدورة الدموية العميقة.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

جميع التجارب على الحيوانات وأجريت امتثالا "قانون حماية الحيوانات الألمانية" (تييرشج) ووافقت عليها اللجنة المحلية الرفق بالحيوان (انخفاض ساكسونيا مكتب الدولة لحماية المستهلك وسلامة الأغذية، وبروتوكول حساب السياحة الفرعي 14/1556). أدنى وزن الماوس مناسبة لهذا النموذج هو 25 غ.

1-"الأعمال التحضيرية قبل الجراحة"

ملاحظة: تنفذ جميع الإجراءات تحت ظروف نظيفة وغير معقمة، مع الصكوك يعقم.

  1. مكان 50-60 8-سم البروبيلين طويلة جوفاء الألياف بالتوازي في أنبوب والاتصال مع محول تي على كلا الجانبين. ملء الفراغ بين ألياف جوفاء وفرع خارجي من T-المحول مع الغراء.
    1. السماح على الأقل 24 ح للغراء تتصلب. قص ألياف جوفاء تمتد خارجاً من T-المحول باستخدام مبضع معيار وسحب أنبوب سيليكون أكثر لمواقع الاتصال.
  2. إدخال إبرة معدنية ز 27 (من برانولي ز 26) قنية البولي يوريثان الأب 2. استخدام شفرة جراحية ومقص الدقيقة تحت مجهر (8-12 X التكبير) لجعل فينيستريشنز ثلاثة أو أربعة من حوالي 0.15 سم كل داخل ثلث قنية ﻹعطاء القاصي الأمثل وريدي عودة تدفق.
    1. إزالة الأسلاك عند الانتهاء. استخدام مسحات القطن لتشريح كليلة وتراجع للهياكل. استخدام مسحات شاش (5 × 5 سم 2) لامتصاص السوائل الزائدة لمنع جفاف الأنسجة.
  3. إعداد حجم فتيلة. للانتهاء، إضافة 30 وحدة دولية من الهيبارين كل مل فتيلة الحل و 2.5% v/v حل 8.4 في المائة من NaHCO 3 للتخزين المؤقت. تخزين هذا الحل في 4 درجات مئوية حتى استخدامها.
  4. ملء الدائرة CPB (أي، مضخة وأنابيب والصياد الجوية كلا cannulas) مع ميليلتر 850 فتيلة الحل عن طريق القنية الوريدية. مجرد تعبئة، الحفاظ على تعميم CPB حتى الحيوان على استعداد كانوليشن.

2. تخدير الحيوان

  1. لإدارة التخدير، ضع الحيوان في دائرة التعريفي لأقل من 2.5% v/v isoflurane/الأكسجين المخلوط. تأكيد التخدير المناسب بتقييم منعكس سحب دواسة وذيل قرصه العاكسة ومنعكس طرفه العين. تطبيق مرهم العين البيطرية لتجنب جفاف العين-
  2. مكان الحيوان على لوح الاحترار مع وظيفة تنظيم درجة الحرارة. قياس درجة حرارة الجسم مع تحقيق إدراج مستقيمي ومتصلة بنظام حيازة البيانات.
  3. بعد تحقيق التخدير الكامل، التنبيب أوروتراتشيلي الحيوان استخدام براونولي ز 20 بلاستيكية وإدراج ذلك شفويا ودفعها إلى القصبة الهوائية تحت المراقبة البصرية. ابدأ المبخر isoflurane متصلاً بجهاز التنفس الصناعي ماوس باستخدام التهوية الميكانيكية. تبعاً لوزن الحيوان، ضبط التهوية بحيث يتحقق حجم المد 250-350 ميليلتر.
  4. حقن
  5. لتأمين التسكين الكامل، 5 مغ/كغ وزن الجسم الحيوان والايبوبروفين تحت الجلد. من المستحسن الاحتفاظ بتركيز isoflurane بين 1.3 2.5 في المائة في الأوكسجين. يمكن تعديل تركيز Isoflurane يدوياً حسب المرحلة التي بلغتها الإجراءات.

