Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Developmental Biology

שימוש הרומן של בדיקת אולטרה סאונד בתדירות גבוהה תלת מימדי אפיון בתחילת ההריון העכבר

Published: October 24, 2017 doi: 10.3791/56207
* These authors contributed equally

Summary

עכברים נמצאים בשימוש נרחב ללמוד ביולוגיה הריונית. עם זאת, סיום ההריון נדרשת עבור מחקרים כאלה אשר מונע חקירות האורך, מחייבת השימוש במספר גדול של בעלי חיים. לכן, אנו מתארים שיטה לא פולשנית של בדיקת אולטרה סאונד בתדירות גבוהה לגילוי מוקדם ומעקב אחר האירועים שלאחר ההשתלה העכבר בהריון.

Abstract

בדיקת אולטרה סאונד בתדירות גבוהה (HFUS) היא שיטה נפוצה כדי לא-פולשנית לנטר בזמן אמת התפתחות עובר אנושי בתוך הרחם. העכבר משמש באופן שגרתי כמודל ויוו ללמוד השרשת הריון התקדמות. למרבה הצער, מאתר מחקרים כאלה דורשים הפרעה הריון כדי לאפשר ניתוח פנוטיפי להמשך טיפול. כדי לטפל בבעיה זו, השתמשנו תלת-ממדיים (3-D) שחזור של HFUS הדמיה נתונים עבור גילוי מוקדם ואפיון של העובר מאתר ההשתלה, התקדמות התפתחותית בודדים שלהם בתוך הרחם. שילוב הדמיה HFUS עם שחזור תלת-ממדיות ומודלים, הצלחנו במדויק לכמת מספר האתר השרשה של העובר וכן לנטר התקדמות התפתחותית בעכברים בהריון C57BL6J/129S מ- 5.5 ימים שלאחר משגל (d.p.c.) דרך כדי 9.5 d.p.c. עם השימוש של מתמר. מדידות כללו: מספר, מה מיקומם ואילו נפח של ההשתלה, כמו גם מרווח השרשה בין האתר; הכדאיות העובר הוערך על-ידי ניטור פעילות לבבית. בתקופה הקרובה שלאחר ההשתלה (5.5 ל 8.5 d.p.c.), שחזור תלת-ממדי של הרחם gravid רשת והן כיסוי אחיד בתבנית אפשרה ייצוג חזותי של ההריונות המתפתח בתוך כל קרן הרחם. כמו עכברים מהונדסים גנטית להמשיך לשמש כדי לאפיין פנוטיפים הרבייה הנשית נגזר תפקוד לקוי של הרחם, שיטה זו מציעה גישה חדשה, לכמת, ויוכל לאפיין מוקדם השרשה אירועים ויוו. שימוש זה הרומן הדמיה תלת-ממדית HFUS מדגים את היכולת לזהות בהצלחה, להמחיש ו לאפיין את השרשת אתרים במהלך ההריון מאתר מוקדם בצורה לא פולשנית. הטכנולוגיה מציעה שיפור משמעותי בשיטות הנוכחי, אשר מסתמכים על ההפרעה של הריונות עבור רקמות ברוטו ואפיון histopathologic. כאן אנו משתמשים פורמט וידאו וטקסט כדי לתאר כיצד לבצע בהצלחה סאונד בתחילת ההריון מאתר להפיק נתוני לשחזור ואמין עם שחזור של הטופס הרחם רשת, מלא תמונות תלת-ממדיות.

Introduction

חוזרים ונשנים לאבדן הריון מוקדם הוא אחד הסיבוכים הנפוצים ביותר לאחר ההתעברות, משפיעה על-1% של זוגות מנסה להרות1,2. המנגנון הבסיסי של אובדן הריון מוקדם הן מגוונות: מומים עובריים פנימי, מחלות רקע אימהי לפגמים והפורה רירית הרחם-1,-3,-4. בגלל ללקוחות שלנו הגנטי שלהם, העכבר מודלים כבר מנוצל באופן נרחב לחקירות של השרשת מוקדם והריון. יתר על כן, הזמן הריונית קצר של העכבר, את היכולת לבצע מחקרים רחבי היקף מבטיח את השירות גדל והולך של העכבר בהתייחסות שאלות מפתח קליני ברפואה הרבייה האנושית5. עם זאת, הרוב המכריע של עיצובים מוטוריים מאתר עדיין דורשים סכרים רבים תומת בימים הריונית רציפים לכמת ולנתח מיקום האתר השרשה, מספר, גודל ותבניות ריווח במהלך ההריון6, 7,8, ובכך מסלק האורך מחקרים על אותה חיה.

