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Neuroscience

Magnésium biodégradable Stent traitement des anévrismes sacciformes dans un modèle de Rat - Introduction de la Technique chirurgicale

Published: October 1, 2017 doi: 10.3791/56359

Summary

Des modèles animaux expérimentaux reproductible sont nécessaires à l’essai des matériaux nouveaux embolisation, qui ont été conçus pour traiter l’occlusion endovasculaire des anévrismes intracrâniens (IA). La présente étude vise à développer une technique chirurgicale sûre et standardisée pour stent assistée par embolisation d’anévrismes sacciformes dans un modèle animal de rat.

Abstract

La progression régulière dans l’arsenal des techniques disponibles pour le traitement endovasculaire des anévrismes intracrâniens requiert des modèles animaux expérimentaux abordables et reproductible pour tester embolisation de nouveaux matériaux tels que les inverseurs de stents et flux. Le but du présent projet était de concevoir un sûr et rapide, et une technique chirurgicale standardisée pour stent assistée par embolisation d’anévrismes sacciformes dans un modèle animal de rat.

Les anévrismes sacciformes ont été créés d’un greffon artériel de l’aorte. Les anévrismes ont été transplantés microchirurgicalement par anastomose bout à l’autre de l’aorte abdominale de l’approche d’une pesée syngenic de rats Wistar mâles > 500 g. Après anastomose de l’anévrisme, embolisation de l’anévrisme a effectué un ballon magnésium extensible stents (2,5 x 6 mm). L’endoprothèse est rétrograde introduit de l’aorte abdominale inférieure à l’aide d’une technique de Seldinger modifiée.

Après une série pilote de 6 animaux, un total de 67 rats ont été exploité conformément aux procédures d’exploitation standard établies. Moyenne des temps de chirurgie, le temps d’anastomose moyenne et moyenne temps de la ponction de l’artère de suture étaient 167 ± 22 minutes, 26 ± 6 min et 11 ± 5 min, respectivement. Le taux de mortalité était de 6 % (n = 4). Le taux de morbidité était de 7,5 % (n = 5), et la thrombose-stent a été trouvée dans 4 cas (n = 2 précoce, n = 2 fin de thrombose de stent).

Les résultats démontrent la faisabilité d’occlusion stent normalisé des anévrismes sacciformes flanc chez le rat - avec faibles taux de morbidité et de mortalité. Cette procédure d’embolisation de stent allie la possibilité d’étudier des concepts novateurs de stent ou inverseur de débit selon périphériques ainsi que les aspects moléculaires de la guérison.

Introduction

Hémorragie sous-arachnoïdienne due à une rupture d’anévrisme intracrânien est associée à un taux élevé de mortalité et de mauvais pronostic neurologique chez les nombreux survivants. Il y a actuellement deux approches générales pour occlure IA : soit écrêtage MICROCHIRURGICAL (qui exige une exposition du dispositif de l’anévrisme), ou une occlusion endovasculaire. Comme le traitement moins invasif de bobine endovasculaire de IA à col étroit s’est avéré être associée à une morbidité légèrement inférieure (en particulier dans la circulation postérieure1,2), les options de traitement endovasculaire sont devenus les modalité privilégiée de nombreux centres de neurochirurgie. Plusieurs appareils ont été développés afin d’étendre les indications de traitement endovasculaire et surmonter la principale limite de récurrence de IA après enroulement. Endoprothèses vasculaires intracrâniennes sont particulièrement prometteuses pour surmonter ces limites, car ils servent un échafaudage pour les néo-endothelization et bobine de prévention de la hernie, ainsi que protègent l’artère parent et améliorer intraluminal intraaneurysmal thrombose causée par réduction de l’afflux de sang. Il est nécessaire d’étudier de nouveaux stents intracrâniennes chez un modèle animal faible coût ; au niveau macroscopique et moléculaire.

Le but de cette étude était de concevoir un sûr et rapide et standardisé de technique chirurgicale pour application de stent dans un modèle d’anévrisme sacculaire déjà établie au rat3,4,5. Dans le présent projet, nous avons évalué le rôle d’un stent biodégradable de magnésium.

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Protocol

Wistar mâles rats avec un poids moyen de 592 g (± 50 SD) et la moyenne d’âge de 20 semaines étaient logés dans les animaleries à une température ambiante de 22-24 ° C et le cycle de douze heures de lumière/obscurité, avec libre accès à l’eau du robinet et un régime de pellet. Les animaux avaient reçu des soins humains conformément aux lignes directrices. Les expériences ont été approuvées par le Comité pour les animaux soin du Canton de Berne, Suisse (être 102/13). Nous avons suivi strictement les recommandations pour la recherche de l’Animal : rapports d’expériences In Vivo (directives de l’arrivée).

1. matériel de laboratoire, les fournitures consommables, les instruments chirurgicaux

  1. Utiliser une salle d’opération tranquille, aseptique et maintenir la température à 23 ± 3 ° C.
  2. Utiliser un bureau chirurgical avec une surface facile à nettoyer et à désinfecter et recouvrir d’un drap de chirurgie. Utiliser un microscope chirurgical de la table-top avec une caméra pour enregistrer la chirurgie et une lumière infrarouge pour réchauffer l’animal avant et après la chirurgie.
  3. Obtenir les fournitures consommables suivantes pour créer l’anévrisme de flanc et utiliser l’endoprothèse vasculaire.
    1. Obtenir des tampons de cellulose et de gaze stériles petits et grands, des seringues avec des aiguilles creuses 18 et 26G et une aiguille à pointe émoussée pour la substitution d’irrigation/volume.
    2. Obtenir des sutures chirurgicales y compris non résorbable 10-0 et 9-0 micro suture non résorbable 6-0 et 5-0 suture et suture résorbable 3-0.
    3. Obtenir la solution de chlorure de sodium isotonique 0,9 % pour la substitution d’irrigation/volume et pour assurer la propreté des instruments au cours de la chirurgie
  4. Obtenir les instruments suivants pour utiliser l’endoprothèse vasculaire : piqûre d’aiguille 19G, fil-guide hydrophobe, 4 Fogaty gaine et une seringue de gonflage pour la dilatation du ballonnet.
  5. Obtenir les fournitures consommables suivants pour DÉCELLULARISATION mur anévrisme :
    1. Obtenir des microtubes pour le stockage de l’anévrisme à-24 ° C et des étiquettes d’identification, ainsi qu’un agitateur de laboratoire afin d’assurer le traitement complet chimique de l’anévrisme.
    2. Obtenir 0,1 % dodécylsulfate de sodium (SDS) et saline tamponnée au phosphate (PBS) pour le processus de DÉCELLULARISATION appropriée.
  6. Obtenir des instruments de chirurgie standard suivants :
    1. Obtenir des instruments chirurgicaux plus grossières : pinces de tissus mous, écartement des tissus mous, pinces droites et courbes, trois pinces de moustique, ciseaux chirurgicaux, porte-aiguille.
    2. Obtenir des instruments chirurgicaux de micro : micro-ciseaux droits et courbes, droites et courbes micro-pinces et quatre clips de mini vasculaires temporaires avec des applicateurs clip vasculaire correspondante.

2. anesthésie

  1. Placez le rat dans une chambre à gaz et anesthésier avec un mélange d’isoflurane et oxygène (4 % isoflurane). Maintenir l’inhalation jusqu'à ce que l’animal perd conscience.
  2. Retirer l’animal anesthésié de la chambre à gaz et injecter l’anesthésie définitive consistant en un mélange adapté au poids de la médétomidine chlorhydrate (0,5 mg/kg) et le chlorhydrate de kétamine (50 mg/kg) par voie intrapéritonéale (en injectant dans le droit ou abdomen inférieur gauche).
  3. Contrôler la profondeur de l’anesthésie à intervalles définis pendant la chirurgie avec une orteil-pincée nocive pour confirmer que le rat est insensible et complètement anesthésiés. S’il y a un readminster réflexe, orteil-pincer l’anesthésie avec une injection intrapéritonéale adaptées au poids de la kétamine et la médétomidine. Anesthésie suffisante est nécessaire avant l’ouverture de la cavité abdominale et effectuer l’anastomose bout à l’autre et l’insertion de l’endoprothèse.
  4. Placez le rat sous la lampe infrarouge chauffage jusqu'à ce que l’anesthésie intrapéritonéale prend effet, car préopératoire réchauffement efficace évite la vaste refroidissement pendant la chirurgie.

3. chirurgie préparation et positionnement du rat

  1. Peser le rat, extraire la langue pour sécuriser les voies aériennes supérieures et d’appliquer la pommade ophtalmique pour éviter la dessiccation cornéenne.
  2. Utilisez un ruban adhésif pour fixer le rat pour une petite planche lavable et éviter toute pression ou la traction aux pattes.
  3. Le rat dans le domaine opérationnel vous raser avec un rasoir animaux petit et désinfecter la région chirurgicale.
  4. Placer deux marqueurs épaisseur 2-3 cm de distance sous le dos de l’animal provoque autant lordose lombaire et thoraco-lombaire que possible. Cela garantit la meilleure exposition de du rétropéritoine et facile d’application de l’endoprothèse.
  5. Couvrir le rat avec un drap stérile ouverture et placez-le sous le microscope d’opération. Mis en place deux supports à côté de l’animal pour faciliter une position plus confortable pour les mains de l’expérimentateur.
  6. Laver et désinfecter les mains et mettez des gants stériles. Il est utile d’avoir un assistant présent surtout pour l’implantation de stents.
  7. Pratiquer cette opération dans des conditions aseptiques, conformément aux recommandations sur les animaux de laboratoire6,7.