3. الإجراءات الجراحية

  1. بعد تحقيق التخدير الكامل والتنبيب، تنفيذ شق جلد خط الوسط في الرقبة مع مقص حاد غرامة وفصل العضلات بطريقة فظة، وفضح على اليمين حبل الوريد والشريان السباتي الأيسر. أثناء الإعداد، يتجمد السفن الصغيرة باستخدام كواجولاتور بيطرية متصلاً بالملقط القطبين لضمان فقدان الحد الأدنى من الدم.
  2. بعد إعداد السفن جوجولار، سد cranially في الجزء الأعلى الأيسر الشريان السباتي المشترك إلى التشعب استخدام خيوط الحرير 8-0-
  3. الاتصال بعقدة نهاية القاصي قنية ز 27 لأنابيب التدفق الشرياني استخدام موصل سيليكون (معرف 0.5 مم، 1 ملم OD)، وكشف خياطة الحرير مكان 8-0 في الجزء الدانية الشريان، وإدراج تلميح القنية في الشريان السباتي.
  4. بعد الموضع الصحيح من طرف قنية، تقدم نصيحة قنية ذلك لأنه يضع 3-4 مم بروكسيمالي إلى القوس الاورطي. إصلاح نصيحة القنية بتأمين مع عقده الحرير 8-0-
  5. Microsurgical استخدام الملقط، والمقص، أداء تشريح فظة وحادة وفضح حبل الوريد الحق بإعداد كليلة من الأنسجة جانبياً للعضلات الترقوية، قرب الترقوة، ومكان عقده حرير 8-0 في النهاية البعيدة و 8-0 حلقة في نهاية الدانية.
  6. بعد عملية ربط النهاية البعيدة من حبل الوريد، ضع غيض القنية الوريدية في الوريد الأيمن والتقدم نحو الاذين الأيمن وتأمين استخدام عقده الحرير. للعودة الوريدية الأمثل، قد يكون من الضروري للنهوض نصيحة وريدي في البطين الأيمن.
  7. حالما يتحقق ذلك الموقف الصحيح قنية الاضطلاع هيبارينيزاتيون الجهازية بإضافة وحدة دولية 2.5 الهيبارين جرام من وزن الجسم الحيوان عن طريق الحقن الوريدي المباشر إلى حبل الوريد.
  8. كانولاتي للرصد في الوقت الحقيقي الضغط الغازية وشريان فخذي الأيسر. تعرض منطقة الفخذ وفصل شريان فخذي المشتركة بلطف من فخذي الوريد والعصب الفخذي تحت 25 X التكبير-
    1. ليجاتي الجزء القاصي من شريان فخذي. أوككلودي الجزء الدانية مع كشف عقده مؤقتاً وجعل شق صغير على الجدار الأمامي باستخدام الملقط الصغير-
    2. بعد ذلك، إدراج قنية البولي يوريثان الأب 1 في شريان فخذي وآمنة مع حرير خياطة 10-0. يستخدم هذا القنية لاستخراج عينات الدم لتحليل غاز الدم.
  9. بعد نجاح وضع cannulas الشرياني والوريدي، الشروع في تجاوز القلبي الرئوي عن طريق تشغيل المضخة. الوقت من تنبيب بدءاً من CPB حوالي 45 دقيقة ابدأ استخدام معدل تدفق من 0.5 مل/دقيقة، اعتماداً على قياسات الضغط المنهجي، وزيادة تدفق الدم داخل 2 دقيقة للتدفق الكامل (4-6 مل/دقيقة) عن طريق زيادة سرعة المضخة.
  10. تحت المراقبة الكاملة، تنفيذ ستيرنوتومي العليا استخدام مقص حاد بدءاً قبضة والذهاب 5 ملم باتجاه والذيلية. يتجمد حواف القصية فورا لتجنب النزيف. كشف القوس الاورطي عن طريق سحب الشريان السباتي الحق في اتجاه الجمجمة.
  11. للتحكم الأمثل، circumferentially مجاناً القوس الاورطي من الغدة الصعترية والأنسجة المحيطة بها تيسيرا لقط. ضع حلقة 8-0 حرير حول الشريان الاورطي تصاعدي. وضع المشبك عبر عن كارديوبليجيا، سحب الحلقة الحرير في اتجاه الجمجمة إلى فضح أفضل الشريان الاورطي تصاعدي.

4. تجاوز القلبي وتحليل غاز الدم

  1. لتحليل غاز الدم (بغا)، استخدام أنابيب شعرية زجاجية لجمع الدم الشرياني ميليلتر 60-90 عبر قسطرة شريان فخذي. استخدام المشبك صغيرة على أنابيب سيليكون
    1. وفصل الأنبوب من القسطرة. الإفراج عن الضغط ببطء على المشبك للسماح للمراقب بملء الأنبوب الشعرية.
    2. أعد
    3. أنبوب السيليكون بالقسطرة. إدراج الأنابيب الشعرية إلى محلل الغاز الدم للقياسات في النقاط الزمنية التالية:
      10 دقيقة بعد بدء CPB مع التهوية (BGA1)
      بعد 25 دقيقة من CPB و 15 دقيقة لاعتقال الجهاز التنفسي (BGA2)
      بعد 40 دقيقة من CPB و 30 دقيقة من اعتقال الجهاز التنفسي (BGA3)
      بعد 55 دقيقة من CPB، 45 دقيقة للجهاز التنفسي و 20 دقيقة من توقف القلب (BGA4)
  2. تحت CPB تدفق مستقر، إينيتيا اعتقال الجهاز التنفسي الشركة المصرية للاتصالات بوقف التهوية.
  3. بعد انتهاء التهوية، تعيين لوحة المفاتيح الاحترار إلى 28 درجة مئوية ويبدأ موضعياً تبريد الحيوان إلى 28 درجة حرارة الجسم درجة مئوية خلال 20 دقيقة الأولى من الجهاز التنفسي القبض استخدام الشاش غارقة في المياه المالحة الباردة.
  4. متى تحقق درجة حرارة جسم من 28 درجة مئوية، وبعد ما مجموعة 30 دقيقة للقبض على الجهاز التنفسي، إدارة 0.3 مل محلول بوكل 7.45% في دائرة CPB الشروع في كارديوبليجيا-
  5. لعبور لقط الابهر وسحب الحلقة الحرير الموضوعة سابقا (الخطوة 3، 10) في اتجاه الجمجمة للتعرض أفضل ووضع المشبك الصغير-سيريفيني على الجزء تصاعدي من الشريان الاورطي.
  6. تنفيذ ما مجموعة 60 دقيقة اعتقال الجهاز التنفسي و 30 دقيقة من توقف القلب. إزالة المشبك الصغير-سيريفيني من الشريان الاورطي تصاعدي لبدء ضخه القلب. وفي الوقت نفسه إعادة تهوية والحارة الحيوان إلى 37 درجة مئوية.
  7. بعد اكتمال ضخه وقد بلغ هذا الحيوان نورموثيرميا، إنهاء CPB بإيقاف تشغيل المضخة ومواصلة رصد القياسات الفسيولوجية (مثل درجة حرارة الجسم وتخطيط القلب، وضغط الدم الغازية) عن 20 دقيقة
  8. في نهاية التجربة، اكسسانجويناتي الحيوان تحت التخدير الكامل (إيسوفلوراني 5%) وجمع الدم وأجهزة لمواصلة تحليل 14-

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

ويصف هذا البروتوكول حلبة نضح، والعمليات الجراحية، ورصد البارامترات الفيزيولوجية أثناء CPB بالماوس. عندما يقوم بها ميكروسورجيون مهرة على نحو كاف، يتم باستمرار وتكاثر الحصول على النتائج.