במרפאה, אולטרסאונד הוא כלי יקר ערך ואמינות כדי לפקח הכדאיות בעובר האנושי ופיתוח10,9,בצורה לא פולשנית11. לאחרונה, אולטרסאונד בתדירות גבוהה (HFUS) החלה למצוא יישומים מוגבלים העכבר כשיטה לניטור הכדאיות בעובר וצמיחה במהלך הריון12,13,14. ההתקדמות הטכנולוגית האחרונה אולטראסאונד הדמיה התירו את היישום של תלת מימד (נתונים תלת-ממדיים) שחזור ויזואלי של אברי חית וניטור עוקבות של פתולוגיות15,16, 17. הטכנולוגיה הדמיה מתקדמות של השתפרה במידה ניכרת את היכולת לזהות תנודות נפח קטן יותר, כדי להפחית את ההשתנות הבין-בעלי חיים, לעקוב אחר ההתקדמות של פתולוגיה או את היעילות של התערבות טיפולית17. בזמן השירות העיקרי של טכנולוגיה זו הייתה לעקוב אחר התקדמות ממאירות ב oncomouse מודלים15,16, הדמיה תלת-ממדית HFUS רק לאחרונה שימש quantitate ולנטר את הצמיחה הפעילה של השרשת התפתחות העובר בתוך הרחם העכבר18.

. הנה, נדגים כיצד לבצע HFUS הדמיה כדי לייצר לנתונים דו-ממדיים ותלת -ממדיים ליצירת שחזורים של הרחם בהריון העכבר מוקדם. נדגים את התועלת של שיטה זו הרומן לזהות אירועים עובריים ההשתלה מוקדם אלה ללא צורך סיום ההריון, ומאפשר לחוקרים לאסוף נתונים בצורה לא פולשנית.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

מחקרים אלו נערכו על פי המדריך עבור טיפול, שימוש של חיות מעבדה שפורסם על ידי מכוני הבריאות הלאומיים ו פרוטוקולים בעלי חיים אושרה על ידי טיפול בעלי חיים מוסדיים שימוש הוועדה (IACUC) של ביילור לרפואה תחת פרוטוקול מספר AN-4203.

1. הכנה של העכבר בהריון אולטראסאונד

  1. מתוזמן ההזדווגות
    1. המקום הסכר עם זכר מפרה מוכח העכבר מתחיל לילה אחרי 1700. נפרדים סכר, זכר מאת מהרשת (h), ללא קשר אם תקע הנרתיק זה קיים, כדי להבטיח תיארוך מדויק של הריון-
      הערה: בבוקר לאחר ההזדווגות נחשבת היום 0.5 פוסט coitum (d.p.c.).
  2. בהכנה אולטרסאונד
    1. הנח את העכבר בהריון במיכל אטום הרדמה אינדוקציה-
    2. Sedate עם איזופלוריין (2%) בשאיפה הרדמה וחמצן (1 ליטר/דקה) עד החיה מאבד את רפלקס שקמה בעצמה אחרי שמפילים (כ 1-2 דקות תלוי בגודל של העכבר), ספונטאניות שאינם קיימים (מלבד הנשימה).
    3. עכבר למקום מסומם במצב פרקדן על האף חרוט עם איזופלוריין (2%) בשאיפה הרדמה וחמצן (1 ליטר/דקה). החלת משחה אופטלמולוגיות לחיה ' העיניים s.
    4. באמצעות מקלון צמר גפן, להחיל קרם depilatory כל הבטן, החזה לנרתיק, לרוחב אל האגף.
    5. לאפשר קרם להישאר לכל היותר 3 דקות ולאחר מכן הסר את השיער עם רקמת ושמנת. ודא כי כל השיער הוסר, כמו כל השיער הנותר יקטן באיכות התמונה.

