Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Техника минимально инвазивной поперечной аорты сдавливания в мышей для индукции гипертрофия левого желудочка

Published: September 25, 2017 doi: 10.3791/56231

Summary

Целью настоящего Протокола является описание шаг за шагом технику минимально инвазивной поперечной сужение аорты (TAC) мышей. Ликвидация интубации и вентиляции, которые являются обязательными для часто используемых стандартной процедуры миниинвазивная TAC упрощается процедура оперативного и уменьшает нагрузку на животное.

Abstract

Поперечная сужение аорты (TAC) мышей является одним из наиболее распространенных хирургических методов для экспериментального исследования давление перегрузки индуцированной оставил гипертрофия желудочков (ГЛЖ) и ее прогрессирования сердечной недостаточности. В большинстве сообщенных расследований эта процедура выполняется с интубации и вентиляции животное, которое делает его сложных и трудоемких и добавляет к хирургической бремя для животного. Целью настоящего Протокола является описание упрощенной методики малоинвазивной TAC без интубации и вентиляции мышей. Важнейшие шаги техники подчеркнуты достижения низкой смертности и высокой эффективности в стимулировании ГЛЖ.

Самцов мышей C57BL/6 (10-недельных, 25-30 g, n = 60) были под наркозом с одной внутрибрюшинной инъекции смеси кетамина и ксилазина. В спонтанно дыхание животных после 3-4 мм верхний частичной стернотомия, сегмент 6/0 Шелкового шва резьбой через глаз помощи лигирование был принят под аорты и связали над притупляются 27-иглы. Шам эксплуатируемых животных прошли же хирургической подготовки, но без сужение аорты. Эффективность процедуры в стимулировании ГЛЖ подтверждено значительное увеличение соотношения вес сердца/тела. Этот показатель получен в течение 3, 7, 14 и 28 дней после операции (n = 6-10 в каждой группе и каждый момент времени). Используя нашу технику, ГЛЖ наблюдается по сравнению с фиктивным животных от 7 день через день 28 ТЭК. Оперативное и поздно (более 28 дней) смертности являются весьма низкие на 1,7%.

В заключение наша экономически техника минимально инвазивной TAC в мышах носит очень низкой постановляющей части и послеоперационная смертность и очень эффективна в привлечении ГЛЖ. Это упрощает процедура оперативного и уменьшает нагрузку на животное. Она может быть легко выполнена, следуя критические шаги, описанные в настоящем Протоколе.

Introduction

За последние годы, было проведено исследование сердечной недостаточности в жизнеспособных животных модели1. По сравнению с больших животных моделей сердечной недостаточности, малые животные модели имеют многочисленные потенциальные преимущества. Рядом с нижней расходы жилищного строительства и технического обслуживания малые животные модели доступны для больше исследователей из-за менее сложных необходимое2.

Мышь сердечной недостаточности модели предлагают многие из те же преимущества, как крыса модели. В дополнение к сокращению жилья стоит3, мышь модели выгоду от наличия соответствующих штаммов трансгенных и нокаут (KO). Возможность конкретного типа, индуцибельной KO ячейки или трансгенных стратегии сделать мышь бесценным инструментом для изучения патогенеза сердечной недостаточности и попытаться определить новые терапевтические схемы3.

Среди мыши модели сердечной недостаточности в настоящее время используется4, поперечной аорты сужения (TAC), который был впервые описан Rockman5 является предпочтительной моделью для создания давления перегрузки индуцированной левого желудочка гипертрофия (ГЛЖ)1 , 3. самое главное преимущество этой модели является возможность разрешить стратификации ГЛЖ2, хотя левой вентрикулярной Ремоделирование в ответ на TAC переменной между различными мыши штаммов. Мышей C57BL/6, в частности, разработать быстрого LV дилатация после TAC, что не может произойти с другими штаммов4,6,7.

Внезапного возникновения гипертонии, достигнутые с причинами TAC примерно 50% увеличение LV массы в течение 2 недель, позволяя быстро изучить действие фармакологических или молекулярные вмешательств, направленных на плавного развития ГЛЖ4. Острый индукции тяжелой гипертензии, TAC не точно воспроизвести прогрессивного левого желудочка гипертрофия и Ремоделирование наблюдается в клинических условиях аортальный стеноз или артериальной гипертензии. Тем не менее эта модель используется для определения и изменения роман терапевтических целей в сердечной недостаточности4многих детективов.

Выполнение TAC в мышах требует больше хирургического опыта, чем требуется для других методов, используемых для побудить ГЛЖ и последующих сердечной недостаточности2. Большинство авторов выполнить эту процедуру, интубирование и вентиляции животных2,8, который делает эту процедуру более требовательной и длительным и добавляет к хирургической бременем для животного. Только несколько исследователи использовали минимально инвазивной TAC в их исследовании с краткое хирургическая процедура9,10,11.

Целью настоящего Протокола является описать пошаговую инструкцию упрощенный и удобный метод минимально инвазивной поперечной аорты сдавливания в мышей, выделив на критических этапах процедуры. Выполнив следующие ключевые шаги, один можно легко выполнить эту технику.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

мужчины C57BL/6J мышей (10 недель, 25-30 г, n = 60) используются в настоящем Протоколе. Животные получают гуманной помощи в соответствии с руководящими принципами, сформулированными французским министерством сельского хозяйства и высшего образования и научных исследований, и все процедуры выполняются в соответствии с директивой Совета Европейского сообщества от 24 ноября 1986 () 86/609/EEC) и французских законов. Протокол был утвержден " региональный комитет по этике для животных экспериментов CREMEAS " (#2016092816207606).

1. Подготовка к операции

  1. сохранить мышей на одну неделю после прибытия в объекте животных на 12h / 12h цикла свет/темно, в стандартные корпуса, с пищей (для Подробнее см. таблицу материалы) и вода доступна объявление Либитум.
  2. В день операции, место мышей в отдельных клетках за несколько минут до индукции анестезии, для того чтобы избежать каких-либо дополнительных стресс для животного. Стерилизовать всех хирургических инструментов за день до операции.
  3. Вставки внутри peritoneally разовая доза смесь кетамин (51.4 мг/кг) и ксилазина (3,3 мг/кг) разводят в физиологический раствор (0,9% NaCl).
  4. Убедитесь, что из глубины анестезии отсутствие мыс отступление рефлекс.
  5. Бритья бритвой коммерчески доступных шею и грудь животного и дезинфицировать области побрился с 70% спирта.
  6. Животное лежа на площадку Рабочая чистого Корк и исправить лапы с клейкой лентой.

2. Хирургия

  1. хирургических стерильных используется всей процедуры. В спонтанно дыхание животных, выполняют разрез продольной средней шейки матки более 10 мм с 11-лезвие ножа из выше грудной вырез на середину груди для того, чтобы разоблачить грудины ( рис. 1).
  2. Убрать щитовидной железы, передав шовный материал полипропилен пребывания леска 4/0 с Crile-Вуд иглодержатель и ленту его на рабочую площадку.
  3. Отдельные тупо предварительно трахеи мышцы с микро хирургические щипцы раскрыть трахеи.
  4. Слайд аккуратно гладкой накренилась изогнутые микро хирургические щипцы с закрытой пасти над трахеи и за грудиной.
  5. , Тщательно открытия и закрытия челюстей гладкой наконечником щипцы изогнутые микрохирургическое осуществлять тупым диссекция под заранее трахеи мышцы и за грудиной отойти плевра.
  6. Понять право выше ключицы мышцы с гладкой наконечником прямо микро хирургические щипцы и потяните вверх нежно грудь животного.
  7. Слайд нижней челюсти кости щипцы под грудины и выполнить верхняя частичной стернотомия, 3-4 мм ( рис. 2). Прямой в нижней части мини стернотомии слегка к левой.
  8. Пройти второй межреберное пространство леска 7/0 полипропилен пребывания шовный материал от внутри к вне на каждой стороне с помощью микро хирургические иглодержатель мини стернотомии. Оставайтесь рядом реберно грудинном угол, чтобы избежать травм межрёберные и внутренней грудной судов или плевры.
  9. Распространения края грудины, с помощью 7/0 Мононить полипропиленовая пребывания швы на каждой стороне и исправить их на рабочую площадку с помощью скотча.
  10. Осторожно двигаться в сторону предварительно трахеи мышц, средостения жира и вилочковой железы с помощью накренилась гладкой изогнутые микрохирургическое щипцы для визуализации аорты под увеличением малой мощности (2-3 X) ( рис. 3). Будьте особенно осторожны, чтобы не коснуться или повреждение париетальной плевры для предотвращения развития пневмоторакса.
  11. Разоблачить мягких тканей под аорты, связывая щипцы ( рис. 4 A) и аккуратно распространение его челюсти. Подготовить тоннель в мягких тканей под аорты с второй связывая щипцами осторожно открытия и закрытия челюстей в мягких тканей.
  12. Пройти сегмента 6/0 шелк лигатура резьбой через глаз лигирование помощи ( Рисунок 4 B), в левой руке под аорты и извлечь его, связывая щипцами в правой руке между происхождение право непоименованных и левой общей сонной артерии ( рис. 5).
  13. Вырезать 27-иглы длиной 5 мм и тупые обоих концах, нажав их с Crile иглодержателя. Место притупляются 27-иглы рядом с аорты ( рис. 6) с гладкой наконечником прямо микро хирургические щипцы и связать шовный материал плотно вокруг иглы и аорты между правом непоименованных и левой общей сонной артерии артерий, используя два связывая щипцы ( рис. 7). Плотно завязать шовный материал, выполните первоначальные двойным узлом, следуют четыре дополнительных узла. Убедитесь, что все узлы являются плоскими.
  14. После перевязки, удалить быстро, но осторожно, игла для достижения сужение диаметром 0,4 мм и воспроизводимый поперечной 65-70% аорты сужение.
  15. Проверить гемостаза мягких тканей вокруг аорты, грудной края и предварительно трахеи мышц. Положите рассасывающимся Кровоостанавливающая марля, где просачивание крови наблюдается. Удалить, 7/0 Мононить полипропиленовая остаться шовные материалы, используемые для распространения края грудины.
  16. Пройти простой 6/0 Мононить полипропиленовая шовный материал с микро хирургические иглодержателя от снаружи к внутри левой второй межреберное пространство и затем от внутри вне право второй межреберное пространство. Оставайтесь рядом реберно грудинном угол, чтобы избежать травм межрёберные и внутренней грудной судов или плевры.
  17. Объединить края грудины, связывая 6/0 Мононить полипропиленовая шовный материал с Crile-Вуд иглодержатель.
  18. Закройте кожи с 5/0 Мононить полипропиленовая, управлением шовный материал в один слой с Crile-Вуд иглодержатель.
  19. Выполнения Шам процедуры идентичны для сужения операцию, но не связывая швом вокруг аорты.

3. Послеоперационное восстановление

  1. очень внимательно следить за животных. передавать отдельные клетки мыши и поместить его в положении лежа.
  2. Разрешить, мыши, чтобы восстановить под потепления света до тех пор, пока полностью проснуться (менее 1 ч после вызывая анестезии).
  3. Для послеоперационного обезболивания, придать 0,1 мг/кг бупренорфина внутрибрюшинно. повторить подкожной инъекции 0,1 мг/кг каждые 8 ч бупренорфина в первые три дня, как указано.
  4. Место эксплуатация мышей в стандартных клетках (максимум 3 мышей в клетке) и минимум 2 мышей на клетке.

4. Сердце урожай

  1. в день анализа, усыпить мышь с раствором кетамина 300 мг/кг и ксилазина 20 мг/кг в солевых внутрибрюшинной инъекцией.
  2. Сначала собирают кровь из нижней полой вены и затем через линию же залить 5 мл раствора 2.6 мм ЭДТА в Салине.
  3. Урожая сердце, удалить предсердия и вес сердца (левого и правого желудочков без предсердия).
  4. Отдельные слева от правой ventrучастие с носовой перегородки, оставшиеся части левого желудочка. Весят как образцы тканей и заморозить их в жидком азоте.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Оперативное и конце выживания
Постановляющей части выживания был очень высоким, 98,3% (59 из 60) для всей серии (TAC и Шам эксплуатируемых животных). Только смерть наступила в результате кровотечения осложнение в мыши, строганные Шам операции. Послеоперационные выживания в период наблюдения за 28 дней также был отличный, 98,3% (58 из 59). Только в конце послеоперационные смерть произошла в TAC мыши на день (D) 16, возможно, сердечного происхождения.

Проверка техники
Представлена методика очень надежных и воспроизводимых. Правильное размещение шов между правом непоименованных и левой общей сонной артерии было подтверждено в ходе ткани урожай во всех животных, претерпевает TAC.

Эффективность метода побудить гипертрофия левого желудочка был подтвержден определение соотношения сердце вес/тела вес (HW/BW, мг/г) на 3, 7, 14 и 28 дней после операции. HW является вес левого и правого желудочка без предсердия. HW/BW соотношение значительно возросла в диапазонов по сравнению с группами Шам от послеоперационных D7 (4.9±0.2 против 4.1±0.05 мг/г, P < 0.01) о и значительно выше остали до D28 (5.8±0.3 против 4.1±0.1 мг/г, P < 0.0001) После операции (рис. 8). Наблюдаемое увеличение соотношения HW/BW объясняется исключительно увеличение левого желудочка/тела вес коэффициент (рис. 9А) поскольку соотношение веса правый желудочек/тела оставались сопоставимыми между TAC и Шам эксплуатируемых животных во время всей наблюдения период (Рисунок 9B).

Кроме того мы измерили в ткани левого желудочка выражение mRNA биомаркеров гипертрофии сердца как описано12. В D14, выражение mRNA мозга натрийуретического белка (БНП), предсердная натрийуретического белка (АНП), ангиотензин-превращающего фермента (АПФ), коллаген 1А1 (Col1a1) и преобразование ß фактор роста (TGFß) был значительно выше в аортальной диапазонов по сравнению с Шам эксплуатируемых животных (рис. 10). Таким образом наблюдаемое левого желудочка гипертрофия проверяет эффективность нашей методики TAC.

Среднее и Среднеквадратичная ошибка среднего значения были сопоставлены между TAC и Шам групп с использованием односторонней ANOVA, следуют Бонферрони в пост hoc испытания для сравнения парных данных.

Figure 1
Рисунок 1 : Разрез.
Кожа является врезаны более 10 мм от выше грудной вырез в середине грудины и щитовидной железы втягивается с швом пребывания. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Figure 2
Рисунок 2 : Кости щипцы.
Этот инструмент позволяет короткий и точно вырезать в кости для 3-4 мм верхний частичной Улучшенный мини стернотомии. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Figure 3
Рисунок 3 : Экспозиции.
После отзыва края грудины с 7/0 остаться швы, аорты, прямо непоименованных и подвергаются левой общих сонных артерий вместе с трахеи. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Figure 4
Рисунок 4 : A. Tying щипцами. Эти щипцы являются необходимыми для выполнения нежный и тупым рассечение за грудиной и вокруг аорты. B. помощи лигирование. Это является ключевым инструментом для реализации деликатный и атравматической проход под аорты в TAC и Шам действовали мышей. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Figure 5
Рисунок 5 : Проход под аорты arch.
Сегмент шелковые лигатура 6/0 передается под аорты с использованием помощи перевязки и помещен между правом непоименованных и левой общей сонной артерии. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Figure 6
Рисунок 6 : Подготовка для перевязки.
Короткий сегмент 2-3 мм притупляются 27-иглы помещается над аорты. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Figure 7
Рисунок 7 : Поперечной сужение аорты.
Шелковый шов связана через иглу и аорты между право непоименованных и левой общей сонной артерии, используя связывание щипцы. Шелковые вместо полипропиленовые шовные является предпочтительным для аорты перевязки, потому, что узел будет лучше проводить. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Figure 8
Рисунок 8 : Проверка поперечной сужение аорты.
Индукции гипертрофии сердца, нашей минимально инвазивной поперечной сужение аорты свидетельствует значительное увеличение соотношения веса веса/тела сердца в пластинчатые (черные полосы) по сравнению с Шам действовали (Белый Барс) мышах. Гипертрофии сердца уже присутствует на D7 после операции и увеличивается постепенно с течением времени до D28 (n = 6-10 на группу. ** P < 0.01, *** P < 0,001, *** P < 0.0001). Данные представлены как означает ± SEM (планки погрешностей). Сделки о признании виныSE нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Figure 9
Рисунок 9 : Слева (A) и (B) желудочка вправо / тела соотношение веса.
За период наблюдения соотношение веса левого желудочка/тела увеличивается, а соотношение веса правый желудочек/тела остается в TAC (черные полосы) по сравнению с приводом Шам (Белый баров) животных. Это подтверждает левого желудочка гипертрофия без изменений в правый желудочек и укрепляет проверки нашей техники (n = 6-10 на группу. ** P < 0.01, *** P < 0,001, *** P < 0.0001). Данные представлены как означает ± SEM (планки погрешностей). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Figure 10
Рисунок 10 : Выражение БНП mRNA.
выражение mRNA мозга натрийуретического белка (БНП), предсердная натрийуретического белка (АНП), ангиотензин-превращающего фермента (АПФ), коллаген 1А1 (Col1a1) и преобразования ß фактор роста (TGFß), положительный контроль для гипертрофии сердца в аортальной диапазонов (черная полоса) против липовые животных (белая полоса) (n = 6 для каждой группы) на D14. Выражение рассчитывается как 2(-ΔCt) где калибратора является уровень мРНК гена Gapdh ссылку. Данные представлены как означает ± SEM (планки погрешностей). * P < 0,05, ** P < 0.01, *P < 0,001, по сравнению с группой Шам (t-тест). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Цель настоящего Протокола заключается в представлении Пошаговые иллюстрации хирургической техники для малоинвазивных поперечной сужение аорты в мышах. 2,других авторов8сообщила подробное техническое описание поперечной сужение аорты у мышей. Однако, эти следователи выполняют операции после интубации и вентиляции животных. Использование дополнительного шага интубации-вентиляции увеличивает сложность и продолжительность всей процедуры и глобальной стресса животное подвергается. По этим причинам концепция минимально инвазивной поперечной сужение аорты получила определенное внимание. Малоинвазивные поперечной сужение аорты мышей используется для гипертрофии левого желудочка и ее прогрессирования сердечной недостаточности9,10,11. Эти исследования сосредоточены на пути, участвующие в генезе гипертрофии левого желудочка и сердечной недостаточности, но не на описании хирургической техники9,10,11.

В настоящем протоколе мы сообщаем в деталях упрощенной и воспроизводимые техника минимально инвазивной TAC в мышах. Опытный хирург может сделать сужение операции в течение 20 минут и Шам операции (без шва связывая) в 15 минут. В ходе наших первоначальных технических доказательства мы обнаружили, что введение ключевых инструментов, лигирование помощи, позволили очень низкой постановляющей части смертности на 1,7%. Это выгодно постановляющей части смертности 4%, сообщил Rockman et. al. 5, 3,7% на Ляо et al. 13 и 2,7% Стэнсфилд et al14. Кроме того, в период наблюдения до 28 дней, также показывает очень низким конце послеоперационной смертности 1,7%. Опять же, это сравнивает хорошо в конце смертности, сообщает Rockman et al (10%)5, Ляо et al (19%)13 или Стэнсфилд et al (2,6%)14.

Проход под аорты является важнейшим этапом всей процедуры. Воспроизводимость этот шаг не был описан Ху и коллег, которые использовали домашний провод с ловушкой на своем конце пройти под аорты между происхождения право непоименованных и левой общей сонной артерии9, ни Тарнавские, которые расположены Изогнутый пинцет с медиальной стороны под восходящей части аорты поймать 7/0 шелк шов на противоположной стороне и переместить его под аорты2. Перешнуровка помощи используется в нашей технике позволяет стандартизированный и воспроизводимые маневр с низким риском разрыва аорты.

Еще один решительный шаг процедуры является напряженность, применяемых для галстука над 27-иглы для уменьшения эффективно и содержанием однородно просвета аорты. Во-первых мы используем связывая щипцы, которые помогают применения единообразного и воспроизводимые напряженность на швом вокруг аорты. Соответствующие размещения шва проверяется во время сбора сердца и аорты. Андерсен и coworkers проверены соответствующие размещения группы оценки доплеровских сигналов сонных артерий как до, так и после размещения аорты группы11. В их докладе надлежащих диапазонов было принято, когда соотношение доплеровской скорости в два раза от правого к левой сонной артерии11. В нашей технике, мы решили измерить эффективность TAC по степени индуцированной левого желудочка гипертрофия в диапазонах по сравнению с фиктивным животных с целью проверки процедура, так как он не требует любое увеличение продолжительности процедуры или дополнительная анестезия животных. В нашей технике степень гипертрофии левого желудочка и соответствующие размещения диапазонов проверяются в конце эксперимента. Результаты, полученные другими исследователями на 3 недели, после TAC в мышей15выгодно степени левого желудочка гипертрофия по нашей методике. Кроме того низкий вариант соотношения сердца веса тела наблюдается в наши пластинчатые животных свидетельствует о низкой колебания напряжения, применяется к галстук.

В заключение избегая интубации вентиляции изложенные в настоящем Протоколе, наша техника минимально инвазивной TAC в мышах обеспечивает надежных и воспроизводимых модель. Эта модель уменьшает глобальной деформации положить на животных и экономии времени и затрат по сравнению с использованием интубации вентиляция животных TAC. Оперативное и конце смертности этой процедуры являются очень низкими и сделать эту технику, одним из методов выбора для индукции гипертрофии левого желудочка в мышей.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Авторы имеют никакого конфликта интересов раскрыть.

Acknowledgments

Эта работа была поддержана Грант (N ° 32016) швейцарского фонда сердечно-сосудистой системы в рт.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Surgical microscope Olympus SZX2-TR30
Razor Rowenta Nomad TN3650FO
Sutures:
Polypropylene 7/0 Ethicon BV-1X
Polypropylene 6/0 BBraun C0862061
Silk 6/0 ligature  FST 18020-60
Polypropylene 4/0 Ethicon 8683
Polypropylene 5/0 Ethicon Z303
Drugs:
Ketamin Merial Imalgène 1000, LBM154AD
Xylazine Bayer Rompun 2%, KP09PPC
Buprenorphine Ceva Vetergesic, 072013
Instruments: 
Bone nippers Fine Surgical Tools 16101-10
Ligation aid Fine Surgical Tools 18062-12
Tying forceps Fine Surgical Tools 18026-10
Needle holder Crile-Wood Fine Surgical Tools 12003-15
Microsurgery forceps  Fine Surgical Tools 11003-12
Microsurgery forceps  Fine Surgical Tools 11002-12
Tissue forceps Fine Surgical Tools 11021-12
Microsurgery needle holder Fine Surgical Tools 12076-12
Microsurgery scissors Fine Surgical Tools 91501-09
Mayo scissors Fine Surgical Tools 14511-15
11-blade knife Fine Surgical Tools 10011-00
RNA extraction and qPCR:
TriReagent Euromedex TR-118-200
Rneasy Mini kit Qiagen 74704
Qubit Fluorimetric RNA assay Fisher Scientific 10034622
RNA 6000 Nano kit Agilent 5067-1511
High Capacity cDNA kit Fisher Scientific 10400745
Taqman Master Mix Fisher Scientific 10157154
Taqman BNP primers Fisher Scientific Mm01255770_g1
Taqman ANP primers Fisher Scientific Mm01255747_g1 
Taqman ACE primers Fisher Scientific Mm00802048_m1
Taqman Col1a1 primers  Fisher Scientific Mm00801666_g1
Taqman TGFb primers Fisher Scientific Mm01178820_m1
Taqman Gapdh primers Fisher Scientific Mm99999915_g1
ABIPrism  Thermocycler Applied Biosystems 7000
Software:
GraphPad Prism GraphPad Prism 7
Animal food
Complete diet for adult rats/mice Safe UB220610R

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Molinari, F., Malara, N., Mollace, V., Rosano, G., Ferraro, E. Animal models of cardiac cachexia. Int. J. Cardiol. 219 (15), 105-110 (2016).
  2. Tarnavski, O. Mouse surgical models in cardiovascular research. Methods. Mol. Biol. 573, 115-137 (2009).
  3. Verma, S. K., Krishnamurthy, P., Kishore, R., et al. Transverse aortic constriction: a model to study heart failure in small animals. Manual of Research Techniques in Cardiovascular Medicine. Ardehali, H. , Wiley, J., & Sons. 164-169 (2014).
  4. Patten, R. D., Hall-Porter, M. R. Small animal models of heart failure. Development of novel therapies, past and present. Circ. Heart Fail. 2 (2), 138-144 (2009).
  5. Rockman, H. A., et al. Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 88 (18), Erratum in: Proc. Natl. Acad. Sci. USA Page 9907 8277-8281 (1991).
  6. Barrick, C. J., Rojas, M., Schoonhoven, R., Smyth, S. S., Threadgill, D. W. Cardiac response to pressure overload in 129S1/SvImJ and C57BL/6J mice: temporal- and background-dependent development of concentric left ventricular hypertrophy. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 292 (5), 2119-2130 (2007).
  7. Deschepper, C. F., Olson, J. L., Otis, M., Gallo-Payet, N. Characterization of blood pressure and morphological traits in cardiovascular-related organs in 13 different inbred mouse strains. J. Appl. Physiol. 97 (1), 369-376 (2004).
  8. Almeida, A. C., van Oort, R. J., Wehrens, X. H. T. Transverse aortic constriction in mice. J. Vis. Exp. (38), April 21 (2010).
  9. Hu, P., Zhang, D., Swenson, L., Chakrabarti, G., Abel, E. D., Litwin, S. E. Minimally invasive aortic banding in mice: effects of altered cardiomyocyte insulin signaling during pressure overload. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 285 (3), 1261-1269 (2003).
  10. Faerber, G., et al. Induction of heart failure by minimally invasive aortic constriction in mice: Reduced peroxisome proliferator-activated receptor ϒ coactivator levels and mitochondrial dysfunction. J. Thorac. Cardiovasc. Surg. 141 (2), 492-500 (2011).
  11. Andersen, N. M., Tang, R., Li, L., Javan, H., Zhang, X. Q., Selzman, C. H. IKK-β inhibition prevents adaptive left ventricular hypertrophy. J. Surg. Res. 178 (1), 105-109 (2012).
  12. Nemska, S., Monassier, L., Gassmann, M., Frossard, N., Tavakoli, R. Kinetic mRNA profiling in a rat model of left ventricular hypertrophy reveals early expression of chemokines and their receptors. PLoS ONE. 11 (8), 0161273 (2016).
  13. Liao, Y., et al. Echocardiographic assessment of LV hypertrophy and function in aortic-banded mice: necropsy validation. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 282 (5), 1703-1708 (2002).
  14. Stansfield, W. E., et al. Characterization of a model to independently study regression of ventricular hypertrophy. J. Surg. Res. 142 (2), 387-393 (2007).
  15. Beetz, N., et al. Ablation of biglycan attenuates cardiac hypertrophy and fibrosis after left ventricular pressure overload. J. Mol. Cell. Cardiol. 101, December 145-155 (2016).

Tags

Медицина выпуск 127 миниинвазивная поперечной сужение аорты мышей в естественных условиях модель гипертрофия левого желудочка
Техника минимально инвазивной поперечной аорты сдавливания в мышей для индукции гипертрофия левого желудочка
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Tavakoli, R., Nemska, S., Jamshidi,More

Tavakoli, R., Nemska, S., Jamshidi, P., Gassmann, M., Frossard, N. Technique of Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice for Induction of Left Ventricular Hypertrophy. J. Vis. Exp. (127), e56231, doi:10.3791/56231 (2017).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter