Summary
כתב יד זה מתאר מודל מאתר osteolysis calvarial על ידי חשיפה לחלקיקים CoCrMo, המהווה מודל חיה אידיאלית להערכת הגומלין שבין חלקיקי ללבישה, תאים שונים התרופפות אספטי.
Abstract
ללבוש חלקיקים-induced osteolysis הוא הגורם העיקרי התרופפות aseptic בכישלון שכיחיםהחלפת, אבל המנגנון הבסיסי נותר לא ברור. בשל זמן מעקב לצורך זיהוי, מופע ספורדי, זה מאתגר כדי להעריך את osteolysis של ofparticle-induced פתוגנזה במקרים קליניים. ומכאן, מודלים בעלי חיים אופטימלי יש צורך בלימודים. המודל מאתר של osteolysis calvarial נוסדה על ידי חשיפה לחלקיקים CoCrMo הוא כלי יעיל וחוקית להערכת את האינטראקציות בין חלקיקי תאים שונים התרופפות אספטי. במודל זה, חלקיקי CoCrMo קודם מתקבל על ידי זרם גבוה-ואקום 3-אלקטרודה, resuspended בתוך באגירה פוספט תמיסת מלח-ריכוז של 50 מ"ג/מ"ל. לאחר מכן, µL 50 של ההשעיה וכתוצאה מכך הוחל לאמצע calvaria מאתר לאחר ההפרדה של קרום העצם הגולגולת על ידי חד לנתיחה. אחרי שבועיים, העכברים הוקרבו, דגימות calvaria נבצרו; הערכות כמותיים בוצעו על ידי hematoxylin אאוזין מכתים ו טומוגרפיה מיקרו. נקודות החוזק של מודל זה כוללים פשטות ההליך, הערכה כמותית של איבוד מסת העצם, רגע, osteolysis, להשתמש הפוטנציאל הטרנסגניים או נוקאאוט מודלים ופיתוח בעלות נמוכה יחסית. עם זאת, מודל זה יכול לשמש כדי להעריך את כוח מכני ואת ההשפעות כרונית של חלקיקי התרופפות אספטי. המודל מאתר osteolysis calvarial שנוצר על ידי חשיפה לחלקיקים CoCrMo הוא כלי אידיאלי עבור הערכת את האינטראקציות בין ללבוש חלקיקים שונים תאים, למשל, מקרופאגים, fibroblasts, תאי העצם ובין osteoclasts, ב התרופפות אספטי.
Introduction
התרופפות aseptic הוא הגורם הנפוץ ביותר של שכיחיםהחלפת היפ הכולל (THA) וכישלון שכיחיםהחלפת (TKA) ברך הכולל, אשר דורש ניתוח תיקון1. עם זאת, המנגנון הבסיסי נותר לא ברור2. מעקב ארוך נדרש לזהות חלקיקים-induced osteolysis, אשר מופע נדיר; לכן, זה מאתגר לחקור שלה פתוגנזה במקרים קליניים. לפיכך, מחקרים נוספים התמקדות מנגנונים מורכבים הסלולר ורקמות דורשים שני ניסויים ויוו ב ללבוש מודלים של חלקיקים-induced osteolysis, מבחני במבחנה בתאים הקשורים עצם הומאוסטזיס3. מודל בעלי חיים חוקי חשוב לחשוף את ההשפעות של חלקיקים ללבוש על איבוד העצם, מתן הוכחות נוספות הסלולר מבחני.
מודל osteolysis calvarial מאתר שנבנה על ידי חשיפה לחלקיקים CoCrMo היא שיטה יעילה וחוקית להערכת את האינטראקציות בין חלקיקי תאים שונים התרופפות אספטי. במודל זה, חלקיקי CoCrMo לגרום calvarial osteolysis על ידי גרימת ציטוקינים דלקתיים ב מקרופאגים, הפעלת osteoclasts, מעכבות התפשטות אוסטאובלסט קידום אוסטאובלסט אפופטוזיס.
זה לוקח רק שבועיים להקים מודל זה. Osteolysis יכול להיות דמיינו לכמת על ידי hematoxylin אאוזין (H & E) מכתים, מיקרו שחושב טומוגרפיה (מיקרו-CT)2. בנוסף, מודל זה יש עכבר יחסית בעלות נמוכה, הטרנסגניים ואת נוקאאוט מודלים יכול לשמש למסך מספר רב של תרכובות מינונים שונים3.
הנוהל כדי לבסס והערכה של מודל זה הוא פשוט. ראשית, חלקיקי CoCrMo מתקבל על ידי זרם גבוה-ואקום 3-אלקטרודה, resuspended בתוך באגירה פוספט תמיסת מלח (PBS)-ריכוז של 50 מ"ג/מ"ל. לאחר מכן, µL 50 של ההשעיה וכתוצאה מכך הוחל לאמצע calvaria מאתר לאחר ההפרדה של קרום העצם הגולגולת על ידי חד לנתיחה. העכברים הוקרבו אחרי שבועיים ולאחר calvaria דגימות נבצרו; ניתוחים כמותיים בוצעו על ידי H & E מכתים andmicro-טי
מודל osteolysis calvarial מאתר שנבנה על ידי חשיפה לחלקיקים CoCrMo היא כלי אידיאלי עבור הערכת את האינטראקציות בין חלקיקים CoCrMo תאים שונים, כגון מקרופאגים, fibroblasts, תאי העצם osteoclasts, ב התרופפות אספטי.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
כל השיטות המתוארות כאן אושרו על ידי טיפול בעלי חיים מוסדיים ועל שימוש הוועדה (IACUC) של אוניברסיטת נאנג'ינג.
1. CoCrMo חלקיקים הכנה
- לקבל CoCrMo חלקיקים באמצעות זרם ישיר של שלוש-אלקטרודה גבוהה-ואקום מפוברק4. המקום CoCrMo סגסוגת בכלי תחת 10-3 הרשות הפלסטינית ואקום, 0.04 ארגון MPa ו מימן 3:2 (v/v), 650 קטודית A הנוכחי.
- למדוד על הקוטר של חלקיקים CoCrMo.
- להוסיף 1 מ ג של CoCrMo חלקיקים לתוך 1.5 מ"ל אתנול נטול מים.
- Resuspend CoCrMo חלקיקים באתנול נטול מים ע י ניעור אולטראסוניות-28 kHz ו- 600 W עבור 5 דקות.
- החל טיפה אחת (כ- 20 µL) של ההשעיה המתקבלת על השולחן אובייקטיבית של מיקרוסקופ אלקטרונים הילוכים (TEM). לכידת סדרת תמונות TEM ב 200 מתח ההאצה kV והרזולוציה nm 0.24.
- להשתמש בתוכנה המצורפת כדי לחשב את מתכוון קוטר חלקיקים בגודל והפצה ב TEM micrographs.
- Decontaminate endotoxins
- אוטוקלב 50 גרם של חלקיקים למשך 15 דקות ב 121 מעלות צלזיוס ו 15 psi.
- לאתר endotoxins על ידי Assay כמותית Limulus Amebocyte Lysate (LAL) (< 0.25% האיחוד האירופי/mL נחשבת לציון אנדוטוקסין היעדרות)5.
- Resuspend החלקיקים בתוך באגירה פוספט תמיסת מלח (PBS)-ריכוז של 50 מ"ג/מ"ל בתור פתרון מניות6.
2. בניית דגם Calvarial Osteolysis
- עזים ומתנגד C57BL/J6 6 בן שבועיים עכברים (שישה עכברים לכל קבוצה) withpentobarbital (50 מ"ג/ק"ג). השתמש במבחן קמצוץ כדי להעריך את רמת ההרדמה. למנוע ייבוש של העיניים עם תמיסת מלח.
- הצב עכברים במצב שכיבה. הסר את הפרווה על הגולגולת עם מכונת הגילוח, לחטא את העור באמצעות כדורי צמר גפן רפואי המכיל 75% אתנול.
- עבור נקודת לוקליזציה, לזהות שתי נקודות, כולל את האמצע בין שתי העיניים והאוזניים, בהתאמה. לאחר מכן, לקבוע את הגבול בין השניים מעל נקודות, פצעים וחתכים בעור לאורך הקו לעיל עם מספריים (איור 1 א').
- הסר קרום העצם הגולגולת calvaria עם האזמל (איור 1B)6.
- תפר עור בשני קצותיו בתפר פשוט קטע.
- הפיכת קו תפר דרך האמצע של החתך ללא knotting. החזק את שני הקצוות של קו התפר.
- הטבע µL 50 CoCrMo חלקיקים השעיה (50 mg/mL, ב- PBS) באמצע מכונות (איור 1C)2.
- מקמי תפר האחרון בתוך בתפר פשוט קטע (איור 1D).
- לשמור על עכברים עוד 2 שבועות.
3. הערכה של מודל Calvarial Osteolysis על-ידי סריקה מיקרו-CT
- להקריב העכברים עם פחמן דו-חמצני. לערוף העכברים במישור האופקי. להסיר את רקמת המוח בתוך העור, פרווה בחוץ. לקצור את מכונות לניסויים נוספים.
- לנקות בעדינות את כל הרקמות הרכות על calvaria עם פינצטה. לתקן מכונות שנוקה ב 4% paraformaldehyde ב 4 ° C עבור ה 24 Immerse את מכונות ב- PBS 24 h לפני סריקת CT-מיקרו.
- לנתח את מכונות עכברים ידי מיקרו-CT ברזולוציה גבוהה של פתרון איזומטרי של מיקרומטר 18 ו רנטגן הגדרות האנרגיה של 45 kV, 550 mA.
- לבצע שחזור תלת מימדי של מיקרו-CT נתונים עם התוכנה.
- איכותי וניתוח כמותי.
- ראשית, בחר את אזור ריבוע מסביב התפר קו האמצע אזור בעל עניין.
- שנית, למדוד צפיפות המינרלים של העצם (BMD), עצם נפח/סה כ נפח (BV/טלוויזיה), trabecular (Tb.N), עובי trabecular (Tb.Th), ההפרדה/ריווח trabecular (Tb.Sp) ומספר אחוז נקבוביות סה עם התוכנה שסופקה לסי-מיקרו
- שלישית, השווה לשלוש הקבוצות למדידות שונים מאת אנובה בכיוון אחד. עבור הוק לאחר ניתוח השונות, להחיל את שיטת Bonferroni2.
4. הערכה של מודל Calvarial Osteolysis על ידי צביעת המטוקסילין
- Decalcify calvaria דגימות ב- 15% אתילן diamine ב tetraacetic חומצה (EDTA)-PBS ב 4 º C. לשנות את הפתרון decalcification כל יום במשך 3 שבועות.
- להטביע את הדגימות decalcified פרפין עבור 2 ס"מ על 1 ס"מ x 1 ס מ קוביה, לחתוך אותם למקטעים 2 מיקרומטר באזור של חלקיקים התצהיר.
- כתם הסעיפים עם hematoxylin ותיאר אאוזין כאמור7.
- Micrographs של pathomorphism הכוללת מידיהם של מיקרוסקופ אור.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
חלקיקי ננו המיוצר ללא צורך במיקור חוץ CoCrMo היו בסביבות 50 ננומטר (שגיאת תקן של 3.56) בקוטר, כפי לכמת על ידי TEM (איור 2). לאחר חשיפה של העכבר מכונות CoCrMo חלקיקים, החיות (n = 6 לכל קבוצה) היו נשמרות רק בעוד שבועיים. בתוך השבועיים, החתך calvarial נרפא לחלוטין, התפר עלול ליפול. כל זיהום מקומי או מאי יתאחה משפיעים על הערכת אובדן עצם. אחרי העכבר הקרבה, נבצרו calvaria דגימות. לאחר מכן, כל הרקמות הרכות נוקה בעדינות, מיקרו-CT נעשה שימוש כדי לכמת את איבוד מסת העצם. תמונות שחזור תלת מימדי והן הנציגה הילתית תצלומים-חתך הרוחב, אובדן עצם משמעותית נצפתה אצל עכברים שטופלו CoCrMo חלקיקים (איור 3). צפיפות מינרלים (BMD) עצם, עצמות נפח/סה כ נפח (BV/טלוויזיה), trabecular (Tb.N) ומספר עובי trabecular (Tb.Th) הצטמצמו באופן משמעותי, בעוד נקבוביות הכולל ואת ההפרדה trabecular/מרווח (Tb.Sp) היו גדל באופן משמעותי, CoCrMo קבוצת לעומת המזויפים ובקרה מבצע הקבוצות (איור 4). מבחן t של סטודנט שימש כדי להעריך את ההבדלים בין הקבוצות, ו- p < 0.05 נחשב משמעותי סטטיסטית. יתר על כן, צביעת המטוקסילין סעיפים calvaria אישר איבוד מסת העצם אצל עכברים שטופלו CoCrMo חלקיקים (איור 5).
איור 1 : סכימטי של דגם העכבר osteolysis חלקיקים-induced (PIO). הצד השמאלי מציג את מיקום העכבר בדוגמנות. (א) הצבע לוקליזציה. לקבוע את האמצע בין שתי העיניים והאוזניים, בהתאמה, פצעים וחתכים בעור לאורך הקו ביניהם. (B) לחשוף, להסיר את קרום העצם הגולגולת calvaria. (ג) השעיה חלקיקים CoCrMo להטביע באמצע calvaria. (ד) תפר עור בתפר פשוט קטע. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
איור 2 : הילוכים מיקרוסקופ אלקטרונים סורק של חלקיקים CoCrMo. (א) נציג שידור תמונות מיקרוסקופ אלקטרונים של חלקיקים CoCrMo. (B) פילוג גודל החלקיקים של חלקיקים CoCrMo הייתה לכמת עם התוכנה. כל עמודה מייצגת תדירות מנורמל למספר הכולל של חלקיקים. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
איור 3 : ניתוח מיקרו-CT עם שחזור תלת-ממדי של דגימות הבקרה עכברים ואלה שטופלו PBS (פעולה המזויפים) וחלקיקים CoCrMo. הקו האופקי לבן מציין את המיקום של תמונת חתך הרוחב. החץ הלבן מצביע על אובדן עצם בקבוצה CoCrMo-השרשה. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
איור 4 : ניתוח כמותי של מיקרו-CT תמונות לאחר שחזור תלת מימדי- כימות של צפיפות מינרלים (BMD) עצם (א), נפח אחסון/סה כ עצם (BV/טלוויזיה) (B), אחוז הכולל נקבוביות (C), מספר trabecular (Tb.N) (D), עובי trabecular (Tb.Th) (E), ו trabecular ההפרדה/מרווח (Tb.Sp) (נ), mean±standard בטעות. מבחן t של סטודנט שימש כדי להעריך את ההבדלים בין הקבוצות, עם p < 0.05 נחשב משמעותי סטטיסטית. * *, P < 0.01; , P < 0.001. n = 6 עכברים לכל קבוצה. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
איור 5 : להחליפן בתמונות של H & E מכתים calvaria דגימות (10 ×) של בקרת עכברים ואלה שטופלו PBS (פעולה המזויפים), חלקיקים CoCrMo. חץ אדום מציין osteolysis. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
ישנן שתי שיטות עיקריות עבור ללבוש חלקיקים-induced osteolysis בעכברים: המודל אוויר-נרתיק ודגם calvarial osteolysis. במודל כיס אוויר, אוויר-נרתיק subcutaneously שנוצר קודם נוסדה, ואחריו ללבוש חלקיקים מבוא השרשה לתוך רקמת העצם8. הקיר נרתיק מחקה קרום העצם, התרופפות אספטי. עם זאת, עצם ההשתלה הוא nonvascular עם אין פעילות ביולוגית, מה שהופך את זה קשה להעריך ישירה אינטראקציות בין חלקיקים לרקמת העצם. המודל calvarial osteolysis יש כמה יתרונות על פני לכנף אוויר-כיס. ראשית, ללבישה חלקיקים ישירות נחשפים calvaria, מאפשר להעריך אינטראקציות בין חלקיקים ללבוש ועצמות הומאוסטזיס, לרבות ספיגת עצם ולאחר אוסטאובלסט, אוסטאוקלסט ו מקרופאג פעילויות9,10 . שנית, מדידות כמותיים של אובדן עצם הינם זמינים, המאפשר להערכת פוטנציאל גנטי גישות שונות ביולוגיים למניעת אובדן עצם11. שלישית, זה אפשרי להעריך את היחס בין חלקיקים ללבישה, אובדן עצם שונים רקע גנטי, כולל מהונדס, ג'ין נוקאאוט עכברים12,13. רביעית, זה יכול לשמש למסך מספר רב של תרכובות במינונים שונים. עם זאת, שיעור ההצלחה של המודל osteolysis traditionalcalvarial הוא נמוך יחסית, באמצעות עצם histomorphometry למדוד osteolysis הופך את התוצאות פחות אובייקטיבי1.
כדי לשפר את אחוזי ההצלחה של המודל ועיבוד התוצאות אובייקטיבי יותר, בוצעו מספר שינויים. ראשית, ננו חלקיקים שימשו כדי לשפר את האינטראקציה בין calvaria וללבוש חלקיקים. ואכן, האינטראקציות בין חלקיקי ננו של calvaria מוגברת בהשוואה מסחרית סגסוגת חלקיקים, בקוטר אכזרי של מיקרומטר 1.514,15. שנית, אזור2 1.0 ס מ על calvaria היה מותווה על מנת להשיג חשיפה נאותה של calvaria. שלישית, שחזור מיקרו-CT ותלת ממדית שימשו כדי לכמת את איבוד מסת העצם.
קיימות מספר מגבלות במודל הנוכחי. הראשון, מיקרו-CT ציוד עבור עכברים אינו זמין נרחב עבור חוקרים, טכנאים נדרשים עבור שחזור סריקה ותלת -ממדיים. שנית, חלקיקים CoCrMo נעשה שימוש במודל הנוכחי אינם זמינים מסחרית ולאחר הייצור שלהם מתבססת על תמיכה של טכנאים הנדסת חומרים. שלישית, מודל זה אינו מייצג כרונית אפקטים של חלקיקים על מסת העצם, חסר גורמים הלא-ביולוגיים הקשורים osteolysis, כגון לחץ הנוזלים מתנדנדות או כוחות מכני. היעילות של המודל יכול להיות עלה באופן משמעותי עם העזרה של ננו חלקיקים, מספיק חשיפה של calvaria. אובדן עצם יכול ניתן לכמת, והשיג נתונים אובייקטיביים יותר עם מיקרו-טי
מודל מאתר osteolysis calvarial נוסדה על ידי חשיפה לחלקיקים CoCrMo היא כלי אידיאלי כדי להעריך את האינטראקציות בין חלקיקים CoCrMo תאים שונים כגון מקרופאגים, fibroblasts, תאי העצם osteoclasts ב התרופפות אספטי. בנוסף, סדרת תרופות יכולה להיבדק של והשפעותיהם על התרופפות aseptic שימוש במודל זה.
ישנם שלבים קריטיים רבים של הליך זה. הראשון הוא היישום של חלקיקים CoCrMo בקוטר אכזרי של 50 ננומטר. שנית, חשיפה נאותה של calvaria הושגה. אזור2 1.0 ס מ על calvaria הספיקה במודל זה, צריך להיות גזור קרום העצם על calvaria ובזהירות לחלוטין. . הקרע ברורה של קרום העצם מעצימה את האינטראקציות בין חלקיקים calvaria. שלישית, מדידה כמותית של איבוד מסת העצם על ידי מיקרו-CT אפשרי. מדידות כמותיים של איבוד העצם של שלושה שחזור תלת-ממדי, כגון BMD, BV/טלוויזיה, Tb.N, Tb.Th, Tb.Sp, אחוז הכולל נקבוביות, להקל להבחין בין הבדלים אובדן עצם טיפולים שונים, ואף לספק ראיות מוצקות osteolysis תמועל histomorphometry העצם מסורתי.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
המחברים אין לחשוף.
Acknowledgments
מחקר זה נתמך על ידי את נבחרת מדעי הטבע קרן של סין (81572111), קליניים מדע טכנולוגיה פרויקט קרן של מחוז ג'יאנגסו (BL2012002), מדעי למחקר פרוייקט של נאנג'ינג (201402007), מדעי הטבע קרן של מחוז ג'יאנגסו (BK20161385), קרן מיוחדת התאגדות רופא סיני (2015COS0810).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| CoCrMo alloy from prosthesis | Waldemar Link GmbH & Co | GEMINI MK II | Raw material to obtain CoCrMo nanoparticles |
| Fabricated high-vacuum three-electrode direct current | College of Materials Science & Engineering , Nanjing University of Technology | Self designed machine | |
| 6 week old male C57BL/6J mice | Model animal research center of Nanjing University | N000013 | |
| 100% Ethanol | Nanjing Reagent | C0691514023 | Solvent of CoCrMo nanoparticles for transmission electron microscope scanning |
| 1.5 ml Microcentrifuge tubes | Taizhou Weierkang Medical Supplies co., LTD | W603 | |
| Microanalytical balance | Shenzhen Qun long Instrument Equipment Co,. LTD | EX125DZH | |
| Ultrasonic shaker | Shanghai Yuhao scientific instrument co., LTD | YH-200DH | To suspend CoCrMo nanoparticles |
| Transmission Electron Microscope | FEI | Tecnai G20 | |
| SimplePCI software | Compix Inc. | 6.6 version | To calculate the mean diameter and particle size distribution. |
| High-handed sterilization pan | QIULONGYIQI | KYQL-100DS | To decontaminate endotoxin |
| Limulus Amebocyte Lysate (LAL) Assay | Charles River | R13025 | To detect endotoxin |
| 15 ml Microcentrifuge tubes | Taizhou Suyi Medical | B122 | |
| Phosphate-buffered saline | Boster Biological Technology | AR0030 | Solvent of CoCrMo nanoparticles stock solution |
| Pentobarbital Sodium | Sigma | P3761 | To anesthetize mice |
| Normal saline | SACKLER | SR8572EP-15 | To prevent drying of mice eyes |
| 75% Ethanol | Nanjing Reagent | C0691560275 | Disinfection |
| Medical cotton ball | Shuitao | 1278298933 | Disinfection |
| Shaver | Kemei | KM-3018 | To shave the fur |
| Scissor | RWD LIFE SCIENCE | S12005-10 | To incise skin |
| Suture | RWD LIFE SCIENCE | F34001-01 | To suture skin |
| Needle holder | RWD LIFE SCIENCE | F33001-01 | To suture skin |
| Needle | RWD LIFE SCIENCE | R14003-12 | To suture skin |
| Vessel forceps | RWD LIFE SCIENCE | F22003-09 | To suture skin |
| Scalpel | RWD LIFE SCIENCE | S31010-01 | To harvest calvaria |
| Tweezers | RWD LIFE SCIENCE | F12006-10 | To harvest calvaria |
| 100 µL pipettes | Eppendorf | 3120000240 | To embed particles suspension in the calvatias |
| 100 µL pipette tips | AXYGEN | T-200-Y | To embed particles suspension in the calvatias |
| 5 ml Microtubes | Taizhou Weierkang Medical Supplies co., LTD | W621 | |
| 4% Paraformaldehyde | Servicebio | G1101 | Fixation |
| Micro Computed Tomography | SkyScan | SkyScan1176 | |
| Ethylene Diamine Tetraacetic Acid | Servicebio | G1105 | Decalcification |
| Paraffin | Servicebio | #0001 | |
| Paraffin slicing machine | Leica | RM2125RTS | |
| Glass slide | Servicebio | G6004 | |
| Cover glass | Servicebio | 200 | |
| HE staining kit | Servicebio | #1-5 | HE staining |
| Light microscope | Nikon | E200 |
References
- Dong, L., et al. Antisense oligonucleotide targeting TNF-alpha can suppress Co-Cr-Mo particle-induced osteolysis. J Orthop Res. 26 (8), 1114-1120 (2008).
- Deng, Z., et al. SIRT1 protects osteoblasts against particle-induced inflammatory responses and apoptosis in aseptic prosthesis loosening. Acta Biomater. 49, 541-554 (2017).
- Langlois, J., Hamadouche, M. New animal models of wear-particle osteolysis. Int Orthop. 35 (2), 245-251 (2011).
- Wang, P., Zhao, F. X., Zhang, Z. Z. Preparation of ultrafine zinc powders by DC arc plasma evaporation method. Chinese Journal of Nonferrous Metals. 21 (9), 2236-2241 (2011).
- Wang, Z., et al. The fibroblast expression of RANKL in CoCrMo-particle-induced osteolysis is mediated by ER stress and XBP1s. Acta Biomater. 24, 352-360 (2015).
- Wang, Z., et al. Autophagy mediated CoCrMo particle-induced peri-implant osteolysis by promoting osteoblast apoptosis. Autophagy. 11 (12), 2358-2369 (2015).
- Wang, R., et al. Particle-induced osteolysis mediated by endoplasmic reticulum stress in prosthesis loosening. Biomaterials. 34 (11), 2611-2623 (2013).
- Yang, S. Y., et al. Adeno-associated virus-mediated osteoprotegerin gene transfer protects against particulate polyethylene-induced osteolysis in a murine model. Arthritis Rheum. 46 (9), 2514-2523 (2002).
- Liu, N., et al. Autophagy mediated TiAl(6)V(4) particle-induced peri-implant osteolysis by promoting expression of TNF-alpha. Biochem Biophys Res Commun. 473 (1), 133-139 (2016).
- Wang, Z., et al. ER Stress Mediates TiAl6V4 Particle-Induced Peri-Implant Osteolysis by Promoting RANKL Expression in Fibroblasts. PLoS One. 10 (9), e0137774 (2015).
- Wang, Z., et al. TiAl6V4 particles promote osteoclast formation via autophagy-mediated downregulation of interferon-beta in osteocytes. Acta Biomater. 48, 489-498 (2017).
- Chen, S., et al. Lycorine suppresses RANKL-induced osteoclastogenesis in vitro and prevents ovariectomy-induced osteoporosis and titanium particle-induced osteolysis in vivo. Sci Rep. 5, 12853 (2015).
- Neuerburg, C., et al. The role of calcitonin receptor signalling in polyethylene particle-induced osteolysis. Acta Biomater. 14, 125-132 (2015).
- Catelas, I., Jacobs, J. J. Biologic activity of wear particles. Instr Course Lect. 59, 3-16 (2010).
- Liu, A., et al. The biological response to nanometre-sized polymer particles. Acta Biomater. 23, 38-51 (2015).