للحفاظ على التروية الأنسجة مناسبة، يحتفظ الضغط الشرياني يعني دائماً بين 40 و 60 مم زئبق بضبط تدفق الدم CPB وإضافة وحدة تخزين إضافية. تبعاً لوزن الحيوان وحالة وحدة التخزين، ودرجة حرارة الجسم، هو الحفاظ على تدفق الدم اكستراكوربورال بين 2.3-6.5 مل/دقيقة التصويب من حجم الخسارة خلال التجربة يتحقق عن طريق إضافة 0.1 مل من محلول فتيلة للدائرة خلال CPB. هو تحقيق استقرار درجة الحموضة الجهازية عن طريق إضافة 8.4 mmol/لتر من ناهكو2. وتدار جميع السوائل عبر الخزان الحابسة للهواء لتقليل خطر الانصمام الهواء.

تم تقييم المعلمات الفسيولوجية باستخدام بغا في أربع نقاط زمنية مختلفة (الشكل 1)، والقياسات من إجراء CPB نجاح ممثل وترد في الجدول 1.

وتظهر القياسات الهيماتوكريت تخفيف الدم بسبب إضافة حجم فتيلة للدائرة (الجدول 1). ، ومع ذلك، لا حاجة لنقل الدم كما تم الاحتفاظ بمستويات الهيموغلوبين على مستويات كافية أثناء التجربة (الجدول 1). بو الشريانية الجهازية2، تشبع الأكسجين، pCO2 انتهاء قيم التحقق من الأداء الممتاز للصغير-مكساج (الجدول 1). وكان انتهاء2 pCO الأمثل باستخدام خليط أكسجين جوي قوة المراقبة الدولية2 0.8.

وقدم بغا أيضا نظرة ثاقبة حالة التمثيل الغذائي للحيوان خلال CPB. بعد بدء CPB مع التهوية، تم رفع pH الشرياني (الجدول 1). غالباً ما يخفف هذا التأثير بمجرد بدء القبض على الجهاز التنفسي. كان ينظر إلى تخفيض تدريجي لدرجة الحموضة وأثناء التجربة (الجدول 1). التخزين المؤقت المستمر من pH الشرياني ولاكتات كان ضروريا للتعويض عن الحماض.

Figure 1
الشكل 1 : الخط الزمني التجريبي. توقيت تنبيب والتهوية، واعتقال الجهاز التنفسي، CPB، سكتة قلبية، وضخه، التبريد/re-الاحترار ونقاط أخذ العينات بغا. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

BGA1 BGA2 BGA3 BGA4
الهيموغلوبين (غ/دل) 8.9 6.8 6.8 5.6
الهيماتوكريت 27.5 21.2 21.3 17.7
pO2 (مم زئبق) 508 506 504 271
pCO2 (مم زئبق) 24.5 20.3 20 36.4
sO2 (%) 100 100 100 100
الأس الهيدروجيني 7.56 7.65 7.36 7.32
لاكتات (mmol/لتر) 2.6 3.1 3 6.9

الجدول 1: الممثل بغا النتائج من CPB ناجحة في ماوس. بغا المتخذة في أربع نقاط زمنية مختلفة على مدى التجربة.

Figure 2
الشكل 2 : الرسم التخطيطي للدائرة CPB في الماوس- قنية وريدية (أزرق) يوضع في أدنى الوريد الأجوف عبر حبل الوريد الأيمن وقنية الشريانية (أحمر) في الشريان الاورطي عن طريق الشريان السباتي الأيسر. يتم ضخ الدم المؤكسج من خلال خزان الهواء-صياد في الشريان السباتي الأيسر. ECG أقطاب توضع تحت الجلد ويتم قياس درجة حرارة الجسم مستقيمي، ويتم رصد الضغط عبر شريان فخذي. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

قمنا بتطوير نموذج ذات صلة سريرياً تؤدي وظائفها كاملة من CPB في ماوس. مع أكثر من ثلاثين من سلالات من الفئران بعد أمراض القلب والأوعية الدموية، يمكن أن يكون لدينا نموذج نقطة انطلاق لوضع بروتوكولات المحتملة الجديدة المتصلة بالبروتوكول. وعلاوة على ذلك، نظراً لعدد كبير من الكواشف الخاصة بالماوس والفئران بخروج المغلوب، هذا النموذج لا يمكن أن تحل فقط نموذج الفئران الحالي لبروتوكول، لكن سيسهل تشريح للآليات الجزيئية التي تشارك في تلف الجهاز المتصلة بالبروتوكول. وحتى الآن، طبق لا CPB في الفئران بسبب التحديات microsurgical في تقنية كانوليشن، فضلا عن التحديات التقنية بما في ذلك تطوير الصغرى-مكساج وجود وحدة تخزين فتيلة صغيرة بما فيه الكفاية. نحو مسارات 90 والعمل الدؤوب ميكروسورجيون ذوي الخبرة ضرورية للتوصل إلى نموذج مستقر. تم اختبار النماذج ما يزيد على 15 آلة CPB وجود الاسطوانة مختلفة مضخات وأنابيب، والخزانات المتنوعة وتحسينها باستمرار. أكثر من 10 إصدارات مختلفة من اﻷوكسيجين تم بناؤها واختبارها لتحقيق النتائج الحالية. نموذجنا الرواية تتطلب إعادة تصميم كاملة لإعداد نموذج الجرذ الموجود لتداول اكستراكوربورال. أولاً، نحن بني أصغر ممكن الصغرى-مكساج السماح فتيلة وحدات التخزين < 0.3 مل. وأعيد تصميم مكساج استخدام نظام مقلوب حيث يتدفق الدم من خلال ألياف جوفاء، وليس فيما بينها، مما يسمح لإجراء تخفيض كبير في حجم فتيلة.

أثناء تطوير لنموذجنا واجهنا عدة صعوبات تقنية. لدينا دوائر النموذج الأولى يتطلب كميات فتيلة كبيرة تصل إلى 6 مل. وادي هذا إلى تخفيف الدم الشديد مع قيم الهيموغلوبين أقل من 4 غ/دل وقيم الهيماتوكريت لما يقرب من 15. على الرغم من بغا عرض جيد من الأوكسجين لاحظنا بوادر نقص تاكسج الدم مما أدى إلى توقف القلب السريع أثناء الإجراء. من أجل تحقيق الأوكسجين الأنسجة السليمة، يجب أن تكون القيم الهيماتوكريت أعلى من 25. ضبط حجم أنابيب وتغيير تصميم الاسطوانة-المضخة، إنتاج صياد هواء المنمنمة والأمثل cannulas الوريدية والشريانية، تم تخفيض حجم فتيلة إلى حد كبير إلى < 0.9 مل.

على الرغم من نضح كافية ضروري تدفق من 4-6 مل/دقيقة، بتوفير القدر الكافي من التدفق الخلفي وريدي. وضع قنية وريدية في الاذين الأيمن، أو حتى أفضل، في البطين الأيمن، يخفف من هذه المشكلة. زيادة تدفق التروية يؤدي إلى أما مص القنية الوريدية أو فقدان السوائل والأنسجة وذمة المتصلة أوفيربيرفوسيون. تجنب الاحتفاظ2 CO في الماوس، والذي لديه أيض بسرعة، وجدنا أن حفظ إمدادات الأوكسجين من خلال مكساج في قوة المراقبة الدولية2 80% مع تدفق 600 مل/دقيقة الأمثل للأكسجين في الأنسجة.

مسألة أخرى يمكن أن تواجه أحد هو الفقدان التدريجي لحجم داخل الأوعية إلى إينتيرستيتيوم، مما يستلزم استبدال وحدة التخزين تكرار كل 30-40 دقيقة. هايبروسمولاريتي اﻻلكتروﻻيت الحلول التي تحتوي على هيدروكسيثيل نشأ (هس) يمنع فقدان الحجم داخل الأوعية، ولكن عندما تستخدم حصرا، لزوجة عالية يسبب زيادة هائلة في الضغوط الجهازية خلال CPB. وهذا يؤدي إلى تسرب في مكساج والأنابيب الدانية إلى قنية الشرياني. ولذلك، لتحقيق توازن بين هايبروسمولاريتي ولزوجة معتدلة، وجد الأمثل خليط 1:1 من الحلول التي تتضمن هس وآخر السائل متوازنا متساوي التوتر.

وعدلت الإلكترونيات دافعة المضخة الدوارة لزيادة سرعة دوران مما يتيح تدفق كاف داخل أنابيب قطرها صغير. تحت الشفط القوى التي تنتجها الرول-المضخة، نموذجي لفقاعات الهواء المجهرية في النظام الوريدي. بناء الهواء المنمنمة الصياد مع حجم فتيلة أدناه 0.15 مل حل هذه المشكلة. إضافة 0.1 مل من وحدة التخزين الإضافية والحد من تدفق CPB بالإضافة إلى التحقق من الموضع الصحيح من القنية الوريدية القضاء الانسداد الهواء في الدائرة.

لاختبار الجدوى التقنية لنموذج رواية القلبي الرئوي الالتفافية، أخذ عينات الدم متعددة مطلوبة. إزالة أكثر من 0.2 مل دم عادة قاتلة لماوس صحية. لتأمين الأوكسجين والاستقرار الفسيولوجية، قد تتجاوز هذه القيمة مبلغ عينات الدم في تجربتنا وبلغت تقريبا 0.9 مل في نهاية التجربة. ومع ذلك، لوحظت الأوكسجين مستقرة والمعلمات الفسيولوجية وعلى الرغم من الانخفاض المستمر في قيم الدم. ولذلك، صمم نموذجنا الجدوى الأولية أساسا كبروتوكول الحادة، وعدم البقاء على قيد الحياة. ونحن الآن بوضع نموذج مينيملي البقاء على قيد الحياة، بالضرورة، سوف يكون أقل أخذ عينات من الدم.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

Acknowledgments

المؤلفين قد لا شكر وتقدير.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Sterofundin B.Braun Petzold GmbH PZN:8609189 priming volume, 1:1 with Tetraspan
Tetraspan 6% HES Solution B. Braun Melsungen AG PZN: 05565416 priming volume, 1:1 with Sterofundin
Heparin Natrium 25.000 Ratiopharm GmbH PZN: 3029843 2.5 IU per ml of priming solution
NaHCO3 8,4% Solution B. Braun Melsungen AG PZN: 1579775 3% in priming solution
KCL 7.45 % Solution B. Braun Melsungen AG PZN: 2418577 0.1 mL for cardioplegia
Carprofen Zoetis Inc., USA PZN:00289615 08859153 5 mg/kg/BW
1 Fr PU Catheter Instechlabs INC., USA C10PU-MCA1301 carotid artery
2 Fr PU Catheter Instechlabs INC., USA C20PU-MJV1302 jugular vein
Vasofix Safety catheter 20G B.Braun Medical 4268113S-01 orotracheal intubation
8-0 Silk suture braided Ashaway Line & Twine Mfg. Co., USA 75290 ligature
Isoflurane Piramal Critical Care Deutschland GmbH PZN:9714675 narcosis
CLINITUBES blood capillaries Radiomed GmbH 51750132 blood sampling 60 - 95 microliter
Spring Scissors - 6mm Blades Fine Science Tools GmbH 15020-15 instruments
Spring Scissors - 2mm Blades Fine Science Tools GmbH 15000-03 instruments
Halsted-Mosquito Hemostat Fine Science Tools GmbH 13009-12 instruments
Dumont #55 Forceps Fine Science Tools GmbH 11295-51 instruments
Castroviejo Micro Needle Holder - 9cm Fine Science Tools GmbH 12060-02 instruments
Micro Serrefines Fine Science Tools GmbH 18555-01 instruments
Bulldog Serrefine Fine Science Tools GmbH 18050-28 instruments
MiniVent Ventilator for Mice (Model 845) Harvard Apparatus 73-0044 mechanical ventilation
Isoflurane Vaporizer Drager 19.1 Drägerwerk AG & Co. KGaA anesthesia 1.3 - 2.5%
PowerLab data acquisition device 4/35 ADInstruments Ltd, New Zealand PL3504 invasive pressure, ECG, temperature
ABL 800 Flex Radiometer GmbH blood gas analysis
NMRI mice Charles River Laboratories Crl:NMRI(Han) male, 30 - 35 g, 12 weeks old, housed at least 1 week before the experiment

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Edmunds, L. Cardiopulmonary Bypass after 50 Years. N. Engl. J. Med. 351 (16), 1601-1603 (2004).
  2. Goto, T., Maekawa, K. Cerebral dysfunction after coronary artery bypass surgery. J. Anesth. 28 (2), 242-248 (2014).
  3. Uysal, S., Reich, D. L. Neurocognitive outcomes of cardiac surgery. J. Cardiothorac. Vasc. Anesth. 27 (5), 958-971 (2013).
  4. Ballaux, P. K., Gourlay, T., Ratnatunga, C. P., Taylor, K. M. A literature review of cardiopulmonary bypass models for rats. Perfusion. 14 (6), 411-417 (1999).
  5. Jungwirth, B., de Lange, F. Animal models of cardiopulmonary bypass: development, applications, and impact. Semin. Cardiothorac. Vasc. Anesth. 14 (2), 136-140 (2010).
  6. Günzinger, R., et al. A rat model of cardiopulmonary bypass with cardioplegic arrest and hemodynamic assessment by conductance catheter technique. Basic Res Cardiol. 102 (6), 508-517 (2007).
  7. Waterbury, T., Clark, T. J., Niles, S., Farivar, R. S. Rat model of cardiopulmonary bypass for deep hypothermic circulatory arrest. J. Thorac. Cardiovasc. Surg. 141 (6), 1549-1551 (2011).
  8. Schnoering, H., et al. A newly developed miniaturized heart-lung machine-expression of inflammation in a small animal model. Artif. Organs. 34 (11), 911-917 (2010).
  9. Kim, J., et al. The responses of tissues from the brain, heart, kidney, and liver to resuscitation following prolonged cardiac arrest by examining mitochondrial respiration in rats. Oxid. Med. Cell. Longev. 2016, (2016).
  10. Shappell, S. B., Gurpinar, T., Lechago, J., Suki, W. N., Truong, L. D. Chronic obstructive uropathy in severe combined immunodeficient (SCID) mice: lymphocyte infiltration is not required for progressive tubulointerstitial injury. J. Am. Soc. Nephrol. 9 (6), 1008-1017 (1998).
  11. Majzoub, J. A., Muglia, L. J. Knockout mice. N. Engl. J. Med. , 904-907 (1996).
  12. Houser, S. R., et al. Animal Models of Heart Failure A Scientific Statement From the American Heart Association. Circ. Res. 111 (1), 131-150 (2012).
  13. Russell, J. C., Proctor, S. D. Small animal models of cardiovascular disease: tools for the study of the roles of metabolic syndrome, dyslipidemia, and atherosclerosis. Cardiovasc. Pathol. 15 (6), 318-330 (2006).
  14. Iurascu-Gagea, M., Craig, S. Euthanasia and necropsy. The laboratory rabbit, guinea pig, hamster, and other rodents. Suckow, M. A., Stevens, K. A., Wilson, R. P. , Academic Press (Elsevier). 117-141 (2012).

Tags

الطب، 127 قضية، تجاوز القلبي الرئوي، تداول اكستراكوربورال، نموذج الحيوان، الماوس، وتلف الجهاز، وجراحة
تجاوز القلبي في طراز ماوس: نهج جديد
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Madrahimov, N., Natanov, R., Boyle,More

Madrahimov, N., Natanov, R., Boyle, E. C., Goecke, T., Knöfel, A. K., Irkha, V., Solovieva, A., Höffler, K., Maus, U., Kühn, C., Ismail, I., Warnecke, G., Shrestha, M. L., Cebotari, S., Haverich, A. Cardiopulmonary Bypass in a Mouse Model: A Novel Approach. J. Vis. Exp. (127), e56017, doi:10.3791/56017 (2017).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter