Summary
Burada lazer Doppler perfüzyon görüntüleme (LDPI) bir arada sunmak ve lazer Doppler perfüzyon (LDPM) spinal ölçmek için izleme kordon yerel kan akışı ve oksijen doygunluğu (SO2), omurilik tanıtmak için standart bir prosedür yanı sıra sıçan travmada.
Abstract
Lazer Doppler flowmetry (LDF) omurilik microcirculatory değişiklikleri ölçmek için tercih yapar kan akışı (BF) ölçüm için invaziv olmayan bir yöntemdir. Bu makalede, amacımız BF değişikliği Medulla Spinalis Yaralanmalarında sonra analiz etmek için lazer Doppler görüntüleme ve izleme kullanmak olmuştur. Lazer Doppler görüntü tarayıcı ve sonda/monitör her okuma elde etmek için istihdam olmak. LDPI veri yaralanma sitenin etrafına perfüzyon genel bir bakış verdi ve BF karşılaştırmalı analizi farklı yerler arasında için erişilebilir hale BF, yerel bir dağıtımını sağladı. Yoğun problama alan bir süre içinde ölçerek, kombine bir sonda aynı anda genel omurilik perfüzyon ve oksijen kaynağı gösteren omurilik BF ve oksijen doygunluğu ölçmek için kullanıldı. LDF kendisi hareket için duyarlılık ve biyolojik sıfır sinyal göreli akı gibi birkaç sınırlamalar vardır. Ancak, teknoloji basit kurulum ve hızlı BF ölçülmesi nedeniyle klinik ve deneysel çalışmada uygulanmıştır.
Introduction
Spinal kord son derece bozukluklarına ve Medulla Spinalis Yaralanmalarında (SCI) tarafından indüklenen hipoksi son derece duyarlı dokudur. Önceki çalışmalarımız spinal kord kan akışını önemli ölçüde motor fonksiyon eksikliği için ilgili olabilir beyin sarsıntısı yaralanma1,2sonra azalma gösterdi. Son yıllarda yapılan çalışmalarda kan damarları SCI takip bütünlüğünü iyi duyusal motor işlevleri3iyileşme ile ilişkili olduğunu göstermiştir. Bu geliştirilmiş vascularity beyaz madde, dolaylı olarak geliştirilmiş fonksiyonu4' e lider kurtarmak bildirilmiştir. Bu nedenle, sonrası yaralanma omurilik perfüzyon bakım canlılığı ve işlevselliği korumak için birincil öneme sahip olduğu ortaya çıktı.
Perfüzyon SCI sonra üzerinde çeşitli tedavilerin etkileri SCI5,6,7' nin deneysel modelleri çeşitli teknikler kullanarak çok sayıda müfettişler tarafından muayene. Lazer Doppler, iyi kurulmuş bir teknik olarak, hiç şüphesiz birkaç hayvan ve insan çalışmaları8,9,10,11perfüzyon miktarının için yararlı bir yöntem. Teknik aydınlatıcı ışığına kırmızı kan hücreleri hareket ettirerek indüklenen Doppler kayması12 ölçme üzerinde temel alır. Erken 1980'li yıllarda teknik ticarileştirilmesi beri büyük ilerleme lazer teknolojisi, fiber optik ve sinyal işleme perfüzyon ölçmek için güvenilir bir teknoloji LDF yapılan lazer Doppler aletleri13tarafından yapılmıştır.
Mevcut çalışmada, her iki yöntem lazer Doppler ölçüm concussive sıçan spinal kelimesinde kan akımı (BF) değerlendirmek için uygulandı. Teknoloji ve onun basit kurulum noninvaziv doğası nedeniyle, bizim iletişim kuralı omurilik BF ölçümleri için duyarlı, hızlı ve güvenilir bir yöntem sağlar. Daha da önemlisi, bu yöntem her zaman noktası BF sonrası concussive SCI hayvan kurban olmadan boyuna çalışma sağlar.
BF doku ve perfüzyon stimülasyon sırasında hızlı değişiklikler değerlendirmek yeteneği nedeniyle, serebral BF14,15 değerlendirmek gibi diğer doku karaciğer16, gibi ölçmek için bu iletişim kurallarını uygulamak mümkündür 17, cilt18,19ve bağırsak20. Orta serebral arter tıkanıklığı geçici bir sıçan modelinde, lazer Doppler okuma BF oranı iskemik penumbra14' te beklenen düzeylere doğru azalma sağlamak için kullanılmıştır. Kritik uzuv iskemi (CLI) indüksiyon uğramıştır, fare içinde lazer Doppler tarama önce ve sonra CLI yordam ve tedavi21sonra farklı dönemlerde hind uzuv BF gözlemlemek için uygulandı. Ayrıca, bioavailability ve bazı ilaçların metabolik izni LDF16tarafından algılandı hepatik BF bağlıydı. Bu nedenle, LDF yaygın deneysel model, Farmakodinamik ve farmakokinetik değerlendirilmesinde kullanılabilir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Hayvan iletişim kuralları deneysel hayvanları içeren ulusal kurumları sağlık (NIH tarafından) kurulan yönergeleri takip ve hayvan bakım ve kullanım Komitesi sermaye Tıp Üniversitesi tarafından onaylanmıştır.
Lazer Doppler ekipman aşağıda açıklanan kullanarak omurilik BF ölçme ve SCI tanıtan yordamlar yayımlanmış çalışma1' kullanılmıştır.
1. ameliyat için hazırlık
- Fentobarbital sodyum çözüm %3 (w/v) salin hazırlamak ve 35 mg/kg doz yönetmek.
Dikkat: Fentobarbital sodyum kontrollü bir madde olduğunu. Ayrıntılı kayıtları tutulmalıdır ve çözümleri güvenli, kilitli bir yerde depolanır. - Ekipman sterilize ve cerrahi alan hazırlamak.
- Temiz cerrahi ekipman ile ertesi gün merdiven: % 75 etanol sonra gecede 60 ° C fırında 30 dakika, 121 ° C'de otoklav sonra Kuru Temizleme. Cerrahi alan % 75 alkolle sterilize.
2. ameliyat için fare hazırlanması
- Mayi iğne Fentobarbital sodyum (35 mg/kg) fareyle anestezi. Tüm prosedürü cerrahi, BF ölçümleri ve dikiş dahil olmak üzere 30-40 dk sürer.
- Boynun alt sırt üzerinden fare dorsal alan tıraş. Saç olabildiğince kısa kesmek gerekir. Fareyi bir 40 ° C sabit vücut ısısını korumak için yastık Isıtma yerleştirin.
3. laminektomi ve beyin sarsıntısı için Spinal kord
Not: laminektomi sadece sahte grubu için gerçekleştirmek için 3.1-3.6 yapınız.
- Hayvan dorsal tarafta yukarı getirin. Traş bölümü ile steril pamuk topları kullanarak % 75 alkol tarafından takip iyot sterilize. Torasik vertebra T7 T11 için kapsayan laminektomi site üzerinden neşteri ile cilt kesi (4 cm) olun.
- Ekli kas her iki tarafta spinöz işlemleri, lamina ve faset eklem ortaya çıkarmak için T10 T8 kesti.
- Neşteri kavşak T10 T11 arasındaki bağlantıyı kes kesi yapmak için kullanın. Daha fazla kavşağı tarafından dikkatle uzak kemik ortaya çıkarmak için kas katmanı dissekan tarafından ortaya çıkarmak.
- Makas daha fazla kas lamina uzak ve çevresinde küçük parçalar ile Transpediküler temizlemek için kullanın. Bu-ecek açık vertebra, T10 T11 arasında küçük bir boşluk (Şekil 1A). Yavaşça ve kibarca bir kan durdurucu sargı forseps bu boşluğu yerleştirin ve Transpediküler (Şekil 1B) kesin. Forseps eğriliği her zaman yanal, kordon uzakta konumlandırılmış emin olun. Diğer tarafta tekrarlayın.
- Omurilik (Şekil 1 c) açığa ve çýkýntýdan ve lamina kırmak. Herhangi bir ücretsiz veya çentikli kemik parçaları geride değil emin olun.
- Daha fazla T9 ve T8 lamina kaldırmak için işlemi yineleyin.
- Hayvan Impactor ekipman tabloya git ve hayvanın omurga üzerinde spinöz proses T7 ve T11 sıkma tarafından stabilize etmek için tabloya bağlı Adson forseps çifti kullanın, sonra forseps (Şekil 1 d) omurga düzeltmek için ayarlamak.
- Hayvanın Impactor altında grev çubuk maruz spinal kord ortasına nişan al ve içinde 3-5 mm ve yüzey spinal kord için rod indirin.
- Darbe kuvveti gibi etkisi parametrelerini ayarlamak (160 KD) ve bekleme süresi (1 s)
- SCI yazılım arayüzü "Deney Başlat" butonuna basarak neden sonra "Evet" etkisi otomatik olarak başlatmak için aşağıdaki arabirime'i tıklatın. Darbeden sonra yazılım etkisi parametrelerini yanındaki gerçek verileri görüntülemek, bu ayar noktası (Şekil 1E) yakın oldu emin olmak için verileri kontrol et.
Not: Deney başarısı için tipik bir işaret istemsiz kuyruk swing ve bacak hareketi kısa bir süre sonra etkisi oldu. Kuyruk uyaranlara uzuv yansıma için kontrol için de yapılabilir. Ancak, Basso, Beattie ve Bresnahan (BBB) lokomotor ölçek22,23 gibi lokomotor değerlendirme indüklenen yaralanma etkinliğini belirlemek gereklidir.
- SCI yazılım arayüzü "Deney Başlat" butonuna basarak neden sonra "Evet" etkisi otomatik olarak başlatmak için aşağıdaki arabirime'i tıklatın. Darbeden sonra yazılım etkisi parametrelerini yanındaki gerçek verileri görüntülemek, bu ayar noktası (Şekil 1E) yakın oldu emin olmak için verileri kontrol et.
4. lazer Doppler tarama
- Bu çalışmada kullanılan lazer Doppler tarayıcı ayrıntıları için Malzemeler tablo görmek. Maruz spinal kord taramak için fare dorsal tarafta siyah, yansıtıcı olmayan arka plan üzerine yerleştirin.
- Tarama parametrelerini ayarlayın: Tarama yazılımı açın, "ölçü" ölçüm grafik kullanıcı arayüzü girmek ve tarayıcı kurulum arabirimini açmak için "Tarayıcı Kur" butonuna tıklayın. Küçük alanlarda olduğu gibi bu deney böyle inceden inceye gözden geçirmek için yüksek çözünürlüklü (256 × 256 puan 4 × 10 cm2kapsayan) "Tarama boyutu ve görüntü seçenekleri altında" iyi bir tarama modu için "yüksek çözünürlük" seçin (Şekil 2A). Tarama parametreleri (Şekil 2B) kontrol etmek için "Görüntü Tara" seçeneğini tıklatın.
- Canlı video görüntüsünün kontrol etmek için "Video ve mesafe" seçeneğine tıklayın. Tarayıcı pozisyon 10-13 cm yukarıda cerrahi pencere ve hareket hayvan ile arka plan merkezi maruz spinal kord tarama penceresinde (Şekil 2C).
- "Otomatik uzak" fonksiyonu iyi tarama yüksekliğini Ayarla, tarama yükseklik deneyde Şekil 2Ctüm ölçümler arasında tutarlı tutulmalıdır Not için kullanın.
- Nonreflective bir kapak ile bir pencere daha fazla arka plan en aza indirmek ve hayvanın yön işaretlemek için sadece cerrahi alan göstermek için kullanın.
- "Tekrar tarama üzerinde" tıklayın, inceden inceye gözden geçirmek (Bu durumda 8 tekrar taramaları kullanın) sayısını ayarlamak ardından tekrar tarama arabirimini açmak için "Tamam". Taramayı başlatmak için Başlat'ı tıklatın ve tüm süreç yaklaşık 3-4 dk (Şekil 2B) alacak.
5. lazer Doppler izleme
- Biz zaman içinde VP3 künt iğne sonu teslim sonda monitör BF ve SO2 ile bir tarayıcı monitör kullanılır. Lazer Doppler sonda dikey izleme ekipmanları ayarlamak için stereotaksik bir enstrüman için ekleyin.
- Stereotaksik aparatı dorsal tarafta sıçan kaldıralım, strafor maruz spinal kord seviyeye gerektiğinde küçük bir parça ile hayvan altına koymak.
- Sonda omurilik monitöre BF için indirin.
Not: Adım 5,3 olarak veri okuma sonda için uygulanan basınca duyarlı ölçüm tekrarlanabilirlik için çok önemlidir, bu nedenle ilave dikkat değil bitti - veya altında - position için sonda gereklidir.- Belgili tanımlık kesme inceleyin ve herhangi bir aşırı sıvı veya kan bir steril pamuk yastık kullanarak kaldırın.
- 2 mm maruz omurilik Merkezi noktasına rostral sonda bulmak için cihaz'ın X ve Y ekseni kullanın veya lezyon işaret ve orta ven kaçının.
- Yavaşça sonda sadece omurilik yüzeyine dokunmadan düzeye düşürmek için Z ekseni kullanın. Sonda sadece omurilik çok gevşek irtibat noktası taraftan kaçmayı herhangi bir parlak ışık izin vermek için ama yüzeye dokunun.
-
Veri kaydı
- Veri toplama yazılımı açıkken, Kur arabirimini açmak için "deney yeni" düğmesini tıklatın. "Genel" seçeneği altında kontrol için sistem yapılandırma ve tıkırtı "En yakın" (Şekil 3A), görüntü kurulumunda BF için kanalı seçin ve SO2 ve "İleri" (Şekil 3B)'yi tıklatın.
- Dosya bilgileri girin ve "ileri" veri kayıt arabirimi girin, kayıt veri sonda (şekil 3D) başlatmak için yeşil üçgen düğmesini tıklayın (Şekil 3 c)'yi tıklatın.
- Sinyal istikrarlı, kayıt veri 8 ardışık min için bir kez. O zaman soruşturma kaldırın ve hayvan çıkarmak--dan belgili tanımlık kesme dikiş ve hayvan ameliyat sonrası bakım altına koymak için stereotaksik aparatı.
6. dikiş ve sonrası işlem bakım
- Belgili tanımlık kesme dikiş: kas belgili tanımlık kesme her iki tarafında bir dikiş iğne yerleştirin. Dokular birlikte çekerek, böylece kaldırılan lamina yerinde maruz omurilik kapsayan iplik aracılığıyla, çek. İğne bağı kullanarak, formu aracılığı ile tüm iplik üç kare knot çekin ve deniz mili mümkün olduğunca yakın olarak iplik trim.
- Belgili tanımlık kesme dikiş olarak aynı şekilde 3-4 kare knot ile deri dikiş, sonra konu yaklaşık 1 cm düğümleri üzerinden trim.
- Cerrahi sitesi ve kafes alt arasında temas kaçınarak kendi tarafında onun kafes içinde fare yerleştirin. Kafesleri yastıkları ısıtma üzerinde yer almalıdır.
- Hayvan ameliyat sonrası kanama yok emin olmak için anesteziden uyanır ve dikiş kapalı kalması kadar izlemek.
- Subkutan Benzil penisilin sodyum köstebeğiyle cerrahisi, 120 mg/kg / gün 3 gündür enjekte et. İntraperitoneally buprenorfin (0,05 mg/kg) hemen ameliyat ve ameliyat sonrası her 6 saat sonra 1 gün için enjekte et.
- Hayvanlar için yeterli yiyecek ve su erişiminiz olduğundan emin olmak için su şişeleri genişletilmiş bardak uçları ile uygun ve gıda hayvan yakın koyarlar.
Not: Biz bu nedenle hayvan tarafından indüklenen yaralanma felç oldu sağlanması BBB Derecelendirme Ölçeği 0 üzerinde bir BBB skor hayvanlarla dışlamak için hayvan 24 saat sonrası yaralanma hindlimb lokomotor işlevini değerlendirmek için yapılan. - Ameliyat sonrası idrar kesesi el ile boş hafifçe basınç karnına günde iki kez uygulayarak gerekirse verin.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
LDPI omurilik kaudal rostral ekseni boyunca doğrusal profilleri (Şekil 4) ayıklayarak sayısal spinal kord BF ölçmek için kullanıldı. Şekil 5A ve Şekil 5B akı görüntüleme omurilik sham grubu ve SCI grubu, sırasıyla temsil eder. Şekil 5C ve Şekil 5 d değiştirmek aşağıdaki sonuçlara yolaçabilir BF sham grubu ve SCI grubu, spinal kord kaudal rostral ekseni boyunca sırasıyla temsil eder. Şekil 5A ve Şekil 5B karşılaştırma SCI BF, azalma indüklenen gösterdi ve Merkez üssü BF rostral kordon ve kaudal kablo düşük.
Yani2 ve Şekil 6 resimli edinme ve LDPM veri işleme ve LDPM saat-alan LD sinyal gösterdi. Verileri kaydedildi sonra sürekli faiz bölge (ROI) veri bir 8 dk streç, hangi sonra yerleşik bir filtre tarafından filtre herhangi bir biyolojik olmayan sinyalleri en aza indirmek için seçildi. Daha sonra yatırım getirisi istatistiksel analiz edildi ve sonuçları bir ham veri formatında ihraç. Şekil 7 kaydedilen BF periyodik varyasyonu ve SO2 zaman sahte grubu ve SCI grubu içinde. Şekil 7Aiçinde gösterildiği gibi önemli ölçüde azalmıştır SCI grup spinal kord BF sham grubuyla karşılaştırıldığında. Aynı anda, SO2 omurilik yaralanma sonra BF değişikliği ile tutarlı olan omurilik beyin sarsıntısı (Şekil 7B), sonra son derece düşüktü. Rahatsızlık azaltmak için ölçümleri art arda alınmış ve verileri normalleştirilmiş.
Şekil 1. Laminektomi ve omurga için sarsıntı. (A) T10 T11 arasındaki kavşak çıkarın. (B) Transpediküler kırmaya forseps yerleştirin. (C) lamina Break ve omuriliğe bulaşmasına neden. (anatomi şematik kroki) (D) omurga üzerinde deney tablo Stabilize. (E) yazılım ve kontrol verileri kullanarak ilk etki. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 2. Lazer Doppler taramak için adım adım Kur. (A) tarama için genel kurulum. (B) arabirimi için görüntü tarama parametreleri ayarlayın. (C) video ve mesafe arabirimi kurulum. (D) için tekrar tarama arabirimi kurulum. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 3. Lazer Doppler izlemek için adım adım Kur. (A) yeni bir deneme başlayın. (B) kanal görüntüsü seçin. (C) konu ayrıntıları girin. (D) veri kaydını Başlat seçimini yapın. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 4. Lazer Doppler perfüzyon görüntüleme işlemi. (A) 8 sürekli sahte grubundaki fareleri tarayarak türetilmiş tarar. (B) sürekli taramalar ortalama görüntüsü. (C, D) Bölge faiz (ROI) kızılötesi görüntü dayalı omurga merkezi eksen boyunca yoğunluk profil ayıklamak için seçildi. İç metin kutusu ROI profil oluşturma sonucunu gösterir. Renk çubuğunu perfüzyon birimleri burada mavi en düşük değerini temsil eder ve kırmızı en yüksek değeri gösterir Doppler tarayıcı lazer tarafından ölçülen belirtti. Araç perfüzyon yani "flux" göreli değeri algıladı. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 5. BF omurilik lazer Doppler perfüzyon Imaging'i kullanma algılandı. (A, B) 5 mm ROI omurga eksen boyunca akı haritada rostral kaudal kordon çizilmiştir. (C, D) Her yatırım getirisi spinal kord ekseni üzerinde ortalanmış bir çizgi boyunca yoğunluk profilini miktar için ayıklandı.
Şekil 6. Lazer Doppler perfüzyon izleme işlemi. (A) ham veri nerede zaman işaretçiyi başlangıç noktası belirtilen kayıt. Bir 8 dk ROI (B) seçimi. (C) seçili veri sonra yerleşik bir filtre tarafından filtre. (D) istatistiksel analiz Roi. (E) ham veri verme. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 7. Spinal kord perfüzyon değerlendirilen lazer Doppler perfüzyon izleyerek. Sham grubu ve SCI grubu ham kan akışı çıktısı örneği (A) A 15 s. Sham grubu ve SCI grubu ham oksijen doygunluğu çıkışının (B) A 15 s örnek. Lazer Doppler sonda 2 mm orta noktasına rostrally omurilik yüzeye merkezi ven sağ tarafında üstünde düzeyinde yerleştirildi. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Bir kaç detay bu protokolü gerçekleştirirken fark. İlk olarak, anestezi ve cerrahi işlem olarak hızlı ve zarif hayvan için tanıtılan stres en aza indirmek için mümkün olduğunca yapılmalıdır. Rahatsızlık sonuçlarını azaltmak için nispeten sakin ve kararlı bir durumda hayvan tutmak. İkinci olarak, kan potansiyel ile okuma engelleyebilir beri lazer Doppler, kullanýlýyor ölçüm sırasında kanama için daha fazla dikkat edilmeli. Son olarak, veri kayıt sırasında hayvanlar tutarsız sonuçlar sıcaklık farkı tarafından neden kaçınarak bir sıcaklık kontrollü ortamda tutulmalıdır.
Araştırmacılar lazer Doppler tarama kullanırken düşünmelisiniz çeşitli faktörler önemli. İletişim kuralı'nda belirtildiği gibi tarama mesafe karşılaştırılabilir sonuçlar için deney boyunca tutarlı tutulmalıdır. Küçük alanlar için yüksek çözünürlüklü çoklu tarama ile BF güvenilir veri üretmek için öneririz. Ayrıca, steril bir gazlı bez ile a küçük pencere sadece daha fazla arka plan en aza indirmek için omurga açığa cerrahi alanı kapsayan hayvan işaretli yönünü ile koyarak öneririz.
Sonda konumlandırma uyum ve uygulama izleme Protokolü kritik unsurlardan biridir. Sonda ölçülen yüzeye dik olmalı ve aşırı baskı-meli var olmak kaçmak. Bu hedefe ulaşmak için fare omurga olmalı doğruldu ve gerekirse, strafor ile hayvan underlaying tarafından tesviye ve sonda cihaz kullanarak yerleştirilmiş olmalıdır ve emin ölçümleri yapmak için koordinatları kabaca aynı alandan alınır.
Bizim önceki madde1' de açıklandığı gibi kalibrasyon mutlak akışını ve hareket artefaktı24duyarlılık sakatlık gibi bu teknoloji bazı sınırlamalar vardır. Başka iyi fark sınırlama biyolojik sıfır sinyal-diğer bir deyişle, sinyal BF25,26olmadan varlığı olduğunu. Bu sınırlamalar sonuçlarına etkisi en aza indirmek için ölçüler art arda alınmalı ve normalleştirme rahatsızlık azaltmak için önerilir.
Radyoaktif microsphere tekniği ve Doppler Ultrason tekniği gibi diğer teknikleri BF ölçüm için geliştirilmiştir. Ancak, eski gerçek zamanlı olarak radyoaktif bir madde içine kan enjekte olmalı ve doku için ölçüm27eksize gerekiyor beri değil. Gelişmiş kontrast teknolojisi gelince LDF gibi non-invaziv, kontrast Aracısı (microbubbles) intravenöz enjekte olmalı ve kateterizasyon Şah veya femoral tutarlı difüzörü infüzyon için gereklidir, ancak ultrason görüntüleme 28. bu teknikleri ile karşılaştırıldığında, LDF non-invaziv dokusunun microcirculatory akı ölçme yeteneğine sahip.
LDF sinyalleri zaman ve frekans farklı özelliklerini oluşur. Bu özellikler yakalamak için dalgacık analizi ve fourier analizi yöntemleri periyodik frekans dalgalanmaları29,30ortaya çıkarmak için uygulandı. Bu titreşimler tecelli etkisi kalp beat, solunum, vasküler düz kas içsel myogenic etkinliği, gemi Duvar ve endotel ilgili metabolik aktivite31,32nörojenik faaliyete. Klinik uygulamalar ve temel araştırma, LDF sadece BF sinyaller elde edemiyor ama aynı zamanda mikrovasküler BF değerlendirilmesi hangi mikrovasküler bozukluğu ve daha genel olarak, patogenezi araştırmak bir platform sağlayabilir mikrovasküler hastalığı.
Mevcut çalışmada, BF omurilik içinde değerlendirmek için LDF her iki Yöntem uygulandı. LDPI veri çevresini perfüzyon genel bir bakış verdi ve farklı yerlerde BF karşılaştırmalı analizi gerçekleştirmek mümkün kılan BF, coğrafi dağılımı sağlanır. Yoğun problama alan zamanla ölçerek, LD izlenmesi dan alınan verileri daha ayrıntılı bir açıklama spektrum gibi ayrıntılı analizler ve dalgacık analizi, BF alanında daha derin bir anlayış kazanmak için izin yerel kan akımı sağlanan , umut verici bir gelecek araştırma konusu olan.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Yazarlar ifşa gerek yok.
Acknowledgments
Yazarlar hiçbir katkıda bulunanlar var.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Laser Doppler Line Scanner | Moor Instruments | moorLDLS2 | |
| Laser Doppler Monitor | Moor Instruments | moorVMS-LDF | |
| Probe for Monitor | Moor Instruments | VP3 | Blunt needle end delivery probe |
| Impactor | Precision Systems and Instrumentation | IH-0400 | |
| Phenobarbital sodium | Sigma-Aldrich | P3761 | |
| Buprenorphine | Sigma-Aldrich | B-908 | |
| Syringe | Becton Dickinson Medica (s) Pte.Ltd | 300841 | |
| Surgical suture needles with thread | Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd | 18T0329 (batch number) /4-0 | |
| Scalpel | Operation instrument factory of Shanghai Medical Instrument Co., Ltd. | J11030 4# | |
| Scalpel blade | Operation instrument factory of Shanghai Medical Instrument Co., Ltd. | J12130 20# | |
| Ophthalmic forceps | Operation instrument factory of Shanghai Medical Instrument Co., Ltd. | JD1040 | |
| Hemostatic forceps | Operation instrument factory of Shanghai Medical Instrument Co., Ltd. | J31050 | |
| Benzyl penicillin sodium | North China Pharmaceutical Co., Ltd | F6072116 (batch number) | |
| 75% alcohol | Dezhou Anjie Gaoke disinfection products Co., Ltd | 150421R (batch number) | |
| Iodine | Shandong Lierkang Medical Technology Co., Ltd | 20170102 (batch number) | |
| Rat | Laboratory Animal Center, The Academy of Millitery Medical Sciences | Sprague-Dawly (rat strain) |
References
- Jing, Y. L., Bai, F., Chen, H., Dong, H. Meliorating microcirculatory with melatonin in rat model of spinal cord injury using laser Doppler flowmetry. Neuroreport. 27 (17), 1248-1255 (2016).
- Jing, Y. L., Bai, F., Chen, H., Dong, H. Melatonin prevents blood vessel loss and neurological impairment induced by spinal cord injury in rats. J Spinal Cord Med. , 1-8 (2016).
- Han, S., et al. Rescuing vasculature with intravenous angiopoietin-1 and alpha v beta 3 integrin peptide is protective after spinal cord injury. Brain. 133 (Pt 4), 1026-1042 (2010).
- Gerzanich, V., et al. De novo expression of Trpm4 initiates secondary hemorrhage in spinal cord injury. Nat Med. 15 (2), 185-191 (2009).
- Phillips, J. P., Cibert-Goton, V., Langford, R. M., Shortland, P. J. Perfusion assessment in rat spinal cord tissue using photoplethysmography and laser Doppler flux measurements. Journal of Biomedical Optics. 18 (3), 037005 (2013).
- Garcia-Lopez, P., Martinez-Cruz, A., Guizar-Sahagun, G., Castaneda-Hernandez, G. Acute spinal cord injury changes the disposition of some, but not all drugs given intravenously. Spinal Cord. 45 (9), 603-608 (2007).
- Brown, A., Nabel, A., Oh, W., Etlinger, J. D., Zeman, R. J. Perfusion imaging of spinal cord contusion: injury-induced blockade and partial reversal by β2-agonist treatment in rats. Journal of Neurosurgery-Spine. 20 (2), 164-171 (2014).
- Olive, J. L., McCully, K. K., Dudley, G. A. Blood flow response in individuals with incomplete spinal cord injuries. Spinal Cord. 40 (12), 639-645 (2002).
- Yamada, T., et al. Spinal cord blood flow and pathophysiological changes after transient spinal cord ischemia in cats. Neurosurgery. 42 (3), 626-634 (1998).
- Gordeeva, A. E., et al. Vascular Pathology of Ischemia/Reperfusion Injury of Rat Small Intestine. Cells Tissues Organs. , (2017).
- Liu, M., et al. Insulin treatment restores islet microvascular vasomotion function in diabetic mice. J Diabetes. , (2016).
- Drain, L. The laser Doppler technique. , Wiley, USA. (1980).
- Rajan, V., Varghese, B., van Leeuwen, T. G., Steenbergen, W. Review of methodological developments in laser Doppler flowmetry. Lasers Med Sci. 24 (2), 269-283 (2009).
- Dohare, P., et al. The neuroprotective properties of the superoxide dismutase mimetic tempol correlate with its ability to reduce pathological glutamate release in a rodent model of stroke. Free Radic Biol Med. 77, 168-182 (2014).
- Bai, H. Y., et al. Pre-treatment with LCZ696, an orally active angiotensin receptor neprilysin inhibitor, prevents ischemic brain damage. Eur J Pharmacol. 762, 293-298 (2015).
- Vertiz-Hernandez, A., et al. L-arginine reverses alterations in drug disposition induced by spinal cord injury by increasing hepatic blood flow. J Neurotrauma. 24 (12), 1855-1862 (2007).
- Garcia-Lopez, P., Martinez-Cruz, A., Guizar-Sahagun, G., Castaneda-Hernandez, G. Acute spinal cord injury changes the disposition of some, but not all drugs given intravenously. Spinal Cord. 45 (9), 603-608 (2007).
- Li, Z., et al. Post pressure response of skin blood flowmotions in anesthetized rats with spinal cord injury. Microvasc Res. 78 (1), 20-24 (2009).
- Boyle, N. H., et al. Scanning laser Doppler is a useful technique to assess foot cutaneous perfusion during femoral artery cannulation. Critical Care. 3 (4), 95-100 (1999).
- Emmanuel, A. V., Chung, E. A. L., Kamm, M. A., Middleton, F. Relationship between gut-specific autonomic testing and bowel dysfunction in spinal cord injury patients. Spinal Cord. 47 (8), 623-627 (2009).
- Sheu, J. J., et al. Combination of cilostazol and clopidogrel attenuates rat critical limb ischemia. J Transl Med. 10, 164 (2012).
- Basso, D. M., Beattie, M. S., Bresnahan, J. C. Graded histological and locomotor outcomes after spinal cord contusion using the NYU weight-drop device versus transection. Experimental Neurology. 139 (2), 244-256 (1996).
- Basso, D. M., Beattie, M. S., Bresnahan, J. C. A Sensitive and Reliable Locomotor Rating-Scale for Open-Field Testing in Rats. Journal of Neurotrauma. 12 (1), 1-21 (1995).
- Oberg, P. A. Tissue motion--a disturbance in the laser-Doppler blood flow signal? Technol Health Care. 7 (2-3), 185-192 (1999).
- Tenland, T., Salerud, E. G., Nilsson, G. E., Oberg, P. A. Spatial and temporal variations in human skin blood flow. Int J Microcirc Clin Exp. 2 (2), 81-90 (1983).
- Kernick, D. P., Tooke, J. E., Shore, A. C. The biological zero signal in laser Doppler fluximetry - origins and practical implications. Pflugers Arch. 437 (4), 624-631 (1999).
- Rudolph, A. M., Heymann, M. A. The circulation of the fetus in utero. Methods for studying distribution of blood flow, cardiac output and organ blood flow. Circ Res. 21 (2), 163-184 (1967).
- Dubory, A., et al. Contrast Enhanced Ultrasound Imaging for Assessment of Spinal Cord Blood Flow in Experimental Spinal Cord Injury. Jove-Journal of Visualized Experiments. (99), e52536 (2015).
- Kuliga, K. Z., et al. Dynamics of Microvascular Blood Flow and Oxygenation Measured Simultaneously in Human Skin. Microcirculation. 21 (6), 562-573 (2014).
- Li, Z. Y., et al. Post pressure response of skin blood flowmotions in anesthetized rats with spinal cord injury. Microvascular Research. 78 (1), 20-24 (2009).
- Muck-Weymann, M. E., et al. Respiratory-dependent laser-Doppler flux motion in different skin areas and its meaning to autonomic nervous control of the vessels of the skin. Microvasc Res. 52 (1), 69-78 (1996).
- Stefanovska, A., Bracic, M., Kvernmo, H. D. Wavelet analysis of oscillations in the peripheral blood circulation measured by laser Doppler technique. Ieee Transactions on Biomedical Engineering. 46 (10), 1230-1239 (1999).