4. anévrisme greffon récolte

  1. Sous anesthésie générale, ouvrir l’abdomen sous le processus xiphoïde. Tout d’abord, couper la peau dans la ligne de mésoventrales avec des ciseaux pointus et séparer la peau de la musculature. Ensuite, couper la musculature abdominale et identifier le diaphragme au-dessus du foie au point d’insertion de la cavité thoracique.
  2. Couper le diaphragme et le tissu conjonctif avec des ciseaux pointus pour accéder à la cavité thoracique et couper les côtes avec gros ciseaux et un demi centimètre à droite et à gauche du sternum.
  3. Lorsque la cage thoracique est ouverte, sacrifier le rat avec une surdose intracardiaque de chlorhydrate de kétamine (120 mg/kg).
  4. Mobiliser le poumon gauche et le fixer sur le côté droit à l’aide d’un écouvillon de cellulose.
  5. Suite à une exposition appropriée de l’arc aortique, serrez l’azygos et veines cave crâniale gauche avec deux pinces de moustique au-dessus de l’aorte et couper entre les deux. Laisser les pinces sur les terminaisons de navire coupées afin d’éviter un saignement veineux rétrograde. Utiliser les pinces pour déplacer le cœur et les veines sur le côté, ce qui permet d’améliorer l’accès à l’arc aortique et descendant aorte.
  6. Disséquer l’aorte en utilisant une technique microchirurgicale avec micro-ciseaux et pinces à micro.
  7. Retrouver l’aorte vers le haut de la section descendante de la crosse aortique et identifier l’artère sous-clavière gauche et l’artère intercostale premier, laissant l’aorte.
  8. Placer un non-résorbable 6-0 suture juste crânienne de l’artère intercostale première et le nouer. À l’extrémité proximale, couper l’aorte juste après l’origine de l’artère sous-clavière gauche. Il est important d’utiliser une seule perpendiculaire coupe car il réduit les risques d’irrégularités à la fine pointe de la prothèse vasculaire. Enfin, retirez l’anévrisme nouvellement créée avec une coupe juste au-dessous de la ligature.
  9. Après avoir mesuré l’anévrisme, immédiatement transplantation du greffon dans le rat destinataire.

5. application de création et de stent anévrisme

  1. Approche chirurgicale
    1. Commencer l’incision cutanée dans le tiers distal de l’abdomen avec des ciseaux pointus et coupe dans un midventral position distale du processus xiphoïde jusqu'à 1 cm. Séparez avec précaution la peau et du tissu sous-cutané de la musculature. Utilisez les mêmes ciseaux pour ouvrir les muscles abdominaux le long de la linea alba. Utiliser forceps pour déclencher les muscles pendant la coupe pour éviter d’endommager les organes intra-abdominale.
    2. Suite à la laparotomie, déplacer le petit intestin, le cæcum et le côlon vers la droite. Utiliser un enrouleur automatique tenant à la cavité abdominale ainsi dégagés et fixer les organes. Placer un tampon sous le foie pour retirer de la zone chirurgicale et mettez en avant rétropéritonéale.
      Remarque : Si la masse graisseuse est obstruaient la vue, il peut être placé à l’extérieur de la cavité abdominale et recouvert d’une gaze humide afin d’éviter l’appauvrissement fluide vaste.
    3. Vider la vessie pour obtenir une exposition maximale de l’aorte abdominale de l’anévrisme. Il peut s’agir de décharge soit accompli par légère pression à la paroi de la vessie, ou vésical à l’aide d’une aiguille creuse de 26G.
    4. Protéger la vessie et les testicules de déshydratation et d’une vaste manipulation pendant une intervention chirurgicale par ensevelissement avec un tampon de cellulose stérile humide.
    5. Ouvrir le péritoine pariétal couvrant l’aorte avec deux pinces émoussés. Faites attention avec les uretères presque transparents, les vaisseaux testiculaires et l’artère mésentérique supérieure. Dès que le péritoine pariétal est ouvert, l’aorte abdominale se trouvent juste en dessous. Il est souvent couvert d’une mince couche de tissu adipeux.
    6. Commencez par une dissection par clivage de l’aorte abdominale à l’aide de deux micro-pinces pour la dégager de la graisse rétropéritonéale environnante jusqu'à ce qu’une plus longue longueur du navire est visible. Continuer avec dissection pointue à l’aide de micro-ciseaux et pinces à micro. Seulement saisir l’adventice au cours de ce procédé pour éviter d’endommager la paroi des vaisseaux.
  2. Dissection de l’aorte abdominale
    NOTE : Pour faciliter la description de la stratégie chirurgicale nous avons divisé l’aorte abdominale en trois segments distinctifs (Figure 1).
    1. Commencer la dissection dans le segment distal - ce qui est techniquement plus difficile.
      Remarque : Le segment distal est divisé entre la bifurcation iliaque et la veine iliolombaire et l’artère. Ce segment est le point pour l’insertion de ponction et stent aorte abdominale distale.
      1. Disséquer l’aorte avec micro-ciseaux et micro-forceps de la V. cave par une coupe aux côtés de la couche adventitiels artérielle entre les deux navires.
        NOTE : Petites artères lombaires peuvent se poser rarement vaisseaux segmentaires de la face dorsale de l’aorte abdominale et interférer avec la procédure. Coagulation et coupe des vaisseaux est nécessaire pour éviter le suintement rétrograde au cours de la suture du navire.
      2. Identifier l’artère droite iliolombaire ; son origine peut varier considérablement dans ce segment, mais se trouve plus fréquemment plus caudal que l’homologue de gauche.
        Remarque : Cette condition rarement interfère avec le site de ponction d’insertion prévues stent dans l’artère, mais elles peut-être exiger un point de ponction plus loin enlevé ou - pour la plus extrême variabilité anatomique - une ligature de navire de l’artère droite iliolombaire.
      3. Après avoir préparé l’aorte dans ce segment, placez un coussin de caoutchouc coloré sous le navire pour indiquer où s’effectuera la ponction artérielle. Éviter les étirements le navire dans ce segment. Stretch traction sur la paroi des vaisseaux peut conduire à la rupture de vaisseau incontrôlée après ponction artérielle, qui à son tour n’entravera la reconstruction finale. Il est donc important de l’aorte de toutes les adhérences sur le site de ponction de l’artère de sortie et d’éviter toute mise en place de tampons de gaze sous l’aorte.
    2. Disséquer l’aorte de la cava V. dans le segment moyen de la même manière comme décrit précédemment.
      Remarque : Le segment moyen se subdivise entre l’iliolombaire veine et l’artère et la veine rénale. Ce segment est utilisé pour l’implantation de l’anévrisme et le positionnement du stent.
      1. Identifier l’artère mésentérique supérieure à l’origine de l’aorte abdominale et conserver pendant toutes les procédures.
      2. Ligaturer ou coaguler les artères de la face dorsale de l’aorte dans cette section ainsi. Pour éviter d’endommager le plexus lombo-sacré, assurer la purge suffisante et être conscient du temps court de la coagulation.
      3. Déterminer l’emplacement de l’endoprothèse après dissection de l’aorte dans ce segment. Anticiper les interférences possibles du stent avec vaisseaux abdominaux avant de définir l’emplacement final de l’anévrisme et le stent.
      4. Après avoir défini l’emplacement de l’anévrisme et le stent, placer un petit morceau de gaze et un tampon de caoutchouc coloré sous l’aorte pour la meilleure exposition.
    3. Enfin, disséquer le segment proximal de l’aorte abdominale. Il s’agit techniquement plus simple que la même procédure dans les segments distaux et moyens.
      Remarque : Le segment proximal se trouve proximale de la veine rénale. Il est utilisé pour l’application du clip plus proximale temporaire lors de l’implantation de stents de technique de Seldinger.
      1. Après avoir ouvert le péritoine pariétal, séparer les vaisseaux avec deux pinces émoussés.
      2. La suite dorsale circumnavigation de l’aorte avec une pince courbe, émoussé, placer un petit morceau d’un pad en caoutchouc coloré dessous pour faciliter l’application plus tard proximale clip.
  3. Création de l’anévrisme
    1. Bloquer l’aorte dans le segment moyen en premier appliquant la pince distale, suivie de la proximale afin d’assurer un remplissage solide du navire et facilite l’artériotomie ultérieur.
    2. Supprimer l’adventice sur le site de l’anastomose prévues. Saisir l’adventice avec micro-pinces et découpez soigneusement avec des ciseaux micro sans blesser la paroi des vaisseaux.
    3. Soulever un petit morceau de la paroi des vaisseaux avec une micro-pince et effectuer une incision linéaire avec des micro-ciseaux. L’artériotomie devrait être la même taille que la base de l’anévrisme.
    4. Rincer l’artère dans les deux sens avec une solution saline dans une aiguille à pointe émoussée.
    5. Placez les deux premières mailles de l’anastomose bout à l’autre, qui est effectuée avec suture non résorbable 9-0, à l’extrémité proximale et distale de l’artériotomie. Saisissez la paroi des vaisseaux aussi peu que possible au cours de la suture et faire en sorte que les sutures traversent chaque couche de la paroi des vaisseaux. Ils devraient prendre seulement la partie ventrale de l’aorte pour éviter le rétrécissement de l’artère ; qui pourrait conduire à la rupture du navire pendant l’application de l’endoprothèse.
    6. Refermer l’incision avec des sutures interrompus. Commencez la suture sur le côté gauche et cela avant de continuer sur l’autre côté. Lorsque la paroi arrière est terminée, vérifiez la section endoluminale de l’anastomose de sutures placés à tort.
      Remarque : À ce stade, différentes thérapeutiques intra-anévrysmal comme application de bobine peut être introduit.
    7. Après avoir terminé l’anastomose, enlevez d’abord la pince distale. Placez une suture supplémentaire en cas de saignements majeurs de reflux. Gérer les mineures qui suinte en appuyant doucement sur un petit morceau de gaze à la source du saignement. Le tissu adipeux ou une couche adventitiels précédemment obtenue peut être utile aussi bien. Maintenant enlever la pince proximale.
    8. Rincez le site de l’anastomose et couper les extrémités restantes de ligature à la coupole de l’anévrisme.
    9. Observer la perméabilité de l’aorte abdominale distale avec le test direct de traite.
    10. Retirer l’écouvillon de petite gaze sous la garniture de caoutchouc coloré, comme tous les segments de l’aorte devraient être environ à la même hauteur avant l’insertion de l’endoprothèse. Évitez de couvrir les lignes de suture d’une anastomose avec le tissu adipeux comme les barres de renfort de stent doivent être visibles tout en positionnant l’endoprothèse sous l’anévrisme nouvellement créé.
    11. Pour éviter des dommages d’ischémie prolongée, laisser pendant 10 minutes de reperfusion avant de poursuivre la clampage aortique proximale et l’insertion de l’endoprothèse.
    12. Vider la vessie avant l’implantation de l’endoprothèse.
  4. Implantation de stents
    Remarque : Il est utile d’avoir un assistant en main pour les étapes suivantes, en particulier pour le gonflage de stent final.
    1. Clip tout d’abord le site de ponction de l’artère dans le segment distal. Commencer avec la pince distale et suivez avec le proximal. Retirez le tissu conjonctif lâche et (partiellement) l’adventice sur le site de ponction avec micro-ciseaux.
    2. Placez une grosse bride temporaire dans le segment proximal pour éviter une hémorragie majeure au cours de la ponction artérielle.
    3. Effectuer la ponction artérielle dans le segment distal avec une aiguille de ponction de 18G. Soulever un petit morceau de la paroi des vaisseaux avec une micro-pince pour faciliter la ponction et réduire le risque de percer les parois des vaisseaux aortiques.
    4. Rincer l’artère complètement suite à la piqûre avec du sérum physiologique dans les deux directions à l’aide d’une aiguille à pointe émoussée.
    5. Insérez un fil-guide hydrophobes dans le site de ponction et ôter la bride proximale dans le segment distal.
    6. Poussez le fil-guide vers l’avant jusqu’au niveau de la pince dans le segment proximal. Insérer l’introducteur de Teflon selon la technique de Seldinger utilisant le fil-guide inséré précédemment.
      NOTE : Fils de guidage hydrophobes sont plus adaptés que ceux hydrophile parce qu’elles ont une adhérence supérieure et mieux la commande manuelle. Introducteurs de Teflon étant plus faciles à insérer qu’introducteurs en polypropylène, ils réduisent le risque de rupture incontrôlée sur le site de ponction.
    7. Poussez le dilatateur vers le haut juste en amont du site d’anastomose, la gaine est située environ un demi-centimètre de ci-dessous.
    8. Retirer le fil-guide et le dilatateur et assurez-vous que le robinet à 3 voies est éteint pour éviter la perte de sang inutile.
    9. Après avoir aspiré le système de ballon, introduire le stent résorbable de magnésium à l’aide de l’introducteur de Fogarty 4. Gonfler le ballonnet avec un bar de pression juste avant de retirer le dispositif introducteur pour protéger l’endothélium du bâtiment s’est effondré de lésion induite par l’entretoise et réduire le risque de la jambe s’enchevêtrer dans l’intraaneurysmal déjà implanté matériel (Figure 2).
    10. Lorsque l’endoprothèse est dans sa position finale, soigneusement gonfler le ballonnet avec bar de 8-9. Continuellement vérifier les sutures anastomose bout à l’autre pour l’extraction possible.
    11. Après dilatation stent adéquat et adhérence à la paroi vasculaire aortique, dégonfler et retirer le ballon.
    12. Lors du retrait de l’introducteur, avoir un clip temporaire à portée de main pour une application immédiate proximale sur le site de ponction comme rétrograde qui suinte d’artères brevets proximales peut être importante.
    13. Retirez la pince temporaire dans le segment proximal après avoir placé le clip proximal dans le segment distal. Remarquez l’anastomose bout à l’autre comme toute augmentation pression intra-aortique due à l’écrêtage distale peut provoquer des saignements sur le site de suture.
    14. Rincer avec du sérum physiologique, le site de ponction d’une aiguille à pointe émoussée dans les deux sens. Puis il suture avec une technique interrompue avec du fil non résorbable 10-0. Si possible, éviter de saisir la paroi des vaisseaux avec la micro-pince et faire en sorte que chaque suture traverse toutes les couches de la paroi des vaisseaux. Suture sur le vase outmost site pour éviter la sténose du vaisseau de ponction.
    15. Ajouter les sutures supplémentaires si une hémorragie majeure résultant d’un reflux. En cas de suintement mineures, fixez hémostase par pression douce sur le site de saignement à l’aide d’un tampon de gaze ou un segment déjà préservé de l’adventice. Petits morceaux de tissu adipeux peuvent être utiles aussi bien.
    16. Retirez le tampon en caoutchouc coloré sous le site de ponction. La pulsation de l’aorte sera clairement visible proximale et distale sur le site de l’anastomose. Vérifier la perméabilité de l’artère distale avec le test direct de traite.

6. fermeture

  1. Supprimer tous les tampons de gaze, puis rincez doucement la cavité abdominale avec du sérum physiologique isotone afin de dégager les débris et promouvoir la substitution de volume.
  2. Retirez le stabilisateur de doux-tissu et retourner l’intestin grêle, cancer du caecum et masse grasse à leur position anatomique correcte.
  3. Suture non résorbable 5-0 permet de rejoindre les muscles abdominaux. Pour réduire la traction cutanée, mettez quelques sutures sous-cutanée à l’aide d’une suture résorbable 3-0. Utiliser le même 3-0 suture pour fermer la peau.
  4. Après fermeture, désinfecter la peau et placez l’animal sous la lumière infrarouge de lui fournir de la chaleur.

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Representative Results

La durée moyenne de la chirurgie était 167 min (± 22), 26 min (± 6) qui étaient nécessaires pour la création de l’anévrisme et 23 autres (± 7) min requis pour l’application du stent et la reconstruction de l’artériotomie (Figure 3).

Mortalité, morbidité et thrombose intrastent macroscopique étaient les principaux résultats de l’étude. Les périodes de suivi régulières ont été 7 jours (n = 28) et 21 jours (n = 32) respectivement. Mortalité ou morbidité mouvementée entraîner une résiliation anticipée de l’étude. Il n’y a aucun décès durant la chirurgie. Quatre animaux (6 %) sont décédés dans la première trois jours après l’opération en raison de la thrombose-stent au début. Cinq rats (7,5 %) ont connu des complications postopératoires avec deux causés par la thrombose intrastent précoce, qui a conduit à la paralysie des membres postérieurs. Ces animaux ont été euthanasiés en raison de leur déficit neurologique sévère. Dans deux autres affaires, tardive intrastent thrombose a été vu au jour 21, après que l’expérience avait pris fin. Ces animaux n’avait montré aucun déficit neurologique jusqu'à ce jour. Un rat a subi la déhiscence de la plaie de toutes les couches de la paroi abdominale, le deuxième jour postopératoire avec revers consécutif du volume et a été euthanasié en conséquence. Le taux de mortalité et de morbidité combiné était de 13,4 % (Figure 4 et Figure 5).

Figure 1
Figure 1 : Illustration des trois segments distinctives de l’aorte abdominale.
La veine cave supérieure et leurs cessions sont de couleur bleues, tandis que l’aorte abdominale et leurs cessions sont de couleur rouge. * Marque du segment distal, dans lequel se faite l’insertion de ponction et stent aorte abdominale. ** Marque le segment intermédiaire, dans lequel l’implantation de l’anévrisme et le positionnement du stent final se produisent. Marque le segment proximal, qui est utilisé pour l’application du clip plus proximale temporaire lors de l’implantation de stents. S’il vous plaît cliquez ici pour visionner une version agrandie de cette figure.

Figure 2
Figure 2 : Magnésium stent gonflé à 1 bar S’il vous plaît cliquez ici pour visionner une version agrandie de cette figure.

Figure 3
Figure 3 : Caractéristiques chirurgicales.
Chaque point représente un animal ; valeurs moyennes (lignée) ; et l’écart s’il vous plaît cliquez ici pour visionner une version agrandie de cette figure.

Figure 4
Figure 4 : Ordinogramme.
Nombre d’animaux utilisés dans l’étude ; la mortalité et la morbidité s’il vous plaît cliquez ici pour visionner une version agrandie de cette figure.

Figure 5
Figure 5 : Macroscopiques et microscopique (grossissement de 10 x) vue d’ensemble des Mg-stent traitées fin-à-côte les anévrismes implantés après récolte de tissus à 21 jours.
R : la photo de gauche montre une brevet aorte abdominale. La photo de droite montre l’aorte ouverte longitudinalement avec la néo-intimale mince couvrant le stent et l’ostium anévrisme insinuées derrière l’endoprothèse. B : la photo de gauche montre une thrombose-stent de l’aorte abdominale. La photo de droite montre l’aorte longitudinalement ouvert avec un thrombus couvrant la lumière du vaisseau. Les entretoises de stent dégénérées ont été causés par le thrombus. C: un aperçu microscopique (tache d’éosine hématoxyline) de l’anévrisme dans A. s’il vous plaît cliquez ici pour visionner une version agrandie de cette figure.

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Discussion

Modèles de stents et animal biorésorbable
Ces dernières années, la tendance générale en médecine a été loin des implants permanents (qui restent dans le corps du patient pour le reste de leur vie) de matériaux bio-résorbables. Endoprothèses de magnésium, notamment, sont déjà bien établies dans cardiologie8,9. Malheureusement ces stents n’ont pas encore été testés pour d’autres applications, telles que les maladies cérébro-vasculaires. C’est pourquoi nous avons décidé d’étudier l’utilisabilité d’une endoprothèse biorésorbable dans le traitement de l’anévrisme sacculaire. L’étude a été réalisée sur des rats comme elles - comme les autre petite expérience animaux - sont adaptés en raison du faible achat associé et les frais de subsistance. En outre, elles peuvent être utilisés dans différents domaines de recherche grâce à la possibilité de modification génétique10. Les faibles coûts, une manipulation facile et relativement rapide chirurgicales permettent des études à réaliser sur un grand nombre d’animaux. Afin d’évaluer les nouveaux dispositifs intravasculaires, il est crucial d’utiliser un modèle normalisé anévrisme qui permet des conditions interindividuelles constantes ; surtout en ce qui concerne le débit sanguin, contrainte de cisaillement de mur, turtuosity navire, localisation de l’anévrisme et taille de l’anévrisme. Le modèle d’anévrisme de flanc rat décrit offre tous ces avantages. En outre, le modèle permet l’essai d’approches nouvelles endovasculaire dans des conditions différentes de mur. Il présente le plus petit modèle animal possible dans lequel les concepts biologiques de guérison d’anévrisme et applications thérapeutiques - tels que les stents - peuvent être analysés. Grâce à ses dimensions, il permet à des dispositifs de tailles similaires à tester plus tard pour l’usage clinique chez l’homme. Veuillez vous référer aux travaux déjà publié pour des descriptions détaillées des avantages/inconvénients et les différences biologiques des modèles précliniques anévrisme cervicogénique dans diverses espèces4,11.

Morbidité et mortalité
Études antérieures ont montré des taux élevés de mortalité dans l’implantation de stents abdominale. Les valeurs varient de 5,7 à 57 %12,13,14,15. La plupart des animaux sont morts de la thrombose, suite à la blessure d’intima au cours de l' implantation de stents16. Même si le taux de mortalité dans notre étude était faible, thrombose de stent-associated reste une cause importante des complications postopératoires et de fatalité (thrombose intrastent début de 7,5 %, 3 % tardive intrastent thrombose). Nous émettons l’hypothèse que le contact réduit entre le stent et le bateau est une raison importante pour le faible taux de mortalité de 6 % (5 sur 67 animaux) dans notre étude. Le contact a été réduit grâce à la technique de Seldinger et le gonflage du ballonnet à 1 bar avant de retirer l’introducteur ; comme la bulle couvre le tranchant de l’endoprothèse de magnésium. Par le biais de dilatation continue, douce du site de ponction avec un fil-guide et dilatator gaine, le site de ponction peut être conservé petit, qui à son tour facilite la reconstruction de la paroi des vaisseaux et diminue le risque de rétrécissement de l’artère iatrogène. Les rats doivent peser au moins 500 g pour une insertion de technique de Seldinger ne pose aucun problème de l’introducteur de 4F. Traitement antiplaquettaire a été montré pour réduire intrastent thrombose quel que soit le préjudice d’intima mécanique causé par stent placement12,17,18,19. En outre, profilé en diluant stent dispositifs réduisent considérablement la sténose du vaisseau suite stent traitement20. Aquarius et al. 12 traités anévrismes de flanc avec inverseurs de courant chez des rats à l’aide d’une technique opératoire similaire à celui décrit ci-dessus. Ils ont signalé aucune thrombose-stent dans leur série. La différence principale de cette étude est qu’ils ont utilisé un traitement antiplaquettaire double et diluant strut stent périphériques par rapport à notre stents de magnésium. Notre étude vise à explorer la biologie de l’anévrisme de guérison après l’application de l’endoprothèse, nous avons décidé de mener les expériences sans médicaments de manière à ne pas influencer l’état de coagulation et proinflammatoires intraaneurysmal naturel. Nous avons donc accepté le risque accru de thrombose.

Transaortic mise en place
Contrairement à l’insertion du stent par l’intermédiaire de l’artère carotide13,,15,21,22 qui sacrifie le navire, peut être une reconstruction primaire du site de ponction (et préservation du navire) obtenu en insérant l’endoprothèse à travers un gros vaisseaux comme l’aorte abdominale ou l' artère iliaque14. Un autre avantage de la pose d’un stent transaortic est il permet le contrôle visuel direct nécessaire pour le placement précis de stent et évite d’endommager les mangeoires abdominales. Sans contrôle visuel, faux placement se produit dans jusqu'à 12 % des cas,21. En outre, la taille du ballon et l’artère peut être observée pour éviter le surinvestissement de la paroi des vaisseaux. Application de création et de stent anévrisme dans l’abdomen permet l’anévrisme à cultiver non perturbées, qui est largement considéré dans l’anévrisme avec murs DECELLULARISE5. Le seul inconvénient de cette position anatomique est la possible interaction cellulaire et moléculaire entre le tube digestif et de l’anévrisme.

Il n’existe actuellement aucun autres translationnelles, les modèles animaux qui reflètent l’anévrisme intracrânien humaine dans l’espace sous-arachnoïdien.

Différences du dispositif
Aquarius et coll.12 décrit une méthode pour le traitement des anévrismes de flanc dans un modèle de rat à l’aide des déviateurs de flux. Alors que le temps nécessaire pour l’insertion de l’endoprothèse a été semblable à notre série (24.5±6.4 vs 26±6 minutes), ils avaient une totale plus courte durée (126±23.0 contre 167±22 minutes) et temps d’anastomose (16.3±6.4 vs 23±7 minutes). Le plus long temps de chirurgie dans notre série peut s’expliquer par la dissection d’aorte abdominale plus étendue. Comme nous avons inséré le stent avec le ballon avant prolongé pour éviter toute blessure intimale, nous étions obligés de placer le clip proximal supérieur de l’artère rénale. Une application plus distale du clip proximale navire pourrait entraîner début obstacle du ballon et signifier que l’ostium de l’anévrisme n’est pas couvert par le stent. Le temps ischémique a été fractionnée (40 contre 23 min) dans le présent protocole pour réduire le risque de dommages hypoxiques. Les organes ont été réoxygénées pendant une phase de reperfusion d’au moins 10 min. Une seule fois longtemps ischémique réduit la durée de la chirurgie, mais peut augmenter le risque de défaillance organique multi postopératoire - qui n’apparaît pas dans les cas présentés. Après une période d’apprentissage nécessaire, les procédures présentées devraient être gérables même pour les chirurgiens sans formation préalable de microchirurgie.

Conclusion
En conclusion, cette technique demande de stent dans un modèle de paroi abdominale chez le rat s’est avérée utile, avec une haute qualité de la normalisation, faible taux de morbidité et de mortalité et de faibles coûts. Ces caractéristiques rendent le modèle approprié pour les futures études des matériaux destinés à l’embolisation de l’anévrisme assistée par stent.

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Disclosures

Ce travail a été soutenu par les fonds de recherche du Conseil de la recherche, Kantonsspital Aarau, Aarau, Suisse. Les stents biodégradables de magnésium ont été fournis par Biotronik AG, Centre d’Intervention vasculaire, Bülach, Suisse. Les auteurs sont seuls responsables de la conception et la réalisation de l’étude présentée et ne déclarent aucun intérêts opposés.

Acknowledgments

Nous remercions Eugen Hofmann et Philine Zumstein pour leur assistance technique excellente et pour le partage de leur expertise dans les procédures de demande de stent. Nous remercions Majlinda Kalanderi pour le dessin anatomique.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Medetomidine any generic
Ketamin any generic
Buprenorphine any generic
Phosphate buffered saline
Sodium dodecyl sulfate (0.1%)
3-0 resorbable suture Ethicon Inc., USA VCP428G
5-0 non absorbable suture Ethicon Inc., USA 8618G
6-0 non-absorbable suture B. Braun, Germany C0766070
9-0 non-absorbable suture B. Braun, Germany G1111140
10-0 non-absorbable suture Covidien, USA N2530 Monosof
Operation microscope Zeiss, Germany
Digital microscope camera Sony, Japan HXR-MC1P
Standard surgical instruments multiple see protocol 7.a
Microsurgical instruments multiple see protocol 7.b
Vascular clip applicator B. Braun, Germany FT495T
Temporary vascular clamps B. Braun, Germany
19G Puncture needle  Angiomed GmbH, Germany 15820010
Hydrophobic guide wire Cook Medical, USA G00650
4F sheat Cordis Corporation, USA 504-604A
Inflation syringe
Laboratory shaker Stuart SRT6
Magnesium Stent 2.5/6 AMS with Polymer coating Biotronik, Switzerland
Surgery drape 
Sterile cellulose swabs
Syringes 1 ml and 2 ml
Hollow needles 18G and 26G
Isotonic sodium chloride
Microtubes
Eye ointment Bausch + Lomb Inc, USA Lacrinorm any generic
Small animal shaver

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References

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Magnésium biodégradable Stent traitement des anévrismes sacciformes dans un modèle de Rat - Introduction de la Technique chirurgicale
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Nevzati, E., Rey, J., Coluccia, D., D'Alonzo, D., Grüter, B., Remonda, L., Fandino, J., Marbacher, S. Biodegradable Magnesium Stent Treatment of Saccular Aneurysms in a Rat Model - Introduction of the Surgical Technique. J. Vis. Exp. (128), e56359, doi:10.3791/56359 (2017).

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