2. הכנה של השלב אולטרסאונד

  1. להפעיל את המתמר.
  2. לצרף שלב מנוע תלת-ממדי הבמה מנוע המתמר. מנוע
    1. מתחברים תלת-ממד על-ידי חיבור הכבל מנוע תלת-ממד למחבר מנוע תלת-ממד בפאנל האחורי. לצרף את המערכת המוטורית 3D מערכת הרכבה באמצעות הדואר שחרור מהיר על גבי להתחבר לתחנת הדמיה, ושחרור מהיר הר בתחתית להצמיד את המלחציים מתמר.
  3. לצרף את המכשיר המלחציים מתמר.

3. בגין הדמיה העכבר בהריון

  1. עכבר למקום פרקדן על פלטפורמת ניטור. העכבר ברציפות מקבל איזופלוריין הרדמה (בין 1.5-2.5%) וחמצן (1 ליטר/דקה) באמצעות קונוס האף. בעדינות להדביק ציפורניים כל קצב הלב ניטור רפידות על הרציף.
    1. החל מ ל 1-2 של ג'ל שידור אולטרסאונד על הבטן.
  2. באמצעות מנוע השלב ידנית, הצב את החללית אולטרסאונד על הבטן התחתונה-
    1. לאתר שלפוחית השתן, אשר אמור להופיע כמו עיגול כהה מלאות נוזל פשוט cephalad את פתח הנרתיק.
    2. פעם שלפוחית השתן ממוקם, לנוע החללית באיטיות cephalad להמחיש הרחם בהריון, אשר אמור להופיע כמו בצורת גליל עם פינות עגולות באתרי הריון. זה יכול להיות מתואר נראה כמו פנינים בשרשרת.
    3. לאחר הרחם בהריון זוהתה, להתחיל הדמיה 2-D-

4. 2-D אולטראסאונד הדמיה (איור 1)

  1. , ברגע הרחם בהריון זוהתה, להתחיל הריון באתר הקרוב שלפוחית השתן ולעבור לאט, ברצף cephalad לקבוע מספר ומיקום של אתרי הריון.
  2. אם הכליות, הטחול או הכבד הם דמיינו, למקם מחדש את המכשיר סימטרית (יותר קרוב אל שלפוחית השתן) כפי שהמשתמש הלך יותר מדי רחוק cephalad.
  3. תמונה הקרן הרחם contralateral באופן זהה.
  4. להקפיא את התמונה כאשר המסגרת אולטרסאונד נמצא במרכז של אתר ההשתלה/הריון לשמור עבור ניתוח ומדידות מאוחר יותר.
    הערה: זה לוקח פחות משניה עבור התמונה להיות קפוא ולא הציל לניתוח בשלב מאוחר יותר.
  5. מידה השרשה מרחק באמצעות התגובה decidualization hyperechoic כסמן על-ידי לחיצה ידנית על " מידה " כלי ראשון, ולחיצה על מיקומו של אתר ההשתלה אחד. לאחר מכן, גרור את הסמן השרשה האתר ולחץ על הבא כדי לצייר קו המחשב באופן אוטומטי ידווח על המרחק שלו. התוכנה ידווח אז מהי המידה ידנית. שלב זה לא ממוחשב, אבל מסתמך על המשתמש כדי לסמן את המרחק בין אתרי decidualized על ידי ציור קו בין האתרים decidualized, שיספק התוכנית של הממ מדידה
  6. למדוד גודל השרשה, שק הריון בגודל וגודל קוטב עוברי.

5. קצב דפיקות הלב

הערה: ב 9.5 d.p.c., לפי קצב לב העובר צריך להיות ברור דמיינו.

  1. תוך שמירה על המכשיר עדיין מאוד, להפעיל את גל הדופק דופלר, מקמו זה הדופק גלוי.
  2. שיא הלב לפעום הפעימות.
    הערה: מלבד בלב, הליך זה יכול גם להקליט הפעימות הטבור.

6. רכישת אולטרסאונד תלת-ממדי

  1. אחרי הרחם בהריון יש כבר מדמיין על הדמיה דו-ממדיים, למקם את המכשיר באזור הנמצא נקודת האמצע משוער של תמונת תלת-ממדיים הרצויים. לדוגמה, אם אחת היו הדמיה תפוח בתלת-ממד, החללית בתחילה יוצבו איפה ליבת תפוח הוא ניבא להיות ממוקם (כלומר באמצע של אובייקט).
  2. עם החללית בעמדה באמצע התמונה הרצוי, להשיג על רכישת תלת-ממדי. השלב מנוע תלת-ממדי לנסוע מרחק זה הרחם בסדרה של צעדים או מסגרות, מתוך כוונה לכידת ב כולו מה החוקר רצונות.
  3. אישור כי המבנים המיועדים הן לגמרי בשבי סריקה תלת-ממדי לפני שתשלים את החלק אולטרסאונד בזמן אמת. ולשמור מידע תלת-ממדי זה שלאחר עיבוד במועד מאוחר יותר. הזמן הכולל עבור רכישת דו-ממדיים ותלת -ממדיים אולטרסאונד הוא כ- 10-20 דקות כאשר מבוצעת על ידי משתמש מנוסה.

7. שיחזור תלת-ממדי שלאחר עיבוד (איור 2)

  1. לטעון את הנתונים הרצויים עבור עיבוד תמונה תלת-ממדית.
  2. בחר " ושיטות מקבילות המסתובבת ", אשר יטען כל המסגרות תמונה תלת-ממדית לתוך אחת תלת-ממד " תיבת " כי המשתמש ואז תקשר את האובייקט הרצוי, מסגרת. בחר שלב מידה 0.08 mL. מתחילים בקצה אחד של הרחוב התמונה וגלילה להכיר עם תמונות שנלכדו בתוך שטח.
    1. התחל בקצה אחד של התמונה ואת באופן ידני מעקב קווי המתאר של העצם.
    2. הגלילה הבא תמונה דו-ממדית פרוסה או " מסגרת " ולאתר באופן ידני את קווי המתאר של העצם.
    3. המשך בתהליך זה עד כל המסגרות ידנית מבואר/לאתר על ידי המשתמש.
    4. לחץ על " סיום " כדי לקבל את התמונה התלת-ממדי ואת הנפח הכולל חישובים.
  3. לבחור בין רשת כיסוי אחיד, אשר הוא חץ בפינה הימנית העליונה.
  4. לבחור אם לשמור או להסיר את המידע שמסביב של תמונת אולטרסאונד עבור בהירות. כל שחזור תלת-ממדי יכול לקחת בין 10 ל- 20 דקות

8. טיפול procedural

  1. בסיום באולטרסאונד, לכבות את הגז הרדמה, להסיר את העכבר מרציף ו נגב בעדינות ולשטוף כל ג'ל אולטרסאונד מהחיה.
  2. הנח את העכבר חזרה לכלוב במצב של שכיבה על אזור מרופד. לפקח עד החיה היא ערה ומרגש באופן ספונטני.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

כפי שמתואר באיור1, סאונד בתדירות גבוהה תוכל לאתר את ההשתלה אתר פיתוח מתחיל מוקדם ככל נקודת זמן d.p.c 5.5. שימוש hyperechoic מצית את רירית הרחם decidualized כסמן של ההשתלה-6.5 d.p.c מאפשר למספר ההשתלה ואת הריווח של אתרים אלה כדי ניתן לכמת. כמו ההיריון מתקדמת 7.5 d.p.c., כהה יותר hypoechoic שק הריון, הקוטב העוברי גם הם הניתנות לזיהוי בקלות.

כפי שמוצג באיור2, ההרכב עיבוד דפוס שהושלמו של שחזור תלת מימדי של הרחם העכבר הוא מסוגל, ניתן לאבחן. ב 6.5 d.p.c, ההרכב אולטרסאונד תלת-ממדי בתדירות גבוהה גם רשת וגם כיסוי מלא תבניות יכול לשמש כדי לספק תיאור חזותי. דוגמא נוספת, הפעם ב- 7.5 d.p.c, מדגים את התמונה הסופית ללא הפרדות צבע של הרחם עוד עם רשת וגם כיסוי מלא.

Figure 1
איור 1: זיהוי אולטרסאונד בתדירות גבוהה של פיתוח אתר ההשתלה וניטור של גידול העובר לאורך כל ההיריון. כפי שמוצג באיור 1A, ב- 5.5 d.p.c. hyperechoic מצית רירית הרחם decidualized (ד) מאפשר את המספר של ההשתלה ואת מרווח כדי ניתן לכמת. כפי שמוצג באיור 1B, האתרים decidualization (ד) בחורן הרחם עוד הצטרפו לקרן הרחם (U). מאת 7.5 d.p.c., hypoechoic כהה שק (GS) ואת קוטב עוברי (נ) הם קלות לזיהוי איור 1C. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

Figure 2
איור 2: שחזור תלת מימדי של הרחם העכבר במהלך ההריון מוקדם. ב- 6.5 d.p.c, כפי שמוצג באיור 2A, אולטרסאונד תלת-ממדי בתדירות גבוהה גם רשת וגם כיסוי מלא תבניות מוצגים. ב- 7.5 d.p.c, כפי שמוצג באיור 2B, תמונות אולטרסאונד תלת-ממדי בתדירות גבוהה עם רשת וגם כיסוי מלא תבניות מוצגים. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

שימוש זה הרומן הדמיה תלת-ממדית HFUS מדגים את היכולת לזהות בהצלחה, להמחיש ו לאפיין את השרשת אתרים במהלך ההריון מאתר מוקדם בצורה לא פולשנית. הטכנולוגיה מציעה שיפור משמעותי בשיטות הנוכחי, אשר מסתמכים על ההפרעה של הריונות עבור רקמות ברוטו ואפיון histopathologic. עם זאת יצוין כי שיטות היסטולוגית עדיין ייחשב יותר אופטימלית כאשר איפיון ברמה יותר המוגדל וסלולריות יותר היא הרצויה, או כאשר נדרש ניתוח גנים וחלבונים. עם מספר הולך וגדל של הדגמים החדשים של העכבר, הצגת פגמים השרשה ו בתחילת ההריון אובדן19,20,21,22, היכולת של זה מתקדם טכניקה אולטרסאונד לגילוי מוקדם הריונות מ 5.5 d.p.c ואילך מספק יתרונות ברורים על פני שיטות אולטרסאונד קודמות שבהן היו מוגבלים איתור בגיל ההריון אמצע12,13. יתר על כן, שיטה זו מזהה תנועה לב ברגע הלב מתחיל לפעום, בין 8.5-9.5 d.p.c23,24 ומאפשר לאישור של עוברים קיימא. היכולת לעקוב אחר התפתחות ההריון מוקדם של אותה חיה משמעה פחות חיות נדרשים לכל ניסוי ניתן לבצע ניתוח מדויק יותר כזה עיצובים מוטוריים האורך25,26, 27.

יצוין כי שלושת הצעדים הקריטיים ביותר בפרוטוקול הם: (1) יודעים את היום המדויק הריון; (2) את היכולת של המפעיל על מנת לאתר את הרחם ומקם את החללית מעל האתר האנטומי הנכון; טכניקות מדויקות (3) כדי לייצר שחזור תלת-ממדי. ההנחיות הבאות צרות הירי הוכיחו מועיל: כאשר קשה לאתר את הרחם באולטראסאונד, המשתמש יכול להתחיל על-ידי הבטחת שלפוחית השתן מזוהה לראשונה. שלפוחית השתן נראה בדרך כלל בצורת מעגל שחור, הוא מיד cephalad את פתח הנרתיק. אפילו בעכברים שעברו micturition מייד לפני באולטרסאונד, שלפוחית השתן היא לא ריקה לגמרי, לפיכך (, הניסיון שלנו) יכול להיות סמן אמין. ברגע שלפוחית השתן מזוהה, המכשיר צריך לאט לאט לעבור cephalad עד הרחם נתפסת. אם השלפוחית הוא קטן או אפשרות, ניתן לאבחן, המשתמש יכול גם לנסות לדמיין את הרחם על ידי החל השחלה, אשר ניתן למצוא על האגפים, נחות הכליה. באמצעות גישה שיטתית זו, כל אתר ההשתלה, התפתחות העובר יכול להיות שנצפו, כמו באיור 1. . לפעמים, זה עשוי להיות קשה להשיג את האזור הרצוי של הרחם במהלך בדיקת אולטרה סאונד בשל האופן שבו הרחם ממוקם בבטן, כפי שמוצג באיור 2 צורות שונות והמיקומים של הרחם ויוו. המשתמש יכול להטות את המטוס פלטפורמה העכבר כדי להזיז או ליישר מחדש הרחם באופן פנימי כדי עמדה חיובית יותר שבו ניתן ללכוד אזור הרחם הרצוי על ידי אולטרסאונד. לבסוף, המשתמש יכול לאשר כי התמונות הרצויות הרחם התקבלו במהלך בדיקת אולטרה סאונד על-ידי גלילה במהירות דרך תמונות אולטרסאונד רכשה מיד לאחר המפגש אולטרסאונד הושלמה. מגבלה מינור הוא כי הכיסוי רשת שינוי תלת-ממדית/מלא עבור שחזור ויזואלי לא ניתן לבצע במהלך הפגישה אולטרסאונד. כדי להבטיח כי תמונות אולטרסאונד להיות שהושג מדויק, אנו ממליצים כי כפי החוקרים צוברים מיומנות, בעלי החיים מורדמים לאחר אולטרסאונד על מנת לתאם את הדיוק של ממצאי אולטרסאונד כדי דגימות רקמה מגעיל מדידות, אנטומיה.

בעוד אנו נתאר כאן את הדוגמנות של ההריון מאתר נורמלי, יישומים עתידיים של טכניקה זו יוחל לכמת אירועים חריגים הריון מוקדם. HFUS ושיחזור תלת-ממדי יאפשר חוקרים כדי לזהות ולנטר את המספר, הגודל והמיקומים של הריון נורמלי צמיחה ו/או פיתוח. לדוגמה, אפיון פנוטיפי פולשני של חריגות –כלומר פגום decidualization רירית הרחם, הפצה השרשת העובר סוטה, ואת הפלישה trophoblastic לקוי וצמיחה — המוצג על-ידי גידול מספר עכברים מהונדסים גנטית ניתן עכשיו longitudinally לנתח ללא הפרעה להריון באמצעות מתודולוגיה הדמיה זו.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

המחברים אין לחשוף.

Acknowledgments

אנו מעריכים מאוד את הסיוע של רונג זאו, Jie Li יאן יינג.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
VisualSonics Vevo 2100 Ultrasound Imaging Platform/Machine VisualSonics, inc. VS-11945
Vevo Imaging Station VisualSonics, inc. SA-11982
Aquasonic 100 Ultrasound Transmission Gel Parker #SKU PLI 01-08
Isoflurane (IsoThesia) 100mL bottle Henry Shein #29404
PuraLubenAnimal Ophthalmic Ointment Dechra #12920060

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Rai, R., Regan, L. Recurrent miscarriage. Lancet. 368 (9535), 601-611 (2006).
  2. Sugiura-Ogasawara, M., Ozaki, Y., Suzumori, N. Management of recurrent miscarriage. J Obstet Gynaecol Res. 40 (5), 1174-1179 (2014).
  3. Kutteh, W. H. Novel strategies for the management of recurrent pregnancy loss. Semin Reprod Med. 33 (3), 161-168 (2015).
  4. Page, J. M., Silver, R. M. Genetic Causes of Recurrent Pregnancy Loss. Clin Obstet Gynecol. 59 (3), 498-508 (2016).
  5. Zhang, J., Croy, B. A. Using ultrasonography to define fetal-maternal relationships: moving from humans to mice. Comp Med. 59 (6), 527-533 (2009).
  6. Li, S. J., et al. Differential regulation of receptivity in two uterine horns of a recipient mouse following asynchronous embryo transfer. Sci Rep. 5, 15897 (2015).
  7. Ding, Y. B., et al. 5-aza-2'-deoxycytidine leads to reduced embryo implantation and reduced expression of DNA methyltransferases and essential endometrial genes. PLoS One. 7 (9), e45364 (2012).
  8. Kusakabe, K., Naka, M., Ito, Y., Eid, N., Otsuki, Y. Regulation of natural-killer cell cytotoxicity and enhancement of complement factors in the spontaneously aborted mouse placenta. Fertil Steril. 90 (4 Suppl), 1451-1459 (2008).
  9. Demianczuk, N. N., et al. The use of first trimester ultrasound. J Obstet Gynaecol Can. 25 (10), 864-875 (2003).
  10. Thompson, H. E. Evaluation of the obstetric and gynecologic patient by the use of diagnostic ultrasound. Clin Obstet Gynecol. 17 (4), 1-25 (1974).
  11. Unterscheider, J., et al. Definition and management of fetal growth restriction: a survey of contemporary attitudes. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 174, 41-45 (2014).
  12. Greco, A., et al. High frequency ultrasound for in vivo pregnancy diagnosis and staging of placental and fetal development in mice. PLoS One. 8 (10), e77205 (2013).
  13. Flores, L. E., Hildebrandt, T. B., Kuhl, A. A., Drews, B. Early detection and staging of spontaneous embryo resorption by ultrasound biomicroscopy in murine pregnancy. Reprod Biol Endocrinol. 12, 38 (2014).
  14. Nguyen, T. M., et al. Estimation of mouse fetal weight by ultrasonography: application from clinic to laboratory. Lab Anim. 46 (3), 225-230 (2012).
  15. Singh, S., et al. Quantitative volumetric imaging of normal, neoplastic and hyperplastic mouse prostate using ultrasound. BMC Urol. 15, 97 (2015).
  16. Liu, L., et al. Ultrasound-mediated destruction of paclitaxel and oxygen loaded lipid microbubbles for combination therapy in ovarian cancer xenografts. Cancer Lett. 361 (1), 147-154 (2015).
  17. Ni, J., et al. Monitoring Prostate Tumor Growth in an Orthotopic Mouse Model Using Three-Dimensional Ultrasound Imaging Technique. Transl Oncol. 9 (1), 41-45 (2016).
  18. Peavey, M. C., et al. Three-Dimensional High-Frequency Ultrasonography for Early Detection and Characterization of Embryo Implantation Site Development in the Mouse. PLoS One. 12 (1), e0169312 (2017).
  19. Song, H., et al. Cytosolic phospholipase A2alpha is crucial [correction of A2alpha deficiency is crucial] for 'on-time' embryo implantation that directs subsequent development. Development. 129 (12), 2879-2889 (2002).
  20. Nallasamy, S., Li, Q., Bagchi, M. K., Bagchi, I. C. Msx homeobox genes critically regulate embryo implantation by controlling paracrine signaling between uterine stroma and epithelium. PLoS Genet. 8 (2), e1002500 (2012).
  21. Hirate, Y., et al. Mouse Sox17 haploinsufficiency leads to female subfertility due to impaired implantation. Sci Rep. 6, 24171 (2016).
  22. Wang, T. S., et al. Dysregulated LIF-STAT3 pathway is responsible for impaired embryo implantation in a Streptozotocin-induced diabetic mouse model. Biol Open. 4 (7), 893-902 (2015).
  23. Ji, R. P., et al. Onset of cardiac function during early mouse embryogenesis coincides with entry of primitive erythroblasts into the embryo proper. Circ Res. 92 (2), 133-135 (2003).
  24. Srinivasan, S., et al. Noninvasive, in utero imaging of mouse embryonic heart development with 40-MHz echocardiography. Circulation. 98 (9), 912-918 (1998).
  25. Franco, N. H., Olsson, I. A. Scientists and the 3Rs: attitudes to animal use in biomedical research and the effect of mandatory training in laboratory animal science. Lab Anim. 48 (1), 50-60 (2014).
  26. Pratap, K., Singh, V. P. A training course on laboratory animal science: an initiative to implement the Three Rs of animal research in India. Altern Lab Anim. 44 (1), 21-41 (2016).
  27. Landi, M. S., Shriver, A. J., Mueller, A. Consideration and checkboxes: incorporating ethics and science into the 3Rs. J Am Assoc Lab Anim Sci. 54 (2), 224-230 (2015).

Tags

ביולוגיה התפתחותית גיליון 128 תלת-ממדי אולטרסאונד בתדירות גבוהה עכבר השרשה הריון
שימוש הרומן של בדיקת אולטרה סאונד בתדירות גבוהה תלת מימדי אפיון בתחילת ההריון העכבר
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Peavey, M. C., Reynolds, C. L.,More

Peavey, M. C., Reynolds, C. L., Szwarc, M. M., Gibbons, W. E., Valdes, C. T., DeMayo, F. J., Lydon, J. P. A Novel Use of Three-dimensional High-frequency Ultrasonography for Early Pregnancy Characterization in the Mouse. J. Vis. Exp. (128), e56207, doi:10.3791/56207 (2017).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter