Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

رصد آثار مستعمرة-مستوى التعرض لمبيدات الآفات المقاسة على نحل العسل

Published: November 15, 2017 doi: 10.3791/56355

Summary

قد تؤثر الجرعات المقاسة من مبيدات الآفات المستعمرات في الطرق التي يصعب كشفها باستخدام أساليب الدوري أو المرئي فقط. أساليب لقياس كتلة مجموع النحل الكبار، الحضنة، والموارد الغذائية بوزنها خلايا وأجزاء الخلية وتصوير الإطارات، وتركيب أجهزة استشعار، وتقدم. ويتناول أيضا تحليل البيانات.

Abstract

آثار التعرض لمبيدات الهوام المقاسة لعسل النحل المستعمرات قد تكون كبيرة ولكن يصعب اكتشافها في الحقل باستخدام أساليب التقييم البصرية القياسية. هنا يمكننا وصف أساليب لقياس كميات النحل الكبار، الحضنة، والموارد الغذائية بوزنها خلايا وأجزاء الخلية وتصوير الإطارات، وتركيب خلايا جداول، ومع أجهزة الاستشعار الداخلية. ثم يتم دمج البيانات من هذه التقييمات الدورية مع تشغيل البيانات ديترينديد متوسط واليومية في خلية الوزن ودرجة الحرارة الداخلية خلية. وقد استخدمت مجموعات البيانات الناتجة للكشف عن آثار مستعمرة-مستوى ايميداكلوبريد المطبقة في شراب سكر منخفضة تصل إلى 5 أجزاء في البليون. الأساليب هي الهدف وتتطلب القليل من التدريب، وتقديم السجلات الدائمة في النموذج الناتج الاستشعار والصور الفوتوغرافية.

Introduction

وقد أثيرت شواغل مؤخرا حول التعرض لعسل النحل بتركيزات منخفضة من المواد الكيميائية الزراعية، خاصة مبيدات الآفات. يمكن أن يتعرض لها عسل النحل في الميدان عن طريق التطبيق المباشر في باحثات في الميدان أو حتى المستعمرات أنفسهم، بالاتصال مع الأسطح المعالجة والغبار من العلاجات البذور، واستهلاك المنتجات النباتية مثل حبوب اللقاح والرحيق والإفرازات1 , 2 , 3 , 4 , 5-السمية الحادة وضوح تضر عسل النحل، ولكن تركيزات أن أسباب الوفيات 50% في اختبار الحشرات (LC50) العديد من مبيدات الآفات، بما في ذلك neonicotinoids مثل ايميداكلوبريد، أعلى بكثير من التي لوحظت في خبز النحل والشمع6 وتعتبر أعلى من ما هو نطاق حقل "واقعية"7. ومع ذلك، قد أظهرت الأعمال الأخيرة تأثيرات التعرض المقاسة لمبيدات الآفات على مستعمرة مستوى8، حتى بالنسبة لتركيزات منخفضة تصل إلى 5 أجزاء لكل بليون (ppb)9.

عسل النحل المستعمرات قد تم يشار إلى "سوبيرورجانيسمس" لأن العديد من الوظائف المرتبطة بحيوان فردية، بما في ذلك شراء الأغذية، الاستنساخ (مستعمرات نحلة العسل التي تجري عن طريق الأنشطار مستعمرة)، والتحكم في درجة الحرارة، وتجري قبل مجموعات من العمال الكبار النحل10،11،12،،من1314. المستعمرات نحلة العسل، تعتبر الكائنات الحية، توفر فرصة فريدة لدراسة لأنه يمكن تفكيك الهياكل التي تدعم المستعمرات، درست، وتجميعها، إذا فعلت بعناية، آثار سلبية قليلة، أو لا. النحالين والباحثين الاستفادة من هذا بتفكيك خلايا لتفتيشها، من بين أمور أخرى، ووجود وحالة كفاية الملكة والآفات ومسببات الأمراض ومخازن الأغذية، كمية الحضنة، وغيرها من العوامل15. مستعمرات النحل لها سمة هامة أخرى في ذلك، وخلافا لمعظم قد، فهي عادة ثابتة والحصول على الموارد عن طريق نشر محصده النحل التي يمكن جمع الغذاء على مسافات تصل إلى 10 كم16. خلايا النحل يمكن وبالتالي الحفاظ عليه إلى أجل غير مسمى في موازين إلكترونية، وقد تبين البيانات الناتجة عن الوزن المستمر لتوفير المعلومات في تخزين العسل، تستخدم علفاً للنشاط، وتستخدم علفاً للنجاح، ويحتشدون، استهلاك شراب، قاتلة والمقاسه آثار مبيدات الآفات، والإصابة بالآفات وسرقة9،،من1718،،من1920. لأنه يمكن الوصول إليها من جميع أنحاء المستعمرة، بما في ذلك الحضنة،، أجهزة استشعار لدرجة الحرارة والرطوبة، CO2والصوت، وغيرها من العوامل يمكن تركيبها داخل الخلية وتستخدم للحصول على البيانات المستمرة التي أبلغ عن الصحة وحالة مستعمرة 21.

تقديرات حجم السكان الحضنة والنحل الكبار مفيدة إذا كانت غير حاسمة بالنسبة لتفسير العديد من أنواع البيانات المستمرة. تقييمات المرئي يتم تطبيق سريع وعلى نطاق واسع في ميدان الدراسات22 ولكن أوجه القصور. التفتيش البصري تجري عادة خلال النهار وهكذا لا تراعي النحل مساحات العلف، الذي يمكن أن يؤلف جزء كبير من السكان23. الدقة ودقة التقديرات من عمليات التفتيش البصري تعتمد أيضا على التدريب والخبرة من. الموضوعية اعتبار آخر، لا سيما إذا كان المفتشون خلية ندرك التي خلايا في أي المجموعات المعاملة؛ قد يكون من الصعب تبرير افتراضات بشأن توزيع الخطأ لهذه التدابير.

من المتوقع أن يختلف كمياً بين المستعمرات الكبيرة والصغيرة، حتى قياس ومراقبة لحجم مستعمرة كثيرا معدل خلية في الوزن، حجم السكان مساحات العلف، ودرجات الحرارة داخل الخلية، تقديم أمثلة قليلة، يسهل الكشف عن آثار العلاج في تجارب معشاة ذات شواهد. لأغراض البحوث، وضعت مقياس دقيق وموضوعي للنحل الكبار أساس في المبدأ القائل بأن الفرق بين الخلية إجمالي الوزن خلال فترة من عدم النشاط، كما هو الحال في الليل، ومجموع الوزن من جميع أجزاء الخلية (بما في ذلك وودينواري والشمع والعسل والحضنه) هو وزن النحل الكبار الإجمالي الشامل. وزنها الإطارات وقياس كتلة الحضنة باستخدام الصور الفوتوغرافية الإطار، وبالمثل يمكن تقدير الموارد الغذائية بطرح كتلة أمهات من وزن الإطار، بعد ضبط للأوزان لأن الإطار الفارغ والشمع. هذه الأساليب تهدف إلى تحسين الدقة المتوقعة من تقييمات البصرية في الميدان.

Protocol

البروتوكولات المبينة أدناه اتبع المبادئ التوجيهية الرعاية الحيوانية من "دائرة البحوث الزراعية بوزارة الزراعة"-

1-"التقييم الكامل"

ملاحظة: من الضروري إجراء تقييم كامل لتحديد 1) أوزان جميع أجزاء الخلية، بما في ذلك الغطاء وغطاء، مربعات، المجلس السفلي، والإطارات و 2) مبالغ الموارد الحضنة والغذاء. سيتم تلخيص أوزان جميع أجزاء الخلية ومطروحاً من الوزن الإجمالي خلية عند النحل جميع حاضرين تسفر عن وزن جميع النحل الكبار. يمكن الاحتفاظ بالبيانات في أوزان أجزاء الخلية التي ثابتة إلى حد كبير، مثل الغطاء، والمجلس الأسفل وعليها، وتستخدم التقييمات، وبالتالي التعجيل بعمليات التقييم في المستقبل. إجراء تقييم كامل في أو بالقرب من بداية الدراسة. قد تتغير الأجزاء الخشبية من حيث الرطوبة المحتوى 24 تكرار ذلك ينصح التقييمات الكاملة بعد فترات طويلة. وزن جزء من الخلية، مثل الغطاء، وفي كل تقييم لتقدير التغيرات في أجزاء أخرى من الخلية. ضع دهليز فرزهم حول العمال وخلية أثناء التقييم إذا كان بالقرب من خلايا أخرى وسرقة الضغط مصدر قلق-

  1. تزن جميع أجزاء الخلية. استخدام نطاق بدقة 1 جرام أو أقل-
    1. وزن الغطاء والغلاف الداخلي واستبعاد الملكة، وتغذية شراب وأية أجزاء أخرى على رأس الخلية.
    2. باستخدام أداة البسط أو خلية، إزالة، وتزن أي مواد غذائية أو العلاج، مثل البروتين الملحق أو الشحوم باتي، يستريح على قمم الإطارات. استبدال بعد ذلك إذا لزم الأمر.
    3. ضع مربع خلية فارغة (يشار إليها فيما بعد " مربع مؤقت ") بجوار الخلية لتكون بمثابة موقع الانتقالية للإطارات. ضع مربع مؤقت فوق سطح مستو، مثل غطاء أو لوحة أسفل، للحيلولة دون حصول النحل، ولا سيما الملكة، التي تقع خارج منطقة الجزاء على الأرض-
    4. تحريك الإطارات بسرعة ولطف، يفضل أن يكون ذلك في مجموعات من اثنين أو ثلاثة للاحتفاظ بأجزاء من الكتلة النحل، إلى مربع مؤقت حيث الإطارات بنفس الترتيب كما كانت في المربع الأصلي. مرة واحدة كل ما تم نقل الإطارات، اهتز المتبقية أي النحل على الإطارات في المؤقتة مربع وتزن مربع خلية.
    5. إذا كان المربع مربع أدنى، تزن المجلس السفلي ومدخل المخفض وأية أجزاء أخرى من الخلية بعد الهز النحل داخل المربع مؤقتة. عدد الإطارات مع علامة لا تمحى قبل أن ينتقل منها حتى يمكن الاستعاضة عنهما في اتجاهها الأصلي-
    6. تثبيت المجلس السفلي ومدخل المخفض، مربع الحضنة، ومعدات أخرى. نقل الإطارات من مربع مؤقت مرة أخرى إلى مربع الحضنة الأصلي في ترتيبها الأصلي والتوجه، ومرة أخرى مع الحرص على تجنب الاضطرابات غير الضرورية من النحل-
  2. إزالة إطار من نهاية واحد من المربع وبصريا التفتيش على كلا الوجهين من الإطار لوجود الملكة. إذا تم العثور على الملكة لها مكان برفق في جزء من مربع الفعل تم تقييمه، لتجنب المزيد من الاضطرابات. اهتز الشغالات بلطف ولكن بحزم في مربع بين الإطارات، بدلاً من التركيز على أعلى، إذا كان ذلك ممكناً-
  3. وزن الإطار والصورة كلا الجانبين الإطار بأكمله مع كاميرا رقمية، والحصول على أقرب ما أمكن للإطار حتى توج الحضنة وخلايا العسل وتتميز بسهولة، ولكن على مسافة كافية بحيث يتم تضمين كامل الإطار. صورة الإطار بينما عامل آخر يحمل عليه.
    1. استخدام ' حامل الإطار ' (أي الرقصة التي يحمل الإطار تستقيم مع مقياس ولا مار المشط) بالمقياس. وزن مغذيات شراب داخل الخلية.
      ملاحظة: سيتم استخدام حجم الإطار في الصورة لتحويل المناطق السطحية من نسبة إلى تدابير المطلقة.
  4. استبدال الإطار في موضعه الأصلي والتوجه في المربع خلية. إزالة الإطار التالي قبل إعادة تثبيت الإطار السابق لتوفير مزيد من المساحة لهز النحل بأمان داخل المربع. التحقق من وجود الملكة ويهز لإزالة النحل، ووزنها، وصورة فوتوغرافية، واستبدال كل إطار اللاحقة حتى تم تجهيز جميع الأطر.
  5. إذا كانت الخلية اثنين أو أكثر من مربعات، تزن وتصوير الإطارات من مربع أدنى أولاً.
    1. إزالة المربع العلوي أو مربعات تسلسلياً، التراص لهم بجوار الخلية في الاتجاه المعاكس إلى ترتيبها الأصلي. مرة واحدة وقد تم تقييم المربع السفلي، مكان المربع التالي إلى تقييم أعلى المربع السفلي، ضع مربع مؤقت فوق مربعات مقيم المتبقية، ونقل إطارات من المربع الثاني إلى المربع مؤقتة، كما ذكر أعلاه. نقل الإطارات مرة أخرى على المربع الأصلي، في اتجاهها الأصلي-
      ملاحظة: بتفتيش صناديق الدنيا ستسقط النحل أولاً، اهتزت في مربع خلية الذي سيتم لم يعد الانزعاج.
  6. الحصول على خلية إجمالي الوزن أثناء فترة الخمول، مثل الليل أو الصباح الباكر قبل أن تحلق النحل في يوم التقييم الأخيرة. يمثل هذا الوزن مستعمرة كاملة بما في ذلك باحثات.
  7. حساب كتلة النحل الكبار بجمع أوزان جميع أجزاء الخلية (وودينواري، والإطارات، وتغذية النحل، إلخ) ومن ثم طرح هذا المبلغ من " مجموع الوزن خلية " القيمة التي تم الحصول عليها في الخطوة السابقة. الفرق بين الاثنين تقدير للنحل الكبار ماساشوستس
    ملاحظة: بمجرد إجراء تقييم كامل، يمكن إجراء التقييمات اللاحقة على أساس جزئي، على افتراض أجزاء الخلية غير الإطار، مثل المربعات والمجلس السفلي، لم تتغير ملحوظ في الوزن. يستغرق وقتاً أقل من التقييمات الجزئية.
  8. أن إجراء تقييم جزئي لخلية مع مربع واحد، وإزالة، وتصوير، ووزن، واستبدال الإطارات دون تحريك الإطارات إلى مربع مؤقت. في خلية مع مربعات متعددة، اتبع الإجراء كما هو موضح أعلاه (الخطوة 1، 5)، ولكن دون وزنها المربعين خلية.

2. تركيب خلايا النحل في جداول

ملاحظة: جداول الخلية المستخدمة في هذه الدراسة جداول هيئة المحكمة الإلكترونية في الهواء الطلق بأقصى قدرة على الأقل 100 كجم، بدقة خلية تحميل جزء واحد في 5000 مع تعويض درجة الحرارة، عموم حجم 460 مم × 610 مم. هذه المقاييس ترتبط بمؤشر 24 فولت تيار مستمر و datalogger 12 بت. قد يكون مؤشر الإخراج الرقمي أو التمثيلي؛ مقياس النظم المستخدمة هنا كان الإخراج في mA والمعايرة المطلوبة منحنيات لتحويل البيانات إلى كجم

جداول
  1. تثبيت على سطح ثابت ومستوى-
    ملاحظة: رفع الجداول من الأرض باستخدام كتل الخرسانة أو السيراميك، أو قطع من الخشب المجفف الفرن، سيبقى حجم والتوصيلات الكهربائية من اتصالهم التربة أو المياه-
  2. تغطي عموم المقياس على أعلى مع البلاستيك، القماش، الورق المقوى، أو مواد أخرى لمنع انعكاس الضوء المفرط والتدفئة من مدخل الخلية.
  3. التأكد من أن مداخل إلى خلايا النحل التي قريبة من بعضها البعض من مواجهة اتجاهات مختلفة للحد من الانجراف بين المستعمرات.
  4. خلية معايرة المقاييس عند التثبيت ودوريا بعد ذلك، خاصة إذا تم نقل الجداول. وسجل الإخراج مقياس
    1. مكان مقياس معايرة الأوزان على أن ترجيح عموم. التأكد من أن الأوزان الإجمالية تتجاوز 50% السعة القصوى للمقياس.
      ملاحظة: إذا كان إخراج مقياس الجهد الكهربي أو الوحدات الحالية، بدلاً من وحدات جماعية، ثم استخدم الميل والتقاطع منحنى المعايرة (العلاقة بين إجمالي وزن المعروفة في عموم ونطاق الإخراج) لتحويل جدول الإخراج إلى وحدات جماعية.

3. تركيب "أجهزة استشعار درجة الحرارة"

ملاحظة: درجة الحرارة أجهزة الاستشعار المستخدمة في هذه الدراسة كانوا من نوعين: 1) المزدوجات الحرارية المرفقة للكابلات التي تتصل مباشرة البطارية datalogger (التي قد توضع داخل أو خارج خلية، إذا كان الكبل طويلة بما يكفي)؛ و 2) الأجهزة الصغيرة، والبطارية مع أجهزة الاستشعار المتكاملة وداتالوجيرس، والتي تتطلب إزالة من الخلية للبيانات ليتم تحميلها.

  1. الحصول على جهاز استشعار درجة حرارة التي يمكن أن تلائم بين الإطارات، مقاومة لظروف الرطوبة العالية في المناطق الداخلية لخلية، وما يكفي من طاقة البطارية والذاكرة (أو يمكن الوصول إليه، عن طريق كابل أو اتصال لاسلكي).
  2. مكان أجهزة الاستشعار التي يمكن أن تتأثر بالشمع أو دنج في حاوية واقية، مثل أنسجة التضمين كاسيت (علبة بلاستيكية صغيرة، ويمكن التخلص منها مع غطاء إغلاق الأداة الإضافية وفتحات التهوية). الحاوية الواقية يقلل تراكم الشمع ودنج التي يمكن أن تسد منافذ الوصول إلى أجهزة الاستشعار من أجهزة الاستشعار أو خلاف ذلك يؤثر على تحميل البيانات.
  3. إرفاق جهاز استشعار فقط أسفل الشريط العلوي في مركز المربع لتوفير بيانات مفيدة في تربية الحضنة (انظر أدناه)-
    ملاحظة: يتم إرفاق قطعة قصيرة من السلك إلى الحاوية مع أجهزة الاستشعار وسلك تدبيس إلى الجزء العلوي من الإطار، حيث الحاوية معلقة أسفل جانب واحد. أجهزة الاستشعار التي وضعها مباشرة على كتلة الحضنة قد تتداخل مع الحضنة وصيانة مشط، وأجهزة الاستشعار التي وضعت في إطارات بالقرب من الخارجي، أو على أغلفة داخلية أو أغطية، قد تتأثر قدرا كبيرا من الظروف الخارجية، خاصة خلال الطقس البارد.

4. التحضير "العلاج شراب"

ملاحظة: جعل الحلول معاملة جديدة في اليوم لتغذية كل استخدام ايميداكلوبريد التحليلية الصف. اميداكلوبريد هو الغاية المياه القابلة للذوبان وذلك بسهولة إدماجه في شراب؛ بعض مبيدات الآفات منخفضة الذوبان في الماء وينبغي تطبيقها باستخدام وسائل أخرى. وطبقت تركيبات من 1 كغم من الحل العلاج باستخدام زجاجة بلاستيكية 1 لتر كما يلي:

w:w
  1. مزيج محلول السكروز التحكم (لا مبيد آفات) 1:1 (مثلاً 500 غرام السكروز: 500 مل ماء مقطر). تسخين السكروز تذوب في الماء المقطر استخدام قارورة خلط كبير مع شريط خلط على صفيحة ساخنة لأي أكثر من 60 درجة مئوية.
  2. للحلول التي ستشمل ايميداكلوبريد، خلط محلول السكروز كالمذكورة أعلاه، ولكن حجب 100 مل (وبالتالي " قصيرة ") للسماح بإضافة حجم كل منها ايميداكلوبريد " سبايك " الحلول.
    1. حل 500 جم من السكر في 400 مل ماء المقطر السماح لإضافة ارتفاع 100 مل لتحقيق 1 كغم من الحل العلاج. لمزيد من الراحة في الميدان، نقل 900 غ من " قصيرة " السكر الحل إلى زجاجة أخرى، ثم إضافة المصطلحات الخاصة لكل زجاجة الفردية.
  3. تعد حلاً أسهم ايميداكلوبريد 10 أجزاء من المليون بقياس 1.0 ملغ من مبيدات الآفات على توازن التحليلي وحلها في 100 مل ماء المقطر استخدام شريط خلط دون الحرارة.
    ملاحظة: لتجنب مشاكل مع الكهرباء الساكنة، تزن في ايميداكلوبريد في أوعية بلاستيكية صغيرة، نونريكتيفي ووضع تلك الأوعية مباشرة في الحل. إثارة الحل وإزالة الأوعية بعد قد حلت ايميداكلوبريد-
  4. مزيج
  5. حل 5 جزء في البليون، 0.5 مل الحل الأسهم في 99.5 مل ماء المقطر لتحقيق 100 مل من محلول سبايك. هذا إضافة إلى 900 غ محلول السكروز قصيرة لتحقيق 1 كجم من شراب 5 جزء في البليون. لحل 20 جزء في البليون، مزيج 2.0 مل من محلول الأسهم في 98.0 مل ماء المقطر لإنتاج الحل سبايك 100 مل. لمزيج حل 100 جزء في البليون، المقطر 10.0 مل من محلول الأسهم إلى 90.0 مل من الماء لحل سبايك.

5. إعداد خلايا النحل وتطبيق العلاج

  1. تقييم المستعمرات لتحديد النحل الكبار والسكان الحضنة قبل وبعد تطبيق العلاج. نموذج صورة للاهتمام، مثل العسل، خبز النحل، النحل، أو الشمع، لتحديد مستويات خط الأساس لمبيدات الآفات قبل العلاج.
    1. بعينه الشمع وفتح أنبوب الطرد مركزي 50 مل، حدد مقطع مشط فارغ وكشط مصب الأنبوب على طول المشط مفتوحة حتى تم جمع المبلغ المطلوب من الشمع. تجنب لمس الشمع في الأنبوب. استبدال الغطاء على الأنبوب وتسمية الأنبوب. استبدال الإطار في الخلية.
    2. عينة العسل أو الرحيق، فتح أنبوب الطرد مركزي واضغط مصب الأنبوب ضد المقطع مشط تحتوي على العسل أو الرحيق. السماح للمواد التي تتدفق في الأنبوب، بدلاً من إلغاء الأنبوب، لتقليل كمية الشمع في العينة. استبدال الغطاء على الأنبوب وتسمية الأنبوب. استبدال الإطار في الخلية.
    3. الخبز
    4. لتذوق خبز النحل، وحدد إطار الذي يحتوي على خبز النحل واستخدام ملعقة معدنية أو بلاستيكية نظيفة لإزالة محتويات عدة خلايا النحل ووضع المواد في أنبوب الطرد مركزي. استبدال الإطار في الخلية.
      ملاحظة: جمع مواد كافية سوف يستغرق عادة عدة دقائق كل إطار. وقد عينة نموذجية لتحليل مبيدات الآفات على الأقل 3 غرام مواد؛ عينة العسل والشمع وخبز النحل على الأقل 2 أو 3 نقاط مختلفة في كل خلية، والجمع بين هذه عنها لكل خلية.
  2. قريبا بعد التقييم، مثل اليوم التالي، إزالة أية إطارات برودليس التي تحتوي على العسل والرحيق واستبدال تلك الأطر بالمؤسسة أو مشط مرسومة فارغة لتسهيل تخزين شراب.
    ملاحظة: يتمثل الهدف في زيادة سعة التخزين فارغة والطلب على الرحيق. إذا كان العلاج تطبيق مختلطة في تكملة بروتين، قد لا يلزم إزالة الإطارات الغذاء.
  3. وقد
  4. ضمان الخلية المغذية. وقت ممكن بعد تقييم ما قبل المعالجة، تطبيق العلاج بصب الشراب (الخطوة 4، 4) في وحدة التغذية بأسرع ما يمكن. الحرص على عدم تسرب أي شراب خارج الخلية حيث قد تجد النحل من مستعمرات أخرى عليه.
    ملاحظة: مغذيات الداخلية قد تعمل بشكل أفضل للحد من سرقة؛ بعض المبيدات تؤثر على نشاط النحل الكبار وخلايا المعالجة قد تكون أقل يقظة في حماية مغذيات من سرقة النحل 9.

6. تحليل "الصور الفوتوغرافية في إطار خلية"

ملاحظة: الصور الإطار يتم إجراؤها أثناء كل تقييم الخلية. يمكن استخراج المعلومات من الصور الفوتوغرافية باستخدام البروتوكول التالي-

  1. تنشيط برنامج تحليل صورة، مثل إيماجيج، الذي يسمح بتحديد شكل على صورة فوتوغرافية باستخدام أداة تتبع وقياس مجال الشكل المحدد.
  2. استرداد صورة فوتوغرافية رقمية للإطار. حدد ' ملف ' وانقر ' فتح '. انتقل إلى المجلد حيث يتم الاحتفاظ الصور الفوتوغرافية لتحديد صورة للتحليل. سيتم الآن فتح الصورة داخل البرنامج إيماجيج، وسوف يكون شريط الأدوات إيماجيج النشطة.
  3. حدد ' المضلع ' أداة من شريط الأدوات. استخدام الماوس للنقر على كل زاوية لتعريف مجال الإطار مغطاة بمشط. سينطبق الشكل معا عندما يتم التوصل إلى زاوية الانطلاق.
  4. بمجرد منطقة مشط يتم تعريفه باستخدام أداة المضلع، انقر فوق ' تحليل ' وحدد ' MeasureƆ مربع حوار جديد سوف يطفو على السطح مع القياس. استخدام العمود ' منطقة ' لقياس بكسل داخل المنطقة المحددة التي تم استخلاصها.
    ملاحظة: المرة الأولى يستخدم هذا البرنامج، تحديد النتائج المرجوة التي يتعين الإبلاغ عنها.
    1. فوق في ' نتائج ' في النتائج مربع الحوار، وحدد ' "تعيين قياسات" '. تحقق من المنطقة، وقم بإلغاء تحديد كافة الآخرين.
  5. لتعريف منطقة تغطيها توج الحضنة، حدد ' حر ' أداة. كساد على زر الماوس على نقطة البداية وتتبع حول الحضنة. عند الوصول إلى نقطة البداية، حرر زر الماوس؛ الشكل سوف يستقر في مكان-
    1. فوق ' تحليل ' وحدد ' تدبير '. إذا لم يكن نمط الحضنة الصلبة، نتيجة لعوامل مثل المرض، استخدم ' متعددة النقاط ' أداة التحديد لعد الخلايا بدلاً من ذلك. تحويل الخلية تهم مباشرة إلى سم 2 تيسيرا للمقارنة؛ وهناك عادة حوالي 4.01 خلايا/سم 2 20-
  6. تقسيم قيمة تتبع الشكل الحضنة بقيمة داخلية الإطار للحصول على تغطية إطار المئة توج الحضنة-
  7. قياس
  8. الداخلية للإطارات التمثيلية للحصول على معيار حتى يمكن تحويل مساحة الحضنة لسم 2-
    ملاحظة: إطار لانجستروث عميق نموذجية على مساحة حوالي 880 سم 2 20. على سبيل المثال، إذا تم العثور على 20% داخل إطار لانجستروث العميقة التي تغطيها الحضنة، ثم ع السطحعصام سيكون 0.20 x 880 سم 2 = 176 سم 2-
  9. مجموع مساحة الحضنة للخلية. لتحويل هذا التدبير إلى الدمار، اضرب المساحة السطحية 0.77 غرام/سم 2 20-
  10. حساب المساحة السطحية للعسل ولم يسبق لهم اللعب الرحيق وحبوب اللقاح المخزنة، على سبيل المثال، باستخدام الطريقة الموضحة في الخطوات 6.3 إلى 6.6.
    ملاحظة: إذا كانت تعتبر الرحيق وحبوب اللقاح معا ك " مخازن الأغذية " وهذا يقلل من مكونات الإطار إلى اثنين (مخازن الأغذية والحضنه). إطار لانجستروث نموذجية مع مؤسسة البلاستيك ومشط مرسومة فارغة ويزن حوالي 556 ز 20، حتى لحساب وزن مخازن الأغذية ومجموع وزن الإطار باستخدام مشط مرسومة فارغة ووزن الكتلة الحضنة، وطرح أن الوزن من الوزن الملحوظ للإطار المذكور.

Representative Results

نمو مستعمرة نحلة العسل ومراقبة، يتم قياسها باستخدام عمليات التفتيش العادية خلية مع مراقبة الوزن المستمر، كشفت عن إنتاج الحضنة أقل بكثير بين المستعمرات التي تتعرض إلى ايميداكلوبريد في 100 جزء في البليون.
خلية عمليات التفتيش أظهرت أن الجماهير النحل الكبار لم تتأثر إلى حد كبير بالتعرض لكل التركيزات المقاسة من 5 و 100 جزء في البليون، ولكن كشف تحليل للصور الفوتوغرافية لإطارات الحضنة أن إنتاج الحضنة في علاج 100 جزء في البليون (أقل بكثير الشكل 1). وأظهرت بيانات الوزن خلية مستمر مستعمرة مختلفة معدلات النمو فيما بين مجموعات من خلايا يتعرضون لتركيزات مختلفة من ايميداكلوبريد. بيانات الوزن المستمر خلية كانت تنقسم إلى قسمين: ح 25 تشغيل بيانات متوسط، والتي تتصل بنمو مستعمرة ونجاح مساحات العلف، والفرق بين البيانات الخام كل ساعة وح 25 تشغيل متوسط، كل ساعة ديترينديد البيانات. ستريك يومية للبيانات ديترينديد تتصل بجمع العلف النشاط19،20 (الشكل 2). بينما وزنها خلايا أحياناً قد يكون اكتشاف الاختلافات متوسط الوزن عند نقطة معينة، وزنها المستمر قدمت البيانات ديترينديد للحصول على معلومات حول السلوك مستعمرة.

السكك الحديدية أعلى الإطار الأوسط في خلية تجارية نموذجية موقع فعال لأجهزة استشعار درجات الحرارة.
يخزن العمال الكبار النحل في المستعمرات إنشاء والحفاظ على درجات حرارة عالية (33-36 درجة مئوية) خصوصا في وجود الحضنة14 والكتلة نفسها الجوال للاستفادة من الغذاء في أجزاء مختلفة من25،خلية26. للحد من فقدان الحرارة، تجنب التكتلات وجود سطح اتصال كبيرة مع الأجزاء الخارجية من الخلية، مثل الجانبين أو أسفل، لذلك نادراً ما المسافة من أعلى مركز في مربع إلى الكتلة الكبيرة. لقد ثبت أعلى مركز في مربع الحضنة لخفضت تقلب درجات الحرارة مقارنة بمواقع أخرى في الخلية، مثل مركز العلوي إطار خارجي والجزء العلوي من مربع ثاني ("سوبر") في الصيف والخريف الظروف20. في ظروف الشتاء، الذي يتوقع من الفرق بين درجة الحرارة المحيطة والكتلة تكون أعظم، تم العثور على نفس الموقع أعلى درجات الحرارة وتقلب أدنى مقارنة بالظروف المحيطة، مشيراً إلى أكبر مساهمة من المجموعة نفسها (الشكلان 3 و 4؛ الجدول 1). لا يمكن أن يعزى الاختلافات في أنظمة درجات الحرارة إلى الاختلافات في كتلة النحل الكبار (الجدول 2).

الاتساع منحنيات جيبية يصلح لبيانات درجات الحرارة المستمر كانت أعلى بكثير في علاج 100 جزء في البليون في معاملة 5 جزء في البليون في حين كان الفريق معاملة لا تختلف اختلافاً كبيرا من السيطرة على المجموعة 9 .
ستريك طرديا مع تغير درجة الحرارة، حيث تشير ستريك أعلى درجات الحرارة أكثر من متغير في تلك المرحلة في الخلية. وتعكس ستريك أقل ارتفاع إنتاج الحضنة في مجموعات العلاج 5 جزء في البليون، والتحكم بالمقارنة مع مجموعة العلاج 100 جزء في البليون (الشكل 5). هذه النتائج، جنبا إلى جنب مع أولئك من خلية عمليات التفتيش وبيانات الوزن خلية مستمر، تؤكد أن مستعمرة-مستوى السلوك كان تأثرا كبيرا بالتعرض إلى ايميداكلوبريد 100 جزء في البليون.

Figure 1
رقم 1: التدابير النحل والحضنه الكبار. خلية بيانات التفتيش اعتبارا من أيار/مايو، سنة 2014، آذار/مارس، حتى عام 2015، للمستعمرات التي تتعرض لشراب يحتوي على 0 (مراقبة)، 5 و 100 جزء في البليون ايميداكلوبريد قرب توكسون، من الألف إلى الياء. متوسط (A) (+ SEM) مجموع كتلة النحل الكبار؛ (ب) متوسط (+ SEM) مختومة مساحة الحضنة. المنطقة الرمادية يشير إلى فترة العلاج (4-6 كجم من شراب السكروز المعالجة في الأسبوع لكل خلية لمدة 6 أسابيع). أربع مستعمرات كل مجموعة العلاج؛ توفي مستعمرة واحدة في المليار 100 خلال فصل الشتاء. وسجلت جماهير النحل الكبار لا في آب/أغسطس. البيانات هنا صدر سابقا ويستخدم هنا مع إذن9. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 2
الشكل 2 : عسل النحل خلية بيانات الوزن. بيانات الوزن المستمر من حزيران/يونيه إلى كانون الأول/ديسمبر، عام 2014، لعسل النحل المستعمرات يتعرضون لشراب يحتوي على 0, 5 و 100 جزء في البليون ايميداكلوبريد قرب توكسون، من الألف إلى الياء. (أ) خلية إجمالي الوزن (± SEM)؛ (ب) الاتساع من منحنيات جيبية يصلح لبيانات الوزن ديترينديد نفس الفترة. المنطقة الرمادية يشير إلى فترة العلاج (4-6 كجم من شراب السكروز المعالجة في الأسبوع لكل خلية لمدة 6 أسابيع). أربع مستعمرات كل مجموعة العلاج؛ توفي مستعمرة واحدة في المليار 100 خلال فصل الشتاء. البيانات هنا صدر سابقا ويستخدم هنا مع إذن9. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 3
الشكل 3: داخل خلية درجات الحرارة في مواقع مختلفة. متوسط (± SEM) درجات الحرارة اليومية (درجة مئوية) لمواقع أجهزة الاستشعار 3 داخل خلايا النحل العسل. (أ) 4 خلايا مربع واحد أبقى في موقع على علو شاهق (ملم: 2412 م)؛ و (ب) 3 خلايا أبقى في موقع ارتفاع أدنى (سرير: 719 م) بالقرب من توكسون، من الألف إلى الياء من عام 2013 في كانون الأول/ديسمبر إلى شباط/فبراير 2014. وكانت خلايا لانجستروث خشبية مربعات العميق (43.65 لتر) مزودة بأغطية داخلية خشبية وتصغير أغطية مبطنة من المعدن. مجسات درجة الحرارة الحرارية كانت موصولة بقضبان أعلى الإطارات، وكان هناك جهاز استشعار datalogger متكاملة/درجة حرارة على السكك الحديدية أسفل الإطار الأوسط. وتوضح هذه البيانات أن موقف أجهزة الاستشعار في الجزء العلوي من الإطار الأوسط دائماً أعلى من مقارنة المحيطة باستشعار مواقف أخرى وهكذا غنية بالمعلومات حول إدارة الحرارة من مستعمرات النحل. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 4
الشكل 4 : تقلب درجات الحرارة في مواقع مختلفة داخل الخلية. ستريك (± SEM) في المتوسط اليومي لجيب جأورفيس يصلح لكل ساعة بيانات درجة الحرارة ديترينديد 3 استشعار المواقع داخل خلايا عسل النحل. (أ) 4 خلايا أبقى في موقع علو شاهق (مليم: 2412 م)؛ و (ب) 3 خلايا أبقى في موقع ارتفاع أدنى (سرير: 719 م) بالقرب من توكسون، من الألف إلى الياء من عام 2013 في كانون الأول/ديسمبر إلى شباط/فبراير 2014. وكانت خلايا لانجستروث خشبية مربعات العميق (43.65 لتر) مزودة بأغطية داخلية خشبية وتصغير أغطية مبطنة من المعدن. مجسات درجة الحرارة الحرارية كانت موصولة بقضبان أعلى الإطارات، وكان هناك جهاز استشعار datalogger متكاملة/درجة حرارة على السكك الحديدية أسفل الإطار الأوسط. وتوضح هذه البيانات أن موقف أجهزة الاستشعار في الجزء العلوي من الإطار الأوسط استمرار انخفاض في تقلب (هنا تقاس كالسعة لمنحنيات جيبية يصلح للبيانات ديترينديد كل ساعة) من مقارنة المحيطة باستشعار مواقف أخرى وهكذا غنية بالمعلومات حول إدارة الحرارة من مستعمرات النحل. مقاييس لدرجة الحرارة المحيطة (خط أسود متصل) على حق كل رسم بياني. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 5
5 الرقم: درجات الحرارة للمستعمرات المعالجة داخل الخلية. بيانات درجات الحرارة المستمر من حزيران/يونيه إلى كانون الأول/ديسمبر، عام 2014، لعسل النحل المستعمرات يتعرضون لشراب يحتوي على 0, 5 و 100 جزء في البليون ايميداكلوبريد قرب توكسون، الألف إلى الياء. (أ) خلية متوسط درجة الحرارة (± SEM)؛ (ب) الاتساع من منحنيات جيبية يصلح لبيانات درجة الحرارة ديترينديد نفس الفترة. المنطقة الرمادية يشير إلى فترة العلاج (4-6 كجم من شراب السكروز المعالجة في الأسبوع لكل خلية لمدة 6 أسابيع). أربع مستعمرات كل مجموعة العلاج؛ توفي مستعمرة واحدة في المليار 100 خلال فصل الشتاء. البيانات هنا صدر سابقا ويستخدم هنا بإذن (مايكل et al. 2016a)- الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

مقارنة اختبار t ص. ف الموقع مقارنة متوسط. (درجة مئوية)
Pos. 2-Pos. 1 2.05 0.0485 ملم 1.00 ±0.25
سرير 4.38 ±0.12
Pos. 2-Pos. 3 0.84 1 ملم 2.05 ±0.21
سرير 0.12 ±0.11

الجدول 1: متوسط الاختلافات في درجة الحرارة وخاصة بعد المقارنات بين مواقف استشعار مختلفة داخل خلايا النحل العسل. الموضع 1: الإطار الخارجي العلوي؛ موقف 2: الإطار الأوسط الأعلى؛ موقف 3: أسفل الإطار الأوسط. 4 مربع واحد خلايا تم الاحتفاظ بها في موقع على علو شاهق (مليم: م 2412) وأبقى 3 خلايا النحل في موقع ارتفاع أدنى (سرير: 719 م) بالقرب من توكسون، من الألف إلى الياء من عام 2013 في كانون الأول/ديسمبر إلى شباط/فبراير 2014. وكانت خلايا لانجستروث خشبية مربعات العميق (43.65 لتر) مزودة بأغطية داخلية خشبية وتصغير أغطية مبطنة من المعدن. أرفقت مجسات درجة الحرارة الحرارية للوظائف 1 و 2، وجهاز استشعار datalogger متكاملة/درجة حرارة تم إرفاقه في موقف 3.

المجموعة تاريخ متوسط كتلة النحل الكبار (± SEM) (ز) متوسط (± SEM) مساحة الحضنة (سم2)
ملم 18 نوفمبر 2013 2119 ±412 1372 ±396
سرير 15 نوفمبر 2013 2270 ±312 53 ±30
ملم 13 فبراير 2014 2171 ±105 0
سرير 11 فبراير 2014 2027 ±487 867 ± 79

الجدول 2: متوسط النحل الكبار الجماهير والجماهير الحضنة، المقدر باستخدام البروتوكولات المذكورة هنا، لأربعة خلايا أبقى في موقع على علو شاهق (ملم: 2412 م)؛ وأبقى ثلاث خلايا في موقع ارتفاع أدنى (سرير: 719 م) بالقرب من توكسون، من الألف إلى الياء من عام 2013 في كانون الأول/ديسمبر إلى شباط/فبراير 2014. وكانت خلايا لانجستروث خشبية مربعات العميق (43.65 لتر) مزودة بأغطية داخلية خشبية وتصغير أغطية مبطنة من المعدن. أرفقت مجسات درجة الحرارة الحرارية للوظائف 1 و 2، وجهاز استشعار datalogger متكاملة/درجة حرارة تم إرفاقه في موقف 3.

Discussion

فقط كمحصول يتطلب العلماء بيانات صحيحة ودقيقة لتقييم آثار المعالجات المختلفة على نمو النبات والعائد، عسل النحل الباحثين تتطلب بيانات صحيحة ودقيقة لتقييم نمو مستعمرة النحل والنشاط. هذه الأنواع من البيانات ذات أهمية خاصة عندما آثار العلاج قد تكون خفية وطويلة الأجل، مثل قد يتوقع عندما يتعرض النحل بتركيزات منخفضة من مبيدات الآفات.

بيانات الوزن المستمر خلية تحتوي على الكثير من المعلومات عن نمو ونشاط المستعمرات يجري دراستها، فضلا عن استجابة تلك المستعمرات للاضطرابات الخارجية، مثل من سرقة النحل وإضافة شراب السكر ل تغذية9. ومع ذلك، يتطلب التفسير المناسب للوزن المستمر وبيانات درجة الحرارة بعض المعرفة بحجم المستعمرة بصفة دورية. وفي حين يمكن تقدير حجم السكان البالغين النحل من ستريك يومية للبيانات كل ساعة ديترينديد أثناء تدفق رحيق، سبب محصده زيادة حركة المرور، خارج تدفق رحيق العلاقة لا تعقد جيدا20. وبالمثل، يتغير الوزن مستعمرة سبب نجاح مساحات العلف، والاستهلاك الغذائي، والسكان النحل الزيادات والانخفاضات (مثل النحل يقتل) جزئيا دالة لحجم مستعمرة. مستعمرات أصغر قد تكون صحية ولكن إظهار معدلات نمو أقل وأقل كتلة محصده، على سبيل المثال، ببساطة الواجب سكان محصده أصغر.

تحديد موقع ثابت ثابت والزاخر بالمعلومات لاستشعار درجة حرارة داخل الخلية حاسم بالنسبة لإنتاج نتائج استنساخه، لا سيما مع overwintering. وقد أظهرت الأبحاث السابقة أن رصد درجة الحرارة في السكك الحديدية أعلى الإطار المركزي في مربع الحضنة (أسفل) كانت أقل ارتباطاً بدرجات الحرارة المحيطة (الخارجية) من عدة مواقع أخرى في الخلية، وتأثرت أكثر بالمستعمرة نفسها 20. خلال فصل الشتاء، درجة حرارة الخلافات بين الكتلة مستعمرة النحل والمحيطة يتوقع أن تكون مرتفعة، وحتى الاختلافات بين المواقف داخل الخلية وبالمثل يتوقع أن تكون أكبر من خلال الأشهر الأكثر دفئا. وبالإضافة إلى ذلك، سيتم نقل الكتلة النحل إلى مواقع مختلفة داخل الخلية إلى استغلال الموارد الغذائية25،26. وأظهرت الدراسة الشتاء الموصوفة هنا أن درجات الحرارة في مواقف الأفقي، من الوسط العلوي إلى أعلى الإطارات الخارجي، كانت تختلف اختلافاً كبيرا في حين لا الاختلافات الرأسية في الإطار الأوسط. حركة الهواء الأفقية عبر الإطارات مقيد نسبيا بينما ليس من الحركة الرأسية على طول إطار، حيث خلط العمودي يتوقع أن تكون أكبر. هذه النتائج تؤكد أن استشعار موقف بشأن السكك الحديدية أعلى الإطار الأوسط يرجح أن تكون غنية بالمعلومات فيما يتعلق بتأثيرات درجة الحرارة من المستعمرة.

تقييمات خلية كما هي موصوفة هنا حل بعض هذه المسائل. بطرح مجموع الخلية أجزاء من الوزن الإجمالي خلية قياس أثناء الخمول، كما هو الحال في الليل، التقدير من النحل الكبار الشامل مستقل عن عدد النحل مساحات العلف وهكذا لا يبالي وقت التقييم. تسجيل البيانات من نطاق يتيح مجالاً للذاتية، وصور الإطار توفير سجل دائمة، حتى يمكن أن يعاد تحليلات للمساحات السطحية الحضنة أو الغذاء إذا لزم الأمر، مما يقلل من الاعتماد على التدريب للشخص الذي يقوم التحاليل.

الأساليب الموصوفة هنا لا تخلو من مصادر الخطأ. خلية أجزاء الحاجة إلى أن تكون خالية من النحل كما ينبغي أن يكون وزنه ممكن، وأي قطع كبيرة من مشط أو غيرها من المواد التي يتم إزالتها قبل التخلص منها. محتوى الرطوبة في مكونات خشبية يمكن أن تتغير بمرور الوقت ويمكن أن يحمل خلايا فارغة قابلة للقياس التذبذبات اليومية في الوزن بسبب التغيرات اليومية في الرطوبة النسبية المحيطة24. سيتم تغيير خلية تحتوي على مستعمرة ربما لا قدر لعسل النحل تميل إلى الاحتفاظ رطوبة ثابتة نسبيا داخل خلية27، التي سوف تخفف من آثار المحيطة. هذه الأساليب تعتمد أيضا على العمل السريع. بمجرد خلية اتخذت أربا، ظروف درجة الحرارة والغاز تغيير جذري ودرجات حرارة باردة يمكن أن تؤثر على صحة الحضنة14. ويمكن تعزيز تفكيك خلية دون شاشة للحفاظ على النحل من المستعمرات المجاورة سرقة، لا سيما في أوقات ندرة الرحيق.

إدخال تعديلات على هذه الإجراءات ضرورية أحياناً. وفي حين أنه من مصلحة الباحثون لجمع البيانات قدر ممكن، في بعض المناسبات، مثل عندما يجب فحص خلايا عديدة، عندما سرقة ضغط مرتفع، أو عندما تكون الأحوال الجوية ليست الأمثل، يجب أن تتحرك بسرعة العمال والتخلي عن بعض البيانات. إذا كانت البيانات المتعلقة بالاحتياطيات الغذائية غير حاسمة، ينبغي وزن الإطارات التي تحتوي على العسل و/أو حبوب اللقاح، أو الإطارات بالشمع أو مؤسسة، فقط لكن لا تصويرها. مستويات لم يسبق لهم اللعب اليرقات والبيض تحظى باهتمام بعض الباحثين، وغالباً ما يتم الكشف عنها في إطار الصور الفوتوغرافية؛ ومع ذلك، تجنبا لأخذ العينات يجب أن يكون تحيز باحث ثقته في التمكن من الكشف عنها في جميع الصور. يمكن تحديد غالباً إلا توج الحضنة موثوقة ومتسقة في الصور الفوتوغرافية التي التقطت في الظروف الحقلية. فيما يتعلق بتطبيق العلاج، بعض خلايا، لا سيما تلك التي تغذيها جرعات كبيرة من ايميداكلوبريد، يمكن أن يصبح السبات العميق، مما تسبب في انخفاض في استهلاكها شراب وقدرتها على الدفاع عن الخلية الخاصة بهم. إذا لم تستهلك في الشراب بعد 5-7 د مستعمرة، ينبغي إزالة الشراب، ووزنه والتخلص منها (لتجنب التلوث بسبب التخمير) وعرضت المستعمرة شراب الطازجة. حسب وزنها شراب المهملة، الباحثين سوف يكون سجل كم مستعمرة كل استهلاكها، وبالتالي يمكن حساب الجرعة الإجمالية. وأخيراً، تطبيق العلاجات في شراب السكر الأكثر فعالية عندما تكون هناك مصادر بديلة الرحيق قليلة أو لا. مصادر الرحيق البديل يضعف العلاج إلى درجة غير معروف. الباحثين ينبغي إلا يغيب عن البال، كما أشير في القسم البروتوكول، أن مبيدات الآفات مثل ايميداكلوبريد ترتبط بمستويات انخفاض النشاط، بما في ذلك حماية الخلية، اعتماداً التركيز. انخفاض مستعمرة الدفاع قد يؤدي أيضا إلى زيادة سرقة والخلط المحتملة للعلاج.

النتائج المعروضة هنا إظهار أن الرصد المستمر لخلية الوزن ودرجة الحرارة الداخلية هي حساسة لمستعمرة-مستوى السلوكيات، حتى مع احترام للتغيرات السلوكية التي تحدثها منخفض جداً (5 جزء في البليون) تركيزات من مبيدات الآفات السمية العصبية. كذلك تطبيق هذه الأساليب الأخرى أعصاب ومبيدات الآفات مع أنماط أخرى من العمل، مثل منظمات نمو الحشرة، سيزيد من فهمنا لآثار الجرعات ميدانية واقعية على المستعمرات نحلة العسل.

Disclosures

المؤلفين قد لا تضارب المصالح المالية.

Acknowledgments

يشكر المؤلفون بحرارة ك. أندرسون، ج. ج. أدامكزيك، وبرن هاء، أنا مرجت، موت جيانسيراكوسا م. ب وهولست أ ستيلويل أ. ر. لإجراء مناقشات في التصميم والتنفيذ، ومن أجل المساعدة في الحقل.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Langstroth hive equipment (box) Mann Lake Ltd, Hackensack, MN KD-700
Langstroth hive equipment (frame) Mann Lake Ltd, Hackensack, MN WW-900
Langstroth hive equipment (lid and cover) Mann Lake Ltd, Hackensack, MN WW-302
 
Langstroth hive equipment (base) Mann Lake Ltd, Hackensack, MN WW-316
Langstroth hive equipment (internal feeder) Mann Lake Ltd, Hackensack, MN FD-505
Cordovan Italian queens and bee packages C.F. Koehnen & Sons, Glenn, CA
Scale, bench (100 kg max. capacity): model B-2418  TEKFA, Copenhagen, Denmark discontinued
Scale, bench (100 kg max. capacity): Diamond Series Avery Weigh-Tronix , Fairmont, MN 1824-200
Imidacloprid, analytical-grade CAS # 138261-41-3 Sigma-Aldrich, St. Louis, MO 63103 37894
Electronic scale, precision (precision = 0.1 mg): Adventurer Pro 260 Ohaus,  Parsippany, NJ AV264C
Electronic scale, portable (15 kg max. cap.): Ranger Count 3000 Ohaus, Parsippany, NJ RC31P15
Thermocouple probe: TMC6-HD Onset Computer Corp., Bourne, MA TMC6-HD
Datalogger, 12-bit: Hobo U-12 Onset Computer Corp., Bourne, MA U12-012
Temperature and r.h. datalogger: iButton Hygrochron Baulkham Hills, NSW 2153, Australia DS1923
Temperature datalogger: iButton Thermochron Baulkham Hills, NSW 2153, Australia DS1922L
Nalgene plastic bottle Thermo Scientific, Rochester, NY 2104-0032
Tissue embedding cassette Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA B1000731WH
Digital camera: Pentax K-01 Ricoh Imaging Co., Ltd. 15241
ImageJ version 1.47 software W. Rasband, National Institutes of Health, USA
Centrifuge tubes, 50 ml Fisher Scientific, Asheville, NC 14-959-49A

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Krupke, C. H., Hunt, G. J., Eitzer, B. D., Andino, G., Given, K. Multiple routes of pesticide exposure for honey bees living near agricultural fields. PLoS ONE. 7 (1), e29268 (2012).
  2. Pochi, D., Biocca, M., Fanigliulo, R., Pulcini, P., Conte, E. Potential exposure of bees, Apis mellifera L., to particulate matter and pesticides derived from seed dressing during maize sowing. Bull. Environ. Contam. Toxicol. 89, 354-361 (2012).
  3. Reetz, J., Zühlke, S., Spiteller, M., Wallner, K. Neonicotinoid insecticides translocated in guttated droplets of seed-treated maize and wheat: a threat to honeybees? Apidologie. 42, 596-606 (2011).
  4. Stoner, K. A., Eitzer, B. D. Movement of soil-applied imidacloprid and thiamethoxam into nectar and pollen of squash (Cucurbita pepo). PLoS ONE. 7 (6), e39114 (2012).
  5. Zhu, Y. C., et al. Spray toxicity and risk potential of 42 commonly used formulations of row crop pesticides to adult honey bees (Hymenoptera: Apidae). J. Econ. Entomol. , 1-8 (2015).
  6. Mullin, C. A., et al. High levels of miticides and agrochemicals in North American apiaries: implications for honey bee health. PLoS ONE. 5, e9754 (2010).
  7. Cresswell, J. E. A meta-analysis of experiments testing the effects of a neonicotinoid insecticide (imidacloprid) on honey bees. Ecotoxicol. 20, 149-157 (2011).
  8. Dively, G. P., Embrey, M. S., Kamel, A., Hawthorne, D. J., Pettis, J. S. Assessment of chronic sublethal effects of imidacloprid on honey bee colony health. PLoS ONE. 10 (3), e0118748 (2015).
  9. Meikle, W. G., et al. Sublethal effects of imidacloprid on honey bee colony growth and activity at three sites in the U.S. PLoS ONE. 11 (12), e0168603 (2016).
  10. Johnson, B. R. Within-nest temporal polyethism in the honey bee. Behav. Ecol. Sociobiol. 62 (5), 777-784 (2008).
  11. Moritz, R. F. A., Southwick, E. E. Bees as superorganisms: An evolutionary reality. , Springer. Heidelberg, Germany. (1992).
  12. Schmolz, E., Lamprecht, I., Schricker, B. A method for continuous direct calorimetric measurements of energy metabolism in intact hornet (Vespa crabro) and honeybee (Apis mellifera) colonies. Thermochem. Acta. 251, 293-301 (1995).
  13. Southwick, E. E., Mugaas, J. N. A hypothetical homeotherm: The honey bee hive. Comp. Biochem. Physiol. 40A, 935-944 (1971).
  14. Stabentheiner, A., Kovac, H., Brodschneider, R. Honeybee colony thermoregulation - regulatory mechanisms and contribution of individuals in dependence on age, location and thermal stress. PLoS ONE. 5 (1), e8967 (2010).
  15. Delaplane, K. S., van der Steen, J., Guzman-Novoa, E. Standard methods for estimating strength parameters of Apis mellifera colonies. The COLOSS BEEBOOK. Dietemann, V., Ellis, J. D., Neumann, P. Volume I: standard methods for Apis mellifera research, J. Apic. Res. 52 (1) (2013).
  16. Beekman, M., Ratnieks, F. L. W. Long-range foraging by the honey-bee, Apis mellifera L. Functional Ecology. 14, 490-496 (2000).
  17. Buchmann, S. L., Thoenes, S. C. The electronic scale honey bee colony as a management and research tool. Bee Sci. 1, 40-47 (1990).
  18. Lecocq, A., Kryger, P., Vejsnæs, F., Bruun Jensen, A. Weight watching and the effect of landscape on honeybee colony productivity: Investigating the value of colony weight monitoring for the beekeeping industry. PLoS ONE. 10 (7), e0132473 (2015).
  19. Meikle, W. G., Rector, B. G., Mercadier, G., Holst, N. Within-day variation in continuous hive weight data as a measure of honey bee colony activity. Apidologie. 39, 694-707 (2008).
  20. Meikle, W. G., Weiss, M., Stilwell, A. R. Monitoring colony phenology using within-day variability in continuous weight and temperature of honey bee hives. Apidologie. 47, 1-14 (2016).
  21. Meikle, W. G., Holst, N. Application of continuous monitoring of honey bee colonies. Apidologie. 46, 10-22 (2015).
  22. De Smet, L., et al. Stress indicator gene expression profiles, colony dynamics and tissue development of honey bees exposed to sub-lethal doses of imidacloprid in laboratory and field experiments. PLoS ONE. 12 (2), e0171529 (2017).
  23. Danka, R. G., Rinderer, T. E., Hellmich, R. A., Collins, A. M. II Foraging population sizes of African and European honey bee (Apis mellifera L.) colonies. Apidologie. 17 (3), 193-202 (1986).
  24. Meikle, W. G., Holst, N., Mercadier, G., Derouané, F., James, R. R. Using balances linked to dataloggers to monitor honeybee colonies. J. Apic. Res. 45 (1), 39-41 (2006).
  25. Owens, C. D. The thermology of wintering honey bee colonies. , United States Department of Agriculture, Agricultural Research Service. Technical Bulletin no. 1429 (1971).
  26. Szabo, T. I. Thermology of wintering honey-bee colonies in 4-colony packs. Am. Bee J. 189, 554-555 (1989).
  27. Human, H., Nicolson, S. W., Dietemann, V. Do honeybees, Apis mellifera scutellata, regulate humidity in their nest? Naturwissenschaften. 93, 397-401 (2006).

Tags

العلوم البيئية، 129 قضية، تقييم خلية، خلية الوزن، ودرجة الحرارة خلية، عسل النحل مستعمرة مراقبة، ايميداكلوبريد، neonicotinoid
رصد آثار مستعمرة-مستوى التعرض لمبيدات الآفات المقاسة على نحل العسل
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Meikle, W. G., Weiss, M. MonitoringMore

Meikle, W. G., Weiss, M. Monitoring Colony-level Effects of Sublethal Pesticide Exposure on Honey Bees. J. Vis. Exp. (129), e56355, doi:10.3791/56355 (2017).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter