Summary
Bu el yazması CoCrMo parçacıklar, aşınma partikülleri ve aseptik gevşeme çeşitli hücreler arasındaki etkileşimler değerlendirmek için ideal bir hayvan modeli oluşturan maruz bir fare grefti Osteoliz modeli açıklar.
Abstract
Aşınma parçacık kaynaklı Osteoliz aseptik gevşeme artroplasti başarısızlık büyük bir nedeni ama altta yatan mekanizma belirsizdir. Algılama ve sporadik oluşumu için gerekli takibi nedeniyle uzun, Patogenez ofparticle kaynaklı Osteoliz klinik durumlarda değerlendirmek için davet ediyor. Bu nedenle, en iyi hayvan modelleri daha fazla çalışmalar için gereklidir. Grefti Osteoliz CoCrMo parçacıklar maruz tarafından kurulan fare modeli parçacıklar ve aseptik gevşeme çeşitli hücreler arasındaki etkileşimler değerlendirmek için etkili ve geçerli bir araçtır. Bu modelde, CoCrMo parçacıklar ilk yüksek vakum üç elektrot doğru akım tarafından elde ve fosfat tamponlu tuz konsantrasyonu 50 mg/mL, resuspended. Sonra sonra kafatası kapaklarini tarafından ayrılması keskin diseksiyon elde edilen süspansiyon 50 µL fare calvaria ortasına kadar uygulandı. İki hafta sonra fareler kurban edildi ve calvaria numuneler hasat edildi; nitel ve nicel Değerlendirmeler Hematoksilen ve Eozin boyama ve mikro bilgisayarlı tomografi tarafından yapıldı. Bu modelin güçlü yordamı basitlik, kemik kaybı kantitatif değerlendirilmesi, hız Osteoliz geliştirme, potansiyel kullanım transgenik veya nakavt modelleri ve nispeten düşük maliyetli içerir. Ancak, bu model mekanik kuvvet ve aseptik gevşeme içinde parçacıklar kronik etkilerini değerlendirmek için kullanılacak uygulanamıyor. CoCrMo parçacıklar maruz tarafından oluşturulan fare grefti Osteoliz modeli aşınma partikülleri ve çeşitli hücreler, örneğin, makrofajlar, fibroblastlar, dokusunu ve aseptik gevşeme içinde Osteoklastlar, arasındaki etkileşimler değerlendirmek için ideal bir araçtır.
Introduction
Aseptik gevşeme en yaygın nedeni olan toplam kalça protezi (THA) ve total Diz protezi (TKA) hata, hangi düzeltme ameliyatı1gerektirir. Ancak, altta yatan mekanizma belirsiz2kalır. Uzun bir takip olan bir durum nadirdir, parçacık kaynaklı Osteoliz algılamak için gereklidir; Bu nedenle, klinik durumlarda onun patogenezinde keşfetmeye davet ediyor. Bu nedenle, daha fazla çalışmaları karmaşık cep ve doku mekanizmaları üzerinde odaklanarak hem in vivo deneyler parçacık kaynaklı Osteoliz modelleri ve vitro deneyleri homeostazı3kemik ile ilgili hücrelerde giymek gerektirir. Geçerli bir hayvan modeli daha da hücresel deneyleri için kanıt sağlayan kemik kaybı, aşınma partikülleri etkilerini ortaya önemlidir.
Bir fare grefti Osteoliz model CoCrMo parçacıklar maruz inşa parçacıklar ve aseptik gevşeme çeşitli hücreler arasındaki etkileşimler değerlendirmek için etkili ve geçerli bir yöntemdir. Bu modelde, CoCrMo parçacıklar grefti Osteoliz makrofajlar içinde inflamatuar sitokinlerin inducing, Osteoklastlar etkinleştirme, osteoblast yayılması inhibe ve osteoblast apoptosis teşvik neden.
Sadece bu modeli kurmak için iki hafta sürer. Osteoliz görüntülenir ve Hematoksilen Eozin (H & E) boyama ile sayısal ve mikro Bilgisayarlı Tomografi (mikro-CT)2. Buna ek olarak, bu modeli nispeten düşük maliyetli ve transgenik ve nakavt fare modelleri çeşitli dozlarda3bileşikler çok sayıda ekran için kullanılabilir vardır.
Kurmak ve bu model değerlendirmek için basit bir yöntemdir. İlk olarak, CoCrMo parçacıklar yüksek vakum üç elektrot doğru akım tarafından elde edilen ve fosfat tamponlu tuz (PBS) 50 mg/mL bir konsantrasyon, resuspended. Sonra sonra kafatası kapaklarini tarafından ayrılması keskin diseksiyon elde edilen süspansiyon 50 µL fare calvaria ortasına kadar uygulandı. Fareler iki hafta sonra kurban edildi ve calvaria örnekleri hasat edildi; nitel ve nicel analizler H & E andmicro-CT boyama tarafından gerçekleştirilmiştir
Bir fare grefti Osteoliz model CoCrMo parçacıklar maruz inşa CoCrMo parçacıklar ve makrofajlar, fibroblastlar, dokusunu ve aseptik gevşeme içinde Osteoklastlar, gibi çeşitli hücreler arasındaki etkileşimler değerlendirmek için ideal bir araçtır.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Tüm yöntem tanımlamak burada kurumsal hayvan bakım ve kullanım Komitesi (IACUC) Nanjing Üniversitesi tarafından onaylanmıştır.
1. CoCrMo parçacık hazırlık
- CoCrMo parçacıklar bir fabrikasyon yüksek vakum üç elektrot doğru akım4kullanarak elde. 10-3 Pa vakum, 0,04 MPa argon ve hidrojen 3:2 (v/v) altında alet CoCrMo alaşım ve 650 A katot geçerli yerleştirin.
- CoCrMo parçacıklar çapı ölçmek.
- 1 mg CoCrMo parçacıkların susuz etanol 1,5 mL ekleyin.
- CoCrMo parçacıklar susuz etanol ultrasonik 28 kHz ve 5 min için 600 W sallayarak resuspend.
- Bir damla (yaklaşık 20 µL) elde edilen süspansiyon transmisyon elektron mikroskobu (TEM) objektif masaya uygulanır. 200 kV ivme gerilim ve 0,24 nm çözünürlük TEM fotoğraf serisi yakalamak.
- TEM Filmler ortalama çap ve parçacık boyutu dağıtım hesaplamak için sağlanan yazılımı kullanın.
- Endotoxins dezenfekte etmek
- Basınçlı kap 15dk 121 ° C ve 15 psi için parçacıkların 50 gr.
- Endotoxins bir nicel Limulus Amebocyte Lysate (LAL) tahlil tarafından tespit (< % 0.25 EU/mL endotoksin devamsızlık belirtmek için olarak kabul)5.
- Parçacıklar fosfat tamponlu tuz (PBS) 50 mg/mL konsantrasyonu hisse senedi çözüm6olarak, resuspend.
2. inşaat grefti Osteoliz modeli
- 6 haftalık C57BL/J6 fareler (grup başına altı fareler) withpentobarbital (50 mg/kg) anestezi. Çimdik testi anestezi düzeyini değerlendirmek için kullanın. Gözleri normal salin ile kurutma önlemek.
- Fareler yüzükoyun sígara yerleştirin. Kafatası üzerinde kürk bir tıraş makinesi ile kaldırın ve % 75 etanol içeren tıbbi pamuk topları kullanarak cilt dezenfekte.
- Noktası yerelleştirme için de dahil olmak üzere iki gözüm kulağım arasında orta sırasıyla iki nokta tanımlayın. Sonra iki puan yukarıda arasındaki çizgi belirlemek ve yukarıdaki hattı boyunca cilt (şekil 1A) makasla deşmek.
- Kafatası kapaklarini bir neşter (şekil 1B)6calvaria kaldırın.
- Her iki ucunda deri ile basit kesintiye uğramış Dikiş dikiş.
- Belgili tanımlık kesme ortasına dikiş hattından knotting olmadan olun. Dikiş hattı iki ucu tut.
- CoCrMo parçacık süspansiyon (50 mg/mL, PBS), 50 µL ortasında calvarias (şekil 1 c)2gömün.
- Basit kesintiye uğramış dikiş (şekil 1 d) içinde son dikiş düğüm.
- Fareler için başka bir 2 hafta korumak.
3. mikro-CT tarama grefti Osteoliz modeli değerlendirilmesi
- Karbon dioksit ile fareler kurban. Yatay düzlemde farelerde başını kesmek. Beyin dokusu içinde ve cilt kaldırın ve dışarı kürk. Calvarias daha fazla deneyler için hasat.
- Yavaşça yukarı calvaria üzerinde tüm yumuşak doku cımbız ile temizleyin. %4 paraformaldehyde temizlenen calvarias calvarias mikro-CT tarama önce PBS 24 h 24 h bırakın için 4 ° C'de tamir et.
- Yüksek çözünürlüklü mikro-CT 18 µm izometrik bir çözünürlükte ve x-ışını enerji ayarları 45 tarafından fareler calvarias analiz kV ve 550 anne.
- Mikro-CT veri yazılımı ile üç boyutlu yeniden yapılandırma kuralları.
- Kalitatif ve kantitatif analiz.
- İlk olarak, kare bölgenin orta hat dikiş çevresinde faiz bölgesi olarak seçin.
- İkinci olarak, ölçmek kemik mineral yoğunluğu (KMY), birim/toplam kemik birim (BV/TV), Trabeküler numarası (Tb.N), Trabeküler kalınlığı (Tb.Th), Trabeküler ayırma/aralığı (Tb.Sp) ve mikro-CT için sağlanan yazılımı ile toplam gözeneklilik yüzdesi
- Üçüncü olarak, tek yönlü ANOVA tarafından çeşitli ölçümler için üç grup karşılaştırın. Öğleden hoc Varyans analizi için Bonferroni yöntem2uygulayın.
4. grefti Osteoliz Model H & E boyama tarafından değerlendirilmesi
- Calvaria örneklerinde % 15 etilen diamin tetraacetic asit (EDTA) decalcify-4 ° C'de PBS Kalsiyumun çözüm 3 hafta boyunca her gün değiştirin.
- Parafin bir 2 cm x 1 cm x 1 cm küp için decalcified örnekleri katıştır ve onları 2 µm bölümlere partikül yükünün alanında dilim.
- Hematoksilen bölümlerle leke ve Eozin daha önce7açıklandığı gibi.
- Genel pathomorphism Filmler tarafından ışık mikroskobu yakalamak.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Kurum içi üretilen Nano CoCrMo parçacıklar 50 civarında olduğunu TEM (Şekil 2) tarafından sayısal olarak çapı, nm (3,56 standart hatası). Fare calvarias maruz CoCrMo parçacıklar, hayvanlar için kaldıktan sonra (n = 6 grup başına) için başka bir iki hafta muhafaza. İki hafta içinde grefti kesi tamamen iyileşmiş olarak ve dikişi düşebilir. Herhangi bir yerel enfeksiyon veya sendikasız Mayıs kemik kaybı değerlendirme etkiler. Fare kurbandan sonra calvaria örnekleri hasat edildi. O zaman, tüm yumuşak doku yavaşça temizlendi ve mikro-CT kemik kaybı ölçmek için kullanılan. Üç boyutlu rekonstrüksiyon görüntüleri ve kesit temsilcisi koronal fotoğraflara önemli kemik kaybı CoCrMo parçacıklar (şekil 3) ile tedavi farelerde gözlendi. Kemik mineral yoğunluğu (KMY), birim/toplam kemik hacmi (BV/TV), Trabeküler numarası (Tb.N) ve Trabeküler kalınlığı (Tb.Th) azaltılacağını, toplam porozite ve Trabeküler ayırma/aralığı (Tb.Sp) önemli ölçüde CoCrMo içinde artarken Grup denetimi ve sham grupları işlemi (şekil 4) ile karşılaştırıldığında. Öğrenci t Testi grupları ve p arasındaki farklılıkları değerlendirmek için kullanılan < 0,05 olarak istatistiksel olarak anlamlı kabul. Ayrıca, H & E calvaria bölümlerini boyama CoCrMo parçacıklar (şekil 5) ile tedavi farelerde kemik kaybı doğruladı.
Resim 1 : Parçacık kaynaklı Osteoliz (PIO) fare modeli şematik. Sol taraf modelleme fare bulunduğu gösterir. (A) yerelleştirme üzerine gelin. Orta iki gözüm kulağım arasında sırasıyla belirlemek ve aralarındaki çizgi boyunca cilt deşmek. (B) maruz ve kafatası kapaklarini calvaria kaldırmak. (C) Embed CoCrMo parçacık süspansiyon calvaria ortasında. (D) basit kesintiye uğramış dikiş deride dikiş. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Resim 2 : İletim CoCrMo parçacıkların elektron mikroskobu tarama. (A) temsilcisi transmisyon elektron mikroskobu görüntüleri CoCrMo parçacıkların. (B) yazılımı ile parçacık boyutu dağıtım CoCrMo parçacıkların sayısal. Her çubuk parçacıklarının toplam sayısı için normalleştirilmiş frekans temsil eder. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 3 : Mikro-CT analizi ile kontrol fare ve bu örnekleri 3 boyutlu rekonstrüksiyon tedavi PBS (sahte işlem) ve CoCrMo parçacıkları ile. Beyaz yatay çizgi kesit görüntü konumunu gösterir. Beyaz ok CoCrMo implantasyon grubunda kemik kaybı olduğunu gösterir. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 4 : Üç boyutlu yeniden yapılandırma sonra mikro-CT görüntülerin kantitatif analiz. Miktar kemik mineral yoğunluğu (KMY) (A), kemik birim/toplam cilt (BV/TV) (B), yüzde toplam porozite (C), Trabeküler numarası (Tb.N) (D), Trabeküler kalınlığı (Tb.Th) (E), ve ve Trabeküler ayırma/aralığı (Tb.Sp) (F), ortalama±standart hatalı. Öğrenci t Testi gruplarıyla p arasındaki farklılıkları değerlendirmek için kullanılan < 0,05 istatistiksel olarak anlamlı kabul. **, P < 0,01; , P < 0,001. n grubu başına 6 fare =. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 5 : H & E calvaria örnekleri (10 ×) kontrol fare ve o boyama temsilcisi görüntüleri tedavi PBS (sahte işlem) ve CoCrMo parçacık. Kırmızı ok Osteoliz gösterir. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Aşınma parçacık kaynaklı Osteoliz farelerde için iki ana yöntem vardır: hava kesesi modeli ve grefti Osteoliz modeli. Hava kesesi modelinde, subkutan oluşturulan bir hava kesesi ilk, aşınma parçacık giriş ve implantasyon kemik doku8ardından kuruldu. Kese duvar aseptik gevşeme içinde kapaklarini taklit eder. Ancak, kemik implantasyon parçacıklar ve kemik doku arasındaki doğrudan etkileşim değerlendirmek zordur hiçbir biyolojik etkinlik ile nonvascular. Grefti Osteoliz model hava kesesi muadili birçok avantajı vardır. İlk olarak, aşınma partikülleri doğrudan aşınma partikülleri arasındaki etkileşimler değerlendirmek ve kemik rezorpsiyonu ve osteoblast, Osteoklast ve makrofaj faaliyetleri9,10 da dahil olmak üzere Homeostazı, kemik edinerek calvaria için maruz kalmaktadır . İkinci olarak, kemik kaybı nicel ölçümler çeşitli olası genetik yaklaşımlar ve biyolojik ajanlar değerlendirilmesi kemik kaybı önleme11' izin kullanılabilir. Üçüncü olarak, aşınma partikülleri ve kemik kaybı çeşitli transgenik dahil olmak üzere genetik arka planlar, ve gen nakavt fareler12,13arasındaki ilişki değerlendirmek mümkündür. Dördüncüsü, çeşitli dozda bileşikler çok sayıda ekran için kullanılabilir. Ancak, traditionalcalvarial Osteoliz modeli başarı oranı nispeten düşüktür ve Kemik Histomorfometri Osteoliz ölçmek için kullanarak sonuçları objektif1daha az yapar.
Model başarı oranını artırmak ve sonuçları daha nesnel işlemek için çeşitli değişiklikler yapılmıştır. İlk olarak, Nano parçacıklar calvaria arasındaki etkileşimleri geliştirmek ve parçacıklar giymek için kullanılmıştır. Nitekim, Nano parçacıklar ve calvaria arasındaki etkileşimler gelişmiş ticari alaşım parçacıkları, 1,5 µm14,15ortalama çapı ile karşılaştırıldığında. İkinci olarak, calvaria bir 1.0 cm2 alanı calvaria yeterli pozlama elde etmek için belirlenen. Üçüncü olarak, mikro-CT ve üç boyutlu rekonstrüksiyon kemik kaybı ölçmek için kullanılmıştır.
Mevcut modelindeki bazı sınırlamaları vardır. İlk, mikro-CT ekipman fareler için araştırmacılar için yaygın olarak kullanılabilir değildir ve teknisyenleri için tarama ve üç boyutlu yeniden yapılandırma gereklidir. İkinci olarak, mevcut modelinde kullanılan CoCrMo nano tanecikleri ticari olarak mevcut değildir ve malzeme bilimi teknisyenlerden destek üretim dayanan. Üçüncü olarak, bu model parçacıklar kronik etkileri kemik kitle üzerinde temsil etmez ve salınım sıvı basıncı veya mekanik Kuvvetleri gibi mekanizmaları ile ilgili biyolojik olmayan faktörler yoksun. Modelinin etkinliğini önemli ölçüde Nano parçacıkların yardım ve calvaria yeterli pozlama ile artış. Kemik kaybı sayılabilir ve mikro-CT ile elde edilen daha objektif veriler
CoCrMo parçacıklar maruz tarafından kurulan bir fare grefti Osteoliz modeli CoCrMo parçacıklar ve makrofajlar, fibroblastlar, dokusunu ve aseptik gevşeme içinde Osteoklastlar gibi farklı hücreleri arasındaki etkileşimler değerlendirmek için ideal bir araçtır. Buna ek olarak, ilaçlar bir dizi bu modeli kullanan aseptik gevşeme üzerinde etkileri test edilebilir.
Bu yordamın birçok kritik adımlar vardır. CoCrMo nano tanecikleri 50 ortalama büyüklüğündeki ilk uygulamadır nm. İkinci olarak, calvaria yeterli pozlama elde edildi. Calvaria bir 1.0 cm2 alanı bu modelde benziyordu ve kapaklarini calvaria üzerinde dikkatle ve tamamen disseke. Kapaklarini açık bir diseksiyon parçacıklar ve calvaria arasındaki etkileşimler yoğunlaşıyor. Üçüncü olarak, mikro-CT tarafından kemik kaybı bir nicel ölçüm mümkündür. BMD, BV/TV, Tb.N, Tb.Th, Tb.Sp ve toplam gözeneklilik, yüzdesi gibi üç boyutlu rekonstrüksiyon kemik kaybı nicel ölçümler çeşitli tedaviler kemik kaybı farklılıkları ayırt etmek kolaylaştırmak ve sağlam kanıtı sağlamak Osteoliz geleneksel Kemik Histomorfometri ile karşılaştırıldığında.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Yazarlar ifşa gerek yok.
Acknowledgments
Bu çalışmada Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı Çin (81572111), klinik bilim ve teknoloji proje Vakfı, Jiangsu Province (BL2012002), bilimsel araştırma projesi, Nanjing (201402007), Doğa Bilimleri tarafından desteklenmiştir Jiangsu eyaleti (BK20161385) temeli ve Çince Tıp doktor Derneği (2015COS0810) özel temeli.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| CoCrMo alloy from prosthesis | Waldemar Link GmbH & Co | GEMINI MK II | Raw material to obtain CoCrMo nanoparticles |
| Fabricated high-vacuum three-electrode direct current | College of Materials Science & Engineering , Nanjing University of Technology | Self designed machine | |
| 6 week old male C57BL/6J mice | Model animal research center of Nanjing University | N000013 | |
| 100% Ethanol | Nanjing Reagent | C0691514023 | Solvent of CoCrMo nanoparticles for transmission electron microscope scanning |
| 1.5 ml Microcentrifuge tubes | Taizhou Weierkang Medical Supplies co., LTD | W603 | |
| Microanalytical balance | Shenzhen Qun long Instrument Equipment Co,. LTD | EX125DZH | |
| Ultrasonic shaker | Shanghai Yuhao scientific instrument co., LTD | YH-200DH | To suspend CoCrMo nanoparticles |
| Transmission Electron Microscope | FEI | Tecnai G20 | |
| SimplePCI software | Compix Inc. | 6.6 version | To calculate the mean diameter and particle size distribution. |
| High-handed sterilization pan | QIULONGYIQI | KYQL-100DS | To decontaminate endotoxin |
| Limulus Amebocyte Lysate (LAL) Assay | Charles River | R13025 | To detect endotoxin |
| 15 ml Microcentrifuge tubes | Taizhou Suyi Medical | B122 | |
| Phosphate-buffered saline | Boster Biological Technology | AR0030 | Solvent of CoCrMo nanoparticles stock solution |
| Pentobarbital Sodium | Sigma | P3761 | To anesthetize mice |
| Normal saline | SACKLER | SR8572EP-15 | To prevent drying of mice eyes |
| 75% Ethanol | Nanjing Reagent | C0691560275 | Disinfection |
| Medical cotton ball | Shuitao | 1278298933 | Disinfection |
| Shaver | Kemei | KM-3018 | To shave the fur |
| Scissor | RWD LIFE SCIENCE | S12005-10 | To incise skin |
| Suture | RWD LIFE SCIENCE | F34001-01 | To suture skin |
| Needle holder | RWD LIFE SCIENCE | F33001-01 | To suture skin |
| Needle | RWD LIFE SCIENCE | R14003-12 | To suture skin |
| Vessel forceps | RWD LIFE SCIENCE | F22003-09 | To suture skin |
| Scalpel | RWD LIFE SCIENCE | S31010-01 | To harvest calvaria |
| Tweezers | RWD LIFE SCIENCE | F12006-10 | To harvest calvaria |
| 100 µL pipettes | Eppendorf | 3120000240 | To embed particles suspension in the calvatias |
| 100 µL pipette tips | AXYGEN | T-200-Y | To embed particles suspension in the calvatias |
| 5 ml Microtubes | Taizhou Weierkang Medical Supplies co., LTD | W621 | |
| 4% Paraformaldehyde | Servicebio | G1101 | Fixation |
| Micro Computed Tomography | SkyScan | SkyScan1176 | |
| Ethylene Diamine Tetraacetic Acid | Servicebio | G1105 | Decalcification |
| Paraffin | Servicebio | #0001 | |
| Paraffin slicing machine | Leica | RM2125RTS | |
| Glass slide | Servicebio | G6004 | |
| Cover glass | Servicebio | 200 | |
| HE staining kit | Servicebio | #1-5 | HE staining |
| Light microscope | Nikon | E200 |
References
- Dong, L., et al. Antisense oligonucleotide targeting TNF-alpha can suppress Co-Cr-Mo particle-induced osteolysis. J Orthop Res. 26 (8), 1114-1120 (2008).
- Deng, Z., et al. SIRT1 protects osteoblasts against particle-induced inflammatory responses and apoptosis in aseptic prosthesis loosening. Acta Biomater. 49, 541-554 (2017).
- Langlois, J., Hamadouche, M. New animal models of wear-particle osteolysis. Int Orthop. 35 (2), 245-251 (2011).
- Wang, P., Zhao, F. X., Zhang, Z. Z. Preparation of ultrafine zinc powders by DC arc plasma evaporation method. Chinese Journal of Nonferrous Metals. 21 (9), 2236-2241 (2011).
- Wang, Z., et al. The fibroblast expression of RANKL in CoCrMo-particle-induced osteolysis is mediated by ER stress and XBP1s. Acta Biomater. 24, 352-360 (2015).
- Wang, Z., et al. Autophagy mediated CoCrMo particle-induced peri-implant osteolysis by promoting osteoblast apoptosis. Autophagy. 11 (12), 2358-2369 (2015).
- Wang, R., et al. Particle-induced osteolysis mediated by endoplasmic reticulum stress in prosthesis loosening. Biomaterials. 34 (11), 2611-2623 (2013).
- Yang, S. Y., et al. Adeno-associated virus-mediated osteoprotegerin gene transfer protects against particulate polyethylene-induced osteolysis in a murine model. Arthritis Rheum. 46 (9), 2514-2523 (2002).
- Liu, N., et al. Autophagy mediated TiAl(6)V(4) particle-induced peri-implant osteolysis by promoting expression of TNF-alpha. Biochem Biophys Res Commun. 473 (1), 133-139 (2016).
- Wang, Z., et al. ER Stress Mediates TiAl6V4 Particle-Induced Peri-Implant Osteolysis by Promoting RANKL Expression in Fibroblasts. PLoS One. 10 (9), e0137774 (2015).
- Wang, Z., et al. TiAl6V4 particles promote osteoclast formation via autophagy-mediated downregulation of interferon-beta in osteocytes. Acta Biomater. 48, 489-498 (2017).
- Chen, S., et al. Lycorine suppresses RANKL-induced osteoclastogenesis in vitro and prevents ovariectomy-induced osteoporosis and titanium particle-induced osteolysis in vivo. Sci Rep. 5, 12853 (2015).
- Neuerburg, C., et al. The role of calcitonin receptor signalling in polyethylene particle-induced osteolysis. Acta Biomater. 14, 125-132 (2015).
- Catelas, I., Jacobs, J. J. Biologic activity of wear particles. Instr Course Lect. 59, 3-16 (2010).
- Liu, A., et al. The biological response to nanometre-sized polymer particles. Acta Biomater. 23, 38-51 (2015).
