Summary
وهدف البروتوكول هو إعداد هيدروليساتي الكيراتين من ريش الدجاج بالتحلل المائي القلوي الانزيمية، واختبار ما إذا كانت إضافة هيدروليساتي الكيراتين إلى مستحضرات تجميل مرهم قاعدة يحسن وظيفة حاجز الجلد (زيادة ترطيب و تقليل فقدان المياه الخسارة). ويتم إجراء اختبارات على الرجل والمرأة المتطوعين.
Abstract
الكيراتين البروتينات (خس) هي المكونات القياسية المتبعة في الشعر مستحضرات التجميل. فهم آثار ترطيب خ مفيد للعناية بالبشرة مستحضرات التجميل. وأهداف البروتوكول: (1) لمعالجة ريش الدجاج إلى خ بالتحلل المائي القلوي الانزيمية وتنقية ذلك بالغسيل الكلوي و (2) اختبار ما إذا كانت إضافة خ إلى قاعدة مرهم (OB) يزيد من ترطيب الجلد ويحسن وظيفة حاجز الجلد بتقليص فقدان فقدان الماء (تول). أثناء التحلل القلوي الانزيمية المحتضنة الريش هي أولاً في درجة حرارة أعلى في بيئة قلوية، ومن ثم، تحت ظروف معتدلة، تحلل مع إنزيم proteolytic. هو دياليزيد في حل خ، فراغ المجفف، ويطحن إلى مسحوق ناعم. يتم إعداد مستحضرات التجميل تتألف من النفط في المياه مستحلب (O/W) الذي يحتوي على 2، 4، و 6% من الوزن من خ (استناداً إلى وزن المكشوف). خصائص ترطيب خ هو إجراء الاختبار على 10 رجال و 10 نساء في فترات زمنية من تركيبات اختبار 1، 2، 3، 4، 24، وحاء 48 تنتشر في مواقع الدسم الساعد فولار. ويتم تقييم ترطيب الجلد من الطبقة القرنية (SC) بقياس سعة الجلد، والذي أحد الأساليب المستخدمة وبسيطة أكثر على نطاق العالم. تول يستند إلى قياس كمية المياه التي تنقل الواحدة على منطقة محددة والفترة الزمنية الممتدة من الجلد. كلا الأسلوبين تماما غير الغازية. خ يجعل لانسداد ممتازة؛ اعتماداً على إضافة خ في الحريق المكشوف، أنه يجلب تخفيض 30% في تول بعد التطبيق. خ يعمل أيضا هوميكتانت، كما أنها تربط بين المياه من الطبقات السفلي من البشرة لاتفاقية استكهولم؛ في إضافة خ الأمثل في المكشوف، تصل إلى ارتفاع 19% في الماء في الرجال و 22% ارتفاعا في النساء يحدث.
Introduction
المجازر، وصناعة الأغذية، وصناعة الدباغة سنوياً تنتج كميات هائلة من النفايات الصلبة الكيراتين – الصوف، الريش، شعيرات، والحوافر، ومخالب، الأبواق، وما شابه. ووفقا لأحدث البيانات الإحصائية، يعيش إجمالي وزن الدجاج والديك الرومي والبط وسائر الدواجن المذبوحة في الولايات المتحدة 62.5 بیلیون جنيه استرليني في السنة1؛ وفي الاتحاد الأوروبي من حوالي 28.7 بیلیون جنيه في السنة. وبالنظر إلى أن الريش تصل إلى 8.5 في المائة الوزن الإجمالي الدواجن، تنتج الولايات المتحدة وحدها سنوياً جنيه 5.3 بیلیون تقريبا من النفايات الريش2.
الكيراتين هو بروتين العارضة مقاومة كيميائية عالية لأنها cross-linked بشدة مع ثنائي كبريتيد الجسور التي تجعل معالجة به أمرا صعباً. ويتطلب الحصول على المنتجات القابلة للذوبان ناهضة متقاطعة وربما القيام بالتحلل المائي ل السندات ببتيد3. الانقسام والجسور ثنائي كبريتيد قد المضي قدما من خلال رد فعل شاردة ثيول وفقا للنمط التالي4،5:
S– + – Sبقج– ↔ – Sب– + – ققج–
مع درجة حموضة عالية جداً، التحلل الجسور ثنائي كبريتيد كما يظهر، وفقا لنمط6
[س] –– + يا– ← – S– – سوه
تحت ظروف معتدل (درجة الحموضة 8 تقريبا)، حتى سولفيتوليسيس تجري وفقا للنمط التالي:
– د – + هسو ←3– – ش + – SSO3–
هو الطريقة الأكثر اقتصادا المهينة الكيراتين لانهيار الميكروبية، التي تتسم بظروف رد فعل معتدل أثناء التجهيز وعالية انهيار الكفاءة (حوالي 90%)7،8. كيراتيناسيس تنتجها بعض أنواع البكتيريا المعزولة من التربة والكراتين النفايات9. كيراتيناسيس الميكروبية يتحلل هياكل الكيراتين جامدة و cross-linked بقوة10 وخ الناتجة التي أعدت وغنية بالبروتينات القابلة للذوبان، مع أي خسارة في الأحماض الأمينية الأساسية التي اكتشفت في ذلك11.
بغية إدراج بروتين في مستحضرات التجميل (مثلاًوالمستحلبات والمحاليل والمواد الهلامية)، المتطلبات ضمان أن هذه البروتينات القابلة للذوبان في الماء ونظم معينة تتسم بالشفافية، وهو تجنب أن إعادة التجميع من الببتيدات المقرر أن التفاعلات مسعور. ولذلك، ممارسة شائعة لتطبيق البروتينات البروتينات، مثل تحلل الكولاجين والايلاستين والكيراتين. عند إضافة البروتينات إلى المستحلبات التجميلية، اتخاذ خطوات لضمان أن هيدروليساتي هو أول المذابة في الماء. وفي بعض الحالات، من المستحسن أن البروتين (أو هيدروليساتي) قابل للذوبان في الكحول أو المذيبات العضوية الأخرى12.
خ عادة ظهرت في الشامبو ومكيفات الهواء، والمحاليل والأمصال المغذية للشعر، وكذلك ماسكاراس وطلاء الأظافر ووكلاء المكياج العين. آثار خ أعلن عادة ما تشمل تشكيل فيلم واقية، تنعيم الشعر أو مسمار هيكل، اشتداد اللدونة ومظهر لتشكيل المعالجة، تنظم الاتساق بين المنتجات، والتشجيع على تكوين الرغوة13 , 14-كما ثبت أن خ يقلل من التوتر السطحي، ومن ثم يمكن تيسير مكملات في مستحضرات التجميل تخفيض مبلغ مستحلب إضافة إلى استقرار الكريمات. خ الحد من آثار تهيج تشغيلها عن طريق وكلاء (التوتر السطحي) تنظيف للجلد والعينين، والشعر، وبالتالي تقليل أي آثار جانبية محتملة لتنظيف وكلاء في الأنسجة (مثلاً، جفاف الجلد وصلابة، ووظيفة الحاجز انخفض من الجلد). أيضا هو استغلال القدرة على التخزين المؤقت عالية من البروتينات لتحقيق الاستقرار في درجة الحموضة من مستحضرات التجميل؛ الببتيدات طول أقصر لها تأثير التخزين مؤقت أكبر15،16. على الرغم من أن تصبح مستقرة خس كعناصر قياسية في الشعر ومستحضرات تجميل الأظافر، فضلا عن تستخدم في منتجات للعناية بالبشرة، لا تظهر دراسات عن آثار ترطيب خ في الأدب المعاصر.
وضعت التكنولوجيا الانزيمية القلوية لتجهيز المنتجات الكيراتين إلى خ، واختبار النشط في عملية بشأن آثار عدد من إضافات تجميلية17،18،،من1920 , 21 , 22-استفادة التحلل القلوي الانزيمية مرحلتين باستخدام البروتياز الميكروبي لريش الدجاج يحقق كفاءة عالية في ظروف رد فعل معتدل ونوعية خ مرتفع جداً خلافا للتحلل المستخدمة في الأحماض القوية أو القلويات. وفي المرحلة الأولى، هي المحتضنة الريش في درجة حرارة أعلى في بيئة قلوية، مما يعطل هيكل الكيراتين جزئيا وتتضخم الريش؛ وبعد تعديل درجة الحموضة، هي تحلل الريش مع إنزيم proteolytic تحت ظروف معتدلة في المرحلة الثانية. وتمتلك خ دياليزيد على نسبة عالية من البروتينات.
أغراض الأسلوب الموصوفة هنا هي تجهيز ريش الدواجن في خ عن طريق التحلل المائي القلوي الانزيمية واختبار تأثير خصائص ترطيب من خ المطبقة على مستحلب التجميل O/W. بأساليب غير الغازية دور فعال في فيفوالتحقيق في خصائص ترطيب. وتشمل الأساليب الأكثر شيوعاً لقياس وظيفة ترطيب وحاجز الجلد لاتفاقية استكهولم قياس الخواص الكهربائية للجلد (الموصلية أو السعة). وتشمل أساليب مختلفة للتحقيق في اتفاقية استكهولم ترطيب الأسلوب تخيل متعددة الأطياف تحت الحمراء (نيم)، مطيافية الرنين المغناطيسي النووي، والتصوير المقطعي التماسك البصري، أو نقل الحراري عابر23بالقرب. وظيفة الحاجز لاتفاقية استكهولم يرتبط "تول لاتفاقية استكهولم" ويقاس بأسلوب التهوية الدائرة، والدائرة حبسوا الطريقة و طريقة الدائرة المفتوحة24.
يتم تحديد خصائص الصيغ النموذجية استخدام محول المسبار Multi 5 الآلام والكروب الذهنية مع ثلاثة أنواع من المجسات. كورنيوميتير أول واحد، 825 سم، تدابير البشرة ترطيب بتقييم التغيرات في القدرة الكهربائية لسطح الجلد؛ ويبين مكثف قياس التغيرات في سعة سطح الجلد في وحدات كورنيوميتريك. كورنيوميتير يعطي فقط بتقييم نسبي ل ترطيب الجلد25. لتول، التحقيق الثاني، تيواميتير 300 TM، يستخدم لقياس كثافة التدرج من تبخر الماء (في صك دائرة مفتوحة استناداً إلى قانون فيك للانتشار) من الجلد غير مباشر بأزواج اثنين من أجهزة الاستشعار (درجة الحرارة والرطوبة النسبية) تشير إلى كمية المياه التي يجري نقلها الواحدة على منطقة محددة وفترة زمنية (/h غم/م2). يمكن الكشف عن هذا الأسلوب حتى أدنى اضطراب الجلد الحاجز الدالة26. PH الجلد هو مؤشر واحد من الجدار ووظيفة مضادة للميكروبات من اتفاقية استكهولم27. وتم قياس حموضة عباءة الجلد بتحقيق جلد 905 الأس الهيدروجيني (ثالثة) متصل بمحطة 5 الآلام والكروب الذهنية. هذا المسبار المصممة خصيصا يتكون من قطب كهربائي مسطحة وتصدرت الزجاج لتماس الجلد بالكامل، متصلاً الفولتميتر. يقيس النظام التغييرات المحتملة بسبب نشاط الكاتيونات الهيدروجين المحيطة بطبقة رقيقة جداً من أشكال شبه الصلبة تقاس في الجزء العلوي من التحقيق. يتم عرض التغييرات في الجهد الأس الهيدروجيني28.
نقدم تجارب تنقسم إلى ثلاثة أقسام: (1) إعداد "خ" من الدجاج الريش بمرحلتين القلوية الانزيمية التحلل المائي وتنقية لها بالغسيل الكلوي (إزالة الأملاح والكسور الجزيئية المنخفضة)، (2) إعداد مستحضرات التجميل التركيبات المحتوية على 2 و 4 و 6% خ، و (3) اختبار خصائص خ بقياس البشرة ترطيب، تول، والجلد الأس الهيدروجيني. تم إجراء الاختبار على النساء 10 مع متوسط سن 27.2 والرجل 10 مع متوسط سن 26.2. طريقة اختيار المتطوعين واختبار نفسها أجريت وفقا للمبادئ الأخلاقية الدولية للبحوث الطبية الحيوية استخدام البشر29؛ وأعطى جميع الأشخاص موافقتهم المستنيرة قبل إدراجها في الدراسة. قبل الاختبار، وبدأ طلب المتطوعين لإكمال استبيان عن حالتهم الصحية. المتطوعين ملتزمة بتجنب تطبيق أي منتج مستحضرات التجميل إلى مواقع التجارب والمناطق المحيطة بها خلال 24 ساعة قبل وأثناء فترة الاختبار؛ وعلاوة على ذلك، سمح لهم فقط يغسل مساء قصيرة مع المياه الجارية.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
وتم توظيف المتطوعين بين العاملين والطلاب من الجامعة. وأجريت وفقا لطريقة اختيار "المبادئ التوجيهية الأخلاقية الدولية الطبية الحيوية البحوث إشراك البشر. مجلس المنظمات الدولية للعلوم الطبية، جنيف (2002). " خ عنصر مشترك في مستحضرات تجميل المستخدمة في المنتجات العناية بالشعر (الشامبو، ومكيفات الهواء، إلخ) ومن ثم الحصول على موافقة من مجلس المراجعة المؤسسية غير مطلوب.
1-عملية ريش الدجاج إلى خ
- جمع ريش الدجاج من مزرعة لدواجن.
- تغسل أي غير قابلة للذوبان من الشوائب وبقايا الدم من ريش الدجاج الزيادة كافية من المياه العذبة بتشغيل (الباردة). ضع الريش على لوحة مسطحة وجافة بين عشية وضحاها في 50 درجة مئوية.
ملاحظة: يمكن أن يكون مؤقتاً البروتوكول هنا. - طحن 50 ز المجففة الريش في مصنع لقطع (مناسبة للمواد عينة لينة المتوسطة الثابتة، والمواد الليفية) في صفاء نهائي من 1.0 مم. وبدلاً من ذلك، يمكن أن يكون النهائي صفاء الريش مطحون أعلى، ولكن ليس أكثر من 3.0 ملم.
ملاحظة: يمكن أن يكون مؤقتاً البروتوكول هنا. -
ديجريسى الريش
ملاحظة: يستخدم الأسلوب الأكثر فعالية واقتصادية لإزالة الشحوم ريش الدواجن إنزيم دهون تجارية.- في حاوية مرجل 27-L فولاذ المقاوم للصدأ مع التحكم في درجة الحرارة، مزيج الريش بالماء يسخن ما يصل إلى 40 ± 2 درجة مئوية في 1: نسبة وزن 75. إضافة إنزيم دهون (نشاط 100 KLU/g) بجرعة من 1.5-2.0% (المتصلة بوزنه في الريش الجاف) ولطف يقلب المحتويات مع محرض علوية لمدة 5 دقائق.
- قم بضبط ال pH الخليط إلى 9.0 ± 0.2، القيمة المقابلة لنشاط الإنزيم دهون الحد الأقصى عن طريق إضافة 1% هيدروكسيد الصوديوم أو 1% ح3ص4 الحل. يقلب الخليط لمدة 5 دقائق مع محرض النفقات عامة، وثم تحقق من إعادة ضبط مستوى الرقم الهيدروجيني باستخدام مقياس الأس الهيدروجيني/mV مقاعد البدلاء مختبر.
- يحرك الخليط بلطف مع محرض النفقات عامة عن 24 ساعة عند 40 ± 0.5 درجة مئوية. وبدلاً من ذلك، احتضان المخلوط في 40 ± 0.5 درجة مئوية، وخلال ح 6 الأولى من الحضانة يقلب المحتويات فترات ح 1.
- تصفية الخليط من خلال غربال غرامة (100 ميكرومتر الحجم) وتغسل الريش ديجريسيد مع تيار مياه العذبة بتشغيل (الباردة). جاف الريش على لوحة مسطحة عند 50 درجة مئوية في غرفة تجفيف بين عشية وضحاها.
ملاحظة: يمكن أن يكون مؤقتاً البروتوكول هنا.
- تنفيذ المرحلة الأولى من التحلل ريش الدجاج. مزيج الريش مع محلول المياه كوه 0.3% في وزن نسبة 01:50 ويقلب بلطف مع محرض النفقات عامة في 60 ± 0.5 درجة مئوية ح 24. الرقم الهيدروجيني للمخلوط يقلل من 12.5 تقريبا في البداية الحضانة إلى 11.0 تقريبا في نهاية الحضانة. بعد الانتهاء من المرحلة الأولى من التحلل، ضبط الأس الهيدروجيني المخلوط إلى الرتبة المقابلة لأقصى نشاط إنزيم proteolytic مع 10% ح3ص4 (في هذه الحالة، إلى مستوى من 9.0 ± 0.2) بإضافة 1% هيدروكسيد الصوديوم.
- تنفيذ المرحلة الثانية من التحلل ريش الدجاج. إضافة إلى الخليط، إنزيم proteolytic في جرعة من 5.0 في المائة (ذات الصلة بالمادة الجافة من كمية الريش وزنه في بداية المرحلة الأولى من التحلل المائي). بلطف إثارة مع محرض النفقات عامة في 60 ± 0.5 درجة مئوية ح 8 ثم تسخين المزيج (في نفس الحاوية المرجل 27-L الفولاذ المقاوم للصدأ) إلى نقطة الغليان (100 درجة مئوية) ويغلي لمدة 10 دقائق لإلغاء تنشيط الإنزيم.
- فصل حل خ (إعداد في الخطوة 1، 6) من بقايا أونديسولفيد بالترشيح فإنه من خلال الكثافة تصفية ورقة بشأن قمع بوخنر مع ضغط فراغ طفيف؛ وبدلاً من ذلك، استخدم أجهزة الطرد مركزي.
ملاحظة: البروتوكول يمكن أن يكون مؤقتاً هنا لعدة أيام إذا كانت مخزنة في 5 ± حل خ 1 درجة مئوية. - في دلو بلاستيكي (26 سم قطرها x 26 سم ارتفاع) دياليزي خ استخدام الغشاء موكو 12 ك لإزالة الببتيدات الصغيرة والأملاح. صب 400 مل الحل خ في أنابيب الغسيل الكلوي ودياليزي أنها ضد 4 لتر ماء المقطر ح 80 في درجة حرارة الغرفة؛ تغيير الماء المقطر بعد 18 و 36 و 60 ح.
- يلقي حلاً دياليزيد من خ على صفيحة لاصقة المضادة (مثلاً، السيليكون) بنسبة 500 مل للمنطقة لوحة2 سم 1,000، فراغ الجافة على طبقة رقيقة في 40 ± 0.5 درجة مئوية لبين عشية وضحاها، وطحن على شكل مسحوق ناعم، وإبقائه في وعاء مغلق في مجفف.
ملاحظة: البروتوكول يمكن أن يكون مؤقتاً هنا لعدة أشهر إذا تم تخزين المسحوق خ في مكان جاف.
2-إعداد مستحضرات التجميل مع خ
ملاحظة: OB المستخدمة لاختبار قاعدة O/W كريم ماء تجارية وتتألف من أكوا، البارافين، سائل البارافين، ستيريل الكحول، 4 لاوريث، هيدروكسيد الصوديوم، كاربومير، ميثيلبارابين، وبروبيلبارابين.
- إعداد التركيبات المحتوية على 2 و 4 و 6% خ (وفقا لقاعدة وزن المرهم). وزن كمية مسحوق خ داخل وعاء البولي إثيلين (7 سم قطرها x 10 سم ارتفاع) وإضافة المكشوف في مبلغ الذي يضمن الوزن الكلي للصياغة يساوي 50 غ؛ انظر وصفه في الجدول 1.
| وضع مستحضرات التجميل | وزن مرهم قاعدة [ز] | الوزن من الكيراتين هيدروليساتي [ز] | الوزن الإجمالي [ز] | |||||
| قاعدة مرهم | 50 | 0 | 50 | |||||
| مرهم قاعدة + 2 ٪ خ | 49 | 1 | ||||||
| مرهم قاعدة + 4 ٪ خ | 48 | 2 | ||||||
| مرهم قاعدة + 6% خ | 47 | 3 | ||||||
الجدول 1: الوزن بكميات من مرهم هيدروليساتي الكراتين وقاعدة لإعداد مستحضرات التجميل.
- مجانسة الخليط خلاط مختبر 3 البيضاء لمدة 10 دقيقة في س 134.16 ز ومحرض علوية ميكانيكية استخدام مزيج. الحفاظ على الصيغ المعدة في 5 ± 1 درجة مئوية والحارة لهم في درجة حرارة الغرفة ل 2 ح قبل الاستخدام.
ملاحظة: المجانسة الخليط من الحريق المكشوف مع خ يمكن القيام به مع محرض غير الرقمية، وكذلك. في محرض غير الرقمية، هناك جداول بسرعة التقريبي (بلفة في الدقيقة) كذلك. وستعمل التحريك اللطيف أفضل لهذه الخطوة.
ملاحظة: البروتوكول يمكن أن يكون مؤقتاً هنا لمدة تصل إلى 5 أشهر إذا كانت الصياغات مخزنة في 5 ± 1 درجة مئوية.
3-اختبار "خصائص خ" بقياس ترطيب الجلد، وتول، ودرجة الحموضة
ملاحظة: إجراء جميع القياسات في غرفة مكيفة في 23 ± 2 درجة مئوية والرطوبة النسبية من 56 ± 3%.
- 5 مكان شرائط من ورق الترشيح (حجم 2 × 4 سم) إلى حل الفسيولوجية (0.90% كلوريد الصوديوم) وتركها لمدة 1 دقيقة تقريبا في الحل.
- تطبيق الشريطين على الجانب الداخلي للساعد الأيمن، وثلاثة للجانب الداخلي من ذراعه اليسرى، وإصلاحها ح 4 مع اللصقات لاصقة. هذه الخطوة هي ديجريسى الجلد والقضاء على الخصائص الفردية للجلد في الموقع. بعد ح 4، إزالة الشرائط وديمارك المناطق بقلم دائمة، انظر الشكل 1.
رقم 1: أسلوب لموقع اختبار تركيبات على الساعد من أطرافه اليسرى واليمنى العليا- الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
- تطبيق 0.1 مل الصيغ المجربة في كل بقعة من مواقع الدسم الساعد باستخدام المحاقن وتنتشر في كامل سطح ملحوظ. في ذراعه اليسرى، لا تطبق أي شيء إلى الموقع الأول (وهو عنصر التحكم)، تنطبق المكشوف إلى موقع آخر، والمكشوف + 2% خ الثالث. تطبيق المكشوف + 4% خ والمكشوف + 6% خ للذراع الأيمن.
- قياس كل عينة في كل موقع وكل فاصل زمني (1، 2، 3 و 4، 24 و 48 ساعة) وأخذ قراءات 5 مع المسبار متر ترطيب الجلد لترطيب الجلد وقراءات 15 مع المسبار متر تول للجلد تول 1 القراءة مع المسبار متر pH الجلد للجلد الأس الهيدروجيني. عدم السماح للمتطوعين لتطبيق أي منتج مستحضرات التجميل إلى مواقع التجارب والمناطق المحيطة بها خلال فترة الاختبار؛ يسمح لهم مساء قصيرة يغسل بالمياه الجارية.
ملاحظة: يمكن أن يكون مؤقتاً البروتوكول هنا. - عملية القراءات الناتجة من الخصائص العددية الأساسية للإحصاء الوصفي، باستخدام برامج جداول البيانات. من قراءات ترطيب 5 قياس لكل عينة، تجاهل أدنى وقراءات أعلى، وحساب قراءات 3 فقط للوسط الحسابي والانحراف المعياري. من تول 15 قراءات قياس لكل عينة، تجاهل 5 الأولى، وحساب قراءات 10 فقط للوسط الحسابي والانحراف المعياري.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
خ أعدت وفقا للإجراءات المعروضة هنا (انظر الشكل 2) أصفر اللون، بسهولة للذوبان في الماء مع المحتوى على نسبة عالية من البروتين (المواد الصلبة غير العضوية تمثل < 2.0 ٪)؛ الرقم الهيدروجيني لحل 1.0 في المائة خ 5.3، ويفي بالمتطلبات مستحضرات التجميل-الصف البروتينات. عائد خ من المواد الخام 50 جرام هو حوالي 30%. توزيع الوزن الجزيئي خ يحدده الحزب الديمقراطي الصربي صفحة، ويظهر في الشكل 3.
رقم 2: صورة تمثيلية من الكيراتين هيدروليساتي- الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 3: الحزب الديمقراطي الصربي صفحة معايير هيدروليساتي وبروتين الكيراتين. لين 1: مجموعة فائقة منخفضة الوزن الجزيئي ماركر (3.5-26.6 كاتشين). الممرات 2 و 3 و 4: البروتينات الكيراتين أعد على 3 دفعات. تم تحميل 120 ميكروغرام خ إعادة علقت في 20 ميليلتر تحميل المخزن في كل بئر. لين 5: واسعة النطاق الوزن الجزيئي ماركر (كاتشين 6.5-200)
ترطيب وقيم تول كانت محددة في مختلف المتطوعين، وهكذا لا يمكن مقارنتها ببعضها البعض. ولذلك، يتم التعبير عن القيم بالتغيير في المئة بالمقارنة مع المكشوف على الموقع تعامل مع الصياغات، 2 التي تحتوي على هذا الأخير، 4 والإضافات 6% من خ على فترات لقياس 1، 2، 3 و 4، 24 و 48 ساعة. يتم التعبير عن قيم الأس الهيدروجيني للجلد كالوسط الحسابي لقيم الأس الهيدروجيني الجلد مسجل لجميع المتطوعين. نتائج التغيير في الماء وتول في المائة، مقارنة بالحريق المكشوف، ومستويات الأس الهيدروجيني للجلد وترد في الجدول 2 للرجال 10 وفي الجدول 3 10 امرأة المتطوعين.
| الرجال | ||||||
| الوقت | ح 1 | ح 2 | ح 3 | ح 4 | ح 24 | ح 48 |
| ترطيب (تغيير % مقابل قاعدة أويتمينت) ± SD | ||||||
| مرهم قاعدة + 2 ٪ خ | + تردداتها 16 | + 14 ±16 | + 12 ±9 | + 19 ±14 | + 11 ±18 | + 15 ±9 |
| مرهم قاعدة + 4 ٪ خ | + 6 ±19 | + 1 ±18 | + ± 10 5 | + 7 ±16 | + 11 ±9 | + تردداتها 14 |
| مرهم قاعدة + 6% خ | -3 ±25 | -4 ±14 | -7 ±18 | -4 ±17 | + 11 ±14 | -17 ±14 |
| تول (تغيير % مقابل قاعدة أويتمينت) ± SD | ||||||
| مرهم قاعدة + 2 ٪ خ | -تردداتها 20 | -20 ±22 | -11 ±21 | -20 ±21 | -23 ±20 | --21±17 |
| مرهم قاعدة + 4 ٪ خ | --±12 28 | --±20 29 | --±20 28 | --±24 28 | -47 ±20 | --±20 36 |
| مرهم قاعدة + 6% خ | --±16 36 | --±21 41 | --±17 31 | --±17 36 | --±20 53 | --±17 54 |
| الأس الهيدروجيني | ||||||
| عنصر التحكم | 4.7 ± 0.5 | روبلين 5.1 | روبلين 4.9 | 5.1 ±0.3 | 4.6 ± 0.5 | 4.8 ±0.7 |
| قاعدة مرهم | 0.5 ± 4.8 | 5.1 ±0.3 | 4.9 ±0.3 | روبلين 5.0 | روبلين 4.6 | ± 0.6 5.0 |
| مرهم قاعدة + 2 ٪ خ | ± 0.6 5.0 | روبلين 4.8 | 4.9 ± 0.5 | 4.9 ± 0.5 | 4.7 ±0.3 | ± 0.6 5.0 |
| مرهم قاعدة + 4 ٪ خ | 0.5 ± 4.8 | 4.9 ±0.3 | روبلين 4.8 | 4.8 ±0.3 | 4.7 ± 0.5 | 0.5 ± 4.8 |
| مرهم قاعدة + 6% خ | 4.7 ± 0.5 | ± 0.2 5.0 | روبلين 4.9 | روبلين 4.8 | ± 0.6 4.8 | ± 0.6 5.0 |
الجدول 2: النتائج لتغيير في الماء وتيول والأس الهيدروجيني لجلد متطوعين الرجال 10 في فترات القياس من 1، 2، 3 و 4، 24 و 48 ساعة.
| النساء | ||||||
| الوقت | ح 1 | ح 2 | ح 3 | ح 4 | ح 24 | ح 48 |
| ترطيب (تغيير % مقابل قاعدة أويتمينت) ± SD | ||||||
| مرهم قاعدة + 2 ٪ خ | + 22 ±7 | + 15 ±6 | + 15 ±8 | + 12 ±9 | + 14 ±14 | + 18 ±9 |
| مرهم قاعدة + 4 ٪ خ | 0 ±4 | -دقة ± 5 6 | -دقة ± 5 2 | + 1 ±7 | + 10 ±13 | + ± 10 15 |
| مرهم قاعدة + 6% خ | -دقة ± 5 12 | --±2 14 | -9 ±7 | -5 ±9 | + 8 ±12 | + 10 ±9 |
| تول (تغيير % مقابل قاعدة أويتمينت) ± SD | ||||||
| مرهم قاعدة + 2 ٪ خ | --±1.6 32 | -16 ±3.0 | -12 ±1.3 | -20 ±0.9 | --±1.9 35 | --±1.6 38 |
| مرهم قاعدة + 4 ٪ خ | -إناثها 41 | --±2.7 37 | -24 ±0.8 | -34 ±0.9 | -± 1.5 44 | --±1.9 38 |
| مرهم قاعدة + 6% خ | -50 ±1.4 | --±2.2 39 | --±0.7 29 | --±0.9 39 | -16 ±2.4 | -33 ±2.1 |
| الأس الهيدروجيني | ||||||
| عنصر التحكم | 5.0 ±0.7 | 5.3 ±0.3 | 4.9 ±0.7 | 0.5 ± 5.0 | 5.0 ±0.8 | 4.7 ±0.7 |
| قاعدة مرهم | 5.2 ± 0.6 | 5.3 ±0.3 | 5.2 ±0.7 | روبلين 5.0 | 5.1 ±0.8 | 4.8 ±0.7 |
| مرهم قاعدة + 2 ٪ خ | 5.4 ±0.7 | روبلين 5.1 | روبلين 4.9 | 5.1 ±0.7 | 4.9 ±0.7 | تيار 5.0 |
| مرهم قاعدة + 4 ٪ خ | 5.2 ±0.7 | 5.1 ±0.3 | روبلين 5.0 | روبلين 4.9 | ± 0.6 5.1 | 5.1 ± 0.2 |
| مرهم قاعدة + 6% خ | 5.2 ±07 | 5.2 ± 0.2 | روبلين 5.0 | 5.0 ±0.3 | ± 0.6 5.4 | روبلين 5.2 |
الجدول 3: نتائج لتغير في الماء، وتول، والأس الهيدروجيني للجلد للمرأة 10 متطوعين في فترات القياس من 1، 2، 3 و 4، 24 و 48 ساعة.
ترطيب لاتفاقية استكهولم للمتطوعين الرجال:
خلال فترات قصيرة للقياس (ح 1-4)، وسجلت أعلى الزيادات في ترطيب الجلد (12-19 في المائة) لتركيبات المكمل المكشوف مع % 2 من خ؛ وإضافة 4% خ أظهرت ارتفاع أصغر في الماء (1-7%). وفي المقابل، خ 6% ينعكس سلبا على القيم الخاصة باتفاقية استكهولم ترطيب (انخفاضا من 3-7%). بعد 24 ساعة قياس، كان تبين زيادة قدرها 11 في المائة في اتفاقية استكهولم ترطيب لجميع الإضافات من خ للحريق المكشوف اختبارها. واصل نفس الاتجاه حتى بعد 48 ساعة، عقب مع زيادة طفيفة في الماء التي لا تزال قائمة: زيادة 15% عن خ 2 في المائة، بزيادة 14 في المائة لإضافة خ 4%، وانخفاض 17% خ 6 في المائة.
ترطيب لاتفاقية استكهولم للنساء المتطوعات:
فمن الملاحظ أن المكمل المكشوف مع % 2 خ يتسبب تقريبي 22% زيادة في ترطيب اتفاقية استكهولم، بالنسبة إلى الحريق المكشوف وحدها، أقرب في ح 1 القياس؛ بالإضافة إلى 4% من خ للحريق المكشوف، في الواقع، ليس له تأثير على الماء؛ بينما، على العكس من ذلك، إضافة 6% خ للحريق المكشوف ينعكس انخفاض 12 في المائة تقريبا في الماء، بالمقارنة مع نقية جراحات مماثلة ينظر الاتجاهات بعد 2 و 3 و 4 ح للقياس، في أي زيادات ترطيب بنسبة 12-15% للتغذية التكميلية بنسبة 2% خ؛ للإضافات أكبر من خ الترطيب أما يبقى على حالة أو يقلل. بعد 24 ساعة قياس، وسجلت الترطيب كأعلى من المكشوف لجميع الإضافات خ المختبرة؛ حدثت أكبر زيادة (14 في المائة) في الماء لإضافة 2% خ، في حين أن الزيادة أدنى (8 في المائة) كان ينظر للتغذية التكميلية في 6% من خ. وتتحقق نتائج مماثلة بعد 48 ساعة قياس، حيث سجلت ترطيب أكبر مما للحريق المكشوف الصرفة لجميع العينات مع إضافات خ؛ حدث الارتفاع أكبر (18 في المائة) في الماء لإضافة خ 2%، في حين لوحظ أن الزيادة أدنى (10%) لتكميل خ 6 في المائة.
تول للمتطوعين الرجال:
نتائج تول جعل من الواضح أن الصياغات تستكمل مع خ يقلل تول، عندما يطبق على الجلد، بالمقارنة مع جراحات نقية بقدر متزايد من خ تمارس تأثيراً إيجابيا على قيم أقل من تول. بعد 1 ساعة بعد تطبيق الصيغ، تول تم تسجيلها ك 20% أقل من OB نقية، تتصل بصيغة مع 2% خ؛ بينما انخفض خ 4% 28% في تول؛ في حين أسفرت خ 6 في المائة درامية 36% انخفاض في تول. وفي الواقع، القيم تول تقلص لوحظت أيضا في 2 و 3 و 4 ح القياس بتركيبات وتستكمل مع خ. بعد 24 و 48 ساعة، خفضت تول حتى إلى حد كبير على مواقع تعامل مع الصياغات خ. كان تول لاحظت على الجلد بعد 24 ساعة، 23% أقل للمكشوف مع إضافة 2% من خ من موقع الحريق المكشوف النقي؛ خ 4% انخفض بحوالي 47% تول، بينما خ 6% آثار تول أن ينخفض بنسبة 53 في المائة. يتضح اتجاه مماثل حتى بعد 48 h: تيول للجلد تعامل مع الحريق المكشوف الذي يحتوي على 2% خ كان أقل من 21% في موقع الحريق المكشوف النقي؛ وأظهرت خ 4% تول على 36% أقل؛ وأحدثت خ 6 في المائة نسبة انخفاض قدرها 54%.
تيول للنساء المتطوعات:
فمن الواضح أن تنعكس جميع الإضافات المرصودة من خ للحريق المكشوف في تول مخفضة، كما يتبين من المتطوعين الرجال. بعد 1 ساعة من التطبيق، وسجلت انخفاضا كبيرا في تول لعينات OB تحتوي على جميع الإضافات من خ؛ حوالي 32 ٪ تخفيض في تول كان ينظر لإضافة 2% خ، حول انخفاض نسبة 41% 4% خ، وحتى 50 ٪ انخفاضا في تول لمكملات 6% من خ. وعقب 2 و 3 و 4 ح فترات القياس، تظل حالة مماثلة، أي، هناك انخفاض في تول في هذه الفواصل الزمنية؛ يحدث انخفاض أقل في تول ل 2% خ، بينما يعتبر أعظم % 6 خ. بعد ح 2، يقلل تيول بنسبة 16% عن خ % 2، 37% خ في 4%، و 39% خ 6 في المائة. في ح 3، تول يقلل كذلك من 12% خ 2 في المائة، من 24 في المائة خ 4%، و 29% خ 6 في المائة. في ح 4، تول كذلك يقلل بنسبة 20% 2% خ، 34% 4% خ، و 39% % 6 خ. بعد 24 ساعة، حدث انخفاض أقل في تول (16 في المائة) لإضافة 6% خ، بينما كان ينظر أعظم (44%) لمكملات 4% من خ؛ خ 2% ولوحظ أن يسبب انخفاض نسبة 35 في المائة في تول. في ح 48، تظل النتائج متشابهة ومتوازنة نسبيا، مع انخفاض أقل في تول (33 في المائة) لإضافة 6% خ، أكبر (38 ٪) 4 في المائة خ ول 2% خ.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
وميزة التحلل القلوي الانزيمية أنه يمكن تعديلها وفقا للتطبيقات المستقبلية من خ. على سبيل المثال، في التطبيقات مستحضرات التجميل العناية بالشعر حيث لون البنى طفيفة لمنتج لا تشكل عقبة، درجة حرارة أعلى في التحلل المائي يمكن تطبيقها مما أدى إلى ارتفاع عائد من خ. وبالإضافة إلى ذلك، وقت المعالجة أطول خلال كل مراحل الإجراءات التكنولوجية إلى حد كبير يؤثر على مجمل عملية الكفاءة – عائد خ ترتفع إلى 85%.
النتائج لقياس الماء تجعل من الواضح أنه، أثناء الفاصل الزمني لرصد لقياس (ح 1-48)، إضافة 2% خ للحريق المكشوف الأمثل نظراً لأنه يسبب زيادة بنسبة % 11-19 في اتفاقية استكهولم ترطيب للمتطوعين الرجال، وزيادة بنسبة % 12-22 للمتطوعين امرأة. خ أن يضاف يملك توزيع واسع للوزن الجزيئي. أننا نقترح أن جزء من كسور منخفضة الوزن الجزيئي (ميغاواط < كاتشين 20) تخترق البشرة بعد التطبيق على الجلد. زيادة ترطيب الجلد بعد وضع في صيغة تستكمل مع خ مفسرة عن طريق المياه ملزم خ من طبقات البشرة أقل لهيكل اللجنة الدائمة، مما يؤدي إلى تشكيل ح-الجسور بين جزيئات خ والمياه. هذه الآلية للعمل كما يعتنقها بعض المؤلفين30. تأثير ترطيب خ قابل للمقارنة مع المرطبات التقليدية (مثلاً، الجلسرين، اليوريا، وحمض الهيالورونيك) التي تم اختبارها في مستحلب وهلام تركيبات22.
قياسات تول تسليط الضوء على أن جميع الصيغ مع مكملات خ تسبب خلال فترة الملاحظة للقياس (ح 1-48) للمتطوعين الرجال، تول في الانخفاض بعد تطبيق. إضافة 2% خ للحريق المكشوف بسبب تخفيض في تيول من 11-23 في المائة، بالمقارنة مع جراحات نقية عندما استكمل المكشوف بنسبة 4 في المائة خ، تول انخفض بنسبة 28-47 في المائة؛ وفي حين أجل خ 6 في المائة أنه تقلص بقدر 31-54%. للمتطوعين امرأة، المكمل المكشوف مع 4% خ يمثل الخيار الأفضل، كما كان هناك انخفاض 24-44 في المائة في "تول اتفاقية استكهولم". تول أقل بكثير لتركيبات وتستكمل مع خ يمكن تفسيره بعملية الكسور أعلى-الوزن الجزيئي من خ تشكل غشاء حماية مرة واحدة تطبق على البشرة، مما يحول دون فقدان الماء البشرة. وفي الواقع، خ تأثير إيجابي للغاية على تول قابل للمقارنة أو حتى يتجاوز، من أجل المقارنة، قيم تول المسجلة للمواد الهلامية تجميلية أو المستحلبات وتستكمل مع 5-10% الجلسرين و 1-5 في المائة من سيريسين. وبالمثل، عند مقارنة خ مع الزيوت المعدنية التقليدية، تضاءلت خ تول بحوالي 25-30%31. بالإضافة إلى ذلك، خصائص الحاجز خ أفضل من، على سبيل المثال، تلك ل اليوريا وحمض الهيالورونيك22.
الأس الهيدروجيني لسطح الجلد:
للإشارة، pH 3.5 إلى 4.3 من سطح جلد حمضية pH 4.4 إلى 5.5 محايدة في هذا الصدد والأس الهيدروجيني 5.6 إلى 6.5 يمثل سطح جلد أساسية32. لقد وجدنا أن لم تلاحظ أي تغييرات كبيرة في درجة حموضة سطح الجلد بعد وضع جميع الصيغ المجربة (OB + 2 و 4 و 6% خ)؛ يناظر الرقم الهيدروجيني من 4.6 إلى 5.0 (الرجال المتطوعين)، و 4.9 إلى 5-4 (امرأة المتطوعين) على سطح جلد عادي. تحليل طويل الأجل (أكثر من 2 أيام) لم يتحقق.
التعديلات واستكشاف الأخطاء وإصلاحها:
تجهيز ريش الدجاج إلى خ من السهل جداً، ويعمل تحت الضغط الجوي وفي درجات الحرارة المعتدلة. يمكن أن تتحول العملية إيجابيا من نطاق مختبرات على نطاق الوحدات تجريبية ونطاق صناعي. في المادة 2 من البروتوكول بحيث خ هو تجانس مع المستحلب (O/W) قاعدة، يتم إدخال بعض التعديلات الممكنة. في الصناعية الممارسة، O/W و W/O بخلط إعداد مستحلبات المياه (W) مرحلة (ماء + مستحضرات التجميل المكونات القابلة للذوبان في الماء) والنفط (س) (النفط + مستحضرات التجميل المكونات القابلة للذوبان في الزيت). خ قابل للذوبان في الماء، حتى أنها مواتية لمزيج من مباشرة في طور الماء للنظام.
القيود المفروضة على هذه التقنية:
يتم قياس التعريب من كل بقعة لقياس الماء وتول والضغط إبرامها مع متر ترطيب الجلد ومكلفة.
الخطوات الحاسمة في إطار البروتوكول في معظمها في الجزء 3. يمكن أن تؤثر الحالة الصحية، والفروق الفردية، والمدخنون/غير المدخنين، الجنس والفروق في السن، الحيض والحالة العقلية قياس ترطيب الجلد وتول. للحصول على نتائج تمثيلية، ينبغي أن ينطبق نفس الشخص الصيغ المجربة في الذراعين وترطيب التدبير وقيم تول. من الضروري إجراء جميع القياسات في غرفة مكيفة مع استقرار درجة الحرارة والرطوبة النسبية. في حالة قياس القيم في فترات 24 و 48 ساعة، تأقلم المتطوعين في غرفة مكيفة لمدة 30 دقيقة على الأقل قبل القياس اللازمة.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
Acknowledgments
تمت كتابة هذه المقالة بدعم المشروع إيغا/متر/2017/007 من جامعة توماس باتا في زلين.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Material or chemicals | |||
| LIPEX 100T | Novozymes | LJP30020 | Lipex - enzyme produced by submerged fermentation of a genetically-modified microorganism, activity 100 KLU/g |
| Savinase Ultra 16L | Novozymes | PXN40001 | Savinase - enzyme produced by submerged fermentation of a genetically-modified microorganism, activity 16 KNPU-S/g |
| Potassium hydroxide, KOH | Sigma-Aldrich | 302510289 | Potassium hydroxide, KOH, 97,0 %, Mr 56,11 |
| Phosphoric acid solution, H3PO4 | Sigma-Aldrich | W290017 | Phosphoric acid solution, H3PO4, 85 wt. % concentration in water, Mr 98,00 |
| Sodium chloride physiological solution | Sigma-Aldrich | 52455 | Tablets of BioUltra NaCl physiological solution; 1 tablet in 1000 mL of water yields 0.9 % NaCl |
| Sodium hydroxide, NaOH | Penta s.r.o. | 40216 | Sodium hydroxide, NaOH, 97,0 %, Mr 40,00 |
| AmiFarm (Cremor base-A) | Fagron | 608425 | Hydrophilic oil in water (O/W) cream base; the composition: aqua, paraffin, paraffin liquid, cetearyl alkohol, Laureth 4, sodium hydroxide, carbomer, methylparaben, propylparaben. |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Equipment | |||
| IKA EUROSTAR POWER control-visc stirrers | IKA-labortechnik | Z404020 | Digital laboratory stirrer, for tasks up to the high viscosity range, 230V, 1/cs |
| IKA Propeller stirrer, 3-bladed | IKA-labortechnik | R 1381 | Propeller stirrer, 3-bladed, stirrer Ø: 45 mm, shaft Ø: 8 mm, shaft length: 350 mm |
| Dialysis tubing closures | Sigma-Aldrich | Z371017-10EA | Dialysis tubing closures, red, size 110 mm |
| Dialysis tubing cellulose membrane | Sigma-Aldrich | D9402-100FT | Dialysis tubing cellulose membrane, average flat width 76 mm (3.0 in.) |
| DOMO Pot with stailess, LCD | DOMO Elektronic | DO42325PC | Preserving boiler stainless steel, 2000 W, 27-L container (diameter 37 cm, height 30 cm), temperature control 30-100 ° C, operation LCD display |
| Hettich zentrifugen Universal 32 | Gemini bv | 2770 GS1R | Mid bench centrifuge, speed 18000 rpm |
| LT 3 shaking device | Fischer Scientific | 6470.0002 | Orbital shaking device |
| KERN 440-47N | Kern | 440-47N | Laboratory balance |
| KERN 770 | Kern | 770 -N | Laboratory analytical balance |
| VENTICELL 222 - Komfort | BMT, MMM Group | C 131749 | Drying oven, temperature control 30-100 ° C, air circulation control |
| Vacucell 55 - EVO | BMT, MMM Group | B 050328 | Vacuum drying oven, temperature control 30-100 ° C |
| PULVERISETTE 19 | Fritsch | 19.1030.00 | Universal cutting mill, rotor with V-cutting edges and fixed knives |
| Multi Probe Adapter System MPA 5 | Courage & Kazaka Electronic | 10225237 | MPA 5 Station - equipment for measurement hydratation, TEWL and pH |
| Skin pH-meter PH 905 probe | Courage & Kazaka Electronic | Probe to specifically measure the pH on the skin surface or the scalp | |
| Corneometer CM 825 probe | Courage & Kazaka Electronic | Probe to determine the hydration level of the skin surface (Stratum corneum). | |
| Tewameter TM 300 | Courage & Kazaka Electronic | Probe for the assessment of the transepidermal water loss (TEWL) | |
| Heidolph RZR 2020 | Heidolph | 13-225-007-03-1 | Overhead stirrer, mechanical speed setting and stepless transmission; speed range 40-2000 rpm |
| Heidolph mechanical stirrer BR 10 | Heidolph | Z336688-1EA | Blade impeller crossed stirrer |
| Fagor FS 12 | Fagor | BTT-138 | Laboratory refrigerator with freezer space |
| WTW bench pH/mV meter | WTW | Z313165 | High-performance bench pH and pH/conductivity meters for routine and high precision laboratory measurements in research or quality control laboratories |
| Container | RPC Superfos | 13-L plastic bucket, diameter 26 cm, height 26 cm | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Software | |||
| Microsoft Office 2010 | Microsoft | ||
| C+K software | Courage and Khazaka Electronic GmbH | MPA 5 station operating software |
References
- United States Department of Agriculture - National Agricultural Statistics Services. Poultry Slaughter, 2016 Summary. , (2016).
- McGovern, V. Recycling poultry feathers: more bang for the cluck. Environ.Health Perspect. 108 (8), A336-A339 (2000).
- Gousterova, A., et al. Degradation of keratin and collagen containing wastes by newly isolated thermoactinomycetes or by alkaline hydrolysis. Lett. Appl. Microbiol. 40 (5), 335-340 (2005).
- Yamauchi, K., Yamauchi, A., Kusunoki, T., Khoda, A., Konishi, Y. Preparation of stable aqueous solution of keratins, and physiochemical and biodegradational properties of films. Biomed. Mater. Res. 31 (4), 439-444 (1996).
- Schrooyen, P. M. M., Dijkstra, P. J., Oberthur, R. C., Bantjes, A., Feijen, J. Partially carboxymethylated feather keratins. 2. Thermal and mechanical properties of films. J. Agric. Food Chem. 49 (1), 221-230 (2001).
- Mark, H. F., Gaylord, N. G., Bikales, N. M. Encyclopedia of Polymer Science Technology: vol. 8: Keratin to Modacrylic Fibers. , Wiley-Interscience. New York. (1968).
- Bertsch, A., Cello, N. A biotechnological process for treatment and recycling poultry feathers as a feed ingredient. Bioresour. Technol. 96 (15), 1703-1708 (2005).
- Grazziotin, A., Pimentel, F. A., de Jong, E. V., Brandelli, A. Nutritional improvement of feather protein by treatment with microbial keratinase. Animal Feed Sci. Technol. 126 (1-2), 135-144 (2006).
- Brandelli, A. Bacterial keratinases: useful enzymes for bioprocessing agroindustrial wastes and beyond. Food Bioprocess Technol. 1 (2), 105-116 (2008).
- Gusta, R., Ramnani, P. Microbial keratinases and their prospective applications: an overview. Appl.Microbiol. Biotechnol. 70 (1), 21-33 (2006).
- Vasileva-Tonkova, E., Gousterova, A., Neshev, G. Ecologically safe method for improved feather wastes biodegradation. International Biodeterior & Biodegradation. 63 (8), 1008-1012 (2009).
- Lodén, M. Hydrating Substance. Handbook of Cosmetic Science and Technology. Barel, A. O., Paye, M., Maibach, H. I. , Informa, Healthcare. New York. 107-119 (2009).
- Teglia, A., Secchi, G. Chapter 9: Proteins in Cosmetics. Principles of Polymer Science and Technology in Cosmetics and Personal Care. Goddard, E. D., Gruber, J. V. , Marcel Dekker. New York. (1999).
- Magdassi, S. Delivery systems in cosmetics. Colloids and Surfaces A: Physicochem. Engin. Aspects. 123-124, 671-679 (1997).
- Method for producing a protein hydrolysate. U.S. Patent. Dahms, G., Jung, A. , 20140323702 (2014).
- Pons, R., Carrera, I., Erra, P., Kunieda, G., Solans, C. Novel preparation methods for highly concentrated water-in-oil emulsions. Colloids and Surfaces A: Physicochem. Engin. Aspects. 91 (3), 259-266 (1994).
- Mokrejs, P., Hrncirik, J., Janacova, D., Svoboda, P. Processing of keratin waste of meat industry. Asian J. Chem. 24 (4), 1489-1494 (2012).
- Mokrejs, P., Svoboda, P., Hrncirik, J. Processing poultry feathers into keratin hydrolysate through alkaline-enzymatic hydrolysis. Waste Manage. Res. 29 (3), 260-267 (2011).
- Mokrejs, P., Krejci, O., Svoboda, P. Producing keratin hydrolysates from sheep wool. Orient. J. Chem. 27 (4), 1303-1309 (2011).
- Mokrejs, P., Krejci, O., Svoboda, P., Vasek, V. Modeling technological conditions for breakdown of waste sheep wool. Rasayan J. Chem. 4 (4), 728-735 (2011).
- Polaskova, J., Pavlackova, J., Vltavska, P., Mokrejs, P., Janis, R. Moisturizing effect of topical cosmetic products applied to dry skin. J. Cosmet. Sci. 64 (5), 329-340 (2013).
- Polaskova, J., Pavlackova, J., Egner, P. Effect of vehicle on the performance of active moisturizing substances. Skin Res. Technol. 21 (4), 403-412 (2015).
- Verdier-Sévrain, S., Bonté, F. Skin hydration: a review on its molecular mechanisms. J. Cosmet. Dermatol. 6 (2), 75-82 (2007).
- Darlenski, R., Sassning, S., Tsankov, N., Fluhr, J. W. Non-invasive in vivo methods for investigation of the skin barrier physical properties. Eur. J. Pharm. Biopharm. 72 (2), 295-303 (2009).
- Berardesca, E. EEMCO guidance for assessment of stratum corneum hydration: electrical methods. Skin Res. Technol. 3 (2), 126-132 (1997).
- Rogiers, V. EEMCO guidance for the assessment of transepidermal water loss in cosmetic sciences. Skin Pharmacol. Appl. Skin Physiol. 14 (2), 117-128 (2001).
- Ali, S. M., Yosipovitch, G. Skin pH: from basic science to basic skin care. Acta Derm. Venereol. 93 (3), 261-267 (2013).
- Agache, P., Humbert, P. Measuring the Skin. , Springer-Verlag. Berlin. (2004).
- Council for International Organizations of Medical Sciences. International Ethical Guidelines for Biomedical Research Involving Human Subjects. , Geneva. (2002).
- Ruland, J. K. Transdermal permeability and skin accumulation of amino acids. Int. J. Pharm. 72 (2), 149-155 (1991).
- Draelos, Z. D. Therapeutic moisturizers. Dermatol. Clin. 18 (4), 597-607 (2000).
- Courage and Khazaka Electronic GmbH, Technical Charges. Information and Operating Instructions for the Multi probe Adapter MPA and its Probe. , (2013).
